本發(fā)明涉及一種新型的脲類化合物、其制備方法及含有其的藥物組合物，以及其作為flt3酪氨酸蛋白激酶抑制劑的用途，特別是在治療癌癥中的用途。

背景技術(shù)：

癌癥是人類臨床死亡的主要疾病之一，特別是惡性腫瘤例如肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、腸癌、食管癌以及白血病，其死亡率極高。至今為止仍沒有有效的方法與藥物可以預(yù)防、治愈和根除癌癥。臨床上急需特異性好、活性高、毒性小、無耐藥性產(chǎn)生的優(yōu)質(zhì)抗癌藥物和治療方法。

白血病即血癌，是造血干細(xì)胞異常的克隆性惡性疾病，因白血病細(xì)胞失去分化為成熟功能性血細(xì)胞的能力而停滯在細(xì)胞發(fā)育的不同階段惡性增殖，在骨髓和其他造血組織中白血病細(xì)胞大量增生積聚并浸潤其他器官和組織，正常造血受到抑制，臨床表現(xiàn)為貧血、出血、感染及各器官浸潤等癥狀。白血病的發(fā)病率在所有腫瘤中占第6/7位，特別是在兒童和老人中有較高的發(fā)病率。白血病屬于細(xì)胞異質(zhì)性惡性腫瘤，種類繁多，病因復(fù)雜，臨床上表現(xiàn)出不同的特征，其中有的白血病發(fā)病快，死亡率高，存活期短，易復(fù)發(fā)，愈后不良，極難治愈。例如急性髓細(xì)胞白血病(aml)在60歲以上病人中其5年存活率僅為10％－20％，60歲以下存活率為40％－50％(h等人,acutemyeloidleukemia.nengljmed.2015；373(12):1136-52)。

雖然血癌的臨床治療可采用多種方法如化療、放療、免疫治療、靶向治療、誘導(dǎo)分化治療以及骨髓/干細(xì)胞移植，但是近40年來急性髓細(xì)胞白血病的臨床治療方法幾乎無大的改變，其標(biāo)準(zhǔn)治療方法仍然以誘導(dǎo)緩解為主即“7+3”基本療法(柔紅霉素25-45mg/m²，iv第1-3天，阿糖胞苷100mg/m²，iv第1-7天，急性早幼粒細(xì)胞白血病apl除外)。經(jīng)典的化療方法雖然能夠在短期內(nèi)有效的誘導(dǎo)緩解aml病情，抑制或者殺死癌細(xì)胞，但是此類藥物副作用大，選擇性差，容易復(fù)發(fā)和容易產(chǎn)生藥物抗性，無法得到根治。靶向治療與腫瘤免疫治療是當(dāng)今癌癥臨床治療的發(fā)展方向，其中靶向藥物治療特異性好，副作用小，療效明顯。許多靶向藥物已成功的應(yīng)用于不同類型的癌癥包括某些類型的白血病，然而至今為止全球尚未有被批準(zhǔn)用于aml治療的靶向藥物上市，臨床上急需大量針對aml靶向治療的藥品。

在aml病人臨床樣本細(xì)胞遺傳基因組大數(shù)據(jù)分析中發(fā)現(xiàn)，基因突變頻繁發(fā)生，其中細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑相關(guān)基因突變率約占50-60％，dna甲基化相關(guān)基因異常占44％，染色體修飾基因變異約為30％，髓系轉(zhuǎn)錄因子基因異常占20-25％，轉(zhuǎn)錄因子融合基因發(fā)生率為18％左右，腫瘤抑制基因突變占14％。例如在aml病人中，最為常見基因異常有flt3-itd(19-28％)、flt3－tkd(5-10％)、npm1(突變?yōu)?7-35％)、dnmta(突變?yōu)?6％)、nras(突變?yōu)?-9％)、asxl1(突變?yōu)?7-19％)、cebpa(突變占4-6％)、tet2(突變在8-27％范圍)、wt1(基因異常為8％)、idh2(點(diǎn)突變?yōu)?-9％)、idh1(突變占9％)、kit(突變率為2-4％)、runx1(基因突變范圍為5-10％)、mll－ptd(5％)、phf6(占3％)、kras(突變?yōu)?-4％)、tp53(突變率在2-8％范圍)、ezh2(突變約為2％)、jak2(突變在1-3％范圍)(coombscc等人,moleculartherapyforacutemyeloidleukaemia.natrevclinoncol.2015dec1.review。welchjs等人,theoriginandevolutionofmutationsinacutemyeloidleukemia.cell.2012；150:264–278。kandothc等人,mutationallandscapeandsignificanceacross12majorcancertypes.nature2013；502(7471):333-339。dingl等人,clonalevolutioninrelapsedacutemyeloidleukaemiarevealedbywhole-genomesequencing.nature.2012；481:506–510。hanahand等人,thehallmarksofcancer.cell.2000；100:57–70。thecancergenomeatlasresearchnetworkgenomicandepigenomiclandscapesofadultdenovoacutemyeloidleukemia.n.engl.j.med.2013；368:2059–2074)。

蛋白激酶是細(xì)胞生長、發(fā)育、分化、代謝、老化與凋亡等重要生理功能所必須的蛋白質(zhì)氨基酸磷酸化酶，主要有跨膜和胞質(zhì)蛋白激酶兩大類型。蛋白激酶的異常可直接導(dǎo)致臨床上不同類型的疾病例如癌癥、炎癥、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)以及心腦血管類疾病。人們經(jīng)過幾十年的不斷努力，許多蛋白激酶例如egfr、her2/3/4、vegfr、pdgfr、met、igf-1r、fgfr、csf-1r、trk受體、ephrin受體、tam受體、tie-2、flt-3、ret、alk、bcr-abl、jaks、src、fak、btk、syk，blk、cdk、pi3k、mek/ras/raf等已被鑒定為臨床不同疾病的靶蛋白分子。其中一些蛋白激酶抑制劑作為靶向治療藥物已成功的應(yīng)用于臨床，并且呈現(xiàn)出良好的治療效果，例如bcr-abl、egfr/her2、alk、btk、vegfr、jak等蛋白激酶抑制劑。fms樣酪氨酸激酶3(fms-liketyrosinekinase3,flt3)或稱為胎肝激酶2(fetalliverkinase-2,flk-2)或稱為人干細(xì)胞激酶1(humanstemcellkinase-1,stk-1)，屬于iii型受體酪氨酸激酶。該激酶家族包括集落刺激因子1受體csf1r、血小板衍生生長因子pdgfr、干細(xì)胞因子受體kit。在正常生長發(fā)育生理環(huán)境下，flt3基因的表達(dá)主要集中在腦、肝、胎盤、生殖腺體和造血細(xì)胞的早期發(fā)育中。在髓系和淋巴系干細(xì)胞生長發(fā)育過程中，flt3基因及其配體基因flt3-l都呈現(xiàn)高表達(dá)，flt3-l與flt3結(jié)合誘導(dǎo)flt3 蛋白自身磷酸化，激活flt3酶活性以及其介導(dǎo)的下游pi3k、jak/stat和ras等信號(hào)傳導(dǎo)途徑，參與血液細(xì)胞的生長、發(fā)育、增殖與分化等生物學(xué)功能(drexlerhg等人,flt3:receptorandligand.growthfactors.2004；22(2):71-3.review)。例如，在flt3基因缺失實(shí)驗(yàn)鼠中，髓系和淋巴系祖細(xì)胞數(shù)量減少。然而，當(dāng)flt3基因發(fā)生異常時(shí)如異常表達(dá)或突變，正常血細(xì)胞發(fā)生癌變，形成白血病。例如，大約30％的急性髓系白血病(aml)患者發(fā)生flt3內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)(itd，19-28％)和酪氨酸激酶域(tkd，5-10％)突變；中等或高危險(xiǎn)骨髓增生異常綜合征(mds)病人中，flt3突變率為2％；apl病人中，flt3突變率小于5％；在all中的發(fā)生率小于1％，且主要見于雙表型的all病例。

flt3的上述兩種突變，包括flt3-itd/flt3-tkd雙突變，均能引起flt3蛋白自身磷酸化，導(dǎo)致flt3配體非依賴性持續(xù)酶活性激活及其下游信號(hào)傳導(dǎo)的異常，從而起到促進(jìn)增殖和抑制凋亡的作用。flt3酪氨酸激酶激活突變是aml中最主要的突變之一，也是aml的主要病因之一。由于flt3-itd克隆具有選擇性生長優(yōu)勢，單獨(dú)使用普通化療藥物難以治愈此類白血病，同時(shí)此類白血病患者耐受化療藥物的作用力強(qiáng)，臨床愈后差，患者易對化療藥物產(chǎn)生抗性并且容易復(fù)發(fā)，所以flt3酪氨酸激酶激活突變已成為aml靶向治療的重要靶標(biāo)(gillilanddg,griffinjd.therolesofflt3inhematopoiesisandleukemia.blood.2002；100(5):1532–1542。kiyoih.等人,internaltandemduplicationoftheflt3geneisanovelmodalityofelongationmutationwhichcausesconstitutiveactivationoftheproduct.leukemia.1998；12(9):1333–1337)。

flt3-itd和flt3-tkd抑制劑一直是aml研究領(lǐng)域備受關(guān)注的藥物研發(fā)之一。至今為止，臨床前研究發(fā)現(xiàn)近上百個(gè)不同類型的小分子化合物能夠體外選擇性抑制或部分抑制flt3蛋白激酶活性以及flt3突變型表達(dá)陽性白血病細(xì)胞系或白血病病人樣本細(xì)胞的體外增值和異種移植體內(nèi)腫瘤生長，其中有的已進(jìn)入臨床試驗(yàn)的不同階段，例如cep701、chir-258、pkc412、mln-518、舒尼替尼、ac220、xl-999、索拉非尼、帕納替尼、crenolanib、asp2215、akn-028、tak-659、e6201、卡博替尼、plx3387和flx925(smithbd等人,single-agentcep-701,anovelflt3inhibitor,showsbiologicandclinicalactivityinpatientswithrelapsedorrefractoryacutemyeloidleukemia.blood.2004；103(10):3669-76；lopesdemenezesde等人,chir-258:apotentinhibitorofflt3kinaseinexperimentaltumorxenograftmodelsofhumanacutemyelogenousleukemia.clincancerres.2005；11(14):5281-91；weisberge等人,inhibitionofmutantflt3receptorsinleukemiacellsbythesmallmoleculetyrosinekinaseinhibitorpkc412.cancercell.2002；1(5):433-43；zarrinkarpp等人,ac220isauniquelypotentandselectiveinhibitorofflt3forthetreatmentofacutemyeloidleukemia(aml).blood.2009；114(14):2984-92；kellylm等人,ct53518,anovelselectiveflt3antagonist forthetreatmentofacutemyelogenousleukemia(aml).cancercell.2002；1(5):421-32；griswoldij等人,effectsofmln518,adualflt3andkitinhibitor,onnormalandmalignanthematopoiesis.blood.2004；104(9):2912-8；smithcc等人,crenolanibisaselectivetypeipan-flt3inhibitor.procnatlacadsciusa.2014；111(14):5319-24；zimmermanei等人,crenolanibisactiveagainstmodelsofdrug-resistantflt3-itd-positiveacutemyeloidleukemia.blood.2013；122(22):3607-15；safaiannn等人,sorafenib(nexavar)inducesmolecularremissionandregressionofextramedullarydiseaseinapatientwithflt3-itd+acutemyeloidleukemia.leukres.2009；33(2):348-50；zhangw等人,mutantflt3:adirecttargetofsorafenibinacutemyelogenousleukemia.jnatlcancerinst.2008；100(3):184-98)。盡管有些flt3抑制劑不同期的臨床試驗(yàn)結(jié)果鼓舞人心，aml病人病情得到改善，但大多數(shù)化合物在單獨(dú)應(yīng)用于aml病人治療時(shí)，并沒有呈現(xiàn)出預(yù)期的臨床效果，至今為止全球尚沒有一個(gè)flt3抑制劑被批準(zhǔn)用于aml臨床治療。

由于aml疾病的特殊性，綜合與分析現(xiàn)有flt3抑制劑臨床前和臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)，我們發(fā)現(xiàn)上述多數(shù)化合物的一個(gè)共同副作用是嚴(yán)重影響正常血細(xì)胞的生長與發(fā)育，降低病人自身免疫力，限制了藥物的臨床治療效果。同時(shí)獲得性藥物抗性的問題也是flt3抑制劑臨床應(yīng)用的障礙，其主要原因與化合物的選擇性、活性、生物利用度及有效性有關(guān)(kadiatm等人,newdrugsinacutemyeloidleukemia(aml).annoncol.2016jan22。steinem等人,emergingtherapeuticdrugsforaml.blood.2016；127(1):71-8。steinem,molecularlytargetedtherapiesforacutemyeloidleukemia.hematologyamsochematoleducprogram.2015；(1):579-83)。

mv4-11、molm-13和molm-14三種人類白血病細(xì)胞系是當(dāng)今應(yīng)用最廣的flt3-itd表達(dá)細(xì)胞。其中mv4-11細(xì)胞含有flt3itd純合子突變(+/+)，屬于人急性淋巴髓單核細(xì)胞白血病。molm-13和molm-14是來自同一病人的姊妹細(xì)胞株，含有flt3itd/wt雜合體突變(+/-)，屬于人急性髓系白血病(quentmeierh等，flt3mutationsinacutemyeloidleukemiacelllines.leukemia.2003；17(1):120-124)。許多研究已證實(shí)靶向抑制flt3-itd就能有效抑制這三種白血病細(xì)胞的體內(nèi)和體外生長，這些細(xì)胞系特別是mv4-11已成為flt3-itd抑制劑篩選與鑒定的常用細(xì)胞模型。

本發(fā)明利用(1)flt3-itd表達(dá)陽性細(xì)胞系mv4-11和molm-13；(2)flt3基因野生型表達(dá)陽性細(xì)胞系rs4；11；(3)其它癌基因表達(dá)陽性的白血病細(xì)胞系及實(shí)體瘤細(xì)胞系作為細(xì)胞模型，致力于開發(fā)一種高活性、高選擇性、高生物利用度、低副作用的新型化合物，其可以作為一種有效的flt3酪氨酸蛋白激酶抑制劑，用于治療癌癥特別是白血病。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明涉及一種新型的脲類化合物，其能夠有效的抑制flt3-itd突變型表達(dá)白血病細(xì)胞系mv4-11和molm-13的體外生長，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其gi50為亞納摩爾范圍，而對flt3野生型高表達(dá)或正常表達(dá)或無表達(dá)癌細(xì)胞系生長相對無明顯抑制作用。同時(shí)本發(fā)明化合物能夠有效地、快速地、濃度依賴性地抑制flt3-itd白血病細(xì)胞mv4-11異種移植動(dòng)物體內(nèi)的腫瘤生長。進(jìn)一步的藥物代謝動(dòng)力學(xué)和藥學(xué)研究發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物在大鼠體內(nèi)呈現(xiàn)高的生物利用度及良好的藥學(xué)性質(zhì)。

因此，本發(fā)明提供一種通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，

其中：

x、y各自獨(dú)立地選自n或者c-br1；

a、a1各自獨(dú)立地選自n或者c-br1；

w、z各自獨(dú)立地選自n或者c-br1；

當(dāng)r1不存在時(shí)，b相同或不同且各自獨(dú)立地選自：氫、鹵素、烷基、烯基、炔基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、或雜芳基，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、或雜芳基任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)q基團(tuán)取代；

當(dāng)r1存在時(shí)，b相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-o-或-nr4-；并且，r1相同或不同且各自獨(dú)立地選自：氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-r^uor^x、-r^uc(o)or^x、-r^un(r^y)(r^z)、-c(o)n(r^y)(r^z)、-r^us(o)nn(r^y)(r^z)、-r^us(o)nr^x；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、氰基、羥基、烷基、烷氧基、羥烷基、羥烷氧基、酰胺基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、鹵代芳基、雜芳基、環(huán)烷基-雜芳基的一種或多種基團(tuán)取代；r4選自氫、烷基、烯基和炔基，或者r4、r1與它們所連接的氮原子一起形成雜環(huán)基或雜芳基，所述雜環(huán)基或雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基的一種或多種基團(tuán)取代；

當(dāng)r2為氫時(shí)，g選自芳基、雜芳基或雜環(huán)基，所述芳基、雜芳基或雜環(huán)基任選進(jìn)一步被選自鹵素、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羥基、氨基、?；h(huán)烷基、 雜環(huán)基、芳基、雜芳基的一種或多種基團(tuán)所取代，其中所述烷基、烯基、炔基、烷氧基、?；?、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、烷基、鹵代烷基、烯基、炔基、芳基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、環(huán)烷基、酯基和氰基的一種或多種基團(tuán)所取代；或者，

當(dāng)r2不為氫時(shí)，g、r2與它們所連接的氮原子一起形成雜環(huán)基或雜芳基，所述雜環(huán)基或雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羥基、氨基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、和雜芳基的一種或多種基團(tuán)所取代，其中所述烷基、烯基、炔基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、烷基、鹵代烷基、烯基、炔基、芳基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、環(huán)烷基、酯基和氰基的一種或多種基團(tuán)所取代；

r3選自q基團(tuán)；

r^u選自一個(gè)鍵、亞烷基、亞烯基、或亞炔基；

r^x選自氫、烷基、羥烷基、鹵代烷基、烯基、或者炔基；或者，

-r^uor^x-中的r^u和r^x與它們所連接的氧原子一起形成含氧的3-7元雜環(huán)基，所述雜環(huán)基任選進(jìn)一步被一種或多種q基團(tuán)取代；

r^y和r^z各自獨(dú)立地選自氫、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環(huán)烷基、或者鹵代烷基；或者，

r^y和r^z與它們所連接的氮原子一起形成雜環(huán)基或者雜芳基，所述雜環(huán)基或雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、鹵代烷基、烷基、烯基和炔基的一種或多種基團(tuán)所取代；

q選自氫、鹵素、羥基、氨基、烷基、烷氧基、環(huán)烷基、烯基、炔基、氰基、芳基、雜環(huán)基或雜芳基，所述氨基、烷基、烷氧基、環(huán)烷基、烯基、炔基、芳基、雜環(huán)基或雜芳基任選進(jìn)一步被選自羥基、鹵素、和烷基的一種或多種基團(tuán)取代；

n為0-2的整數(shù)。

在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，

其中：

x、y、a、a1選自如下結(jié)構(gòu)：

r5¹、r5²、r5³、r5⁴、r5⁵、r5⁶、r5⁷、r5⁸和r5⁹各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、-n(r^y)(r^z)、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、烷氧基、烯基、炔基、-n(r^y)(r^z)、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、羥基、烷基、烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、環(huán)烷基、酯基的一種或多種基團(tuán)所取代。

r1、b、r^y、r^z如通式(i)中所定義。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，

其中：

x、y、a、a1選自如下結(jié)構(gòu)：

r5¹、r5²、r5³、r5⁴和r5⁵各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、-n(r^y)(r^z)、鹵代烷基、鹵代烷氧基。

r1、b、r^y、r^z如通式(i)中所定義。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，

其中：

x、y、a、a1選自如下結(jié)構(gòu)：

r5¹、r5²、r5³各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、-n(r^y)(r^z)、鹵代烷基、鹵代烷氧基。

r1、b、r^y、r^z如通式(i)中所定義。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

r5¹、r5²、r5³、r5⁴、r5⁵、r5⁶、r5⁷、r5⁸和r5⁹各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、-n(r^y)(r^z)、c1-c6鹵代烷基、c1-c6鹵代烷氧基，其中r^y、r^z各自獨(dú)立地選自氫、c1-c6烷基。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，w、z選自如下4種方式：

a)w、z為cq；

b)w、z為n；

c)w為cq且z為n；

d)z為cq且w為n；

其中，q選自氫、鹵素、羥基、氨基、氰基、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6鹵代烷氧基、c3-c7環(huán)烷基、c5-c7芳基、5至7元雜環(huán)基或5至7元雜芳基。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

r1不存在，b相同或不同且各自獨(dú)立地選自：氫、鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6鹵代烷基、c1-c6鹵代烷氧基。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

當(dāng)r1不存在時(shí)，b選自氫、鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基；

當(dāng)r1存在時(shí)，b相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-o-或-nr4-，優(yōu)選為-o-；并且，r1相同或不同且各自獨(dú)立地選自：氫、c1-c10烷基，所述烷基任選進(jìn)一步被選自鹵素、氰基、羥基、c1-c6烷氧基、c3-c7環(huán)烷基、4～6元雜環(huán)基、c5～c7芳基、c5～c7鹵代芳基、5～7元雜芳基、c3～c6環(huán)烷基-5～7元雜芳基的一種或多種基團(tuán)取代，其中所述4～6元雜環(huán)基優(yōu)選含氧或氮的4～6元雜環(huán)基；所述c5～c7芳基或c5～c7鹵代芳基優(yōu)選苯基或鹵代苯基；

r4如通式(i)中所定義。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

當(dāng)r1不存在時(shí)，b選自氫、鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基；

當(dāng)r1存在時(shí)，b相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-o-或-nr4-，優(yōu)選為-o-；并且，r1相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-r^uor^x，其中r^u選自c1-c6亞烷基，r^x選自氫、c1-c6烷基、c1-c6羥烷基、c1-c6鹵代烷基；

r4如通式(i)中所定義。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

當(dāng)r1不存在時(shí)，b選自氫、鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基；

當(dāng)r1存在時(shí)，b相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-o-或-nr4-，優(yōu)選為-o-；并且，r1相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-c(o)n(r^y)(r^z)，其中r^y和r^z各自獨(dú)立地選自氫、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6鹵代烷基、c1-c6鹵代烷氧基、c3-c7環(huán)烷基；或者，

r^y和r^z與它們所連接的氮原子一起形成5～7元雜環(huán)基或5～7元雜芳基，優(yōu)選6元雜環(huán)基或6元雜芳基，更優(yōu)選嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、嘧啶基，所述5～7元雜環(huán)基或5～7元雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基的一種或多種基團(tuán)所取代；

r4如通式(i)中所定義。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

當(dāng)r1不存在時(shí)，b選自氫、鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基；

當(dāng)r1存在時(shí)，b相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-o-或-nr4-，優(yōu)選為-o-；并且，r1相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-r^un(r^y)(r^z)，其中r^u選自c1-c6亞烷基；r^y和r^z各自獨(dú)立地選自氫、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6鹵代烷基、c1-c6鹵代烷氧基、c3-c7環(huán)烷基；或者，

r^y和r^z與它們所連接的氮原子一起形成5～7元雜環(huán)基或者5～7元雜芳基，優(yōu)選嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、氮雜環(huán)庚烷基、吡啶基、嘧啶基，所述5～7元雜環(huán)基或5～7元雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基的一種或多種基團(tuán)所取代；

r4如通式(i)中所定義。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

當(dāng)r1不存在時(shí)，b選自氫、鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基；

當(dāng)r1存在時(shí)，b相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-o-或-nr4-，優(yōu)選為-o-；并且，r1相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-r^uc(o)or^x，其中：r^u選自c1-c6亞烷基；r^x選自氫、c1-c6烷基、c1-c6羥烷基、c1-c6鹵代烷基；

r4如通式(i)中所定義。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

當(dāng)r1不存在時(shí)，b選自氫、鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基；

當(dāng)r1存在時(shí)，b相同或不同且各自獨(dú)立地選自：-o-或-nr4-，優(yōu)選為-o-；并且，r1相同或不同且各自獨(dú)立地選自：5～7元芳基或5～7元雜芳基，優(yōu)選噻二唑基、吡唑基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、三唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、n-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基、苯基、吡啶基、嘧啶基，所述5～7元芳基或5～7元雜芳基任選進(jìn)一步被選自c3～c6環(huán)烷基、5～7元雜環(huán)基、酰胺基的一種或多種基團(tuán)取代；

r4如通式(i)中所定義。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

r4選自氫或c1-c6烷基，或者r4、r1與它們所連接的氮原子一起形成5～7元雜環(huán)基或5～7元雜芳基，優(yōu)選哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、吡啶基、嘧啶基，所述5～7元雜環(huán)基或5～7元雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6鹵代烷氧基的一種或多種基團(tuán)取代。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

當(dāng)r2為氫時(shí)，g選自c5～c7芳基、5至7元雜芳基或5至7元雜環(huán)基，優(yōu)選

所述c5～c7芳基、5至7元雜芳基或5至7元雜環(huán)基任選進(jìn)一步被選自鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6鹵代烷氧基、羥基、氨基、酰基、c3～c7環(huán)烷基、5～7元雜環(huán)基、c5～c7芳基、5～7元雜芳基的一種或多種基團(tuán)所取代；所述c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c3～c7環(huán)烷基、5～7元雜環(huán)基、c5～c7芳基、5～7元雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、羥基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6鹵代烷基、c1-c6鹵代烷氧基、酯基和氰基的一種或多種基團(tuán)所取代；或者，

當(dāng)r2不為氫時(shí)，g、r2與它們所連接的氮原子一起形成5-7元雜環(huán)基或5-7元雜芳基，優(yōu)選吡咯基、吡唑基、咪唑基，所述5-7元雜環(huán)基或5-7元雜芳基任選進(jìn)一步被選自鹵素、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6鹵代烷氧基、羥基、氨基、c3～c7環(huán)烷基、5～7元雜環(huán)基、c5～c7芳基、5～7元雜芳基的一種或多種基團(tuán)所取代。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，其中，

r3選自氫、鹵素、羥基、氨基、c1-c6烷基、c1-c6鹵代烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6鹵代烷氧基、c3～c7環(huán)烷基、氰基、c5～c7芳基、5～7元雜環(huán)基或5～7元雜芳基。

本發(fā)明典型的通式(i)化合物包括但不限于：

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-異噁唑-3-基-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-甲基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-羥基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-異丙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(3-甲基-氧雜環(huán)丁烷-3-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(四氫-呋喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-羥基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-乙氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-{5-[2-(2-羥基-乙氧基)-乙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲；

嗎啉-4-羧酸-1-{4-[3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基酯；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-{4-[5-(2-氮雜環(huán)庚烷-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-{5-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-{6-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[7-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(4-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(2-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(2-氯苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-3-甲基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-3-氯-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-3-氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-3,5-二氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-2-氯-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(6-苯并咪唑-1-基-吡啶-3-基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(2-苯并咪唑-1-基-嘧啶-5-基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吲哚-1-基-苯基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吲唑-1-基-苯基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-氟-吲唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(7-氟-吲唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(4-苯并三唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基-苯基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基-苯基)-脲；

1-[4-(6-溴-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-三氟甲基-咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氯咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(7-甲基咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-咪唑并[4,5-b]吡啶-1-基-苯基)-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基-嘌呤-7-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基嘌呤-9-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-二甲基氨基-嘌呤-7-基)-苯基]-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-噻唑-2-基-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(4-甲基-噻唑-2-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[1,3,4]噻二唑-2-基-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-甲基-1h-吡唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-苯基-1h-吡唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-環(huán)丙基-2h-吡唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-三氟甲基-2h-吡唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-異丙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-[4-(5-仲丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-異丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-乙氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-羥基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-羥基-3-甲氧基-丙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-二甲氨基-丙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-二丁基氨基丙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-氰基甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-甲基-氧雜環(huán)丁烷-3-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(四氫-呋喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(四氫-吡喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

(1-{4-[3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基氧基)-乙酸乙酯；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-{4-[5-(2-氮雜環(huán)庚烷-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-{5-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-氟-芐氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-{5-[4-(1-環(huán)己基-1h-四唑-5-基)-丁氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(4-嗎啉-4-基-[1,2,5]噻二唑-3-基氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

4-(1-{4-[3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲基]-苯基}-1h苯并咪唑-5-基氧基)-吡啶-2-羧酸甲基胺；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-脲；

1-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(2-羥基-乙基)-2h-吡唑-3-基]-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2h-吡唑-3-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(4-甲氧基-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(4-三氟甲氧基-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(4-氟-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(2-氟-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-吡啶-2-基-2h-吡唑-3-基)-脲；

4-{5-[3-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-脲基]-3-叔丁基-吡唑-1-基}-苯甲酸乙酯；

1-(2-丙烯酰基-5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-咪唑-1-基-苯基)-脲；

3-氨基-5-甲基吡唑-1-羧酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺；

5-氨基-3-環(huán)丙基吡唑-1-甲酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺；

5-氨基-3-三氟甲基吡唑-1-羧酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸[4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸(4-{5-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(2-羥基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(四氫-吡喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(四氫-呋喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺；

(1-{4-[(5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羰基)-氨基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基氧基)-乙酸乙酯；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸[4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-酰胺；

4-(1-{4-[(5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羰基)-氨基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基氧基)-吡啶-2-羧酸甲基酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺；

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸[4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-酰胺；

3-叔丁基-吡唑-1-羧酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3,4-二甲基-異噁唑-5-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3-異丙基-異噁唑-5-基)-脲；

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-脲。

本發(fā)明另一方面提供一種制備通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥的方法，其包括以下步驟：

在適宜的溫度、ph和適當(dāng)?shù)娜軇┲校趬A的作用下，使式(ii)化合物與式(iii)化合物反應(yīng)，得到通式(i)的化合物；

所述溶劑優(yōu)選thf、乙腈、二氯甲烷、甲苯，所述堿優(yōu)選三乙胺、n,n-二異丙基乙胺、dmap、吡啶；

x、y、a、a1、z、w、r1、b、r2、g、r3如通式(i)中所定義。

本發(fā)明另一方面提供一種制備通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥的方法，其包括以下步驟：

在適宜的溫度、ph和適當(dāng)?shù)娜軇┲?，在堿的作用下，使式(iv)化合物與式(v)化合物反應(yīng)，得到通式(i)的化合物；

所述溶劑優(yōu)選thf、乙腈、二氯甲烷、甲苯，所述堿優(yōu)選三乙胺、n,n-二異丙基乙胺、dmap、吡啶；

x、y、a、a1、z、w、r1、b、r2、g、r3如通式(i)中所定義。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種藥物組合物，其含有治療有效量的根據(jù)本發(fā)明的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥作為活性成分，以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，或者含有其的藥物組合物，在制備flt3酪氨酸蛋白激酶抑制劑中的用途。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，或者含有其的藥物組合物，在制備用于預(yù)防和/或治療哺乳動(dòng)物包括人中癌癥的藥物的用途。所述癌癥包括但不限于，非實(shí)體瘤如白血病，實(shí)體瘤如皮膚癌、黑色素瘤、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、結(jié)腸癌。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，或者含有其的藥物組合物，其用作flt3酪氨酸蛋白激酶抑制劑的用途。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，或者含有其的藥物組合物，其用作預(yù)防和/或治療哺乳動(dòng)物包括人中癌癥的藥物的用途。所述癌癥包括但不限于，非實(shí)體瘤如白血病，實(shí)體瘤如皮膚癌、黑色素瘤、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、結(jié)腸癌。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種抑制flt3酪氨酸蛋白激酶的方法，其包括向需要其的患者施用抑制有效量的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，或者含有其的藥物組合物。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種預(yù)防和/或治療治療哺乳動(dòng)物包括人中癌癥的方法，其包括向需要其的患者施用治療有效量的通式(i)所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥，或者含有其的藥物組合物。所述癌癥包括但不限于，非實(shí)體瘤如白血病，實(shí)體瘤如皮膚癌、黑色素瘤、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、結(jié)腸癌。

具體實(shí)施方式

除非另有規(guī)定，本文使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本領(lǐng)域技術(shù)人員的通常理解相同含義。所有專利、申請、公開的申請和其他出版物均以全部內(nèi)容并入作為參考。倘若對于本文使用的術(shù)語有多個(gè)定義，除非另有說明，以本節(jié)中的為準(zhǔn)。如果任何給定取代基的數(shù)量沒有規(guī)定，則可以存在一個(gè)或多個(gè)取代基。例如“鹵代烷基”可以含有一個(gè)或多個(gè)相同或不同的鹵素。在本文的描述中，如果化學(xué)結(jié)構(gòu)和化學(xué)名稱彼此矛盾時(shí)，則是以其化學(xué)結(jié)構(gòu)為準(zhǔn)。當(dāng)在本文使用時(shí)，對于任何保護(hù)基團(tuán)、氨基酸和其他化合物的縮寫，除非另有說明，以其常用的公認(rèn)縮寫表示，或根據(jù)iupac-iubcommissiononbiochemicalnomenclature表示(參見，biochem.1972,77:942-944)。

除非有相反陳述，否則下列用在說明書和權(quán)利要求書中的術(shù)語具有下述含義。

術(shù)語“烷基”指飽和的脂族烴基團(tuán)，包括1至20個(gè)碳原子的直鏈和支鏈基團(tuán)。其包括碳數(shù)1～18、優(yōu)選碳數(shù)1～10、更優(yōu)選碳數(shù)1～6、甚至更優(yōu)選碳數(shù)1～4的直鏈或支鏈烷基。非限制性實(shí)施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、正庚基、異庚基、正辛基、異辛基、正壬基、正癸基等。本說明書中，“烷基”還包括碳數(shù)3～10、優(yōu)選碳數(shù)3～8、更優(yōu)選碳數(shù)4～6的環(huán)狀烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)壬基、環(huán)癸基、十氫萘基、降冰片烷、金剛烷基。烷基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基可以在任何可使用的連接點(diǎn)上被取代，優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術(shù)語“烯基”指由碳和氫原子組成的含有至少一個(gè)雙鍵的直鏈或支鏈的烴鏈基團(tuán)，并通過單鍵或雙鍵與分子的其余部分連接。優(yōu)選具有2～10個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有2～6個(gè)碳原子，甚至更優(yōu)選具有2～4個(gè)碳原子。非限制性實(shí)施例包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、戊二烯基、己烯基。烯基可以是取代的或非取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，其獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術(shù)語“炔基”指由碳原子和氫原子組成的含有至少一個(gè)三鍵的直鏈或支鏈的烴鏈基團(tuán)，并通過單鍵或三鍵與分子的其余部分連接。優(yōu)選具有2～10個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有2～6個(gè)碳原子，甚至更優(yōu)選具有2～4個(gè)碳原子。非限制性實(shí)施例包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基。炔基可以是取代的或非取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，其獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔 基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術(shù)語“環(huán)烷基”指飽和或部分不飽和單環(huán)或多環(huán)環(huán)狀烴取代基，其包括3至20個(gè)碳原子，優(yōu)選包括3至12個(gè)碳原子，更優(yōu)選環(huán)烷基環(huán)包含3至10個(gè)碳原子，最優(yōu)選環(huán)烷基環(huán)包含3至7個(gè)碳原子。單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實(shí)施例包含環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)己二烯基、環(huán)庚基、環(huán)庚三烯基、環(huán)辛基等，優(yōu)選環(huán)丙基、環(huán)己烯基。多環(huán)環(huán)烷基包括螺環(huán)、稠環(huán)和橋環(huán)的環(huán)烷基。環(huán)烷基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術(shù)語“雜環(huán)基”指飽和或部分不飽和單環(huán)或多環(huán)環(huán)狀烴取代基，其包括3至20個(gè)環(huán)原子，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子選自氮、氧或s(o)m(其中m是整數(shù)0至2)的雜原子，但不包括-o-o-、-o-s-或-s-s-的環(huán)部分，其余環(huán)原子為碳。優(yōu)選包括3至12個(gè)環(huán)原子，其中1～4個(gè)是雜原子，更優(yōu)選雜環(huán)基環(huán)包含3至10個(gè)環(huán)原子，更優(yōu)選雜環(huán)基環(huán)包含5至7個(gè)環(huán)原子。單環(huán)雜環(huán)基的非限制性實(shí)施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、高哌嗪基、吡喃基、四氫呋喃基等。多環(huán)雜環(huán)基包括螺環(huán)、稠環(huán)和橋環(huán)的雜環(huán)基。雜環(huán)基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術(shù)語“芳基”指具有共軛的π電子體系的全碳單環(huán)或稠合多環(huán)(也就是共享毗鄰碳原子對的環(huán))基團(tuán)，優(yōu)選為5至10元，更優(yōu)選5至7元，甚至更優(yōu)選苯基和萘基，最優(yōu)選苯基。芳基可以是完全芳香族的基團(tuán)，例如苯基、萘基、蒽基、菲基等。芳基也可以含有芳香環(huán)與非芳香環(huán)的組合，例如，茚、芴和苊等。所述芳基環(huán)可以稠合于雜芳基、雜環(huán)基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為芳基環(huán)，非限制性實(shí)施例包含：

芳基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術(shù)語“雜芳基”指包含1至4個(gè)雜原子、5至14個(gè)環(huán)原子的雜芳族體系，其中雜原子選自氧、硫和氮。雜芳基優(yōu)選為5至10元，更優(yōu)選5至7元，甚至更優(yōu)選為5元或6元，例如噻二唑基、吡唑基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、三唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、n-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述雜芳基環(huán)可以稠合于芳基、雜環(huán)基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為雜芳基環(huán)，其非限制性實(shí)例包括：

雜芳基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術(shù)語“烷氧基”指-o-(烷基)和-o-(未取代的環(huán)烷基)，其中烷基、環(huán)烷基的定義如上所述。非限定性實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環(huán)丙氧基、環(huán)丁氧基、環(huán)戊氧基、環(huán)己氧基等。烷氧基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自為烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術(shù)語“鹵代烷基”指其中一個(gè)或多個(gè)氫原子被鹵素取代的烷基，其中烷基的定義如上所述。非限定性實(shí)例包括氯甲基、三氟甲基、1-氯-2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2-氟丙基、2-氟丙-2-基、2,2,2-三氟乙基、1,1-二氟乙基、1,3-二氟-2-甲基丙基、2,2-二氟環(huán)丙基、(三氟甲基)環(huán)丙基、4,4-二氟環(huán)己基和2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基。

術(shù)語“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。

術(shù)語“氰基”指-cn。

術(shù)語“羥基”指-oh基團(tuán)。

術(shù)語“羥烷基”指被羥基取代的烷基，其中烷基的定義如上所述。

術(shù)語“羥烷氧基”指被羥基取代的烷氧基，其中烷氧基的定義如上所述。

術(shù)語“?；敝?c(o)r，其中r指烷基、環(huán)烷基、烯基、炔基，其中烷基、環(huán)烷基、烯基、炔基的定義如上所述。非限定性實(shí)例包括乙?；?、丙?；?、丁酰基、戊酰基、己?；?、乙烯?；?、丙烯酰基。

術(shù)語“酰胺基”指-nhc(o)r，其中r指烷基、烯基、炔基，其中烷基、烯基、炔基的定義如上所述。非限定性實(shí)例包括甲酰胺基、乙酰氨基、丙酰胺基、丁酰胺基、戊酰胺基、己酰胺基、乙烯酰胺基、丙烯酰胺基。

術(shù)語“酯基”指-c(o)or，其中r指烷基或環(huán)烷基，其中烷基、環(huán)烷基的定義如上所述。非限定性實(shí)例包括乙酯基、丙酯基、丁酯基、戊酯基、環(huán)丙酯基、環(huán)丁酯基、環(huán)戊酯基、環(huán)己酯基。

本說明書中的“任選取代”是指未取代或被一個(gè)或多個(gè)(例如2、3、4個(gè))取代基取代。其中取代基選自下組：鹵素原子、烷基、烯基、炔基、鹵代烷基、烷氧基、芳基、鹵代芳基、芳氧基、芳烷基、芳烷基氧基、雜環(huán)基烷氧基、鹵代芳基烷基氧基、烷基氨基、烷基?；?、氰基、或雜環(huán)基等。這些取代基還可以進(jìn)一步被取代。例如，作為取代基的烷基還任選被選自鹵素原子、羥基、烷氧基、烷基氨基、吡咯烷基、苯基、吡啶基、或鹵代苯基中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代。作為取代基的雜環(huán)基還任選被選自鹵素原子、烷基、烷氧基中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代。

本發(fā)明通式(i)所示的化合物的制備方法。

為了完成本發(fā)明化合物的目的，本發(fā)明主要采用如下合成路線與技術(shù)方案。

本發(fā)明化合物的第一種合成方法為，將本發(fā)明通式(i)化合物的結(jié)構(gòu)如上劃分為a部分和b部分，其中a部分為胺類中間體式(ii)化合物，b部分為活潑酯中間體式(iii)化合物。

1、a部分胺類中間體式(ii)化合物的合成方法如下所示。

方法1：通過取代反應(yīng)合成a部分胺類中間體

a)苯并咪唑類中間體1或中間體2或中間體3的合成如下方案1所示，

方案1

首先，以苯并咪唑類中間體m起始，在適當(dāng)?shù)臏囟群蚿h條件下，在堿催化下，在適當(dāng)?shù)娜軇┲型ㄟ^取代反應(yīng)得到中間產(chǎn)物；所述堿可以為例如碳酸鉀、碳酸銫等，所述溶劑可以為例如dmf、乙腈等。然后，將中間產(chǎn)物的硝基還原為氨基，得到中間體1、2、3；硝基的還原可以在例如鐵粉氯化銨體系或h2/鈀碳體系中實(shí)現(xiàn)。

b)其它類型中間體的合成如下方案2所示，

方案2

與上述苯并咪唑類中間體的合成方法相同，只是用相應(yīng)的起始原料代替苯并咪唑類中間體m得到相應(yīng)的其它類型的中間體。

方法2：通過關(guān)環(huán)反應(yīng)合成a部分胺類中間體

a)苯并咪唑類中間體4、中間體5、中間體6和中間體7的合成如下方案3(方法1)和方案4(方法2)所示，

方案3

步驟1：中間體m1與對溴硝基苯于適當(dāng)溶劑中，在堿、催化劑和配體作用下進(jìn)行buchwald反應(yīng)得到中間體m2；所述溶劑優(yōu)選二氧六環(huán)、甲苯，所述堿優(yōu)選叔丁醇鈉、叔丁醇鉀、碳酸銫，所述催化劑優(yōu)選(pd)2(dba)3、醋酸鈀、pd(dba)2，所述配體優(yōu)選xphos、binap；

步驟2：在還原條件下，將中間體m2的兩個(gè)硝基還原氨基，得到中間體m3，所述還原條件可以為例如鐵粉氯化銨體系或h2/鈀碳體系；

步驟3：在酸性條件下，高溫下中間體m3和甲酸經(jīng)歷關(guān)環(huán)反應(yīng)，得到中間體4，所述酸性條件例如鹽酸；

步驟4：r0選自甲氧基時(shí)，在酸性條件下，加熱回流中間體4得到中間體5，所述酸性條件例如hbr；

步驟5：在堿的催化下，在適當(dāng)?shù)娜軇┲泻蜏囟认?，使中間體5與相應(yīng)的活潑鹵代物反應(yīng)得到中間體6，所述堿例如氫氧化鈉、碳酸鉀等，所述溶劑例如dmf等。

方案4

步驟1：在堿存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，?-硝基-5-氟苯胺與中間體m4發(fā)生取代反應(yīng)，得到中間體m5，所述堿可以為例如碳酸鉀等，所述溶劑可以為如dmf等；

步驟2：中間體m5與對溴硝基苯于適當(dāng)溶劑中，在堿、催化劑和配體作用下進(jìn)行buchwald反應(yīng)得到中間體m6；所述溶劑優(yōu)選二氧六環(huán)、甲苯，所述堿優(yōu)選叔丁醇鈉、叔丁醇鉀、碳酸銫，所述催化劑優(yōu)選(pd)2(dba)3、醋酸鈀、pd(dba)2，所述配體優(yōu)選xphos、binap；

步驟3：在還原條件下，將中間體m6的兩個(gè)硝基還原氨基，得到中間體m7，所述還原條件可以為例如鐵粉氯化銨體系或h2/鈀碳體系；

步驟4：在酸性條件下，高溫下中間體m7和甲酸經(jīng)歷關(guān)環(huán)反應(yīng)，得到中間體7，所述酸性條件例如鹽酸。

b)其它類型中間體的合成如下方案5所示

方案5

步驟1：在堿存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇┲校怪虚g體m8與中間體m9發(fā)生取代反應(yīng)，得到中間體m10，所述堿可以為例如三乙胺，所述溶劑可以為例如dmso；

步驟2：在還原條件下，將中間體m10的兩個(gè)硝基還原氨基，得到中間體m11，所述還原條件可以為例如鐵粉氯化銨體系或h2/鈀碳體系；

步驟3：在酸性條件與高溫條件下，中間體m11和甲酸經(jīng)歷關(guān)環(huán)反應(yīng)，得到中間體8，所述酸性條件例如鹽酸。

2、b部分活潑酯中間體式(iii)化合物的合成

1)吡唑類中間體的合成如下方案6所示，

方案6

在適宜的溫度與ph條件下，在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，在酸催化下反?yīng)得到吡唑類中間體，所述溶劑可以為例如乙醇，所述酸可以為例如鹽酸。

2)其它異噁唑類、噁唑類、噻唑類、噻二唑類中間體均可以商業(yè)獲得。

3)活潑酯的合成方法

如果b部分中間體只有一個(gè)成脲位點(diǎn)，則將其制成活潑酯，如下方案7所示，

方案7

在適宜的溫度與ph條件下，在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，在堿的催化下，使氯甲酸苯酯與相應(yīng)的胺(中間體m12)反應(yīng)，得到相應(yīng)的活潑酯，其中所述溶劑可以為例如乙酸乙酯、二氯甲烷、四氫呋喃、丙酮、乙腈、水等，所述堿可以為例如吡啶、碳酸氫鈉、碳酸鉀、三乙胺、氫氧化鈉等。由于與氨基相連的基團(tuán)各不相同，導(dǎo)致其活性不盡相同，因此反應(yīng)時(shí)所選擇的堿略有不同，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識(shí)進(jìn)行常規(guī)選擇。

如果b部分中間體有兩個(gè)可成脲位點(diǎn)(-nh-和-nh2-)，例如：則將a部分胺類中間體制成活潑酯。即成為本發(fā)明化合物的第二種合成方法，將本發(fā)明通式(i)化合物的結(jié)構(gòu)劃分為a部分和b部分，其中a部分為活潑酯中間體式(iv)化合物，b部分為胺類中間體式(v)化合物。

其中，a部分活潑酯中間體式(iv)化合物的制備方法與如上b部分為活潑酯的制備方法相似。即為，在適宜的溫度與ph條件下，在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，在堿的催化下，將a部分的胺類中間體式(ii)化合物與氯甲酸苯酯反應(yīng)，得到a部分活潑酯中間體式(iv)化合物。

最后，如前所述，將中間體式(ii)化合物與式(iii)化合物，或者中間體式(iv)化合物與式(v)化合物，在適宜的溫度、ph和適當(dāng)?shù)娜軇┲?，在堿的作用下，使活潑酯脫掉一分子苯酚得到相應(yīng)的異氰酸酯中間體，再在堿的作用下和相應(yīng)的胺反應(yīng)，生成最終的脲類化合物即通式(i)化合物。所述溶劑優(yōu)選thf、乙腈、二氯甲烷、甲苯，所述堿優(yōu)選三乙胺、n,n-二異丙基乙胺、dmap、吡啶。

其中，x、y、a、a1、z、w、r1、b、r2、g、r3如通式1中所定義，r0、r0¹、r0²在無特殊說明下，與-br1的定義相同。

本發(fā)明通式(i)所示的化合物，其前藥應(yīng)遵照前藥設(shè)計(jì)原則，在生物體內(nèi)正常生理狀況下，能夠通過酶解、水解、酸解或代謝降解，釋放出原活性通式(i)所示的化合物。這里包括但不限于化合物上羥基基團(tuán)的脂化(如形成磷酸脂和碳酸脂)、氨基基團(tuán)和羧基基團(tuán)的保護(hù)。前藥設(shè)計(jì)參照(1)karamanr，prodrugsdesignbasedoninter-andintramolecularchemicalprocesses.chembioldrugdes.82(6):643-68，2013；(2)rautioj等，prodrugs:designandclinicalapplications.natrevdrugdiscov.7(3):255-702008；(3)jampilekj，prodrugs:pharmaceuticaldesignandcurrentperspectives.currpharmdes.17(32):3480-1,2011；(4)bundgaardh.designofprogrugs.elservier,1985。

本發(fā)明通式(i)所示的化合物在藥學(xué)上可接受的鹽，可以為酸加成鹽或堿加成鹽。酸可以為無機(jī)酸，包括但不限于：鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸；或可以為有機(jī)酸，包括但不限于：檸檬酸、馬來酸、草酸，甲酸、乙酸、丙酸、戊酸、乙醇酸、苯甲酸、富馬酸、三氟乙酸、琥珀酸、酒石酸、乳酸、谷氨酸、天門冬氨酸、水楊酸、丙酮酸、甲磺酸、苯磺酸、對苯磺酸。堿可以為無機(jī)堿，包括但不限于：氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鎂、氫氧化鈣；或可以為有機(jī)堿，包括但不限于：氫氧化銨、三乙胺、n,n-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、氨、二乙醇胺和其他羥基烷基胺、乙二胺、n-甲基葡糖胺、普魯卡因、n-芐基苯乙胺、精氨酸或賴氨酸；或可以為堿金屬鹽，包括但不限于：鋰、鉀和鈉鹽；或可以為堿土金屬鹽，包括但不限于：鋇、鈣和鎂鹽；或可以為過渡金屬鹽，包括但不限于鋅鹽；或其他金屬鹽，包括但不限于：磷酸氫鈉和磷酸氫二鈉。

本發(fā)明另一方面將通式(i)所示的化合物或藥學(xué)上可接受的鹽或前藥制備成臨床上可使用的藥用組合物。根據(jù)臨床適應(yīng)癥，給藥途徑與方式，其藥用制劑包括但不限于口服制劑如片劑、凝膠劑、軟/硬膠囊、乳劑、分散性粉劑、顆粒劑、水/油懸乳劑；注射劑包括靜脈注射劑、肌肉注射劑、腹腔注射劑、直腸給藥栓劑、顱內(nèi)注射劑，這些劑型可為水溶液也可為油類溶液；局部制劑包括霜?jiǎng)?、軟膏劑、凝膠劑、水/油溶液以及包合物制劑；吸入劑型包括細(xì)粉、液體氣溶膠以及適合于體內(nèi)植入的各種劑型。

本發(fā)明的藥物組合物可以根據(jù)需要加入藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。這些載體、稀釋劑或賦形劑應(yīng)符合藥物制劑制備工藝規(guī)則，與活性成分相兼容。固體口服制劑的載體包括但不限于甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、纖維素、葡萄糖、蔗糖、環(huán)糊精以及促進(jìn)腸吸收分子載體維生素e-peg1000?？诜苿┛杉尤脒m當(dāng)?shù)闹珓?、甜味劑、矯味劑及防腐劑。

本發(fā)明通式(i)所示的化合物或藥學(xué)上可接受的鹽或前藥可以按0.01-100mg/kg單位劑量給予溫血?jiǎng)游铩５绫绢I(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，藥物的給藥劑量依賴于多種因素，包括但并非限定于以下因素：所用具體化合物的活性、患者的年齡、患者的體重、患者的健康狀況、患者的行被、患者的飲食、給藥時(shí)間、給藥方式、排泄的速率、藥物的組合等。因此，最佳的治療方式如治療的模式、通式(i)化合物的日用量或可藥用的鹽的種類可以根據(jù)傳統(tǒng)的治療方案來驗(yàn)證。

本發(fā)明通式(i)所示的化合物或藥學(xué)上可接受的鹽或前藥，在上述癌癥治療中，可單獨(dú)使用，或與臨床上常規(guī)使用的放射療法、化學(xué)療法、免疫療法、融瘤病毒、rnai、癌癥輔助治療以及骨髓移植和干細(xì)胞移植的一種或多種方法聯(lián)合治療，其中包括但不限于以下抗腫瘤類藥物和治療方法：

1)烷化劑如順鉑、順鉑、奧沙利鉑、苯丁酸氮芥、卡環(huán)磷酰胺，氮芥、美法侖、替莫唑胺、白消安、亞硝基脲類。

2)抗腫瘤抗生素類如阿霉素、博來霉素、多柔比星、道諾霉素、表柔比星、伊達(dá)比星、絲裂霉素c、放線菌素、光神霉素；抗有絲分裂藥如長春新堿、長春堿、長春地辛、長春瑞濱、紫杉醇、泰索帝、polo激酶抑制劑。

3)抗代謝和抗葉酸劑如氟嘧啶、雷甲氨蝶呤、阿糖胞苷、阿扎胞苷、地西他濱、替曲塞、羥基脲、idh1/idh2突變株抑制劑。

4)拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑如表鬼臼毒素、喜樹堿、伊立替康。

5)細(xì)胞生長抑制劑如抗雌激素/抗雄激素類藥物。如他莫昔芬、氟維司群、托瑞米芬、雷諾昔芬、屈諾昔芬、碘昔芬、比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特、醋酸環(huán)丙孕酮；

lhrh拮抗劑或lhrh激動(dòng)劑如戈舍瑞林、亮丙瑞林、和布舍瑞林、孕激素類如醋酸甲地孕酮；

芳香酶抑制劑如阿那曲唑、來曲唑、伏羅唑、伊西美坦、5a-還原酶抑制劑如非那雄胺。

6)抗侵襲劑如c-src激酶家族抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑、尿激酶纖溶酶原激活物受體功能的抑制劑或者類肝素酶的抗體。

7)細(xì)胞生長功能抑制劑包括酪氨酸激酶抑制劑以及絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑如ras/raf信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑，mek和/或akt激酶的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑、c-kit抑制劑、pdgfr抑制劑、abl激酶抑制劑、abl激酶抑制劑、pi3激酶抑制劑、csf-1r激酶抑制劑、egfr家族激酶抑制劑、igf受體激酶抑制劑，極光激酶抑制劑，細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑如cdk2和/或cdk4，cdk6抑制劑，核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白crm1抑制劑，wnt/beta-catenin抑制劑。

8)表觀遺傳學(xué)(epigenetics)抑制劑如組蛋白去乙酰化酶(hdac)抑制劑和dna甲基轉(zhuǎn)移酶(dnmt)抑制劑。

9)腫瘤免疫治療法包括任何提高患者腫瘤細(xì)胞的免疫原性的體外和體內(nèi)方法。如細(xì)胞因子il-2、il-4或者gm-csf進(jìn)行轉(zhuǎn)染；降低t細(xì)胞無效能的方法如抗pd-1/pd-l單抗；使用轉(zhuǎn)染的免疫細(xì)胞如細(xì)胞因子轉(zhuǎn)染的樹突狀細(xì)胞的方法；使用細(xì)胞因子轉(zhuǎn)染的腫瘤細(xì)胞系的方法；降低免疫抑制性細(xì)胞如調(diào)節(jié)性t細(xì)胞、髓源性抑制細(xì)胞、或表達(dá)吲哚胺2,3-脫氧酶的樹突狀細(xì)胞的功能方法；以及腫瘤相關(guān)抗原蛋白類或肽類組成的癌癥疫苗的方法。

10)嵌合抗原受體t細(xì)胞免疫療(cart)。

11)腫瘤基因治療如crispr-cas9，rnai，基因轉(zhuǎn)導(dǎo)。

實(shí)施例

以下結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，但這些實(shí)施例并非限制本發(fā)明的范圍。

化合物的結(jié)構(gòu)是通過核磁共振(nmr)或/和質(zhì)譜(ms)來確定的。nmr位移(δ)以10^-6(ppm)的單位給出。nmr的測定是用(brukeravance-400)核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞砜(dmso-d6)、氘代氯仿(cdcl3)、氘代甲醇(cd3od)，內(nèi)標(biāo)為四甲基硅烷(tms)。

ms的測定用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(thermo，ultimate3000/msq)。

hplc的測定使用高壓液相色譜儀(安捷倫1260infinity，geminic18250×4.6mm,5u色譜柱)。

薄層色譜法(tlc)使用的硅膠板hsgf245采用的規(guī)格是0.15mm～0.2mm，薄層層析分離純化產(chǎn)品采用的規(guī)格是0.9mm～1.0mm(煙臺(tái)黃海)。

柱層析色譜法一般使用200～300目硅膠為載體(煙臺(tái)黃海硅膠)。

本發(fā)明的已知起始原料可以采用或按照本領(lǐng)域已知的方法來合成，或購買自上海達(dá)瑞精細(xì)化學(xué)品有限公司、上海泰坦科技股份有限公司、上海潤捷化學(xué)試劑有限公司、tci、aldrichchemicalcompany。實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照原料或商品制造廠商所建議的條件。未注明具體來源的試劑，為市場購買的常規(guī)試劑。

實(shí)施例中無特殊說明，反應(yīng)能夠均在氬氣氛或氮?dú)夥障逻M(jìn)行。氬氣氛或氮?dú)夥帐侵阜磻?yīng)瓶連接一個(gè)約1l容積的氬氣或氮?dú)鈿馇颉?/p>

實(shí)施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。

實(shí)施例中無特殊說明，反應(yīng)的溫度為室溫，為20℃～30℃。

實(shí)施例1

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-異噁唑-3-基-脲(化合物1)的制備

化合物1

步驟1：1-(4-硝基-苯基)-1h-苯并咪唑的制備

于室溫，將苯并咪唑(23.6g，0.2mol)和對氟硝基苯(31.0g，0.22mol)溶解于300mldmf中，加入無水碳酸鉀(69.0g，0.5mol)。將混合物加熱至90℃，反應(yīng)6小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，緩慢倒入水中，室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，過濾。所得固體水洗，真空干燥過夜。將得到的固體用甲基叔丁基醚打漿，得46g黃色固體狀的1-(4-硝基-苯基)-1h-苯并咪唑。

步驟2：4-苯并咪唑-1-基-苯胺的制備

將步驟1中得到的1-(4-硝基-苯基)-1h-苯并咪唑(46g，0.19mol)、還原鐵粉(53.9g，0.96mol)、氯化銨(81.3g，1.52mol)加入乙醇(500ml)/水(125ml)中，并將得到的混合物加熱至80℃，反應(yīng)4h。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(1l)，用乙酸乙酯萃取(500ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品37g黃色固體狀的4-苯并咪唑-1-基-苯胺。產(chǎn)品無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟3：異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)的制備

將3-氨基異噁唑(tci)(840mg，10mmol)溶解于20mlthf中，于室溫加入吡啶(2.37g，30mmol)。將混合物在冰浴中降溫至0～5℃，緩慢滴加氯甲酸苯酯(2.34g，15mmol)，滴畢撤走冰浴，緩慢升至室溫。tlc檢測反應(yīng)完畢后，將反應(yīng)液倒入水中，用乙酸乙酯(100×2)萃取，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌(200ml)，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得到1.5g白色固體狀的異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯。

步驟4：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-異噁唑-3-基-脲的制備

將步驟2得到的4-苯并咪唑-1-基-苯胺(100mg，0.478mmol)、步驟3得到的異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯(146.4mg，0.717mmol)和三乙胺(145mg，1.43mmol)溶解于10mlthf中，并回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到50mg白色固體狀的1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-異噁唑-3-基-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.81(s,1h),9.36(s,1h),8.76-8.77(d,1h),8.52(s,1h),7.77-7.79(m,1h),7.70-7.72(d,2h),7.60-7.63(d,2h),7.57-7.60(m,1h),7.29-7.36(m,2h),6.88-6.89(d,1h)。

lc-ms(esi):320.2(m+h)⁺。

實(shí)施例2

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-甲基-異噁唑-3-基)-脲(化合物2)的制備

化合物2

與實(shí)施例1中的制備方法相同，除了用5-甲基-3-氨基異噁唑(tci)代替步驟3中的3-氨基異噁唑，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-甲基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.55(s,1h),9.09(s,1h),8.51(s,1h),7.76-7.79(m,1h),7.68-7.71(d,2h),7.60-7.62(d,2h),7.57-7.60(m,1h),7.30-7.34(m,2h),6.57(d,1h),2.38(s,3h)。

lc-ms(esi):334.2(m+h)⁺。

實(shí)施例3

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物3)的制備

化合物3

與實(shí)施例1中的制備方法相同，除了用5-叔丁基-3-氨基異噁唑(tci)代替步驟3中的3-氨基異噁唑，得到白色固體狀的1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.73(s,1h),9.34(s,1h),8.51(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.69-7.71(d,2h),7.57-7.62(m,3h),7.30-7.35(m,2h),6.54(d,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):376.1(m+h)⁺。

實(shí)施例4

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-羥基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物4)的制備

化合物4

步驟1：(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺的制備

氮?dú)夥障?，?-硝基-4-甲氧基苯胺(1.5g，8.92mmol，達(dá)瑞)、對溴硝基苯(3.6g，17mmol)、xphos(425mg)、pd2(dba)3(408mg)、叔丁醇鈉(1.71g,17.8mmol)溶解于30ml甲苯中，并于90℃反應(yīng)3小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫，加入100ml二氯甲烷，室溫?cái)嚢?分鐘，過濾，濾液減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得2.5g紅黑色固體狀的(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺。

步驟2：(4-甲氧基-2-氨基-苯基)-(4-氨基-苯基)-胺的制備

將步驟1中所得產(chǎn)物(4-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺(2.5g，8.65mmol)、還原鐵粉(2.91g，52.0mmol)、氯化銨(4.62g，86.5mmol)加入乙醇(50ml)/水(12.5ml)中，并將得到的混合物加熱至90℃，反應(yīng)1h。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(150ml)，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品1.8g黃色固體狀的(4-甲氧基-2-氨基-苯基)-(4-氨基-苯基)-胺。產(chǎn)品無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟3：4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

將步驟2中所得產(chǎn)物(4-甲氧基-2-氨基-苯基)-(4-氨基-苯基)-胺(1.8g，7.86mmol)溶解于60ml鹽酸中(4mol/l)，于室溫加入2ml甲酸，將混合物加熱至120℃，反應(yīng)1h。將反應(yīng)液冷卻，并在冰浴下用氨水調(diào)節(jié)至ph>9，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到1.2g黃色固體狀的4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟4：1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇的制備

于15ml40％氫溴酸中，將步驟3中所得產(chǎn)物4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(875mg，3.66mmol)加熱至120℃，反應(yīng)6h。將反應(yīng)液冷卻至室溫，有灰白固體析出。將固體過濾，并溶解于70ml水中。過濾，取濾液用氨水調(diào)節(jié)至約ph＝7，有白色固體析出，過濾，水洗固體，真空干燥得600mg灰白色固體狀1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.13(s,1h),8.19(s,1h),7.23-7.25(d,1h),7.19-7.22(d,2h),7.02(d,1h),6.76-6.79(dd,1h),6.70-6.73(d,2h),5.41(s,2h)。

lc-ms(esi):226.1(m+h)⁺。

步驟5：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-羥基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

將步驟4得到的1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇(100mg，0.444mmol)、(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯(173.3mg，0.666mmol)和三乙胺(137.5mg，1.332mmol)溶解于10mlthf中，回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到80mg白色固體狀的1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-羥基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.27(s,1h),9.11(s,1h),8.38(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.56-7.58(d,2h),7.37-7.39(d,1h),7.06-7.07(d,1h),6.81-6.84(dd,1h),6.52(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):392.1(m+h)⁺。

實(shí)施例5

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物5)的制備

化合物5

與實(shí)施例4中的制備方法相同，除了用4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替步驟5中的1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.59(s,1h),9.06(s,1h),8.44(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.58-7.60(d,2h),7.46-7.48(d,1h),7.29-7.30(d,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.53(s,1h),3.82(s,3h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):406.1(m+h)⁺。

實(shí)施例6

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物6)的制備

化合物6

步驟1：4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

將1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇(實(shí)施例4步驟4中合成)(300mg，1.33mmol)、碘乙烷(311mg，2.0mmo)、氫氧化鋰(96mg，3.98mmol)于20ml乙醇中60℃反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液冷卻至室溫，并倒入水中(80ml)，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得400mg黑黃固體狀的4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.08(s,1h),8.44(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.57-7.60(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.27-7.28(d,1h),6.93-6.96(dd,1h),6.53(s,1h),4.05-4.11(q,2h),1.34-1.38(t,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):420.2(m+h)⁺。

實(shí)施例7

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物7)的制備

化合物7

步驟1：4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

將1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇(實(shí)施例4步驟4中合成)(300mg，1.33mmol)、1-氯己烷(240mg，2.0mmol，tci)、氫氧化鈉(160mg，4mmol)加入20mldmf中，將混合物加熱至90℃，反應(yīng)2h。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并倒入水中(80ml)，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品400mg4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。產(chǎn)品無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟2：與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.07(s,1h),8.44(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.58-7.60(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.28-7.29(d,1h),6.94-6.96(dd,1h),6.53(s,1h),4.00-4.03(t,2h),1.72-1.76(m,2h),1.41-1.46(m,2h),1.32-1.36(m,4h),1.31(s,9h),0.87-0.91(t,3h)。

lc-ms(esi):esi476.1(m+h)⁺。

實(shí)施例8

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-異丙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物8)的制備

化合物8

與實(shí)施例6中的制備方法相同，除了用碘代異丙烷(tci)代替步驟1中的碘乙烷，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-異丙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.07(s,1h),8.46(s,1h),7.68-7.70(d,2h),7.58-7.61(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.31-7.32(d,1h),6.93-6.95(dd,1h),6.53(s,1h),4.61-4.67(m,1h),1.31(s,9h),1.29-1.30(d,6h)。

lc-ms(esi):434.1(m+h)⁺。

實(shí)施例9

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(3-甲基-氧雜環(huán)丁烷-3-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物9)的制備

化合物9

與實(shí)施例7中的制備方法相同，除了用3-氯甲基-3-甲基氧雜環(huán)丁烷(達(dá)瑞)代替步驟1中的1-氯己烷，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(3-甲基-氧雜環(huán)丁烷-3-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.59(s,1h),9.07(s,1h),8.45(s,1h),7.68-7.70(d,2h),7.58-7.60(d,2h),7.47-7.49(d,1h),7.35-7.36(d,1h),6.99-7.01(dd,1h),6.53(s,1h),4.52-4.54(d,2h),4.32-4.34(d,2h),4.11(s,2h),1.40(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):esi476.1(m+h)⁺。

實(shí)施例10

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(四氫呋喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物10)的制備

化合物10

與實(shí)施例7中的制備方法相同，除了用2-氯甲基四氫呋喃(達(dá)瑞)代替步驟1中的1-氯己烷，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(四氫呋喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.59(s,1h),9.06(s,1h),8.44(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.58-7.60(d,2h),7.45-7.48(d,1h),7.29-7.30(d,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.53(s,1h),4.16-4.22(m,1h),3.95-4.04(m,2h),3.78-3.83(m,1h),3.67-3.72(m,1h),1.98-2.05(m,1h),1.81-1.93(m,2h),1.68-1.73(m,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):esi476.1(m+h)⁺。

實(shí)施例11

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-羥基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物11)的制備

化合物11

與實(shí)施例7中的制備方法相同，除了用溴乙醇(tci)代替步驟1中的1-氯己烷，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-羥基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.07(s,1h),8.44(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.58-7.60(d,2h),7.46-7.48(d,1h),7.29-7.30(d,1h),6.95-6.98(dd,1h),6.53(s,1h),4.87-4.90(t,1h),4.02-4.06(m,2h),3.73-3.77(m,2h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):esi436.1(m+h)⁺。

實(shí)施例12

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物12)的制備

化合物12

步驟1：4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺的制備

于室溫，將1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇(實(shí)施例4的步驟4制備)(18.0g，0.08mol)溶解于dmf(200ml)中，加入氫氧化鈉(9.6g，0.24mol)，室溫?cái)嚢?0分鐘，過程中有固體析出。于室溫，加入氯乙基甲基醚(11.34g，0.12mol，tci)，并將混合物加熱至90℃反應(yīng)1.5小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并緩慢倒入600ml水中，有固體析出，室溫?cái)嚢?0分鐘。過濾，所得固體水洗，真空干燥得20.5g粉紅固體狀的4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:8.27(s,1h),7.32-7.35(d,1h),7.26(d,1h),7.22-7.24(d,2h),6.90-6.93(dd,1h),6.72-6.74(d,2h),5.41(s,2h),4.12-4.15(m,2h),3.67-3.70(m,2h),3.33(s,3h)。

lc-ms(esi):284.1(m+h)+。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.61(s,1h),9.08(s,1h),8.52(s,1h),7.68-7.70(d,2h),7.59-7.62(d,2h),7.47-7.50(d,1h),7.38(d,1h),6.98-7.01(dd,1h),6.53(s,1h),4.13-4.15(t,2h),3.68-3.71(t,2h),3.33(s,3h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):450.1(m+h)⁺。

實(shí)施例13

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-乙氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物13)的制備

化合物13

與實(shí)施例7的制備方法相同，除了用2-氯乙基乙基醚(達(dá)瑞)代替步驟1中的1-氯己烷，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-乙氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.07(s,1h),8.46(s,1h),7.67-7.70(d,2h),7.58-7.60(d,2h),7.46-7.48(d,1h),7.31(d,1h),6.96-6.99(dd,1h),6.53(s,1h),4.13-4.16(t,2h),3.72-3.74(t,2h),3.50-3.55(q,2h),1.31(s,9h),1.13-1.17(t,3h)。

lc-ms(esi):esi464.1(m+h)⁺。

實(shí)施例14

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-{5-[2-(2-羥基-乙氧基)-乙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲(化合物14)的制備

化合物14

與實(shí)施例7的制備方法相同，除了用2-氯乙氧基乙醇(泰坦)代替步驟1中的1-氯己烷，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-{5-[2-(2-羥基-乙氧基)-乙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.07(s,1h),8.47(s,1h),7.68-7.70(d,2h),7.59-7.61(d,2h),7.47-7.49(d,1h),7.32-7.33(d,1h),6.96-6.99(dd,1h),6.53(s,1h),4.66(br,1h),4.15-4.16(t,2h),3.77-3.79(t,2h),3.49-3.52(m,4h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):esi480.1(m+h)⁺。

實(shí)施例15

嗎啉-4-羧酸-1-{4-[3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基酯(化合物15)的制備

化合物15

將化合物7(41mg,0.105mmol)、三乙胺(32mg,0.315mmol)和dmap(3mg)溶解于10mlthf中，于室溫加入4-嗎啉碳酰氯(19mg，0.126mmol，達(dá)瑞)，室溫反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液倒入水中(30ml)，用乙酸乙酯萃取(30ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得20mg白色固體狀的嗎啉-4-羧酸-1-{4-[3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基酯。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.61(s,1h),9.13(s,1h),8.55(s,1h),7.69-7.71(d,2h),7.60-7.63(d,2h),7.54-7.56(d,1h),7.52-7.53(d,1h),7.10-7.13(dd,1h),6.53(s,1h),3.58-3.62(m,8h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):505.2(m+h)⁺。

實(shí)施例16

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物16)的制備

化合物16

步驟1：4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺的制備

將1-(4-氨基苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇(實(shí)施例4的步驟4制備)(3.0g，0.013mol)溶解于dmf(200ml)中，于室溫加入氫氧化鈉(1.60g，0.04mol)、n-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(3.76g，0.020mol，tci)，室溫?cái)嚢?0分鐘。將混合物加熱至90℃，反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并緩慢倒入100ml水中，有固體析出。室溫?cái)嚢?0分鐘，過濾，所得固體水洗，真空干燥得3.4g黃色固體狀的4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:8.27(s,1h),7.32-7.34(d,1h),7.27(d,1h),7.22-7.24(d,2h),6.89-6.92(dd,1h),6.72-6.74(d,2h),5.41(s,2h),4.11-4.14(t,2h),3.58-3.60(t,4h),2.70-2.73(t,2h),2.48-2.50(m,4h)。

lc-ms(esi):339.1(m+h)+。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(cdcl3-d,400mhz)δ:9.61(s,1h),8.20(s,1h),8.06(s,1h,),7.75-7.77(d,2h),7.46-7.48(d,2h),7.38-7.41(d,1h),7.35-7.36(d,1h),6.99-7.02(dd,1h),5.94(s,1h),4.20-4.23(t,2h),3.76-3.79(t,4h),2.86-2.89(t,2h),2.62-2.64(t,4h),1.39(s,9h)。

lc-ms(esi):505.3(m+h)⁺。

實(shí)施例17

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物17)的制備

化合物17

與實(shí)施例7的制備方法相同，除了用1-(2-氯-乙基)-哌啶鹽酸鹽(潤捷)替代步驟1中的1-氯己烷，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.59(s,1h),9.07(s,1h),8.43(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.57-7.59(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.29-7.30(d,1h),6.94-6.96(dd,1h),6.52(s,1h),4.11-4.14(t,2h),2.67-2.70(t,2h),2.45(m,4h),1.48-1.54(m,4h),1.38-1.41(m,2h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):503.3(m+h)⁺。

實(shí)施例18

1-{4-[5-(2-氮雜環(huán)庚烷-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物18)的制備

化合物18

與實(shí)施例7的制備方法相同，除了用2-(環(huán)己亞氨基)乙基氯鹽酸鹽(潤捷)替代步驟1中的1-氯己烷，得到1-{4-[5-(2-氮雜環(huán)庚烷-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.62(s,1h),9.13(s,1h),8.43(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.57-7.59(d,2h),7.45-7.48(d,1h),7.30(d,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.52(s,1h),4.11-4.14(t,2h),2.95(m,2h),2.77(m,4h),1.62(m,4h),1.55(m,4h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):517.3(m+h)⁺。

實(shí)施例19

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-{5-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲(化合物19)的制備

化合物19

與實(shí)施例7的制備方法相同，除了用1-(3-氯丙基)-4-甲基哌嗪二鹽酸鹽(tci)替代步驟1中的1-氯己烷，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-{5-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.08(s,1h),8.43(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.57-7.59(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.27-7.28(d,1h),6.93-6.96(dd,1h),6.53(s,1h),4.04-4.07(t,2h),2.43-2.46(t,2h),2.35(m,8h),2.16(s,3h),1.87-1.90(m,2h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):532.3(m+h)⁺。

實(shí)施例20

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物20)的制備

化合物20

與實(shí)施例7的制備方法相同，除了用二甲氨基氯乙烷鹽酸鹽(潤捷)代替步驟1中的1-氯己烷，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[5-(2-二甲基氨基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(cdcl3-d,400mhz)δ:9.56(s,1h),8.89(s,1h),8.04(s,1h),7.71-7.73(d,2h),7.41-7.43(d,2h),7.34-7.36(m,2h),6.99-7.02(dd,1h),6.11(s,1h),4.20-4.22(t,2h),2.89-2.92(t,2h),2.47(s,6h),1.37(s,9h)。

lc-ms(esi):463.2(m+h)⁺。

實(shí)施例21

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物21)的制備

化合物21

步驟1：4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例4的步驟1～3相同，除了用2-硝基-4-三氟甲氧基苯胺代替步驟1中的2-硝基-4-甲氧基苯胺，得到4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.62(s,1h),9.10(s,1h),8.66(s,1h,),7.79-7.80(d,1h),7.70-7.72(d,2h),7.61-7.64(m,3h),7.32-7.35(dd,1h),6.53(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):esi460.0(m+h)⁺。

實(shí)施例22

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物22)的制備

化合物22

步驟1：4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例4的步驟1～3相同，除了用2-硝基-4-氟苯胺代替步驟1中的2-硝基-4-甲氧基苯胺，得到4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.61(s,1h),9.10(s,1h),8.57(s,1h),7.68-7.71(d,2h),7.56-7.62(m,4h),7.20-7.23(m,1h),6.52(s,1h),1.28(s,9h)。

lc-ms(esi):394.1(m+h)⁺。

實(shí)施例23

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物23)的制備

化合物23

步驟1：4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例4的步驟1～3相同，除了用2-硝基-4-三氟甲基苯胺代替步驟1中的2-硝基-4-甲氧基苯胺，得到4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.62(s,1h),9.12(s,1h),8.73(s,1h),8.16(d,1h),7.75-7.77(d,1h),7.71-7.73(d,2h),7.63-7.66(m,3h),6.53(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):444.1(m+h)⁺。

實(shí)施例24

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物24)的制備

化合物24

步驟1：4-(5-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例4的步驟1～3相同，除了用2-硝基-4-甲基苯胺代替步驟1中的2-硝基-4-甲氧基苯胺，得到4-(5-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.07(s,1h),8.45(s,1h),7.68-7.70(d,2h),7.58-7.60(d,2h),7.56(m,1h),7.46-7.48(d,1h),7.14-7.17(dd,1h),6.53(s,1h),2.45(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):390.1(m+h)⁺。

實(shí)施例25

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物25)的制備

化合物25

步驟1：(5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺的制備

在氮?dú)夥障拢瑢?-硝基-5-甲氧基苯胺(1.5g，8.92mmol)、對溴硝基苯(3.6g，17mmol)、xphos(425mg)、pd2(dba)3(408mg)、叔丁醇鈉(1.71g,17.8mmol)溶解于30ml甲苯中，將混合物加熱至90℃，反應(yīng)3小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻到室溫后，加入100ml二氯甲烷，室溫?cái)嚢?分鐘，過濾，濾液減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得1.7g紅黑色固體狀的(5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺。

步驟2：(5-甲氧基-2-氨基-苯基)-(4-氨基-苯基)-胺的制備

將步驟1中得到的(5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺(1.7g，5.88mmol)、還原鐵粉(2.63g，47.0mmol)、氯化銨(3.15g，58.8mmol)于乙醇(50ml)/水(12.5ml)中加熱至90℃，反應(yīng)1h。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并緩 慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(150ml)，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品1.3g。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟3：4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

將步驟2中得到的(5-甲氧基-2-氨基-苯基)-(4-氨基-苯基)-胺(1.3g，5.67mmol)溶于50ml鹽酸中(4mol/l)，于室溫加入1.5ml甲酸，將混合物加熱至120℃，反應(yīng)1h。然后，將反應(yīng)液在冰浴下用氨水調(diào)節(jié)至ph>9，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到1.0g黑黃色固體狀的4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟4：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.61(s,1h),9.07(s,1h),8.35(s,1h),7.69-7.71(d,2h),7.63-7.66(d,1h),7.59-7.62(d,2h),7.01-7.02(d,1h),6.90-6.93(dd,1h),6.53(s,1h),3.79(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):406.1(m+h)⁺。

實(shí)施例26

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物26)的制備

化合物26

步驟1：(5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺的制備

在氮?dú)夥障拢瑢?-硝基-5-甲氧基苯胺(1.5g，8.92mmol)、對溴硝基苯(3.6g，17mmol)、xphos(425mg)、pd2(dba)3(408mg)、叔丁醇鈉(1.71g,17.8mmol)溶解于30ml甲苯中，將混合物加熱至90℃，反應(yīng)3小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻到室溫后，加入100ml二氯甲烷，室溫?cái)嚢?分鐘，過濾，濾液減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得1.7g紅黑色固體狀的(5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺。

步驟2：(5-甲氧基-2-氨基-苯基)-(4-氨基-苯基)-胺的制備

將步驟1中所得產(chǎn)物(5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺(1.7g，5.88mmol)、還原鐵粉(2.63g，47.0mmol)、氯化銨(3.15g，58.8mmol)于乙醇(50ml)/水(12.5ml)中加熱至90℃，反應(yīng)1h。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(150ml)，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品1.3g。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟3：4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

將步驟2中所得產(chǎn)物(5-甲氧基-2-氨基-苯基)-(4-氨基-苯基)-胺(1.3g，5.67mmol)溶于50ml鹽酸中(4mol/l)，于室溫加入1.5ml甲酸，將混合物加熱至120℃，反應(yīng)1h。然后，將反應(yīng)液在冰浴下用氨水調(diào)節(jié)至ph>9，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到1.0g黑黃色固體狀的4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟4：3-(4-氨基-苯基)-3h-苯并咪唑-5-醇的制備

于15ml40％氫溴酸中，將步驟3中所得產(chǎn)物4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(600mg，3.66mmol)加熱至120℃，反應(yīng)6h。然后，將反應(yīng)液冷卻至室溫，有灰白固體析出，過濾，將所得固體溶解于70ml水中。過濾，取濾液氨水調(diào)節(jié)至約ph＝7，過程中有白色固體析出。過濾，固體水洗，真空干燥，得485mg灰白色固體狀的3-(4-氨基-苯基)-3h-苯并咪唑-5-醇。

步驟5：4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺的制備

將步驟4中所得產(chǎn)物3-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇(300mg，1.33mmol)、2-氯乙基甲基醚(372.0mg，2.0mmol)、氫氧化鈉(160mg，4mmol)于20mldmf中加熱至90℃，反應(yīng)2h。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，倒入水中(80ml)，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品360mg。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟6：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲的制備

將步驟5得到的4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺(100mg，0.295mmol)、(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯(115.3mg，0.443mmol)和三乙胺(90mg，0.888mmol)溶解于10mlthf中，回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得60mg白色固體狀的1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.07(s,1h),8.36(s,1h),7.68-7.70(d,2h,),7.63-7.65(d,1h),7.59-7.61(d,2h),7.03-7.04(d,1h),6.91-6.94(dd,1h),6.53(s,1h),4.11-4.13(m,2h),3.65-3.68(m,2h),3.31(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):esi450.2(m+h)⁺。

實(shí)施例27

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物27)的制備

化合物27

步驟1：(5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺的制備

在氮?dú)夥障?，?-硝基-5-甲氧基苯胺(1.5g，8.92mmol，達(dá)瑞)、對溴硝基苯(3.6g，17mmol)、xphos(425mg)、pd2(dba)3(408mg)、叔丁醇鈉(1.71g,17.8mmol)溶解于30ml甲苯中，將混合物加熱至90℃，反應(yīng)3小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻到室溫后，加入100ml二氯甲烷，室溫?cái)嚢?分鐘，過濾，濾液減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得1.7g紅黑色固體狀的(5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺。

步驟2：(5-甲氧基-2-氨基-苯基)-(4-氨基-苯基)-胺的制備

將步驟1中所得產(chǎn)物(5-甲氧基-2-硝基-苯基)-(4-硝基-苯基)-胺(1.7g，5.88mmol)、還原鐵粉(2.63g，47.0mmol)、氯化銨(3.15g，58.8mmol)于乙醇(50ml)/水(12.5ml)中加熱至90℃，反應(yīng)1h。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(150ml)，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品1.3g。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟3：4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

將步驟2中所得產(chǎn)物(5-甲氧基-2-氨基-苯基)-(4-氨基-苯基)-胺(1.3g，5.67mmol)溶于50ml鹽酸中(4mol/l)，于室溫加入1.5ml甲酸，將混合物加熱至120℃，反應(yīng)1h。然后，將反應(yīng)液在冰浴下用氨水調(diào)節(jié)至ph>9，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到1.0g黑黃色固體狀的4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟4：3-(4-氨基-苯基)-3h-苯并咪唑-5-醇的制備

于15ml40％氫溴酸中，將步驟3中所得產(chǎn)物4-(6-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(600mg，3.66mmol)加熱至120℃，反應(yīng)6h。然后，將反應(yīng)液冷卻至室溫，有灰白固體析出，過濾，將所得固體溶解于70ml水中。過濾，取濾液用氨水調(diào)節(jié)至約ph＝7，過程中有白色固體析出。過濾，固體水洗，真空干燥，得485mg灰白色固體狀的3-(4-氨基-苯基)-3h-苯并咪唑-5-醇。

步驟5：4-[6-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺的制備

將步驟4中所得產(chǎn)物3-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇(300mg，1.33mmol)、4-(2-氯-乙基)-嗎啉鹽酸鹽(372.0mg，2.0mmol)、氫氧化鈉(160mg，4mmol)于20mldmf中加熱至90℃，反應(yīng)2h。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，倒入水中(80ml)，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品360mg。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟6：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲的制備

將步驟5所得產(chǎn)物4-[6-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺(100mg，0.295mmol)、(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯(115.3mg，0.443mmol)和三乙胺(90mg，0.888mmol)溶解于10mlthf中，回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得60mg白色固體狀的1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(cdcl3-d,400mhz)δ:9.64(s,1h),8.04(s,1h),8.00(s,1h,),7.74-7.79(m,3h),7.45-7.49(d,2h),6.97-7.01(m,2h),5.93(s,1h),4.12-4.15(t,2h),3.74-3.77(t,4h),2.83-2.86(t,2h),2.60-2.62(t,4h),1.39(s,9h)。

lc-ms(esi):505.3(m+h)⁺。

實(shí)施例28

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-{6-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲(化合物28)的制備

化合物28

步驟1：n¹-(2-二甲基氨基-乙基)-n¹-甲基-4-硝基苯-1,3-二胺的制備

將5-氟-2-硝基苯胺(2.5g，0.016mol，tci)、n,n,n'-三甲基乙二胺(2.45g，0.024mmol)、無水碳酸鉀(6.8g，0.048mol)于50mldmf中加熱至90℃，反應(yīng)3小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并倒入水中，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得黃色固體。將所得固體用甲基叔丁基醚打漿，得2.66g黃色固體。

步驟2：n¹-(2-二甲基氨基-乙基)-n¹-甲基-4-硝基-n³-(4-硝基-苯基)-苯-1,3-二胺的制備

氮?dú)夥障拢瑢⒉襟E1中所得產(chǎn)物(2.66g，0.011mmol)、對溴硝基苯(4.70g，0.023mmol)、xphos(530mg)、pd2(dba)3(510mg)、叔丁醇鈉(2.2g,0.023mmol)溶解于80ml甲苯中，于90℃攪拌反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并加入100ml二氯甲烷，于室溫?cái)嚢?分鐘，過濾，濾液減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得1.3g紅黑色固體。

步驟3：n²-(4-氨基-苯基)-n⁴-(2-二甲基氨基-乙基)-n⁴-甲基-苯基-1,2,4-三胺的制備

將步驟2中所得產(chǎn)物(1.3g，3.62mmol)、還原鐵粉(1.01g，18.1mmol)、氯化銨(1.55g，29.0mmol)于乙醇(40ml)/水(10ml)中加熱至90℃，反應(yīng)1h。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(150ml)，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮得粗品1.1g。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟4：n-[3-(4-氨基-苯基)-3h-苯并咪唑-5-基]-n,n,n'-三甲基乙烷-1,2-二胺的制備

將步驟3中所得產(chǎn)物(1.1g，4.37mmol)溶解于40ml鹽酸中(4mol/l)，于室溫加入1.1ml甲酸，將混合物加熱至120℃，反應(yīng)1h。將反應(yīng)液在冰浴下用氨水調(diào)節(jié)至ph>9，用乙酸乙酯萃取(60ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得500mg產(chǎn)品。

步驟5：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-{6-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲的制備。

將步驟4得到的n-[3-(4-氨基-苯基)-3h-苯并咪唑-5-基]-n,n,n'-三甲基乙烷-1,2-二胺(100mg，0.323mmol)、異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯(168mg，0.647mmol)和三乙胺(100mg，0.99mmol)溶解于thf中，并回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到白色固體32mg。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.07(s,1h),8.18(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.56-7.58(d,2h),7.53-7.55(d,1h),6.80-6.82(dd,1h),6.67-6.68(d,1h),6.52(s,1h),3.42(m,2h),2.90(s,3h),2.37-2.40(t,2h),2.16(s,6h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):476.2(m+h)⁺。

實(shí)施例29

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物29)的制備

化合物29

步驟1：5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-硝基-苯胺的制備

將5-氟-2-硝基苯胺(2.5g，0.016mol)、n-甲基哌嗪(2.4g，0.024mmol，達(dá)瑞)、無水碳酸鉀(6.8g，0.048mol)于50mldmf中加熱至90℃，反應(yīng)3小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并倒入水中，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得黃色固體。將所得固體用甲基叔丁基醚打漿，得3g黃色固體狀的5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-硝基-苯胺。

步驟2：[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-硝基-苯基]-(4-硝基-苯基)-胺的制備

氮?dú)夥障拢瑢⒉襟E1中得到的5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-硝基-苯胺(2.5g，0.011mmol)、對溴硝基苯(4.28g，0.021mmol)、xphos(480mg)、pd2(dba)3(460mg)、叔丁醇鈉(2g,0.021mmol)溶解于80ml甲苯中，于90℃攪拌反應(yīng)過夜。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并加入100ml二氯甲烷，于室溫?cái)嚢?分鐘，過濾，濾液減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得1.8g紅黑色固體狀的[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-硝基-苯基]-(4-硝基-苯基)-胺。

步驟3：n²-(4-氨基-苯基)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯-1,2-二胺的制備

將步驟2中所得產(chǎn)物[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-硝基-苯基]-(4-硝基-苯基)-胺(1.8g，5.04mmol)、還原鐵粉(2.26g，40.3mmol)、氯化銨(2.70g，50.4mmol)于乙醇(40ml)/水(10ml)中加熱至90℃，反應(yīng)1h。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(150ml)，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮得粗品1.3g。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟4：4-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺的制備

將步驟3中所得產(chǎn)物n2-(4-氨基-苯基)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯-1,2-二胺(1.3g，4.37mmol)溶解于50ml鹽酸中(4mol/l)，于室溫加入1.5ml甲酸，將混合物加熱至120℃，反應(yīng)1h。將反應(yīng)液在冰浴下用氨水調(diào)節(jié)至ph>9，用乙酸乙酯萃取(60ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到600mg4-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺。

步驟5：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲的制備

將步驟4得到的4-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺(100mg，0.326mmol)、異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯(127mg，0.490mmol)和三乙胺(100mg，0.99mmol)溶解于thf中，并回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到白色固體狀的1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.61(s,1h),9.08(s,1h),8.27(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.56-7.60(m,3h),7.03-7.05(dd,1h),6.91-6.92(d,1h),6.52(s,1h),3.13(m,4h),2.51(m,4h),2.25(s,3h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):474.2(m+h)⁺。

實(shí)施例30

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[7-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物30)的制備

化合物30

步驟1：3-(4-氨基-苯基)-3h-苯并咪唑-4-醇的制備

與實(shí)施例4中的步驟1-4相同，除了用2-氨基-3-硝基苯酚代替步驟1中的2-硝基-4-甲氧基苯胺，得到3-(4-氨基-苯基)-3h-苯并咪唑-4-醇。

步驟2：4-[7-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺的制備

與實(shí)施例7的步驟1相同，除了用3-(4-氨基-苯基)-3h-苯并咪唑-4-醇代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，并且用n-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽代替1-氯己烷，得到4-[7-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺。

步驟3：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[7-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-[7-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，得到1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-{4-[7-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.57(s,1h),9.04(s,1h),8.22(s,1h),7.58-7.60(d,2h),7.44-7.46(d,2h),7.32-7.34(d,1h),7.15-7.19(t,1h),6.84-6.86(d,1h),6.53(s,1h),4.06-4.09(t,2h),3.43-3.45(t,4h),2.45-2.47(t,2h),2.17(m,4h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):505.2(m+h)⁺。

實(shí)施例31

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物31)的制備

化合物31

步驟1：4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用5,6-二甲氧基苯并咪唑(達(dá)瑞)代替步驟1中的苯并咪唑，得到4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.06(s,1h),8.28(s,1h,),7.68-7.70(d,2h),7.59-7.61(d,2h),7.31(s,1h),7.04(s,1h),6.52(s,1h),3.82(s,3h),3.79(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):436.1(m+h)⁺。

實(shí)施例32

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物32)的制備

化合物32

步驟1：4-(5,6-二甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用5,6-二甲基苯并咪唑代替步驟1中的苯并咪唑，得到4-(5,6-二甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5,6-二甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.08(s,1h),8.36(s,1h),7.67-7.70(d,2h),7.57-7.59(d,2h),753(s,1h),7.37(s,1h),6.53(s,1h),2.34(s,6h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):403.9(m+h)⁺。

實(shí)施例33

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物33)的制備

化合物33

步驟1：(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例4的步驟1-步驟3中的制備方法相同，除了用2-硝基-4-氟-6-甲基苯胺(tci)代替步驟1中的2-硝基-4-甲氧基苯胺，得到(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.64(s,1h),9.12(s,1h),8.30(s,1h),7.62-7.65(d,2h),7.49-7.51(d,2h),7.37-7.40(dd,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.53(s,1h),2.03(s,3h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):408.1(m+h)⁺。

實(shí)施例34

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(4-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物34)的制備

化合物34

步驟1：4-(4-氟-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例4的步驟1-步驟3中的制備方法相同，除了用2-硝基-3-氟苯胺代替步驟1中的2-硝基-4-甲氧基苯胺，得到4-(4-氟-苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(4-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(4-氟-苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(4-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.62(s,1h),9.08(s,1h),8.46(s,1h),7.55-7.65(m,5h),7.25-7.30(m,1h),7.12-7.17(m,1h),6.53(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):394.1(m+h)⁺。

實(shí)施例35

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(2-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物35)的制備

化合物35

步驟1：4-(2-甲基苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用2-甲基苯并咪唑代替步驟1中的苯并咪唑，得到4-(2-甲基苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(2-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(2-甲基苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(2-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.63(s,1h),9.12(s,1h),7.69-7.71(d,2h),7.61-7.63(m,1h),7.46-7.48(d,2h),7.16-7.23(m,2h),7.10-7.12(m,1h),6.53(s,1h),2.43(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):389.9(m+h)⁺。

實(shí)施例36

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(2-氯苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物36)的制備

化合物36

步驟1：4-(2-氯苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用2-氯苯并咪唑代替步驟1中的苯并咪唑，得到4-(2-氯苯并咪唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(2-氯苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(2-氯苯并咪唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(2-氯苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.64(s,1h),9.16(s,1h),7.70-7.73(m,3h),7.50-7.53(d,2h),7.29-7.34(m,2h),7.17-7.19(m,1h),6.54(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):410.1(m+h)⁺。

實(shí)施例37

1-(4-苯并咪唑-1-基-3-甲基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物37)的制備

化合物37

步驟1：4-苯并咪唑-1-基-3-甲基-苯胺的制備。

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用3-甲基-4-氟硝基苯(潤捷)代替步驟1中對氟硝基苯，得到4-苯并咪唑-1-基-3-甲基-苯胺。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-3-甲基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-苯并咪唑-1-基-3-甲基-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(4-苯并咪唑-1-基-3-甲基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.63(s,1h),9.05(s,1h),8.41(s,1h),7.80-7.83(m,1h),7.61-7.62(d,1h),7.48-7.51(dd,1h),7.35-7.38(d,1h),7.29-7.31(m,2h),7.15-7.17(m,1h),6.54(s,1h),2.00(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):390.2(m+h)⁺。

實(shí)施例38

1-(4-苯并咪唑-1-基-3-氯-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物38)的制備

化合物38

步驟1：4-苯并咪唑-1-基-3-氯-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用3-氯-4-氟硝基苯代替步驟1中的對氟硝基苯，得到4-苯并咪唑-1-基-3-氯-苯胺。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-3-氯-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-苯并咪唑-1-基-3-氯-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(4-苯并咪唑-1-基-3-氯-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.77(s,1h),9.29(s,1h),8.40(s,1h),8.03-8.04(d,1h),7.76-7.79(m,1h),7.60-7.63(d,1h),7.51-7.54(dd,1h),7.29-7.31(m,2h),7.20-7.21(m,1h),6.55(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):410.1(m+h)⁺。

實(shí)施例39

1-(4-苯并咪唑-1-基-3-氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物39)的制備

化合物39

步驟1：4-苯并咪唑-1-基-3-氟-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用3,4-二氟硝基苯代替步驟1中的對氟硝基苯，制得4-苯并咪唑-1-基-3-氟-苯胺。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-3-氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-苯并咪唑-1-基-3-氟-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(4-苯并咪唑-1-基-3-氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.74(s,1h),9.30(s,1h),8.45(s,1h),7.80-7.84(dd,1h),7.77-7.79(m,1h),7.63-7.67(t,1h),7.30-7.39(m,4h),6.54(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):esi393.9(m+h)⁺。

實(shí)施例40

1-(4-苯并咪唑-1-基-3,5-二氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物40)的制備

化合物40

步驟1：4-苯并咪唑-1-基-3,5-二氟-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用3,4,5-三氟硝基苯代替步驟1中的對氟硝基苯，得到4-苯并咪唑-1-基-3,5-二氟-苯胺。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-3,5-二氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-苯并咪唑-1-基-3,5-二氟-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(4-苯并咪唑-1-基-3,5-二氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.91(s,1h),9.46(s,1h),8.48(s,1h),7.78-7.81(m,1h),7.55-7.58(d,2h),7.31-7.35(m,3h),6.54(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):412.1(m+h)⁺。

實(shí)施例41

1-(4-苯并咪唑-1-基-2-氯-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物41)的制備

化合物41

步驟1：4-苯并咪唑-1-基-2-氯-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用2-氯-4-氟硝基苯代替步驟1中的對氟硝基苯，制得4-苯并咪唑-1-基-2-氯-苯胺。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-2-氯-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-苯并咪唑-1-基-2-氯-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(4-苯并咪唑-1-基-2-氯-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:10.32(s,1h),8.89(s,1h),8.56(s,1h),8.39-8.41(d,1h),7.90-7.91(d,1h),7.77-7.79(m,1h),7.67-7.69(dd,1h),7.61-7.63(m,1h),7.30-7.37(m,2h),6.49(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):410.1(m+h)⁺。

實(shí)施例42

1-(6-苯并咪唑-1-基-吡啶-3-基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物42)的制備

化合物42

步驟1：6-苯并咪唑-1-基-吡啶-3-基胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用2-氯-5-硝基吡啶代替步驟1中的對氟硝基苯，制得6-苯并咪唑-1-基-吡啶-3-基胺。

步驟2：1-(6-苯并咪唑-1-基-吡啶-3-基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用6-苯并咪唑-1-基-吡啶-3-基胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(6-苯并咪唑-1-基-吡啶-3-基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.80(s,1h),9.20(s,1h),8.88(s,1h),8.68-8.69(d,1h),8.19-8.22(m,2h),7.89-7.91(d,1h),7.76-7.78(m,1h),7.33-7.38(m,2h),6.53(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):377.1(m+h)⁺。

實(shí)施例43

1-(2-苯并咪唑-1-基-嘧啶-5-基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物43)的制備

化合物43

步驟1：1-(5-硝基-嘧啶-2-基)-1h-苯并咪唑的制備

于室溫，將2-氯-5-硝基嘧啶(118mg，1mmol)和苯并咪唑(175.5mg，1.1mmol)溶解于15ml乙腈中，加入無水碳酸鉀(414mg，3mmol)，室溫反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液倒入水中，用乙酸乙酯萃取(50×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮得黃黑色固體。無需純化，直接用于下一步。

步驟2：2-苯并咪唑-1-基-嘧啶-5-基胺的制備

與實(shí)施例1的步驟2相同，除了1-(5-硝基-嘧啶-2-基)-1h-苯并咪唑代替步驟2中的1-(4-硝基-苯基)-1h-苯并咪唑，得到2-苯并咪唑-1-基-嘧啶-5-基胺。

步驟3：1-(2-苯并咪唑-1-基-嘧啶-5-基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用2-苯并咪唑-1-基-嘧啶-5-基胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(2-苯并咪唑-1-基-嘧啶-5-基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:10.01(s,1h),9.25(s,1h),9.06(s,1h),9.05(s,2h),8.51-8.53(d,1h),7.78-7.80(d,1h),7.42-7.46(m,1h),7.35-7.39(m,1h),6.52(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):378.2(m+h)⁺。

實(shí)施例44

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吲哚-1-基-苯基)-脲(化合物44)的制備

化合物44

步驟1：4-吲哚-1-基-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用吲哚代替步驟1中的苯并咪唑，得到4-吲哚-1-基-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吲哚-1-基-苯基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-吲哚-1-基-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吲哚-1-基-苯基)-脲。

¹hnmr(cdcl3-d,400mhz)δ:9.46(s,1h),8.66(s,1h),7.69-7.71(m,3h),7.53-7.55(d,1h),7.48-7.51(d,2h),7.32-7.33(d,1h),7.16-7.26(m,2h),6.69-6.70(d,1h),5.97(s,1h),1.39(s,9h)。

lc-ms(esi):374.9(m+h)⁺。

實(shí)施例45

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吲唑-1-基-苯基)-脲(化合物45)的制備

化合物45

步驟1：4-吲唑-1-基-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用吲唑代替步驟1中的苯并咪唑，制得4-吲唑-1-基-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吲唑-1-基-苯基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-吲唑-1-基-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吲唑-1-基-苯基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.58(s,1h),9.03(s,1h),8.35(d,1h),7.88-7.90(d,1h),7.79-7.81(d,1h),766-7.71(m,4h),7.47-7.51(m,1h),7.25-7.28(m,1h),6.54(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):376.0(m+h)⁺。

實(shí)施例46

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-氟-吲唑-1-基)-苯基]-脲(化合物46)的制備

化合物46

步驟1：4-(6-氟-吲唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用6-氟吲唑代替步驟1中的苯并咪唑，制得4-(6-氟-吲唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-氟-吲唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(6-氟-吲唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-氟-吲唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.58(s,1h),9.04(s,1h),8.37(s,1h),7.92-7.95(m,1h),7.65-7.70(m,4h),7.57-7.59(m,1h),7.13-7.18(m,1h),6.53(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):394.1(m+h)⁺。

實(shí)施例47

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(7-氟-吲唑-1-基)-苯基]-脲(化合物47)的制備

化合物47

步驟1：4-(7-氟-吲唑-1-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用7-氟吲唑代替步驟1中的苯并咪唑，制得4-(7-氟-吲唑-1-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(7-氟-吲唑-1-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(7-氟-吲唑-1-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(7-氟-吲唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.63(s,1h),9.16-9.17(d,1h),9.08(s,1h),8.03-8.05(d,2h),7.67-7.69(d,2h),7.59-7.61(d,1h),7.05-7.13(m,2h),6.54(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):394.1(m+h)⁺。

實(shí)施例48

1-(4-苯并三唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物48)的制備

化合物48

步驟1：4-苯并三唑-1-基-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用苯并三氮唑(tci)代替步驟1中的苯并咪唑，制得4-苯并三唑-1-基-苯胺。

步驟2：1-(4-苯并三唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-苯并三唑-1-基-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(4-苯并三唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(cdcl3-d,400mhz)δ:9.65(s,1h),8.16-8.18(d,1h),8.12(s,1h),7.82-7.85(d,2h),7.73-7.79(m,3h),7.55-7.59(m,1h),7.44-7.48(m,1h),5.94(s,1h),1.40(s,9h)。

lc-ms(esi):376.9(m+h)⁺。

實(shí)施例49

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基-苯基)-脲(化合物49)的制備

化合物49

步驟1：4-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用1h-吡咯并[2,3-b]吡啶(潤捷)代替步驟1中的苯并咪唑，得到4-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基-苯基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基-苯基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.55(s,1h),8.98(s,1h),8.30-8.32(m,1h),8.07-8.09(m,1h),7.90-7.91(d,1h),7.80-7.82(d,2h),7.61-7.63(d,2h),7.18-7.22(m,1h),6.70-6.71(d,1h),6.53(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):376.2(m+h)⁺。

實(shí)施例50

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基-苯基)-脲(化合物50)的制備

化合物50

步驟1：[4-(3-硝基-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯的制備

2-氯-3-硝基吡啶(1g，6.3mmol，tci)、(4-氨基-苯基)-氨基甲酸叔丁基酯(達(dá)瑞)(1.6g，7.56mmol)、三乙胺(3.2g，31.5mmol)于dmso(30ml)中85℃反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液倒入水中(100mg)，用乙酸乙酯萃取(60ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得1.25g[4-(3-硝基-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯。

步驟2：[4-(3-氨基-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯的制備

將[4-(3-硝基-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯(1.25g，3.81mol)、還原鐵粉(1.1g，19.05mmol)、氯化銨(1.63g，30.48mmol)于乙醇(40ml)/水(10ml)中回流反應(yīng)2h。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品1g。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟3：4-(咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺的制備

于室溫，將[4-(3-氨基-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯(1g,3.33mmol)溶解于30ml鹽酸中(4mol/l)，加入1ml甲酸，將混合物加熱至120℃反應(yīng)1h。將反應(yīng)液在冰浴下用氨水調(diào)節(jié)至ph>9，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。得粗品340mg。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟4：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基-苯基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基-苯基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.58(s,1h),9.05(s,1h),8.85(s,1h),8.43-8.44(dd,1h),8.20-8.22(dd,1h),7.85-7.87(d,2h),7.67-7.69(d,2h),7.37-7.41(q,1h),6.53(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):377.2(m+h)⁺。

實(shí)施例51

1-[4-(6-溴-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲(化合物51)的制備

化合物51

步驟1：[4-(5-溴-3-硝基-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯的制備

將2-氯-3-硝基-5-溴吡啶(1g，4.23mmol，tci)、(4-氨基-苯基)-氨基甲酸叔丁基酯(1.06g，5.08mmol，達(dá)瑞)、三乙胺(2.14g，0.021mol)于dmso(30ml)中80℃反應(yīng)4h。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并倒入水中(100mg)，用乙酸乙酯萃取(60ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得700mg[4-(5-溴-3-硝基-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯。

步驟2：[4-(3-氨基-5-溴-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯的制備

將步驟1得到的[4-(5-溴-3-硝基-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯(700mg，1.72mol)、還原鐵粉(480mg，8.58mmol)、氯化銨(734mg，1.37mmol)于乙醇(30ml)/水(8ml)中回流反應(yīng)1h。將反應(yīng)液冷卻至室溫，并倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品550mg。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟3：4-(6-溴-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺的制備

于室溫，將步驟2得到的[4-(3-氨基-5-溴-吡啶-2-基氨基)-苯基]-氨基甲酸叔丁基酯(550mg，1.45mmol)溶解于20ml鹽酸中(4mol/l)，加入0.5ml甲酸，將混合物加熱至120℃反應(yīng)1h。將反應(yīng)液在冰浴下用氨水調(diào)節(jié)至ph>9，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到230mg黃色固體狀的4-(6-溴-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺。

步驟4：1-[4-(6-溴-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(6-溴-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-[4-(6-溴-咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-3-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.59(s,1h),9.06(s,1h),8.90(s,1h),8.51(s,1h),8.52(s,1h),7.80-7.82(d,2h),7.67-7.69(d,2h),6.54(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):455.0\457.0(m+h)⁺。

實(shí)施例52

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-三氟甲基-咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲(化合物52)的制備

化合物52

步驟1：4-(6-三氟甲基-咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例51的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用5-三氟甲基-3-硝基吡啶(達(dá)瑞)代替步驟1中的2-氯-3-硝基-5-溴吡啶，得到4-(6-三氟甲基-咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-三氟甲基-咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(6-三氟甲基-咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-三氟甲基-咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.61(s,1h),9.09(s,1h),9.05(s,1h),8.82(d,1h),8.67(d,1h),7.82-7.84(d,2h),7.69-7.71(d,2h),6.53(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):445.2(m+h)⁺。

實(shí)施例53

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氯咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲(化合物53)的制備

化合物53

步驟1：4-(5-氯咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例51的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用2,6-二氯-3-硝基吡啶(tci)代替步驟1中的2-氯-3-硝基-5-溴吡啶，得到4-(5-氯咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氯咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5-氯咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-氯咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.08(s,1h),8.85(s,1h),8.25-8.27(d,1h),7.75-7.77(d,2h),7.68-7.70(d,2h),7.44-7.46(d,1h),6.53(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):411.1(m+h)⁺。

實(shí)施例54

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲(化合物54)的制備

化合物54

步驟1：4-(5-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例51的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用6-甲基-3-硝基吡啶(達(dá)瑞)代替步驟1中的2-氯-3-硝基-5-溴吡啶，得到4-(5-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(5-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(5-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.59(s,1h),9.04(s,1h),8.71(s,1h),8.05-8.07(d,1h),7.81-7.83(d,2h),7.65-7.68(d,2h),7.23-7.25(d,1h),6.53(s,1h),2.58(s,3h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):391.2(m+h)⁺。

實(shí)施例55

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(7-甲基咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲(化合物55)的制備

化合物55

步驟1：4-(7-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例51的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用2-氯-3-硝基-4甲基吡啶(潤捷)代替步驟1中的2-氯-3-硝基-5-溴吡啶，得到4-(7-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(7-甲基咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(7-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(7-甲基咪唑[4,5-b]吡啶-3-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.58(s,1h),9.05(s,1h),8.78(s,1h),8.28-8.29(d,1h),7.84-7.86(d,2h),7.66-7.68(d,2h),7.21-7.22(m,1h),6.53(s,1h),2.63(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):391.1(m+h)⁺。

實(shí)施例56

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-咪唑并[4,5-b]吡啶-1-基-苯基)-脲(化合物56)的制備

化合物56

步驟1：4-咪唑并[4,5-b]吡啶-1-基-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用4-氮雜苯并咪唑(達(dá)瑞)代替步驟1中的苯并咪唑，得到4-咪唑并[4,5-b]吡啶-1-基-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-咪唑并[4,5-b]吡啶-1-基-苯基)-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-咪唑并[4,5-b]吡啶-1-基-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-(4-咪唑并[4,5-b]吡啶-1-基-苯基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.61(s,1h),9.09(s,1h),8.80(s,1h),8.51-8.52(dd,1h),8.03-8.05(dd,1h),7.70-7.72(d,2h),7.63-7.66(d,2h),7.35-7.38(q,1h),6.53(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):377.2(m+h)⁺。

實(shí)施例57

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基-嘌呤-7-基)-苯基]-脲(化合物57)的制備

化合物57

步驟1：4-(6-甲氧基-嘌呤-7-基)-苯胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用6-甲氧基嘌呤(泰坦)代替步驟1中的苯并咪唑，得到4-(6-甲氧基-嘌呤-7-基)-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基-嘌呤-7-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用4-(6-甲氧基-嘌呤-7-基)-苯胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基-嘌呤-7-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.60(s,1h),9.08(s,1h),8.76(s,1h),8.60(s,1h),7.79-7.81(d,2h),7.67-7.69(d,2h),6.53(s,1h),4.14(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):408.1(m+h)⁺。

實(shí)施例58

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-甲氧基嘌呤-9-基)-苯基]-脲(化合物58)的制備

化合物58

步驟1：與實(shí)施例57的步驟1-步驟2中的制備方法相同，為實(shí)施例57步驟1-步驟2中同一反應(yīng)另一產(chǎn)物。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.63(s,1h),9.07(s,1h),8.70(s,1h),8.63(s,1h),7.62-7.64(d,2h),7.56-7.58(d,2h),6.53(s,1h),3.98(s,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):407.9(m+h)⁺。

實(shí)施例59

1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-二甲基氨基-嘌呤-7-基)-苯基]-脲(化合物59)的制備

化合物59

步驟1：[7-(4-氨基-苯基)-7h-嘌呤-6-基]-二甲基-胺的制備

與實(shí)施例1的步驟1-步驟2中的制備方法相同，除了用6-二甲基氨基嘌呤(達(dá)瑞)代替步驟1中的苯并咪唑，得到[7-(4-氨基-苯基)-7h-嘌呤-6-基]-二甲基-胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-二甲基氨基-嘌呤-7-基)-苯基]-脲的制備

與實(shí)施例4的步驟5相同，除了用[7-(4-氨基-苯基)-7h-嘌呤-6-基]-二甲基-胺代替1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇，制得1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[4-(6-二甲基氨基-嘌呤-7-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.57(s,1h),9.05(s,1h),8.52(s,1h),8.27(s,1h),7.76-7.78(d,2h),7.64-7.66(d,2h),6.53(s,1h),3.49(s,6h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):421.2(m+h)⁺。

實(shí)施例60

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-噻唑-2-基-脲(化合物60)的制備

化合物60

步驟1：噻唑-2-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)的制備

與實(shí)施例1的步驟3相同，除了用2-氨基噻唑(tci)代替3-氨基異噁唑，得到噻唑-2-基-氨基甲酸苯基酯。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-噻唑-2-基-脲的制備

與實(shí)施例1的步驟4相同，除了用噻唑-2-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)代替異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-噻唑-2-基-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:10.65(s,1h),9.24(s,1h),8.52(s,1h),7.77-7.79(m,1h),7.73-7.75(d,2h),7.62-7.64(d,2h),7.57-7.60(m,1h),7.39-7.40(d,1h),7.29-7.34(m,2h),7.13-7.14(d,1h)。

lc-ms(esi):336.1(m+h)⁺。

實(shí)施例61

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(4-甲基-噻唑-2-基)-脲(化合物61)的制備

化合物61

步驟1：(4-甲基-噻唑-2-基)-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)的制備

與實(shí)施例1的步驟3相同，除了用2-氨基-4-甲基噻唑(tci)代替3-氨基異噁唑，得到(4-甲基-噻唑-2-基)-氨基甲酸苯基酯。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(4-甲基-噻唑-2-基)-脲的制備

與實(shí)施例1的步驟4相同，除了用(4-甲基-噻唑-2-基)-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)代替異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(4-甲基-噻唑-2-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:10.50(s,1h),9.27(s,1h),8.51(s,1h),7.76-7.79(m,1h),7.73-7.75(d,2h),7.61-7.63(d,2h),7.57-7.59(m,1h),7.29-7.35(m,2h),6.66(s,1h),2.24(s,3h)。

lc-ms(esi):350.1(m+h)⁺。

實(shí)施例62

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[1,3,4]噻二唑-2-基-脲(化合物62)的制備

化合物62

步驟1：[1,3,4]噻二唑-2-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)的制備

與實(shí)施例1的步驟3相同，除了用2-氨基噻二唑(泰坦)代替3-氨基異噁唑，制得[1,3,4]噻二唑-2-基-氨基甲酸苯基酯。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[1,3,4]噻二唑-2-基-脲的制備

與實(shí)施例1的步驟4相同，除了[1,3,4]噻二唑-2-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)代替異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[1,3,4]噻二唑-2-基-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:11.10(s,1h),9.36(s,1h),9.08(s,1h),8.53(s,1h),7.73-7.79(m,3h),7.58-7.65(m,3h),7.29-7.36(m,2h)。

lc-ms(esi):337.1(m+h)⁺。

實(shí)施例63

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-脲(化合物63)的制備

化合物63

步驟1：(5-叔丁基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)的制備

與實(shí)施例1的步驟3相同，除了用2-氨基-5-叔丁基噻二唑(達(dá)瑞)代替3-氨基異噁唑，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-脲。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-脲的制備

與實(shí)施例1的步驟4相同，除了(5-叔丁基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)代替異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:11.09(s,1h),9.35(s,1h),8.56(s,1h),7.80-7.82(m,1h),7.75-7.77(d,2h),7.61-7.64(d,2h),7.57-7.60(m,1h),7.30-7.36(m,2h),1.37(s,9h)。

lc-ms(esi):393.1(m+h)⁺。

實(shí)施例64

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-甲基-1h-吡唑-3-基)-脲(化合物64)的制備

化合物64

步驟1：(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-氨基甲酸苯基酯的制備

將4-苯并咪唑-1-基-苯胺(實(shí)施例1步驟2中合成)(10.0g，0.048mol)、吡啶(11.33g，0.143mol)溶解于100mlthf中；冰浴下緩慢滴加氯甲酸苯酯(11.23g，0.072mol)；滴畢，移走冰浴緩慢升至室溫反應(yīng)3小時(shí)。將反應(yīng)液倒入水中，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得棕黃色固體。將所得固體用甲基叔丁基醚/石油醚(1:1)打漿得14g黃色固體狀的(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-氨基甲酸苯基酯。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-甲基-1h-吡唑-3-基)-脲的制備

將步驟1中得到的(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-氨基甲酸苯基酯(100mg，0.304mmol)、三乙胺(92mg，0.912mmol)、3-氨基-5-甲基吡唑(50.7mg，0.365mmol，tci)溶解于10mlthf中，回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得40mg白色固體狀的1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-甲基-1h-吡唑-3-基)-脲；同時(shí)得到10mg化合物113(見實(shí)施例113)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:11.97(s,1h),9.42(s,1h),8.96(s,1h),8.49(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.67-7.70(d,2h),7.56-7.59(m,3h),7.28-7.35(m,2h),6.02(s,1h),2.20(s,3h)。

lc-ms(esi):333.1(m+h)⁺。

實(shí)施例65

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-苯基-1h-吡唑-3-基)-脲(化合物65)的制備

化合物65

與實(shí)施例64的制備方法相同，除了用3-氨基-5-苯基吡唑(達(dá)瑞)代替步驟2中的3-氨基-5-甲基吡唑，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-苯基-1h-吡唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.80(s,1h),9.27(s,1h),9.13(s,1h),8.51(s,1h),7.71-7.79(m,5h),7.58-7.61(m,3h),7.45-7.48(m,2h),7.29-7.38(m,3h),6.72(s,1h)。

lc-ms(esi):395.1(m+h)⁺。

實(shí)施例66

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-環(huán)丙基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物66)的制備

化合物66

與實(shí)施例64的制備方法相同，除了用3-環(huán)丙基-1h-吡唑-5-氨基(達(dá)瑞)代替步驟2中的3-氨基-5-甲基吡唑，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-環(huán)丙基-2h-吡唑-3-基)-脲。同時(shí)得到化合物114(見實(shí)施例114)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.37(s,1h),8.96(s,1h),8.50(s,1h),7.76-7.79(m,1h),7.67-7.70(d,2h),7.56-7.59(m,3h),7.30-7.34(m,2h),5.92(s,1h),1.85-1.89(m,1h),0.91-0.95(m,2h),0.66-0.70(m,2h)。

lc-ms(esi):359.2(m+h)⁺。

實(shí)施例67

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-三氟甲基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物67)的制備

化合物67

與實(shí)施例64的制備方法相同，除了用5-氨基-3-三氟甲基吡唑(達(dá)瑞)代替步驟2中的3-氨基-5-甲基吡唑，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-三氟甲基-2h-吡唑-3-基)-脲。同時(shí)得到化合物115(見實(shí)施例115)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:13.30(s,1h),9.33(s,1h),9.33(s,1h),8.50(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.70-7.72(d,2h),7.57-7.62(m,3h),7.28-7.36(m,2h),6.42(s,1h)。

lc-ms(esi):387.1(m+h)⁺。

實(shí)施例68

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物68)的制備

化合物68

步驟1：(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-氨基甲酸苯基酯的制備

將4-苯并咪唑-1-基-苯胺(實(shí)施例1步驟2中合成)(10.0g，0.048mol)、吡啶(11.33g，0.143mol)溶解于100mlthf中；冰浴下緩慢滴加氯甲酸苯酯(11.23g，0.072mol)；滴畢，移走冰浴緩升溫室溫反應(yīng)3小時(shí)。將反應(yīng)液倒入水中，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮得棕黃色固體。將所得固體用甲基叔丁基醚/石油醚(1:1)打漿，得14g黃色固體狀的(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-氨基甲酸苯基酯。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲的制備

將步驟1得到的(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-氨基甲酸苯基酯(100mg，0.304mmol)、三乙胺(92mg，0.912mmol)、3-叔丁基-吡唑-5-胺(50.7mg，0.365mmol)溶解于10mlthf中，回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得40mg白色固體狀的1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲。同時(shí)得到12mg化合物116(見實(shí)施例116)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.41(s,1h),9.00(s,1h),8.50(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.67-7.70(d,2h),7.57-7.59(m,3h),7.28-7.35(m,2h),6.03(s,1h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):375.2(m+h)⁺。

實(shí)施例69

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物69)的制備

化合物69

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯胺(實(shí)施例22步驟1中合成)代替步驟1中的4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。同時(shí)得到化合物125(見實(shí)施例125)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.43(s,1h),8.99(s,1h),8.56(s,1h),7.67-7.70(d,2h),7.55-7.60(m,4h),7.17-7.22(m,1h),6.03(s,1h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):393.1(m+h)⁺。

實(shí)施例70

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物70)的制備

化合物70

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(實(shí)施例23步驟1中合成)代替步驟1中的4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。同時(shí)得到化合物126(見實(shí)施例126)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.44(s,1h),9.00(s,1h),8.72(s,1h),8.15(d,1h),7.75-7.77(d,1h),7.70-7.72(d,2h),7.64-7.67(dd,1h),7.60-7.63(d,2h),6.03(s,1h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):443.1(m+h)⁺。

實(shí)施例71

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物71)的制備

化合物71

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(實(shí)施例4步驟3中合成)代替步驟1中的4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.43(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.46-7.48(d,1h),7.29-7.30(d,1h),6.94-6.96(dd,1h),6.02(s,1h),3.82(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):405.1(m+h)⁺。

實(shí)施例72

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物72)的制備

化合物72

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(實(shí)施例6步驟1中合成)代替步驟1中的中間體4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-乙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.40(s,1h),8.98(s,1h),8.42(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.44-7.47(d,1h),7.27(d,1h),6.92-6.95(dd,1h),6.02(s,1h),4.06-4.11(q,2h),1.34-1.38(t,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):419.2(m+h)⁺。

實(shí)施例73

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物73)的制備

化合物73

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(實(shí)施例7步驟1中合成)代替步驟1中的4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。同時(shí)得到化合物117(見實(shí)施例117)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.42(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.44-7.46(d,1h),7.27-7.28(d,1h),6.92-6.95(dd,1h),6.02(s,1h),4.00-4.03(t,2h),1.70-1.76(m,2h),1.41-1.47(m,2h),1.30-1.35(m,4h),1.27(s,9h),0.87-0.91(t,3h)。

lc-ms(esi):475.2(m+h)⁺。

實(shí)施例74

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-異丙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物74)的制備

化合物74

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-(5-異丙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(實(shí)施例8中合成)代替步驟1中的4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-異丙氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.42(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.44-7.46(d,1h),7.27-7.28(d,1h),6.91-6.94(dd,1h),6.02(s,1h),4.61-4.67(m,1h),1.28-1.30(d,6h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):433.1(m+h)⁺。

實(shí)施例75

1-[4-(5-仲丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物75)的制備

化合物75

步驟1：4-(5-仲丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺的制備

于室溫，將1-(4-氨基-苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇(實(shí)施例4步驟4制備)(300mg，1.22mol)溶解于dmf(20ml)中，加入氫氧化鈉(98mg，2.44mmol)，室溫?cái)嚢?0分鐘，過程中有固體析出。于室溫，加入氯代仲丁烷(tci)(170g，1.83mmol)，將混合物加熱至90℃，反應(yīng)1.5小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，緩慢倒入100ml水中，用乙酸乙酯萃取(60ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。得350mg黃黑色油狀物，直接用于下一步反應(yīng)，無需純化。

步驟2：[4-(5-仲丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-氨基甲酸苯基酯的制備

將步驟1得到的4-(5-仲丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(350g，1.24mmol)、吡啶(294mg，3.72mmol)溶解于thf(100ml)中，冰浴下滴加氯甲酸苯酯(291g，1.86mol)，過程中有固體析出。滴畢，升至室溫反應(yīng)1.5h后，加水100ml淬滅，用乙酸乙酯萃取(60ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得350mg[4-(5-仲丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-氨基甲酸苯基酯。

步驟3：1-[4-(5-仲丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例68的步驟2相同，除了用[4-(5-仲丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-氨基甲酸苯基酯代替中的(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-氨基甲酸苯基酯，制得1-[4-(5-仲丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.42(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.44-7.46(d,1h),7.27-7.28(d,1h),6.92-6.95(dd,1h),6.02(s,1h),4.38-4.45(m,1h),1.54-1.74(m,2h),1.27(s,9h),1.25-1.26(d,3h),0.94-0.97(t,3h)。

lc-ms(esi):447.2(m+h)⁺。

實(shí)施例76

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-異丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物76)的制備

化合物76

與實(shí)施例75的制備方法相同，除了用1-氯-2-甲基丙烷(tci)代替步驟1中的氯代仲丁烷，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-異丁氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.42(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.26-7.27(d,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.02(s,1h),3.80-3.81(d,2h),2.02-2.08(m,1h),1.27(s,9h),1.00-1.02(d,6h)。

lc-ms(esi):447.3(m+h)⁺。

實(shí)施例77

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物77)的制備

化合物77

步驟1：4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺的制備

于室溫，將1-(4-氨基苯基)-1h-苯并咪唑-5-醇(實(shí)施例4步驟4制備)(18.0g，0.08mol)溶解于dmf(200ml)中，加入氫氧化鈉(9.6g，0.24mol)，室溫?cái)嚢?0分鐘，過程中有固體析出。于室溫，加入氯乙基甲基醚(11.34g，0.12mol)，將混合物加熱至90℃，反應(yīng)1.5小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫，緩慢倒入600ml水中，有固體析出，室溫?cái)嚢?0分鐘。過濾，所得固體水洗，真空干燥，得20.5g粉紅固體狀的4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺。

步驟2：{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-氨基甲酸苯基酯的制備

將步驟1得到的4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺(10.0g，0.035mol)、吡啶(8.37g，0.106mol)溶解于thf(100ml)中，冰浴下滴加氯甲酸苯酯(6.63g，0.042mol)，過程中有固體析出。滴畢，升至室溫反應(yīng)1.5h后，加水200ml淬滅，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得15g{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-氨基甲酸苯基酯。lc-ms(esi):404.1(m+h)⁺。

步驟3：1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲

與實(shí)施例68的步驟2相同，除了用{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-氨基甲酸苯基酯代替步驟2中的(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-氨基甲酸苯基酯，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。同時(shí)得到化合物120(見實(shí)施例120)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.43(s,1h),7.65-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.45-7.48(d,1h),7.30-7.31(d,1h),6.95-6.98(dd,1h),6.02(s,1h),4.14-4.16(m,2h),3.68-3.71(m,2h),3.33(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):449.2(m+h)⁺。

實(shí)施例78

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-乙氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物78)的制備

化合物78

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用2-乙氧基氯乙烷代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-乙氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.40(s,1h),8.98(s,1h),8.43(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.30(d,1h),6.95-6.98(dd,1h),6.02(s,1h),4.13-4.16(m,2h),3.72-3.74(m,2h),3.50-3.55(q,2h),1.27(s,9h),1.13-1.17(t,3h)。

lc-ms(esi):463.2(m+h)⁺。

實(shí)施例79

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-羥基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物79)的制備

化合物79

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用溴乙醇代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-羥基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。同時(shí)得到化合物121(見實(shí)施例121)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.42(s,1h),8.99(s,1h),8.43(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.58(d,2h),7.46-7.48(d,1h),7.28-7.29(d,1h),6.95-6.98(dd,1h),6.02(s,1h),4.90(m,1h),4.03-4.06(t,2h),3.75-3.76(m,2h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):435.2(m+h)⁺。

實(shí)施例80

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-羥基-3-甲氧基-丙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物80)的制備

化合物80

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用1-氯-3-甲氧基-2-丙醇(達(dá)瑞)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-羥基-3-甲氧基-丙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.44(s,1h),9.00(s,1h),8.46(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.55-7.58(d,2h),7.46-7.48(d,1h),7.28(d,1h),6.96-6.99(dd,1h),6.03(s,1h),5.14(s,1h),3.93-4.02(m,3h),3.42-3.48(m,2h),3.30(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):479.1(m+h)⁺。

實(shí)施例81

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-二甲氨基-丙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物81)的制備

化合物81

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了n,n-二甲氨基氯丙烷鹽酸鹽(泰坦)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-二甲氨基-丙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.04(s,1h),9.59(s,1h),9.09(s,1h),8.42(s,1h),7.66-7.69(d,2h),7.54-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.27(d,1h),6.94-6.96(dd, 1h),6.04(s,1h),4.04-4.07(t,2h),2.41-2.45(t,2h),2.19(s,6h),1.87-1.90(m,2h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):476.2(m+h)⁺。

實(shí)施例82

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-二丁基氨基丙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物82)的制備

化合物82

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用n-(3-氯丙基)二丁基胺(泰坦)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-二丁基氨基丙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.52(s,1h),9.02(s,1h),8.44(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.54-7.56(d,2h),7.47-7.50(d,1h),7.32(d,1h),6.95-6.97(dd,1h),6.03(s,1h),4.11-4.14(t,2h),3.12(m,2h),2.95(m,4h),2.10(m,2h),1.58(m,4h),1.29-1.35(m,4h),1.27(s,9h),0.88-1.92(t,6h)。

lc-ms(esi):560.2(m+h)⁺。

實(shí)施例83

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-氰基甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物83)的制備

化合物83

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用氯乙腈代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-氰基甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.51(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.57-7.59(d,2h),7.53-7.55(d,1h),7.51-7.52(d,1h),7.06-7.08(dd,1h),6.02(s,1h),5.24(s,2h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):430.2(m+h)⁺。

實(shí)施例84

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物84)的制備

化合物84

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-(5-三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(實(shí)施例21中合成)代替步驟1中的4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5三氟甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.42(s,1h),9.01(s,1h),8.65(s,1h),7.79(d,1h),7.69-7.71(d,2h),7.64-7.67(d,1h),7.59-7.61(d,2h),7.32-7.35(dd,1h),6.03(s,1h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):459.1(m+h)⁺。

實(shí)施例85

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-甲基-氧雜環(huán)丁烷-3-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物85)的制備

化合物85

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用3-氯甲基-3-甲基氧雜環(huán)丁烷(達(dá)瑞)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-甲基-氧雜環(huán)丁烷-3-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.44(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.55-7.58(d,2h),7.47-7.49(d,1h),7.35-7.36(d,1h),6.98-7.01(dd,1h),6.02(s,1h),4.52-4.54(d,2h),4.32-4.34(d,2h),4.11(s,2h),1.40(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):475.2(m+h)⁺。

實(shí)施例86

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(四氫-呋喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物86)的制備

化合物86

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用2-氯甲基四氫呋喃(達(dá)瑞)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(四氫-呋喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。同時(shí)合成化合物123(見實(shí)施例123)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.43(s,1h),7.66-7.69(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.29-7.30(d,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.02(s,1h),4.16-4.22(m,1h),3.95-4.04(m,2h),3.78-3.84(m,1h),3.67-3.72(m,1h),1.98-2.07(m,1h),1.81-1.95(m,2h),1.66-1.75(m,1h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):475.2(m+h)⁺。

實(shí)施例87

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(四氫-吡喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物87)的制備

化合物87

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用2-(氯甲基)四氫吡喃(達(dá)瑞)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(四氫-吡喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。同時(shí)得到化合物122(見實(shí)施例122)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.42(s,1h),8.99(s,1h),8.42(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.27-7.28(d,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.02(s,1h),3.89-3.97(m,3h),3.63-3.69(m,1h),3.47-3.41(m,1h),1.82-1.84(m,1h),1.67-1.70(m,1h),1.46-1.54(m,4h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):489.2(m+h)⁺。

實(shí)施例88

(1-{4-[3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基氧基)-乙酸乙酯(化合物88)的制備

化合物88

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用氯乙酸乙酯(達(dá)瑞)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到(1-{4-[3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基氧基)-乙酸乙酯。同時(shí)得到化合物124(見實(shí)施例124)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.44(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.47-7.49(d,1h),7.26-7.27(d,1h),6.98-7.01(dd,1h),6.02(s,1h),4.84(s,2h),4.16-4.21(q,2h),1.27(s,9h),1.21-1.25(t,3h)。

lc-ms(esi):477.2(m+h)⁺。

實(shí)施例89

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物89)的制備

化合物89

步驟1：{4-[5-(3-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-氨基甲酸苯基酯的制備

將4-[5-(3-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺(實(shí)施例16步驟1中合成)(300mg，0.887mmol)、吡啶(210mg，2.66mmol)溶解于thf(20ml)中，冰浴下滴加氯甲酸苯酯(277.6mg，1.74mmol)，過程中有固體析出。滴畢，升至室溫反應(yīng)2h后，加水50ml淬滅，用乙酸乙酯萃取(30ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得280mg{4-[5-(3-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-氨基甲酸苯基酯。lc-ms(esi):459.2(m+h)⁺。

步驟2：1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲

與實(shí)施例68的步驟2中制備方法相同，除了用4-[5-(3-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-氨基甲酸苯基酯代替(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-氨基甲酸苯基酯，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。同時(shí)得到化合物119(見實(shí)施例119)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.43(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.31-7.32(d,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.02(s,1h),4.14-4.17(m,2h),3.60(m,4h),2.73(m,2h),2.51(m,4h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):504.1(m+h)⁺。

實(shí)施例90

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物90)的制備

化合物90

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用1-(2-氯乙基)哌啶鹽酸鹽代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.42(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.53-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.30(d,1h),6.94-6.96(dd,1h),6.02(s,1h),4.12-4.14(t,2h),2.70(m,2h),2.47(m,4h),1.49-1.54(m,4h),1.39-1.42(m,2h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):502.2(m+h)⁺。

實(shí)施例91

1-{4-[5-(2-氮雜環(huán)庚烷-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物91)的制備

化合物91

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用2-(環(huán)己亞胺基)乙基氯(潤捷)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-{4-[5-(2-氮雜環(huán)庚烷-1-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.44(s,1h),9.00(s,1h),8.43(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.30-7.31(d,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.02(s,1h),4.12-4.15(t,2h),2.97(m,2h),2.79(m,4h),1.63(m,4h),1.55(m,4h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):516.3(m+h)⁺。

實(shí)施例92

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-{5-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲(化合物92)的制備

化合物92

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用1-(3-氯丙基)-4-甲基哌嗪(潤捷)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-{5-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲。同時(shí)合成化合118(見實(shí)施例118)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.50(s,1h),9.03(s,1h),8.42(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.54-7.56(d,2h),7.44-7.46(d,1h),7.27(d,1h),6.92-6.95(dd,1h),6.03(s,1h),4.03-4.06(t,2h),2.25-2.46(m,10h),2.17(s,3h),1.85-1.92(m,2h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):531.3(m+h)⁺。

實(shí)施例93

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-氟-芐氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物93)的制備

化合物93

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用3-氟溴芐(達(dá)瑞)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(3-氟-芐氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.50(s,1h),9.02(s,1h),8.47(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.42-7.50(m,2h),7.31-7.38(m,3h),7.14-7.18(m,1h),7.05-7.07(m,1h),6.04(s,1h),5.22(s,2h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):499.2(m+h)⁺。

實(shí)施例94

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-{5-[4-(1-環(huán)己基-1h-四唑-5-基)-丁氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲(化合物94)的制備

化合物94

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用1-環(huán)己基-5-(4-氯丁基)-四氮唑(潤捷)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-{5-[4-(1-環(huán)己基-1h-四唑-5-基)-丁氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.41(s,1h),8.99(s,1h),8.42(s,1h),7.66-7.68(d,2h),7.55-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.30-7.31(d,1h),6.93-6.96(dd,1h),6.02(s,1h),4.38-4.45(m,1h),4.08-4.11(t,2h),2.99-3.02(t,2h),1.66-1.98(m,12h),1.39-1.48(m,2h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):597.3(m+h)⁺。

實(shí)施例95

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(4-嗎啉-4-基-[1,2,5]噻二唑-3-基氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物95)的制備

化合物95

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用3-氯-4-嗎啉基-1,2,5-噻二唑(潤捷)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(4-嗎啉-4-基-[1,2,5]噻二唑-3-基氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.43(s,1h),9.00(s,1h),8.58(s,1h),7.75-7.76(d,1h),7.69-7.71(d,2h),7.60-7.63(m,3h),7.29-7.32(dd,1h),6.03(s,1h),3.76-3.78(t,4h),3.55-3.57(t,4h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):560.1(m+h)⁺。

實(shí)施例96

4-(1-{4-[3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲基]-苯基}-1h苯并咪唑-5-基氧基)-吡啶-2-羧酸甲基胺(化合物96)的制備

化合物96

與實(shí)施例77的步驟1-步驟3的制備方法相同，除了用n-甲基-4-氯-2-吡啶甲酰胺(泰坦)代替步驟1中的2-氯乙基甲基醚，得到4-(1-{4-[3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲基]-苯基}-1h苯并咪唑-5-基氧基)-吡啶-2-羧酸甲酰胺。同時(shí)得到化合物127(見實(shí)施例127)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.44(s,1h),9.01(s,1h),8.77-8.80(m,1h),8.62(s,1h),8.51-8.52(d,1h),763-7.72(m,6h),7.39-7.40(d,1h),7.18-7.21(d,2h),6.03(s,1h),2.77-2.79(d,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):525.2(m+h)⁺。

實(shí)施例97

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物97)的制備

化合物97

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(實(shí)施例33步驟1中合成)代替步驟1中的4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5-氟-7-甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.42(s,1h),9.02(s,1h),8.27(s,1h),7.61-7.64(d,2h),7.45-7.48(d,2h),7.36-7.39(dd,1h),6.93-6.96(dd,1h),6.03(s,1h),2.04(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):407.1(m+h)⁺。

實(shí)施例98

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物98)的制備

化合物98

步驟1：4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺的制備

與實(shí)施例27的步驟1至步驟5的制備方法相同，除了用2-氯乙基甲基醚代替步驟5中的4-(2-氯-乙基)-嗎啉鹽酸鹽，得到4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺。

步驟2：1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺代替步驟1中的4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。同時(shí)得到化合物128(見實(shí)施例128)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.03(s,1h),9.40(s,1h),9.00(s,1h),8.35(s,1h),7.67-7.69(d,2h,),7.63-7.65(d,1h),7.56-7.59(d,2h),7.03-7.04(d,1h),6.91-6.94(dd,1h),6.02(s,1h),4.11-4.13(m,2h),3.65-3.68(m,2h),3.31(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):esi449.1(m+h)⁺。

實(shí)施例99

1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲(化合物99)的制備

化合物99

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯胺(實(shí)施例31步驟1中合成)代替步驟1中的4-苯并咪唑-1-基-苯胺，得到1-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-[4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-脲。同時(shí)得到化合129(見實(shí)施例129)。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:12.02(s,1h),9.40(s,1h),9.00(s,1h,),8.27(s,1h),7.67-7.69(d,2h),7.56-7.58(d,2h),7.31(s,1h),7.04(s,1h),6.02(s,1h),3.82(s,3h),3.79(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):esi435.1(m+h)⁺。

實(shí)施例100

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物100)的制備

化合物100

步驟1：(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)的制備

與實(shí)施例1的步驟3相同，除了用5-氨基-3-叔丁基-1-甲基吡唑(達(dá)瑞)代替步驟3中的3-氨基異噁唑，得到(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例1的步驟4相同，除了用(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)代替異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.17(s,1h),8.58(s,1h),8.51(s,1h),7.77-7.79(m,1h),7.69-7.72(d,2h),7.57-7.60(m,3h),7.29-7.36(m,2h),6.08(s,1h),3.63(s,3h),1.23(s,9h)。

lc-ms(esi):389.2(m+h)⁺。

實(shí)施例101

1-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物101)的制備

化合物101

步驟1：1-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲的制備

將4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺(實(shí)施例77步驟1中制得)(107mg，0.378mmol)、(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯(實(shí)施例100步驟1中制得)(156.0mg，0.571mmol)和三乙胺(115mg，1.14mmol)溶解于10mlthf中，回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得56mg白色固體的1-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.16(s,1h),8.57(s,1h),8.43(s,1h),7.67-7.69(d,2h,),7.56-7.58(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.29-7.30(d,1h),6.94-6.97(dd,1h),6.08(s,1h),4.14-4.16(t,2h),3.68-3.70(t,2h),3.62(s,3h),3.33(s,3h),1.22(s,9h)。

lc-ms:esi463.3(m+h)⁺。

實(shí)施例102

1-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲(化合物102)的制備

化合物102

步驟1：1-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲的制備

將4-[5-(2-嗎啉-4-基-甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯胺(實(shí)施例16步驟1中制得)(125mg，0.368mmol)、(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯(實(shí)施例100步驟1中制得)(152.0mg，0.555mmol)和三乙胺(112mg，1.11mmol)溶解于10mlthf中，回流反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得60mg白色固體狀的1-(5-叔丁基-2-甲基-2h-吡唑-3-基)-3-{4-[5-(2-嗎啉-4-基-甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.17(s,1h),8.57(s,1h),8.43(s,1h),7.67-7.70(d,2h,),7.55-7.57(d,2h),7.45-7.47(d,1h),7.30-7.31(d,1h),6.94-6.96(dd,1h),6.08(s,1h),4.13-4.16(t,2h),3.62(s,3h),3.58-3.60(t,4h),2.71-2.74(t,2h),2.49-2.51(m,4h),1.22(s,9h)。

lc-ms:esi518.2(m+h)⁺。

實(shí)施例103

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(2-羥基-乙基)-2h-吡唑-3-基]-脲(化合物103)的制備

化合物103

步驟1：2-(5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-基)-乙醇的制備

將2-肼基乙醇(6.69g，0.088mol，泰坦)、氰基頻吶酮(10g，0.08mol，達(dá)瑞)、濃鹽酸(0.2ml)于80ml乙醇中回流反應(yīng)5小時(shí)。反應(yīng)液減壓濃縮，將所得油狀物放置過夜，次日有固體析出。將所得固體用甲基叔丁基醚打漿，得12g黃白固體狀的2-(5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-基)-乙醇。

步驟2：5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-2h-吡唑-3-基胺的制備

氮?dú)夥障?，將步驟1得到的2-(5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-基)-乙醇(6.6g，0.0361mol)、tbdmscl(6.49g，0.0433mmol)、咪唑(6.13g，0.09mol)溶解于100mldmf中，室溫反應(yīng)過夜。次日，將反應(yīng)液倒入水中，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得粗品6g。無需純化，直接用于下一步反應(yīng)。

步驟3：{5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-2h-吡唑-3-基}-氨基甲酸苯基酯的制備

與實(shí)施例1的步驟3的制備方法相同，除了用5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-2h-吡唑-3-基胺代替步驟3中的3-氨基異噁唑，制得{5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-2h-吡唑-3-基}-氨基甲酸苯基酯。

步驟4：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-{5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-2h-吡唑-3-基}-脲的制備

與實(shí)施例1的步驟4的制備方法相同，除了用{5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-2h-吡唑-3-基}-氨基甲酸苯基酯代替步驟4中的異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-{5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-2h-吡唑-3-基}-脲。

步驟5：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(2-羥基-乙基)-2h-吡唑-3-基]-脲的制備

于室溫，將步驟4得到的1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-{5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-2h-吡唑-3-基}-脲(1.05g，1.97mmol)溶解于30mlthf中，滴加tbaf(1m的thf溶液)3ml，滴畢室溫反應(yīng)15分鐘。將反應(yīng)液倒入水中，用乙酸乙酯萃取(80ml×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得930mg黃色固體狀的1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(2-羥基-乙基)-2h-吡唑-3-基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.38(s,1h),8.51(s,1h),8.50(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.69-7.71(d,2h),7.57-7.60(m,3h),7.31-7.33(m,2h),6.12(s,1h),5.11-5.13(t,1h),4.00-4.02(m,2h),3.68-3.73(m,2h),1.23(s,9h)。

lc-ms(esi):418.9(m+h)⁺。

實(shí)施例104

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物104)的制備

化合物104

步驟1：5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基胺的制備

與實(shí)施例103的步驟1相同，除了用苯肼代替2-肼基乙醇，得到5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基胺。

步驟2：(5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯的制備

與實(shí)施例1的步驟3相同，除了用5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基胺代替3-氨基異噁唑，得到(5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯。

步驟3：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基)-脲的制備

與實(shí)施例1的步驟4相同，除了用(5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基)-氨基甲酸苯基酯代替異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-苯基-2h-吡唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.30(s,1h),8.50(s,1h),8.50(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.64-7.66(d,2h),7.54-7.58(m,7h),7.41-7.44(m,1h),7.30-7.35(m,2h),6.41(s,1h),1.29(s,9h)。

lc-ms(esi):451.2(m+h)⁺。

實(shí)施例105

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物105)的制備

化合物105

與實(shí)施例104的步驟1-步驟3中的制備方法相同，除了用4-甲基苯肼代替步驟1中的苯肼，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2h-吡唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.29(s,1h),8.49(s,1h),8.43(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.63-7.66(d,2h),7.55-7.59(m,3h),7.41-7.43(d,2h),7.29-7.36(m,4h),6.39(s,1h),2.39(s,3h),1.29(s,9h)。

lc-ms(esi):465.2(m+h)⁺。

實(shí)施例106

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(4-甲氧基-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲(化合物106)的制備

化合物106

與實(shí)施例104的步驟1-步驟3中的制備方法相同，除了用4-甲氧基苯肼代替步驟1中的苯肼，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(4-甲氧基-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.28(s,1h),8.50(s,1h),8.39(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.63-7.66(d,2h),7.55-7.59(m,3h),7.42-7.46(d,2h),7.28-7.34(m,1h),7.08-7.12(d,2h),6.38(s,1h),3.83(s,3h),1.29(s,9h)。

lc-ms(esi):481.2(m+h)⁺。

實(shí)施例107

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(4-三氟甲氧基-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲(化合物107)的制備

化合物107

與實(shí)施例104的步驟1-步驟3中的制備方法相同，除了用4-三氟甲氧基苯肼代替步驟1中的苯肼，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(4-三氟甲氧基-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.29(s,1h),8.58(s,1h),8.51(s,1h),7.78-7.80(m,1h),7.65-7.72(m,4h),7.54-7.59(m,5h),7.29-7.36(m,2h),6.43(s,1h),1.30(s,9h)。

lc-ms(esi):535.2(m+h)⁺。

實(shí)施例108

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(4-氟-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲(化合物108)的制備

化合物108

與實(shí)施例104的步驟1-步驟3中的制備方法相同，除了用4-氟苯肼代替步驟1中的苯肼，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(4-氟-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.27(s,1h),8.49(s,1h),8.47(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.64-7.66(d,2h),7.55-7.61(m,5h),7.37-7.41(m,2h),7.28-7.34(m,2h),6.40(s,1h),1.29(s,9h)。

lc-ms(esi):469.2(m+h)⁺。

實(shí)施例109

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(2-氟-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲(化合物109)的制備

化合物109

與實(shí)施例104的步驟1-步驟3中的制備方法相同，除了用2-氟苯肼代替步驟1中的苯肼，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-[5-叔丁基-2-(2-氟-苯基)-2h-吡唑-3-基]-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.17(s,1h),8.49(s,1h),8.47(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.63-7.65(d,2h),7.55-7.60(m,5h),7.53-7.48(m,1h),7.39-7.43(m,1h),7.28-7.35(m,2h),6.42(s,1h),1.28(s,9h)。

lc-ms(esi):469.2(m+h)⁺。

實(shí)施例110

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-吡啶-2-基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物110)的制備

化合物110

與實(shí)施例104的步驟1-步驟3中的制備方法相同，除了用2-肼吡啶(達(dá)瑞)代替步驟1中的苯肼，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2-吡啶-2-基-2h-吡唑-3-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:11.32(s,1h),10.22(s,1h),8.53(s,1h),8.50-8.52(m,1h),8.01-8.05(m,1h),7.92-7.94(d,1h),7.77-7.79(m,3h),7.59-7.64(m,3h),7.29-7.37(m,3h),6.65(s,1h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):452.2(m+h)⁺。

實(shí)施例111

4-{5-[3-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-脲基]-3-叔丁基-吡唑-1-基}-苯甲酸乙酯(化合物111)的制備

化合物111

與實(shí)施例104的步驟1-步驟3中的制備方法相同，除了用4-肼基苯甲酸乙酯(達(dá)瑞)代替步驟1中的苯肼，得到4-{5-[3-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-脲基]-3-叔丁基-吡唑-1-基}-苯甲酸乙酯。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.32(s,1h),8.64(s,1h),8.49(s,1h),8.09-8.11(d,2h),7.75-7.78(m,3h),7.64-7.67(d,2h),7.55-7.58(m,3h),7.28-7.34(m,2h),6.45(s,1h),4.32-4.37(q,2h),1.32-1.36(t,3h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):523.2(m+h)⁺。

實(shí)施例112

1-(2-丙烯?；?5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-咪唑-1-基-苯基)-脲(化合物112)的制備

化合物112

步驟1：1-(2-丙烯?；?5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-咪唑-1-基-苯基)-脲的制備

將1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-脲(化合物68)(150mg，0.40mmol)、n,n-二異丙基乙胺(77.4mg，0.60mmol)溶解于10mlthf中，冰浴下(0-5℃)滴加丙烯酰氯(43.4mg，0.48mmol)。滴畢，在冰浴下反應(yīng)30分鐘后，加水(30ml)淬滅，用乙酸乙酯萃取(50×2)，有機(jī)相用飽和nacl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。殘余物通過柱層析色譜法(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得80mg白色固體狀的1-(2-丙烯?；?5-叔丁基-2h-吡唑-3-基)-3-(4-咪唑-1-基-苯基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:10.36(s,1h),10.13(s,1h),8.52(s,1h),7.77-7.79(m,1h),7.72-7.75(d,2h),7.61-7.63(d,2h),7.58-7.60(m,1h),7.48-7.55(q,1h),7.31-7.34(m,2h),6.72(s,1h),6.61-6.66(m,1h),6.20-6.23(m,1h),1.29(s,9h)。

lc-ms(esi):429.1(m+h)⁺。

實(shí)施例113

3-氨基-5-甲基吡唑-1-羧酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺(化合物113)的制備

化合物113

在實(shí)施例64中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.91(s,1h),8.53(s,1h),7.92-7.94(d,2h),7.77-7.79(m,1h),7.62-7.65(d,2h),7.59-7.61(m,1h),7.31-7.34(m,2h),5.71(d,1h),5.34(s,2h),2.48(d,3h)。

lc-ms(esi):333.1(m+h)⁺。

實(shí)施例114

5-氨基-3-環(huán)丙基吡唑-1-甲酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺(化合物114)的制備

化合物114

在實(shí)施例66中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:10.07(s,1h),8.54(s,1h),7.94-7.96(d,2h),7.77-7.79(m,1h),7.65-7.67(d,2h),7.61-7.63(m,1h),7.31-7.34(m,2h),6.46(s,2h),5.06(s,1h),1.83-1.88(m,1h),0.88-0.93(m,2h),0.70-0.74(m,2h)。

lc-ms(esi):359.1(m+h)⁺。

實(shí)施例115

5-氨基-3-三氟甲基吡唑-1-羧酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺(化合物115)的制備

化合物115

在實(shí)施例67中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:10.40(s,1h),8.55(s,1h),7.92-7.95(d,2h),7.77-7.79(m,1h),7.68-7.71(d,2h),7.62-7.64(m,1h),7.30-7.37(m,2h),6.90(s,2h),5.76(s,1h).

lc-ms(esi):387.0(m+h)⁺。

實(shí)施例116

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺(化合物116)的制備

化合物116

在實(shí)施例68中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.80(s,1h),8.56(s,1h),7.91-7.94(d,2h),7.77-7.79(m,1h),7.68-7.70(d,2h),7.62-7.64(m,1h),7.31-7.35(m,2h),6.42(s,2h),5.32(s,1h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):375.0(m+h)⁺。

實(shí)施例117

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸[4-(5-己氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-酰胺(化合物117)的制備

化合物117

在實(shí)施例73中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.79(s,1h),8.48(s,1h),7.90-7.92(d,2h),7.65-7.67(d,2h),7.49-7.51(d,1h),7.28-7.29(d,1h),6.94-6.96(dd,1h),6.41(s,2h),5.32(s,1h),4.01-4.04(t,2h),1.71-1.76(m,2h),1.43-1.47(m,2h),1.31-1.35(m,4h),1.27(s,9h),0.87-0.91(t,3h)。

lc-ms(esi):475.2(m+h)⁺。

實(shí)施例118

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸(4-{5-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯并咪唑-1-基}-苯基)-酰胺(化合物118)的制備

化合物118

在實(shí)施例92中同步合成。

¹hnmr(cdcl3-d,400mhz)δ:9.28(s,1h),8.06(s,1h),7.78-7.80(d,2h),7.49-7.52(d,2h),7.39-7.41(d,1h),7.34-7.35(d,1h),6.97-7.00(dd,1h),5.44(s,2h),4.10-4.13(t,2h),2.50-2.70(m,10h),2.37(s,3h),2.01-2.08(m,2h),1.31(s,9h)。

lc-ms(esi):531.2(m+h)⁺。

實(shí)施例119

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺(化合物119)的制備

化合物119

在實(shí)施例89中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.79(s,1h),8.49(s,1h),7.90-7.92(d,2h),7.65-7.67(d,2h),7.50-7.52(d,1h),7.32-7.33(d,1h),6.96-6.98(dd,1h),6.42(s,2h),5.32(s,1h),4.15-4.17(t,2h),3.59-3.61(t,4h),2.73-2.76(t,2h),2.49-2.51(m,4h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):504.2(m+h)⁺。

實(shí)施例120

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺(化合物120)的制備

化合物120

在實(shí)施例77中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.79(s,1h),8.49(s,1h),7.90-7.92(d,2h),7.65-7.68(d,2h),7.51-7.53(d,1h),7.31-7.32(d,1h),6.96-6.99(dd,1h),6.42(s,2h),5.32(s,1h),4.15-4.17(m,2h),3.69-3.71(m,2h),3.33(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):449.2(m+h)⁺。

實(shí)施例121

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(2-羥基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺(化合物121)的制備

化合物121

在實(shí)施例79中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.79(s,1h),8.49(s,1h),7.90-7.92(d,2h),7.65-7.68(d,2h),7.51-7.53(d,1h),7.30(d,1h),6.97-6.99(dd,1h),6.41(s,2h),5.32(s,1h),4.89-4.92(t,1h),4.04-4.06(t,2h),3.74-3.78(m,2h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):435.2(m+h)⁺。

實(shí)施例122

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(四氫-吡喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺(化合物122)的制備

化合物122

在實(shí)施例87中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.79(s,1h),8.48(s,1h),7.89-7.91(d,2h),7.65-7.67(d,2h),7.50-7.52(d,1h),7.28-7.29(d,1h),6.96-6.98(dd,1h),6.41(s,2h),5.32(s,1h),3.89-3.98(m,3h),3.63-3.69(m,1h),3.34-3.42(m,1h),1.82-1.84(m,1h),1.67-1.70(m,1h),1.46-1.54(m,4h),1.26(s,9h)。

lc-ms(esi):489.2(m+h)⁺。

實(shí)施例123

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[5-(四氫-呋喃-2-基甲氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺(化合物123)的制備

化合物123

在實(shí)施例86中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.79(s,1h),8.49(s,1h),7.90-7.92(d,2h),7.65-7.68(d,2h),7.50-7.53(d,1h),7.31-7.32(d,1h),6.96-6.99(dd,1h),6.41(s,2h), 5.32(s,1h),4.18-4.20(m,1h),3.98-4.02(m,2h),3.78-3.82(m,1h),3.69-3.71(m,1h),1.67-2.07(m,4h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):475.1(m+h)⁺。

實(shí)施例124

(1-{4-[(5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羰基)-氨基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基氧基)-乙酸乙酯(化合物124)的制備

化合物124

在實(shí)施例88中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.79(s,1h),8.50(s,1h),7.90-7.92(d,2h),7.65-7.67(d,2h),7.52-7.54(d,1h),7.28(d,1h),6.99-7.02(dd,1h),6.41(s,2h),5.32(s,1h),4.84(s,2h),4.16-4.21(q,2h),1.27(s,9h),1.21-1.25(t,3h)。

lc-ms(esi):477.1(m+h)⁺。

實(shí)施例125

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸[4-(5-氟-苯并咪唑-1-基)-苯基]-酰胺(化合物125)的制備

化合物125

在實(shí)施例69中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.81(s,1h),8.61(s,1h),7.91-7.93(d,2h),7.67-7.69(d,2h),7.58-7.64(m,2h),7.19-7.25(m,1h),6.41(s,2h),5.33(s,1h),1.26(s,9h)。

lc-ms(esi):393.2(m+h)⁺。

實(shí)施例126

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸[4-(5-三氟甲基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-酰胺(化合物126)的制備

化合物126

在實(shí)施例70中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.83(s,1h),8.77(s,1h),8.17(d,1h),7.94-7.96(d,2h),7.80-7.82(d,1h),7.71-7.73(d,2h),7.66-7.68(dd,1h),6.41(s,2h),5.33(s,1h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):443.1(m+h)⁺。

實(shí)施例127

4-(1-{4-[(5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羰基)-氨基]-苯基}-1h-苯并咪唑-5-基氧基)-吡啶-2-羧酸甲基酰胺(化合物127)的制備

化合物127

在實(shí)施例96中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.82(s,1h),8.78-8.79(m,1h),8.68(s,1h),8.50-8.52(d,1h),7.93-7.95(d,2h),7.72-7.75(m,3h),7.67(d,1h),7.39-7.40(d,1h),7.18-7.23(m,2h),6.42(s,2h),5.33(s,1h),2.77-2.79(d,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):525.1(m+h)⁺。

實(shí)施例128

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-苯并咪唑-1-基]-苯基}-酰胺(化合物128)的制備

在實(shí)施例98中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.80(s,1h),8.45(s,1h),7.91-7.93(d,2h,),7.68-7.70(m,3h),7.08(d,1h),6.95-6.98(dd,1h),6.42(s,2h),5.33(s,1h),4.13-4.15(m,2h),3.66-3.68(m,2h),3.31(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):esi449.1(m+h)⁺。

實(shí)施例129

5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-羧酸[4-(5,6-二甲氧基-苯并咪唑-1-基)-苯基]-酰胺(化合物129)的制備

化合物129

在實(shí)施例99中同步合成。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.78(s,1h),8.33(s,1h),7.90-7.92(d,2h,),7.67-7.69(d,2h),7.32(s,1h),7.08(s,1h),6.41(s,2h),5.32(s,1h),3.83(s,3h),3.81(s,3h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):esi435.1(m+h)⁺。

實(shí)施例130

3-叔丁基-吡唑-1-羧酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺(化合物130)的制備

化合物130

與實(shí)施例68的制備方法相同，除了用3-(叔丁基)-1h-吡唑代替步驟2中的3-叔丁基-吡唑-5-胺，得到3-叔丁基-吡唑-1-羧酸(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-酰胺。

¹hnmr(cdcl3-d,400mhz)δ:9.26(s,1h),8.23-8.24(d,1h),8.14(s,1h),7.89-7.92(m,1h),7.86-7.88(d,2h),7.54-7.57(m,3h),7.36-7.38(m,2h),6.40-6.41(d,1h),1.39(s,9h)。

lc-ms(esi):360.1(m+h)⁺。

實(shí)施例131

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3,4-二甲基-異噁唑-5-基)-脲(化合物131)的制備

化合物131

步驟1：(3,4-二甲基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)的制備

與實(shí)施例1的步驟3中的制備方法相同，除了用3,4-二甲基-5-氨基異噁唑代替3-氨基異噁唑，得到(3,4-二甲基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸苯基酯。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3,4-二甲基-異噁唑-5-基)-脲

與實(shí)施例1的步驟4中的制備方法相同，除了用(3,4-二甲基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸苯基酯代替異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3,4-二甲基-異噁唑-5-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:9.22(s,1h),9.18(s,1h),8.50(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.69-7.71(d,2h),7.57-7.61(m,3h),7.30-7.33(m,2h),2.16(s,3h),1.85(s,3h)。

lc-ms(esi):348.1(m+h)⁺。

實(shí)施例132

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3-異丙基-異噁唑-5-基)-脲(化合物132)的制備

化合物132

步驟1：(3-異丙基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)的制備

與實(shí)施例1的步驟3中的制備方法相同，除了用3-異丙基-5-氨基異噁唑代替3-氨基異噁唑，得到(3-異丙基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸苯基酯。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3-異丙基-異噁唑-5-基)-脲

與實(shí)施例1的步驟4中的制備方法相同，除了用(3-異丙基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸苯基酯代替異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3-異丙基-異噁唑-5-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:10.21(s,1h),9.13(s,1h),8.51(s,1h),7.76-7.78(m,1h),7.70-7.72(d,2h),7.61-7.63(d,2h),7.57-7.59(m,1h),7.28-7.36(m,2h),6.05(s,1h),2.90-2.96(m,1h),1.21-1.23(d,6h)。

lc-ms(esi):362.1(m+h)⁺。

實(shí)施例133

1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-脲(化合物133)的制備

化合物133

步驟1：(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸苯基酯(活潑酯)的制備

與實(shí)施例1的步驟3中的制備方法相同，除了用3-叔丁基-5-氨基異噁唑代替3-氨基異噁唑，得到(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸苯基酯。

步驟2：1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-脲的制備

與實(shí)施例1的步驟4中的制備方法相同，除了用(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸苯基酯代替異噁唑-3-基-氨基甲酸苯基酯，得到1-(4-苯并咪唑-1-基-苯基)-3-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-脲。

¹hnmr(dmso-d6,400mhz)δ:10.21(s,1h),9.12(s,1h),8.51(s,1h),7.76-7.79(m,1h),7.70-7.73(d,2h),7.61-7.63(d,2h),7.57-7.60(m,1h),7.29-7.35(m,2h),6.10(s,1h),1.27(s,9h)。

lc-ms(esi):376.1(m+h)⁺。

實(shí)施例134化合物成鹽實(shí)驗(yàn)

(1)稱取本發(fā)明化合物100mg-1000mg于50ml單口瓶中；

(2)加入2-12ml甲醇室溫?cái)嚢?，為渾濁分散體系；

(3)稱取3個(gè)當(dāng)量的對應(yīng)的酸溶解于少量甲醇中滴加其中，滴加過程中體系溶清；

(4)繼續(xù)室溫?cái)嚢?h；

(5)后處理：

1)如有固體析出，加10倍甲醇體積量的乙酸乙酯攪拌30min，抽濾，所得固體用乙酸乙酯洗滌，干燥得產(chǎn)品。

2)如沒有固體析出，反應(yīng)體系濃縮得粗品，粗品溶于少量甲醇中(溶清為限)，滴加10倍甲醇體積量的乙酸乙酯或甲基叔丁基醚析出固體，攪拌1h-2h，抽濾，所得固體用乙酸乙酯洗滌，干燥得產(chǎn)品。

3)如沒有固體析出，反應(yīng)體系濃縮得粗品，粗品溶于少量甲醇中(溶清為限)，滴加10倍甲醇體積量的乙酸乙酯或甲基叔丁基醚，沒有固體析出或者析出固體性狀不好(粘稠)，則繼續(xù)濃縮，濃縮完全后油泵抽氣30min-1h，所得粗品加乙酸乙酯或甲基叔丁基醚后慢慢碾壓成顆粒狀，打漿成均勻分散體系，加1/20倍乙酸乙酯體積量的甲醇，繼續(xù)攪拌30min，抽濾，所得固體用乙酸乙酯洗滌，干燥得產(chǎn)品。

實(shí)施例135化合物水溶性和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

(1)水溶性實(shí)驗(yàn)

稱取研成細(xì)粉的供試品，于25℃±2℃一定容量的水中，每隔五分鐘強(qiáng)力振搖30秒，觀察30分鐘內(nèi)的溶解情況。如果無目視可見的溶質(zhì)顆粒，即視為完全溶解。易溶系指供試品1g能在水1ml～10ml中溶解；溶解系指供試品1g能在水10ml～30ml中溶解；略溶系指供試品1g能在水30ml～100ml中溶解；微溶系指供試品1g能在水100ml～1000ml中溶解；幾乎不溶或不溶系指供試品1g在溶劑10000ml中不能完全溶解。

(2)穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

1)高溫試驗(yàn)

供試品開口置于綜合藥物穩(wěn)定試驗(yàn)箱中(永生儀器)，于60℃放置10天，于第5天和第10天取樣，按藥物穩(wěn)定性考察指標(biāo)進(jìn)行檢測。

2)高濕度試驗(yàn)

供試品開口置于綜合藥物穩(wěn)定試驗(yàn)箱中(永生儀器)，在25℃相對濕度90％±5％條件下放置10天，于第5天和第10天取樣，按藥物穩(wěn)定性考察指標(biāo)進(jìn)行檢測。

3)強(qiáng)光照試驗(yàn)

供試品開口置于綜合藥物穩(wěn)定試驗(yàn)箱中(永生儀器)，在4500lx±500lx光照條件下放置10天，于第5天和第10天取樣，按藥物穩(wěn)定性考察指標(biāo)進(jìn)行檢測。

(3)hplc檢測

取供試品適量，用乙腈-水(1:1)溶解，并定量稀釋制成約0.3mg/ml的溶液，取20ul注入液相色譜儀(安捷倫1260infinity)，記錄色譜圖，按百分面積法計(jì)算。流動(dòng)相為磷酸鹽緩沖液和乙腈水溶液，梯度洗脫。

表1為部分實(shí)施例化合物成鹽后水溶性及穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

表1本發(fā)明化合物鹽的水溶性和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)例

化合物活性測定

實(shí)驗(yàn)材料與方法

1、細(xì)胞系及細(xì)胞培養(yǎng)

腫瘤細(xì)胞系是研究腫瘤體外生長抑制的有效細(xì)胞模型。本發(fā)明選擇具有代表性的腫瘤細(xì)胞系應(yīng)用于本發(fā)明化合物細(xì)胞生長抑制活性的測定。所有使用的細(xì)胞系分別來源于atcc、dsmz和中科院細(xì)胞庫。細(xì)胞培養(yǎng)條件與方法按每種細(xì)胞系要求進(jìn)行。每次體外培養(yǎng)不超過3次傳代，根據(jù)需要，可對細(xì)胞系進(jìn)行單克隆純化與鑒定。

細(xì)胞培養(yǎng)基分別選用rpmi1640(gibco)、mem(gibco)、mccoy's5a(gibco)、imdm(gibco)，加入5-20％胎牛血清(gibco)、1％雙抗、2mm谷氨酰胺或者1mm丙酮酸鈉。

(1)表達(dá)flt3野生型(wt)和內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)(itd)突變型白血病細(xì)胞系

mv4-11(flt3itd+/+突變型，人急性淋巴髓單核細(xì)胞白血病，atcc)用1×imdm加10％fbs的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。molm-13(flt3itd-/+突變型，人急性髓系白血病，dsmz)、rs4；11(flt3野生型，人急性淋巴白血病細(xì)胞，atcc)、k562(無flt3表達(dá)，但表達(dá)bcr-abl融合蛋白，人慢性粒細(xì)胞白血病cml，atcc)、hl-60(flt3野生型，人早幼粒白血病細(xì)胞apl，atcc)、ramos(brutons酪蛋白激酶(btk)表達(dá)陽性，人b淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞，atcc)、kasumi-1(c-kitn822k突變型，人急性髓細(xì)胞白血病，atcc)、u937(flt3野生型，人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株，atcc)、oci-aml3(npmc+突變型，人急性髓細(xì)胞性白血病，atcc)、和kg-1(表達(dá)fgfr1op2突變型，人急性髓細(xì)胞白血病，atcc)，均用1×rpmi1640加10％fbs的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。

(2)egfr表達(dá)細(xì)胞系

a431人表皮癌細(xì)胞(egfr野生型/高表達(dá)amp，中科院上海細(xì)胞庫)；nci-h292人肺癌細(xì)胞(egfr野生型，來自人肺粘液表皮樣癌/淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，中科院上海細(xì)胞庫)；非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞pc-9(atcc)和hcc827細(xì)胞(中科院上海細(xì)胞庫)是egfrexon19(e746-a750)缺失型突變細(xì)胞系；人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì) 胞nci-h1975，表達(dá)egfrl858r/t790m雙突變(atcc)，第一代egfr抑制劑抗性。以上細(xì)胞用1×rpmi1640加10％fbs的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。

(3)her2/erbb2基因擴(kuò)增或高表達(dá)及突變的腫瘤細(xì)胞系

人胃癌細(xì)胞系nci-n87(her2/erbb2amp，atcc)、人乳腺癌細(xì)胞株hcc1954(her2/erbb2amp，拉帕替尼耐藥性細(xì)胞株，gi50>1000nm)和zr-75-30(her2/erbb2amp，atcc)、au565腺癌細(xì)胞系(her2/erbb2amp，atcc)、nci-h2170人肺鱗狀細(xì)胞癌(her2/erbb2amp，atcc)、nci-h1781人支氣管肺泡腺癌細(xì)胞株(her2/erbb2insg776v，c突變型，atcc)分別用1×rpmi1640完全培養(yǎng)基培養(yǎng)(10％fbs)培養(yǎng)；人肺腺癌細(xì)胞calu-3(her2/erbb2amp，atcc)培養(yǎng)基為1×mem、10％fbs、1％雙抗、1％neaa(gibco)、2mm谷氨酰胺和1mm丙酮酸鈉。人乳腺癌細(xì)胞sk-br-3(her2/erbb2amp，atcc)用mccoy's5a完全培養(yǎng)基(10％fbs)培養(yǎng)。

(4)過表達(dá)met酪氨酸蛋白激酶的腫瘤細(xì)胞系

mkn-45人胃癌細(xì)胞(cmetamp，atcc)和非小細(xì)胞肺癌nci-h1993(cmetamp，atcc)分別用1×rpmi1640加10％fbs的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。

(5)表達(dá)alk融合蛋白及突變株的腫瘤細(xì)胞系

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株nci-h2228(atcc)(表達(dá)eml4-alk融合基因)和人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株karpas-299(atcc)(表達(dá)npm-alk融合基因)分別用1xrpmi1640(10％fbs)完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞sh-sy5y(中科院上海細(xì)胞庫)(表達(dá)alkf1174l突變蛋白)用mem完全培養(yǎng)基(1xmem，10％fbs，1％neaa，1mm丙酮酸鈉)培養(yǎng)。

(6)fgfr1高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞系

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞nci-h1581(fgfr1amp，atcc)是fgfr1基因擴(kuò)增/過表達(dá)腫瘤細(xì)胞系，用1xrpmi1640(10％fbs)完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。

(7)表達(dá)ras和raf突變株的腫瘤細(xì)胞系

nci-h460人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞(krasg61h突變型，atcc)、h1299非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株(nrasq61k突變型，atcc)、a375黑色素瘤細(xì)胞系(brafv600e突變型，中科院上海細(xì)胞庫)、hct116人結(jié)腸癌細(xì)胞株(krasg13d突變型，中科院上海細(xì)胞庫)用1xrpmi1640(10％fbs)完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。a549非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(krasg12s突變型，中科院上海細(xì)胞庫)用1×ham’sf12k，加10％fbs、1％雙抗、2mm谷氨酰胺的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。

2、藥物處理

貼壁細(xì)胞用0.25％胰酶-edta(gibco)消化。懸浮培養(yǎng)細(xì)胞直接離心收集(1700rpm，3分鐘)，棄上清，計(jì)數(shù)細(xì)胞(自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，invitrogen)。根據(jù)每種細(xì)胞生長周期，配制不同的細(xì)胞濃度(每毫升5-10×10⁴細(xì) 胞)，接種到96孔板(corning)，每孔100微升，37℃、5％co2培養(yǎng)過夜。第二天，將待測化合物加入到培養(yǎng)細(xì)胞中，平行2孔，細(xì)胞空白和溶劑對照孔分別加入相同體積的完全培養(yǎng)基和溶劑(dmso)，有機(jī)溶劑終濃度不得超過千分之一。細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)72小時(shí)，mtt測定。待測化合物與參比化合物用dmso(sigma)溶解，化合物純度達(dá)98％以上?；衔镔A存濃度為10mm，-20℃保存，使用前對倍或者10倍系列稀釋。

3、mtt檢測及gi50計(jì)算

mtt檢測試劑為dojindocck8試劑盒，酶標(biāo)測定儀為thermomultiskanfc儀。

將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)基吸出，立即加入新配制的含10％cck8的完全培養(yǎng)基(5％fbs)，每孔100ul。懸浮細(xì)胞可直接加入cck8試劑，終濃度為10％，繼續(xù)培養(yǎng)1-4小時(shí)，當(dāng)溶劑對照孔呈現(xiàn)暗黃色時(shí)，測od450nm光吸收值，按以下公式計(jì)算細(xì)胞生長率，

細(xì)胞生長率％＝100*(t-t0)/(c-t0)

t＝藥物處理細(xì)胞孔光密度值-空白對照孔光密度值；t0＝藥物處理前細(xì)胞孔光密度值-空白對照孔光密度值；c＝溶劑對照細(xì)胞孔光密度-空白對照孔光密度值。通過藥物濃度與細(xì)胞生長率曲線，計(jì)算細(xì)胞生長50％抑制的藥物濃度即gi50。試驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行三次，并對數(shù)據(jù)進(jìn)行生物學(xué)統(tǒng)計(jì)分析。

試驗(yàn)例1

化合物對表達(dá)flt3野生型和內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)(itd)突變型白血病細(xì)胞系體外生長抑制活性的測定

表2總結(jié)本發(fā)明化合物對表達(dá)flt3-itd突變型和野生型白血病細(xì)胞系生長抑制活性(gi50濃度)的測定結(jié)果。gi50值越小，細(xì)胞生長抑制活性越強(qiáng)。如果化合物對flt3-itd表達(dá)細(xì)胞(mv4-11和molm-13)生長抑制活性強(qiáng)(即gi50低)，而對flt3野生型高表達(dá)(如rs4；11)或低表達(dá)或無表達(dá)(如k562)細(xì)胞的生長抑制弱或無作用時(shí)(即gi50濃度高)，說明該類化合物對flt3-itd突變型的選擇性高，將具有治療flt3-itd相關(guān)疾病的潛在開發(fā)價(jià)值。本發(fā)明選用flt3-itd高特異性化合物ac220做為對照化合物，按照原研公司制備方法由本公司合成(chaoq等,identificationofn-(5-tert-butyl-isoxazol-3-yl)-n'-{4-[7-(2-morpholin-4-yl-ethoxy)imidazo[2,1-b][1,3]benzothiazol-2-yl]phenyl}ureadihydrochloride(ac220),auniquelypotent,selective,andefficaciousfms-liketyrosinekinase-3(flt3)inhibitor.jmedchem.2009；52(23):7808-16)。

表2本發(fā)明化合物對表達(dá)flt3-itd突變型和野生型白血病細(xì)胞系生長抑制活性

結(jié)論：由上表可知，本發(fā)明化合物與對照化合物ac220相比，對flt3-itd表達(dá)細(xì)胞(mv4-11和molm-13)生長抑制活性更強(qiáng)；對flt3野生型高表達(dá)細(xì)胞(rsv4；11)或正常表達(dá)(hl-60、ramos、u937、kasumi-1、kg-1和oci-aml3)或無表達(dá)(k562)細(xì)胞的生長抑制與對照化合物一樣，較弱或無作用。因此，本發(fā)明化合物對flt3-itd突變型具有高選擇性和高活性，是一種新型的、潛在的和具備治療flt3-itd相關(guān)疾病潛力的抑制劑。

試驗(yàn)例2

化合物對腫瘤細(xì)胞體外生長抑制活性(gi50)的測定

對本發(fā)明化合物4、11、12、16、27、68、71、77、79、89和116進(jìn)行其它幾個(gè)癌基因蛋白激酶表達(dá)異常的腫瘤細(xì)胞系細(xì)胞生長抑制試驗(yàn)。化合物以5000nm為起始濃度，對倍或10倍系列稀釋至0.01nm，按照gi50計(jì)算方法計(jì)算每種化合物的gi50值。試驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行三次，并對數(shù)據(jù)進(jìn)行生物學(xué)統(tǒng)計(jì)分析。具體結(jié)果見下表3。

結(jié)論：結(jié)果顯示本發(fā)明化合物12、16、27、68、71、77、89和116對表達(dá)flt3itd突變型細(xì)胞mv4-11具有高的抑制活性，gi50為亞納摩爾范圍；對flt3野生型高表達(dá)細(xì)胞rs4；11需要相對高的濃度才呈現(xiàn)明顯的抑制作用，gi50為微摩爾范圍。測試化合物4、11和79對表達(dá)flt3itd突變型細(xì)胞mv4-11具有強(qiáng)抑制作用，同時(shí)對flt3野生型高表達(dá)細(xì)胞rs4；11呈現(xiàn)一定的生長抑制活性，但需要較高的抑制濃度。相反化合物12、16、27、68、71、77、89和116對egfr、her2/erbb2、fgfr1、ras、braf、cmet、alk癌基因蛋白激酶異常表達(dá)的測試腫瘤細(xì)胞系的生長無明顯抑制作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步顯示本發(fā)明化合物對flt3-itd具有高選擇性。

試驗(yàn)例3

腫瘤細(xì)胞體內(nèi)生長抑制實(shí)驗(yàn)

免疫缺陷小鼠的異種移植是測試化合物動(dòng)物體內(nèi)抗腫瘤活性的有效模型。一般來講，人腫瘤細(xì)胞異種移植試驗(yàn)的有效性和人體腫瘤臨床治療呈一定的正相關(guān)。bab/c免疫缺陷小鼠是最常用的腫瘤細(xì)胞異種移植動(dòng)物之一。為了測試本發(fā)明化合物是否能夠有效抑制flt3-itd表達(dá)陽性白血病細(xì)胞的體內(nèi)生長，本發(fā)明選用mv4-11細(xì)胞bab/c裸鼠腫瘤模型進(jìn)行試驗(yàn)。將生長對數(shù)期的mv4-11細(xì)胞收集于50ml離心管(corning)，1700rm離心3分鐘，棄上清。用50ml1xrpmi1640無血清培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞，離心，棄上清，再懸浮，細(xì)胞計(jì)數(shù)(自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，invitrogen)，配制成10x10⁷細(xì)胞/毫升，置冰上，皮下接種10x10⁶(0.2ml)細(xì)胞于6～8周齡(重20克左右)雌性bab/c裸鼠右側(cè)背部(購于上海西普爾－必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，上海中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心飼養(yǎng)，上海中醫(yī)藥大學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn))。當(dāng)腫瘤塊生長到大小在100-200mm³體積時(shí)，隨機(jī)分組，耳扎標(biāo)記，稱重。治療組，每組3～6只裸鼠，藥物分別用溶劑ptp液(30％聚乙二醇400，0.5％吐溫-80，2.5％丙二醇)配制成不同藥物濃度乳狀混懸液，以0.1ml/每10克體重，每日灌胃一次，連續(xù)給藥，藥量范圍為0.1-200mg/kg，待測化合物純度為99％以上，單雜不高于0.1％。對照組，每組3～6只裸鼠，給相同體積(0.1ml/每10克體重)的溶劑ptp液，每周測量腫瘤3～4次，當(dāng)對照組腫瘤平均體積達(dá)到1500mm³時(shí)，或給藥到28天時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束，進(jìn)行腫瘤組織分子病理學(xué)分析。

抑瘤率＝(對照組相對腫瘤體積crtv-治療組相對腫瘤trtv體積)/對照組相對腫瘤體積crtv×100％。腫瘤體積按v＝1/2axb²計(jì)算，a為長，b為寬。根據(jù)測量的結(jié)果計(jì)算出相對腫瘤體積(relativetumorvolume，rtv)，計(jì)算公式為：rtv＝vt/v0。其中v0為分籠給藥時(shí)(即d0)測量所得腫瘤體積，vt為每一次測量時(shí)的腫瘤體積。具體結(jié)果見表4。

表4本發(fā)明化合物對腫瘤細(xì)胞體內(nèi)生長的抑瘤率

*nd：無測定

結(jié)論：結(jié)果顯示本發(fā)明化合物68、71對mv4-11體內(nèi)腫瘤生長呈現(xiàn)濃度和時(shí)間依賴性抑制活性。劑量25mg/kg或以上時(shí)，從第6天開始，腫瘤生長抑制率達(dá)80％以上，第28天時(shí)，腫瘤全部消失，而動(dòng)物體重相對不受影響。相對于化合物68、化合物71活性較強(qiáng)，劑量為2.5mg/kg時(shí)仍呈現(xiàn)明顯的腫瘤生長抑制活性。本發(fā)明化合物77和16具有更強(qiáng)的體內(nèi)mv4-11腫瘤生長抑制劑活性，其藥物劑量為2.5mg/kg時(shí)，給藥第15天，腫瘤全部消失。

試驗(yàn)例4

本發(fā)明化合物大鼠體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究

雌性sd大鼠(上海西普爾－必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司)購入后，在上海中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心(上海中醫(yī)藥大學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn))適應(yīng)性飼養(yǎng)7天，8只sd大鼠隨機(jī)分為2組，每組4只。一組用于尾靜脈(iv)注射給藥，另一組用于灌胃(po)給藥。灌胃組大鼠給藥前禁食12小時(shí)以上。大鼠給藥后，采用眼眶靜脈叢取 血，取血時(shí)間為0min(給藥前)、2min、5min、15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、24h。血樣收集于加有肝素鈉的1.5ml離心管中，4℃8000rpm離心3分鐘，收集上層血漿液，-80℃保存待測。血漿中化合物濃度由lc-ms/ms(absciex4500lc/ms/ms系統(tǒng))測定，藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)用藥代動(dòng)力學(xué)專業(yè)軟件winnonlin計(jì)算，試驗(yàn)重復(fù)一次。具體結(jié)果見表5。

表5本發(fā)明化合物的大鼠體內(nèi)生物利用度結(jié)果

結(jié)論：本發(fā)明化合物在大鼠體內(nèi)表現(xiàn)出極高的生物利用度。