專利名稱：從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于齊墩果酸的提取純化方法，特別涉及一種從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法。
背景技術(shù)：
齊墩果酸英文名稱Oleanic acid,亦稱土當(dāng)歸酸，屬于五環(huán)三萜類化合物，白色針晶(乙醇)；無臭，無味，可溶于甲醇、乙醇、苯、乙醚、丙酮和氯仿，幾乎不溶于水，對酸堿均不穩(wěn)定。熔點308°C 310°C，[a]20D+68°至+78° (C=0.15，氯仿)。齊墩果酸主要具有護(hù)肝降酶、促進(jìn)肝細(xì)胞再生、抗炎、強心、利尿、抗腫瘤等作用，還具有降血糖、降血脂、鎮(zhèn)靜的作用，是開發(fā)治療肝病和降血糖等藥物有效成分。
齊墩果酸結(jié)構(gòu)式
齊墩果酸常見的提取來源為木犀科植物齊墩果olea europaea 1.的葉；女貞 ligustrum lucidum ait.果實；龍月旦禾斗植物青卩十月旦 swertia mileensis t. η. he et w. 1. shi全草；川西猜牙菜s. mussotii franch.；傘形科植物大星芹astrantia major 1.的葉、根；五加科植物橡木aralia chinensis 1.的根皮及莖皮；葫蘆科植物大籽雪膽 hemsleya macrosperma c. y. wu、可愛雪月旦 hemsleya amabilis diels、中華雪月旦 hemsleya chinensis cogn.(金龜蓮、羅鍋底)的塊根。近年來研究發(fā)現(xiàn)，葡萄皮中齊墩果酸的含量也不低，約在0. 5%-1. 5%，另外由于我國葡萄酒釀制工業(yè)每年會產(chǎn)生葡萄皮廢渣超過5萬噸，因此原料資源更為廉價易得，更由于其來源于食品，原料更為安全。連續(xù)逆流提取是指在提取的過程中，物料和溶劑同時連續(xù)運動，但運動方向相反， 通過機械傳輸，連續(xù)定量加料，使物料和溶媒充分接觸，設(shè)備內(nèi)溶劑不斷更新，最終連續(xù)出渣。同時在設(shè)備內(nèi)部不斷更新溶劑，溶劑在流動過程中不斷獲得物料的有效成份，濃度不斷提高。在連續(xù)進(jìn)液和連續(xù)出液的過程中，溶劑中存在連續(xù)的濃度梯度，從而使提取液可以獲得比較快的浸出速度，也可以獲得比較高的提取液濃度。使用離子交換樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合樹脂可以使去除重金屬、脫色、純化齊墩果酸一次完成，有效成分損耗低。中國專利CN 1346653A從葡萄皮中提取浸膏或齊墩果酸的方法，采用的超臨界萃取儀提取，醇溶、酸堿處理、活性炭脫色法，不利于去除重金屬，齊墩果酸的損耗相對較大， 酸堿容易造成環(huán)境污染。另外超臨界提取設(shè)備昂貴不利于降低成本。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)去離子水洗凈的葡萄皮經(jīng)打漿機打漿后，用體積百分濃度為70% 100%的乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :20 40的條件下提取 60分鐘，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱，用6倍柱體積去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%乙醇水溶液、7倍柱體積的百分濃度為95%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水， 攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。所述混合樹脂為離子交換樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合。所述提取溶劑為體積百分濃度為70% 100%的乙醇水溶液。所述料液比為1 :20 ；35。所述混合樹脂為離子交換樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合，混合質(zhì)量比為1: 1。所述離子交換樹脂為陽離子交換樹脂，型號為001X8 ；D001FC ；D151。所述大孔樹脂，型號為AB-8 ；DlOl ；HP-40。本發(fā)明的方法節(jié)省了大量溶劑；可以將齊墩果酸提取出來，提高齊墩果酸的提取率的同時，減少了產(chǎn)品中重金屬含量。本發(fā)明使用混合樹脂純化葡萄皮提取液，使得無機鹽、重金屬、色素等雜質(zhì)一次性被除掉，有效成分損失少，可以大幅提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本。
具體實施例方式下面通過具體的實施例說明本發(fā)明從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，下面的描述僅是為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。在本發(fā)明中使用混合樹脂作為分離介質(zhì)，在提高齊墩果酸含量的同時，除去了無機鹽，重金屬、色素等無機和有機雜質(zhì)，其中混合樹脂選自離子交換樹脂、大孔樹脂的混合。 各實施例中所指料液質(zhì)量比指的是葡萄皮與提取溶劑的質(zhì)量比。實施例1
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為70%乙醇水溶液為提取溶劑，在 50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :20，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂001X8與大孔樹脂AB-8組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水， 攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為98. 2%，重金屬含量小于5ppm。實施例2
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為80%乙醇水溶液為提取溶劑，在 50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :30，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂D001FC與大孔樹脂HP-40組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水， 攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為99. 1%，重金屬含量小于5ppm。實施例3
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為100%乙醇水溶液為提取溶劑， 在50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :40，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂D151與大孔樹脂AB-8組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度 35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻， 在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為99. 5%，重金屬含量小于5ppm。實施例4
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為90%乙醇水溶液為提取溶劑，在 50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :35，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂001X8與大孔樹脂DlOl組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為98. 8%，重金屬含量小于5ppm。實施例5
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為95%乙醇水溶液為提取溶劑，在 50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :25，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂D001FC與大孔樹脂DlOl組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水， 攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為98. 6%，重金屬含量小于5ppm。實施例6
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為85%乙醇水溶液為提取溶劑，在 50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :30，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂001X8與大孔樹脂HP-40組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水， 攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為97. 2%，重金屬含量小于5ppm。實施例7
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為75%乙醇水溶液為提取溶劑，在 50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :28，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂D151與大孔樹脂HP-40組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水， 攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為96. 8%，重金屬含量小于5ppm。實施例8從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為70%乙醇水溶液為提取溶劑，在 50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :40，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂D001FC與大孔樹脂AB-8組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水， 攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為96. 2%，重金屬含量小于5ppm。實施例9
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為95%乙醇水溶液為提取溶劑，在 50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :20，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂D151與大孔樹脂DlOl組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度 35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻， 在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為98. 5%，重金屬含量小于5ppm。實施例10
從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，包括如下步驟
(1)將葡萄皮用去離子水洗凈打漿，以體積百分濃度為100%乙醇水溶液為提取溶劑， 在50°C條件下使用連續(xù)逆流提取60分鐘，其料液質(zhì)量比為1 :20，過濾，得葡萄皮提取液；
(2)所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇，加入5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱， 混合樹脂由質(zhì)量比為1 :1的陽離子交換樹脂001X8與大孔樹脂DlOl組成，用6倍柱體積的去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%的乙醇水溶液洗滌，最后用7倍柱體積的體積百分濃度為95%的乙醇水溶液洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度35%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水， 攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。齊墩果酸含量為99. 3%，重金屬含量小于5ppm。
權(quán)利要求
1.從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，其特征是包括如下步驟(1)去離子水洗凈的葡萄皮經(jīng)打漿機打漿后，用體積百分濃度為70% 100%的乙醇水溶液為提取溶劑，采用連續(xù)逆流提取技術(shù)，在50°C，料液質(zhì)量比為1 :20 40的條件下提取 60分鐘，過濾，得葡萄皮提取液；(2)將所得提取液減壓濃縮揮盡乙醇后，加5質(zhì)量倍去離子水溶解，攪勻，上混合樹脂柱，用6倍柱體積去離子水、6倍柱體積的體積百分濃度為30%乙醇水溶液、7倍柱體積的百分濃度為95%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集百分濃度為95%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水，攪勻，在20°C條件下析晶8小時，吸去上清液，結(jié)晶加入等體積的百分濃度為95%乙醇水溶液溶解，減壓濃縮至糖度30%，加入等體積的去離子水， 攪勻，在20°C條件下析晶8小時，過濾，結(jié)晶以去離子水洗至無醇味，在50°C條件下減壓干燥，即得到純化后的齊墩果酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述混合樹脂為離子交換樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，其特征在于所述提取溶劑為體積百分濃度為70% 100%的乙醇水溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，其特征在于所述料液比為 1 :20 40。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，其特征在于所述混合樹脂為離子交換樹脂、大孔樹脂兩種樹脂的混合，混合質(zhì)量比為1: 1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，其特征在于所述離子交換樹脂為陽離子交換樹脂，型號為001X8 ；D001FC ；D151。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，其特征在于所述大孔樹脂型號為AB-8 ；DlOl ；HP-40。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從葡萄皮中提取純化齊墩果酸的方法，該方法包括如下步驟(1)將洗凈的葡萄皮打漿，用60%-100%乙醇采用連續(xù)逆流提取，過濾，得葡萄皮提取液；(2)揮盡乙醇，加水溶解，上混合樹脂柱，并進(jìn)行洗脫分離純化重結(jié)晶。本發(fā)明的方法節(jié)省了大量溶劑；減少了產(chǎn)品中重金屬含量；有效成分損失少，可以大幅提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本，可以使原料得到更充分的利用。
文檔編號C07J63/00GK102286061SQ20111029384
公開日2011年12月21日 申請日期2011年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月27日
發(fā)明者吳巍 申請人:天津市尖峰天然產(chǎn)物研究開發(fā)有限公司