專(zhuān)利名稱(chēng)：前列腺癌、脫發(fā)和其他雄激素過(guò)多綜合征的治療和診斷中的雄激素受體抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明的領(lǐng)域是化合物及其在前列腺癌和包括脫發(fā)、多毛癥和尋常粉刺在內(nèi)的雄激素過(guò)多綜合征的治療中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
多種病理性綜合征的存在依賴(lài)于雄性激素。所以，前列腺癌的生長(zhǎng)在早期是由雄激素驅(qū)使的，并且可能，至少是暫時(shí)地，由于雄激素喪失而停止。雄激素性脫發(fā)是由雄激素從促進(jìn)毛囊的生長(zhǎng)轉(zhuǎn)換為脫發(fā)的未經(jīng)解釋的原因引起。在皮膚雄激素介導(dǎo)的疾病，例如脫發(fā)、尋常痤瘡和多毛癥中，發(fā)現(xiàn)皮膚內(nèi)雄激素的過(guò)量是主要致病因素。
人們?nèi)匀粵](méi)有完全了解雄性和雌性脫發(fā)的病理生理學(xué)并且治療無(wú)法令人滿(mǎn)意。人們認(rèn)識(shí)到頭皮血流少、缺乏營(yíng)養(yǎng)和頭發(fā)有關(guān)的維生素、微生物導(dǎo)致的炎性病變等是此類(lèi)因素。然而，顯然大多數(shù)影響因素是雄性激素(AH)對(duì)頭皮毛囊的作用。AH在皮膚生理學(xué)中至關(guān)重要；它們?cè)谡麄€(gè)生命中促進(jìn)胡須和體毛的生長(zhǎng)。頭發(fā)的生長(zhǎng)也取決于AH但只是在生命早期。仍然無(wú)法解釋AH為何能夠隨著年齡的增長(zhǎng)從促進(jìn)頭發(fā)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)換為脫發(fā)，包括稱(chēng)作雄激素排放(AE)和脫發(fā)(AGA)的癥狀。在多毛癥和尋常痤瘡中，皮膚AH的過(guò)量是那些復(fù)雜綜合征的主要因素。
雄激素只能夠經(jīng)雄激素受體(AR)起作用，雄激素受體是一種轉(zhuǎn)錄因子，一種與DNAd特定區(qū)域相互作用的蛋白質(zhì)。所以，睪酮及其更加有效的類(lèi)似物5-α二氫睪酮(DHT)的作用方式依賴(lài)于與AR結(jié)合。此后才可以發(fā)生RNA聚合酶II的轉(zhuǎn)錄。AH來(lái)源于全身性循環(huán)和/或在結(jié)合位于毛囊內(nèi)的AR皮膚中合成。
在雄激素脫發(fā)的治療中，最初為治療前列腺癌開(kāi)發(fā)的多種抗雄激素?fù)?jù)稱(chēng)可用于全身性治療，但用這些全身性吸收的物質(zhì)的長(zhǎng)期治療的副作用值得關(guān)注。在皮膚疾患中業(yè)已嘗試了抗雄激素組合物，但成功的有限，可能是因?yàn)樗蟹晴揞?lèi)化合物是由皮膚吸收并引起全身作用，其妨礙了其在雄性中的應(yīng)用。在頭皮中，雄激素的前體一般轉(zhuǎn)化為有效雄激素，其與毛囊中的AR結(jié)合并促進(jìn)頭發(fā)生長(zhǎng)。然而，在遺傳因素性對(duì)象中雄激素會(huì)在某個(gè)年齡引起脫發(fā)。顯然，能夠經(jīng)皮而不是全身吸收并且局部抑制或消除AR的局部活性組合物可以有效預(yù)防或逆轉(zhuǎn)初期雄激素性脫發(fā)。
前列腺癌療法(CaP)的現(xiàn)狀并不令人滿(mǎn)意，這在雄性中是第二種最常見(jiàn)的惡性腫瘤。當(dāng)早期檢查，同時(shí)嚴(yán)格確定前列腺中的腫瘤時(shí)，常常可以通過(guò)植入放射性種子或通過(guò)前列腺切除術(shù)控制CaP，但這經(jīng)常造成失禁和陽(yáng)痿。局部早期前列腺癌當(dāng)位于骨盆中時(shí)常?？梢允艿竭m當(dāng)控制并包圍在外部放射光束的單端口內(nèi)。
對(duì)于早期CaP，標(biāo)準(zhǔn)治療是雄激素受體的阻斷，通常結(jié)合LHRH超興奮劑，其同時(shí)抑制腎上腺的和睪丸的睪酮。這種方法的原理在于早期癌癥的生長(zhǎng)始終依賴(lài)于雌激素。臨床使用的抗雄激素的作用機(jī)理被認(rèn)為包括通過(guò)結(jié)合AR和/或通過(guò)干擾AR與DNA的結(jié)合來(lái)阻斷AR；一些激動(dòng)性化合物甚至可以促進(jìn)DNA結(jié)合但是它們修飾結(jié)合功能域。所以，發(fā)現(xiàn)環(huán)丙氯地孕酮可以阻斷約50％的AR結(jié)合DNA，同時(shí)發(fā)現(xiàn)氟他胺、比卡魯胺或尼魯米特徹底阻斷上述結(jié)合。然而所有這些現(xiàn)有技術(shù)的組合物均只有有限的適用性，因?yàn)樵l(fā)性腫瘤及其轉(zhuǎn)移瘤最后變?yōu)殡y以用激素治療并對(duì)進(jìn)一步的抗雄激素治療有耐受性。這個(gè)理由始終就是AR突變，偶爾可以發(fā)現(xiàn)其是遺傳偏離，但常常是AR阻斷的結(jié)果。當(dāng)通過(guò)化學(xué)閹割消除腎上腺的和睪丸的雄激素時(shí)，使用LHRH超興奮劑和/或手術(shù)閹割，突變的受體保留了被不同甾類(lèi)代謝產(chǎn)物和孕酮和雌激素激活的能力。多種其他因子可以通過(guò)AR活化作用激活雄激素受體基因，例如胰島素樣生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子和角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子和神經(jīng)內(nèi)分泌遞質(zhì)，例如5-羥色胺。所以，阻斷AR不是理想的療法并需要新的途徑。還發(fā)現(xiàn)由于AR阻斷，AR基因被擴(kuò)增同時(shí)導(dǎo)致在6-24個(gè)月內(nèi)AR過(guò)度生成，AR突變和瘤轉(zhuǎn)移變得難以用激素治療且繼續(xù)生長(zhǎng)。
對(duì)現(xiàn)有抗雄激素的耐受性的共同特征是AR的修飾。即使在雄激素阻斷療法后復(fù)發(fā)，試驗(yàn)表明AR仍然存在并在CaP細(xì)胞的增殖中發(fā)揮重要作用。
在選擇性治療的選擇中，只能在了解疾病的程度時(shí)才能夠作出正確的治療決定。當(dāng)嚴(yán)格確定前列腺患有CaP時(shí)可以手術(shù)和/或局部和外部放射來(lái)治療。然而，在囊外疾病的情況中，前列腺切除術(shù)或放療不但是無(wú)效的，而且有害，因?yàn)檫@些干預(yù)伴隨著相鄰組織嚴(yán)重副作用的高發(fā)率，例如陽(yáng)痿、尿失禁和慢性炎癥。現(xiàn)有診斷方法的組成包括數(shù)字式直腸觸診、血清前列腺特異性抗原測(cè)定和超聲、磁共振和X射線成像。這些技術(shù)無(wú)法準(zhǔn)確檢測(cè)出擴(kuò)散到軟組織中的CaP。所以，無(wú)法可靠檢測(cè)出轉(zhuǎn)移到淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移瘤，并且這些方法在臨床前期(understaging)中檢查出40-60％的上述疾病。
CaP的診斷定位劑的現(xiàn)有技術(shù)教導(dǎo)了特異性放射性標(biāo)記抗體，但該方法的復(fù)雜性限制了其廣泛使用。用18F標(biāo)記的5α-二氫睪酮業(yè)已用于PET掃描，一種難以普及的成像形式。
所以，CaP的治療和診斷方法目前都非常缺乏。發(fā)現(xiàn)那些不但阻斷AR而且能夠減少可利用AR的數(shù)目的化合物令人感興趣。此外，局部目的的另一期望特征是化合物具有低或沒(méi)有全身再吸收作用。而且，化合物應(yīng)該降解或代謝為低或無(wú)毒的成分并具有很小或沒(méi)有抗雄激素活性。另外，對(duì)腫瘤性前列腺細(xì)胞特異性的放射同位素標(biāo)記的化合物十分有益。這些化合物使主治醫(yī)師能夠準(zhǔn)確觀察到CaP的病理形態(tài)學(xué)，由此使那些CaP已經(jīng)惡化達(dá)到治療手術(shù)或單放射端口范圍之外的患者避免不必要的和昂貴的手術(shù)和/或放療。隨后可以開(kāi)始其他適當(dāng)?shù)寞煼?，例如雄激素脫離和/或非特異性化療。
全身性抗雄激素(AA)是經(jīng)口服給藥體內(nèi)穩(wěn)定的化合物，已知其阻斷AH與AR結(jié)合。最初為前列腺癌治療開(kāi)發(fā)，這些化合物具有顯著的全身性作用，因?yàn)樗鼈內(nèi)硇缘刈钄郃R，其中導(dǎo)致性欲和雄性性功能的喪失。非甾類(lèi)藥物完全不能在雄性中口服或局部用于AE或AGA治療，因?yàn)樗鼈兛梢詮钠つw很好地吸收且在體內(nèi)穩(wěn)定。嘗試用局部性甾類(lèi)AA如環(huán)丙氯地孕酮、氯地孕酮和螺內(nèi)酯治療雄性EA和AGA并沒(méi)有成功，顯然是因?yàn)槠つw對(duì)其的吸收作用低下(Zaumseil，R-P.Schering AG/Asche Corp.，Hamburg Personal Communication 1997)。一些抗雄激素也具有皮膚刺激作用。
全身性AA被建議用于患有AE和AGA的婦女的治療(Diamanti-Kandarakis，E.婦女中抗雄激素療法的現(xiàn)有狀況，Current Pharm Des，1999Sep，5(9)707-23)，但臨床研究關(guān)注副作用。一般知道，至少在雄性中，擴(kuò)展的AR阻斷導(dǎo)致AR突變，并且突變的受體獲得了被其他物質(zhì)激活的能力，該物質(zhì)例如是多種甾類(lèi)代謝產(chǎn)物和孕酮和雌激素，胰島素樣生長(zhǎng)因子，表皮生長(zhǎng)因子和角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子和神經(jīng)內(nèi)分泌遞質(zhì)，如5-羥色胺。還顯示AR阻斷擴(kuò)增AR基因。顯然，通過(guò)用全身性AA阻斷AR治療婦女的脫發(fā)并不理想而在男性中完全是不可接受的。
目前治療AE和AGA使用的是局部米諾地爾及其衍生物，和口服芬甾酮(Scow，D.T.；Nolte，R.S.Shaughnessy，A.F.男性脫發(fā)的醫(yī)學(xué)治療，American Family Physician，1999 Apr 15，59(8)2189-94，2196)。米諾地爾是一種抗高血壓藥物，偶然發(fā)現(xiàn)其可以預(yù)防脫發(fā)，并且一定程度上促進(jìn)再生，但只是在頂部頭皮，這種作用暫時(shí)解釋為通過(guò)前列腺素內(nèi)過(guò)氧化合酶-1的活化作用，增加局部血液流量，抑制細(xì)菌感染和/或通過(guò)改變真皮乳頭中的AH代謝機(jī)制(Michelet，J.F-Commo，S.；Billoni，N.；Mah，Y.F.；Bernard，B.A.米諾地爾對(duì)細(xì)胞保護(hù)性前列腺素合酶-1的活化作用可能是其頭發(fā)生長(zhǎng)促進(jìn)作用的解釋?zhuān)琂ournal of Investigative Dermatology，1997 Feb，109(2)；2-5-9；Pirard-Franchimont，C.；Dedoneker，P.；Cauwenbeergh，G.；Pirard，G.E.；酮康唑香波長(zhǎng)期使用在雄激素性脫發(fā)中的作用，Dermatology，1998；196(4)474-7；Sato，T.；tadokoro，T.；Soroda，T.；Asada，Y.；Itami，S.；Takayasu，S.米諾地爾提高取自禿頭頭皮的培養(yǎng)人體真皮乳頭細(xì)胞的17β-羥基甾類(lèi)脫氫酶和5α還原酶活性，Journal of Dermatological Science，1999Feb 19(2)123-5)。
非那雄胺經(jīng)口服攝取并每天抑制睪酮向二氫睪酮(DHT)轉(zhuǎn)化，由此降低頭皮中AH的活性。研究表明，約半數(shù)的男子在前中部頭皮處獲得適當(dāng)改善且約半數(shù)停止排放臭氣。副作用包括使性欲和勃起功能降低，其在停藥后消失(Kaufman，K.D-Olsen，E.A.；Whiting，D.；Robe室溫s，J.L.；Hordinsky，M.；Shapiro，J.；Binkowitz，B.；Gormley，G.J.非那雄胺在患有雄激素性脫發(fā)男子的治療中，非那雄胺雄性模式脫發(fā)研究組，Journal of theAmerican Academy of Dermatology.1998 Oct，39(4Pt，.1)578-89)。沒(méi)有研究可以用來(lái)證明這種激素平衡的長(zhǎng)期全身治療是否無(wú)害。
顯然，抑制而不是阻斷皮內(nèi)AR，同時(shí)無(wú)刺激且不是全身性吸收的局部活性抗雄激素將有效治療AH依賴(lài)的皮膚疾患。
我們?cè)O(shè)計(jì)并合成了多種具有有效抗雄激素活性的新化合物，并且意外發(fā)現(xiàn)其中一些通過(guò)濃度和時(shí)間依賴(lài)性方式抑制而不是阻斷AR(Sovak，M.S.；Bressi，J.C.；Douglas，J.；campion，B.；Wrasidlo，W.AndrogenicDirected Compositons，U.S.Application Ser.No.09/215，351，1998)。這些化合物的一些化合物在局部給藥時(shí)顯示出非常低的或沒(méi)有全身性生物利用度。此外，證實(shí)BP-766可生物降解至無(wú)抗雄激素活性且具有低的全身性毒性的成分。本文描述了皮膚雄激素受體的局部活性和非全身性吸收的抑制劑。在雄性和雌性中為雄激素排放和脫發(fā)提供了合理的治療概念。
相關(guān)文獻(xiàn)美國(guó)專(zhuān)利5,656,651和WO97/00071及其引用的參考文獻(xiàn)，描述了含有苯基二甲基乙內(nèi)酰脲類(lèi)化合物的抗雄激素定向組合物，其中苯基被三氟甲基和氰基或硝基取代。還參見(jiàn)，Battmann等J.Steroid Biochem.Molec.Biol.64103-111(1998)；Cousty-Berlin，同上5147-55(1994)；和Battmann等，同上4855-60(1994)，描述了類(lèi)似化合物及其應(yīng)用。對(duì)于其他含有被取代苯基部分的化合物，參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利4,636,505和4,880,839和EP0100172。有關(guān)抗雄激素活性的探討，參見(jiàn)Kuil和Brinkmann，Eur.Urol.2978-82(1996)；Kondo等，Prostate 29146-152(1996)，和Simard等，Urology49580-589(1997)。脫發(fā)及其與雄激素的關(guān)系的討論，參見(jiàn)Kaufman，Dermatologic Clinics 14697-711(1996)；Toney等，J.Steroid Biochem.Molec.Biol.60131-136(1997)；Brouwer等，J.of Dermatology 137699-702(1997)；和Shapiro和Price Dermatologic Clinics 16341-356(1998)。
附圖簡(jiǎn)述

圖1BP-766合成。對(duì)于A、B、C參見(jiàn)EP100172。
圖2BP-766的結(jié)構(gòu)圖3BP-34的結(jié)構(gòu)圖4三氟乙酸的結(jié)構(gòu)圖5血清中BP-766的生物降解性發(fā)明概述本發(fā)明提供了化合物及其應(yīng)用方法，其中所述的化合物是被取代的苯基-2-甲基，2-(羥基或甲基)-3-雜原子取代的-丙酰胺衍生物，具有雜原子連接的全氟?；螓u代芳基取代基或是雙衍生物(bis-derivatives)，其中取代基可以直接與雜原子相連或者通過(guò)連接基相連。所述的化合物是活性抗雄激素化合物且發(fā)現(xiàn)可以用于依賴(lài)于雄激素的腫瘤和脫發(fā)的治療。此外，所述的化合物可以被放射性同位素標(biāo)記用于治療和診斷。
發(fā)明詳述所提供的化合物特征在于具有苯胺基團(tuán)，其具有至少一個(gè)位于對(duì)位的取代基，可取地在間位具有第二取代基，并且其苯胺的氮結(jié)合2-甲基，2-(羥基或甲基)-3-雜原子取代的-丙?；騈-取代的氨基甲酰基，特別是硫代氨基甲酰基。雜原子(包括氨基甲?；牡?通過(guò)一個(gè)鍵或連接基與全氟酰基、鹵代芳基或烷基取代基相連或與二價(jià)連接基相連構(gòu)成雙化合物(bis-compound)。所述的化合物當(dāng)局部給藥時(shí)具有與細(xì)胞毒性、細(xì)胞表面上雄激素受體的減少和降低全身性吸收作用有關(guān)的單個(gè)或總的特性。此外，所述的化合物可以放射同位素標(biāo)記，用于診斷和治療中。
單體化合物一般含有至少12個(gè)碳原子，通常至少14個(gè)碳原子，更經(jīng)常至少16個(gè)碳原子并且不超過(guò)約36個(gè)碳原子，通常不超過(guò)約28個(gè)碳原子，同時(shí)所述的雙化合物通常含有至少20個(gè)碳原子，經(jīng)常至少22個(gè)碳原子和不超過(guò)約40個(gè)碳原子，經(jīng)常不超過(guò)約36個(gè)碳原子。
丙酰胺的兩個(gè)位置具有兩個(gè)甲基或一個(gè)甲基和一個(gè)羥基。全氟酰基與3-雜丙酰胺經(jīng)雜原子通過(guò)一個(gè)鍵或連接基相連，該連接基的鏈內(nèi)具有1-10個(gè)碳原子，通常2-8個(gè)碳原子和0-6個(gè)，通常0-4個(gè)，更經(jīng)常是0-2個(gè)雜原子。該連接基可以是脂族、脂環(huán)族、雜環(huán)或芳族的，通常為脂族，更經(jīng)常是飽和脂族。
一般，本發(fā)明的化合物具有下式 其中Q是硫?qū)僭?氧或硫)；X是硝基(NO2)、氰基(CN)或鹵素，特別是原子序數(shù)為9-35的鹵素，尤其是9-17的鹵素(氟和氯)；V是CF3、鹵素，特別是原子序數(shù)為9-35的鹵素，尤其是9-17的鹵素(氟和氯)或H；通常是CF3；T是氫和與T1一起形成C＝Z橋，其中Z是原子序數(shù)8-16的硫?qū)僭?氧{羰基}或硫{硫代羰基})，特別是硫，W當(dāng)T是H和甲基時(shí)當(dāng)T和T1是C＝Z時(shí)是OH；U當(dāng)T和T1一起構(gòu)成C＝Z橋或d是0時(shí)是N，和與T1一起構(gòu)成一個(gè)鍵或NH，S或O，特別是NH和S；n是1或2且d是0或1；當(dāng)d是0，T和T1是氫；當(dāng)d是1，則當(dāng)n是1時(shí)和當(dāng)d是0時(shí)，Y是一個(gè)鍵或連接基，該連接基鏈內(nèi)含有1-10，一般0-8個(gè)碳原子，通常2-8，更加經(jīng)常2-6個(gè)碳原子和0-6，通常0-4個(gè)雜原子，其中所述的雜原子是N、O、S并且該雜原子以氨基(包括酰氨基)、氧基和氧代-和非氧代羰基，以及硫代和硫羰和非-硫羰-羰基存在，其中該連接基可以是脂族、脂環(huán)族、雜環(huán)和芳族，通常是脂族，通常飽和；和Z，當(dāng)不與Y一起時(shí)，是含1-10個(gè)碳原子，通常1-6個(gè)碳原子，更經(jīng)常1-5個(gè)碳原子的飽和或不飽和(如雙鍵或叁鍵)的脂族基團(tuán)；含有2-10個(gè)碳原子，一般2-8個(gè)碳原子，通常2-6個(gè)碳原子，更加經(jīng)常3-5個(gè)碳原子的多氟酰氨基，所述多氟酰氨基具有至少2個(gè)氟基團(tuán)至總數(shù)是2m-1個(gè)氟基團(tuán)，通常具有至少2m-2個(gè)氟基團(tuán)，其中m是碳原子的數(shù)目；或者含有6-12個(gè)碳原子，更加經(jīng)常6-10個(gè)碳原子的被取代芳基氨基，特別是苯氨基，和特別是對(duì)位取代的原子序數(shù)是9-80的鹵素，特別是F、Cl、Br和I，更特別是Br和I(原子序數(shù)35-80)。
當(dāng)n是2時(shí)，Y和Z一起構(gòu)成一個(gè)鍵或連接基，該連接基總共含有1-10，通常含1-8個(gè)原子，其具有0-10，通常0-8個(gè)碳原子，更加經(jīng)常2-6個(gè)碳原子和0-6，通常0-4個(gè)雜原子，同時(shí)鏈內(nèi)具有0-4，通常0-2個(gè)雜原子，其中所述的雜原子是N、O、S，連接基內(nèi)至少有一個(gè)碳原子和雜原子，并且雜原子是以氨基(包括酰氨基)，氧基和氧代-和非-氧代-羰基，以及硫代和硫羰和非-硫羰-羰基存在，其中該連接基當(dāng)不是1個(gè)雜原子時(shí)可以是脂族、脂環(huán)族、雜環(huán)和芳族，通常脂族，通常飽和；和苯基，Y和/或Z可以被常規(guī)放射性標(biāo)記取代，特別是Z，其中該標(biāo)記可以是放射性碘、螯合的锝，和其他適當(dāng)放射體。
當(dāng)Y是一個(gè)鍵時(shí)，U也常常是一個(gè)鍵，由此使多氟酰氨基和苯氨基的氮與丙酰基的碳原子相連。
對(duì)于放射性標(biāo)記，Z可以具有取決于放射性標(biāo)記的性質(zhì)的多種適當(dāng)官能度。例如，對(duì)于放射性碘，可以可以用炔基加入氫化物，例如氫化錫，隨后用碘代替錫基。其中放射性標(biāo)記螯合，螯合基團(tuán)可以通過(guò)任何常規(guī)官能團(tuán)，例如酰氨基、酯、醚、硫醚、氨基等與Z相連。螯合化合物包括咪唑類(lèi)、硫代乙酸類(lèi)、半胱氨酸、甘氨酸酰胺等的聯(lián)合形式。
所述的化合物可以具有或可以不具有一個(gè)或多個(gè)立體異構(gòu)中心。所述的化合物可以以外消旋混合物使用，或著拆分為其對(duì)映異構(gòu)體并且使用對(duì)映異構(gòu)體。
當(dāng)所述的化合物具有乙內(nèi)酰脲環(huán)時(shí)，它們通常包括在下面的結(jié)構(gòu)式中 其中X1、V1和Y1分別在X、V和Y的定義范圍內(nèi)；Y1通常是2-10個(gè)碳原子，通常2-8個(gè)碳原子，更經(jīng)常2-6個(gè)碳原子的亞烷基；A1是硫?qū)僭?氧或硫)，特別是硫，和Z1是含有2-10個(gè)碳原子，通常2-6個(gè)碳原子，更經(jīng)常3-5個(gè)碳原子的多氟酰氨基，所述多氟酰氨基具有至少2個(gè)氟基團(tuán)至不超過(guò)2m-1個(gè)氟基團(tuán)，通常具有至少2m-2個(gè)氟基團(tuán)，其中m是碳原子的數(shù)目，或者含有6-12個(gè)碳原子，通常6-10個(gè)碳原子的被取代芳基氨基，特別是苯氨基，和優(yōu)選對(duì)位取代的原子序數(shù)9-80的鹵素，特別是Br和I(原子序數(shù)35-80)。
那些含有2-羥基，2-甲基丙酰基作為組成部分的化合物一般具有下式 其中X2、V2和n2分別在X、V和n的定義范圍內(nèi)U2是一個(gè)鍵和雜原子，特別是氮和硫?qū)僭?O和S)；當(dāng)n2是1時(shí)；Y2是含有1-10個(gè)碳原子，通常1-6個(gè)碳原子，更經(jīng)常2-6個(gè)碳原子和0-4個(gè)雜原子的亞烷基，其雜原子是N和硫?qū)僭夭⑶野ü倌軋F(tuán)羰基、硫代羰基、氧基、硫代和氨基；和Z2是含有2-10個(gè)碳原子，通常2-6個(gè)碳原子，更經(jīng)常2-4個(gè)碳原子和具有至少2個(gè)氟基團(tuán)至不超過(guò)2m-1個(gè)氟基團(tuán)，通常具有至少2m-2個(gè)氟基團(tuán)的多氟酰氨基；或者含有6-12個(gè)碳原子，更加經(jīng)常6-10個(gè)碳原子的被取代芳基氨基，特別是苯基，和優(yōu)選對(duì)位取代的原子序數(shù)9-80的鹵素，特別是F、Cl、Br和I，更加具體是Br和I。
具有氨基甲酰基的化合物，一般具有下式 其中X3和V3在X1和V1的定義范圍內(nèi)；Q3是硫?qū)僭?，特別是硫；Y3是一個(gè)鍵和含有1-6個(gè)碳原子，通常1-3個(gè)碳原子的亞烷基；Z3是含有1-6個(gè)碳原子的烷基；含有2-10個(gè)碳原子，通常2-6個(gè)碳原子，更加經(jīng)常2-4個(gè)碳原子并具有至少2個(gè)氟基團(tuán)至不超過(guò)2m-1個(gè)氟基團(tuán)，通常具有至少2m-2個(gè)氟基團(tuán)的多氟酰氨基；或者含有6-12個(gè)碳原子，通常6-10個(gè)碳原子的芳基氨基，特別是苯基，和優(yōu)選對(duì)位取代的原子序數(shù)為9-80的鹵素，特別是F、Cl、Br和I，更加具體是Br和I。
該主題化合物可以按照常規(guī)方法制備，具體方法根據(jù)具體側(cè)基而改變。乙內(nèi)酰脲的制備一般包括使用異氰酸酯和被取代α-氨基乙腈。通過(guò)適當(dāng)選擇異氰酸酯和α-氨基乙腈，可以在一個(gè)步驟中獲得終產(chǎn)物?；蛘撸梢允褂枚喾N保護(hù)基，隨后可以脫除或者使取代基參與乙內(nèi)酰脲的形成或者可以為進(jìn)一步衍生提供位點(diǎn)。在EPO公開(kāi)0 494 819和0 580 459中描述了多種方法。該脲化合物可以利用異氰酸酯(包括硫代異氰酸酯)和氨基化合物制備。在本申請(qǐng)的試驗(yàn)部分中為乙內(nèi)酰脲和丙?；糠只衔锾峁┝嗽S多實(shí)施例。
所述的主題化合物可以用作抗雄激素，在增生性疾病、多毛癥、痤瘡和雄激素性脫發(fā)的治療中代替現(xiàn)有抗雄激素。所述的主題化合物具有一個(gè)或多個(gè)下列特性特異性結(jié)合雄激素受體并對(duì)雄激素受體具有高親和力；以濃度依賴(lài)方式破壞或抑制雄激素受體的存在；當(dāng)局部給藥時(shí)全身性吸收作用低或沒(méi)有全身性吸收作用；和有限的穩(wěn)定性，降解為低毒或無(wú)雄激素活性的成分。所述的主題化合物可以單用或與其他雄激素或其他治療劑，例如氟他胺、比卡魯胺和尼魯米特合用。通常可以使用輻射、加熱等并且可以適當(dāng)與所述的主題化合物合用。治療可以并行地、連續(xù)地或者按照預(yù)定方案進(jìn)行以減小腫瘤細(xì)胞不應(yīng)性的可能性。
發(fā)現(xiàn)所述的主題化合物具有高細(xì)胞抑制和細(xì)胞毒性，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和具有雄激素受體的細(xì)胞的生存力。它們也可以對(duì)腫瘤細(xì)胞具有明顯高于對(duì)正常細(xì)胞的作用。
治療組合物可以按照常規(guī)方法和被治療的適應(yīng)癥進(jìn)行配制。所述的組合物可以配制為用于口服或非腸道，例如血管內(nèi)、皮下、瘤內(nèi)、腹膜內(nèi)等給藥劑型，如丸劑、散劑、膠囊、水或油溶液或分散體，等等。常規(guī)載體包括鹽水、磷酸鹽緩沖鹽水、水、植物油、乙醇、異丙醇等?？梢允褂觅x形劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、矯味劑等。濃度可以是約0.1-10％(重量)并且劑量范圍是約0.1mg-約5g，通常不超過(guò)約2g/劑。每天可以給藥一個(gè)或多個(gè)劑量。
所述的主題化合物可以與通用治療劑聯(lián)合用于特定治療，可以與抗腫瘤藥物、脫發(fā)治療藥物等聯(lián)合使用。特別感興趣的是采用一種方案，其中所述的主題化合物與治療脫發(fā)的藥物如米諾地爾7或Aminexil7(LOreal的商標(biāo))合用，其中已知藥物的使用劑量可以與所述主題化合物不存在時(shí)相同，或者在觀察到的聯(lián)合經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上減小劑量。聯(lián)合時(shí)最佳劑量的測(cè)定可以按照常規(guī)方式利用適當(dāng)臨床研究并改變兩種成分的比例來(lái)進(jìn)行，其可以是常規(guī)制劑或者作為兩個(gè)獨(dú)立制劑來(lái)使用。
所述的主題化合物可以用于競(jìng)爭(zhēng)性試驗(yàn)中或者作為對(duì)照來(lái)評(píng)估其他化合物的細(xì)胞抑制或細(xì)胞毒性作用或?qū)π奂に厥荏w的阻斷。所以，可以利用特定的細(xì)胞系，其中可以測(cè)定出該試劑對(duì)與靶細(xì)胞的存活率或其他標(biāo)識(shí)有關(guān)的主題化合物活性的影響。另外，在含有腫瘤雄激素受體細(xì)胞的混合物中，所述的主題化合物可以用來(lái)在正常細(xì)胞的存在下消除腫瘤細(xì)胞。所以，在不同的培養(yǎng)基中，含雄激素受體的細(xì)胞可以很容易變化成為腫瘤性，通過(guò)使培養(yǎng)基中的主題化合物保持在細(xì)胞毒性水平，可以選擇性殺死細(xì)胞。
此外，放射性標(biāo)記化合物可以用于治療和/或診斷目的，這取決于放射性標(biāo)記的選擇。放射性標(biāo)記化合物可以按照常規(guī)方法利用生理可接受成分配制，例如多種液體分散劑，如去離子水、PBS、DMSO、乙醇等，與多種添加劑合用，例如非離子洗滌劑、葡萄糖、穩(wěn)定劑、抗生素等。通常，放射性標(biāo)記應(yīng)在使用前即時(shí)提供，由此在位點(diǎn)制成放射性產(chǎn)物或者運(yùn)載到注射位點(diǎn)。制劑一般通過(guò)靜脈內(nèi)注射給藥。
下列實(shí)施例舉例說(shuō)明但不起限定作用。
實(shí)施例實(shí)施例14-硝基-3-三氟甲基-N-(2-羥基-2-甲基-3-氨基-丙?；?苯胺，(BP-34)向加壓反應(yīng)器中加入4-硝基-3-三氟甲基-[2，3-環(huán)氧-2-甲基丙?；鵠苯胺，BP-33(10.0g，34.46mmol)(參見(jiàn)圖3)和甲醇(100ml)。冷卻至70℃后，過(guò)量的氨冷凝到反應(yīng)器內(nèi)，將反應(yīng)器密封并攪拌14小時(shí)。蒸發(fā)后，粗固體用冷CH2Cl2(50ml)洗滌。過(guò)濾并干燥得到6.1g BP-34(收率58％)。
熔點(diǎn)142-145℃實(shí)施例24-硝基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-N-(六氟丁酰氨基)丙?；?苯胺，(BP-521)在氮?dú)庀翨P-34(247mg，0.80mmol)與CH2Cl2(5mL)、THF(10mL)和NEt3(1.1mL，0.80mmol)冷卻至0℃且加入七氟丁酰氯(120μl，0.80mmol)。冷卻至室溫后除去揮發(fā)物，加入CH2Cl2(30mL)和H2O(50mL)，分離有機(jī)層并用MgSO4干燥。經(jīng)過(guò)硅膠色譜(CHCl3/丙酮)純化后分離出產(chǎn)物，其為無(wú)色油(320mg，收率82％)。
實(shí)施例34-硝基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-十五氟辛酰氨基)-丙酰胺，(BP-562)向BP-34(360mg，1.17mmol)加入THF(10mL)和NEt3(485μL，3.5mmol)。使該溶液冷卻至0℃丙加入十五烷基辛酰氯(295μL，1.17mmol)。達(dá)到室溫后，除去揮發(fā)物。經(jīng)過(guò)硅膠色譜(CHCl3/丙酮)純化后，得到產(chǎn)物，其為淺黃色固體(689mg，收率84％)。
質(zhì)譜(m/z)704(MH+)；726(M+Na+).19F NMR(470MHz，CDCl3)-56.8ppm，-77.3，-116.3，-118.1，-118.6，-119.1，-119.4，-122.7。
實(shí)施例44-硝基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-N-(七氟丁基)氨基丙酰基)苯胺，(BP-626)將BP-33(50mg，0.172mmol)溶于THF(1mL)和2，2，3，3，4，4，4-七氟丁胺(200mg，1mmol)，并且在90℃下加熱6小時(shí)。汽提后，固體經(jīng)過(guò)硅膠色譜(CH2Cl2/丙酮)純化后，得到BP-626，其為油(61mg，收率72％)。
質(zhì)譜(m/z)590(MH+)，512(MN+a)實(shí)施例52-硫代乙基七氟丁酰胺(BP-532)在0℃下將七氟丁酰氯(11.9g，51mmol)加入到2-(S三苯甲硫基)乙胺(15.58g，49mmol)和NEt3(5.43g，54mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液內(nèi)。2小時(shí)后，終止該反應(yīng)并用H2O(1×20mL)、飽和NaHCO3(20mL)和飽和NaCl(20mL)提取。蒸發(fā)溶劑且殘余物由己烷(150mL)結(jié)晶得到產(chǎn)物(23.06g，91.3％)。
mp99-104℃將三氟乙酸(22.16g，194mmol)加入到該產(chǎn)物(10.02g，194mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液內(nèi)。5分鐘后，加入三乙基硅烷(5.65g，49mmol)。蒸發(fā)溶劑且固體通過(guò)硅膠色譜(CH2Cl2)純化得到產(chǎn)物(4.69g，88.3％)。
實(shí)施例64-氰基-3-三氟甲基-N-[(2′-羥基-2′-甲基-3′-S-{(2″-七氟丁酰氨基)乙基)硫代}丙?；鵠苯胺，(BP-533)將BP-532(1.6g，5.9mmol)在THF(5mL)中的溶液在0℃下加入到NaH(0.157g，6.6mmol)在THF(2.6ml)中的混懸液內(nèi)。30分鐘后，在室溫下加入4-氰基-3-三氟甲基-N-[2，3-環(huán)氧-2-甲基丙?；鵠苯胺(1.58g，5.9mmol)在THF(5mL)中的溶液。用H2O終止反應(yīng)，用Et2O(3×20ml)提取。蒸發(fā)溶劑且殘余物通過(guò)硅膠色譜(氯仿/丙酮)純化得到白色結(jié)晶固體(2.55g，79.9％)。
實(shí)施例74-氰基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-S(2″-七氟丁酰氨基)乙基)亞磺?；；?苯胺，(RP-567+BP-568)在室溫下將偏過(guò)碘酸鈉(0.18g，0.86mmol)在水(10mL)中的溶液滴加到BP-533(0.39g，0.72mmol)在MeOH(15mL)中的溶液內(nèi)。攪拌14小時(shí)后，過(guò)濾出的固體用甲醇(15mL)洗滌。揮發(fā)物蒸發(fā)到EtOAC(100mL)中且用水(10mL)、10％亞硫酸鈉水溶液(15mL)和飽和NaCl(15mL)提取。有機(jī)層用MgSO4干燥并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)硅膠色譜(50∶50 CHCl3/丙酮)純化得到兩種非對(duì)映異構(gòu)體，其為白色結(jié)晶固體(0.31g，78.0％)。
實(shí)施例84-氰基-3-三氟甲基-N-[(2′-羥基-2′-甲基-3′-S-{(2″-七氟丁酰氨基)乙基)磺?；；?苯胺，(BP-534)將MCPBA(0.796g，4.6mmol)在CH2Cl2(100mL)中的溶液滴加到存在于CH2Cl2(100mL)中的BP-533(1.09g，2.0mmol)內(nèi)。攪拌14小時(shí)后，用10％亞硫酸鈉(20mL)終止該反應(yīng)，用Na2CO3(2×15mL)和鹽水(15mL)提取。蒸發(fā)溶劑且殘余物通過(guò)硅膠色譜(CHGl3/丙酮)純化得到產(chǎn)物，其為油(0.93g，79.8％)。
實(shí)施例94-[2′，5′-二氧代-3′，3′-二甲基-1′-吡咯烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-245)將2，2-二甲基琥珀酸酐(34.41g，268mmol)置于燒瓶中并在140℃氮?dú)庀氯廴?。分次加?-氨基-2-三氟甲基苯腈(25g，134mmol)，隨后加入甲磺酸(500μl)。2小時(shí)后，溫度降低至120℃且加入EtOAc(200mL)。該溶液用NaHCO3(2×50mL)洗滌， 隨后用飽和NaCl(50mL)洗滌。干燥(MgSO4)，過(guò)濾，并且除去溶劑留下油，將油溶解在60℃的甲苯(200mL)中。數(shù)天后，過(guò)濾并干燥得到BP-245(25.7g，65％)，其為無(wú)色結(jié)晶。
HPLC純度＝99％，熔點(diǎn)131-133℃
實(shí)施例104-[2′，5′-二氧代-3′，3′，4′-三甲基-1′-吡咯烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-420)將BP-245(10g，34mmol)溶解在Schlenk燒瓶中的DMF(40mL)和THF(20mL)中且在氮?dú)庀吕鋮s至-78℃。在10分鐘內(nèi)加入雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(34mL，1M的THF溶液；34mmol)，加入存在于THF(20mL)中的碘甲烷(5.1g，35.7mmol)。使該反應(yīng)物升至室溫并攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)物傾入甲苯(400mL)，1N HCl(200mL)，分離各層且甲苯層用50％飽和NaCl(100mL)洗滌。干燥(MgSO4)，過(guò)濾且除去溶劑得到黃色結(jié)晶固體，其通過(guò)硅膠色譜(甲苯/丙酮)純化且由甲苯(40mL)結(jié)晶得到白色結(jié)晶固體(2.19g，收率21％)。
實(shí)施例114-[2′，5′-二氧代-3′，3′，4′，4′-四甲基-1′-吡咯烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-424)將BP-245(5.0g，16.9mmol)溶解在干燥的DMF(22mL)并冷卻至-60℃。在10分鐘內(nèi)加入雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(33.8mL，1M的THF溶液；33.8mmol)，隨后加入存在于THF(10mL)中的碘甲烷(5.025g，35.4mmol)。-20℃下6小時(shí)后，將混合物傾入甲苯(200mL)和1N HCl(100mL)中。分離各層且甲苯層用飽和NaCl(50mL)洗滌。干燥(MgSO4)，過(guò)濾且除去溶劑得到油，其通過(guò)硅膠色譜(甲苯/丙酮)純化。BP-424的收率＝3.25g(60％)。
熔點(diǎn)162.5-164℃實(shí)施例124-[2′-氧代-5′-羥基-3′，3′，4′，4′-四甲基-1′-吡咯烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-511)將BP-424(100mg，0.31mmol)溶解在甲醇(2mL)和1N HCl(100μL)中。15℃下，在2分鐘內(nèi)加入固體硼氫化鈉(58mg，1.54mmol)。在室溫下14小時(shí)后，除去甲醇，產(chǎn)物在EtOAc(20mL)和10％NaCl(25mL)之間分配。分離各層，有機(jī)層用飽和NaCl(25mL)洗滌并且干燥(MgSO4)，蒸發(fā)得到白色固體(109mg)，其通過(guò)從CH2Cl2結(jié)晶進(jìn)一步純化。(88mg，收率87％)。
熔點(diǎn)-195-197℃。質(zhì)譜(m/z)325(MH+)MW＝326.32
實(shí)施例134-(2′-氧代-5-七氟丁氧基-3′，3′，4′，4′-四甲基-1′-吡咯烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-569)將BP-511(100mg，0.036mmol)懸浮在2，2，3，3，4，4，4-七氟丁醇(1mL)和甲磺酸(100uL)中且在室溫下攪拌6小時(shí)。將該溶液傾入0.1M K2HPO4(pH7.0，15mL)和EtOAc(25mL)。有機(jī)層用鹽水(2×10mL)洗滌和干燥(MgSO4)。汽提且硅膠色譜(CCl4/丙酮)純化得到白色固體(53mg，收率34％)。
質(zhì)譜(m/z)509(MH+)實(shí)施例144-[3′-(4″-N-叔丁氧基羰基)-氨基丁基)-4′，4′-二甲基-5′-亞氨基-2′-硫代-1′-咪唑烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-380)將異硫氰酸4-氰基-3-三氟甲苯基酯(2.3g，10mmol)溶解在THF(15mL)中，并且將NEt3(1.43，L，10.3mmol)加入到存在于THF(10mL)中的粗2-(1′_，4′_-丁基氨基-N-叔丁氧基-羰基)-2-氰基丙烷(2.6g，10.2mmol)中。1.5小時(shí)后，真空中除去揮發(fā)物。在硅膠柱上進(jìn)行上進(jìn)行HPLC(CHCl3/丙酮)得到黃色固體(3.6g)的純度為94％。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ3.20(m，2H，CH2NHC(O))；3.68(m，2H，CH2NC(S)).
實(shí)施例154-[3′-(4″-氨基丁基)-4′，4′-二甲基-5′-亞氨基-2′-硫代-1′-咪唑烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-380)將BP-380(21.0g，33mmol)溶解在MeOH(80mL)。加入4N HCl(40mL，160mmol)和甲醇(40mL)?；亓?.5小時(shí)后蒸發(fā)。從EtOH漿過(guò)濾出產(chǎn)物，用冷的EtOH(50mL)洗滌且在真空下干燥得到無(wú)色固體(15.8g，收率88.5％)。
1H NMR(DMSO-d6，500MHz)δ3.72(m，2H NCH2CH2)；2.82(m，2H，CH2CH2NH3)；1.55(s，6H，CCH3).
實(shí)施例164-[3′-(4″-N-七氟丁酰氨基丁基)-4′，4′-二甲基-5′-氧代-2′-硫代-1-咪唑烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-443)將BP-381(15.8g，37.6mmol)置于含有CH2Cl2(200mL)和NEt3(23mL，165mmol)的燒瓶中。加入七氟丁酰氯(6.2mL，41.3mmol)。室溫下攪拌6小時(shí)且都經(jīng)過(guò)硅膠色譜(CHCl3/丙酮)純化。得到油(8.9g)(收率41％)。
19F NMR(CDCl3)；-58.5ppm(ArCF3)；-77.1(CF2CF3)；-117.2(C(O)CF3)；-123.4(CF2CF2CF3).
13C NMR(CDCl3127Mhz)157.8ppm 175.13，178.55.
實(shí)施例174-[3′-(4″-七氟丁氨基乙基)丁基)-4′，4′-二甲基-5′-亞氨基-2′-硫代-1′-咪唑烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-444)將BP-138(340mg，0.95mmol；得自實(shí)施例7)溶解在CH2Cl2(5mL)和Net3(0.397ml，2.85mmol)中。加入七氟丁酰氯(0.142mL，0.95mmol)。室溫下30分鐘后，除去揮發(fā)物。硅膠色譜(CHCl3/丙酮)純化得到無(wú)色固體(280mg)(收率5％)。
19F NMR(470Mhz，CDCl3)；-58.6ppm；-77.0；-117.0；-123.3.
實(shí)施例18N-(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-N′-七氟丁基)硫脲，(BP-628)將異硫氰酸4-氰基-3-三氟甲苯基酯(2.28g，10mmol)溶解在THF(15mL)中，并且冷卻至5℃。攪拌1小時(shí)后加入2，2，3，3，4，4-七氟丁胺(209mg，10.5mmol)，加入EtOAc(60mL)和1N HCl(25mL)。有機(jī)層用飽和NaCl(15mL)洗滌并干燥(MgSO4)。硅膠色譜純化(CH2Cl2/丙酮)，得到白色固體(收率90％)。
實(shí)施例194-硝基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-{N′-(甲基)-N′-(3″-苯基-3″-(對(duì)-三氟甲基苯基))丙基}氨基}苯胺，(BP-657)將BP-33(77mg，0.264mmol)和氟西汀(69mg，0.22mmol)溶解在對(duì)二噁烷(3mL)中并將該溶液在95℃下加熱6小時(shí)。除去溶劑，產(chǎn)物在硅膠色譜(CH2Cl2/MeOH/NEt3)上純化。收率＝64mg(收率48％)。
實(shí)施例202-羥基-3-((2-羥基-2-(N-(4-硝基-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲?；?丙基)氨基)-2-甲基-N-(4-硝基-3-(三氟甲基)苯基)丙酰胺，(BP-673)將BP-33(1.0g，34mmol)溶解在甲醇(40mL)中。加入NH4OH(30％，4mL)且該反應(yīng)物在室溫下攪拌24小時(shí)。除去揮發(fā)物，粗固體用甲醇(2×10mL)提取。從二氯甲烷收集沉淀產(chǎn)物并且進(jìn)一步利用柱色譜(CH2Cl2/MeOH梯度溶液)純化，得到黃色固體。BP-673的產(chǎn)量＝490mg(48％)。
質(zhì)譜(m/z)MH+598實(shí)施例212-羥基-3-((2-(2-(2-羥基-2-(N-(4-硝基-3(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)丙基)氨基)乙氧基)乙基)氨基)-2-甲基-N-(4-硝基-3-(三氟甲基)苯基)丙酰胺，(BP-676)將BP-33(500mg，1.72mmol)置于含有攪拌棒的燒瓶中。加入二噁烷。在另一燒瓶中，將二胺(Hunstman XTJ-504)(127mg，0.86mmol)溶解在二噁烷(4mL)內(nèi)。將其加入前者中，攪拌所得溶液并在90℃下加熱5小時(shí)。撤去油浴且該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌9小時(shí)。除去揮發(fā)物并加入氯仿(10mL)，得到無(wú)色沉淀，收集該沉淀并干燥，得到產(chǎn)物，其為無(wú)色固體。BP-676的產(chǎn)量＝290mg(46％)。
質(zhì)譜(m/z)MH+＝729實(shí)施例22N-(4-氯苯基)-3-((2-(N-(4-氯苯基)氨基甲?；?-2-羥丙基)氨基)-2-羥基-2-甲基-丙酰胺，(BP-708)將BP-706(3.0g，14.2mmol)溶解在有攪拌棒的燒瓶中的CH3OH中。加入NH4OH(12mL)使溶液轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色液體。汽提2天后，除去揮發(fā)物，粗產(chǎn)物用MeOH(2×120mL)提取。產(chǎn)物用柱色譜(CH2Cl2MeOH梯度溶液)純化并分離出產(chǎn)物，其為白色固體。BP-708的產(chǎn)量＝2.56g(41％)。
質(zhì)譜(m/z)MH+＝440mp76-78℃實(shí)施例233-((((4-溴苯基)氨基)硫代甲基)氨基-2-羥基-2-甲基-N-(4-硝基-3-(三氟甲基)苯基)丙酰胺，(BP-668)N2(氣態(tài))下將BP-34(2.0g，6.5mmol)溶解在無(wú)水THF(30mL)，加入NEt3(100μL)。在另一燒瓶?jī)?nèi)在N2(氣態(tài))下，向前一混合物內(nèi)同樣加入異硫氰酸4-溴苯基酯。攪拌1小時(shí)后，除去揮發(fā)物，粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱色譜(CHCl3/丙酮梯度溶液)純化，得到產(chǎn)物，其為黃色固體(m.p.192-195℃)，收率67％。
質(zhì)譜(m/z)MH+＝521，523實(shí)施例243-((((環(huán)己基甲基)氨基)硫代甲基)氨基-2-羥基-2-甲基-N(4-硝基-3-(三氟甲基)苯基)丙酰胺，(BP-743)N2(氣態(tài))下將BP-34(2.0g，6.5mmol)溶解在無(wú)水THF(30mL)，加入NEt3(2.7mL)并且隨后加入異硫氰酸環(huán)己基甲酯(1.0g，6.4mmol)。攪拌3小時(shí)后，除去揮發(fā)物，產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱色譜(CHCl3/丙酮梯度溶液)純化，得到黃色固體(m.p.77-81℃)，收率84％。
質(zhì)譜(m/z)MH+＝463；MNa+＝485實(shí)施例254-[2′，5′-二氧代-3′，3′，4′-三甲基-4′-丙炔基-1′-吡咯烷基]-2-三氟甲基-苯腈，(BP-535)將BP-420(1.71g，5.5mmol)置于燒瓶?jī)?nèi)。冷卻至-50℃之后，加入雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(5.55mL，1M的THF溶液；5.55mmol)，隨后加入丙炔基溴(0.69g，58mmol)。該反應(yīng)在0℃下保持過(guò)夜，隨后將其傾入1NHCl(20mL)并用EtOAc提取。有機(jī)層用50％飽和NaCl(100mL)洗滌。干燥(MgSO4)，過(guò)濾和除去溶劑得到固體，其在硅膠色譜(甲苯/丙酮)純化。產(chǎn)物從甲苯重結(jié)晶(1.05g，收率55％)。
實(shí)施例262-(三氟甲基)-4-(3，3，4-三甲基-2，5-二氧代-4-(6，7，7-三氟庚-6烯-2-炔基)環(huán)戊基)苯腈，(BP-751)將BP-535(120mg，0.34mmol)溶解在無(wú)水THF(10mL)中且將該溶液冷卻至-78℃。加入KN(SiMe3)2(344μL，1M甲苯溶液)，隨后加入BrCH2CH2CF＝CF2(65mg，0.34mmol)。令該溶液升至室溫，用1N HCl終止并且用EtOAc提取。分離各層并且干燥有機(jī)層(MgSO4)，過(guò)濾和濃縮得到粗產(chǎn)物，其經(jīng)柱色譜純化得到產(chǎn)物，其為無(wú)色固體。
實(shí)施例274-氰基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-N-(七氟丁酰氨基)丙?；?苯胺，(BP-713)將BP-646(BP-34的氰基類(lèi)似物)(1.121g，3.89mmol)溶解在干燥CH2Cl2中并加入NEt3(1.6mL)。加入七氟丁酰氯(558μl，4.28mmol)。3小時(shí)后，除去揮發(fā)物并通過(guò)硅膠色譜(CHCl3/丙酮)純化得到無(wú)色固體(1.03g，收率55％)。
質(zhì)譜(m/z)482(MH+)。熔點(diǎn)142-144℃實(shí)施例28N-(3-三氟甲基-4-氰基苯基)-N-丙基硫脲，(BP-735)將異硫氰酸4-氰基-3-三氟甲苯基酯(1g，4.39mmol)溶解在無(wú)水THF(30mL)中并冷卻至0℃。緩慢加入正丙基胺且撤去冰浴。室溫下攪拌16小時(shí)后，除去揮發(fā)物，產(chǎn)物由甲苯結(jié)晶得到米色片狀物(1.02g，收率77％)。
實(shí)施例292-羥基-3-(((4′-碘代苯基)氨基)羰基氨基)-2-甲基-N-(4″-硝基-3″-三氟甲基)苯基)丙酰胺(BP-754)將BP-34(2.35g，7.66mmol)溶解在無(wú)水THF(25mL)中。在另一燒瓶?jī)?nèi)，使異氰酸對(duì)碘代苯基酯(2.0g，8.16mmol)溶解在無(wú)水THF(10mL)中。向第一溶液內(nèi)加入NEt3(3.2mL)，隨后加入上述異氰酸酯溶液。2小時(shí)后，除去揮發(fā)物，粗產(chǎn)物用CH2Cl2(2×50mL)洗滌且收集所得的產(chǎn)物，其為淺黃色固體(4.9g，收率95％)。
實(shí)施例304-[3′-反式-(2″-丙烯基-3″-碘)-4′，4′-二甲基-5′-氧代-2′-硫代-1-咪唑烷基]-2-三氟甲基苯腈(BP-305)；4-[3′-順式-(2″-丙烯基-3″-碘)-4′，4′-二甲基-5′-氧代-2′-硫代-1-咪唑烷基]-2-三氟甲基苯腈(BP-305)N2下將BP-199(4-[4′，4′-二甲基-3-丙炔基-5′-氧代-2′-硫代-1′-吡咯烷基]-2-三氟甲基苯腈；(參見(jiàn)WO97/00071)溶解在干燥甲苯(100mL)中。加入Bu3SnH(1.12ml)和AIBN(68.5mg)，并將反應(yīng)混合物加熱至回流?；亓鲾嚢?小時(shí)后，令該反應(yīng)混合物冷卻至室溫且在真空下除去揮發(fā)物。粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜(SiO3，洗脫劑CHCl3)純化，分離，其為淺色油(1.67g)。HPLC純度為95.3％。
將BP-237(80∶20 E/Z異構(gòu)體，370mg)溶解在CHCl3(5mL)中并冷卻至0℃。在另一燒瓶?jī)?nèi)，使I2(146mg)溶解在CHCl3(15mL)中并加入到EP-237的溶液內(nèi)。室溫下2小時(shí)后，除去揮發(fā)物，產(chǎn)物混合物利用硅膠色譜(梯度溶液CHCl3/丙酮)純化。分離出BP-305(反式異構(gòu)體)，其為白色結(jié)晶固體200mg，m.p.137-139℃。純度96.4％(被1.2％的BP-307(HPLC)污染)。通過(guò)柱色譜進(jìn)一步純化(70mg，m.p.146-7℃，純度99.2％HPLC)。
實(shí)施例314-氰基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-(丙炔基氧基丙?；?苯胺，(BP-623)向冷卻至-78℃的丙炔醇(2.59mL，44.5mmol)的溶液內(nèi)滴加存在于乙醚中的甲基鋰(27.8mL，1.6M)的溶液，30分鐘后加入4-氰基-3-三氟甲基-N-[2，3-環(huán)氧-2-甲基丙?；鵠苯胺(4.0g，14.8mmole；按照EP0 100 172的通用方法制備)在THF(40mL)中的溶液。令該溶液達(dá)到室溫，攪拌20小時(shí)并除去揮發(fā)物。殘余物在THF/飽和NaCl水溶液(50mL/50mL)之間分配，減壓下濃縮有機(jī)層得到油，通過(guò)硅膠色譜(CHCl3/丙酮)純化，BP-632產(chǎn)量4.27(88％)。
實(shí)施例324-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[3″-( 125I)碘-反式-2″-丙烯基氧基]丙?；桨?BP-636)；4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[3″-(125I)碘-順式-2″-丙烯基氧基]丙?；桨?BP-637)；4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[偕-二-3″-(125I)碘-2″-丙烯基氧基]丙?；桨?BP-638)A.4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[3″-三丁基甲錫烷基-反式-2″-丙稀基氧基]丙酰基苯胺(BP-633)；4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[3″-三丁基甲錫烷基-順式-2″-丙稀基氧基]丙?；桨?BP-634)；4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[偕-二-三丁基甲錫烷基-2″-丙烯基氧基]丙酰基苯胺(BP-635)向BP-632(2.60g，8.0mmle)在甲苯(30mL)中的溶液內(nèi)加入BuSnH(3.21mL，12.0mmol)和AIBN(1.39g，12.0mmol)。該溶液回流20小時(shí)，除去揮發(fā)物，粗產(chǎn)物在硅膠色譜(CHCl3/丙酮)上純化得到4.07g(89％)的反式、順勢(shì)和偕(gem)異構(gòu)體(BP-633、-634、-635)的8∶1∶1混合物。
B.上面制備的混合物溶解在少量的DMF中。用Na[123]I、Na[125]I或Na[131]I通過(guò)已知方法完成放射性碘標(biāo)記。(參見(jiàn)Hunter和Greenwood，Nature(1962)194495-6)。
實(shí)施例334-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[3″-(125I)碘-反式-2″-丙烯硫基]丙?；桨?BP-552)；4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[3″-(125I)碘-順式-2″-丙烯硫基]丙?；桨?BP-553)；4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[偕-二-3″-(125I)碘-2″-丙烯硫基]丙?；桨?BP-554)；A.在-78℃下將丙炔硫醇的溶液(100mL，0.13M THF/CH2Cl2溶液；按照Castro，J.等Synthesis 1977，518制備)加入到NaH(0.52g，13.0mmle，60％，油中)在THF(25mL)的混懸液內(nèi)且攪拌1小時(shí)。向該冷卻溶液內(nèi)加入4-氰基-3-三氟甲基-N-[2.3-環(huán)氧-2-甲基丙?；鵠苯胺(3.51g，13.0mmole；按照EP0 100 172通用方法制備)在THF(20mL)中的溶液并在-78℃下攪拌1小時(shí)。令該溶液達(dá)到室溫，攪拌1小時(shí)并除去揮發(fā)物。殘余物在CHCl3/H2O(200mL/200mL)之間分配，減壓下濃縮有機(jī)層至得到油并且通過(guò)硅膠色譜(CH2Cl2)純化，得到1.13g(25％)的BP-548。
B.4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[3″-三丁基甲錫烷基-反式-2″-丙烯硫基]丙?；桨?BP-549)；4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[3″-三丁基甲錫烷基-順式-2″-丙烯硫基]丙?；桨?BP-550)；4-氰基-3-三氟甲基-N-[2′-羥基-2′-甲基-3′-[偕-2″-二-三丁基甲錫烷基-2″-丙烯硫基]丙酰基苯胺(BP-551)將BP-548(1.03g，30mmol)溶解在1，4-二烷(15mL)和甲苯(30mL)中。加入BU3SnH(1.21mL，4.5mmol)和AIBN(0.52g，4.5mmol)，將該反應(yīng)混合物加熱回流12小時(shí)。除去揮發(fā)物，粗產(chǎn)物在硅膠色譜(CHCl3)上純化得到0.78g(44％)的偕、順式和反式異構(gòu)體(分別是BP-551、-550和-549)的5∶3∶2混合物。
C.將BP-549、-550和-551的混合物溶解在少量的DMF中。用Na[123]I、Na[125]I或Na[131]I通過(guò)已知方法完成放射性碘標(biāo)記(參見(jiàn)Hunter和Greenwood，Nature(1962)194495-6)。
在38℃下測(cè)試化合物在人血清中的穩(wěn)定性。將它們?nèi)苡诋惐?H2O(95∶5)，與人血清混合達(dá)到濃度為0.5mg/mL，并且在38℃下溫育。血清等分試樣用乙酸乙酯提取并通過(guò)HPLC分析。在化合物BP-521、BP-668和BP-673的加速穩(wěn)定性研究中，配制在異丙醇/H2O(95∶5)中并在50℃下溫育，經(jīng)過(guò)HPLC分析在長(zhǎng)達(dá)6天內(nèi)觀察到?jīng)]有變化。
表1在38℃下溫育后人血清中保留的完整化合物的百分比化合物6小時(shí) 24小時(shí) 48小時(shí) 6天BP-52 1 97.5 90.0 84.0 60.0BP-668- 100 100 100BP-673- 100 100 100可以看出，含有脂族全氟碳的化合物由于全氟酰胺的水解而具有有限的穩(wěn)定性，釋放出游離胺，BP-34(實(shí)施例1)和全氟碳部分?；衔顱P-673(二聚體類(lèi))和BP-668還是穩(wěn)定的。
將足夠穩(wěn)定的化合物溶解在EtOH/DMSO中且與人前列腺癌細(xì)胞LNCaP一起溫育，其含有突變最小的AR。72小時(shí)后，進(jìn)行顯示細(xì)胞存活力的XXT試驗(yàn)(Scudievo等，Cancer Research，484827(1988))。表2顯示了消滅50％細(xì)胞存活力所需要的最低藥物濃度。
表2對(duì)細(xì)胞存活力的影響化合物 摩爾濃度比卡魯胺 7.0 H 10-5羥基氟他胺 5.0 H 10-5BP-34 ＜1 H 10-4BP-443 5.5 H 10-6BP-463 5.5 H 10-5BP-483 6.25 H 10-6BP-521 5.6 H 10-6BP-546 4 H 10-6BP-668 1.5 H 10-5BP-673 2.7 H 10-5BP-676 1.4 H 10-5BP-713 1 H 10-5
通過(guò)用LNCaP細(xì)胞培養(yǎng)研究化合物與AR之間的相互作用，隨后裂解細(xì)胞并進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)印跡分析。表3顯示細(xì)胞在與試驗(yàn)化合物一起溫育48小時(shí)后溶胞產(chǎn)物中含有的殘留AR的百分比。
表3通過(guò)蛋白質(zhì)印跡法測(cè)定的保留在人前列腺癌細(xì)胞LNCaP中的雄激素受體的百分比化合物 3μM摩爾濃度 10μM摩爾濃度BP-34 9798BP-52 380BP-668 730BP-673 743BP-676 6420BP-713 503BP-735 451BP-754 2814比卡魯胺9789羥基氟他胺 9894可以看出，通過(guò)XXT試驗(yàn)，不是所有對(duì)LNCaP細(xì)胞具有強(qiáng)抑制作用的化合物也在抑制AR中具有相應(yīng)的活性。雖然對(duì)照抗雄激素，即羥基氟他胺和比卡魯胺，對(duì)于AR沒(méi)有任何顯著作用，發(fā)現(xiàn)化合物BP-521，BP-673、BP-668、BP-713和BP-735的化合物在3μM濃度下具有重要的抑制作用。這些化合物實(shí)際上在10μM的濃度下能夠消除AR。
游離胺，BP-34，是BP-521的組合物的產(chǎn)物，其對(duì)AR沒(méi)有影響，而且對(duì)LNCaP細(xì)胞也沒(méi)有作用。
BP-521的生物利用度結(jié)果如表4所示。
表4BP-521的生物利用度

可以看出只有一部分的劑量在經(jīng)口服、i.p.(腹膜內(nèi))和i.m.(肌肉內(nèi))給藥后全身性利用，與報(bào)告的比卡魯胺的0.03％相比(Cockshott I.D.，等，EurUrol.1990，Vol 18，Suppl.310-17)，口服試驗(yàn)中的血清峰水平是注射劑量的0.0052％。BP-521的生物利用度在皮下、肌肉和腹膜內(nèi)的空間中也很低。
當(dāng)給完整大鼠皮下給予100mg/kg的BP-52110次時(shí)，其前列腺和精囊的平均重量減小約46％。另一方面，0.1mg/kg劑量的BP-521和BP-668在補(bǔ)充丙酸睪酮的閹割大鼠中沒(méi)有減小次級(jí)性器官重量，而0.5mg/kg的卡比魯胺時(shí)其減小了約20％。(0.1mg/kg的劑量約是預(yù)期用于人的局部日劑量)。
局部吸收作用是在大鼠中進(jìn)行，在所述大鼠的20cm2的剃毛皮膚表面內(nèi)每天用0.5mL的10％BP-521在50/50 PEG 400/EtOH中的溶液處理共2次。通過(guò)HPLC發(fā)現(xiàn)沒(méi)有吸收作用，同時(shí)檢測(cè)的校準(zhǔn)靈敏度是5納克。
全身性毒性定向通過(guò)在小鼠內(nèi)每2天腹膜內(nèi)注射來(lái)評(píng)估。BP-521，200mg/kg bw給藥5次，沒(méi)有死亡率或致病率，而且致病率而不是死亡率可以在350mg/kg bw觀察到。對(duì)于BP-34，相應(yīng)的值是150mg/kg bw和300mg/kg bw。
在對(duì)三名男性志愿者的定向試驗(yàn)中，在感染頭皮涂覆0.5mL的1％BP-521在乙醇中的溶液，每天兩次，有效制止額線處的初期雄激素性脫發(fā)并且在8周后，使頭發(fā)大量生長(zhǎng)。
可以推斷出，由于全身性毒性低和缺乏經(jīng)皮吸收作用，一般低生物利用度適用于治療其中低生物降解性是有益的皮膚疾病，產(chǎn)生的游離胺BP-34，不具有抗雄激素活性，并且其他分解產(chǎn)物，全氟丁酸，具有低毒性(Takagi A.，等.Cancer Letters.1991，57，5755-60)。
含有非放射性碘的試驗(yàn)化合物(BP-554、-636和-305)與對(duì)照相比與AR相互作用。這些化合物用水中含有乙醇、DMSO、吐溫和葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)配制并且靜脈內(nèi)注射到300g的雄性大鼠中。4小時(shí)后處死大鼠并測(cè)定不同器官內(nèi)和血液內(nèi)的試驗(yàn)物質(zhì)相對(duì)于前列腺水平的含量。在被分析的其他組織相比較前列腺中的蓄積非常明顯。如美國(guó)專(zhuān)利5,656,651所述，主題化合物可以用來(lái)全身掃描來(lái)描述前列腺癌和轉(zhuǎn)移瘤。
實(shí)施例344-硝基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3 ′-N-(三氟甲基氨基)丙?；?苯胺(BP-766)在N2下在5℃下攪拌BP-34(500g，1.63mol)、乙酸乙酯(2.0L)和三乙胺(295mL，2.12mol)。加入三氟乙酸酐(299ml，2.12mol)，室溫下攪拌30分鐘，隨后用1N鹽酸(1.0L)、飽和碳酸氫鹽水溶液(2×2.0L)和鹽水(1.0L)洗滌。用MgSO4處理后，蒸發(fā)溶劑，純化殘余物(參見(jiàn)圖1)。
1H NMR(DMSO-d6，500MHz)δ10.56(s1ArONHC(O))；δ9.31t，NHC(O)CF3).3F NMR(DMSO-d6，470Mhz)δ-58.4(s1 ArCF3)；δ-73.4(s1C(O)CF3)。質(zhì)譜(m/z)426(MNa+)。
配制的BP-766的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性通過(guò)在55℃下溫育配制的BP-766溶液(參見(jiàn)圖2)進(jìn)行模擬架子儲(chǔ)藏的加速穩(wěn)定性試驗(yàn)并且與在室溫下儲(chǔ)藏比較。通過(guò)HPLC發(fā)現(xiàn)，存在于97％異丙醇或乙醇∶水(60∶40)中的BP-766在55℃和室溫下溫育后表現(xiàn)出很小的變化，試驗(yàn)進(jìn)行6天(表5)。一般地說(shuō)，這相當(dāng)于在室溫下一年。此后BP-766在50℃下于無(wú)水異丙醇中溫育8周，觀察是否能夠在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持穩(wěn)定。表6給出BP-766在無(wú)水異丙醇中的穩(wěn)定性。50℃下8周后等于室溫(20℃)下5年，利用藥物的平均活性系數(shù)發(fā)現(xiàn)沒(méi)有明顯的分解現(xiàn)象(Connors，Kenneth A.；Amidon，gordon L.；Stella，Valentino J.ChemicalStability of Pharmaceuticals--A Handbook for Pharmacists.第二版，1986版權(quán)，John Willey&Sons，Inc.)。
表5 配制的BP-766的加速儲(chǔ)藏/穩(wěn)定性

表6 在無(wú)水異丙醇中配制的加速儲(chǔ)藏/穩(wěn)定性

BP-766對(duì)雄激素受體的作用BP-766與AR的相互作用可以通過(guò)與LNCaP細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)研究，已知該細(xì)胞含有人AR后細(xì)胞溶解產(chǎn)物，并且利用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)印跡試驗(yàn)鑒定和定量分析AR蛋白質(zhì)。下表7給出在細(xì)胞與BP-766一起溫育16、24和48小時(shí)后溶胞產(chǎn)物中所含的殘留AR的百分比與生物降解BP-34的副產(chǎn)物的關(guān)系。另外，作為對(duì)照，使用標(biāo)準(zhǔn)全身性抗雄激素，比卡魯胺和羥基氟他胺。
表7通過(guò)蛋白質(zhì)印跡殘留在LNCaP中的雄激素受體百分比

全身性抗雄激素，羥基氟他胺和卡比魯胺，沒(méi)有表現(xiàn)出對(duì)AR任何顯著的抑制作用，然而，在BP-766的3和10μM濃度下發(fā)現(xiàn)重要的抑制作用。BP-766實(shí)際上使AR降低到10μM濃度。
BP-34對(duì)AR沒(méi)有影響。
兔中的皮膚吸收和刺激作用的研究為了模擬人體涂覆(0.6mg/kg-天)，在4只兔子的兩個(gè)獨(dú)立的緊鄰剃毛皮膚的區(qū)域上每天將BP-766局部涂覆2次，進(jìn)行10天。在第一次涂覆后2、5和21小時(shí)時(shí)收集血清樣品，并且此后每隔一天進(jìn)行1次。處理血清樣品并且通過(guò)HPLC分析。利用粗短刺狀和空白血清樣品和線性測(cè)定，我們測(cè)定BP-766和/或BP-34的檢測(cè)限約為10ng/ml。再任何樣本中都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)BP-766或BP-34。已知兔的皮膚吸收作用比人體高約5-6倍(Marzulli，F(xiàn).N.& Maibach，HI Dermatotoxicology，第5版，Taylor &Frasier，Washington，D.C.1966)，從而我們?cè)诳紤]這種方法的檢測(cè)限時(shí)，在最壞情況下在人體血清中也只能發(fā)現(xiàn)痕量。
每天還可以觀察兔子的皮膚刺激情況。在試驗(yàn)的整個(gè)過(guò)程中沒(méi)有觀察到刺激的征兆。
BP-766在人體血清中的生物降解作用在38℃下測(cè)定人體血清內(nèi)濃度為0.5mg/mL的BP-766時(shí)的生物降解性，并且在38℃下溫育。在體溫下培養(yǎng)后，隨時(shí)間通過(guò)HPLC發(fā)現(xiàn)的血清內(nèi)完整化合物的百分比報(bào)導(dǎo)在表8中且繪制在圖5內(nèi)。顯然，由于意想不到的原因局部BP-766被再吸收，應(yīng)該希望迅速分解成為可排泄無(wú)毒成分。BP-766的生物降解的唯一產(chǎn)物是BP-34，和三氟乙酸，其似乎具有低毒性。所以，三氟乙酸在給予小鼠時(shí)沒(méi)有表現(xiàn)出毒性。(Permadi，H.；Lundgren，B.；Andersson，K.；Sundberg，C.；Depierre，J.W.全氟脂肪酸對(duì)小鼠肝中過(guò)氧物酶體增殖和線粒體大小的作用劑量和時(shí)間因素和鏈長(zhǎng)的作用，Xenobiotica，91993，vol.23，no.7，pp 761-70)。BP-766、BP-34和三氟乙酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖2-4所示。
表8BP-766在人血清中的生物降解性；殘留BP-766的百分比與時(shí)間的關(guān)系時(shí)間BP-766％(小時(shí)) 人體血清(38℃)0 1006 54.334 10.948 痕量BP-766的全身性毒性通過(guò)多次腹膜內(nèi)注射到小鼠內(nèi)定向評(píng)估BP-766的全身性毒性。每天注射BP-766共7天，每次劑量為300-500mg/kg bw。BP-766的LD50(導(dǎo)致50％死亡率7天的日劑量)評(píng)估為450mg/kg bw。所以最大耐受劑量應(yīng)該約為300mg/kg。對(duì)于BP-34，100-300mg/kg的腹膜內(nèi)注射在小鼠中沒(méi)有導(dǎo)致死亡。觀察致病而不是死亡的劑量為300mg/kg。所以，BP-34的最大耐受劑量應(yīng)該約250mg/kg。
小鼠和大鼠急性口服毒性BP-766制劑的口服毒性是在NMRI小鼠和Wistar大鼠中進(jìn)行測(cè)定。通過(guò)幾率分析計(jì)算出LD50，并且在各劑量下(1500、2000和2500mg/kg)用5只小鼠或大鼠試驗(yàn)。
雄性和雌性NMRI小鼠中BP-766的LD50分別計(jì)算出是2871.7mg/kg和2232.0mg/kg。在雄性和雌性Wistar大鼠中BP-766的LD50無(wú)法測(cè)定，因?yàn)橹挥幸恢恍坌源笫笏劳?在1500mg/kg的劑量下)，并且沒(méi)有雌性大鼠死亡。所以，在大鼠中BP-766的LD50比試驗(yàn)的最高劑量高很多，即2500mg/kg體重。
BP-766在脫發(fā)治療中的功效的試驗(yàn)性觀察在6名患有雄激素排放和脫發(fā)的志愿者中試驗(yàn)BP-766。在6名(4名男性，2名女性)志愿者中將BP-766直接涂覆在皮膚上(在細(xì)發(fā)線后)，其為在無(wú)水異丙醇中的2％溶液，每次涂覆1ml，每天2次(0.6mg/kg)共8周；在所有志愿者中觀察到?jīng)]有皮膚刺激作用。初步的結(jié)果顯示，BP-766在2周后在所有6名志愿者中是額發(fā)線的排放終止。使用4個(gè)月后，觀察到兩名志愿者出現(xiàn)頭發(fā)明顯的再生。
結(jié)論可以得出結(jié)論，由于沒(méi)有局部毒性、沒(méi)有全身性吸收作用，和生物降解性，BP-766適合需要抗雄激素的皮膚疾病的治療。
從上述結(jié)果明顯看出，提供了有效治療與雄激素受體有關(guān)的適應(yīng)癥的化合物，例如雄激素依賴(lài)性腫瘤，和皮膚雄激素介導(dǎo)的疾病，例如痤瘡、多毛癥和雄激素性脫發(fā)。除了具有細(xì)胞毒性和細(xì)胞抑制活性以外，證實(shí)一些此類(lèi)化合物具有雄激素受體抑制作用。對(duì)于局部治療，提供了具有低再吸收作用的化合物。
雖然本發(fā)明通過(guò)說(shuō)明和實(shí)施例詳細(xì)描述，但目的在于更清楚理解。顯然，在所附權(quán)利要求書(shū)的范圍內(nèi)可以進(jìn)行某些變化和改進(jìn)。在此引用的所有參考文獻(xiàn)在此引入作為參考，如果是全文也引入。
權(quán)利要求
1.一種具有式4-硝基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-N-(三氟甲基酰氨基)丙?；?苯胺的化合物。
2.一種藥物制劑，含有一種具有式4-硝基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-N-(三氟甲基酰氨基)丙酰基)苯胺的化合物；和藥學(xué)可接受載體。
3.一種制備具有式4-硝基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-N-(三氟甲基酰氨基)丙?；?苯胺的化合物的方法，包括制備三乙胺、乙酸乙酯和4-硝基-3-三氟甲基-N-(2-羥基-2-甲基-3-氨基-丙?；?苯胺的混合物；向該混合物加入三氟乙酸酐；將該混合物混合約1/2小時(shí)；用稀鹽酸、飽和碳酸氫鹽水溶液和鹽水洗滌該混合物；用MgSO4處理該混合物；從該混合物蒸發(fā)乙酸乙酯得到殘余物；和純化該殘余物。
4.用作藥物的具有式4-硝基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-N-(三氟甲基酰氨基)丙?；?苯胺的物質(zhì)或組合物。
5.含有式4-硝基-3-三氰甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-N-(三氟甲基酰氨基)丙?；?苯胺的物質(zhì)或組合物在制備用于治療脫發(fā)的治療應(yīng)用的藥物中的用途。
6.含有式4-硝基-3-三氟甲基-N-(2′-羥基-2′-甲基-3′-N-(三氟甲基酰氨基)丙?；?苯胺的物質(zhì)或組合物在制備用于治療雄激素性排放和脫發(fā)的治療應(yīng)用的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供含有乙內(nèi)酰脲、脲或2－羥基、2－甲基丙?；娜〈交彼幔涠垠w和其烷基、多氟酰氨基和鹵代芳基氨基衍生物，以及其放射標(biāo)記衍生物。所述的化合物特異性地結(jié)合雄激素受體并且發(fā)現(xiàn)可用于與雄激素受體有關(guān)的適應(yīng)癥，例如依賴(lài)于雄激素的細(xì)胞增殖、多毛癥、痤瘡和雄激素脫發(fā)。
文檔編號(hào)C07C275/30GK1416416SQ01806445
公開(kāi)日2003年5月7日 申請(qǐng)日期2001年2月9日 優(yōu)先權(quán)日2000年2月11日
發(fā)明者米洛斯·索瓦克, 艾倫·塞利格森, 詹姆斯·G·道格拉斯第三, 賈森·W·布朗, 布賴(lài)恩·坎皮恩 申請(qǐng)人:生物物理公司