本發(fā)明涉及化合物合成
技術(shù)領(lǐng)域：
，更具體地說，本發(fā)明涉及20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物及其合成方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：孕烯醇酮本身具有較弱的抗炎活性，文獻曾報道孕烯醇酮c3-位羥基酯化，水楊酸酯和甲酸酯有與臨床應(yīng)用的可的松相當(dāng)?shù)目寡鬃饔?，而三氯乙酸酯、氯乙酸酯、呋?2’-酸酯、對甲苯磺酸酯、鄰苯二甲酸酯有較抗炎松略強的抗炎作用(李振肅,王海青等.5-孕甾烯-3β,17α-雙醇-20-酮-3-醋酸酯-17α-脂肪酸酯類的合成及其構(gòu)效關(guān)系研究[j].藥學(xué)學(xué)報,1983,18(2):119-124.)。課題組已經(jīng)對孕烯醇酮進行化學(xué)修飾改造的相關(guān)研究，“孕烯醇酮芳香醛吖嗪甾體化合物及其合成方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用”(中國發(fā)明專利，申請?zhí)枺?01310184358.x，申請公布號cn103254264a)，“3-取代-b-homo-甾體-b-環(huán)內(nèi)酰胺化合物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用”(中國發(fā)明專利，申請?zhí)枺?01110009124.2，申請公布號：cn102146115a)，“具有氨衍生物支鏈結(jié)構(gòu)的3-羥基-5-烯甾體化合物制備方法及其在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用”(中國發(fā)明專利，申請?zhí)枺?01210330275.2，申請公布號：cn102816198a)。但是，有關(guān)20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物及其合成方法、以及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用未見報道。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物。本發(fā)明的另一目的是提供上述化合物的合成方法。本發(fā)明的進一步目的是提供上述化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物的甾核結(jié)構(gòu)式如下所示：其中，r-基團可為：所述的20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物的合成方法，包括以下步驟：以甾體化合物孕烯醇酮為原料，首先將孕烯醇酮的3-位羥基經(jīng)過芳香酰氯酯化成酯，反應(yīng)得到中間產(chǎn)物，再將中間產(chǎn)物的17-位羰基還原，即得到20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物。優(yōu)選的是，3-位羥基經(jīng)過芳香酰氯酯化成酯的反應(yīng)方法為：將孕烯醇酮溶于吡啶，再加入酰氯，于40℃溫度下反應(yīng)，用tlc跟蹤反應(yīng)，至無原料點后停止反應(yīng)，得到的反應(yīng)產(chǎn)物先加入冰水，再用乙酸乙酯萃取水相，合并有機相，再用1mol/l稀鹽酸萃洗，然后再用飽和nacl溶液萃洗有機相，接著用無水na2so4干燥，最后減壓蒸餾掉有機溶劑，柱層析分離，得到白色固體，即為中間產(chǎn)物；其中，所述芳香酰氯為對氟苯甲酰氯、間甲基苯甲酰氯、對甲基苯甲酰氯中的一種。優(yōu)選的是，17-位羰基還原的反應(yīng)方法為：將所述中間產(chǎn)物與甲醇混合，并加入cecl3·7h2o作為催化劑，攪拌至催化劑完全溶解后，再加入無水ch2cl2，待中間產(chǎn)物完全溶解后，稱取nabh4緩慢加入進行反應(yīng)，室溫下反應(yīng)，tlc檢測，反應(yīng)至無原料點停止反應(yīng)，加入1mol/l稀鹽酸，調(diào)節(jié)溶液的ph值為弱酸性，減壓蒸餾掉有機溶劑后，加入蒸餾水，用乙酸乙酯萃取，合并有機相，再用飽和nacl溶液萃洗，然后用無水na2so4干燥，最后減壓蒸餾掉有機溶劑，柱層析分離，得到白色固體的終產(chǎn)物，即為所述20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物。所述的20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述的20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物為活性成分的藥用組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。制備所述20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物的反應(yīng)路線如下所示：其中，化合物1至6中的r基團如下所示：試劑和條件：a:吡啶、對氟苯甲酰氯、間甲基苯甲酰氯、對甲基苯甲酰氯；b:ch3oh、ch2cl2、cecl3·7h2o、nabh4。通過生理活性試驗研究表明，本發(fā)明的20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物4,5和6對人鼻咽癌細胞的生長增殖具有抑制作用，可作為藥物中間體或藥物應(yīng)用于不同抗腫瘤藥物制造和用途。本發(fā)明的其它優(yōu)點、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本發(fā)明的研究和實踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。需要說明的是，下述實施方案中所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法，所述試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。<實施例1>20-羥基-孕烯-3-對氟苯甲酸酯(4)的制備步驟1:孕烯-3-對氟苯甲酸酯(1)的制備稱取0.360g(約1mmol)孕烯醇酮，置于100ml的茄型燒瓶中，移取10ml吡啶于燒瓶，攪拌孕烯醇酮至完全溶解，再移入400ul對氟苯甲酰氯。于40℃油浴鍋中反應(yīng)，用tlc跟蹤反應(yīng)，至無原料點后停止反應(yīng)，反應(yīng)24小時。處理反應(yīng)產(chǎn)物時，先加入15ml冰水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取水相，合并有機相，再用1mol/l稀鹽酸萃洗，然后再用飽和nacl溶液(15ml×3)萃洗有機相，接著用無水na2so4干燥。最后減壓蒸餾掉有機溶劑，柱層析分離(洗脫劑:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:5)，得到白色固體0.614g，產(chǎn)率為：90.9％，m.p.200-202℃，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)ir、nmr和ms分析確定；步驟2:20-羥基-孕烯-3-對氟苯甲酸酯(4)的制備于裝有0.130g(約0.2mmol)化合物(1)100ml的茄型燒瓶中，移入5ml甲醇，并稱取0.115gcecl3·7h2o(催化劑)放入反應(yīng)燒瓶，攪拌至催化劑完全溶解后，再加入10ml無水ch2cl2，待化合物(1)完全溶解后，稱取0.060gnabh4,并于5min內(nèi)緩慢加入燒瓶中反應(yīng)。室溫下反應(yīng)，tlc檢測，反應(yīng)30min無原料點停止反應(yīng)，向燒瓶中加入1mol/l稀鹽酸，調(diào)節(jié)溶液的ph值為弱酸性即可，減壓蒸餾掉大部分有機溶劑后，加入15ml蒸餾水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取，合并有機相，再用飽和nacl溶液(15ml×3)萃洗，然后用無水na2so4干燥，最后減壓蒸餾掉有機溶劑，柱層析分離(洗脫劑:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:6)，得到白色固體0.117g，產(chǎn)率為：89.6％，m.p.220-222℃，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)ir、nmr和ms分析確定其結(jié)構(gòu)是20-羥基-孕烯-3-對氟苯甲酸酯(4)。<實施例2>20-羥基-孕烯-3-間甲基苯甲酸酯(5)的制備步驟1:孕烯-3-間甲基苯甲酸酯(2)的制備稱取0.339g(約1mmol)孕烯醇酮，置于100ml的茄型燒瓶中，移取10ml吡啶于燒瓶，攪拌孕烯醇酮至完全溶解，再移入400ul間甲基苯甲酰氯。于40℃油浴鍋中反應(yīng)，用tlc跟蹤反應(yīng)，至無原料點后停止反應(yīng)，反應(yīng)24小時。處理反應(yīng)產(chǎn)物時，先加入15ml冰水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取水相，合并有機相，再用1mol/l稀鹽酸萃洗，然后再用飽和nacl溶液(15ml×3)萃洗有機相，接著用無水na2so4干燥。最后減壓蒸餾掉有機溶劑，柱層析分離(洗脫劑:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:5)，得到白色固體0.519g，產(chǎn)率為：99.9％，m.p.170-174℃，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)ir、nmr和ms分析確定；步驟2:20-羥基-孕烯-3-間甲基苯甲酸酯(5)的制備于裝有0.488g(約1mmol)化合物(2)100ml的茄型燒瓶中，移入5ml甲醇，并稱取0.433gcecl3·7h2o(催化劑)放入反應(yīng)燒瓶，攪拌至催化劑完全溶解后，再加入10ml無水ch2cl2，待化合物(2)完全溶解后，稱取0.234gnabh4,并于5min內(nèi)緩慢加入燒瓶中反應(yīng)。室溫下反應(yīng)，tlc檢測，反應(yīng)30min無原料點停止反應(yīng)，向燒瓶中加入1n稀鹽酸(體積比1:1)，調(diào)節(jié)溶液的ph值為弱酸性即可，減壓蒸餾掉大部分有機溶劑后，加入15ml蒸餾水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取，合并有機相，再用飽和nacl溶液(15ml×3)萃洗，然后用無水na2so4干燥，最后減壓蒸餾掉有機溶劑，柱層析分離(洗脫劑:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:6)，得到白色固體0.403g，產(chǎn)率為：82.2％，m.p.134-136℃。產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)ir、nmr和ms分析確定其結(jié)構(gòu)是20-羥基-孕烯-3-間甲基苯甲酸酯(5)。<實施例3>20-羥基-孕烯-3-對甲基苯甲酸酯(6)步驟1:孕烯-3-對甲基苯甲酸酯(3)的制備稱取1.558g(約5mmol)孕烯醇酮，置于100ml的茄型燒瓶中，移取15ml吡啶于燒瓶，攪拌孕烯醇酮至完全溶解，再移入400ul對甲基苯甲酰氯。于40℃油浴鍋中反應(yīng)，用tlc跟蹤反應(yīng)，至無原料點后停止反應(yīng)，反應(yīng)24小時。處理反應(yīng)產(chǎn)物時，先加入15ml冰水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取水相，合并有機相，再用1mol/l稀鹽酸萃洗，然后再用飽和nacl溶液(15ml×3)萃洗有機相，接著用無水na2so4干燥。最后減壓蒸餾掉有機溶劑，柱層析分離(洗脫劑:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:5)，得到白色固體1.962g，產(chǎn)率為：90.1％，m.p.194-196℃，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)ir、nmr和ms分析確定；步驟2:20-羥基-孕烯-3-對甲基苯甲酸酯(6)的制備于裝有0.421g(約1mmol)化合物(3)100ml的茄型燒瓶中，移入5ml甲醇，并稱取0.375gcecl3·7h2o(催化劑)放入反應(yīng)燒瓶，攪拌至催化劑完全溶解后，再加入10ml無水ch2cl2，待化合物(3)完全溶解后，稱取0.124gnabh4,并于5min內(nèi)緩慢加入燒瓶中反應(yīng)。室溫下反應(yīng)，tlc檢測，反應(yīng)30min無原料點停止反應(yīng)，向燒瓶中加入1mol/l稀鹽酸，調(diào)節(jié)溶液的ph值為弱酸性即可，減壓蒸餾掉大部分有機溶劑后，加入15ml蒸餾水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取，合并有機相，再用飽和nacl溶液(15ml×3)萃洗，然后用無水na2so4干燥，最后減壓蒸餾掉有機溶劑，柱層析分離(洗脫劑:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:6)，得到白色固體0.379g，產(chǎn)率為：89.6％，m.p.204-207℃，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)經(jīng)ir、nmr和ms分析確定其結(jié)構(gòu)是20-羥基-孕烯-3-對甲基苯甲酸酯(6)。采用本發(fā)明所述的20-羥基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物對某些腫瘤細胞進行細胞毒性試驗，發(fā)現(xiàn)其中某些化合物具有顯著的抑制腫瘤細胞生長增殖效果。如表中化合物4，5和6對人鼻咽癌細胞株(cne-2)的抑制作用。表化合物4，5和6對人鼻咽癌細胞株的ic50值(μmol/l)化合物456ic5022.621.65.3盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細節(jié)。當(dāng)前第1頁12