一種使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于蕨藻紅素提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種使用高速逆流色譜分離羽狀蕨 藻中蕨藻紅素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蕨藻紅素廣泛存在于藻類(lèi)植物中，具有顯著的促進(jìn)或抑制植物生長(zhǎng)，延緩果實(shí)成 熟，花朵衰老，競(jìng)爭(zhēng)性抑制增長(zhǎng)激素，除草劑，脫葉劑等作用，除此之外蕨藻紅素還被發(fā)現(xiàn)具 有較好的抗腫瘤活性。蕨藻紅素為橙紅色立方晶體，熔點(diǎn)：319-319. 5°C，分子式=C24H18N2O4, 結(jié)構(gòu)式：
[0003]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法，其特征是包括以下步驟： (1) 將羽狀蕨藻粉碎，采用微波輔助提取法提取后，獲得羽狀蕨藻粗提物； (2) 選取高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)； (3) 將步驟（1)獲得的羽狀蕨藻粗提物濃縮至膏狀，用高速逆流色譜溶劑系統(tǒng)的下相 溶解，得到高速逆流色譜分離樣液； (4) 采用高速逆流色譜分離步驟（3)的高速逆流色譜分離樣液，并收集各流分； (5) 將步驟（4)所得各流分與蕨藻紅素標(biāo)準(zhǔn)品采用高效液相色譜分析，通過(guò)高效液相 色譜的保留時(shí)間定性，收集與標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間一致的流分即為蕨藻紅素產(chǎn)品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法，其特征 是：步驟（1)中采用微波輔助提取法提取時(shí)，微波輔助提取的各項(xiàng)參數(shù)為：提取溶劑為體積 百分含量為80~100%的乙醇，微波溫度為40~60°C，微波功率為100~300W，微波時(shí)間 為5~15min，料液比為1:30~1:50g/mL。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法，其特征 是：采用微波輔助提取法提取時(shí)，微波輔助提取的各項(xiàng)參數(shù)為：提取溶劑為體積百分含量 為90%的乙醇，微波溫度為50°C，微波功率為300W，微波時(shí)間為15min，料液比為1:40g/mL。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法，其特征 是：步驟（2)中高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)為正己烷-甲醇-水，其中正己烷-甲醇-水的體 積比為2:1:1。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法，其特征 是：步驟（4)中采用高速逆流色譜分離時(shí)，分離條件為：流速為I. 0~3. OmL/min，轉(zhuǎn)速為 800 ~900rpm/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為 315nm。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方 法，其特征是：步驟（4)中采用高速逆流色譜分離時(shí)，以溶劑系統(tǒng)上相為固定相，下相為流 動(dòng)相。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法，其特征 是：采用高速逆流色譜分離時(shí)，固定相的保留率為76. 8%。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方 法，其特征是：步驟（5)中高效液相色譜的條件為：Athena C18-WP，100A，4.6mmX150mm， 3 ym ;流動(dòng)相為甲醇-0. 2%冰醋酸，二者的體積比為80:20 ;檢測(cè)器為88232UV紫外檢測(cè) 儀；檢測(cè)波長(zhǎng)為315nm ;流速為0. 3mL/min ;柱溫為30°C ;進(jìn)樣量為20 y L。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法，其特征 是：蕨藻紅素的保留時(shí)間在13. 784min附近。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法，其特 征是：步驟（5)中蕨藻紅素產(chǎn)品的純度大于95%。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種使用高速逆流色譜分離羽狀蕨藻中蕨藻紅素的方法，含以下步驟：(1)將羽狀蕨藻粉碎，用微波輔助提取法提取，得粗提物；(2)選取高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)；(3)將粗提物濃縮至膏狀，用高速逆流色譜溶劑系統(tǒng)的下相溶解，得高速逆流色譜分離樣液；(4)采用高速逆流色譜分離樣液，收集各流分；(5)將各流分與蕨藻紅素標(biāo)準(zhǔn)品采用高效液相色譜分析，通過(guò)高效液相色譜的保留時(shí)間定性，收集與標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間一致的流分即為蕨藻紅素產(chǎn)品。該方法將MAE與HSCCC聯(lián)合起來(lái)實(shí)現(xiàn)羽狀蕨藻中蕨藻紅素的分離純化，其精密度和重現(xiàn)性相對(duì)傳統(tǒng)的分離純化方法得到了提升。且操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短、適用范圍廣、對(duì)環(huán)境污染小、易于工業(yè)推廣。
【IPC分類(lèi)】C07D487-04
【公開(kāi)號(hào)】CN104744477
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510109154
【發(fā)明人】鄧建朝, 李來(lái)好, 楊賢慶, 牛改改, 吳燕燕, 陳勝軍, 郝淑賢, 林婉玲, 岑劍偉, 楊少玲, 周婉君
【申請(qǐng)人】中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所
【公開(kāi)日】2015年7月1日
【申請(qǐng)日】2015年3月12日