本發(fā)明屬于天然藥物提取分離領域，尤其涉及一種熊果苷的提取分離方法。
背景技術：
熊果苷屬氫醌苷化合物，化學名為4-羥基苯基-d-吡喃葡萄糖苷，是源于綠色植物的天然活性皮膚脫色組分，存在于熊果、越橘等植物中，是一種新興的無刺激、無過敏、配伍性強的天然美白活性物質(zhì)。熊果苷是國際上正在極力推廣的高功效醫(yī)藥、化妝品添加劑，國際公認的高效祛斑美白劑，是美白化妝品理想的添加成份，國內(nèi)外需求巨大，市場前景廣闊。熊果苷具有顯著的抑制酪氨酸酶活性，減少酪氨酸酶在皮膚中的沉積，對皮膚有漂白、防色變和祛斑的功效。
目前，熊果苷的制備方法主要有兩大類型，其一是從熊果、越橘等植物中直接提取，來獲取熊果苷；其二是以葡萄糖苷、對苯二酚等為起始原料通過化學合成制備熊果苷。方法一的提取率過低，而且所得熊果苷純度不高，方法二的生產(chǎn)成本較高，制備過程用到大量化學試劑，不僅對實驗人員健康造成損傷，而且生產(chǎn)過程產(chǎn)生的廢液試劑對環(huán)境也不利。
技術實現(xiàn)要素：
發(fā)明目的：為克服現(xiàn)有技術中的問題，本發(fā)明提供了一種高純度的熊果苷的制備方法。
技術方案：本發(fā)明所述的熊果苷的制備方法，包括：將熊果葉粉末置于醇中進行提取，提取結束后過濾，除去濾液中的醇后用有機溶劑進行萃取，取水層；用型號為ab-8與hpd-100大孔吸附樹脂混合后對水層進行吸附，然后用濃度為20～30％醇溶液進行洗脫，收集洗脫液；將洗脫液析晶、干燥后得熊果苷。
所述的醇為乙醇，濃度為40-50％。
所述提取的液料比為0.8-1.4:1，優(yōu)選的，液料比為1-1.2:1。
所述提取為微波提取，微波提取功率為400-600w，次數(shù)為2-3次，溫度為30-40℃，每次提取時間為0.5-1h。
所述的有機溶劑為乙醚、氯仿、石油醚等與水不互溶的有機溶劑。
ab-8與hpd-100大孔吸附樹脂的體積比為0.5-1.5：1。
洗脫時，柱流速為1-2bv/min，用20～25％乙醇進行洗脫。
所述的洗脫液一般于50-55℃真空濃縮至至1/2體積，至5-10℃下，攪拌析晶0.5-1.5h，過濾，46-54℃下真空干燥4-6h，即得高純度熊果苷。
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果為：
本發(fā)明利用浸漬法配合微波對熊果葉粉末進行粗提，結合大孔樹脂混合技術對熊果苷進行純化，然后進行重結晶，即可得到高純度的熊果苷。本專利的方法對環(huán)境友好，工藝穩(wěn)定，易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，同時樹脂可以重復使用，生產(chǎn)成本較低，可用于工業(yè)生產(chǎn)。
本發(fā)明工藝獲得的產(chǎn)品質(zhì)量好，收率高，巧妙地利用混合樹脂(非極性和弱極性的混合樹脂，對上樣液中雜質(zhì)的吸附能力更強，即可一步得到強極性的熊果苷洗脫液)，使得工藝一步即可得到高純度的熊果苷洗脫液。
具體實施方式
下面結合具體實施例，進一步闡明本發(fā)明，應理解這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領域技術人員對本發(fā)明的各種等價形式的修改均落于
本技術：
所附權利要求所限定的范圍。
實施例1
稱取熊果葉粉末300g，置于燒杯中，按1g熊果葉粉末：1ml40％乙醇的比例加入300ml40％乙醇，于35℃下，微波功率500w提取0.5h，每隔15min攪拌一次，共浸提兩次，合并浸提液，過濾，50℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1h，除去乙醇，加0.5倍體積的有機溶劑萃取(可以為乙醚、氯仿、石油醚等與水不互溶的有機溶劑，本實施例為乙醚)，萃取2次，合并水層后稀釋2倍體積，冷卻至室溫，上ab-8與hpd-100按1：1體積比例混合大孔吸附樹脂柱(徑高比為1:6)進行吸附，吸附完成后，以25％乙醇為洗脫液，柱流速為1.5bv/min，收集乙醇洗脫液，55℃真空濃縮至1/2體積，至5℃下，攪拌析晶1.0h，過濾，50℃下，真空干燥4h，即得高純度熊果苷，純度為99.5％，收率為6.1％。
實施例2
稱取熊果葉粉末600g，置于燒杯中，按1g熊果葉粉末：1ml40％乙醇比例加入600ml40％乙醇，于35℃下，微波(微波功率為400w)提取0.5h，每隔15min攪拌一次，共浸提兩次，合并浸提液，過濾，50℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1h，除去乙醇，加0.5倍體積的有機溶劑萃取(可以為乙醚、氯仿、石油醚等與水不互溶的有機溶劑，本實施例為氯仿)，萃取2次，合并水層后稀釋2倍體積，冷卻至室溫后，上ab-8與hpd-100按0.5：1體積比例混合大孔吸附樹脂柱(徑高比為1:7)進行吸附，吸附完成后，以25％乙醇為洗脫液，柱流速為1.5bv/min，收集乙醇洗脫液，55℃真空濃縮至一定至1/2體積，至5℃下，攪拌析晶1.0h，過濾，50℃下，真空干燥4h，即得高純度熊果苷，純度為99.2％，收率為5.6％。
實施例3
稱取熊果葉粉末1200g，置于燒杯中，按1g熊果葉粉末：1ml40％乙醇加入1200ml40％乙醇，于35℃下，微波(微波功率為600w)提取0.5h，每隔15min攪拌一次，共浸提兩次，合并浸提液，過濾，50℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1h，除去乙醇，加0.5倍體積的有機溶劑萃取(可以為乙醚、氯仿、石油醚等與水不互溶的有機溶劑，本實施例為石油醚)，萃取2次，合并水層后稀釋2倍體積，冷卻至室溫后，上ab-8與hpd-100按1.5：1體積比例混合大孔吸附樹脂柱(徑高比為1:5)進行吸附，吸附完成后，以25％乙醇為洗脫液，柱流速為1.5bv/min，收集乙醇洗脫液，55℃真空濃縮至一定至1/2體積，至5℃下，攪拌析晶1.0h，過濾，50℃下，真空干燥4h，即得高純度熊果苷，純度為99.0％，收率為5.8％。
實施例4
水層僅用ab-8型大孔吸附樹脂柱進行吸附，其余方法參數(shù)同實施例1，所得熊果苷的純度為89.6％，收率為6.5％。