一種快速提取純化甘草酸及其鹽類的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種快速提取純化甘草酸及其鹽類的方法，以甘草根莖為原料，采用閃式提取技術(shù)獲得甘草酸，以甘草酸粉為原料，采用閃式提取技術(shù)獲得甘酸酸鹽。本發(fā)明的方法，實現(xiàn)室溫下快速提取，與現(xiàn)有工藝相比，能實現(xiàn)溶劑的循環(huán)利用，顯著減少廢液量、降低能耗、縮短提取時間、提高產(chǎn)品質(zhì)量。
【專利說明】一種快速提取純化甘草酸及其鹽類的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中草藥活性成分分離純化領(lǐng)域，具體涉及一種快速提取純化甘草酸及 其鹽類的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 甘草是我國常用的中藥品種之一，富含三萜皂苷類、黃酮類、多糖等活性成分，具 有補脾益氣，清熱解毒，祛痰止咳，緩急止痛，調(diào)和諸藥等功效。甘草中含量最高的活性組分 為甘草酸。甘草酸是一種三萜皂苷類化合物，也是研究較為透徹、應(yīng)用最廣的甘草活性組 分。尤其是高純度甘草酸及其鹽類，經(jīng)過化學(xué)反應(yīng)可以制備成甘草次酸、異甘草酸鎂、甘草 酸二銨等暢銷藥（CN200410083052. 6)，市場需求巨大。
[0003] 甘草酸的提取工藝研究較多，已見報道的工藝主要包括：傳統(tǒng)方法（如冷 浸、滲漉、熱浸、熱回流等）、微波輔助提取法（CN03105372.6)、超聲波輔助提取法 (CN02109474.8)、超臨界萃取法（CN00105599. 2)等。冷浸和滲漏等方法提取效率非常低， 提取時間往往需要24小時以上，而且提取液用量大，濃縮提取液所耗能量較大。熱浸和熱 回流等方法通過加熱提取液（一般40-80°C )將提取時間縮短為2-5小時，但所得提取液中 蛋白質(zhì)、淀粉、多糖等含量增多，從而影響產(chǎn)物的純度與色澤。微波輔助提取法和超聲波輔 助提取法通過微波、超聲等強化傳質(zhì)過程，使提取時間進(jìn)一步縮短至20-60分鐘，提取溫度 也降至30-50°C，但仍然存在提取液用量大，濃縮提取液所耗能量較大等缺點。超臨界萃取 法以超臨界二氧化碳作為提取溶劑，常加入甲醇、乙醇等改性劑以增大其極性，由于溶劑極 性較低，對甘草酸提取效果有限，提取時間常需2-6小時，且需使用高壓設(shè)備（壓力一般大 于100大氣壓），投資成本較高。
[0004] 鑒于以上方法的不足，本領(lǐng)域亟需開發(fā)新的提取技術(shù)，實現(xiàn)室溫條件下快速提取 純化甘草酸及其藥學(xué)上可接受的鹽，以提高產(chǎn)品質(zhì)量，降低能源消耗，減少廢液排放。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種快速提取純化甘草酸及其鹽類的方法。
[0006] 本發(fā)明的第一方面，提供一種甘草酸鹽的提取方法，所述方法以甘草酸為原料，采 用閃式提取技術(shù)進(jìn)行提取獲得所述甘草酸鹽。
[0007] 在另一優(yōu)選例中，所述甘草酸鹽選自：甘草酸單銨鹽、甘草酸單鉀鹽、甘草酸單鈉 鹽。
[0008] 在另一優(yōu)選例中，所述甘草酸是以甘草根莖為原料，采用閃式提取技術(shù)進(jìn)行提取 獲得，包括以下步驟：
[0009] a)將所述甘草根莖干燥粉碎后過篩，得到甘草粉；
[0010] b)以水作為溶劑，對所述甘草粉進(jìn)行閃式提取，得到甘草酸水提液；
[0011] c)將所述甘草酸水提液的pH調(diào)節(jié)為1. 5-2. 5,分離沉淀物，并經(jīng)洗滌、干燥后得到 所述甘草酸。
[0012] 在另一優(yōu)選例中，所述步驟c)中，采用濃硫酸調(diào)節(jié)甘草酸水提液的pH值為 L 5-2· 5〇
[0013] 在另一優(yōu)選例中，所述方法具有以下一個或多個特征：
[0014] ⑴所述步驟a)中過10-100目篩，較佳地過20-80目篩，更佳地過40目篩；
[0015] ⑵所述步驟b)中，所述甘草粉和所述溶劑的固液比為1:10_l:40g/mL ;
[0016] (3)所述步驟b)中，所述閃式提取所用的轉(zhuǎn)速為10000-16000轉(zhuǎn)/分鐘；
[0017] (4)所述步驟b)中，所述閃式提取的提取時間為0. 5-5分鐘；
[0018] (5)所述步驟b)中，所述閃式提取的提取溫度為15-30°C，較佳地為15-25°C，更佳 地為20°C ;
[0019] (6)所述步驟c)中，采用水進(jìn)行洗滌；
[0020] (7)所述步驟c)中，所述干燥是在30-50°C進(jìn)行真空干燥。
[0021] 在另一優(yōu)選例中，所述方法還包括以下步驟：將所述步驟c)中分離沉淀物后得到 的上清液調(diào)節(jié)至中性，沉降去除固體，取上清液與水混合后，作為步驟b)中的溶劑，用于閃 式提取，循環(huán)利用。
[0022] 在另一優(yōu)選例中，所述固體包括硫酸鈣。在另一優(yōu)選例中，采用氫氧化鈣調(diào)節(jié)所述 上清液的pH至中性。
[0023] 在另一優(yōu)選例中，所述方法包括以下步驟：
[0024] i )將所述甘草酸干燥粉碎后過篩，得到甘草酸粉；
[0025] ii )以90wt% -99wt%的乙醇水溶液作為溶劑，對所述甘草酸粉進(jìn)行閃式提取，得 到甘草酸醇提液；
[0026] iii )將所述甘草酸醇提液的pH調(diào)節(jié)為7. 5-8. 5,分離沉淀物；
[0027] iv )將所述沉淀物與酸反應(yīng)后，經(jīng)過濾、洗滌濾餅、干燥得到所述甘草酸鹽，
[0028] 其中，所述步驟iii )中采用氨氣、15wt%-30wt%的濃氨水、5wt%-30wt%氫氧化 鉀乙醇溶液或15wt % -30wt %氫氧化鈉水溶液，調(diào)節(jié)所述甘草酸醇提液的pH值；
[0029] 所述酸選自：氫氟酸、鹽酸、氫溴酸、磷酸、乙酸、草酸、硫酸、甲磺酸、水楊酸、三氟 甲磺酸、萘磺酸、馬來酸、檸檬酸、醋酸、酒石酸、琥珀酸、酢漿草酸、蘋果酸、谷氨酸。
[0030] 在另一優(yōu)選例中，所述方法具有以下一個或多個特征：
[0031] ⑴所述步驟i )中過10-100目篩，較佳地過20-80目篩，更佳地過40目篩；
[0032] (2)所述步驟ii )中，所述甘草酸粉和所述溶劑的固液比為l:10-l:40g/mL ;
[0033] (3)所述步驟ii )中，所述閃式提取所用的轉(zhuǎn)速為10000-16000轉(zhuǎn)/分鐘；
[0034] (4)所述步驟ii )中，所述閃式提取的提取時間為0. 5-5分鐘；
[0035] (5)所述步驟ii )中，所述閃式提取的提取溫度為15-30°C，較佳地為15-25°C，更 佳地為20°C ;
[0036] (6)所述步驟iii)中，采用氨氣、15wt%-30wt%的濃氨水、5wt%-30wt%氫氧化鉀 乙醇溶液或15wt % -30wt %氫氧化鈉水溶液，調(diào)節(jié)所述甘草酸醇提液的pH值；
[0037] (7)所述步驟iv )中，所述干燥是在30_50°C進(jìn)行真空干燥；
[0038] (8)所述步驟iv )中，所述沉淀物與所述酸的重量體積比為lg: 1. 5_5ml ;
[0039] (9)所述步驟iv )中，所述沉淀物與所述酸在30-60°C反應(yīng)20-90min ;
[0040] (10)所述步驟iv )中，所述洗滌濾餅是依次采用所述酸、乙醇進(jìn)行洗滌。
[0041] 在另一優(yōu)選例中，依次用兩倍量（mL/g)冰醋酸、兩倍量（mL/g)無水乙醇各洗滌濾 餅一次。
[0042] 在另一優(yōu)選例中，將所述步驟iii)中分離沉淀物后得到的上清液調(diào)節(jié)至中性，沉 降去除固體，取上清液與乙醇混合后，作為步驟ii )中的溶劑，用于閃式提取，循環(huán)利用。
[0043] 在另一優(yōu)選例中，采用濃硫酸調(diào)節(jié)所述上清液的pH至中性。
[0044] 在另一優(yōu)選例中，所述方法還包括步驟v ):對步驟iv )獲得的所述甘草酸鹽進(jìn)行 結(jié)晶純化。
[0045] 在另一優(yōu)選例中，所述結(jié)晶純化包括以下步驟：
[0046] v 1)將所述甘草酸鹽溶于75_95wt%的乙醇水溶液中，固液比為l:10-l:20g/mL， 加熱至50-60°C，加入0. 5-2倍重量的活性炭粉末脫色2-5小時；
[0047] v 2)對步驟v 1)得到的混合物進(jìn)行過濾，將濾液置于〇-5°C進(jìn)行冷卻結(jié)晶；
[0048] v 3)冷卻結(jié)晶8-24hr后，再冷卻至-40°C?-10°C至少8hr，過濾得到甘草酸鹽濕 晶體；
[0049] v 4)將所述甘草酸鹽濕晶體進(jìn)行干燥后得到甘草酸鹽純品。
[0050] 在另一優(yōu)選例中，所述步驟v 2)中將濾液置于4°C進(jìn)行冷卻結(jié)晶。
[0051] 在另一優(yōu)選例中，所述步驟v 3)中再冷卻至-15?-30°C，較佳地冷卻至_20°C進(jìn) 行冷卻結(jié)晶。
[0052] 在另一優(yōu)選例中，所述方法還包括將步驟v 4)獲得的甘草酸鹽純品進(jìn)行重結(jié)晶 的步驟。
[0053] 在另一優(yōu)選例中，所述重結(jié)晶是指重復(fù)步驟v 1)- v 4)對甘草酸鹽純品進(jìn)行重結(jié) 晶。
[0054] 在另一優(yōu)選例中，采用乙醇水溶液稀釋步驟v 3)中過濾得到的結(jié)晶母液，用作步 驟v 1)中的溶劑溶解甘草酸鹽，循環(huán)利用。
[0055] 本發(fā)明的第二方面，提供一種甘草酸的提取方法，以甘草根莖為原料，采用閃式提 取技術(shù)進(jìn)行提取獲得所述甘草酸。
[0056] 在另一優(yōu)選例中，所述方法包括以下步驟：
[0057] a)將所述甘草根莖干燥粉碎后過篩，得到甘草粉；
[0058] b)以水作為溶劑，對所述甘草粉進(jìn)行閃式提取，得到甘草酸水提液；
[0059] c)將所述甘草酸水提液的pH調(diào)節(jié)為1. 5-2. 5,分離沉淀物，并經(jīng)洗滌、干燥后得到 所述甘草酸。
[0060] 在另一優(yōu)選例中，所述步驟C)中，采用濃硫酸調(diào)節(jié)甘草酸水提液的pH值為 L 5-2· 5〇
[0061] 在另一優(yōu)選例中，所述方法具有以下一個或多個特征：
[0062] ⑴所述步驟a)中過10-100目篩，較佳地過20-80目篩，更佳地過40目篩；
[0063] (2)所述步驟b)中，所述甘草粉和所述溶劑的固液比為1:10-1:40g/mL ;
[0064] (3)所述步驟b)中，所述閃式提取所用的轉(zhuǎn)速為10000-16000轉(zhuǎn)/分鐘；
[0065] (4)所述步驟b)中，所述閃式提取的提取時間為0. 5-5分鐘；
[0066] (5)所述步驟b)中，所述閃式提取的提取溫度為15_30°C，較佳地為15_25°C，更佳 地為20°C ;
[0067] (6)所述步驟c)中，采用水進(jìn)行洗滌；
[0068] (7)所述步驟c)中，所述干燥是在30_50°C進(jìn)行真空干燥。
[0069] 在另一優(yōu)選例中，所述方法還包括以下步驟：
[0070] 將所述步驟c)中分離沉淀物后得到的上清液調(diào)節(jié)至中性，沉降去除固體，取上清 液與水混合后，作為步驟b)中的溶劑，用于閃式提取，循環(huán)利用。所述固體包括硫酸鈣。在 另一優(yōu)選例中，采用氫氧化鈣調(diào)節(jié)所述上清液的pH至中性。
[0071] 本發(fā)明的方法，實現(xiàn)室溫下快速提取，與現(xiàn)有工藝相比，能實現(xiàn)溶劑的循環(huán)利用， 顯著減少廢液量、降低能耗、縮短提取時間、提高產(chǎn)品質(zhì)量。
[0072] 應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文（如實施例）中具 體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0073] 圖1為甘草酸提取純化工藝流程圖。
[0074] 圖2為HPLC譜圖，其中（a)為甘草酸單銨鹽標(biāo)準(zhǔn)品HPLC圖譜，甘草酸出峰時間 16. 27min ;和（b)實施例5獲得的甘草酸單銨鹽產(chǎn)品HPLC圖譜，甘草酸出峰時間與標(biāo)準(zhǔn)品 一致。
【具體實施方式】
[0075] 本申請的發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入地研究，首次意外研發(fā)出一種快速提取純化甘 草酸及其鹽類的方法，以甘草根莖為原料，采用閃式提取技術(shù)獲得甘草酸，以甘草酸粉為原 料，采用閃式提取技術(shù)獲得甘酸酸鹽。本發(fā)明的方法，實現(xiàn)室溫下快速提取，與現(xiàn)有工藝相 t匕，能實現(xiàn)溶劑的循環(huán)利用，顯著減少廢液量、降低能耗、縮短提取時間、提高產(chǎn)品質(zhì)量。在 此基礎(chǔ)上，完成了本發(fā)明。
[0076] 提取方法
[0077] 如圖1所示，本發(fā)明的甘草酸鹽的提取純化方法包括以下步驟：
[0078] a'）將甘草根莖干燥粉碎后過篩，得到甘草粉；
[0079] b'）以水作為溶劑，對所述甘草粉進(jìn)行閃式提取，得到甘草酸水提液；
[0080] C'）將所述甘草酸水提液的pH調(diào)節(jié)為1. 5-2. 5,分離沉淀物，并經(jīng)洗滌、干燥后得 到甘草酸；
[0081] 其中，將所述步驟c'）中分離沉淀物后得到的上清液調(diào)節(jié)至中性，沉降去除固體， 取上清液與水混合后，作為步驟b'）中的溶劑，用于閃式提取，循環(huán)利用。所述固體包括硫 酸鈣。在另一優(yōu)選例中，采用氫氧化鈣調(diào)節(jié)所述上清液的pH至中性；
[0082] d'）將所述甘草酸干燥粉碎后過篩，得到甘草酸粉；
[0083] e'）以90wt% -99wt%的乙醇水溶液作為溶劑，對所述甘草酸粉進(jìn)行閃式提取，得 到甘草酸醇提液；
[0084] f'）采用氨氣、15wt% -30wt%的濃氨水、5wt% -30wt%氫氧化鉀乙醇溶液或 15wt % -30wt %氫氧化鈉水溶液，將所述甘草酸醇提液的pH調(diào)節(jié)為7. 5-8. 5,分離沉淀物；
[0085] g'）將所述沉淀物與酸反應(yīng)后，經(jīng)過濾、洗滌濾餅、干燥得到所述甘草酸鹽粗品， 其中，所述酸選自：氫氟酸、鹽酸、氫溴酸、磷酸、乙酸、草酸、硫酸、甲磺酸、水楊酸、三氟甲磺 酸、萘磺酸、馬來酸、檸檬酸、醋酸、酒石酸、琥珀酸、酢漿草酸、蘋果酸、谷氨酸；
[0086] 其中，將所述步驟f'）中分離沉淀物后得到的上清液調(diào)節(jié)至中性，沉降去除固體， 取上清液與乙醇混合后，作為步驟e'）中的溶劑，用于閃式提取，循環(huán)利用。在另一優(yōu)選例 中，采用濃硫酸調(diào)節(jié)所述上清液的pH至中性，
[0087] h'）將所述甘草酸鹽粗品溶于75-95wt%的乙醇水溶液中，固液比為l:10-l:20g/ mL，加熱至50-60°C，加入0. 5-2倍重量的活性炭粉末脫色2-5小時；
[0088] i'）對步驟v 1)得到的混合物進(jìn)行過濾，將濾液置于〇-5°C進(jìn)行冷卻結(jié)晶；
[0089] j'）冷卻結(jié)晶8-24hr后，再冷卻至-40°C?-10°C至少8hr，過濾得到甘草酸鹽濕 晶體；
[0090] k'）將所述甘草酸鹽濕晶體進(jìn)行干燥后得到甘草酸鹽純品，較佳地，經(jīng)步驟 h'）-k'）進(jìn)行重結(jié)晶得到甘草酸鹽精品，
[0091] 其中，采用乙醇水溶液稀釋步驟j'）中過濾得到的結(jié)晶母液，用作步驟h'）中的 溶劑溶解甘草酸鹽，循環(huán)利用。
[0092] 在另一優(yōu)選例中，所述方法包括以下步驟：
[0093] (1)閃式水提制備甘草酸粉：
[0094] ①.甘草根據(jù)經(jīng)風(fēng)干、粉碎后過40目標(biāo)準(zhǔn)篩，得到甘草粉；
[0095] ②.將甘草粉加入閃式提取器中；以水作為溶劑，固液比1:10?l:40(g/mL);閃 式提取轉(zhuǎn)速10000?16000轉(zhuǎn)/分鐘，提取時間0. 5?5分鐘，提取溫度為室溫（20°C左 右）；過濾得到甘草酸水提液；
[0096] ③.使用濃硫酸調(diào)節(jié)甘草酸水提液的pH值1. 5-2. 5,靜置半小時，離心得沉淀，力口 入少量水洗滌沉淀幾次，30-50°C真空干燥沉淀，得到甘草酸粉。
[0097] ④.步驟③中離心所得上清液，用氫氧化鈣調(diào)節(jié)至中性后，沉降一段時間去除硫 酸鈣等固體顆粒物，取上層清液與一定量水混合后，運送至步驟②中作為提取溶劑，循環(huán)利 用。
[0098] (2)閃式醇提制備粗甘草酸鹽：
[0099] ①·甘草酸粉經(jīng)粉碎后過40目標(biāo)準(zhǔn)篩；
[0100] ②.將甘草酸粉加入閃式提取器中；以95%乙醇作為溶劑，固液比1:10? 1:40 (g/mL);閃式提取轉(zhuǎn)速10000?16000轉(zhuǎn)/分鐘，提取時間0. 5?5分鐘，提取溫度為 室溫（20°C左右）；過濾得到甘草酸醇提液；
[0101] ③.使用氨氣、濃氨水（22-25wt% )、氫氧化鉀乙醇溶液（10-20被％ )或氫氧化鈉 溶液（22-25wt% )，調(diào)節(jié)甘草酸醇提液的pH值7. 5-8. 5,靜置半小時，離心得沉淀，加入兩倍 量（mL/g)的冰醋酸，30-60°C反應(yīng)半小時，過濾，濾餅依次用兩倍量（mL/g)冰醋酸、兩倍量 (mL/g)無水乙醇各洗滌一次，30-50°C真空干燥濾餅，得到甘草酸鹽粗粉。
[0102] ④.步驟③中離心所得上清液，用濃硫酸調(diào)節(jié)至中性后，沉降一段時間去除硫酸 氨、硫酸鉀、硫酸鈉等固體顆粒物，取上層清液與少量乙醇混合后，運送至步驟②中作為提 取溶劑，循環(huán)利用。
[0103] (3)結(jié)晶純化甘草酸鹽：
[0104] ①.將甘草酸鹽粗粉溶于75_95wt%的乙醇中，固液比為l:10_l:20(g/mL)，加熱 至50-60°C，加入0. 5-2倍量（g/g)活性炭粉末脫色至少2小時；
[0105] ②.趁熱過濾去除不溶物與活性炭，將濾液放置4°C環(huán)境中冷卻結(jié)晶至少8小時， 后置于-20°C環(huán)境中進(jìn)一步長晶；
[0106] ③.過濾得到甘草酸鹽濕晶體，經(jīng)30_60°C真空干燥，得到高純度甘草酸鹽；
[0107] ④.步驟③中所得高純度甘草酸鹽，可根據(jù)產(chǎn)品要求運送至步驟①中進(jìn)行重結(jié) 晶，進(jìn)一步提1?純度；
[0108] ⑤.步驟③中過濾所得結(jié)晶母液，加入乙醇水溶液稀釋后運送至步驟①中作為溶 齊U，循環(huán)利用。
[0109] 本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本案說明書所揭示 的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以被任何提供相同、 均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特 征的一般性例子。
[0110] 本發(fā)明的有益之處在于：
[0111] (1)能實現(xiàn)溶劑的循環(huán)利用，顯著減少廢液量?，F(xiàn)有技術(shù)會產(chǎn)生大量廢液，需配套 的廢液處理系統(tǒng)。而本發(fā)明能實現(xiàn)溶劑的循環(huán)利用，實現(xiàn)廢液的零排放。
[0112] (2)顯著降低能耗?，F(xiàn)有技術(shù)提取溶劑需加熱到40-60°C，且提取液濃度較低，需 濃縮以提高回收率，能耗巨大。而本發(fā)明所用的閃式提取法，在室溫下就能完成高效提取， 且提取液不需濃縮，因此顯著降低了能耗。
[0113] (3)顯著縮短提取時間?，F(xiàn)有技術(shù)提取過程需時幾小時甚至幾天。而本發(fā)明所用 的閃式提取法，在5分鐘之內(nèi)就能實現(xiàn)高效提取，大大縮短了提取時間，提高了生產(chǎn)效率。
[0114] (4)提高產(chǎn)品質(zhì)量?，F(xiàn)有技術(shù)提取溫度較高，提取液中蛋白質(zhì)、多糖等成分含量較 高，所得產(chǎn)品甘草酸及其鹽類含量較低，顏色較深。而本發(fā)明所用的閃式提取法，在室溫下 僅需幾分鐘就能完成提取過程，所得產(chǎn)品甘草酸及其鹽類純度較高，顏色較淺。
[0115] 下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條 件如 Sambrook 等人，分子克?。簩嶒炇沂謨裕∟ew York:Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和 份數(shù)按重量計算。
[0116] 除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意 義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文 中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。
[0117] 通用方法
[0118] 甘草酸及其鹽類純度的測試方法：
[0119] (1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
[0120] 稱取0. 0692g甘草酸單銨鹽標(biāo)準(zhǔn)品（純度大于98%)，溶于60wt%乙醇水溶液，定 容至100mL。使用HPLC裝置，使用碳十八反相色譜柱，流動相乙腈：0. 05%三氟乙酸水溶液 (35:65)，流速0.8111171^11，進(jìn)樣量10微升。所得色譜圖如圖2中（&)。
[0121] (2)甘草酸單銨鹽純度的計算
[0122] 稱取約60mg的樣品，溶于60wt%乙醇水溶液中，定容至100mL。使用HPLC裝置， 色譜條件同前，根據(jù)甘草酸的峰面積計算樣品中甘草酸的純度。
[0123] 甘草酸純度的計算公式如下，
[0124]
【權(quán)利要求】
1. 一種甘草酸鹽的提取方法，其特征在于，所述方法以甘草酸為原料，采用閃式提取技 術(shù)進(jìn)行提取獲得所述甘草酸鹽。
2. 如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述甘草酸是以甘草根莖為原料，采用 閃式提取技術(shù)進(jìn)行提取獲得，包括以下步驟： a) 將所述甘草根莖干燥粉碎后過篩，得到甘草粉； b) 以水作為溶劑，對所述甘草粉進(jìn)行閃式提取，得到甘草酸水提液； c) 將所述甘草酸水提液的pH調(diào)節(jié)為1. 5-2. 5,分離沉淀物，并經(jīng)洗滌、干燥后得到所述 甘草酸。
3. 如權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述方法具有以下一個或多個特征： ⑴所述步驟a)中過10-100目篩，較佳地過20-80目篩，更佳地過40目篩； ⑵所述步驟b)中，所述甘草粉和所述溶劑的固液比為l:10-l:40g/mL; (3) 所述步驟b)中，所述閃式提取所用的轉(zhuǎn)速為10000-16000轉(zhuǎn)/分鐘； (4) 所述步驟b)中，所述閃式提取的提取時間為0. 5-5分鐘； (5) 所述步驟b)中，所述閃式提取的提取溫度為15-30°C，較佳地為15-25°C，更佳地為 20 °C ； (6) 所述步驟c)中，采用水進(jìn)行洗滌； (7) 所述步驟c)中，所述干燥是在30-50°C進(jìn)行真空干燥。
4. 如權(quán)利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述方法還包括以下步驟： 將所述步驟c)中分離沉淀物后得到的上清液調(diào)節(jié)至中性，沉降去除固體，取上清液與 水混合后，作為步驟b)中的溶劑，用于閃式提取，循環(huán)利用。
5. 如權(quán)利要求1-4任一項所述的提取方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟： i )將所述甘草酸干燥粉碎后過篩，得到甘草酸粉； ii )以9〇Wt%-99Wt%的乙醇水溶液作為溶劑，對所述甘草酸粉進(jìn)行閃式提取，得到甘 草酸醇提液； iii )將所述甘草酸醇提液的pH調(diào)節(jié)為7. 5-8. 5,分離沉淀物； iv )將所述沉淀物與酸反應(yīng)后，經(jīng)過濾、洗滌濾餅、干燥得到所述甘草酸鹽， 其中，所述步驟iii)中采用氨氣、15wt% -30wt%的濃氨水、5wt% -30wt%氫氧化鉀乙 醇溶液或15wt % -30wt %氫氧化鈉水溶液，調(diào)節(jié)所述甘草酸醇提液的pH值； 所述酸選自：氫氟酸、鹽酸、氫溴酸、磷酸、乙酸、草酸、硫酸、甲磺酸、水楊酸、三氟甲磺 酸、萘磺酸、馬來酸、檸檬酸、醋酸、酒石酸、琥珀酸、酢漿草酸、蘋果酸、谷氨酸。
6. 如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法具有以下一個或多個特征： (1)所述步驟i )中過10-100目篩，較佳地過20-80目篩，更佳地過40目篩； ⑵所述步驟ii )中，所述甘草酸粉和所述溶劑的固液比為l:l〇-l:40g/mL; (3) 所述步驟ii )中，所述閃式提取所用的轉(zhuǎn)速為10000-16000轉(zhuǎn)/分鐘； (4) 所述步驟ii )中，所述閃式提取的提取時間為0. 5-5分鐘； (5) 所述步驟ii )中，所述閃式提取的提取溫度為15-30°C，較佳地為15-25°C，更佳地 為 20°C ; (6) 所述步驟iii)中，采用氨氣、lSwt^jOwt%的濃氨水、Swt^jOwt%氫氧化鉀乙醇 溶液或15wt % -30wt %氫氧化鈉水溶液，調(diào)節(jié)所述甘草酸醇提液的pH值； (7) 所述步驟iv )中，所述干燥是在30-50°C進(jìn)行真空干燥； (8) 所述步驟iv )中，所述沉淀物與所述酸的重量體積比為lg:l. 5-5ml ; (9) 所述步驟iv )中，所述沉淀物與所述酸在30-60°C反應(yīng)20-90min ; (10) 所述步驟iv)中，所述洗滌濾餅是依次采用所述酸、乙醇進(jìn)行洗滌。
7. 如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，將所述步驟iii)中分離沉淀物后得到的上清 液調(diào)節(jié)至中性，沉降去除固體，取上清液與乙醇混合后，作為步驟ii )中的溶劑，用于閃式 提取，循環(huán)利用。
8. 如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法還包括步驟v ):對步驟iv)獲得 的所述甘草酸鹽進(jìn)行結(jié)晶純化。
9. 如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述結(jié)晶純化包括以下步驟： v 1)將所述甘草酸鹽溶于75-95wt%的乙醇水溶液中，固液比為l:10-l:20g/mL，加熱 至50-60°C，加入0. 5-2倍重量的活性炭粉末脫色2-5小時； v 2)對步驟v 1)得到的混合物進(jìn)行過濾，將濾液置于〇-5°C進(jìn)行冷卻結(jié)晶； v 3)冷卻結(jié)晶8-24hr后，再冷卻至-40°C?-10°C至少8hr，過濾得到甘草酸鹽濕晶 體； v 4)將所述甘草酸鹽濕晶體進(jìn)行干燥后得到甘草酸鹽純品。
10. 如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法還包括將步驟v 4)獲得的甘草酸 鹽純品進(jìn)行重結(jié)晶的步驟。
【文檔編號】C07H1/00GK104151389SQ201410339774
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2014年7月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月16日
【發(fā)明者】劉昌勝, 余金鵬, 徐向君, 袁媛, 喻玲杰, 梁生輝 申請人:華東理工大學(xué), 寧夏拓明農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司