專利名稱：高純度紅景天甙的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從天然植物紅景天中分離制備高純度的紅景天甙(Salidroside)的方法。
(2)紅景天甙的初步純化將紅景天粗提取物用高速逆流色譜分離法進(jìn)行初步分離。收集含紅景天甙的組分，蒸干溶劑。
(3)紅景天甙的精制再將(2)所得組分用高速逆流色譜分離法制得純度高于98％的紅景天甙高純品。
高速逆流色譜法對紅景天甙進(jìn)行初步純化，可選用的溶劑體系主要有三個。均以上相為固定相，下相為流動相。一號溶劑體系由三個組分構(gòu)成，A組分可選用乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、乙酸正丁酯等脂肪酯類，B組分可選用正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇，C組分為水，優(yōu)選乙酸乙酯-正丁醇-水體系，A、B、C的體積比為0.5-2∶2-10∶2-10。二號溶劑體系由四個組分構(gòu)成，A組分可選自乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、乙酸正丁酯等脂肪酯類，B、C組分可選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，D組分為水，優(yōu)選乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-水體系，A、B、C、D的體積比為0.5-5∶10-100∶0.5-5∶10-100。三號溶劑體系由兩個組分構(gòu)成，A組分可選自正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇，B組分為水，優(yōu)選正丁醇和水，其體積比為1-100∶1-100。
高速逆流色譜法對紅景天甙精制溶劑體系主要有三個。均以上相為固定相，下相為流動相。一號溶劑體系由三個組分構(gòu)成，A組分可選自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴，B組分可選自甲醇、乙醇、丙醇、丙酮等脂肪醇或脂肪酮，C組分為水，優(yōu)選氯仿-甲醇-水體系，A、B、C的體積比為2-15∶2-25∶1-15。二號溶劑體系由四個組分構(gòu)成，A組分可選自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴，B、C組分可選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，D組分為水，優(yōu)選氯仿-異丙醇-甲醇-水體系，A、B、C、D的體積比為2-10∶0.5-5∶2-10∶1-10。三號溶劑體系由五個組分構(gòu)成，A、C組分可選自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴，B、D組分可選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，E組分為水，優(yōu)選二氯甲烷-異丙醇-氯仿-甲醇-水體系，A、B、C、D、E的體積比為0.5-2∶0.5-2∶1-10∶2-10∶1-10。
實驗適合于在室溫為15℃-30℃下進(jìn)行。
用本法制備的紅景天甙純度可達(dá)到98％以上。本法適用于以各種含紅景天甙的天然植物、天然植物的提取物為原料制備高純度的紅景天甙。適用于采用各種型號的逆流色譜儀分離制備紅景天甙，用高速逆流色譜法制備紅景天甙可連續(xù)，高效、快速的液液分配色譜分離，具有分離量大、樣品無損失、回收率高、分離環(huán)境緩和、節(jié)約溶劑等特點。
采用乙酸乙酯-異丁醇-丙酮-水和氯仿-甲醇-水兩溶劑體系制備純度高于98％的紅景天甙使用半制備型高速逆流色譜儀，配有NS-1007泵，20ml進(jìn)樣閥，聚四氟乙烯柱，柱容積為240ml，8823A-UV紫外檢測器，Yokogawa 3057便攜式記錄儀。進(jìn)樣前，先用固定相充滿整個柱子，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速為800rpm，以2.0ml/min的流速將流動相泵入柱內(nèi)，待整個體系建立動態(tài)平衡后，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，然后根據(jù)檢測器紫外譜圖，接收目標(biāo)成分。紅景天甙的制備分兩步進(jìn)行(1)將體積比為5∶40∶1∶60的乙酸乙酯-異丁醇-丙酮-水混溶于分液漏斗中，搖勻后靜置分層，取其上層溶液(上相)為固定相，下層溶液(下相)為流動相。用1∶1的上相和下相混合液20ml溶解取得的粗提取物200mg進(jìn)行分離，收集含紅景天甙的組分，蒸干。(2)將體積比為7∶13∶8的氯仿-甲醇-水混溶于分液漏斗中，搖勻后靜置分層，取其上層溶液(上相)為固定相，下層溶液(下相)為流動相。用1∶1的上相和下相混合液2ml溶解(1)中所得樣品進(jìn)行分離，收集紅景天甙的組分峰，冷凍干燥。得到白色紅景天甙固體，經(jīng)HPLC分析，其純度達(dá)到98.23％。
權(quán)利要求
1.一種高純度紅景天甙的制備方法，其特征在于它是采用高速逆流色譜法制備的，其基本工藝路線是(1)用70％丙酮-水溶液浸提紅景天，浸提液蒸去丙酮后，得到粗提取物；(2)紅景天甙的初步純化將粗提取物用高速逆流色譜分離法進(jìn)行初步分離，收集含紅景天甙的組分，蒸干溶劑；(3)紅景天甙的精制再將(2)所得組分用高速逆流色譜分離法制得高純度的紅景天甙純品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高純度紅景天甙的制備方法，其特征在于高速逆流色譜法對紅景天甙進(jìn)行初步純化，可選用的溶劑體系由三個組分構(gòu)成，A組分可選用乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、乙酸正丁酯等脂肪酯類，B組分可選用正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇，C組分為水，優(yōu)選乙酸乙酯-正丁醇-水體系，A、B、C的體積比為0.5-2∶2-10∶2-10。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高純度紅景天甙的制備方法，其特征在于高速逆流色譜法對紅景天甙進(jìn)行初步純化，溶劑體系由四個組分構(gòu)成，A組分可選自乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、乙酸正丁酯等脂肪酯類，B、C組分可選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，D組分為水，優(yōu)選乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-水體系，A、B、C、D的體積比為0.5-5∶10-100∶0.5-5∶10-100。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高純度紅景天甙的制備方法，其特征在于高速逆流色譜法對紅景天甙進(jìn)行初步純化，溶劑體系由兩個組分構(gòu)成，A組分可選自正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇，B組分為水，優(yōu)選正丁醇和水，其體積比為1-100∶1-100。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高純度紅景天甙的制備方法，其特征在于高速逆流色譜法對紅景天甙精制溶劑體系由三個組分構(gòu)成，A組分可選自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴，B組分可選自甲醇、乙醇、丙醇、丙酮等脂肪醇或脂肪酮，C組分為水，優(yōu)選氯仿-甲醇-水體系，A、B、C的體積比為2-15∶2-25∶1-15。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高純度紅景天甙的制備方法，其特征在于高速逆流色譜法對紅景天甙精制溶劑體系由四個組分構(gòu)成，A組分可選自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴，B、C組分可選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，D組分為水，優(yōu)選氯仿-異丙醇-甲醇-水體系，A、B、C、D的體積比為2-10∶0.5-5∶2-10∶1-10。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高純度紅景天甙的制備方法，其特征在于高速逆流色譜法對紅景天甙精制溶劑體系由五個組分構(gòu)成，A、C組分可選自氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等鹵代烴，B、D組分可選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮、正丁醇、異丁醇、叔丁醇等脂肪醇或脂肪酮，E組分為水，優(yōu)選二氯甲烷-異丙醇-氯仿-甲醇-水體系，A、B、C、D、E的體積比為0.5-2∶0.5-2∶1-10∶2-10∶1-10。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是一種采用高速逆流色譜法從天然植物紅景天中分離制備高純度的紅景天甙的方法,其特點是:采用高速逆流色譜法從天然植物紅景天浸提液中經(jīng)過兩次純化得到98%純度的紅景天甙,本法適用于以各種含紅景天甙的天然植物、天然植物的提取物為原料制備高純度的紅景天甙,適用于采用各種型號的逆流色譜儀分離制備紅景天甙,用高速逆流色譜法制備紅景天甙可連續(xù),高效、快速的液液分配色譜分離,具有分離量大、樣品無損失、回收率高、分離環(huán)境緩和、節(jié)約溶劑等特點。
文檔編號C07H1/08GK1365980SQ02100489
公開日2002年8月28日 申請日期2002年2月6日 優(yōu)先權(quán)日2002年2月6日
發(fā)明者韓笑, 張?zhí)煊?申請人:北京天純維通生物技術(shù)有限公司