本發(fā)明涉及植物化學(xué)成份的提取方法，具體是一種具有鎮(zhèn)痛作用的茉莉素的提取方法。

背景技術(shù)：

茉莉是木犀科植物茉莉的根、莖、葉、花，主要分布于廣西、廣東、云南、四川等地，野生較少，多為家種，是一種經(jīng)濟作物。用其花作茶飲，稱為茉莉花茶，或者拌和其他茶葉飲用。將其花經(jīng)水蒸氣蒸餾后所得蒸餾液，稱茉莉花露，具有解胸中一切陳腐之氣，健脾理氣之功效。廣西橫縣多個鄉(xiāng)鎮(zhèn)都有廣泛種植，形成一定規(guī)模的產(chǎn)業(yè)，稱為茉莉之鄉(xiāng)。茉莉的應(yīng)用目前只用其花，每年都舉辦茉莉花節(jié)，以促進茉莉花產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。茉莉花只占茉莉植株的一小部分，而花的產(chǎn)量又與植株的新老有關(guān)，新株花多，老株花少。為保持花的正常產(chǎn)量，種植農(nóng)戶每年都要挖除老株，插植新株，或者砍去老株的地上部分，讓根部長出新苗，而砍去的根莖通常棄之。

茉莉根莖不是中藥，用作草藥也很少見到。民間用法都是取其新鮮根莖磨汁內(nèi)服，或者將新鮮根莖搗絨酒炒外敷，才有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜催眠、麻醉等效果。茉莉的鎮(zhèn)痛麻醉作用在上個世紀七十年代開展的中藥麻醉研究中，也沒有分離得到這類單體成分。近年來，不少學(xué)者也對茉莉根莖的化學(xué)成分進行了研究，但目前沒有發(fā)現(xiàn)有茉莉提取物進行治療鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜催眠的相關(guān)報道。

茉莉根莖鎮(zhèn)痛等成分的化學(xué)性質(zhì)相當(dāng)活躍，光線、空氣、溫度(尤其是加熱)、酸堿等都能促進其自動氧化。通常茉莉根莖陰干或曬干后用溶劑提取不出活性成分，說明它們已經(jīng)氧化變成其他物質(zhì)，做不成藥材。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種具有鎮(zhèn)痛作用的茉莉素的提取方法，可以增加鎮(zhèn)痛藥物的種類，又可以充分利用廢棄農(nóng)作物，變廢為寶。

本發(fā)明以如下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問題：

本發(fā)明具有鎮(zhèn)痛作用的茉莉素的提取方法，包括以下操作步驟：

1)取新鮮茉莉根莖切段，加入0.8～2.0倍重量的體積濃度為18-20％的乙醇水溶液中浸泡3-24小時，過濾，取濾液；

2)將濾液置于盛皿中，放入-10～-15℃的冰庫中使其結(jié)冰化；

3)將冰凍干燥器開啟，待冷阱溫度降至-50℃～-60℃后，放入已冰化的樣品盛皿，并控制冰凍干燥器的真空度為160—170Pa，待冰凍干燥完全；

4)取出樣品盛皿，刮取上層的膜層或絮狀物層，即得茉莉素成品。

步驟1)中，將新鮮茉莉根莖切段后壓碎，然后放入乙醇水溶液中浸泡的同時進行攪拌搗絨，再放出浸漬液，再將藥渣移置離心機中，甩干溶液，將浸漬液和甩出的溶液合并，得濾液。

步驟1)中，所述切段是指切成1-2cm。

步驟4)中，冰凍干燥器在放入已冰化的樣品盛皿后運行48—55小時，至冰凍干燥完全。

本發(fā)明方法能使茉莉的活性成分在低溫低壓條件下提取分離，并使活性成分不被氧化變質(zhì)，保持原有的生物活性，而且工藝過程不需熱能，對環(huán)境不造成污染。

本發(fā)明方法可以增加鎮(zhèn)痛藥物的種類，又可以充分利用廢棄農(nóng)作物，變廢為寶。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明具有鎮(zhèn)痛作用的茉莉素的提取方法作進一步的描述；

實施例1，提取方法如下：

1)取鮮茉莉根莖切段(每段長1-2cm)，樣重400克，加入體積濃度為18％的乙醇水溶液375ml浸泡24小時，采用兩層紗布濾過，得濾液；

2)將濾液分裝于塑料皿中，置于-10～-15℃的冰庫中使其結(jié)冰化；

3)開啟冰凍干燥器，待冷阱溫度降至-55℃后，放入已冰化的樣品塑料皿，并控制冰凍干燥器的真空度為160Pa，運行52小時后，冰凍干燥完全；

4)取出樣品塑料皿，刮取上層的膜層，得茉莉素成品。

步驟1)的濾液中茉莉素含量約達30％。茉莉素收率達0.1％。

實施例2，提取方法如下：

1)取鮮茉莉根莖切段(每段長1-2cm)，樣重500克，加入體積濃度為20％的乙醇水溶液750ml，浸泡24小時，采用兩層紗布濾過，得濾液500ml；

2)將濾液分裝于玻璃燒杯中，置于-10～-15℃的冰庫中使其結(jié)冰化；

3)開啟冰凍干燥器，待冷阱溫度降至-50℃后，放入已冰化的樣品玻璃燒杯，并控制冰凍干燥器的真空度為165Pa，運行48小時，冰凍干燥完全；

4)取出樣品玻璃燒杯，刮取上層絮狀物，得茉莉素成品。

步驟1)的濾液中茉莉素含量約達50％。茉莉素收率達0.35％。

實施例3，提取方法如下：

1)取新鮮茉莉根莖切段(每段長1-2cm)、壓碎，取1500克，加入體積濃度為18％的乙醇水溶液2800ml浸泡，并攪拌搗絨提取3小時，放出浸漬液，藥渣移置離心機中，甩干溶液，然后將浸漬液和甩出的溶液合并得濾液；

2)將濾液分裝于塑料皿中，置于-10～-15℃的冰庫中使其結(jié)冰化；

3)開啟冰凍干燥器，待冷阱溫度降至-60℃后，放入已冰化的樣品塑料皿，并控制冰凍干燥器的真空度為170Pa，運行50小時后，冰凍干燥完全；

4)取出樣品塑料皿，刮取上層絮狀物，得茉莉素成品。

步驟1)的濾液中茉莉素含量約達80％。茉莉素收率達1％。

以下是采用本發(fā)明方法提取得到的茉莉素對動物進行的鎮(zhèn)痛試驗：

1實驗材料

1.1動物：昆明種小鼠，雌性，體重18～22g廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：2014-0002。

1.2受試物

茉莉素

2實驗方法

2.1對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響

取40只小鼠，雌雄兼用，隨機分為4組，即正常對照組、陽性對照組(阿司匹林0.2g/kg)、高低劑量給藥組，每組10只小鼠。于次給藥后30min，進行實驗，每組小鼠均腹腔注射0.6％的醋酸0.2mL，記錄各組小鼠的扭體潛伏期(即從注射醋酸至扭體的時間)及在15min內(nèi)扭體的次數(shù)，若15min內(nèi)未扭體，潛伏期按15min記錄。抑制率＝(生理鹽水組扭體均數(shù)－給藥組扭體均數(shù))/生理鹽水組扭體均數(shù)×100％。

2.2統(tǒng)計學(xué)方法學(xué)：SPSS16.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理。檢測結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準差表示，多個樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

3結(jié)果

3.1對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響

與正常對照組比較，茉莉素高低劑量組均有顯著性差異(P＜0.01)。結(jié)果表明，茉莉素可抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，見表1。

表1 茉莉素對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響

與正常對照組比較：*P＜0.05，**P＜0.01

4結(jié)論

兩組劑量的茉莉素均可顯著抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)，具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。