本發(fā)明涉及食用菌多糖提取領(lǐng)域,具體為一種食用菌多糖提取工藝。
背景技術(shù):
菌多糖提取時(shí)的工藝參數(shù)不同,多糖得率差異很大,為提高多糖得率,進(jìn)行提取工藝參數(shù)的篩選是很重要的。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明針對(duì)以上不足之處,提供一種食用菌多糖提取工藝,多糖得率最高。用此工藝提取和純化多糖,可得到理想的結(jié)果。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:一種食用菌多糖提取工藝,包含有如下步驟:
(1)將原料洗干凈,切成小塊放入盤中,在60℃條件下干燥至恒重,經(jīng)24小時(shí)后取出,烘干后放在研缽里磨成粉末,用紙包好待用;
(2)在分析天平上準(zhǔn)確稱取2g粉末放入大試管中,加適量的水浸泡30分鐘,使粉末充分吸水膨脹,便于多糖的浸出,減少蒸煮的時(shí)間;
(3)將復(fù)水的漿體里加入蒸餾水,使浸提比分別為1:10-30, 將大試管放入沸水浴中蒸煮1-3小時(shí),使菌多糖被充分浸提出來,然后冷卻,將浸提液倒入離心管離心;
(4)將 蒸 煮 液 置 于 離 心 機(jī) 中 以4500r/min的速度,離心 15min,然后將上清液加熱濃縮,直至濾液體積降為原來的四分之一,再將濃縮液轉(zhuǎn)
入大試管中,加3倍體積的 10%H2O2加熱脫色,使淡黃色褪去;
(5)將脫色液倒入分液漏斗中,用Sevage法除去蛋白質(zhì),即加入氯仿和正丁醇(5:2)0.5倍量,振蕩萃取,取上層液,反復(fù)萃取2-3次至游離蛋白質(zhì)完全去除,并用茚三酮檢驗(yàn);
(6)將萃取液倒入大試管中,加入95%乙醇至50%-80%飽和度,使多糖與乙醇生成水不溶性化合物,靜置過夜,以3000r/min,離心15min并用丙酮漂洗沉淀兩次,除去其中的脂類和色素。干燥采用烘箱干燥法,將沉淀物轉(zhuǎn)入鋁盒中,放入干燥箱70℃干燥15h。
優(yōu)選的,一種食用菌多糖提取工藝,包含有如下步驟:
(1)將原料洗干凈,切成小塊放入盤中,在60℃條件下干燥至恒重,經(jīng)24小時(shí)后取出,烘干后放在研缽里磨成粉末,用紙包好待用;
(2)在分析天平上準(zhǔn)確稱取2g粉末放入大試管中,加適量的水浸泡30分鐘,使粉末充分吸水膨脹,便于多糖的浸出,減少蒸煮的時(shí)間;
(3)將復(fù)水的漿體里加入蒸餾水,使浸提比分別為1:20, 將大試管放入沸水浴中蒸煮2小時(shí),使菌多糖被充分浸提出來,然后冷卻,將浸提液倒入離心管離心;
(4)將 蒸 煮 液 置 于 離 心 機(jī) 中 以4500r/min的速度,離心 15min,然后將上清液加熱濃縮,直至濾液體積降為原來的四分之一,再將濃縮液轉(zhuǎn)
入大試管中,加3倍體積的 10%H2O2加熱脫色,使淡黃色褪去;
(5)將脫色液倒入分液漏斗中,用Sevage法除去蛋白質(zhì),即加入氯仿和正丁醇(5:2)0.5倍量,振蕩萃取,取上層液,反復(fù)萃取3次至游離蛋白質(zhì)完全去除,并用茚三酮檢驗(yàn);
(6)將萃取液倒入大試管中,加入95%乙醇至70%飽和度,使多糖與乙醇生成水不溶性化合物,靜置過夜,以3000r/min,離心15min并用丙酮漂洗沉淀兩次,除去其中的脂類和色素。干燥采用烘箱干燥法,將沉淀物轉(zhuǎn)入鋁盒中,放入干燥箱70℃干燥15h。
本發(fā)明的有益效果是:提取時(shí)間適合,乙醇濃度75%,原料和水的比率在1:20時(shí),多糖的提取率最高。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
一種平菇多糖提取工藝,包含有如下步驟:
(1)將平菇洗干凈,切成小塊放入盤中,在60℃條件下干燥至恒重,經(jīng)24小時(shí)后取出,烘干后放在研缽里磨成粉末,用紙包好待用;
(2)在分析天平上準(zhǔn)確稱取2g粉末放入大試管中,加適量的水浸泡30分鐘,使粉末充分吸水膨脹,便于多糖的浸出,減少蒸煮的時(shí)間;
(3)將復(fù)水的漿體里加入蒸餾水,使浸提比分別為1:10, 將大試管放入沸水浴中蒸煮1小時(shí),使菌多糖被充分浸提出來,然后冷卻,將浸提液倒入離心管離心;
(4)將 蒸 煮 液 置 于 離 心 機(jī) 中 以4500r/min的速度,離心 15min,然后將上清液加熱濃縮,直至濾液體積降為原來的四分之一,再將濃縮液轉(zhuǎn)
入大試管中,加3倍體積的 10%H2O2加熱脫色,使淡黃色褪去;
(5)將脫色液倒入分液漏斗中,用Sevage法除去蛋白質(zhì),即加入氯仿和正丁醇(5:2)0.5倍量,振蕩萃取,取上層液,反復(fù)萃取3次至游離蛋白質(zhì)完全去除,并用茚三酮檢驗(yàn);
(6)將萃取液倒入大試管中,加入95%乙醇至50%飽和度,使多糖與乙醇生成水不溶性化合物,靜置過夜,以3000r/min,離心15min并用丙酮漂洗沉淀兩次,除去其中的脂類和色素。干燥采用烘箱干燥法,將沉淀物轉(zhuǎn)入鋁盒中,放入干燥箱70℃干燥15h。
實(shí)施例2
一種雙孢菇多糖提取工藝,包含有如下步驟:
(1)將雙孢菇洗干凈,切成小塊放入盤中,在60℃條件下干燥至恒重,經(jīng)24小時(shí)后取出,烘干后放在研缽里磨成粉末,用紙包好待用;
(2)在分析天平上準(zhǔn)確稱取2g粉末放入大試管中,加適量的水浸泡30分鐘,使粉末充分吸水膨脹,便于多糖的浸出,減少蒸煮的時(shí)間;
(3)將復(fù)水的漿體里加入蒸餾水,使浸提比分別為1:20, 將大試管放入沸水浴中蒸煮2小時(shí),使菌多糖被充分浸提出來,然后冷卻,將浸提液倒入離心管離心;
(4)將 蒸 煮 液 置 于 離 心 機(jī) 中 以4500r/min的速度,離心 15min,然后將上清液加熱濃縮,直至濾液體積降為原來的四分之一,再將濃縮液轉(zhuǎn)
入大試管中,加3倍體積的 10%H2O2加熱脫色,使淡黃色褪去;
(5)將脫色液倒入分液漏斗中,用Sevage法除去蛋白質(zhì),即加入氯仿和正丁醇(5:2)0.5倍量,振蕩萃取,取上層液,反復(fù)萃取3次至游離蛋白質(zhì)完全去除,并用茚三酮檢驗(yàn);
(6)將萃取液倒入大試管中,加入95%乙醇至60%飽和度,使多糖與乙醇生成水不溶性化合物,靜置過夜,以3000r/min,離心15min并用丙酮漂洗沉淀兩次,除去其中的脂類和色素。干燥采用烘箱干燥法,將沉淀物轉(zhuǎn)入鋁盒中,放入干燥箱70℃干燥15h。
實(shí)施例3
一種茶樹菇多糖提取工藝,包含有如下步驟:
(1)將茶樹菇洗干凈,切成小塊放入盤中,在60℃條件下干燥至恒重,經(jīng)24小時(shí)后取出,烘干后放在研缽里磨成粉末,用紙包好待用;
(2)在分析天平上準(zhǔn)確稱取2g粉末放入大試管中,加適量的水浸泡30分鐘,使粉末充分吸水膨脹,便于多糖的浸出,減少蒸煮的時(shí)間;
(3)將復(fù)水的漿體里加入蒸餾水,使浸提比分別為1:30, 將大試管放入沸水浴中蒸煮3小時(shí),使菌多糖被充分浸提出來,然后冷卻,將浸提液倒入離心管離心;
(4)將 蒸 煮 液 置 于 離 心 機(jī) 中 以4500r/min的速度,離心 15min,然后將上清液加熱濃縮,直至濾液體積降為原來的四分之一,再將濃縮液轉(zhuǎn)
入大試管中,加3倍體積的 10%H2O2加熱脫色,使淡黃色褪去;
(5)將脫色液倒入分液漏斗中,用Sevage法除去蛋白質(zhì),即加入氯仿和正丁醇(5:2)0.5倍量,振蕩萃取,取上層液,反復(fù)萃取2次至游離蛋白質(zhì)完全去除,并用茚三酮檢驗(yàn);
(6)將萃取液倒入大試管中,加入95%乙醇至80%飽和度,使多糖與乙醇生成水不溶性化合物,靜置過夜,以3000r/min,離心15min并用丙酮漂洗沉淀兩次,除去其中的脂類和色素。干燥采用烘箱干燥法,將沉淀物轉(zhuǎn)入鋁盒中,放入干燥箱70℃干燥15h。