本申請(qǐng)要求于2014年6月12日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?2/011,500的權(quán)益，該申請(qǐng)通過引用而整體并入本文。
技術(shù)領(lǐng)域：
本技術(shù)部分地涉及從有機(jī)材料或分子的混合物中純化感興趣的多元羧酸。
背景技術(shù)：
：作為用于工業(yè)生產(chǎn)尼龍、塑料和許多其他工業(yè)聚合物的化學(xué)中間體或單體，多元羧酸具有許多用途。目前，絕大多數(shù)的多元羧酸單體從石油生產(chǎn)。最近，使用除石油外的碳源，如各種糖、脂肪和油，利用遺傳工程微生物以工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)多元羧酸已成為可能。工程微生物可在含有一種或多種碳源以及其他所需營(yíng)養(yǎng)物的合適液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)在所需溫度、pH、溶解氧等條件下培養(yǎng)時(shí)，微生物可產(chǎn)生并向培養(yǎng)基中分泌多元羧酸。然后可將多元羧酸從該培養(yǎng)基中分離，并純化至在特定工業(yè)過程中使用所需的程度。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：在某些方面提供了從水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法，其包括：(a)降低包含該多元羧酸的水性介質(zhì)的pH，使得該多元羧酸從所述介質(zhì)中沉淀出來(lái)；(b)使沉淀的多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑在一個(gè)或多個(gè)選定的溫度下接觸；(c)從所述至少一種合適的有機(jī)溶劑中分離該多元羧酸；以及(d)收集純化的多元羧酸。在某些實(shí)施方案中，感興趣的多元羧酸為辛二酸、壬二酸、癸二酸、巴西基酸(十一烷二酸或UDDA)、十二烷二酸(DDDA)、十四烷二酸(TDDA)等中的至少一種。還提供了從水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法，其包括：(a)降低包含該多元羧酸的水性介質(zhì)的pH，使得該多元羧酸從所述介質(zhì)中沉淀出來(lái)；(b)使沉淀的多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑在一個(gè)或多個(gè)選定的溫度下接觸；(c)從所述至少一種合適的有機(jī)溶劑中分離該多元羧酸；(d)收集純化的多元羧酸；并任選地在(a)與(b)之間包括分離步驟，以分離沉淀的多元羧酸。在本文描述的一些方法中，水溶液可為發(fā)酵液。在某些方法中，感興趣的多元羧酸為二羧酸。本文提供了本文所述的用于純化感興趣的多元羧酸的方法，其包括在水性介質(zhì)中培養(yǎng)微生物以產(chǎn)生感興趣的多元羧酸；(a)降低包含該多元羧酸的水性介質(zhì)的pH，使得該多元羧酸從所述介質(zhì)中沉淀出來(lái)；(b)使沉淀的多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑在一個(gè)或多個(gè)選定的溫度下接觸；(c)從所述至少一種合適的有機(jī)溶劑中分離該多元羧酸；以及(d)收集純化的多元羧酸。在某些方面，所述水性介質(zhì)可為發(fā)酵液。在某些方面，該發(fā)酵液包含至少一種原料，該原料為非基于石油的碳源。在一些方面，在不使用任何基于石油的原料的情況下獲得所述多元羧酸。在某些方面是如本文所述的從水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法，其中該多元羧酸選自杜鵑花酸、皮脂酸、UDDA、DDDA、巴西基酸、TDDA、十六碳二酸、創(chuàng)傷酸、十八烷二酸、9-十八碳烯二酸、十八碳-c6,c9-二烯-1,18-二酸鹽、十八碳-c3,c6,c9-三烯-1,18-二酸鹽和二十烷二酸。在某些情況下，該多元羧酸為DDDA。在某些方面是本文所述的從如本文所述的水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法，其包括使該多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑接觸。在某些實(shí)施方案中，所述至少一種有機(jī)溶劑為酸。在一些實(shí)施方案中，所述至少一種有機(jī)溶劑為乙酸。在一些情況下，所述至少一種有機(jī)溶劑為乙酸、甲酸、正丁醇、仲丁醇、異丁醇、叔丁醇、戊醇、己醇、庚醇(septanol)、辛醇、丁酮、戊酮、丙酮和乙酸乙酯中的一種或多種?？蓪⑺鲇袡C(jī)溶劑加熱以使所述感興趣的多元羧酸溶解。在一些情況下，將所述有機(jī)溶劑加熱至比將添加該有機(jī)溶劑的包含所述感興趣多元羧酸的介質(zhì)的溫度高1、2、3、4、5、6、7、8、9或10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70度或超過70度。在一些情況下，可在加熱后使所述有機(jī)溶劑冷卻。在一些情況下，使所述溶劑緩慢冷卻。在一些情況下，可在加熱后使所述有機(jī)溶劑冷卻，從而導(dǎo)致所述感興趣的多元羧酸沉淀?？蓪⑺鲇袡C(jī)溶劑加熱至約70攝氏度，隨后冷卻至約25攝氏度。在一些情況下，可使所述有機(jī)溶劑緩慢冷卻。在一些情況下，可將所述溶劑以每小時(shí)1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15攝氏度至180℃或小于每小時(shí)1攝氏度的速率冷卻至室溫。在一些情況下是本文所述的從如本文所述的水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法，其包括使該多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑接觸，其中該多元羧酸為杜鵑花酸、皮脂酸、UDDA、DDDA、巴西基酸、TDDA、十六碳二酸、創(chuàng)傷酸、十八烷二酸、9-十八碳烯二酸、十八碳-c6,c9-二烯-1,18-二酸鹽、十八碳-c3,c6,c9-三烯-1,18-二酸鹽和二十烷二酸中的一種，所述至少一種有機(jī)溶劑為乙酸，任選地將該乙酸加熱至約70攝氏度，隨后任選地冷卻至約35至約20攝氏度。在一些情況下，將所述至少一種有機(jī)溶劑冷卻至約25攝氏度。在某些方面是本文所述的從如本文所述的水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法，所述方法進(jìn)一步包括一個(gè)或多個(gè)分離步驟。在一些情況下，在通過降低包含所述多元羧酸的水性介質(zhì)的pH使所述多元羧酸從所述介質(zhì)中沉淀之后，可引入分離步驟以從所述水性介質(zhì)中分離所述多元羧酸。在某些方面是本文所述的從如本文所述的水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法，其中按重量：重量計(jì)，與所述水性混合物相比，所述多元羧酸的純度至少高5％。在一些方面是至少一種基本純的多元羧酸的組合物，其中所述基本純的多元羧酸通過本文描述的方法進(jìn)行純化。在一個(gè)方面是一種包含基本純的多元羧酸的組合物，其中所述多元羧酸通過包括以下步驟的方法從水性混合物中純化：(a)降低包含該多元羧酸的水性介質(zhì)的pH，使得該多元羧酸從所述介質(zhì)中沉淀出來(lái)；(b)使沉淀的多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑在一個(gè)或多個(gè)選定的溫度下接觸；(c)從所述至少一種合適的有機(jī)溶劑中分離該多元羧酸；以及(d)收集純化的多元羧酸。在一些情況下，按重量：重量計(jì)，與從中純化所述多元羧酸的水性混合物中對(duì)應(yīng)量的未純化多元羧酸相比，所述基本純的多元羧酸的純度可至少高5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％。在一些情況下，所述基本純的多元羧酸可為杜鵑花酸、皮脂酸、UDDA、DDDA、巴西基酸、TDDA、十六碳二酸、創(chuàng)傷酸、十八烷二酸、9-十八碳烯二酸、十八碳-c6,c9-二烯-1,18-二酸鹽、十八碳-c3,c6,c9-三烯-1,18-二酸鹽和二十烷二酸中的至少一種。在一些實(shí)施方案中，提供了如本文所述的從水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法，其中該方法不包括納濾步驟。在一些情況下，該方法可包括納濾步驟。在一些情況下，該方法可以不包括多元羧酸的結(jié)晶。在一些情況下，所述水溶液可為發(fā)酵液。本文提供了上文或下文描述的從水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的任何方法，該方法包括：(a)降低包含該多元羧酸的水性介質(zhì)的pH，使得該多元羧酸從所述介質(zhì)中沉淀出來(lái)；(b)使沉淀的多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑在一個(gè)或多個(gè)選定的溫度下接觸；(c)從所述至少一種合適的有機(jī)溶劑中分離該多元羧酸；以及(d)收集純化的多元羧酸。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，該方法在以下步驟(a)與(b)之間包括分離過程：(a)降低包含所述多元羧酸的水性介質(zhì)的pH，使得所述多元羧酸從所述介質(zhì)中沉淀出來(lái)；(b)使沉淀的多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑在一個(gè)或多個(gè)選定的溫度下接觸。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中所述水溶液為發(fā)酵液。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中所述感興趣的多元羧酸為二羧酸。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中所述多元羧酸選自杜鵑花酸、皮脂酸、UDDA、DDDA、巴西基酸、TDDA、十六碳二酸、創(chuàng)傷酸、十八烷二酸、9-十八碳烯二酸、十八碳-c6,c9-二烯-1,18-二酸鹽、十八碳-c3,c6,c9-三烯-1,18-二酸鹽和二十烷二酸。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中所述多元羧酸為DDDA。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中所述至少一種有機(jī)溶劑為酸。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中所述至少一種有機(jī)溶劑為乙酸。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中將所述至少一種有機(jī)溶劑加熱以使所述感興趣的多元羧酸溶解。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中在加熱后使所述有機(jī)溶劑緩慢冷卻，從而使所述感興趣的多元羧酸沉淀。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中所述多元羧酸為DDDA，所述有機(jī)溶劑為乙酸且被加熱至約70攝氏度，隨后冷卻至約25攝氏度。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，該方法進(jìn)一步包括一個(gè)或多個(gè)分離步驟。在一些實(shí)施方案中是上文或下文描述的任何方法，其中按重量：重量計(jì)，與起始混合物相比，所述多元羧酸的純度至少高5％。在一些實(shí)施方案中是一種包含感興趣的多元羧酸的組合物，其中所述感興趣的多元羧酸根據(jù)上文或下文描述的任何方法制得。在一些實(shí)施方案中是一種組合物，其中所述感興趣的多元羧酸為DDDA。在以下描述、實(shí)施例和權(quán)利要求中進(jìn)一步描述了某些非限制性的方面和實(shí)施方案。具體實(shí)施方式本文提供了從分子的混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法。在某些實(shí)施方案中，可以通過在存在至少一種非石油碳源的水性介質(zhì)如發(fā)酵液中培養(yǎng)產(chǎn)生感興趣的多元羧酸的微生物來(lái)產(chǎn)生感興趣的多元羧酸?？赏ㄟ^降低水性介質(zhì)的pH，將感興趣的多元羧酸暴露于至少一種合適的有機(jī)溶劑，以及任選地改變所述至少一種合適的有機(jī)溶劑與感興趣的多元羧酸的混合物的溫度，來(lái)純化感興趣的多元羧酸。在一些實(shí)施方案中，可選擇性地采用諸如離心或過濾等額外的處理步驟來(lái)進(jìn)一步純化感興趣的多元羧酸。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“感興趣的多元羧酸”和“目標(biāo)多元羧酸”是指有待從有機(jī)分子混合物和/或其他有機(jī)物質(zhì)如細(xì)胞團(tuán)塊中純化或分離的多元羧酸。本文中感興趣的多元羧酸具有至少八個(gè)碳并且具有至少兩個(gè)且任選更多個(gè)羧基基團(tuán)。感興趣的多元羧酸可以是部分多元羧酸鹽種類的形式，其中一個(gè)或多個(gè)羧基基團(tuán)是鹽形式而非質(zhì)子化的，而其他羧基基團(tuán)為酸形式；鹽形式可包括鈉陽(yáng)離子、鉀陽(yáng)離子、其組合或任何其他陽(yáng)離子或帶正電荷的種類。本文還包括完全質(zhì)子化(酸)形式的感興趣的多元羧酸和全鹽形式的感興趣的多元羧酸。本文包括的“感興趣的多元羧酸”在25攝氏度下以等于或低于1克/升的濃度可溶于水，并且在70攝氏度下以至少10克/升的濃度可溶于水與有機(jī)溶劑(其中該有機(jī)溶劑可與水混溶)的混合物。在某些實(shí)施方案中，感興趣的多元羧酸的長(zhǎng)度為至少8個(gè)碳并且可任選地為最多24個(gè)或更多個(gè)碳，其中多元羧酸中碳的總數(shù)可以是奇數(shù)(9、11、13、15、17、19、21、23、25等)或偶數(shù)(8、10、12、14、16、18、20、22、24、26等)。本發(fā)明的多元羧酸的羧基基團(tuán)可位于分子的任何碳上，例如在分子的末端碳(“α”或“ω”位置)上、在一個(gè)末端碳和一個(gè)或多個(gè)近末端(支鏈)碳上，諸如在1位和2位(即，1,2-二羧酸或“αβ”二羧酸)，或僅在近末端(支鏈或“內(nèi)部”)碳上。本文包括的多元羧酸的非限制性實(shí)例為二羧酸，諸如1,8-辛二酸(“軟木酸”)、1,10-癸二酸(“皮脂酸”)、1,12-十二烷二酸(“DDDA”和“月桂二酸”)、1,14-十四烷二酸(“TDDA”和“肉豆蔻酸”)、1,16-十六烷二酸(“棕櫚酸”)、1,18-十八烷二酸(“硬脂酸”)、二十烷二酸、油二酸(oleicdiacid)、杜鵑花酸、巴西基酸、十一烷二酸、棕櫚油二酸、亞油二酸、亞麻二酸和庚二酸。任選地，本發(fā)明的多元羧酸可以是飽和的或不飽和的，并且如果是不飽和的，其可以具有一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)或更多個(gè)雙鍵。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“混合物”是指在水性環(huán)境中彼此接觸的兩種或更多種不同的有機(jī)分子和/或有機(jī)物質(zhì)，其中至少一種化合物或物質(zhì)為感興趣的多元羧酸。在一些實(shí)施方案中，混合物可包含兩種或更多種不同的多元羧酸，其中一種為感興趣的多元羧酸。在一些實(shí)施方案中，混合物中可存在除多元羧酸以外的有機(jī)分子，例如，一種或多種一元羧酸、一種或多種ω羥基酸、一種或多種醇、醛、酸、酯、烷烴、烯烴、炔烴、芳香化合物、多肽、肽、脂質(zhì)、糖、碳水化合物和/或多核酸分子。在一些實(shí)施方案中，有機(jī)物質(zhì)如細(xì)胞和/或細(xì)胞碎片可存在于混合物中。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“純化的”、“純化”“純的”、“基本純的”或“基本純化的”是指包含感興趣的多元羧酸的溶液、固體或半固體物質(zhì)，該溶液或固體或半固體物質(zhì)從包含感興趣的多元羧酸的起始混合物獲得，并且其中按重量：重量(例如將起始混合物中總固體的重量與已部分或完全純化的混合物中總固體的重量進(jìn)行比較)、重量：體積(例如，g/L)或體積：體積計(jì)，與含有感興趣的多元羧酸的原始起始混合物相比，包含感興趣的多元羧酸的溶液或固體或半固體物質(zhì)的純度至少高5％且高達(dá)95％或更高。在一些實(shí)施方案中，與起始混合物相比，純化的多元羧酸的純度可以高5.1-6％、6.1-7％、7.1-8％、8.1-9％、9.1-10％、10.1-11％、11.1-12％、12.1-13％、13.1-14％、14.1-15％、15.1-16％、16.1-17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、31-34％、35％、36-39％、40％、41-44％、45％、46-49％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或超過95％。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“分離的”是指包含一種或多種多元羧酸的混合物，其中按重量：重量、重量：體積(例如，g/L)或體積：體積計(jì)，與含有感興趣的多元羧酸的原始起始混合物相比，多元羧酸的純度至少高50％。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“有機(jī)溶劑”是指部分水性液體或非水性液體，或者兩種或更多種非水性液體的組合，該非水性液體可與水性液體至少部分混溶并具有2至30個(gè)或更多個(gè)碳。本文中特別有用的有機(jī)溶劑是感興趣的多元羧酸在70攝氏度下以至少10克/升的濃度可溶于其中的那些有機(jī)溶劑，并且其中該有機(jī)溶劑可與水混溶。有機(jī)溶劑的非限制性實(shí)例包括極性和非極性的、質(zhì)子和質(zhì)子惰性的有機(jī)溶劑。在此適用的一種或多種有機(jī)溶劑的選擇通常取決于待純化的感興趣的多元羧酸的分子特征，諸如碳的數(shù)目、羧基基團(tuán)的數(shù)目和位置、是否存在不飽和、是否存在其他官能團(tuán)等。在此適用的有機(jī)溶劑的非限制性實(shí)例包括冰醋酸?？梢允褂貌慌c感興趣的多元羧酸或酸反應(yīng)的有機(jī)溶劑；這樣的有機(jī)溶劑包括例如甲烷、乙烷、戊烷、己烷、辛烷、癸烷、十二烷、十一烷，以及亞甲基(methene)、乙烯、丁烯、戊烯、己烯、辛烯、癸烯、十二碳烯、十一碳烯等。也可以使用炔，諸如己炔、辛炔、癸炔等。對(duì)于一些實(shí)施方案有用的還有冰醋酸、聚乙二醇和其他二醇。在某些實(shí)施方案中，芳香化合物和線性支鏈化合物可能是有用的。在一些實(shí)施方案中，可使用Hansen溶解度參數(shù)模型來(lái)確定最適用于純化感興趣的多元羧酸的有機(jī)溶劑。對(duì)于被稱為十二烷二酸(“DDDA”)的12個(gè)碳的αω多元羧酸和與DDDA相似的其他感興趣的多元羧酸，以下列出的有機(jī)溶劑可用于純化過程：醋酸(冰醋酸)、正丁醇、仲丁醇、異丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇、3-戊醇、1-己醇、2-己醇、3-己醇、1-庚醇、1-辛醇、丁酮、3-戊酮、丙酮和乙酸乙酯。在一些實(shí)施方案中，以下列出的有機(jī)溶劑也可能是有用的：環(huán)化的有機(jī)分子，諸如環(huán)己烷、環(huán)己烯、環(huán)癸烷、環(huán)癸烯等，也作為任選有用的有機(jī)溶劑包括在本文中。本文所包括的其他有機(jī)溶劑為石油餾出物，如煤油?？梢园大w積：體積、重量：重量、體積：重量或重量：體積計(jì)，將本技術(shù)的有機(jī)溶劑添加至包含待純化的感興趣多元羧酸的混合物中。通常，將按體積：體積進(jìn)行確定。任選地，可以將1倍體積的混合物與0.01、0.05、0.10、0.15、0.20、25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、99或更多倍體積(包括前述數(shù)目之間的任何體積量和大于99的體積量)的一種或多種溶劑組合。此外，可部分地基于感興趣的多元羧酸的所需純化水平，適當(dāng)采用這些體積的分?jǐn)?shù)(諸如9.5、25.25、37.75等)。在某些實(shí)施方案中，使用可行的最少量的有機(jī)溶劑，從而使有機(jī)溶劑的環(huán)境影響最小化。在可能的情況下，可通過連續(xù)的純化循環(huán)來(lái)使用以及重復(fù)使用有機(jī)溶劑，以作為降低環(huán)境影響的手段。在一些實(shí)施方案中，可以在采用第一有機(jī)溶劑的同時(shí)或之后使用第二有機(jī)溶劑。在一些實(shí)施方案中，可以在將所述至少一種有機(jī)溶劑用于感興趣的多元羧酸的純化之前和/或期間對(duì)其進(jìn)行加熱。如本文所用的，“加熱”有機(jī)溶劑或“加熱的”有機(jī)溶劑是指在將任何有機(jī)溶劑添加至這類包含感興趣的多元羧酸的介質(zhì)之前，使該有機(jī)溶劑的溫度高于包含感興趣的多元羧酸的介質(zhì)或混合物的溫度。在一些實(shí)施方案中，將有機(jī)溶劑加熱至比將添加該有機(jī)溶劑的包含感興趣的多元羧酸的介質(zhì)的溫度高1、2、3、4、5、6、7、8、9或10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70度或超過70度。在此是否使用加熱的有機(jī)溶劑的決定通常取決于感興趣的多元羧酸在這樣的有機(jī)溶劑中的溶解度。對(duì)于大多數(shù)有機(jī)溶劑，感興趣的多元羧酸在有機(jī)溶劑中的溶解度隨著溫度的升高而增加。在一些實(shí)施方案中，將所述至少一種有機(jī)溶劑加熱至適于使感興趣的多元羧酸的溶解最大化而沒有明顯溶劑損失的溫度。在一些實(shí)施方案中，可以在等于或大于大氣壓的壓力下進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)純化步驟。在某些實(shí)施方案中，在用一種或多種有機(jī)溶劑處理感興趣的多元羧酸之前，將包含感興趣的多元羧酸的混合物的pH降低至較低的pH。如本文所用的“較低的pH”是指比混合物在經(jīng)受pH降低之前的pH低的任何pH。任選地，較低的pH具有比感興趣的多元羧酸的最低pKa低至少0.5、1.0、1.5、2.0或超過2.0個(gè)pH單位的值。較低的pH通常低于5.0，有時(shí)為4.0、3.5、3.0、2.5、2.0、1.5，或前述值之間的pH。在某些實(shí)施方案中，較低的pH通常是低于感興趣的多元羧酸的pKa的pH，并且在一些實(shí)施方案中，較低的pH低于感興趣的多元羧酸的最低pKa。在某些實(shí)施方案中，較低的pH比感興趣的多元羧酸的pKa1低0.1、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0或甚至更多個(gè)pH單位。雖然任何酸，如有機(jī)酸(例如乙酸、丁酸、甲酸等)或無(wú)機(jī)酸(例如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等)均可用于降低包含感興趣的多元羧酸的混合物的pH，但經(jīng)常使用的酸是那些被認(rèn)為是強(qiáng)酸(諸如硫酸)的酸和/或那些不具有可與感興趣的多元羧酸反應(yīng)的反應(yīng)性基團(tuán)的酸。因此，在許多實(shí)施方案中，通常使用無(wú)機(jī)酸。在本文的某些實(shí)施方案中，有時(shí)在將包含感興趣的多元羧酸的混合物暴露于較低的pH與隨后將其暴露于有機(jī)溶劑之間實(shí)施“一個(gè)分離步驟”或“多個(gè)分離步驟”。這樣的分離步驟可任選地包括以下的一種或多種：離心、過濾、在任何溫度下用純水或其他溶液洗滌、結(jié)晶、蒸餾或傾析，和/或生化分離化學(xué)中已知且常用的其他方法。分離步驟有時(shí)包括多個(gè)子步驟。當(dāng)分離步驟包括過濾時(shí)，可使用一種或多種類型的過濾。有用的過濾類型和系統(tǒng)的實(shí)例包括但不限于微濾、納濾、超濾和滲濾。本文中對(duì)一些實(shí)施方案有用的過濾系統(tǒng)包括但不限于GEAR型橫流過濾系統(tǒng)(www.geafiltration.com)、GEOsmonicsGH牌超濾系統(tǒng)或GK牌超濾系統(tǒng)(www.gewater.com)、HydranauticsNF245納濾系統(tǒng)(www.hydranautics.com)以及TriSep(www.trisep.com)XN45納濾系統(tǒng)、TrisepUA-60系統(tǒng)、TrisepUE-10系統(tǒng)或KochHFK328系統(tǒng)(www.kochfilter.com)。合適的過濾程序和系統(tǒng)的選擇通常取決于感興趣的多元羧酸與存在于特定混合物中的污染性有機(jī)分子、鹽等相比的分子大小、凈電荷和/或極性。當(dāng)分離步驟包括一個(gè)或多個(gè)層析步驟時(shí)，本文中有用的層析的實(shí)例包括但不限于離子交換(陽(yáng)離子和/或陰離子)層析、大小排阻層析、吸附層析(諸如基于聚合物的[二乙烯基苯]、活性炭或硅藻土)、親和層析、反相層析、模擬移動(dòng)床層析、快速蛋白質(zhì)液相層析、逆流層析、置換層析、高效層析或膨脹床層析?？梢允褂酶鞣N方法，諸如具有UV檢測(cè)的高效液相層析、氣相層析、反相液相層析等(如在dionex.com和phenomenex.com中描述的)來(lái)確定存在于混合物、溶液或有機(jī)溶劑中的感興趣多元羧酸的量。本發(fā)明的實(shí)施方案包括使用低pH與諸如冰醋酸等微極性有機(jī)溶劑的組合來(lái)純化具有約8至16個(gè)碳的感興趣的多元羧酸。特別地，諸如十二烷二酸、皮脂酸、軟木酸、巴西基酸、肉豆蔻二酸和棕櫚酸等二羧酸可通過以下步驟進(jìn)行純化：(i)將包含感興趣的多元羧酸的混合物暴露于1.0至約4.0范圍的pH，以使多元羧酸從混合物溶液中沉淀出來(lái)；(ii)以混合物體積：有機(jī)溶劑體積為1:1的比例且最高1:3、1:4、1:5、1:6、1:17、1:8、1:9、1:10或甚至超過1:10的比例(混合物與溶劑的體積比)使沉淀的多元羧酸重懸于合適的有機(jī)溶劑如冰醋酸中；(iii)對(duì)感興趣的多元羧酸與有機(jī)溶劑的溶液進(jìn)行加熱；(iv)將加熱的溶液離心以去除雜質(zhì)；(v)降低離心溶液的溫度以使感興趣的多元羧酸從有機(jī)溶劑中沉淀出來(lái)；以及(vi)收集沉淀的感興趣的多元羧酸。在一些實(shí)施方案中，可通過使用額外輪次的感興趣多元羧酸的結(jié)晶或添加感興趣的多元羧酸/有機(jī)溶劑的一個(gè)或多個(gè)蒸發(fā)步驟以去除某些污染物，來(lái)實(shí)現(xiàn)感興趣的多元羧酸的分離步驟或增加的純化步驟。感興趣的多元羧酸可以以晶體的形式從有機(jī)溶劑中沉淀出來(lái)，隨后可通過將混合物從晶體沉淀物蒸發(fā)、通過將晶體過濾出或通過干燥而以濃縮的形式獲得該晶體。如本文所述，可以通過在合適的溫度下使含有感興趣的多元羧酸的混合物經(jīng)受至少一種有機(jī)溶劑和低pH條件，來(lái)形成感興趣的多元羧酸鹽的晶體及其混合物。在一些實(shí)施方案中，形成的晶體的形態(tài)、形狀和大小可以取決于感興趣的多元羧酸是否完全質(zhì)子化(使得所有羧基均為酸形式)或是否一些或全部羧基為鹽形式。在一些實(shí)施方案中，用于形成晶體沉淀物的一種或多種酸的類型和一種或多種有機(jī)溶劑的類型可以影響晶體形態(tài)。在一些實(shí)施方案中，可以通過使感興趣的多元羧酸經(jīng)歷一種或多種傾析程序而使其得到進(jìn)一步純化或分離。該程序?qū)τ诙嘣人嵩诔恋砦镏星椅廴疚镌谝合嘀械那闆r通常是有效的。在一些實(shí)施方案中，可以通過使感興趣的多元羧酸經(jīng)受蒸餾條件從而從感興趣的多元羧酸中蒸餾出污染物，而使感興趣的多元羧酸得到進(jìn)一步純化。可以使用任何已知的程序進(jìn)行蒸餾，例如蒸汽蒸餾、真空蒸餾、閃蒸等。待使用的蒸餾的選擇部分地取決于相比于污染物的物理性質(zhì)，感興趣的多元羧酸的物理性質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，純化程序的每個(gè)步驟中混合物的溫度可以影響來(lái)自該步驟的感興趣的多元羧酸的所得純化程度。感興趣的多元羧酸的溶解度通常隨其所在的混合物和該混合物的溫度而變化。在本文的一些純化過程中，可以在純化過程期間一次或多次升高和/或降低溫度以有助于純化感興趣的多元羧酸。在純化的一些步驟中，溫度可以高至有機(jī)溶劑的熔解溫度，最高約200攝氏度。在純化過程的其他步驟中，溫度可以低至1攝氏度或甚至低于0攝氏度。在一些實(shí)施方案中提供了本文所述的用于純化感興趣的多元羧酸的方法，該方法包括在水性介質(zhì)中培養(yǎng)微生物以產(chǎn)生所述感興趣的多元羧酸；(a)降低包含該多元羧酸的水性介質(zhì)的pH，使得該多元羧酸從所述介質(zhì)中沉淀出來(lái)；(b)使沉淀的多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑在一個(gè)或多個(gè)選定的溫度下接觸；(c)從所述至少一種合適的有機(jī)溶劑中分離該多元羧酸；以及(d)收集純化的多元羧酸。在某些方面，所述水性介質(zhì)可為發(fā)酵液。在某些方面，該發(fā)酵液包含至少一種原料，該原料為非基于石油的碳源。在一些方面，在不使用任何基于石油的原料的情況下獲得所述多元羧酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于純化或分離感興趣的多元羧酸的過程涉及將天然地或通過遺傳工程產(chǎn)生感興趣的多元羧酸并將其分泌至培養(yǎng)基中的微生物進(jìn)行發(fā)酵。該微生物任選地為酵母，諸如耶氏酵母屬的種(Yarrowiasp.)、假絲酵母屬的種(Candidasp.)、畢赤酵母屬的種(Pichiasp.)、克魯維酵母屬的種(Klyveromycessp.)或酵母屬的種(Saccharomycessp.)，但也可使用其他微生物，諸如細(xì)菌、真菌藻類等。該微生物可以在含有一種或多種合適的碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，該碳源例如是單糖、二糖或多糖(葡萄糖、果糖、蔗糖、右旋糖等)，諸如甘油的醇，或油，或諸如月桂酸、油酸的脂肪酸，或油/脂肪酸如棕櫚油的混合物。任選地，可以采用糖類、油和/或脂肪酸的混合物作為碳源，并且可在發(fā)酵過程期間的相同時(shí)間或不同時(shí)間將這些碳源包含在培養(yǎng)基中。除了碳源之外，培養(yǎng)基通常還包含通常為酵母提取物或硫酸銨形式的氮源，某些維生素如生物素和微量的礦物質(zhì)，包括但不限于鋅、銅、硼、碘和/或錳。當(dāng)將碳源轉(zhuǎn)化為感興趣的多元羧酸時(shí)，將微生物添加至培養(yǎng)基中并在合適的pH(通常在pH5.5至7.5或8.0的范圍內(nèi))、合適的溫度(通常為25-50℃)下并在適當(dāng)水平的溶解氧的存在下(通常在攪拌下)發(fā)酵一段時(shí)間。發(fā)酵完成后，可以將微生物和含有感興趣多元羧酸的培養(yǎng)液的混合物的pH降低至4.0或更低，并任選地降低至比感興趣的多元羧酸的最低pKa低2個(gè)或更多個(gè)pH單位的pH值，并且可以將混合物進(jìn)行離心或過濾以去除細(xì)胞團(tuán)塊。這往往導(dǎo)致顯著比例的感興趣的多元羧酸與消耗的細(xì)胞團(tuán)塊及其他固體顆粒一起從溶液中沉淀出來(lái)，在此之后可以將混合物進(jìn)行離心以濃縮含有大部分感興趣的多元羧酸的沉淀物。然后可以使該沉淀物懸浮在有機(jī)溶劑中，可任選地對(duì)該有機(jī)溶劑進(jìn)行加熱，以使感興趣的多元羧酸重新溶解。含有有機(jī)溶劑的混合物隨后可經(jīng)歷分離步驟，諸如過濾或離心或兩者，并且可任選地在相同的升高的溫度下進(jìn)行離心和/或過濾步驟。在該分離步驟之后，可以將包含大部分感興趣的多元羧酸的液相冷卻至室溫或更低的溫度，在這種情況下，感興趣的多元羧酸將可能沉淀，并且可以使該沉淀物重懸并經(jīng)歷諸如結(jié)晶等額外的分離步驟，以將其從其他污染物中進(jìn)一步純化出來(lái)。實(shí)施例以下闡述的實(shí)施例說(shuō)明了某些實(shí)施方案，而并非意在以任何方式限制本文所述的發(fā)明。實(shí)施例1在室溫(20至25℃)和70℃下，對(duì)于水以及乙酸與水的組合(80％體積/體積)，確定多元羧酸十二烷二酸(“DDDA”)和皮脂酸的溶解度。十二烷二酸和皮脂酸從Sigma-Aldrich(St.Louis，MS，USA)獲得。將每種多元羧酸添加至水或乙酸溶液中，同時(shí)進(jìn)行混合并保持在合適的溫度下直到溶液變得過飽和(如在添加多元羧酸后至少20分鐘目測(cè)確定的)。如表1所示，DDDA在水中具有小于1g/L的溶解度，但在70℃下在乙酸溶液中的溶解度超過100g/L。皮脂酸在70℃下在乙酸溶液中也具有超過100g/L的溶解度，但在70℃下在水中的溶解度小于3g/L。DDDA皮脂酸H2O23.0℃<0.03g/L<0.10g/L70.0℃<0.12g/L<2.6g/L80％乙酸20.0℃<0.20g/L<0.20g/L70.0℃>100g/L>100g/L實(shí)施例2：由工程微生物產(chǎn)生DDDA將假絲酵母屬菌株sAA2178的一毫升冷凍甘油儲(chǔ)備物(如國(guó)際專利申請(qǐng)PCT/US2013/076664中所公開的)在無(wú)菌條件下接種至含有約80mlSP92培養(yǎng)基(配方如下)的500ml帶擋板的搖瓶中，并用泡沫塞蓋住該搖瓶，并將該搖瓶放置在搖床上在30℃和250rpm下?lián)u動(dòng)約24小時(shí)。使用該培養(yǎng)物接種三個(gè)含有約80mlSP92培養(yǎng)基的500ml帶擋板的搖瓶至600nm處的初始光密度為0.4，并在約30℃和250rpm下溫育24小時(shí)。然后使用每種培養(yǎng)物在2.5L帶擋板的搖瓶中接種1.5升SP92(75g/L右旋糖)至600nm處的初始光密度為2，并在約30℃和250rpm下溫育24小時(shí)。使用這些培養(yǎng)物在300L工作體積的攪拌槽發(fā)酵罐中接種約200ml含有約40.5g/L右旋糖的1.5xKA1培養(yǎng)基。將發(fā)酵罐保持在約35℃，攪拌保持在約400rpm，氣流為約1VVM，并用NaOH作為堿將pH設(shè)定為約5.8。一旦右旋糖耗盡，則將pH增加至6.0，在最初二十四小時(shí)的發(fā)酵期間，分別以約1.35g/L-h和1.125g/L-h將葡萄糖和月桂酸乙酯進(jìn)料至發(fā)酵罐中。將月桂酸乙酯的進(jìn)料增加至約1.92g/L，并運(yùn)行額外的110hr。通過GC分析確定，所得發(fā)酵液中十二烷二酸的濃度為約135g/L。SP92培養(yǎng)基(每升)材料不含氨基酸的YNB6.7g酵母提取物3.0g硫酸銨3.0g磷酸二氫鉀1.0g磷酸氫二鉀1.0g防泡劑0.060gDeKA-2培養(yǎng)基(每升)硫酸銨10.5g磷酸二氫鉀7.65g硫酸鎂1.54g硫酸鈣二水合物0.248g無(wú)水檸檬酸0.09g硫酸亞鐵0.06g葡萄糖40.5g生物素，1000x0.3ml微量元素，100x(見下表)1.5ml去離子水至1升微量元素硼酸0.900g硫酸銅0.110g碘化鉀0.180g硫酸錳一水合物0.806g鉬酸鈉0.360g硫酸鋅0.720g去離子水至1升實(shí)施例3：從發(fā)酵液中純化DDDA通過在攪拌的同時(shí)向發(fā)酵液中逐滴添加未稀釋的硫酸，將約7800g發(fā)酵液(含有約13.5重量％的DDDA)酸化至在30℃下最終pH小于2.5。然后將該發(fā)酵液在3300g下離心約10分鐘，并棄去上清液。將沉淀物重懸于約7900g冰醋酸中，并在75℃下保持1小時(shí)，隨后將該混合物在約3300g下離心約5分鐘。離心后，收集上清液(其含有大部分DDDA)并棄去沉淀物。然后使乙酸溶液緩慢冷卻至30℃過夜。將所得DDDA晶體收集在布氏漏斗中，每次用8升的水洗滌4次。從最終的洗滌獲得約853gDDDA，并且該DDDA具有約92％(w/w)的純度。該步驟導(dǎo)致與起始發(fā)酵液混合物相比大約7倍的DDDA純化。實(shí)施例4：硬脂酸的酯化將可商購(gòu)的硬脂酸與乙醇以1:3摩爾比混合，并添加1mol％H2SO4作為催化劑。所用的乙醇混合物含有5％甲醇作為變性劑。將混合物加熱至70℃并攪拌5小時(shí)，隨后將溫度降至55℃并攪拌8小時(shí)。然后停止攪拌，以使水層與硬脂酸乙酯層分離。硬脂酸乙酯層的GC分析顯示脂肪酸含量為94％，其中86％為甲酯或乙酯形式。組分質(zhì)量百分比硬脂酸乙酯74硬脂酸甲酯8硬脂酸11乙醇1棕櫚酸1未知5實(shí)施例5：由工程微生物產(chǎn)生十八烷二酸(“ODDA”)將假絲酵母屬酵母菌株sAA2178的一毫升冷凍甘油儲(chǔ)備物(在國(guó)際專利申請(qǐng)PCT/US2013/076664中公開)在無(wú)菌條件下接種至含有約80mlSP92培養(yǎng)基(在以上實(shí)施例2中描述的)的500ml帶擋板的搖瓶中，并用泡沫塞蓋住該搖瓶，并將該搖瓶放置在搖床上在30℃和250rpm下?lián)u動(dòng)約24小時(shí)。使用該培養(yǎng)物接種三個(gè)含有約80mlSP92培養(yǎng)基的500ml帶擋板的搖瓶至在600nm處的初始光密度為0.4。將該搖瓶在約30℃和250rpm下溫育24小時(shí)，之后將三個(gè)搖瓶合并。將合并的培養(yǎng)物分成三等份，用來(lái)接種三個(gè)含有SP92(75g/L右旋糖)的2.5L帶擋板的搖瓶并且在600nm處的初始光密度為2；將這些搖瓶在約30℃和250rpms下溫育約24小時(shí)。使用這些培養(yǎng)物在300L工作體積的攪拌槽發(fā)酵罐中接種約200L含有約40.5g/L右旋糖的1.5xKA培養(yǎng)基(在實(shí)施例2中描述的)。將發(fā)酵罐保持在約34℃，攪拌保持在約400rpm，氣流為約1VVM，并用NaOH作為堿將pH設(shè)定為約5.8。一旦右旋糖耗盡，則將pH增加至6.0，在100小時(shí)的發(fā)酵期間，分別以約1.35g/L-h和0.9g/L-h將葡萄糖和硬脂酸乙酯混合物(74％硬脂酸乙酯、18％硬脂酸、8％硬脂酸甲酯)進(jìn)料至發(fā)酵罐中，但是從第40小時(shí)至第48小時(shí)，將硬脂酸乙酯混合物的速率增加至1.8g/Lhr。通過GC分析確定，所得發(fā)酵液中十二烷二酸的濃度為約40g/L。實(shí)施例6：從發(fā)酵液中純化ODDA將約1.51kg30％H2SO4和2.12kg98％H2SO4添加至從前述實(shí)施例獲得的274.6kg發(fā)酵液中，并將pH調(diào)節(jié)至約2.56。使所得發(fā)酵液經(jīng)歷采用0.1微米不銹鋼Graver膜的切向流過濾，直到將固體濃縮至約152.1kg。然后通過采用四個(gè)1微米聚丙烯氈袋(過濾器來(lái)源，Hampsburg，PA)的死端式過濾將所得發(fā)酵液進(jìn)一步脫水直至完全脫水。然后通過使空氣穿過該袋將固體部分干燥，隨后在真空烘箱(100-150mbar，70℃)下最終干燥，直至通過KarlFisher方法(astm.org/standards/E203.htm)測(cè)得的水含量小于0.5％。將這些干固體與冰醋酸以1kg固體/7kg乙酸的比例混合，并將該混合物加熱至70℃并保持在該溫度下混合30分鐘。通過使用200微米燒結(jié)(frit)布氏漏斗過濾將細(xì)胞碎片去除，隨后將ODDA/乙酸濾液返回至70℃保持15分鐘。使混合物冷卻至室溫過夜。通過使用4-7微米Whatman597纖維素濾紙過濾來(lái)回收沉淀的ODDA，并用水洗滌兩次至原始體積的100％。將回收的粗ODDA收集在托盤中并在溫?zé)岬恼婵蘸嫦渲懈稍铩Ｋ貌牧蠟榧s69.6％十八烷二酸。該步驟導(dǎo)致與起始發(fā)酵液相比大約17倍的ODDA純化。實(shí)施例7：選擇的實(shí)施方案下文列出的是本發(fā)明實(shí)施方案的非限制性實(shí)例。A1.一種從水性混合物中純化感興趣的多元羧酸的方法，其包括：(a)降低包含該多元羧酸的水性介質(zhì)的pH，使得該多元羧酸從所述介質(zhì)中沉淀出來(lái)；(b)使沉淀的多元羧酸與至少一種合適的有機(jī)溶劑在一個(gè)或多個(gè)選定的溫度下接觸；(c)從所述至少一種合適的有機(jī)溶劑中分離該多元羧酸；以及(d)收集純化的多元羧酸。A2.根據(jù)實(shí)施方案A1至A4中任一項(xiàng)所述的方法，其在(a)與(b)之間包括分離過程。A3.根據(jù)實(shí)施方案A1所述的方法，其中所述水溶液為發(fā)酵液。A4.根據(jù)實(shí)施方案A1-A3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述感興趣的多元羧酸為二羧酸。A5.根據(jù)實(shí)施方案A4所述的方法，其中所述多元羧酸選自杜鵑花酸、皮脂酸、UDDA、DDDA、巴西基酸、TDDA、十六碳二酸、創(chuàng)傷酸、十八烷二酸、9-十八碳烯二酸、十八碳-c6,c9-二烯-1,18-二酸鹽、十八碳-c3,c6,c9-三烯-1,18-二酸鹽和二十烷二酸。A6.根據(jù)實(shí)施方案A5所述的方法，其中所述多元羧酸為DDDA。A7.根據(jù)實(shí)施方案A1至A6中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述有機(jī)溶劑為酸。A8.根據(jù)實(shí)施方案A7所述的方法，其中所述有機(jī)溶劑為乙酸。A9.根據(jù)實(shí)施方案A8所述的方法，其中將所述有機(jī)溶劑加熱以使所述感興趣的多元羧酸溶解。A10.根據(jù)實(shí)施方案A9所述的方法，其中在加熱后使所述有機(jī)溶劑緩慢冷卻，從而使所述感興趣的多元羧酸沉淀。A11.根據(jù)實(shí)施方案A10所述的方法，其中所述多元羧酸為DDDA，所述有機(jī)溶劑為乙酸，該乙酸被加熱至約70攝氏度，隨后冷卻至約25攝氏度。A12.根據(jù)實(shí)施方案A1-A11中任一項(xiàng)所述的方法，其進(jìn)一步包括一個(gè)或多個(gè)分離步驟。A13.根據(jù)實(shí)施方案A1-A12中任一項(xiàng)所述的方法，其中按重量：重量計(jì)，與起始混合物相比，所述多元羧酸的純度至少高5％。B1.一種包含感興趣的多元羧酸的組合物，其中該感興趣的多元羧酸根據(jù)實(shí)施方案A1的方法制得。B2.根據(jù)實(shí)施方案B1所述的組合物，其中所述感興趣的多元羧酸為DDDA。本文述及的各專利、專利申請(qǐng)、出版物和文件的全文通過引用并入本文。對(duì)上述專利、專利申請(qǐng)、出版物和文件的引用并非承認(rèn)上述任何一個(gè)屬于相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)，也不視作承認(rèn)這些出版物或文件的內(nèi)容或日期?？梢栽诓幻撾x該技術(shù)的基本方面的情況下對(duì)以上內(nèi)容作出修改。雖然已經(jīng)參照一個(gè)或多個(gè)具體實(shí)施方案相當(dāng)詳細(xì)地描述了該技術(shù)，但本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，可對(duì)本申請(qǐng)具體公開的實(shí)施方案作出改變，而這些修改和改進(jìn)仍落在該技術(shù)的范圍和構(gòu)思內(nèi)。本文適當(dāng)?shù)厥纠悦枋龅募夹g(shù)可在缺乏本文未具體公開的任何元素的情況下實(shí)施。因此，例如在本文中的各情況下，術(shù)語(yǔ)“包含”、“基本上由…組成”和“由…組成”中的任一個(gè)可替換為另兩個(gè)術(shù)語(yǔ)中的任一個(gè)。所用的術(shù)語(yǔ)和表述是描述性而非限制性地使用的，此類術(shù)語(yǔ)和表述的使用不排除所示和所述特征或其部分的任何等同物，并且各種修改在所請(qǐng)求保護(hù)的技術(shù)的范圍內(nèi)是可能的。術(shù)語(yǔ)“一個(gè)”或“一種”可指一個(gè)或多個(gè)其所修飾的元素(例如，“一種試劑”可表示一種或多種試劑)，除非上下文明確描述是所述元素中的一個(gè)或所述元素中的多于一個(gè)。本文所用的術(shù)語(yǔ)“約”是指在基礎(chǔ)參數(shù)的10％以內(nèi)的數(shù)值(即，加或減10％)，而在一串?dāng)?shù)值開始處使用的術(shù)語(yǔ)“約”修飾每一個(gè)數(shù)值(即，“約1、2和3”是指約1、約2和約3)。例如，“約100克”的重量可包括90克至110克的重量。此外，在本文中描述一列數(shù)值時(shí)(例如，約50％、60％、70％、80％、85％或86％)，該列表包括其所有中間值和分?jǐn)?shù)值(例如，54％、85.4％)。因此，應(yīng)當(dāng)理解，雖然已通過代表性實(shí)施方案和任選的特征具體公開了本發(fā)明的技術(shù)，但本領(lǐng)域技術(shù)人員可以想到本文所公開的概念的修改和改變，此類修改和改變被認(rèn)為落在該技術(shù)的范圍內(nèi)。該技術(shù)的某些實(shí)施方案在隨附的權(quán)利要求書中闡述。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3