專利名稱：用于治療神經(jīng)病學(xué)、精神病學(xué)或疼痛病癥的5-(苯基異噁唑基乙氧基)-三唑-3-基取代的 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物在治療中的用途。
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物在治療mGluR5-介導(dǎo)的病癥中的用途。
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物用于治療以下疾病的用途阿爾茨海默氏病、老年性癡呆、AIDS誘導(dǎo)的癡呆、帕金森氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化、亨廷頓舞蹈病、偏頭痛、癲癇、精神分裂癥、抑郁癥、焦慮癥、急性焦慮癥、眼科病癥例如視網(wǎng)膜病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、青光眼、聽覺神經(jīng)性病癥例如耳鳴、化療誘導(dǎo)的神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛和三叉神經(jīng)痛、耐受性、依賴性、脆性X綜合癥(Fragile X)、孤獨癥、智力遲鈍、精神分裂癥和唐氏綜合癥(Down′s Syndrome)。
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物用于治療如下病癥的用途偏頭痛相關(guān)性疼痛、炎癥性疼痛、神經(jīng)性疼痛病癥例如糖尿病性神經(jīng)病、關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕疾病(rheumatiod diseases)、下腰(low back)痛、術(shù)后疼痛和與各種病況(包括癌、心絞痛(angina)、腎或膽絞痛、月經(jīng)、偏頭痛和痛風(fēng))有關(guān)的疼痛。
本發(fā)明涉及如上定義的式I-III的化合物用于治療以下疾病的用途中風(fēng)、頭創(chuàng)傷、缺氧性和缺血性損傷、低血糖、心血管疾病和癲癇。
本發(fā)明還涉及如上定義的式I-III的化合物用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于治療第I組mGluR受體介導(dǎo)的病癥和上列的任何病癥。
本發(fā)明的一個實施方案涉及式I-III的化合物用于治療胃腸道病癥的用途。
本發(fā)明的另一個實施方案涉及式I-III的化合物用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于抑制短暫性下食道括約肌松弛、用于治療GERD、用于預(yù)防胃食管反流、用于治療回流、用于治療哮喘、用于治療喉炎、用于治療肺病、用于發(fā)育停滯的管理、用于治療應(yīng)激性腸病(IBS)和用于治療機(jī)能性消化不良(FD)。
在本文中，術(shù)語“TLESR”短暫性下食道括約肌松弛根據(jù)Mittal，R.K.，Holloway，R.H.，Penagini，R.，Blackshaw，L.A.，Dent，J.，1995；Transient lower esophageal sphincter relaxation.Gastroenterology 109，pp.601-610定義。
術(shù)語“反流”在此處定義為來自胃的流體能夠進(jìn)入食管，因為這時機(jī)械屏障暫時消失。
術(shù)語“GERD”，胃食管反流病在本文中根據(jù)van Heerwarden，M.A.，Smout A.JP.M.，2000；Diagnosis of reflux disease.Baillière’sClin.Gastroenterol.14，pp.759-774定義。
本發(fā)明的另一個實施方案涉及式I-III的化合物用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于治療咳嗽。在一個實施方案中，要治療的咳嗽是慢性咳嗽。在另一個的實施方案中，要治療的咳嗽是急性咳嗽。術(shù)語慢性咳嗽根據(jù)Kardos P等人(The German Respiratory Society`s Guidelinefor the Diagnosis and Treatment of Patients with Acute and ChronicCough Medizinische Klinik 2004；99(8)468-75)定義為持續(xù)超過8周的咳嗽。然而，慢性咳嗽也可以定義為持續(xù)超過3周的咳嗽，或者持續(xù)超過2個月的咳嗽。術(shù)語“急性咳嗽”根據(jù)上述參考文獻(xiàn)定義為持續(xù)少于8周的咳嗽。
上述式I-III的化合物可用于治療或預(yù)防肥胖癥或超重(例如，促進(jìn)體重減輕和維持體重減輕)、預(yù)防或逆轉(zhuǎn)體重增加(例如，反彈，包括藥物誘導(dǎo)的或戒煙之后發(fā)生的)、用于調(diào)節(jié)食欲和/或飽食感、飲食病癥(例如，暴食、厭食、食欲過盛、和強迫性飲食)和渴望(對于藥物、煙草、酒精、任何引發(fā)食欲的大量營養(yǎng)素或非必要食物)。
本發(fā)明還提供治療患有mGluR5介導(dǎo)的病癥或上列任何病癥或處在患有所述病癥危險下的患者中的所述病況的方法，包括對該患者給予有效量的如上定義的式I-III的化合物。
治療性或預(yù)防性處理特定的病癥所需的劑量必然會根據(jù)治療的宿主、給藥途徑和治療疾病的嚴(yán)重程度發(fā)生改變。
在本說明書的上下文中，術(shù)語“治療”和“處理”包括阻止或者預(yù)防，除非明確指出不是這樣。術(shù)語“治療學(xué)的”和“治療地”應(yīng)作相應(yīng)地解釋。
在本說明書中，除非另有說明，術(shù)語“拮抗劑”和“抑制劑”意指化合物通過任何方式部分地或者完全地阻斷引起配體產(chǎn)生響應(yīng)的轉(zhuǎn)導(dǎo)通道。
除非另有說明，術(shù)語“病癥”是指與代謝型谷氨酸受體活性有關(guān)的任何病況和疾病。
非醫(yī)學(xué)用途 除了在治療醫(yī)學(xué)方面的用途之外，式I-III的化合物以及這種化合物的鹽和水合物可用作藥理學(xué)工具，用于體外和體內(nèi)試驗系統(tǒng)的開發(fā)和標(biāo)準(zhǔn)化，所述試驗系統(tǒng)用于在實驗動物(例如貓、狗、兔、猴、大鼠和小鼠)中評價mGluR相關(guān)活性的抑制劑的效果，作為新治療劑研究的一部分。
制備方法 中間體的合成

最終化合物的合成

一般方法 所有的起始原料都是市售的或者在文獻(xiàn)中早有描述。
1H和13C NMR譜在Bruker 300、Bruker DPX400或Varian+400光譜儀上記錄，1H NMR分別以300、400和400MHz操作，使用TMS或殘余溶劑信號作為參考，除非另有陳述，使用氘代氯仿作為溶劑。所有報告的化學(xué)位移δ以ppm計，顯示記錄中出現(xiàn)的信號的精細(xì)分裂(s單峰，br s寬的單峰，d雙峰，t三重峰，q四重峰，m多重峰)。
在線液相色譜分離之后進(jìn)行的質(zhì)譜檢測分析在由Alliance 2795(LC)和ZQ單四極質(zhì)譜儀構(gòu)成的Waters LC-MS上記錄。質(zhì)譜儀裝備有以陽離子和/或陰離子模式操作的電噴射離子源。離子噴射電壓是±3kV并且以0.8s的掃描時間掃描m/z 100-700的質(zhì)譜。為柱(X-TerraMS，Waters，C8，2.1×50mm，3.5μm)施加5％到100％的乙腈-10mM乙酸銨水溶液或0.1％TFA水溶液。
使用Perkin Elmer 241旋光計測量旋光性，在23℃在589nm下使用10cm的比色池。
縮略語表 aq. 水性 DMF 二甲基甲酰胺 EtOAc乙酸乙酯 NH4Cl氯化銨 Novozyme

用于聚合物結(jié)合型南極假絲酵母脂肪酶(candida antarcticalipase)的注冊商標(biāo) r.t.或RT 室溫(除非另有說明，為16到26℃的溫度) 實施例 中間體的合成 實施例1 4-(3-氯苯基)-2，4-二氧代丁酸乙酯
將乙醇鈉(117.8g，1.73mol)分批加入到0℃的3-氯苯乙酮(178.5g，1.15mol)和草酸二乙酯(188mL，1.39mol)的乙醇(3L)溶液中。將混合物在室溫攪拌1小時然后在70℃加熱2小時。在冷卻之后，將混合物用3M鹽酸酸化(pH～3)。蒸除溶劑并且向混合物加入EtOAc。有機(jī)物層用水和飽和鹽水洗滌。蒸除溶劑，得到粗的標(biāo)題產(chǎn)物，其不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。MS(M+-1)＝253。
實施例2 5-(3-氯苯基)異噁唑-3-羧酸乙酯
將4-(3-氯苯基)-2，4-二氧代丁酸乙酯(max 294g，1.16mol)和羥胺鹽酸鹽(120.4g，1.73mol)的乙醇(4L)溶液在80℃加熱4小時。在冷卻(過夜)到約5-10℃之后，將混合物過濾，用冷乙醇洗滌并且真空干燥，得到標(biāo)題化合物(214.5g，74％)。1H NMR7.82(s，1H)，7.72(m，1H)，7.47(m，2H)，4.03(s，3H)。MS(M++1)＝252。
實施例3 [5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]甲醇
將硼氫化鈉(96.7g，2.6mol)緩慢加入到0℃的5-(3-氯苯基)異噁唑-3-羧酸乙酯(214.5g，0.85mol)的甲醇(2.5L)溶液中。將反應(yīng)混合物在50℃加熱2小時，并且在室溫用EtOAc猝滅。蒸除大部分溶劑并且向剩余的粗品加入EtOAc。有機(jī)物層用水、飽和鹽水洗滌，并且濃縮，得到標(biāo)題化合物，其直接用于下一步。MS(M++1)＝210。
實施例4 5-(3-氯苯基)異噁唑-3-甲醛
將含[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]甲醇(178.6g，852mmol)的二氯甲烷(2L)滴加到含氯鉻酸吡啶鎓(400g，1.86mol)的二氯甲烷(2L)中。將得到的漿狀物在室溫下攪拌過夜。將漿狀物過濾通過硅藻土并將濾液蒸餾。向剩余的溶液加入EtOAc。有機(jī)物層用水、飽和鹽水洗滌，并且濃縮，得到粗制標(biāo)題化合物，其直接用于下一步。1H NMR(DMSO-d6)10.13(s，1H)，8.08(br s，1H)，7.95(m，1H)，7.61(m，3H)。MS(M++1)＝208。
實施例5 1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇
在0℃將MeMgBr(3M，在THF中，313mL，937,2mmol)滴加到含5-(3-氯苯基)異噁唑-3-甲醛(177g，252mmol)的THF(3L)。使混合物達(dá)到室溫，在該溫度下攪拌3小時，然后用0℃的NH4Cl水溶液猝滅，并且蒸除溶劑。向殘余物加入EtOAc并且過濾通過硅藻土短柱。有機(jī)物層用水、飽和鹽水洗滌并且濃縮。粗產(chǎn)物通過二氧化硅上的急驟柱色譜法純化，使用庚烷/EtOAc＝80∶20，得到標(biāo)題化合物(70g，37％)，為白色-黃色固體。1H NMR7.73(m，1H)，7.63(m，1H)，7.38(m，2H)，6.57(s，1H)，5.07(q，1H)，2.44(s，1H)，1.59(d，3H)。
實施例6 (1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇乙酸酯
在Ar下將1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇(106.5g，476mmol)和Novozyme

(13g)聚集在干燥甲苯(1.5L)中。在加入乙酸乙烯酯(66mL，716mmol)之后，反應(yīng)在室溫進(jìn)行過夜，隨后通過硅藻土過濾并且用DCM洗滌。真空蒸發(fā)溶劑并使粗產(chǎn)物經(jīng)過二氧化硅上的柱色譜法，使用二氯甲烷/甲醇＝20∶1，得到標(biāo)題化合物(50g，47％)。1HNMR7.76(m，1H)，7.65(m，1H)，7.41(m，2H)，6.54(s，1H)，6.07(q，1H)，2.13(s，3H)，1.66(d，3H)。LC-MS(M++1)＝266。
實施例7 (1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇
將(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇乙酸酯(56g，211mmol)和氫氧化鋰一水合物(10.6g，253mmol)與THF/水(7/5，1.2L)混合并且在室溫攪拌過夜。真空中使混合物的體積減到約1/2，隨后用鹽水稀釋，用乙醚萃取，然后用MgSO4干燥并且在真空中濃縮，得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物通過二氧化硅上的急驟柱色譜法純化，使用庚烷/EtOAc＝70∶30，得到標(biāo)題化合物(40g，85％)。1H NMR7.73(m，1H)，7.63(m，1H)，7.38(m，2H)，6.57(s，1H)，5.07(q，1H)，2.44(s，1H)，1.59(d，3H)。
實施例8 2-異煙酰基-N-甲基肼硫代甲酰胺
向溫和加熱(35℃)和機(jī)械攪拌的異煙酰肼(435g)在異丙醇(6.0L)中的懸浮液中分成幾小份加入(甲基亞氨基)(硫代)甲烷(230g)。在完成加入之后，將反應(yīng)混合物加熱(70℃)6小時，在30分鐘之后加入另外的異丙醇(600ml)。在將反應(yīng)混合物冷卻(冰浴)到17℃之后，過濾出得到的沉淀物并且用異丙醇(1.0L)洗滌。然后將固體空氣干燥過夜，得到615g標(biāo)題化合物，為白色粉末。
實施例9 4-甲基-5-吡啶-4-基-2，4-二氫-3H-1，2，4-三唑-3-硫酮
在室溫向機(jī)械攪拌的2-異煙酰基-N-甲基肼硫代甲酰胺(610g)在水(5.0L)中的懸浮液中加入碳酸氫鈉(390g)。然后在2小時內(nèi)將反應(yīng)混合物慢慢加熱到70℃，并且在該溫度下維持另外的3.5小時，然后冷卻(冰浴)到17℃，隨后通過慢慢(在90分鐘內(nèi))加入濃鹽酸(約470mL)調(diào)節(jié)pH到3。隨后將反應(yīng)混合物過濾，將收集的固體用稀鹽酸洗滌(0.1N，2×1.0L)，得到濕濾餅，將其在溫和的空氣流下在100mbar干燥1.5天，得到544g標(biāo)題化合物。
實施例10 4-[4-甲基-5-(甲硫基)-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶
向機(jī)械攪拌并且冷卻(9℃)的4-甲基-5-吡啶-4-基-2，4-二氫-3H-1，2，4-三唑-3-硫酮(267g)和碘甲烷(197.7g)在丙酮(2.6L)中的懸浮液中加入氫氧化鈉溶液(54g，在600mL水中)，加入速率(為約20mL/min)以維持溫度為10到15℃。然后加入另一部分的水(50mL)并且允許溫度回到21到24℃。在另一個2小時之后，從反應(yīng)混合物真空蒸除丙酮(水浴保持在30℃)。然后加入另一部分的水(750mL)，然后冷卻(17到18℃)并且通過過濾收集形成的沉淀物。然后將固體用水(2×1L)洗滌，然后在溫和的空氣流下在100mbar干燥3天，得到235g的標(biāo)題化合物，為白色粉末。1H NMR(DMSO-d6)2.7(s，3H)3.6(s，3H)7.7(m，2H)8.8(d，2H)。
實施例11 4-[4-甲基-5-(甲基磺酰基)-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶
在冷卻下向機(jī)械攪拌的得自前述步驟的4-[4-甲基-5-(甲硫基)-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶(228g)在水(1.15L)和乙酸(1.15L)的混合物中的溶液中分批加入高錳酸鉀(234g)，加入速率使得溫度為12到17℃(約45分鐘)。然后將反應(yīng)混合物在室溫攪拌4小時，然后在冰浴上冷卻，期間在2.5小時內(nèi)加入氫氧化鈉溶液(5N)以調(diào)節(jié)pH到約10。向反應(yīng)混合物加入

(100g)和氯仿(1.6L)，然后過濾。從濾液分離有機(jī)相并將得到的水相用氯仿萃取(2×1L)。將濾餅用氯仿萃取兩次(2×1.5L)。將合并的有機(jī)相用硫酸鎂干燥，過濾，并且真空濃縮，得到158g標(biāo)題化合物，為白色粉末。通過用氯仿(2×2L)萃取濾餅并將溶液真空濃縮得到另一份產(chǎn)物(78g，白色粉末)。1H NMR(DMSO-d6)3.6(s，3H)3.9(s，3H)7.8(s，2H)8.8(s，2H)。
實施例12 3-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶
與如本文中所述的4-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶類似地通過由相應(yīng)步驟組成的相應(yīng)順序制備標(biāo)題化合物，從煙酰肼開始，代替異煙酰肼。1H NMR3.59(s，3H)3.99(s，3H)7.52(m，1H)8.02(dt，1H)8.83(dd，1H)8.91(m，1H)。
最終化合物的合成 實施例13 3-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶
將(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇(5.40g，24.1mmol)溶解于DMF(45mL)。向其中加入3-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶(5.75g，24.1mmol)和碳酸銫(10.1g，31.4mmol)。在60℃攪拌過夜之后，加入水。將混合物用二氯甲烷萃取，隨后將有機(jī)物層在真空中濃縮，得到粗品，將其通過二氧化硅上的柱色譜法純化，使用二氯甲烷/甲醇＝98/2，得到標(biāo)題化合物(7.10g，77％)。1HNMR8.90(d，1H)，8.72(m，1H)，8.04(dt，1H)，7.76(bs，1H)，7.66(m，1H)，7.45(m，1H)，7.40(m，2H)，6.73(s，1H)，6.35(q，1H)，3.57(s，3H)，1.93(d，3H)。1H NMR(DMSO-d6)8.90(d，1H)，8.71(dd，1H)，8.13(dt，1H)，7.99(s，1H)，7.86(m，1H)，7.58(m，3H)，7.40(s，1H)，6.19(q，1H)，3.54(s，3H)，1.81(d，3H)。LC-MS(M++1)＝382.[α]DRT(2.92g/L，CDCl3)＝-46.575° 實施例14 4-(5-{(消旋)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶
將1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇(63.4mg，0.28mmol)、DMF和氫化鈉(60％，在油中的分散物，15.1mg，0.38mmol)在惰性氣氛下混合并且在室溫攪拌1小時，隨后加入4-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶(45mg，0.19mmol)。在80℃攪拌24小時之后，將混合物冷卻到室溫，用EtOAc稀釋并且用水和鹽水洗滌。將有機(jī)相干燥(Na2SO4)，過濾并且真空濃縮。粗的殘余物通過二氧化硅上的柱色譜法純化，使用含5％甲醇的EtOAc，分離標(biāo)題化合物(11.7mg)。1H-NMR8.81(bs，2H)，7.77(s，1H)，7.67(m，3H)，7.42(m，2H)，6.73(s，1H)，6.36(q，1H)，3.62(s，3H)，1.94(d，3H)。
實施例15 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶
方法1在chiralpak AD柱上用異丙醇作為洗脫液進(jìn)行4-(5-{(消旋)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶的制備性手性HPLC分離，得到標(biāo)題化合物，為第一個洗脫的對映體。
方法2通過使用含碳酸銫的DMF，使(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙醇與4-[4-甲基-5-(甲基磺?；?-4H-1，2，4-三唑-3-基]吡啶偶聯(lián)，與3-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶類似地制備標(biāo)題化合物。1H NMR(DMSO-d6)8.73(m，2H)，7.97(br.s，1H)，7.85(m，1H)，7.74(m，2H)，7.58(m，2H)，7.39(s，1H)，6.20(q，1H)，3.60(s，3H)，1.81(d，3H)。[α]DRT(5.827g/L，CDCl3)＝-48.567° 實施例16 4-(5-{(1S)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶
如實施例4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(方法1)中所述的制備性手性HPLC分離法分離標(biāo)題化合物，為第二洗脫的對映體。1H-NMR8.81(bs，2H)，7.77(s，1H)，7.67(m，3H)，7.42(m，2H)，6.73(s，1H)，6.36(q，1H)，3.62(s，3H)，1.94(d，3H)。
實施例17 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶鹽酸鹽 通過在50℃將10μl的32重量％HCl水溶液分兩份加入到35mg4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶游離堿在500μl乙醇中的透明溶液中生產(chǎn)標(biāo)題的鹽。將漿狀物冷卻到10℃并且在攪拌下保持過夜，然后將鹽濾出，用500μl乙醇洗滌并且在室溫下真空干燥。
所述鹽為結(jié)晶，具有明顯的熔融行為并且在90-95％RH下具有增加的水分吸收。
此外，類似地在乙醇、異丙醇和乙酸乙酯中制備標(biāo)題鹽，并且在乙醇中以1g的規(guī)模制備。所有的批次產(chǎn)生相同的結(jié)晶變型，盡管在一些批次中無定形物含量略微更高。熔點為150℃到160℃。
進(jìn)一步對從乙醇以1g規(guī)模生產(chǎn)的鹽研究其固有的溶解速率并與4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶相比較。與游離堿相比，該鹽具有1000倍的固有溶解速率。堿和鹽的溶解速率使用小體積旋轉(zhuǎn)盤方法測量。從純化合物壓縮圓盤并且中心安裝在圓盤支座上，暴露面積0.07cm2。在37℃下將以500rpm旋轉(zhuǎn)的圓盤支座浸入50mL USP磷酸鹽緩沖液(pH 6.8)中。使用具有連續(xù)循環(huán)的流通池和蠕動泵的分光光度計UV-在線分析化合物。
實施例18 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶硫酸鹽 通過將500μl水與33mg 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶游離堿、500μl甲醇和7μl98重量％硫酸混合得到的透明溶液蒸發(fā)，得到油狀的鹽(oiled salt)。通過將油狀的鹽在500μl乙醇中重結(jié)晶生產(chǎn)標(biāo)題的鹽。
標(biāo)題的鹽是結(jié)晶，具有實質(zhì)的無定形內(nèi)容物，沒有明顯的熔融行為，并且在60-70％相對濕度時潮解。
此外，通過在1.5小時內(nèi)將三份的5μl濃硫酸(98％)加入到68℃含66-68mg 4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶游離堿的1ml異丙醇或1ml乙醇透明溶液中生產(chǎn)標(biāo)題的鹽。該從乙醇生產(chǎn)的鹽具有128℃的熔點，盡管其在70-80％RH時潮解。
生物學(xué)評價 在表達(dá)mGluR5D的細(xì)胞系中功能性評價mGluR5拮抗作用 可以使用用于藥理學(xué)活性的標(biāo)準(zhǔn)試驗分析本發(fā)明的化合物的性質(zhì)。谷氨酸受體試驗的實例是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，在例如Aramori等人，Neuron 8757(1992)；Tanabe等人，Neuron 8169(1992)；Miller等人，J.Neuroscience 156103(1995)；Balazs，等人，J.Neurochemistry 69151(1997)中有所描述。將這些出版物中描述的方法并入本文作為參考。方便地，可以通過測量表達(dá)mGluR5的細(xì)胞中胞內(nèi)鈣[Ca2+]i的活動化的試驗(FLIPR)或者測量肌醇磷酸酯周轉(zhuǎn)的另一個試驗(IP3)來研究本發(fā)明的化合物。
FLIPR試驗 將如WO97/05252所述的表達(dá)人mGluR5d的細(xì)胞以每孔100,000個細(xì)胞的密度在膠原蛋白涂層的黑色側(cè)面透明底96孔板上接種，并且在接種之后24小時進(jìn)行實驗。所有的試驗在緩沖液(pH 7.4)中進(jìn)行，緩沖液包含127mM NaCl，5mM KCl，2mM MgCl2，0.7mM NaH2PO4，2mM CaCl2，0.422mg/ml NaHCO3，2.4mg/ml HEPES，1.8mg/ml葡萄糖和1mg/ml BSA級分IV。將96孔板中的細(xì)胞培養(yǎng)物加載在上述緩沖液中60分鐘，所述緩沖液包含在0.01％普流羅尼酸(pluronic acid)(有專利權(quán)的非離子型表面活性劑多元醇，CAS編號9003-11-6)中的4μM熒光鈣指示劑fluo-3的乙酰氧基甲基酯(Molecular Probes，Eugene，Oregon)。在加載期之后，除去fluo-3緩沖液并且替換為新鮮的試驗緩沖液。使用0.800W和0.4秒CCD攝像機(jī)快門速度的激光設(shè)置進(jìn)行FLIPR實驗，激發(fā)波長和發(fā)射波長分別為488nm和562nm。每個實驗用存在于細(xì)胞板的各個孔中的160μl緩沖液引發(fā)。從拮抗劑板加入40μl，隨后從激動劑板加入50μL。在拮抗劑和激動劑加入之間有90秒的間隔。在兩次加入中的每次完成之后，都立即以1秒為間隔采集熒光信號50次，隨后以5秒為間隔采樣3次。反應(yīng)測量為對激動劑響應(yīng)的峰高度減去采樣周期內(nèi)背景熒光的差。使用線性最小二乘擬合程序進(jìn)行IC50測定。
IP3試驗 另外的mGluR5d功能試驗描述在WO97/05252中，其基于磷脂酰肌醇周轉(zhuǎn)。受體的激活刺激磷脂酶C活性并且引起肌醇1，4，5-三磷酸酯(IP3)的形成增加。
將穩(wěn)定地表達(dá)人mGluR5d的GHEK以40×104細(xì)胞/孔接種在24孔聚L-賴氨酸涂層板上，在包含1μCi/孔的[3H]myo-肌醇的培養(yǎng)基中。將細(xì)胞培養(yǎng)過夜(16小時)，然后洗滌三次并且在37℃在補充有1單位/ml谷丙轉(zhuǎn)氨酶和2mM丙酮酸(pyruvate)的HEPES緩沖鹽水(146mM NaCl，4.2mM KCl，0.5mM MgCl2，0.1％葡萄糖，20mMHEPES，pH 7.4)中培養(yǎng)1小時。將細(xì)胞在HEPES緩沖鹽水中洗滌一次并且在包含10mM LiCl的HEPES緩沖鹽水中預(yù)培養(yǎng)10分鐘。將化合物在37℃一式兩份培養(yǎng)15分鐘，然后加入谷氨酸(80μM)或DHPG(30μM)并且培養(yǎng)另外的30分鐘。通過在冰上加入0.5ml高氯酸(5％)終止反應(yīng)，在4℃培養(yǎng)至少30分鐘。將樣品收集在15ml聚丙烯管中并且用離子交換樹脂(Dowex AG1-X8甲酸鹽形式，200-400目，BIORAD)柱分離肌醇磷酸酯。進(jìn)行肌醇磷酸酯的分離首先通過用8ml30mM甲酸銨洗脫甘油磷脂酰肌醇(glycero phosphatidyl inositol)。然后，用8ml 700mM甲酸銨/100mM甲酸洗脫總的肌醇磷酸酯并且收集在閃爍管中。然后將這些洗脫液與8ml的閃爍體混合并且通過閃爍計數(shù)測定[3H]肌醇結(jié)合。將從一式兩份樣品計數(shù)得到的dpm繪圖并且使用線性最小二乘擬合程序生成IC50測定數(shù)據(jù)。
縮寫 BSA牛血清白蛋白 CCD電荷耦合裝置 CRC濃度反應(yīng)曲線 DHPG 3，5-二羥苯基甘氨酸 DPM每分鐘衰變數(shù) EDTA 乙二胺四乙酸 FLIPR 熒光圖像讀板器 GHEK 包含GLAST的人胚腎 GLAST 谷氨酸/天冬氨酸轉(zhuǎn)運蛋白 HEPES 4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪乙磺酸(緩沖劑) IP3三磷酸肌醇 一般地，所述化合物在上述試驗中是活性的，IC50值低于10000nM。在本發(fā)明的一個方面中，IC50值低于1μM。在本發(fā)明的另一個方面中，IC50值低于100nM。
篩選有效對抗TLESR的化合物 使用成年Labrador獵狗，跨性別，訓(xùn)練為在Pavlov吊索中站立。形成粘膜到皮膚的食管造口，并且在進(jìn)行任何實驗之前允許狗完全恢復(fù)。
活動性測量 簡言之，在禁食約17小時(水自由供應(yīng))之后，通過食管造口引入多腔套筒/側(cè)孔組件(Dentsleeve，Adelaide，South Australia)以測量胃、下食道括約肌(LES)和食道的壓力。使用低柔順性測壓輸液泵(Dentsleeve，Adelaide，South Australia)對組件灌注水。將充滿空氣的管送往口腔方向以測量吞咽，并且在LES上3cm處用銻電極監(jiān)控pH。將所有的信號增強并且在個人電腦上以10Hz接收。
在已經(jīng)得到脫離禁食胃/LES階段III活動活性的基線測量之后，在前腿靜脈中靜脈內(nèi)(i.v.，0.5ml/kg)給予安慰劑(0.9％NaCl)或試驗化合物。在i.v.給藥之后的十分鐘，通過組件的中央腔以100ml/分鐘向胃輸入營養(yǎng)餐(10％蛋白胨、5％右旋葡萄糖、5％英脫利匹特(Intralipid)，pH 3.0)，到30ml/kg的最終體積。輸注營養(yǎng)餐之后，以500ml/分鐘的速度輸入空氣，直到得到10±1mmHg的胃內(nèi)壓力。然后在整個實驗過程中保持壓力在這個水平，使用輸注泵進(jìn)一步輸入空氣或從胃排出空氣。從營養(yǎng)輸入的開始到空氣注入的結(jié)束的實驗時間為45分鐘。已經(jīng)證實該方法是引起TLESR的可靠方法。
TLESR定義為下食道括約肌壓力(相對于胃內(nèi)壓力)以＞1mmHg/秒速率的降低。在松弛開始之前≤2s不應(yīng)該有咽部信號，在有所述咽部信號的那種情況下，松弛屬于吞咽誘導(dǎo)的。LES和胃之間的壓力差應(yīng)該小于2mmHg，并且完全松弛的持續(xù)時間超過1秒。
權(quán)利要求
1.式I的化合物
及其可藥用鹽、水合物、異構(gòu)物和/或?qū)τ丑w。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物是S-對映體。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物是R-對映體。
4.式II的化合物
及其可藥用鹽、水合物、和/或異構(gòu)物。
5.式III的化合物
及其可藥用鹽、水合物、和/或異構(gòu)物。
6.權(quán)利要求1-5中任一項的化合物，為結(jié)晶形式。
7.權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的鹽酸鹽。
8.權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的硫酸鹽。
9.選自以下的鹽4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶鹽酸鹽和4-(5-{(1R)-1-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]乙氧基}-4-甲基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶硫酸鹽。
10.權(quán)利要求1-9中任一項的化合物，其用于治療。
11.藥物組合物，包括權(quán)利要求1-9中任一項的化合物作為活性成分，以及藥理學(xué)和藥學(xué)可接受的載體。
12.權(quán)利要求1-9中任一項的化合物或其可藥用鹽或光學(xué)異構(gòu)體在生產(chǎn)用于治療mGluR5受體介導(dǎo)的病癥的藥物中的用途。
13.權(quán)利要求12的用途，其中所述病癥是神經(jīng)病學(xué)病癥。
14.權(quán)利要求12的用途，其中所述病癥是精神病學(xué)病癥。
15.權(quán)利要求12的用途，其中所述病癥是胃腸道病癥。
16.權(quán)利要求12的用途，其中所述病癥是以下的任一種胃食管反流疾病、IBS、機(jī)能性消化不良、咳嗽、肥胖癥、阿爾茨海默氏病、老年性癡呆、AIDS誘導(dǎo)的癡呆、帕金森氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化、亨廷頓舞蹈病、偏頭痛、癲癇、精神分裂癥、抑郁癥、焦慮癥、急性焦慮癥、強迫癥、眼科病癥例如視網(wǎng)膜病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、青光眼、聽覺神經(jīng)性病癥例如耳鳴、化療誘導(dǎo)的神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛和三叉神經(jīng)痛、耐受性、依賴性、癖嗜和渴望病癥、神經(jīng)發(fā)育病癥包括脆性X綜合癥、孤獨癥、智力遲鈍、精神分裂癥和唐氏綜合癥、偏頭痛相關(guān)性疼痛、炎癥性疼痛、神經(jīng)性疼痛病癥例如糖尿病性神經(jīng)病、關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕疾病、下腰痛、術(shù)后痛、與各種病況包括心絞痛、腎或膽絞痛、月經(jīng)、偏頭痛和痛風(fēng)有關(guān)的疼痛；中風(fēng)、頭創(chuàng)傷、缺氧性和缺血性損傷、低血糖、心血管疾病和癲癇。
17.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是慢性疼痛病癥。
18.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是急性疼痛病癥。
19.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是焦慮癥。
20.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是抑郁癥。
21.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是帕金森氏病。
22.權(quán)利要求16的用途，其中所述疼痛病癥是神經(jīng)性疼痛病癥。
23.權(quán)利要求16的用途，其中所述疼痛病癥是偏頭痛。
24.權(quán)利要求16的用途，其中所述疼痛病癥是炎癥性疼痛。
25.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是胃食管反流疾病。
26.權(quán)利要求16的用途，其中所述病癥是咳嗽。
27.治療或預(yù)防m(xù)GluR5受體介導(dǎo)的病癥的方法，其中對需要這種治療或預(yù)防的受試者給予有效量的權(quán)利要求1-9中任一項的化合物。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述病癥是神經(jīng)病學(xué)病癥。
29.權(quán)利要求27的方法，其中所述病癥是精神病學(xué)病癥。
30.權(quán)利要求27的方法，其中所述病癥是以下的任一種胃食管反流疾病、IBS、機(jī)能性消化不良、咳嗽、肥胖癥、阿爾茨海默氏病、老年性癡呆、AIDS誘導(dǎo)的癡呆、帕金森氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化、亨廷頓舞蹈病、偏頭痛、癲癇、精神分裂癥、抑郁癥、焦慮癥、急性焦慮癥、強迫癥、眼科病癥例如視網(wǎng)膜病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、青光眼、聽覺的神經(jīng)性病癥例如耳鳴、化療誘導(dǎo)的神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛和三叉神經(jīng)痛、耐受性、依賴性、癖嗜和渴望病癥、神經(jīng)發(fā)育病癥包括脆性X綜合癥、孤獨癥、智力遲鈍、精神分裂癥和唐氏綜合癥、偏頭痛相關(guān)性疼痛、炎癥性疼痛、神經(jīng)性疼痛病癥例如糖尿病性神經(jīng)病、關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕疾病、下腰痛、手術(shù)后疼痛、與各種病況包括心絞痛、腎或膽絞痛、月經(jīng)、偏頭痛和痛風(fēng)有關(guān)的疼痛；中風(fēng)、頭創(chuàng)傷、缺氧性和缺血性損傷、低血糖、心血管疾病和癲癇。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是慢性疼痛病癥。
32.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是急性疼痛病癥。
33.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是焦慮癥。
34.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是抑郁癥。
35.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是帕金森氏病。
36.權(quán)利要求30的方法，其中所述疼痛病癥是神經(jīng)性疼痛病癥。
37.權(quán)利要求30的方法，其中所述疼痛病癥是偏頭痛。
38.權(quán)利要求30的方法，其中所述疼痛病癥是炎癥性疼痛。
39.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是胃食管反流疾病。
40.權(quán)利要求30的方法，其中所述病癥是咳嗽。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)/(II)/(III)的新化合物、它們在治療中的用途、以及包括所述新化合物的藥物組合物。
文檔編號C07D413/14GK101273037SQ200680034398
公開日2008年9月24日 申請日期2006年9月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月29日
發(fā)明者A·米尼迪斯, D·溫斯博, A·斯拉西, M·伊薩克, C·艾里松, V·普羅菲爾, P·-O·貝里斯特倫, L·愛德華茲, J·阿羅拉, 濤 忻 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司