專利名稱：一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種去甲異波爾定的提取方法，特別涉及一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法。
背景技術(shù)：
臺烏藥(Combined Spicebush Root)又名旁其、鳑紕、矮樟等，為雙子葉植物藥樟科植物烏藥的根。性味辛，溫。其形態(tài)為常綠灌木或小喬木，高達4 5米。根木質(zhì)，膨大粗壯，略成念珠狀。樹皮灰綠色。小枝幼時密被銹色短柔毛，老時平滑無毛；莖枝堅韌，不易斷。用于寒凝氣滯所致胸腹諸痛證、尿頻、遺尿。具有行氣止痛，溫腎散寒的功效。其中含有去甲異波爾定，結(jié)構(gòu)式為研究表明去甲異波爾定不僅具有體外抗氧化作用(藥學(xué)學(xué)報200641 (10) 956-962)，還可用于治療自身免疫性疾病，如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥、系統(tǒng)紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化癥、銀屑病、潰瘍性結(jié)腸炎、硬皮病、多肌炎、慢性活動性肝炎、混合性結(jié)締組織病、原發(fā)性膽汁性肝硬變、自身免疫性溶血性貧血、橋本甲狀腺炎、重癥肌無力、強直性脊柱炎、變應(yīng)性骨關(guān)節(jié)炎、變應(yīng)性血管炎、自身免疫性噬中性白細胞減少癥、特發(fā)性血小板減少性紫癱等，在臨床上具有重要應(yīng)用價值。專利文獻201110087992. 2報道，采用pH區(qū)帶精制逆流色譜法對粗產(chǎn)物分離純化去甲異波爾定，但其方法能耗大、污染大不適合工業(yè)化大生產(chǎn)?，F(xiàn)有技術(shù)中，尚沒有適用于高純度去甲異波爾定工業(yè)化大生產(chǎn)的制備工藝報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種利于大生產(chǎn)操作、產(chǎn)品純度高去甲異波爾定的提取方法。本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的取臺烏藥，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙酸乙酯作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為2-5%，萃取壓力30-40MPa，溫度50_60°C，CO2流量2-%il/g生藥· min，萃取時間80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，50-70%乙醇洗脫，收集3-8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加到硅膠層析柱上，以比例為4 1 的二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，洗脫液按柱體積分份收集，合并第5-9份的洗脫液，減壓回收溶劑并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得。上述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，所述(X)2超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%。上述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，所述(X)2超臨界萃取壓力35MPa， 溫度550C，CO2流量3ml/g生藥· min。上述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，所述0)2超臨界萃取時間lOOmin。上述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，所述大孔吸附樹脂選自DlOl型、 D102 型、AB-8 型、HPD400、HPD826 中的一種。上述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的濃度為60%。上述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的收集量為5倍量柱體積。制備所得去甲異波爾定采用下列方法檢測。實施例IHPLC法測定去甲異波爾定純度色譜條件色譜柱十八烷基硅烷鍵合膠硅膠為填充劑；流動相乙睛-甲醇 (90 10)；流速:lml/min ；檢測波長:226nm ；柱溫30°C。測定方法精密稱取去甲異波爾定ang，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超聲振蕩使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10uL，注入高效液相色譜儀，采用歸一化法測定樣品純度。采用本發(fā)明制備去甲異波爾定，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所述的方法具有操作簡單，溶劑消耗少，生產(chǎn)成本低，工藝穩(wěn)定，能耗小，污染小，所得產(chǎn)品純度高(99% )，可適用于實驗室和工業(yè)化半制備和制備性生產(chǎn)。
具體實施例以下通過實施例的形式對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。實施例1取臺烏藥10kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙酸乙酯作為夾帶劑， 夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為2%，萃取壓力30MPa，溫度50°C，CO2流量2ml/g生藥·π η，萃取時間80min，得萃取物，加入到DlOl型大孔吸附樹脂柱上吸附，50%乙醇洗脫， 收集3倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加到硅膠層析柱上，以比例為4 1的二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，洗脫液按柱體積分份收集，合并第5-9份的洗脫液，減壓回收溶劑并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得去甲異波爾定1.62g，經(jīng)HPLC檢測， 純度為99. 1%。實施例2取臺烏藥10kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙酸乙酯作為夾帶劑， 夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為3%，萃取壓力35MPa，溫度55°C，CO2流量3ml/g生藥· min，萃取時間lOOmin，得萃取物，加入到D102型大孔吸附樹脂柱上吸附，60 %乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加到硅膠層析柱上，以比例為4 1 的二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，洗脫液按柱體積分份收集，合并第5-9份的洗脫液，減壓回收溶劑并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得去甲異波爾定1. 52g，經(jīng)HPLC檢測，純度為99.3%。實施例3取臺烏藥10kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙酸乙酯作為夾帶劑， 夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力40MPa，溫度60°C，CO2流量％il/g生藥· min，萃取時間120min，得萃取物，加入到AB-8型大孔吸附樹脂柱上吸附，70 %乙醇洗脫，收集8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加到硅膠層析柱上，以比例為4 1 的二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，洗脫液按柱體積分份收集，合并第5-9份的洗脫液，減壓回收溶劑并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得去甲異波爾定1. 57g，經(jīng)HPLC檢測，純度為99. 2%。實施例4取臺烏藥10kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙酸乙酯作為夾帶劑， 夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%，萃取壓力35MPa，溫度55°C，CO2流量3ml/g生藥· min，萃取時間lOOmin，得萃取物，加入到HPD400型大孔吸附樹脂柱上吸附，60 %乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加到硅膠層析柱上，以比例為4 1 的二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，洗脫液按柱體積分份收集，合并第5-9份的洗脫液，減壓回收溶劑并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得去甲異波爾定1. 68g，經(jīng)HPLC檢測，純度為99. 7%。實施例5取臺烏藥10kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙酸乙酯作為夾帶劑， 夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%，萃取壓力35MPa，溫度55°C，CO2流量3ml/g生藥·π η，萃取時間lOOmin，得萃取物，加入到HPD^6型大孔吸附樹脂柱上吸附，60%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加到硅膠層析柱上，以比例為4 1的二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，洗脫液按柱體積分份收集，合并第5-9份的洗脫液，減壓回收溶劑并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得去甲異波爾定1. 6849g，經(jīng)HPLC檢測，純度為99.4%。
權(quán)利要求
1.一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，其特征在于所述的方法由下列步驟組成取臺烏藥，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙酸乙酯作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為2-5%，萃取壓力30-40MPa，溫度50_60°C，(X)2流量2-%il/g生藥·π η， 萃取時間80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，50-70%乙醇洗脫，收集 3-8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，加到硅膠層析柱上，以比例為4 1的二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，洗脫液按柱體積分份收集，合并第5-9份的洗脫液，減壓回收溶劑并濃縮，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，其特征在于所述 CO2超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，其特征在于所述 CO2超臨界萃取壓力35MPa，溫度55°C，(X)2流量3ml/g生藥· min。
4.根據(jù)權(quán)利要求上所述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，其特征在于所述 CO2超臨界萃取時間lOOmin。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂選自DlOl型、D102型、AB-8型、HPD400、HPD^6中的一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求上所述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的濃度為60%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂洗脫用乙醇的收集量為5倍量柱體積。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從臺烏藥中提取去甲異波爾定的方法，采用超臨界萃取得萃取物，加入到大孔吸附樹脂柱上吸附，乙醇洗脫，減壓回收乙醇并濃縮，加到硅膠層析柱上，二氯甲烷-甲醇混合溶劑洗脫，加入丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得，所述的方法具有操作簡單，溶劑消耗少，生產(chǎn)成本低，工藝穩(wěn)定，能耗小，污染小，所得產(chǎn)品純度高(99％)，可適用于實驗室和工業(yè)化半制備和制備性生產(chǎn)。
文檔編號C07D221/18GK102432534SQ20111041009
公開日2012年5月2日 申請日期2011年12月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月11日
發(fā)明者不公告發(fā)明人 申請人:卞毓平