專利名稱：：芍藥苷提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥物提取領(lǐng)域，是種芍藥苷提取工藝。
背景技術(shù)：
：芍藥苷，又名芍藥甙，英文名稱Paeoniflorin,分子量480.45,植物芍藥PaeoniaalbifloraPall的根提取精制而來。為吸濕性無定形褐色粉末(90%為類白色粉末)，四醋酸酯為無色針狀結(jié)晶，熔點196'C。在酸性環(huán)境下芍藥甙穩(wěn)定(pH26)，在堿性環(huán)境下不穩(wěn)定。研究發(fā)現(xiàn)，芍藥苷具有顯著的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗驚厥、解痙、擴張冠狀動脈、降血糖、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤的作用。由于受白芍物質(zhì)構(gòu)成復(fù)雜和工藝技術(shù)的影響，90%以上高純度芍藥苷提取和工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)問題乙酯困擾著個生產(chǎn)廠家，成為行業(yè)性難題?，F(xiàn)有技術(shù)中提取芍藥苷的方法有醇水溶液回流提取法、C02超臨界流體萃取法，膜分離法等，雖然這些現(xiàn)有技術(shù)嘗試了各種不同的提取和純化方法，有些方法工藝復(fù)雜，有的需要特殊的或復(fù)雜的設(shè)備，但由于這些現(xiàn)有技術(shù)無法完全的破壞細(xì)胞壁的束縛，最大限度地提取出有效成分，并對有效物質(zhì)進(jìn)行充分合理分離，因而所得產(chǎn)品純度不高，也不易規(guī)?；a(chǎn)。采用酶解法結(jié)合無醇液相提取工藝結(jié)合提取芍藥苷的提取方法尚未見報道。本發(fā)明的一個目的是為解決上述現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)率低，產(chǎn)品純度差，不利于推廣生產(chǎn)等問題，提供一種簡單有效，產(chǎn)品純度高，能夠?qū)崿F(xiàn)規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的芍藥苷提取工藝。分子式為?，F(xiàn)有技術(shù)中多為毛茛科
發(fā)明內(nèi)容為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的一個技術(shù)方案提供了一種芍藥苷提取工藝，該工藝按照如下步驟進(jìn)行操作提取將原料切片或粗粒，并加入酶進(jìn)行酶解，酵解之后再加入適量水煎煮，靜置、放冷；離心過濾將水提取液進(jìn)行高速離心分離，收集上清液，將上清液過濾，收集濾液；洗脫將過濾后的水提取液濃縮，上大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫雜質(zhì)，再用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；精制洗脫液在加溫后加活性炭脫色過濾，濾液再濃縮至無醇可得芍藥苷粗品，粗品再加乙酸乙酯冷卻結(jié)晶，過濾，將晶體干燥，即得純度在98%以上的芍藥苷。更近一步說，一種芍藥苷提取工藝，步驟如下提取將原料切片或粗粒，并加入原料質(zhì)量的1-3%的酶進(jìn)行酶解，酶解溫度為30-5(TC，酶解時間為3-5小時；酶解之后再加入3-8倍量水煎煮l-4次，每次0.5-3h，煎煮之后，靜置、放冷；離心過濾將水提取液進(jìn)行高速離心分離，收集上清液，將上清液過濾，收集濾液；洗脫將離心過濾后的水提取液濃縮，上大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫雜質(zhì)，再用70-80%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，收集的量為3-4倍量柱體積。精制洗脫液加熱到eot:加活性炭脫色過濾，濾液濃縮至無醇，再加乙酸乙酯結(jié)晶，過濾，將晶體干燥，即得純度在98%以上的芍藥苷晶體。加入酶解液后還可以加入稀鹽酸溶液，調(diào)節(jié)pH值至3-6，然后進(jìn)行酶解。所述酶為纖維素酶或復(fù)合酶。所述復(fù)合酶包括纖維素酶和酒曲酶，以質(zhì)量百分含量計，纖維素酶為40-100%,酒曲酶為0-60%。優(yōu)選，纖維素酶為50-80%,酒曲酶為20-50%。更優(yōu)選纖維素酵為60%，酒曲酶為40%。所述復(fù)合酶還可以包括淀粉酶，以質(zhì)量百分含量計，纖維素酶為40-100%,酒曲酶為0-60%,淀粉酶為0-40%。優(yōu)選纖維素酶為50-60%,酒曲酶為20-40%，淀粉酶為10-20%.最優(yōu)選纖維素酶為50%,酒曲酶為35%,淀粉酶為15%。5本發(fā)明的有益效果在于在提取過程中，先采用酶解法，酶解之后采用了無醇液相提取工藝，由于提取過程中不使用乙醇，使用加工設(shè)備少，便于自動化控制，與醇水溶液回流提取法、C02超臨界流體萃取法，膜分離法等方法相比，具有產(chǎn)品純度高，產(chǎn)出率高，建設(shè)和生產(chǎn)投入低，操作簡便等顯著優(yōu)點。本發(fā)明采用了酶解進(jìn)行原料的處理，酶解液中的酶作用于原料，使得原料細(xì)胞壁破裂，原料中的有效成分更充分和更容易地被提取出來，本發(fā)明所采用的纖維素酶效果顯著，組合酶中各成分相互作用，在酶解過程中互相配合，使得芍藥苷的提取更充分徹底，也使得生產(chǎn)效率獲得很大提高，本發(fā)明提取工藝的回收率為99%左右，總回收率在90%。整個提取工藝實現(xiàn)了規(guī)?；a(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，并且產(chǎn)品純度達(dá)到了98%以上，達(dá)到了國際先進(jìn)技術(shù)水平。具體實施例方式下面結(jié)合實施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不作為對本發(fā)明的限定。實施例1稱取原料lkg丹皮，將原料切l(wèi)irnn左右片，并加入由24g纖維素酶配制的lkg溶液，酶解溫度為45'C，酶解時間為4小時；酶解之后再加入3倍量水煎煮4次，每次lh,煎煮之后，靜置、放冷；離心過濾將提取液放入離心機，在3000轉(zhuǎn)/min條件下分離25min，收集上清液，將離心液過濾，收集濾液待用；洗脫將濾液濃縮，上D201型大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫雜質(zhì)，再用80%的乙醇洗脫，滴速2.0ra1/(min*cm2),收集乙醇洗脫液，收集的量為3倍量柱體積；精制將洗脫液減壓濃縮至一半時，加活性炭脫色過濾，濾液再濃縮至無醇，再加乙酸乙酯結(jié)晶，過濾，將晶體冷凍干燥，即得純度在99%的芍藥苷晶體20.4g。實施例2稱取原料10kg丹皮，將原料制成40目粒，并加入由0.30kg纖維素酶和純凈水配制的10kg溶液，酶解溫度為401C,酶解時間為3小時；酶解之后再加入8倍量水煎煮3次，每次lh，煎煮之后，靜置、放冷；離心過濾將提取物放入離心機，在2000轉(zhuǎn)/min條件下分離20min,收集上清液，將離心液過濾，收集過濾液待用；洗脫將離心分離后的水提取液濃縮，上D201型大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫雜質(zhì)，再用70%的乙醇洗脫，滴速2.Oml/(mincm2)，收集乙醇洗脫液，收集的量為4倍量柱體積；精制將洗脫液減壓濃縮至一半時，加活性炭脫色過濾，濾液再濃縮至無醇，再加^M^J1結(jié)晶，過濾，將晶體冷凍干燥，即得純度在98.5%以上的芍藥苷晶體194g。提取工藝的回收率為99%左右，總回收率在90%。實施例3-11以10kg原料計，酶的用量和成分，以及酶解時間和溫度如下表所<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>權(quán)利要求1.一種芍藥苷提取工藝，其特征在于，該工藝按照如下步驟進(jìn)行操作提取將原料切片或粗粒，并加入酶進(jìn)行酶解，酶解之后再加入適量水煎煮，靜置、放冷；離心過濾將水提取液進(jìn)行高速離心分離，收集上清液，將上清液過濾，收集濾液；洗脫將過濾后的濾液濃縮，上大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫雜質(zhì)，再用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；精制洗脫液加溫后加活性炭脫色過濾，濾液再濃縮至無醇可得芍藥苷粗品，粗品再加乙酸乙酯冷卻結(jié)晶，過濾，將晶體干燥，即得產(chǎn)品。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述芍藥苷提取工藝，其特征在于，步驟如下提取將原料切片或粗粒，并加入原料質(zhì)量的1-3%的酶進(jìn)行酶解，酶解溫度為30-50'C,酶解時間為1-5小時；酶解之后再加入3-8倍量水煎煮l-4次，每次0.5-3h，煎煮之后，靜置、放冷；離心過濾將水提取液進(jìn)行高速離心分離，收集上清液，將上清液過濾，收集濾液；洗脫將離心過濾后濾液濃縮，上大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫雜質(zhì)，再用70-80%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，收集的量為3-4倍量柱體積。精制洗脫液加熱到60'C加活性炭脫色過濾，濾液再濃縮至無醇，再加乙酸乙酯結(jié)晶，過濾，將晶體干燥，即得產(chǎn)品。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述芍藥苷提取工藝，其特征在于，所述酶為纖維素酶或復(fù)合酶。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述芍藥苷提取工藝，其特征在于，所述復(fù)合酶包括纖維素酶和酒曲酶，以質(zhì)量百分含量計，纖維素酶為40-100%,酒曲酶為0-60%。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述芍藥苷提取工藝，其特征在于，所述復(fù)合酶中纖維素酵為50-80%,酒曲酶為20-50%。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述芍藥苷提取工藝，其特征在于，所述復(fù)合酶還包括淀粉酶，以質(zhì)量百分含量計，纖維素酶為40-100%,酒曲酶為0-60%，淀粉酶為0-40%。7.根據(jù)權(quán)利要求4所述芍藥苷提取工藝，其特征在于，所述復(fù)合酶中纖維素酶為50-60%,酒曲酶為20-40%,淀粉酶為10-20%.8.根據(jù)權(quán)利要求7所述芍藥苷提取工藝，其特征在于，所述復(fù)合酶中纖維素酶為50%,酒曲酶為35%,淀粉酶為15%。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述芍藥苷提取工藝，其特征在于，所述提取步驟中原料中加入酶解液后加入稀鹽酸溶液，調(diào)節(jié)Ph值至3-6，然后進(jìn)行酶解。全文摘要本發(fā)明涉及藥物提取領(lǐng)域，是一種芍藥苷提取工藝。解決了現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)率低，產(chǎn)品純度差，不適用于工業(yè)化和規(guī)?；a(chǎn)的問題。采用酶解法結(jié)合無醇液相提取工藝。首先將含有有效成分芍藥苷的中藥材加入酶進(jìn)行酶解，酶解之后再加入適量水煎煮，靜置、放冷；然后將提取高速離心分離，收集上清液，將上清液過濾，收集濾液并濃縮，濃縮物上大孔吸附樹脂柱后洗脫脫色，制得芍藥苷粗品后精制即得純度在98％以上的芍藥苷。本提取工藝由于采用酶解法，使原料中的有效成分更充分和更容易地被提取出來，由于采用無醇液相提取工藝，使得整個工藝具有產(chǎn)品純度高，產(chǎn)出率高，建設(shè)和生產(chǎn)投入低，操作簡便等顯著優(yōu)點。文檔編號C07H17/04GK101628926SQ20091016207公開日2010年1月20日申請日期2009年8月11日優(yōu)先權(quán)日2009年8月11日發(fā)明者張守力申請人:張守力