專利名稱：一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種兩肽的制備方法，特別涉及一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法。
背景技術(shù)：
兩肽的合成是最簡單多肽合成中最簡單的，由一分子的游離氨基和一份子的游離羧基脫掉一分子的羧基，兩肽的合成尤其適用于液相合成，不同的氨基酸合成兩肽有不同的的縮合方法，1985年9月由科學(xué)出版社出版的《多肽合成》這本書中介紹了碳二亞胺法，活化酯法，混合酸酐法，疊氮物法等方法，具體應(yīng)用到兩個(gè)不同的氨基酸上，需要靈活運(yùn)用，經(jīng)檢索，未發(fā)現(xiàn)同一序列的化合物的優(yōu)選方法，芐氧羰基丙氨酰丙氨酸是一種常用的多肽，有多種方法可以完成，現(xiàn)有方法多產(chǎn)量不大，不適于工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，主要解決現(xiàn)有合成方法不適于工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)問題。本發(fā)明的思路:芐氧羰基丙氨酸和丙氨酸甲酯鹽酸鹽由#，艫_ 二環(huán)己基碳二亞胺縮合得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯，然后皂化，得到芐氧羰基丙氨酰丙氨酸。本發(fā)明的技術(shù)方案:一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，其特征在于其制備具體步驟為，第一步反應(yīng):將丙氨酸甲酯鹽酸鹽加入到二氯甲烷中，加入有機(jī)堿，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的廣1.3倍，加入芐氧羰基丙氨酸，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的
0.8^1.2倍，冰浴，滴加#，艫-二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液，與#，艫-二環(huán)己基碳二亞胺物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸廣1.2倍，反應(yīng)過夜(12-16小時(shí))，濾去二環(huán)己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸 乙酯，碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)層，稀鹽酸洗滌有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，乙酸乙酯干燥，過濾，蒸干，得白色固體，重結(jié)晶，得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；第二步反應(yīng):將芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氫氧化鈉溶液，其物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸廣1.2倍，皂化，完畢后，濃縮，乙醚洗滌，加入乙酸乙酯，調(diào)pH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有機(jī)層，有機(jī)層干燥，抽濾，濃縮，芐氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗滌，得到產(chǎn)品。所述有機(jī)堿選自胺類化合物、醇的堿金屬鹽、烷基金屬鋰化合物或胺基鋰化合物中的一種，優(yōu)選甲胺、乙醇鈉、丁基鋰或二異丙基胺基鋰中的一種。本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明根據(jù)具體的氨基酸序列和保護(hù)基團(tuán)特點(diǎn)，提供一種相應(yīng)的兩肽的的生產(chǎn)方法，經(jīng)研究分析，選擇了合適的氨基酸及縮合劑，合適的結(jié)晶重結(jié)晶方法，純度可達(dá)98%以上，收率達(dá)85%以上，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:將丙氨酸甲酯鹽酸鹽加入到二氯甲烷中，加入甲胺，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的I倍，加入芐氧羰基丙氨酸，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的0.8倍，冰浴，滴加#，艫-二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液，與火艫-二環(huán)己基碳二亞胺物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸I倍，反應(yīng)過夜，濾去二環(huán)己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)層，稀鹽酸洗滌有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，乙酸乙酯干燥，過濾，蒸干，的白色固體，重結(jié)晶，得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；將芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氫氧化鈉溶液，其物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸I倍，皂化，完畢后，濃縮，乙醚洗滌，加入乙酸乙酯，調(diào)PH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有機(jī)層，有機(jī)層干燥，抽濾，濃縮，芐氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗滌，得到產(chǎn)品。純度98.1%，收率85%。產(chǎn)物的定性分析:
質(zhì)譜:分子量 294.3 測(cè)得結(jié)果 295.20 [M+H] + 317.15 [M+Na] + 611.50[2M+Na] +
核磁氫譜:溶劑二甲亞砜化學(xué)位移1.198 1.222 1.266 1.2671.290 峰面積6.49 化學(xué)位移2.511峰面積細(xì)線化學(xué)位移4.083峰面積1.07化學(xué)位移4.199峰面積1.00 化學(xué)位移5.018 峰面積1.92 化學(xué)位移6.028 峰面積細(xì)線化學(xué)位移 7.306 7.337 7.342 7.359 7.429 7.454 7.455 峰面積 5.27 化學(xué)位移8.133 8.155 8.158峰面積1.02化學(xué)位移12.557峰面積0.95。實(shí)施例2:
將丙氨酸甲酯鹽酸鹽加入到二氯甲烷中，加入乙醇鈉，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的1.3倍，加入芐氧羰基丙氨酸，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的1.2倍，冰浴，滴加#，艫_ 二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液，與艫-二環(huán)己基碳二亞胺物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1.2倍，反應(yīng)過夜，濾去二環(huán)己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)層，稀鹽酸洗滌有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，乙酸乙酯干燥，過濾，蒸干，的白色固體，重結(jié)晶，得芐 氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；將芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氫氧化鈉溶液，其物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1.2倍，皂化，完畢后，濃縮，乙醚洗滌，加入乙酸乙酯，調(diào)PH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有機(jī)層，有機(jī)層干燥，抽濾，濃縮，芐氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗滌，得到產(chǎn)品。純度99.2%，收率90%。定性分析結(jié)果同實(shí)施例1。實(shí)施例3:
將丙氨酸甲酯鹽酸鹽加入到二氯甲烷中，加入丁基鋰，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的1.1倍，加入芐氧羰基丙氨酸，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的I倍，冰浴，滴加#，艫-二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液，與#，艫-二環(huán)己基碳二亞胺物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1.1倍，反應(yīng)過夜，濾去二環(huán)己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)層，稀鹽酸洗滌有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，乙酸乙酯干燥，過濾，蒸干，的白色固體，重結(jié)晶，得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；將芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，力口入氫氧化鈉溶液，其物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1.1倍，皂化，完畢后，濃縮，乙醚洗滌，力口入乙酸乙酯，調(diào)PH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有機(jī)層，有機(jī)層干燥，抽濾，濃縮，芐氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗滌，得到產(chǎn)品。純度99.3%，收率87%。定性分析結(jié)果同實(shí)施例1o
實(shí)施例4:
將丙氨酸甲酯鹽酸鹽加入到二氯甲烷中，加入二異丙基胺基鋰，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的1.1倍，加入芐氧羰基丙氨酸，物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的0.9倍，冰浴，滴加#，艫_ 二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液，與火艫-二環(huán)己基碳二亞胺物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1.1倍，反應(yīng)過夜，濾去二環(huán)己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)層，稀鹽酸洗滌有機(jī)層，飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，乙酸乙酯干燥，過濾，蒸干，的白色固體，重結(jié)晶，得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；將芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氫氧化鈉溶液，其物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸1.2倍，皂化，完畢后，濃縮，乙醚洗滌，加入乙酸乙酯，調(diào)PH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有機(jī)層，有機(jī)層干燥，抽濾，濃縮，芐氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗滌，得到產(chǎn)品。純度99.3%，收率89%。定性分析結(jié)果同 實(shí)施例1。
權(quán)利要求
1.一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，其特征在于其制備具體步驟為， 第一步反應(yīng):將丙氨酸甲酯鹽酸鹽加入到二氯甲烷中，加入有機(jī)堿，再加入芐氧羰基丙氨酸，冰浴，滴加#，艫-二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液，反應(yīng)過夜，濾去二環(huán)己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，經(jīng)常規(guī)處理后得到白色固體進(jìn)行重結(jié)晶，得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酷； 第二步反應(yīng):將芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氫氧化鈉溶液進(jìn)行皂化反應(yīng)，經(jīng)常規(guī)處理得到最終產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，其特征在于所述的第一步反應(yīng)中，有機(jī)堿選自胺類化合物、醇的堿金屬鹽、烷基金屬鋰化合物或胺基鋰化合物中的一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，其特征在于有機(jī)堿選自甲胺、乙醇鈉、丁基鋰或二異丙基胺基鋰中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，其特征在于所述的第一步反應(yīng)中，有機(jī)堿物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的廣1.3倍，芐氧羰基丙氨酸物質(zhì)的量為丙氨酸甲酯鹽酸鹽的0.8~1.2倍,N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸廣1.2倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，其特征在于所述的第二步反應(yīng)中，氫氧化鈉物質(zhì)的量為芐氧羰基丙氨酸廣1.2倍。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種兩肽的制備方法，特別涉及一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法。主要解決現(xiàn)有合成方法不適于工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)問題。技術(shù)方案為一種芐氧羰基丙氨酰丙氨酸的制備方法，第一步反應(yīng)將丙氨酸甲酯鹽酸鹽加入到二氯甲烷中，加入有機(jī)堿，再加入芐氧羰基丙氨酸，冰浴，滴加N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺的二氯甲烷溶液，反應(yīng)過夜，濾去二環(huán)己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，經(jīng)常規(guī)處理后得到白色固體進(jìn)行重結(jié)晶，得芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；第二步反應(yīng)將芐氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氫氧化鈉溶液進(jìn)行皂化反應(yīng)，經(jīng)常規(guī)處理得到最終產(chǎn)品。
文檔編號(hào)C07K5/062GK103073618SQ201310013700
公開日2013年5月1日 申請(qǐng)日期2013年1月15日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月15日
發(fā)明者徐紅巖, 李忠亮 申請(qǐng)人:吉爾生化(上海)有限公司, 上海吉爾多肽有限公司, 無錫亞肽生物科技有限公司