本發(fā)明涉及吡啶并嘧啶類化合物的
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體地，涉及2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲酰基)-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶及其制備方法。
背景技術(shù)：
：癌癥是當(dāng)今世界上死亡率最高的疾病之一，它對人類的健康造成了極嚴(yán)重的傷害。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)統(tǒng)計資料表明，每年全世界癌癥發(fā)病約1000萬人，死亡約700萬人。我國癌癥發(fā)病人數(shù)在120萬左右，每年死于癌癥的人數(shù)高達90萬以上，目前，對于大部分癌癥均缺乏特效的治療手段，仍然采用多種細胞毒性藥物聯(lián)合化療的方法來治療這種惡性疾患?；焹H能通過大量殺傷高度增殖的癌細胞而使患者得到短期緩解，但無法根治這種惡性疾患。且由于目前所用的化療藥物多缺乏特異性，所以毒副作用很大。更為棘手的是，大多數(shù)復(fù)發(fā)患者對現(xiàn)有的化療藥物產(chǎn)生耐藥性。為此，新型抗癌藥物的開發(fā)勢在必行，仍為世界范圍內(nèi)各國生物和醫(yī)藥研究的熱點和重點。根據(jù)研究，吡啶并嘧啶類化合物具有高效抑制多種癌細胞的生物活性，在新藥創(chuàng)制領(lǐng)域具有重要的研究價值。除此之外，帶有吡啶并嘧啶基本結(jié)構(gòu)的化合物大多具有殺菌、抗真菌、抗病毒、消炎、殺蟲和植物生長調(diào)節(jié)等生物活性，可用作治療高血壓、支氣管炎、痛風(fēng)病和癲癇藥物及用作抗興奮劑、抗過敏劑、強心劑、護肝劑、利尿劑等。技術(shù)實現(xiàn)要素：為了尋找新的抗癌藥物，本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種吡啶并嘧啶類化合物，進一步拓寬吡啶并嘧啶類化合物的研究領(lǐng)域。本發(fā)明的另一目的在于提供上述化合物的制備方法。本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)的。2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶，其結(jié)構(gòu)式如式(Ⅰ)所示：2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶的制備方法，包括如下步驟：S1.N-叔丁氧羰基-4哌啶酮與DMF-DMA在95℃下反應(yīng)1.5h，濃縮后得白色固體，即為3-((N,N-二甲氨基)-亞甲基)-N-叔丁氧羰基-4哌啶酮；S2.將3-((N,N-二甲氨基)-亞甲基)-N-叔丁氧羰基-4哌啶酮、2-脒基吡啶鹽酸鹽、叔丁醇、三乙胺在85℃下攪拌反應(yīng)12h，濃縮層析后，得到淺黃色固體，即化合物2-(2-吡啶)-N-叔丁氧羰基-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶；S3.將2-(2-吡啶)-N-叔丁氧羰基-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶與MeOH，在冰水浴條件下加入鹽酸，室溫下攪拌反應(yīng)12h，去除溶劑得2-(2-吡啶)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶；S4.將2-(2-吡啶)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶溶于二氯甲烷后，再分別加入2-氯-3-三氟甲基苯甲酸、三乙胺、HATU，25℃下攪拌反應(yīng)10h，去除二氯甲烷溶劑后，萃取，有機相濃縮后柱層析分離，即得。S1～S3三步反應(yīng)總收率為42.5％。優(yōu)選地，S1所述N-叔丁氧羰基-4哌啶酮與DMF-DMA的用量比為1:12.5g/ml。優(yōu)選地，S2所述3-((N,N-二甲氨基)-亞甲基)-N-叔丁氧羰基-4哌啶酮與2-脒基吡啶鹽酸鹽的摩爾比為10:11。優(yōu)選地，S2所述層析為柱層析分離，條件為石油醚:乙酸乙酯＝1:1。優(yōu)選地，S3所述2-(2-吡啶)-N-叔丁氧羰基-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶與MeOH的用量比為1:4mmol/mL。優(yōu)選地，S4所述2-(2-吡啶)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶與2-氯-3-三氟甲基苯甲酸的摩爾比為1:1.2。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果在于：為了尋找新的抗癌藥物，并進一步拓寬吡啶并嘧啶類化合物的研究領(lǐng)域，本發(fā)明合成了新型化合物2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶，該化合物未見文獻報道。并且，制備所述化合物的反應(yīng)總產(chǎn)率高，工藝簡單，適應(yīng)于工業(yè)化生產(chǎn)。具體實施方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步詳細說明，但實施例并不對本發(fā)明做任何形式的限定。除非特別說明，本發(fā)明采用的試劑、方法和設(shè)備為本
技術(shù)領(lǐng)域：
常規(guī)試劑、方法和設(shè)備。實驗所用試劑均為市售分析純。實施例12-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶的制備方法，包括如下步驟：S1.在250ml的燒瓶中加入N-叔丁氧羰基-4哌啶酮(1)(12g,60mmol)與150mlDMF-DMA，在95℃下反應(yīng)1.5h，TLC顯示反應(yīng)完全，濃縮后得3-((N,N-二甲氨基)-亞甲基)-N-叔丁氧羰基-4哌啶酮(2)(白色固體，14.4g)，收率為94.4％。S2.在100ml的燒瓶中依次加入3-((N,N-二甲氨基)-亞甲基)-N-叔丁氧羰基-4哌啶酮(2)(2.54g,10mmol)、2-脒基吡啶鹽酸鹽(3)(1.73g,11mmol)、叔丁醇50ml、三乙胺(4.2mL,30mmol)，85℃下攪拌反應(yīng)12h。TLC顯示反應(yīng)完全。濃縮后得粗品，再經(jīng)柱層析分離，條件為石油醚:乙酸乙酯＝1:1，得到化合物2-(2-吡啶)-N-叔丁氧羰基-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(4)(淺黃色固體，1.56g)，收率為50％。S3.在100ml的燒瓶中依次加入2-(2-吡啶)-N-叔丁氧羰基-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(4)(1.56g,5mmol)與MeOH(20mL)，再在冰水浴條件下加入HCl(1ml)，室溫下攪拌反應(yīng)12h。TLC顯示反應(yīng)完全。去除溶劑得2-(2-吡啶)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(5)(白色固體，0.95g)，收率為90％。LC-MS:M/Z＝213.1[M+H]+。三步反應(yīng)總收率為42.5％。S4.將2-(2-吡啶)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(5)(248mg，1mmol)溶于二氯甲烷(10ml)后，再往50ml燒瓶中依次加入2-氯-3-三氟甲基苯甲酸(10)(269mg,1.2mmol)、三乙胺(0.43mL，3.0mmol)、HATU(570mg，1.5mmol)。25℃下攪拌反應(yīng)10h。TLC顯示反應(yīng)完全。去除二氯甲烷溶劑后，加入乙酸乙酯萃取，有機相濃縮后柱層析分離，得2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(11)(白色固體，0.35g)，收率為84％。2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶的表征數(shù)據(jù)如下：1HNMR(300MHz,DMSO):8.95-8.65(m,3H),8.50(t,J＝8.2Hz,1H),8.01-7.89(m,2H),7.77-7.59(m,2H),5.11-4.90(m,1H),4.53(s,1H),4.26-3.91(m,1H),3.65-3.48(m,1H),3.22-2.89(m,2H).LC-MS:M/Z＝419.1[M+H]+,tR＝1.42min.HPLC:99％(214nm),99％(254nm),tR＝4.75min.實施例1的制備流程如下：其中，1為N-叔丁氧羰基-4哌啶酮；2為3-((N,N-二甲氨基)-亞甲基)-N-叔丁氧羰基-4哌啶酮；3為2-脒基吡啶鹽酸鹽；4為2-(2-吡啶)-N-叔丁氧羰基-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶；5為2-(2-吡啶)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶；10為2-氯-3-三氟甲基苯甲酸；11為2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶。如果將S2步驟中的叔丁醇改成正丁醇，最后得到化合物2-(2-吡啶)-N-叔丁氧羰基-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(4)(淺黃色固體，0.72g)，收率為23％。如果將S2步驟中的三乙胺改成二乙胺，最后得到化合物2-(2-吡啶)-N-叔丁氧羰基-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(4)(淺黃色固體，0.53)，收率為17％。如果將S2步驟中的反應(yīng)溫度由85℃變成50℃，最后得到化合物2-(2-吡啶)-N-叔丁氧羰基-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(4)(淺黃色固體，0.84)，收率為27％。由此可知，叔丁醇比正丁醇更適合做S2反應(yīng)的溶劑，這可能是由于原料在叔丁醇中比在正丁醇中溶解度更好的原因；此外，三乙胺比二乙胺更適合做S2反應(yīng)的堿，這可能是由于以叔丁醇為溶劑時，二乙胺的堿性偏強的原因，二乙胺不適合做高反應(yīng)的堿；最后，在以叔丁醇為溶劑，三乙胺為堿的條件下，反應(yīng)溫度為50℃時的反應(yīng)收率明顯低于反應(yīng)溫度為85℃時的收率，這可能是由于該反應(yīng)所需活化能較高，當(dāng)溫度為50℃時不能滿足該反應(yīng)的活化能要求。實施例2本實施例步驟S1～S3同實施例1。S4.將2-(2-吡啶)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(5)(248mg，1mmol)溶于二氯甲烷(10ml)后，再往50ml燒瓶中依次加入2-氯-3-三氟甲基苯甲酸(10)(269mg,1.2mmol)、三乙胺(0.43mL，3.0mmol)、HATU(570mg，1.5mmol)。39℃下攪拌反應(yīng)10h。TLC顯示反應(yīng)完全。去除二氯甲烷溶劑后，加入乙酸乙酯萃取，有機相濃縮后柱層析分離，得2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(11)(白色固體，0.21g)，收率為51％。實施例3本實施例步驟S1～S3同實施例1。S4.將2-(2-吡啶)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(5)(248mg，1mmol)溶于二氯甲烷(10ml)后，再往50ml燒瓶中依次加入2-氯-3-三氟甲基苯甲酸(10)(269mg,1.2mmol)、三乙胺(0.43mL，3.0mmol)、HOBT(203mg，1.5mmol)。25℃下攪拌反應(yīng)10h。TLC顯示反應(yīng)完全。去除二氯甲烷溶劑后，加入乙酸乙酯萃取，有機相濃縮后柱層析分離，得2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(11)(白色固體，0.04g)，收率為9％。實施例4本實施例步驟S1～S3同實施例1。S4.將2-(2-吡啶)-5,6,7,8-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(5)(248mg，1mmol)溶于二氯甲烷(10ml)后，再往50ml燒瓶中依次加入2-氯-3-三氟甲基苯甲酸(10)(269mg,1.2mmol)與二乙胺(0.31mL，3.0mmol)、HATU(570mg，1.5mmol)。25℃下攪拌反應(yīng)10h。TLC顯示反應(yīng)完全。去除二氯甲烷溶劑后，加入乙酸乙酯萃取，有機相濃縮后柱層析分離，得2-(2-吡啶)-6-(2-氯-3-三氟甲基苯甲?；?-5,7,8-三氫吡啶并[4,3-d]嘧啶(11)(白色固體，0.10g)，收率為23％。應(yīng)用例1用噁唑藍比色(MIT)法測定化合物(11)在其濃度為100μmol/L時，對卵巢癌HO-8910細胞和白血病K562細胞兩種癌細胞增殖的抑制率，結(jié)果見表1。表1化合物(11)抑制卵巢癌HO-8910和白血病K562細胞系增殖的抑制率化合物卵巢癌HO-8910/％白血病K652/％(11)72.180.6由表1可知，化合物(11)在濃度為100μmol/L時，能夠高效抑制白血病K562細胞系的增殖，并能夠有效抑制卵巢癌HO-8910細胞的增殖。當(dāng)前第1頁1 2 3