專利名稱：苯烷酰胺類化合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及苯烷酰胺類化合物及其用途，具體地說，涉及一種取代的苯烷酰胺類化合物、 即4-(N-取代氨磺?；?苯烷酰胺類化合物及其用途。
背景技術(shù)：
瘧疾是世界上最嚴(yán)重的流行病之一。有100多個(gè)國家和地區(qū)的大約30億人口受到癡疾的 威脅，全球每年患瘧疾的人有3.5到5億，每年死于疰疾的患者為150到270萬，期中，約 一半為兒童。雖然目前已存在有效的抗癡疾藥物，但疾疾患者的死亡率仍逐年上升，究其原 因，主要是引發(fā)瘧疾的瘧原蟲對(duì)有限的抗瘧藥物已適應(yīng)，即產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗藥性。
癡疾防治在很大程度上還依賴于化學(xué)藥物的預(yù)防和治療。近70多年來，只有少數(shù)藥物適 用于臨床，而抗藥性癡原蟲抹日漸增多。隨著生物化學(xué)、分子生物學(xué)和分子藥理學(xué)等相關(guān)學(xué) 科的不斷發(fā)展，揭示了許多酶和受體在生物體內(nèi)的生物化學(xué)過程中的作用，以在生物體內(nèi)起 關(guān)鍵性作用的酶作為藥物作用靶點(diǎn)進(jìn)行新藥設(shè)計(jì)已經(jīng)成為新藥研究開發(fā)的發(fā)展趨勢(shì)。隨著計(jì) 算機(jī)技術(shù)和信息科學(xué)的飛速發(fā)展，分子結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上的計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)(Computer-Aided Drug Design, CADD)大大加快了新藥研究進(jìn)程，不僅涌現(xiàn)了大量療效確切的酶抑制劑，而且 深入闡明了很多酶參與的生物化學(xué)反應(yīng)過程。這方面成功的例子越來越多， 一般采用已知三 維空間結(jié)構(gòu)的酶進(jìn)行藥物設(shè)計(jì)。新型抗寄生蟲病藥物的設(shè)計(jì)是以一種在瘧原蟲生命周期中起 重要作用的半胱氨酸蛋白酶(falcipain)為靶點(diǎn)，推動(dòng)這個(gè)發(fā)展過程的是人們對(duì)木瓜蛋白酶半 胱氨酸蛋白酶這個(gè)藥物靶標(biāo)認(rèn)識(shí)的不斷深入。瘧原蟲通過消化紅細(xì)胞作為主要的氨基酸來源 用于自身的蛋白質(zhì)合成。已知在血紅蛋白的降解過程中，有三種瘧原蟲蛋白酶起重要的作用。 其中plasmepain I和II屬天門冬氨酸蛋白酶，falcipain屬半胱氨酸蛋白酶。天門冬氨酸蛋白酶抑 制劑主要作用于分瓣原蟲和紅細(xì)胞破裂;半胱氨酸蛋白酶抑制劑主要作用于原蟲營養(yǎng)體，特異 性地作用于瘧原蟲生命周期中紅細(xì)胞降解的第一步，使瘧原蟲因缺少合成自身蛋白的自由氨 基酸而死亡；而氯喹則抑制游離血紅素的聚合，使癡原蟲被游離原血紅素釋放的大量游離基 殺死。顯然半胱氨酸蛋白酶抑制劑殺死痗原蟲的機(jī)制和氯喹不同。因此選擇半胱氨酸蛋白酶 作為抗癥新藥研究的靶點(diǎn)，可望克服抗癡藥物的耐藥性問題。半胱氨酸蛋白酶是M:約為21000~30000的蛋白質(zhì)，在pH4 6.5時(shí)具有最高水解活性，它 的活性部位具有半胱氨酸殘基。瘧原蟲的半胱氨酸蛋白酶屬于木瓜蛋白酶家族。已知的癡原 蟲半胱氨酸蛋白酶有四個(gè)亞型，falcipain-l, falcipain-2A, falcipain-2B， falcipain-3。 Falcipain 1是第一個(gè)表達(dá)得到的瘧原蟲半胱氨酸蛋白酶，其生物學(xué)研究表明，它對(duì)瘧原蟲的無性生殖 階段并無影響，但能顯著的影響卵囊的功能。Falcipain-2A, falcipain-2B具有97 %的同源性， 僅在氨基酸序列的7位有所不同。通過寡核苷酸探針的監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，falcipain-2B mRNA的表達(dá) 水平比falcipain-2A低。然而falcipain-2A和falcipain-2B在痗原蟲營養(yǎng)體晚期其表達(dá)的時(shí)間依 賴性和峰值極為相似，這表明兩種不同的亞型具有相似的生物學(xué)功能。Falcipain-3與falcipain-2 在催化域有66.6 %的同源性，但是它們表達(dá)的階段有所不同。Falcipain-2在營養(yǎng)體階段表達(dá) 達(dá)到最高峰，而falcipain-3在更為成熟的瘧原蟲階段表達(dá)達(dá)到高峰。在這幾種亞型中，對(duì)于 falcipain-2的研究最多，因此其抑制劑的開發(fā)亦受到更為廣泛的關(guān)注。
綜上所述，以半胱氨酸蛋白酶falcipain-2作為靶標(biāo)，結(jié)合CADD和各種水平的生物活性 測(cè)試試驗(yàn)，設(shè)計(jì)并合成的小分子化合物，對(duì)開發(fā)抗癡藥物具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
本發(fā)明的發(fā)明人綜合運(yùn)用CADD和基于Biacore的SPR實(shí)驗(yàn)，找到了 一種4-(N-取代氨磺 ?；?苯烷酰胺化合物，并運(yùn)用合理藥物設(shè)計(jì)方法對(duì)種化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾得4-(N-取代氨磺 ?；?苯烷酰胺類化合物，測(cè)試所得4-(N-取代氨磺?；?苯烷酰胺類化合物在體外酶水平實(shí)驗(yàn) 測(cè)試中抑制falcipain-2的活性，結(jié)果表明本發(fā)明設(shè)計(jì)的4-(N-取代氨磺?；?苯烷酰胺類化合 物具有較強(qiáng)的falcipain-2抑制活性，可用于制備由癡原蟲引起的瘧疾治療藥物。
本發(fā)明所說的4-(N-取代氨磺?；?苯烷酰胺類化合物，其具有式I所示結(jié)構(gòu)
式I中&為氯，d-C6直鏈或支鏈的飽和或不飽和烷基，5-7元芳香基，取代的5-7元 芳香基或式(1)所示基團(tuán)

發(fā)明內(nèi)容
A—CH^式(1)中A為5-7元芳香基，取代的5-7元芳香基，5-7元雜環(huán)基或取代的5-7元雜環(huán) 基，m= 1 ~6;
R2為氫，C廣C6直鏈或支鏈的飽和或不飽和烷基，5-7元芳香基，取代的5-7元芳香基， 5-7元雜環(huán)基，取代的5-7元雜環(huán)基，并有5-7元雜環(huán)基的5-7元芳香基，并有5-7元芳香基 的5-7元雜環(huán)基或式(1 )所示基團(tuán)；
n = 0~3;
其中所說的取代的5-7元芳香基和取代的5-7元雜環(huán)基中的取代基選自卣素(F、 Cl、 Br或I), C廣C6烷氧基，羥基，苯基，d-Q直鏈或支鏈烴基，C廣C4不飽和烴氧基，羧基， 酯基，d-C6羧基烷氧基，d-Q酯基烷氧基，C廣C6羧基烷基，d-Q酯基烷基，絲，硝基， 氨基，羥曱基，三氟曱基，三氟甲氧基，巰基或C廣Q?；幸环N、二種或兩種以上；取代 基的個(gè)數(shù)為1-4;
所說的5-7元雜環(huán)基中的雜原子選自氧、硫或氮中一種、二種或兩種以上，雜原子個(gè)數(shù)為
1-3。
在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選技術(shù)方案中，R，為5-7元芳香基，取代的5-7元芳香基或式(1)所示 基團(tuán)；
其中A為5-7元芳香基或取代的5-7元芳香基，m = 1 ~ 3;所說的取代的5-7元芳香基 中的取代基為卣素(F、 Cl、 Br或I)或C,-C6烷氧基，取代基的個(gè)數(shù)為1-3。 更優(yōu)選的為取代的6元芳香基或式(1)所示基團(tuán)；
其中A為6元芳香基，m=l~3;所說的取代的6元芳香基中的取代基為卣素(F、 Cl、 Br或I)或d-C6烷氧基，取代基的個(gè)數(shù)為1-3。 最佳的R！為取代苯基或式(1)所示基團(tuán)；
其中A為苯基，m為l或2;所說的取代苯基的取代基為囟素(F、 Cl、 Br或I)或d-C3 烷氧基，取代基的個(gè)數(shù)為1-3。具體如千基、苯乙基、3，4-二曱氧基苯基或4-氟苯基等。
在本發(fā)明另 一個(gè)優(yōu)選技術(shù)方案中，R2為5-7元芳香基，取代的5-7元芳香基，5-7元雜環(huán) 基，取代的5-7元雜環(huán)基，并有5-7元雜環(huán)基的5-7元芳香基，并有5-7元芳香基的5-7元雜 環(huán)基或式(1)所示基團(tuán)；
其中A為5-7元雜環(huán)基或取代的5-7元雜環(huán)基，m=l~3;所述的取代的5-7元芳香基 和取代的5-7元雜環(huán)基中的取代基選自卣素(F、 Cl、 Br或I), d-Q烷氧基，C廣Q烷基， 羥基或苯基中一種、二種或二種以上，取代基的個(gè)數(shù)為1-4;
雜環(huán)基的含義與前文所述相同。更優(yōu)選的R2為取代的6元芳香基，5-6元雜環(huán)基，取代的5-6元雜環(huán)基，并有5-6元雜環(huán) 基的6元芳香基，并有6元芳香基的5-6元雜環(huán)基或式(1)所示基團(tuán)；
其中A為5-6元雜環(huán)基或取代的5-6元雜環(huán)基，m = 1 ~ 3;所述的取代的6元芳香基和 取代的5-6元雜環(huán)基中的取代基選自卣素(F、 Cl、 Br或I), C廣C3烷氧基，C廣C3烷基， 羥基或苯基中一種、二種或二種以上，取代基的個(gè)數(shù)為1-3。雜環(huán)基的含義與前文所述相同。
最佳的R2為取代的苯基，5-6元雜環(huán)基，取代的5-6元雜環(huán)基，并有5-6元雜環(huán)基的苯基， 苯并5-6元雜環(huán)基或式(1)所示基團(tuán)；
其中A為5-6元雜環(huán)基或取代的5-6元雜環(huán)基，m為1或2;所述的取代的苯基和取代 的5-6元雜環(huán)基中的取代基選自鹵素(F、 Cl、 Br或I), d-C3烷氧基，d-C3烷基，輕基 或苯基中一種、二種或二種以上，取代基的個(gè)數(shù)為1-3。雜環(huán)基的含義與前文所述相同。
本發(fā)明推薦使用的R2為苯并[l，4]二氧六環(huán)-6-基，苯并[l，3]二氧五環(huán)-5-基，苯并[《噻唑 國2-基，噻唑-2-曱基，吡啶-2-曱基，5-乙基-1, 3， 4-噻二唑-2-基，3， 4-二曱氧苯基,3-幾基-4-曱氧苯基，3-氯-4-氟苯基或4-苯基噻唑-2-基。
本發(fā)明所設(shè)計(jì)的化合物可作為瘧原蟲falcipain-2的小分子抑制劑，其通過阻斷瘧原蟲 falcipain-2催化活性，影響痗原蟲對(duì)宿主血紅蛋白的降解，從而阻斷癥原蟲的生命周期。因此 本發(fā)明所述的化合物可開發(fā)成為新的抗瘧藥物。


圖1為陽性對(duì)照(Z-Phe-Arg-pNA.HCl)和化合物ia-1與FP-2蛋白相互作用的傳感圖，
其中各條線由上到下代表的化合物濃度依次為1 x 1(T5M、 5 x 1(T6M、 2.5 x 1(T6M、 1.25 x10—6m、 6.25xi(r7m、 3.125 x 10—7m和0。
圖2.化合物ia-3、化合物ia-6、化合物ia-10和化合物ia-13的ICso值曲線。
具體實(shí)施例方式
一種制備本發(fā)明所述的4-(N-取代氨磺酰基)苯烷酰胺類化合物(結(jié)構(gòu)如式I所示)的方 法，其合成策略如下所示
iv v lA<formula>formula see original document page 8</formula>其中R!和R2的定義與前文所述相同，n為l、 2或3。
具體包括如下步驟
Ia的合成
1 )將苯取代脂肪酸和催化量濃矽u酸投入到甲醇溶液中回流10~24小時(shí)；蒸除大部分溶劑， 加水，有機(jī)溶劑萃取3次，合并有機(jī)相，依次用水和碳酸氬鈉溶液洗，干燥，蒸干溶劑，得 到苯取代脂肪酸曱酯(II);
2)向苯取代脂肪酸曱酯(II)滴加氯磺酸，控制滴加速度，保持反應(yīng)液溫度不高于40。C, 攪拌1 5小時(shí)，將反應(yīng)液傾入冰水中，有機(jī)溶劑萃取，水洗，干燥，蒸千溶劑，得到4-氯磺 ?；饺〈舅釙貂?III)。
3 ) 20'C-30。C條件下，R,取代胺(R!NH2)在吡啶溶液中與4-氯磺?；饺〈舅峒柞?(m)反應(yīng)，溫度在4(TC-45'C,攪拌12-36小時(shí)。將反應(yīng)液傾入水中，有機(jī)溶劑萃取，得到的 有機(jī)層經(jīng)干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，殘余物柱層析分離得4-(N-Ri取代氨磺?；?^l代脂 肪酸甲酯(IV)。
4) 將4-(N-Rt取代氨磺?；?苯取代脂肪酸曱酉旨(IV)和無積減投入到適量的四氫呋喃/曱醇 混合液中(V/V = 3/1), 20。C-30。C攪拌10-24小時(shí)，減壓蒸除溶劑，殘余物加水，用稀鹽酸調(diào) pH = 2~3，析出大量固體，抽濾，水洗得4-(N-R!取代氨磺?；?苯取代脂肪酸(V)。
5) 將4-(N-R取代氨磺?；?苯取代脂肪酸(V)和氯代試劑溶于惰性溶劑中，30'C-7(TC攪 拌2-10小時(shí)，減壓濃縮，殘余物用少量干燥的二氯曱烷溶解。將上述溶液于20'C-3(TC攪拌 下，滴入R2取代胺(R2NH2)的吡啶混合溶液中。2(TC-30。C反應(yīng)12-24小時(shí)，加水，有機(jī)溶 劑萃取，得到的有機(jī)層經(jīng)干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，殘余物柱層析分離得目標(biāo)物4-(N，-Ri 取代氨磺?；?-N-R2取代苯取代脂肪酰胺(U),目標(biāo)化合物之一 。
和Ib的合成
1) 將對(duì)甲基苯磺酸和氫氧化鉀溶于水中，控溫8(TC攪拌下，滴加高錳酸鉀的水溶液， 加畢，向反應(yīng)液中加入適量的乙醇，過濾，濾液濃縮得對(duì)羧基苯磺酸鉀(VI)。
2) 向?qū)︳然交撬徕?VI)滴加氯磺酸，控制滴加速度，保持反應(yīng)液溫度不高于30。C,攪 拌l-5小時(shí)，將反應(yīng)液傾入水水中，抽濾，水洗得到4-氯磺?；郊姿?vn)。
3) 室溫下R!取代胺(RiNFb)在吡啶溶液中與4-氯磺酰基苯曱酸(VII)反應(yīng)，溫度在40 °C-45°C，攪拌12-36小時(shí)。將反應(yīng)液傾入水中，有機(jī)溶劑萃^f又，得到的有機(jī)層經(jīng)干燥，過濾， 減壓蒸除溶劑，殘余物柱層析分離得4-(N-Ra取代氨磺酰基)苯甲酸(VIII)。
4 )將4-(N-R,取代氨磺酰基)苯曱酸(Vm)和氯代試劑溶于惰性溶劑中，30。C-70。C攪拌2-10 小時(shí)，減壓濃縮，殘余物用少量干燥的二氯甲烷溶解。將上述溶液于室溫?cái)嚢柘?，滴入R2 取代胺(R2NH2)的吡啶混合溶液中。室溫反應(yīng)12-24小時(shí)，加水，有機(jī)溶劑萃取，得到的有 機(jī)層經(jīng)干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，殘余物柱層析分離得目標(biāo)物4-(N，-R!取代氨碌?；?-N-R2 取代苯曱酰胺(18),目標(biāo)化合物之二。
下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述。這些實(shí)施例僅用于更好理解本發(fā)明的內(nèi)容，其 不以任何方式限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實(shí)施例1
3-苯基丙酸甲酯(化合物II-1)的制備
將3.0克3-苯丙酸溶于裝有30 mL無水曱醇的50 mL圓底燒瓶中，加熱至70 。C回流， 然后冷卻至20。C-30。C,控制在這個(gè)溫度，攪拌下將1 mL濃硫酸緩慢滴加至反應(yīng)液中，升溫 至70。C，回流5小時(shí)。減壓蒸餾除去溶劑，加入30mL乙酸乙酯，依次用蒸餾水(10mLx 3 )， 5%碳酸氫鈉(10 mL x 3 )，蒸餾水(10 mL x 3 )洗，乙酸乙酯層用無水硫酸鎂干燥，過 濾，減壓除去溶劑得3-苯基丙酸曱酯(11-1)2.9克，為無色液體，收率88%。 MS(EI)/n/z164
實(shí)施例2
3-(4-氯磺酰基苯基)丙酸曱酯(化合物III-1)的制備
將5.5 mL氯磺酸逐滴滴加到2.9克3-苯基丙酸曱酯(II-l)中，控制滴加速度，保持反應(yīng) 液溫度不高于40。C,加畢繼續(xù)攪拌反應(yīng)1.5小時(shí)。將反應(yīng)液傾入80mL冰水中，二氯曱烷萃 取(30 mL x 3 )，依次用鹽水(10 mL x 3 )，蒸餾水(10 mL x 3 )洗，有機(jī)相用無7jc硫酸鎂干 燥，過濾，減壓除去溶劑得3.3克3-(4-氯磺?；交?丙酸甲酯(IH-1)，為白色固體，收率 72%。 mp 62-64 °C; MS (EI) m/z262 (M+)。實(shí)施例3
3-(4-(N-苯乙基-氨磺?；?苯基)丙酸甲酯(化合物IV-1)的制備
將1.0克2-苯基乙胺加入到20 mL的吡啶中，20。C-3(TC攪拌，分批將1.0克3-(4-氯磺酰 基苯基)丙酸甲酯(IH-1)加入到反應(yīng)液中，加畢，繼續(xù)攪拌反應(yīng)2小時(shí)，減壓除去溶劑，加 適量水用二氯甲烷萃取，依次用6N鹽酸，水洗，二氯甲烷用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓 除去溶劑得0.78克3-(4-(N-苯乙基-氨磺?；?苯基)丙酸曱酯(IV-1 )，為淺黃色液體，收率60%。 MS(EI)w/z347(M+)。
實(shí)施例4
3-(4-(N-苯乙基-氨磺酰基)苯基)丙酸(化合物V-l)的制備
將0.70克3-(4-(N-苯乙基-氨磺?；?苯基)丙酸曱酯(IV-1)溶于15 mL四氫呋喃和甲醇的 混合溶劑(V/V=3:l)中，加入0.20克LiOH.H20, 20。C-30。C攪拌10小時(shí)，減壓蒸干溶劑， 加入適量水，用稀鹽酸調(diào)pH = 2.5,析出固體，抽濾得0.49克3-(4-(N-苯乙基-氨磺?；?苯基) 丙酸(V誦l )，為淺黃色固體，收率75%。 mp 114-116 °C; MS (EI) w/z 333 (M+);力-NMR (CDC13, 500 MHz) 5 2.69 (t， 2H)， 2.78 (t, 2H), 3.04 (t, 2H), 3.23 (t， 2H), 7.09 (m, 2H)， 7.23 (m， 1H), 7.29 (m， 2H)， 7.34 (d， 2H), 7.74 (d， 2H)。
實(shí)施例5
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺?；?苯基)-N-(苯并[l，4]二氧六環(huán)-6-基)丙酰胺(化合物IA的一種(U-1)) 的制備
將0.33克3-(4-(N-苯乙基-氨磺酰基)苯基)丙酸(V-l)溶于20 mL 二氯曱烷中，冰浴攪拌， 在氮?dú)獗Ｗo(hù)下將0.24克草酰氯滴加到反應(yīng)液中，加畢，攪拌反應(yīng)1.5小時(shí)，減壓蒸干溶劑， 得黃色油狀液體，用5mL二氯曱烷溶解，滴加至裝有0.15克苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-胺和20mL 吡啶的反應(yīng)瓶中，加畢，20。C-3(TC攪拌2小時(shí)，減壓除去溶劑，用二氯甲烷萃取，水洗(IO mLx3),無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘余物柱層析分離(洗脫劑乙酸乙酯/石油 醚=1:1),得0.28克白色固體(U-1),收率61%。 mp 132-134 。C; NMR (CDC13, 500 MHz) 3 2.64 (t， 2H)， 2.77 (t, 2H), 3.12 (t, 2H), 3.23 (t, 2H), 4.23 (m, 4H), 4.35 (br, 1H)， 6.82(m, 2H), 7.08 (m, 4H), 7.28 (m, 2H), 7.54 (d, 2H)， 7.71 (d, 2H); MS (EI) w/z 466 (M+)。
實(shí)施例6
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺?；?苯基)-N-(苯并[l,3]二氧五環(huán)-5-基)丙酰胺(化合物IA的一種(U-2)) 的制備將苯并[l，4]二氧六環(huán)-6-胺替換成苯并[l,3]二氧五環(huán)-5-胺，其余所需原料、試劑及制備方 法同實(shí)施例5,得灰白色固體。mp 141-144 。C; NMR (CDC13, 400 MHz) 3 2.66 (t, 2H), 2.77 (t, 2H), 3.16 (t, 2H)， 3.24 (t, 2H)， 4.37 (br, 1H), 5.94 (s, 2H), 6.71 (m， 2H), 7.11 (t, 3H)， 7.29 (m, 3H), 7.39 (d， 2H), 7.72 (d， 2H); MS (EI)油452 (M+)。
實(shí)施例7
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺?；?苯基)-N-(苯并W噻唑-2-基)丙酰胺(化合物U的一種(lA-3))的制 備
將苯并[l，4]二氧六環(huán)-6-胺替換成苯并問噻唑-2-胺，其余所需原料、試劑及制備方法同實(shí) 施例5,得白色固體。mp 141-144 °C; >H- NMR (CDC13, 400 MHz) <5 2.65 (t， 2H)， 2.82 (t， 2H)， 2.93 (m, 2H)， 3.04 (t, 2H), 7.2 (d, 2H), 7.16 (t, 1H)， 7.25 (m， 2H)， 7.31 (t, 1H), 7.46 (m, 3H), 7.65 (t， 1H)， 7.72 (t， 3H), 7.96 (d, 1H), 12.38 (s, 1H); MS (EI)附/z 465 (M+)。
實(shí)施例8
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺?；?苯基)-N-(噻唑-2-曱基)丙酰胺(化合物U的一種(lA-4))的制備
將苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-胺替換成噻唑-2-曱胺，其余所需原料、試劑及制備方法同實(shí)施例 5，得白色固體。mp 97-98 。C; NMR (DMSO-^， 400 MHz) 3 2.45 (t， 2H)， 2.67 (t, 2H), 2.93 (m， 4H)， 4.38 (d， 2H)， 6.84 (d, 1H)， 6.卯(q, 1H)， 7.16 (t, 2H), 7.19 (d， 1H), 7.27 (t， 2H)， 7.32 (q， 1H), 7.39 (d， 2H), 7.66 (m, 3H)， 8.47 (t， 1H); MS (EI) w/z 428 (M+)。
實(shí)施例9
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺?；?苯基)-N-(吡啶-2-曱基)丙酰胺(化合物U的一種(lA-5))的制備
將苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-胺替換成吡啶-2-曱胺，其余所需原料、試劑及制備方法同實(shí)施例 5,得白色固體。mp 121-123 。C; NMR (CDC13,400 MHz) <5 2.52 (t， 2H)， 2.68 (t, 2H)， 2.94 (q， 2H)， 4.31 (d, 2H)， 7.00 (d, 1H), 7.14 (t， 2H), 7.15-7.27 (m， 4H)， 7.42 (d， 2H), 7.68 (m， 4H) 8.45 (m, 2H); MS(EI)m/z423 (M+)。
實(shí)施例10
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺?；?苯基)-N-(5，-乙基-l，,3，，4，-噻二唑-2-基)丙酰胺(化合物IA的一種 (IA-6))的制備
將苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-胺替換成5-乙基-l,3，4-噻二唑-2-胺，其余所需原料、試劑及制備 方法同實(shí)施例5，得白色固體。mp 185-188 。C; !H-NMR(CDCl3,400MHz)3 1.28(t，3H),2.66 (t， 2H), 2.82 (t， 2H), 3.00 (m, 6H)， 7.12 (d, 2H)， 7.18 (t, 1H), 7.26 (t， 2H), 7.43 (d, 2H), 7.68 (m, 3H)， 12.41 (s, 1H); MS (EI) m/z 444 (M+)。
11實(shí)施例11
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺?；?苯基)-N-(3，,4，-二曱氧苯基)丙酰胺(化合物U的一種(lA-7))的制 備
將苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-胺替換成3,4-二曱氧基苯胺，其余所需原料、試劑及制備方法同 實(shí)施例5,得白色固體。mp 145-148 。C; NMR (CDC13， 400 MHz) <5 2.66 (m, 4H), 2.98 (m， 4H): 3.69 (s， 6H), 6.84(d， 1H)， 7.04 (d， 1H)， 7.12 (d, 2H), 7.19 (d, 1H), 7.24 (m， 3H), 7.44 (d， 2H), 7.69 (m， 3H), 9.77 (s， 1H); MS (EI) m/z 468 (M+)。
實(shí)施例12
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺酰基)苯基)-N-(3，-羥基-4，-曱氧苯基)丙酰胺(化合物iA的一種(U-8))的 制備
將苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-胺替換成3-羥基-4-曱氧基苯胺，其余所需原料、試劑及制備方法 同實(shí)施例5，得白色固體。mp 115-120 。C; 'H- NMR (DMSO-^， 400 MHz) 3 2.60 (t, 2H), 2.66 (t， 2H)， 2.96 (m， 4H)， 3.67 (s， 3H), 6.78 (d, 1H), 6.88 (q， 1H), 7.12 (m, 3H), 7.18 (t, 1H), 7.26 (m, 2H)， 7.44 (d, 2H), 7.65 (t， 1H)， 7.70 (d， 2H)， 9.00 (s, 1H)， 9.65 (s, 1H); MS (EI) m/z 454 (1VT)。
實(shí)施例13
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺?；?苯基)-N-(3，-氯-4，-氟苯基)丙酰胺(化合物iA的一種(U-9))的制備 將苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-胺替換成3-氯-4-氟苯胺，其余所需原料、試劑及制備方法同實(shí)施 例5，得白色固體。mp 156-157 °C; 'H- NMR (CDC13， 400 MHz) (5 2.67(m, 4H)， 2.93 (m， 2H)， 2.99 (m， 2H)， 7.12 (d, 2H)， 7.18 (t, 1H), 7.25 (m， 2H), 7.34 (t， 1H), 7.45 (m， 3H), 7.69 (m, 3H), 7.90 (q， 1 H), 10.14 (s， 1 H); MS (EI) m/z 460 (M+)。
實(shí)施例14
3-(4-(N，-苯乙基-氨磺?；?苯基)-N-(4，-苯基噻唑-2-基)丙酰胺(化合物U的一種(U-IO))的制 備
將苯并[l，4]二氧六環(huán)-6-胺替換成4-苯基噻唑-2-胺，其余所需原料、試劑及制備方法同實(shí) 施例5，得白色固體。mp 119-121 。C; NMR (CDC13,400 MHz) 32.77 (t, 4H)， 3.08 (t， 2H)， 3.18 (t, 2H)， 4.83 (t， 1H)， 7.02 (d， 2H), 7.12 (s, 1H)， 7.18-7.25 (m, 5H), 7.39 (m， 3H)， 7.72 (t, 4H); MS (EI)m/z491 (M、
實(shí)施例15
3-(4-(N，-((3，，,4，，-二曱氧基)苯基)氨磺?；?苯基)-N-(苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-基)丙酰胺(化合物lA的一種(U-ll))的制備
將2-苯基乙胺替換成3,4-二甲氧基苯胺，其余所需原料、試劑及制備方法同實(shí)施例3~5, 得白色固體。mp 186-189 。C; NMR (CDC13， 400 MHz) 5 2.58 (t, 2H), 2.93 (t, 2H)， 3.58 (s, 3H)， 3.63 (s, 3H), 4.20(q， 4H)， 6.52 (m, 1H), 6.63 (d， 1H)， 6.75 (q， 2H), 6.卯(q, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.39 (d， 2H), 7.61 (d, 2H); MS (EI) m/z 498 (M+)。
實(shí)施例16
3-(4-(N，-(苯甲基)氨磺?；?苯基)-N-(苯并[l，3]二氧五環(huán)-5-基)丙酰敏化合物Ia的一神(Ia-12))
的制備
將2-苯基乙胺和苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-胺分別替換成芐胺和苯并[l，3]二氧五環(huán)-5-胺，其余 所需原料、試劑及制備方法同實(shí)施例3~5,得白色固體。mp 174-176 。C; NMR (DMSO-4 400 MHz) <5 2.62 (t, 2H)， 2.97 (t， 2H), 3.93 (d， 2H), 5.96 (s， 2H), 6.83 (d, 1H), 6.90 (q, 1H)， 7.21 (m， 3H), 7.28 (m， 3H), 7.43 (d， 2H), 7.71 (d, 2H), 8.09 (t, 1H)， 9.80 (s， 1H); MS (EI) m/z 438 (W)。
實(shí)施例17
3-(4-(N，-(4"-氟苯基)氨磺?；?苯基)-N-(5，-乙基-l，，3，,4，-噻二唑-2-基)丙酰胺(化合物IA的一 種(U-13))的制備
將2-苯基乙胺和苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-胺分別替換成4-氟苯胺和5-乙基-l，3,4-噻二唑-2-胺， 其余所需原料、試劑及制備方法同實(shí)施例3~5,得白色固體。mp 235-239 。C; "H- NMR (DMSO-4 400 MHz) 3 1.29 (t， 3H)， 2.77 (t, 2H)， 2.99 (m， 4H)， 7.06 (d， 4H)， 7.41 (d， 2H), 7.63 (d， 2H)， 10.20 (s， 1H)， 12.40 (s, 1H); MS (EI) m/z 434 (M+)。
實(shí)施例18
2-(4-(N，-革乙基-氨磺?；?苯基)-N-(苯并[M]二氧六環(huán)-6-基)乙酰胺(化合物IA的一種(U-")) 的制備
將3-苯丙酸替換成苯乙酸，其余所需原料、試劑及制備方法同實(shí)施例1~5,得白色固體。 mp 91-92 。C; 'H- NMR (DMSO-4 400 MHz) <5 2.67 (t， 2H)， 2.94 (t， 2H)， 3.68 (s， 2H)， 4.17 (m， 4H), 6.76 (d， 1H), 6.95 (m, 1H), 7.10-7.22 (m, 6H), 7.50 (m, 2H)， 7.75 (m, 2H); MS (EI) m/z 452 (M、
實(shí)施例19
對(duì)羧基苯磺酸鉀(化合物VI)的制備
將1.7克對(duì)甲基苯磺酸和0.68克氫氧化鉀溶于15 mL水中，控溫80 °C攪拌下，滴加高 錳酸鉀的水溶液U.6克/13 mL),加畢，向反應(yīng)液中加入20mL乙醇，過濾，濾液濃縮得對(duì)羧基苯磺酸鉀(VI)1.2克，收率51%。直接用于下步反應(yīng)。
實(shí)施例20
4-氯磺?；綍跛?化合物VII)的制備
向1.2克對(duì)羧基苯磺酸鉀(VI)中滴加4mL氯磺酸，控制滴加速度，保持反應(yīng)液溫度不高 于30。C,加畢，繼續(xù)攪拌2小時(shí)，將反應(yīng)液傾入冰水中，抽濾，水洗得到4-氯磺酰基苯曱酸 (VII)0.22克，為白色固體，收率20%。 mp 230-232 。C。
實(shí)施例21
4-(N-苯乙基-氨磺酰基)苯曱酸(化合物VIII-1)的制備
將0.13克2-苯基乙胺加入到5 mL的吡啶中，室溫?cái)嚢瑁峙鷮?.22克4-氯磺?；綍?酸(VII)加入到反應(yīng)液中，加畢，繼續(xù)攪拌反應(yīng)12小時(shí)，減壓除去溶劑，加適量水用二氯曱 烷萃取，依次用6N鹽酸，水洗，二氯甲烷用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘余物柱 層析分離(洗脫劑乙酸乙酯/石油醚=1:2),得4-(N-苯乙基-氨磺?；?苯曱酸(化合物VIII-1) 0.15克，為白色固體，收率50%。 NMR (DMSO-A, 400 MHz) 3 2.65 (t, 2H), 2.99 (t, 2H)， 7.19 (m， 3H), 7.26 (m， 2H)， 7.90 (d， 2H), 8.10 (d, 2H)。
實(shí)施例22
4-(N，-苯乙基-氨磺?；?-N-(苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-基)苯曱酰胺(化合物Ib的一神(Ib-I))的制 備
將0.15克4-(N-苯乙基-氨磺酰基)苯甲酸(化合物VIII-1)溶于20 mL 二氯曱烷中，冰浴 攪拌，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下將0.24克草酰氯滴加到反應(yīng)液中，加畢，攪拌反應(yīng)1.5小時(shí)，減壓蒸干 溶劑，得黃色油狀液體，用5mL二氯曱烷溶解，滴加至裝有0.15克苯并[l，4]二氧六環(huán)-6-胺 和10mL吡咬的反應(yīng)瓶中，加畢，室溫?cái)嚢?小時(shí)，減壓除去溶劑，用二氯甲烷萃取，水洗 (10mLx3)，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮，殘余物柱層析分離(洗脫劑乙酸乙酯/ 石油醚=1:1),得0.062克淺黃色固體(Ib-1),收率29%。 mp 135-138 。C; NMR (CDC13， 500 MHz) S 2.72 (t, 2H)， 2.99 (t， 2H), 4.24 (m， 4H), 6.83 (d, 1H)， 7.19 (m， 4H), 7,27(m, 2H)， 7.37 (d, 1H), 7.90 (m， 3H), 8.07 (d， 2H)， 10.28 (s， 1H); MS (EI) w/z 438 (M+)。
實(shí)施例23
本發(fā)明化合物IA-1與Falcipain-2蛋白酶結(jié)合活性測(cè)定
Falcipain-2蛋白酶與IA-1結(jié)合活性的篩選和動(dòng)力學(xué)常數(shù)的測(cè)定基于SPR (表面等離子共 振)原理，使用的儀器是Biacore 3000 (Biacore AB, Uppsala, Sweden)。
(1) Falcipain-2質(zhì)粒(pQE30-Fa12)的構(gòu)建根據(jù) Falcipain-2 cDNA 序列設(shè)計(jì)引物，正向和反向引物分另'J為 5,CGTGGATCCCAAATGAATTATGAAG3， 和 5'ATATGTCGACTTATTCAATTAATGGAATG3，，包含Baw// /和Sa/ /酶切位點(diǎn)，通過PCR 擴(kuò)增Falcipain-2片段，將酶切后的PCR產(chǎn)物和表達(dá)載體pQE30連接后鑒定正確，轉(zhuǎn)化入大 腸桿菌Ml5 (Qiagen)進(jìn)行表達(dá)。
(2) Falcipain-2 (FP-2)蛋白的表達(dá)與純化
將構(gòu)建好的質(zhì)粒pQE30-Fa12轉(zhuǎn)入大腸桿菌M15中得到表達(dá)工程菌，將工程菌培養(yǎng)于含 100ng/mL氨卡青霉素和50iag/mL卡那霉素的10 mL LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)過夜(蛋白胨10g/L， 酵母提取物5 g/L，氯化鈉10 g/L)。然后按1:100轉(zhuǎn)接入1 L含氨節(jié)青霉素和卡那霉素的新鮮 LB培養(yǎng)基中，37 ° C下，220轉(zhuǎn)/分培養(yǎng)。當(dāng)OD600達(dá)到約0.8時(shí)，加入IPTG至終濃度0.5 mM， 同時(shí)將溫度降到25 。C培養(yǎng)12小時(shí)進(jìn)行蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)。4000轉(zhuǎn)/分離心30分鐘收集菌體， 收集好后放于-80 。C超低溫冰箱保存過夜。將菌體用20 mL的buffer 1 (20 mM Tris-Cl, 0.5 M NaCl, and 10 mM imidazole, pH8.0)懸起，將懸浮液冰浴上超聲波破碎(300 W,工作30分 鐘， 一次5秒，中間間隔10秒)。破碎后得到的細(xì)胞勻漿在4 °C,以10000轉(zhuǎn)/分離心30分 鐘，棄上清，用20 mL的buffer 2 (6 M guanidine HCl 20 mM Tris-Cl 250mM NaCl 20 mM imidazole, pH8.0)溶解沉淀，室溫下溫和攪拌1小時(shí)，10000轉(zhuǎn)/分離心30 min，并將上清上 樣到用Binding buffer 2 (6 M guanidine HCl, 20 mM Tris-Cl, 250 mM NaCl, pH 8.0)平衡好的Ni2 、NTA柱上，先后用Wash buffer 1 (8 M urea， 20 mM Tris-Cl， 500 mM NaCl pH 8.0)和Wash buffer 2 (8 M urea， 20 mM Tris-Cl, 30mM imidazole)各30ml洗去非特異性結(jié)合的雜蛋白，再用 Elution buffer (8 M urea, 20 Mm Tris-Cl， 1 M imidazole) 10 ml洗去目的蛋白，用SDS-PAGE檢 測(cè)蛋白的分子量和純度。
(3) FP-2包涵體蛋白的復(fù)性
將純化得到的蛋白加入10 mM DTT， 37 °C下溫浴45分鐘后，將蛋白溶液稀釋到10 pg/ml 進(jìn)4亍透析(透4斤'液100 mM Tris-Cl， ImMEDTA, 20% glycerol, 250 mM L-arginine, ImM GSH, lmMSSG， pH 8.0)過夜。將透析好的蛋白濃縮即可用作酶抑制活性的測(cè)定。
(4) FP-2蛋白的偶聯(lián)
徹底清洗Biacore 3000機(jī)器后，用HBS-EP緩沖液(10 mM Hepes, 150 mM NaCl, 3 mM EDTA and 0.005% (v/v) surfactant P20, pH 7.4)平衡#幾器至基線平穩(wěn)。0.2M N-ethyl-N，-dimethylaminopropyl carbodiimide (N-乙基-N，-二曱基氨丙基碳二亞胺)和50mMM N-羥基琥珀酰亞胺(EDC/NHS) 1: 1混和，以5 pL/min進(jìn)樣7分鐘以活化芯片表面。FP-2蛋白用10mM乙酸鈉，pH4.2,稀釋至終濃度為69嗎/ml,以5 pL/min流速進(jìn)樣。最后，用 1 M鹽酸乙醇胺，pH8.5以5nL/min流速進(jìn)樣7分鐘，封閉芯片表面，最終FP-2蛋白的偶聯(lián) 量為9300RU左右。
(5) 化合物篩選
底物Z-Phe-Arg-pNAHCl(BachemAG)作為陽性對(duì)照。IA-1用100% DMSO溶解，母液 濃度為10mM。用HBS-EP緩沖液稀釋化合物，至終濃度為1 pM和10 pM， DMSO的終濃 度為0.1%。根據(jù)IA-1與芯片上FP-2蛋白的結(jié)合的RU ( Response Unit,共振單位)值，判 斷化合物是否具有結(jié)合活性。有結(jié)合活性的化合物可進(jìn)行詳細(xì)的動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果證明IA-1 與FP-2蛋白有明顯的結(jié)合。
(6) 動(dòng)力學(xué)測(cè)定
IA-1用工作緩沖液HBS-EP (含0.1% DMSO)，分別配成不同的濃度梯度，以30 nl/min 進(jìn)樣1 min,解離2 min，然后用相同緩沖液穩(wěn)定2 min。得到IA-1與FP-2蛋白相互作用的傳 感圖，再用Biacore分析軟件中的1 : 1 (Langmuir)結(jié)合模型或穩(wěn)態(tài)模型進(jìn)行擬合，得到確切 的動(dòng)力學(xué)和熱力學(xué)常數(shù)。
(7) 試驗(yàn)結(jié)果見表1陽性對(duì)照和IA-1與FP-2蛋白結(jié)合常數(shù)的測(cè)試結(jié)果。
表1
序號(hào)化合物
編號(hào)
16.03
2Z-Phe-Arg-pNA.HCl~32.1
實(shí)施例24
本發(fā)明化合物對(duì)falcipain-2蛋白酶百分抑制活性的測(cè)定
(1) Falcipain-2 (FP-2)蛋白的表達(dá)與純化和FP-2包涵體蛋白的復(fù)性 參見實(shí)施例16
(2) 本發(fā)明化合物對(duì)FP-2酶抑制活性的測(cè)定
在197 的100 mM NaOAc， 10 mM DTT， pH 5.5的buffer體系中加入FP-2蛋白(終 濃度10 Hg/ml)和溶于DMSO的待測(cè)化合物溶液，終濃度10nM和0iaM(陰性對(duì)照)，室溫下 孵育30 min后用MD SpectraMax M5酶標(biāo)儀于excitation 355 nm; emission 460 nm處連續(xù)測(cè)15min內(nèi)的RFU值，計(jì)算出反應(yīng)速率Km,以下列公式得出待測(cè)化合物在10 pM下百分抑制率, 計(jì)算公式為
(對(duì)照組Km值-實(shí)驗(yàn)組Km值)/對(duì)照組Km值x100 %
(3)化合物活性測(cè)試結(jié)果表2. 4-(N-取代氨磺酰基)苯烷酰胺類化合物對(duì)falcipain-2抑制 率數(shù)據(jù)表2.
序號(hào)化合物 編號(hào)抑制率(％， lOpM)
1Ia-127.4
2Ia-229.0
3Ia-341.5
4Ia-415.2
Ia-520.7
6Ia-646.5
7Ia-724.0
8Ia誦813.6
9Ia誦921.2
10Ia-IO94.5
11u-u6.3
12IA-127,5
13U-1372.9
14IA-144.1
15IB-15.4
實(shí)施例25
本發(fā)明部分化合物對(duì)falcipain-2蛋白酶半數(shù)有效抑制濃度(IC5o)的測(cè)定
選取10pM抑制率在40。/。以上的化合物測(cè)IC50,選擇合適的化合物濃度梯度，實(shí)驗(yàn)方法 和體系如實(shí)施例17。根據(jù)化合物在不同濃度下FP-2酶活的反應(yīng)速率Km,計(jì)算化合物在不同 濃度下對(duì)FP-2酶活的抑制率，使用Sigmoidal公式用origin軟件進(jìn)行擬合得到化合物的IC50 值，結(jié)果見表3( N-(4-取代氨?；?-5-取代呋喃-2-曱酰胺類化合物對(duì)falcipain-2酶活抑制IC50) 和圖2。表3.
化合物
序號(hào) ，.。 ICsoOiM)
1 IA-3 8.91
2 Ia_6 8.13
3 I"0 2.65
4 IA-13 7.03
本發(fā)明所述的 4-(N-取代氨磺?；?苯烷酰胺類化合物在計(jì)算機(jī)虛擬篩選以及在falcipain-2 蛋白酶結(jié)合試驗(yàn)和酶抑制試驗(yàn)中均顯示了陽性結(jié)果。應(yīng)證了其藥理作用機(jī)制。因此，本發(fā)明 所述的化合物可作為falcipain-2的抑制劑。
權(quán)利要求
1、一種4-(N-取代氨磺?；?苯烷酰胺類化合物，其具有式I所示結(jié)構(gòu)式I中R1為氫，C1-C6直鏈或支鏈的飽和或不飽和烷基，5-7元芳香基，取代的5-7元芳香基或式(1)所示基團(tuán)式(1)中A為5-7元芳香基，取代的5-7元芳香基，5-7元雜環(huán)基或取代的5-7元雜環(huán)基，m＝1～6；R2為氫，C1-C6直鏈或支鏈的飽和或不飽和烷基，5-7元芳香基，取代的5-7元芳香基，5-7元雜環(huán)基，取代的5-7元雜環(huán)基，并有5-7元雜環(huán)基的5-7元芳香基，并有5-7元芳香基的5-7元雜環(huán)基或式(1)所示基團(tuán)；n＝0～3；其中所說的取代的5-7元芳香基和取代的5-7元雜環(huán)基中的取代基選自鹵素，C1-C6烷氧基，羥基，苯基，C1-C6直鏈或支鏈烴基，C1-C4不飽和烴氧基，羧基，酯基，C1-C6羧基烷氧基，C1-C6酯基烷氧基，C1-C6羧基烷基，C1-C6酯基烷基，氰基，硝基，氨基，羥甲基，三氟甲基，三氟甲氧基，巰基或C1-C4酰基中一種、二種或兩種以上；取代基的個(gè)數(shù)為1-4；所說的5-7元雜環(huán)基中的雜原子選自氧、硫或氮中一種、二種或兩種以上，雜原子個(gè)數(shù)為1-3。
2、 如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，R,為5-7元芳香基，取代的5-7元芳香基或式(1)所示基團(tuán)；其中A為5-7元芳香基或取代的5-7元芳香基，m=l~3;所說的取代的5-7元芳香基中的取代基為鹵素或Q-C6烷氧基，取代基的個(gè)數(shù)為1-3。
3、 如權(quán)利要求2所述的化合物，其特征在于，R,為取代的6元芳香基或式(1)所示基團(tuán)；其中A為6元芳香基。A掘^n = 0~3;
4、 如權(quán)利要求3所述的化合物，其特征在于，R,為取代苯基或式(1)所示基團(tuán)；其中A為苯基，m為l或2;所說的取代苯基的取代基為卣素或d-C3烷氧基。
5、 如權(quán)利要求4所述的化合物，其特征在于，R!為芐基、苯乙基、3，4-二曱氧基苯基或4- 氟苯基。
6、 如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，R2為5-7元芳香基，取代的5-7元芳香基，5- 7元雜環(huán)基，取代的5-7元雜環(huán)基，并有5-7元雜環(huán)基的5-7元芳香基，并有5-7元芳香基的5-7元雜環(huán)基或式(1 )所示基團(tuán)；其中A為5-7元雜環(huán)基或取代的5-7元雜環(huán)基，m = 1 ~ 3;所述的取代的5-7元芳香基和取代的5-7元雜環(huán)基中的取代基選自卣素，C廣C6烷氧基，d-Q烷基，羥基或苯基中一種、二種或二種以上，取代基的個(gè)數(shù)為1-4。
7、 如權(quán)利要求6所述的化合物，其特征在于，R2為取代苯基，5-6元雜環(huán)基，取代的5-6元雜環(huán)基，并有5-6元雜環(huán)基的苯基，并有苯基的5-6元雜環(huán)基或式(1)所示基團(tuán)；其中A為5-6元雜環(huán)基或取代的5-6元雜環(huán)基；所述的取代苯基和取代的5-6元雜環(huán)基中的取代基選自面素，C,-C3烷氧基，d-C3烷基，羥基或苯基中一種、二種或二種以上，取代基的個(gè)數(shù)為1-3。
8、 如權(quán)利要求7所述的化合物，其特征在于，R2為苯并[l,4]二氧六環(huán)-6-基，苯并[1，3]二氧五環(huán)-5-基，苯并問噻唑-2-基，噢峻-2-曱基，吡啶-2-甲基，5-乙基-1, 3，4-噻二唑-2-基，3,4-二曱氧苯基，3-羥基-4-曱氧苯基，3-氯-4-氟苯基或4-苯基噻唑-2-基。
9、 如權(quán)利要求5所述的化合物，其特征在于，其中R2為苯并[l，4]二氧六環(huán)-6-基，苯并[1，3]二氧五環(huán)-5-基，苯并[《噻唑-2-基，蓬哇-2-甲基，吡啶-2-曱基，5-乙基-1, 3， 4-噱二唑-2-基，3,4-二曱氧苯基，3-羥基-4-曱氧苯基，3-氯-4-氟苯基或4-苯基噻唑-2-基。
10、 如權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所述的化合物在制備治療由癡原蟲引起癡疾的藥物中應(yīng)用。
全文摘要
涉及一種取代的苯烷酰胺類化合物、即4-(N-取代氨磺?；?苯烷酰胺類化合物及其用途。本發(fā)明的發(fā)明人綜合運(yùn)用CADD和基于Biacore的SPR實(shí)驗(yàn)，找到了一種4-(N-取代氨磺酰基)苯烷酰胺化合物，并運(yùn)用合理藥物設(shè)計(jì)方法對(duì)這種化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾得4-(N-取代氨磺酰基)苯烷酰胺類化合物，測(cè)試所得4-(N-取代氨磺?；?苯烷酰胺類化合物在體外酶水平實(shí)驗(yàn)測(cè)試中抑制falcipain-2的活性，結(jié)果表明本發(fā)明設(shè)計(jì)的4-(N-取代氨磺?；?苯烷酰胺類化合物具有較強(qiáng)的falcipain-2抑制活性，可用于制備由瘧原蟲引起的瘧疾治療藥物。
文檔編號(hào)C07D213/00GK101591327SQ20081003806
公開日2009年12月2日 申請(qǐng)日期2008年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月26日
發(fā)明者劉彥青, 盧偉強(qiáng), 希金弗, 莊靜靜, 進(jìn) 朱, 劍 李, 李洪林, 旭 沈, 夫 洛, 蔣華良, 鵬 車, 曈 陳, 陳莉莉, 瑾 黃 申請(qǐng)人:華東理工大學(xué);中國科學(xué)院上海藥物研究所