一種茄果類蔬菜專用的生物有機肥的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種茄果類蔬菜專用生物有機肥，其通過將粉碎的秸稈與牛糞或雞糞作為發(fā)酵有機物料，添加5‰比例的有機物料腐熟劑并加適量的水，與有機物料均勻混合，控制含水量為60％左右，自然室外溫度下發(fā)酵腐熟5?10天形成初肥。再添加各類營養(yǎng)元素與發(fā)酵物料混合均勻后，添加4‰比例的促生長復合菌劑均勻混合后造?；虺煞郢@得的生物肥料。本發(fā)明解決了單純施用化肥、普通有機肥、農(nóng)家肥以及純微生物菌肥所存在的種種弊端，并充分結合了茄果類蔬菜各個時期的生長特點及對養(yǎng)分的需求，注意調(diào)節(jié)其營養(yǎng)生長與生殖生長的矛盾，是一種尤其適用于茄果類蔬菜生長、高效、優(yōu)質(zhì)的生物有機菌肥。在茄果類蔬菜生產(chǎn)種植方面具有較大的應用前景。
【專利說明】
一種茄果類蔬菜專用的生物有機肥的制備方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種生物有機肥及其制備方法，尤其適用于茄果類蔬菜，屬于農(nóng)業(yè)生 物有機肥制備的技術領域。
【背景技術】
[0002] 目前我國化肥年使用量在一億三千萬噸左右，廣大農(nóng)民一直以來都是使用化肥， 然而長期使用化肥產(chǎn)生的弊端隨之而來，土地板結、化學元素殘留、環(huán)境污染等等一系列問 題浮出水面?；室呀?jīng)不能滿足可持續(xù)發(fā)展的需要，更不能成為綠色農(nóng)業(yè)的支柱，各國都在 尋找對策。生物有機肥就此而誕生，成為化肥的第二次革命，生物有機菌肥是農(nóng)業(yè)發(fā)展最有 希望、最有前途的不可替代的產(chǎn)品。中央電視二臺已對其作了大量的介紹和報道，目前正由 國家科委牽頭，國家技術監(jiān)督局參與進行，而對這樣的情況如何擴大產(chǎn)量，如何盡快將它推 廣到世界各地，造福人類是擺在我們面前的重要問題。生物有機肥是指特定功能微生物與 主要以動植物殘體(如畜禽糞便、農(nóng)作物秸桿等)為來源并經(jīng)無害化處理、腐熟的有機物料 復合而成的一類兼具微生物肥料和有機肥效應的肥料。
[0003] 而茄果類蔬菜是一類以食用鮮嫩果實為主、生長周期相對較長的蔬菜，主要包括 番茄、茄子、辣椒等。這類蔬菜共同特點是邊現(xiàn)蕾，邊開花，邊結果。因此在生產(chǎn)上要注意調(diào) 節(jié)其營養(yǎng)生長與生殖生長的矛盾，才能獲得好收成。茄果類蔬菜在幼苗期需要N肥多一些， 到成苗時對N、P的需求量要相對多些，這時氮肥一定不要過多否則會過于長枝葉，花期需要 P肥多些，可促進開更多的花，收獲更多的果實。茄果類蔬菜的花芽分化都是在苗床上進行 的，所以育苗土要求全營養(yǎng)，一定要有豐富的氮、磷、鉀和有機質(zhì)，還要有適當?shù)闹形⒘吭?素。同時由于它們生長期長，所以要求養(yǎng)分釋放期長，以免后期脫肥。要解決上述問題就要 改變現(xiàn)有的生產(chǎn)模式，從而使養(yǎng)分釋放符合茄果類蔬菜養(yǎng)分吸收要求。隨著科學的發(fā)展，生 物有機肥在農(nóng)業(yè)中的作用漸漸顯露出來。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的問題是避免單純施用化肥、普通有機肥、農(nóng)家肥以及純微生物 菌肥所存在的種種弊端，利用微生物技術，選配具有特定腐熟功能的菌種制成菌劑，用此菌 劑將固體有機物料發(fā)酵成初肥，再按適宜的比例添加各類營養(yǎng)元素，再配以各類營養(yǎng)元素 及功效相應的促進茄果類蔬菜生長的復合菌劑所制成的生物有機肥，并將其應用于茄果類 蔬菜作物的種植中。通過各菌種之間的相互作用，起到刺激植物生長、緩解土地板結、改良 土壤生態(tài)環(huán)境、防病抗病等作用，從而達到增產(chǎn)、高產(chǎn)的目的。
[0005] 本發(fā)明產(chǎn)品所選用腐熟菌劑，其采用枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis) CICC10088,米曲霉（Aspergillus niger)CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414等具有特殊腐熟功效的菌種，按適當?shù)谋壤龔秃习l(fā)酵而成的微 生物菌劑。所選用各菌種均能夠產(chǎn)生纖維素酶、木質(zhì)素酶、半纖維素酶、蠟質(zhì)素酶、果膠酶等 多種生物酶，通過中溫菌和耐高溫菌的協(xié)同作用，快速將各類廢棄的有機物料發(fā)酵腐熟成 肥料，變廢為寶，節(jié)省資源，大大減少了環(huán)境污染。
[0006] 本發(fā)明所選用茄果類專用的促生長復合菌劑，其含有大量的對茄果類蔬菜生長發(fā) 育有特殊功效的有益微生物，其采用膠質(zhì)芽孢桿菌（Baci Ilus muci laginosus)CGMCC 1.153,褐色球形固氣菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1.142,巨大芽抱桿菌 (Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱桿菌（Bacillus subtilis)ACCC 01183等菌 種發(fā)酵液混合后作為混合菌劑，經(jīng)再次發(fā)酵而制備的微生物復合菌劑。本發(fā)明選取各菌種 是經(jīng)查閱大量的文獻資料，進行研究總結，根據(jù)實際要求選擇幾種針對茄果類蔬菜生長發(fā) 育有特殊功效的有益微生物，然后通過實際反復實驗，最后確定各微生物的最佳比例，從而 保證茄果類蔬菜各階段的營養(yǎng)需求。
[0007] 具體的本發(fā)明所述茄果類蔬菜專用的生物有機肥的制備方法，該方法包括如下步 驟：
[0008] (一)有機物料腐熟劑的制備
[0009] 將菌種數(shù)量分別達到IO8個/mL以上的枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis) CICC10088,米曲霉（Aspergillus niger)CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌種發(fā)酵液按1.5~2.0:0.8~1.3:0.8~1.3的比例混合均勾 后，接種于盛有復合菌劑培養(yǎng)基A的發(fā)酵罐中，接種量為復合菌劑培養(yǎng)基A總體積的5%，復 合菌劑培養(yǎng)基A的pH 6.0~8.0，30°C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中總菌數(shù)達到IO8個/mL，即得 到有機物料腐熟劑；
[0010] 所述復合菌劑培養(yǎng)基A配方為：玉米面0.5~1.5g/L、玉米秸桿粉15~17g/L、麩皮 0 · 2~0 · 4g/L、_a餅粉0 · 2~0 · 4g/L、4mL/100mL Vogel ' s母液，pH值6 · 0~8 · 0;
[0011] 步驟(一)的具體制備過程為：
[0012] 1.菌種活化:將所述各菌種接于斜面培養(yǎng)基上;枯草芽孢桿菌28~32°C，pH為7.2 ~7.4,培養(yǎng)時間為1~3天;米曲霉培養(yǎng)溫度25~28°C，pH為6.0~6.5,培養(yǎng)時間為4~7天； 白腐菌培養(yǎng)溫度25~28°C，培養(yǎng)時間為4~7天；
[0013] 2.-級菌種培養(yǎng):將所述菌種分別接種于盛有液體培養(yǎng)基的50mL錐形瓶中，培養(yǎng) 基pH為6.0~8.0，錐形瓶放入搖床振蕩培養(yǎng)，溫度為30°C，振蕩24~48h;采用血球計數(shù)板計 數(shù)，菌液中菌種數(shù)量分別達到IO8個/mL;
[0014] 3.二級發(fā)酵:將所述菌種分別接種于盛有液體培養(yǎng)基的1000 mL錐形瓶中，培養(yǎng)基 pH6.0~8.0，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;從而獲得菌種數(shù)量分別達到IO8個/ mL以上的枯草芽抱桿菌（BacilIus subtiIis)CICC10088，米曲霉（AspergilIus niger) CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414。
[0015] 所述斜面培養(yǎng)基配方為：
[0016] 1.枯草芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:牛肉浸液1.0L，蛋白胨IOg，NaC15.Og， 瓊脂20.0-20.5g，PH7.2-7.4，牛肉浸液的制備：瘦牛肉洗凈，切碎，稱取550g浸泡于1375mL 水中，浸泡一夜，過濾，過濾分裝后〇.6kgf/cm2 40min備用。
[0017] 2.米曲霉采用的斜面培養(yǎng)基配方為：5 OBe麥芽汁瓊脂，5 OBe麥芽汁1.0L，瓊脂 15 .OgdSPH0
[0018] 3.白腐菌的斜面培養(yǎng)基配方為:PDA培養(yǎng)基，取去皮的馬鈴薯200克，切成小塊，加 水1000毫升煮沸30分鐘濾去馬鈴薯塊，將濾液補足至1000毫升，加葡萄糖20克，瓊脂15克， 溶化后分裝，15鎊滅菌30分鐘；自然PH。
[0019]所述液體培養(yǎng)基為斜面培養(yǎng)基不加瓊脂即可。
[0020](二)混拌、發(fā)酵
[0021] 將步驟(一）制備好的有機物料腐熟劑按發(fā)酵物料總質(zhì)量的5%。比例混合，再兌入 適量的水，使總水分控制在60 %左右，在發(fā)酵池經(jīng)過5-10天發(fā)酵，即制得初肥；
[0022] 所述發(fā)酵具體為:將混合攪拌均勻的發(fā)酵物料放進發(fā)酵設施，壓實填滿排去空氣， 發(fā)酵池頂部覆蓋一層塑料薄膜，上蓋密封發(fā)酵、適時翻垛，翻堆時補充水分，將總水分控制 在60%左右，原料手握成團，指縫有水但不滴，而松手即散為好。
[0023] 在優(yōu)選的技術方案中，步驟(二）的發(fā)酵時間是指:一般夏天4-5天，春秋6-7天，冬 季10天。
[0024](三)深加工
[0025] 將初肥進行粉碎、烘干，按初肥質(zhì)量百分比，具體添加如下營養(yǎng)元素：
[0026] 氮2.5~3.5%、磷0.8~1.5%、鉀5.0~7.0%;鈣1.5~2.0%、鎂 1.0~1.5% ;硼 0.05~0.1 %;腐植酸類肥料5.0~10.0%;
[0027] 優(yōu)選情況下，添加營養(yǎng)元素的比例為：
[0028] a.大量元素(氮、磷、鉀)的添加比例:氮3.0%、磷1.1%、鉀6.0%;
[0029] b.中量元素(鈣、鎂)的添加比例:媽1.8%、鎂1 · 2% ;
[0030] c ·微量元素（硼）的添加比例：0 · 08% ;
[0031] d.腐植酸銨的添加比例:5.0%。
[0032] (四）茄果類蔬菜專用促生長復合菌劑的制備
[0033] 將菌種數(shù)量分別達到IO8個/mL以上的膠質(zhì)芽孢桿菌(BaciIlus muciIaginosus) CGMCCl · 153，褐色球形固氣菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1 · 142，巨大芽抱桿菌 (Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183的菌 種發(fā)酵液，按(30~40% ): (10~20% ): (30~40% ): (5~10% )的比例混合均勻后作為混合 菌劑，接種于盛有復合菌劑培養(yǎng)基B的發(fā)酵罐中，接種量為復合菌劑培養(yǎng)基B總體積的5%， 復合菌劑培養(yǎng)基B的pH 6.5~7.5，30°C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中總菌數(shù)達到6~10 X IO8 個/mL，即得到茄果類蔬菜專用微生物復合菌劑，pH為6.8，總有效活菌數(shù)為9 X IO8個/mL; [0034] 所述復合菌劑培養(yǎng)基B的配方為：玉米粉15~18g/100mL、豆栢粉5~8g/100mL、酵 母膏0· 1 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP〇4 0.5~2g/100mL、MgS〇4 · 7H20 0.001~0.028/10011^、似(：10.5~0.88/10011^、（順4)2304 0.001~0.018/10011^，其余為蒸 餾水；
[0035]所述步驟（四）的具體過程如下：
[0036] 1.接種:將所述各菌種(膠質(zhì)芽孢桿菌、褐色球形固氮菌、巨大芽孢桿菌、枯草芽孢 桿菌)分別接于斜面培養(yǎng)基上;膠質(zhì)芽孢桿菌(鉀細菌)培養(yǎng)溫度25~35 °C，pH為7.5~8.0， 培養(yǎng)時間為5天;褐色球形固氮菌培養(yǎng)溫度25~30°C，pH為7.0~8.0，培養(yǎng)時間為5天；巨大 芽孢桿菌為27~37°C，pH為6.5~7.5，培養(yǎng)時間為4天;枯草芽孢桿菌培養(yǎng)溫度27~37°(：，？!1 為6.5~7.5,培養(yǎng)時間為4天；
[0037] 2.-級菌種培養(yǎng):將所述步驟1制備的菌種分別按接種環(huán)一環(huán)的量接種于盛有相 應液體培養(yǎng)基的50mL錐形瓶中，培養(yǎng)基pH為6.5~7.5，錐形瓶放入搖床振蕩，溫度為30°C， 振蕩24~48h;采用血球計數(shù)板計數(shù)，菌液中菌種數(shù)量分別達到IO8個/mL;
[0038] 3.二級發(fā)酵:將所述步驟2制備的菌種分別按5%接種于盛有液體培養(yǎng)基的1000 mL 錐形瓶中，培養(yǎng)基pH 6.5~7.5，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;使菌種數(shù)量分別 達到IO8個/mL以上，從而制得菌種數(shù)量分別達到IO8個/mL以上的膠質(zhì)芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1.153,褐色球形固氮菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1.142， 巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis) ACCC 01183的菌種發(fā)酵液。
[0039]所述茄果類蔬菜微生物復合菌劑制備過程中用到的斜面培養(yǎng)基配方為：
[0040] 1.膠質(zhì)芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:KH2P04 0.06g、MgS04 · 7H20 0.05g、
[0041 ] CaS04 · 5H20 0.004g、蛋白胨5g、玉米楽_(50%干重）2.5g、乳糖 15g、NaCl 4g、蒸餾 水1000 mU瓊脂25g、pH 7.1;
[0042] 2.褐色球形固氮菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為：KH2P04 0.2g、K2HP04 0.8g、 MgS04 · 7H20 0.2g、CaS04 · 2H20 0.1g、Na2Mo04 · 2H20微量、酵母膏0.5g、甘露醇20g、 FeC13微量、瓊脂 15g、蒸餾水1000 mUpH 7.2;
[0043] 3.巨大芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為：牛肉膏3g、蛋白胨5g、瓊脂15g、NaCl 5g、蒸饋水 1000mL、pH 7.0;
[0044] 4.枯草芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:牛肉膏10g、蛋白胨10g、NaCl 5g、葡萄 糖 10g，瓊脂15g，蒸餾水1000 mUpH 7.0;
[0045] 所述液體培養(yǎng)基配方為斜面培養(yǎng)基不加瓊脂制得。
[0046](五）按步驟(三)深加工所獲得的發(fā)酵物料總質(zhì)量的3~5%。比例添加步驟（四）獲 得的茄果類蔬菜專用的促生長復合菌劑獲得終產(chǎn)品，將物料混合均勻后，經(jīng)造粒機造?；?成粉，檢測合格后，包裝入庫。
[0047]對于上述技術方案，在優(yōu)選的情況下，步驟(一)所述復合菌劑培養(yǎng)基A配方為：玉 米面0 · 5g/L、玉米猜桿粉 15g/L、麩皮0 · 25g/L、豆餅粉0 · 25g/L、4mL/100mL Vogel ' s母液，pH 8.5〇
[0048]對于上述技術方案，在優(yōu)選的情況下，步驟（一）所述枯草芽孢桿菌（Bacillus subtil is )CICC10088，米曲霉（Aspergi Ilus n iger)CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌種發(fā)酵液按2:1:1的比例混合均勾。
[0049]對于上述技術方案，在優(yōu)選的情況下，步驟(二)所述發(fā)酵有機物料為粉碎的玉米 秸桿與動物糞便按1~2:0.5~2質(zhì)量比混合，所述動物糞便通常為雞糞或牛糞。
[0050] 對于上述技術方案，在優(yōu)選的情況下，步驟(三)所述復合菌劑培養(yǎng)基B的配方為： 玉米粉 16g/100mL、豆栢粉7g/100mL、酵母膏0· lg/100mL、KH2P04 lg/100mL、K2HP〇4lg/ 100mL、MgS〇4.7H20 0.01g/100mL、NaCl 0.6g/100mL、（NH4)2S〇4 0.01g/100mL，其余為蒸餾 水。
[0051] 本發(fā)明的技術方案是經(jīng)過近幾年的不懈努力，結合茄果類蔬菜各個時期的生長特 點及對養(yǎng)分的需求，注意調(diào)節(jié)其營養(yǎng)生長與生殖生長的矛盾，最終研制出一種高效優(yōu)質(zhì)的 生物有機肥。其綜合運用了微生物技術、化肥工業(yè)和農(nóng)業(yè)技術等最新成果，優(yōu)先制備了一種 高效的富含有機質(zhì)、N · P · K營養(yǎng)元素和某些微量元素、植物生長調(diào)節(jié)劑等物質(zhì)有機結合起 來，由特定工藝最終形成了以有機質(zhì)為主體的營養(yǎng)合理、N · P · K比例適當?shù)念w粒狀營養(yǎng) 源。該種肥料不僅具有高利用率、肥效期長的優(yōu)點，而且具有改良土壤、提高農(nóng)作物品質(zhì)，增 強作物抗逆性，增加產(chǎn)量，減少污染，刺激作物生長發(fā)育等特點，省時省工，具有良好的社會 效益和經(jīng)濟效益。
[0052]有益效果
[0053]本發(fā)明所述的茄果類蔬菜專用的生物有機肥是選用具有特定具有腐熟功能的菌 種制成菌劑，用此菌劑將有機固體物料發(fā)酵腐熟成初肥，再按適宜的比例添加大量元素 (氮、磷、鉀）、微量元素(鈣、鎂)及其他特殊物質(zhì)，再配以功效相應的促進茄果類蔬菜生長的 菌劑所制成的肥料。腐熟劑中含有大量的枯草芽孢桿菌、米曲霉、白腐菌等菌種，能夠產(chǎn)生 纖維素酶、木質(zhì)素酶、半纖維素酶、蠟質(zhì)素酶、果膠酶等多種生物酶，通過中溫菌和耐高溫菌 的協(xié)同作用，快速將各類廢棄的固體有機物料發(fā)酵腐熟成肥料，變廢為寶，節(jié)省資源，大大 減少了環(huán)境污染;又添加各類營養(yǎng)元素及茄果類蔬菜專用的促生長菌劑，通過對茄果蔬菜 有特殊功效的有益微生物膠質(zhì)芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌及圓褐固氮菌等各 菌種之間的相互作用，起到刺激植物生長、緩解土地板結、改良土壤生態(tài)環(huán)境、增加土壤的 腐殖質(zhì)及有益微生物菌群、防病抗病等作用，從而達到增產(chǎn)、高產(chǎn)的目的。
【具體實施方式】
[0054]本發(fā)明的下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本發(fā) 明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實施例中所用的生物材料均可以由商業(yè)途徑獲得。
[0055] 實施例一:茄果類蔬菜專用生物有機肥的制備
[0056] 本發(fā)明茄果類蔬菜專用的生物有機肥產(chǎn)品是指利用微生物技術，選配具有特定腐 熟功能的菌種制成菌劑，用此菌劑將有機固體物料發(fā)酵腐熟成初肥，再配以各種營養(yǎng)元素 及茄果類蔬菜專用的促生長復合菌劑所制成的生物肥料。其【具體實施方式】如下：
[0057](一)有機物料腐熟劑的制備
[0058]米用枯草芽抱桿菌（Baci I Ius subti I i s) CICC10088，米曲霉（Aspergi I Ius niger)CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414等具有高效腐熟作用 的菌種按適當?shù)谋壤龔秃习l(fā)酵而成的腐熟菌劑。
[0059] 1.菌種活化:將所述各菌種接于斜面培養(yǎng)基上;枯草芽孢桿菌28~32°C，pH為7.2 ~7.4,培養(yǎng)時間為1~3天;米曲霉培養(yǎng)溫度25~28°C，pH為6.0~6.5,培養(yǎng)時間為4~7天； 白腐菌培養(yǎng)溫度25~28°C，培養(yǎng)時間為4~7天；
[0060] 2.-級菌種培養(yǎng):將所述菌種分別接種于盛有液體培養(yǎng)基的50mL錐形瓶中，培養(yǎng) 基pH為6.0~8.0，錐形瓶放入搖床振蕩培養(yǎng)，溫度為30°C，振蕩24~48h;采用血球計數(shù)板計 數(shù)，菌液中菌種數(shù)量分別達到IO 8個/mL;
[0061] 3.二級發(fā)酵:將所述菌種分別接種于盛有液體培養(yǎng)基的1000 mL錐形瓶中，培養(yǎng)基 PH6.0~8.0,放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;使菌種數(shù)量分別達到IO8個/mL以 上，將各菌種按所述菌種的質(zhì)量百分比混合；
[0062] 4.三級發(fā)酵：分別將枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis)CICC10088,米曲霉 (Aspergillus niger)ClCC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌 種發(fā)酵液按2:1:1的比例混合均勻后，接種于盛有復合菌劑培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，復合菌劑培 養(yǎng)基pH 6.0~8.0，接種量為5 %，30 °C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中菌數(shù)達到IO8個/mL，即得 到有機物料秸桿腐熟劑。
[0063]所述斜面培養(yǎng)基配方為：
[0064] 1.枯草芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:普通瓊脂：牛肉浸液1.0L，蛋白胨10g， NaC15. Og，瓊脂20.0-20.5g，PH7.2-7.4，牛肉浸液的制備:瘦牛肉洗凈，切碎，稱取550g浸泡 于1375mL水中，浸泡一夜，過濾，過濾分裝后0.6kgf/cm240min備用。
[0065] 2.米曲霉采用的斜面培養(yǎng)基配方為：5 t3Be麥芽汁瓊脂，5 t3Be麥芽汁1.0L，瓊脂 15 .OgdSPH0
[0066] 3.白腐菌的斜面培養(yǎng)基配方為:PDA培養(yǎng)基，取去皮的馬鈴薯200克，切成小塊，加 水1000毫升煮沸30分鐘濾去馬鈴薯塊，將濾液補足至1000毫升，加葡萄糖20克，瓊脂15克， 溶化后分裝，15鎊滅菌30分鐘。自然PH。
[0067]所述液體培養(yǎng)基為斜面培養(yǎng)基不加瓊脂即可。
[0068]所述復合菌劑培養(yǎng)基配方為：玉米面0 · 5g/L、玉米秸桿粉15g/L、麩皮0 · 25g/L、豆 餅粉0·25g/L、4mL/100mL Vogel's母液，pH值8·5。
[0069](二)混拌、發(fā)酵
[0070]準備500kg粉碎的玉米秸桿與500kg牛糞作為發(fā)酵的原始有機物料，將制備好的有 機物料腐熟劑按發(fā)酵物料總質(zhì)量的5%。兌入適量的水中，與有機物料均勻混拌，原料手握成 團，指縫有水但不滴，而松手即散為好(總水分在60%左右）。將混合攪拌均勻的發(fā)酵物料放 進發(fā)酵設施，壓實填滿排去空氣，發(fā)酵池頂部覆蓋一層塑料薄膜，上蓋密封發(fā)酵、適時翻垛， 翻堆時補充水分，將總水分控制在60 %左右。經(jīng)過10天發(fā)酵，即制得初肥。
[0071] (三)各類營養(yǎng)元素的添加
[0072] 物料發(fā)酵完成后，按肥劑型要求進行粉碎、烘干，而后添加各類營養(yǎng)元素，包括大 量元素(氮、磷、鉀）、中量元素(鈣、鎂）、微量元素(硼），按發(fā)酵物料質(zhì)量計算，具體添加比例 如下：
[0073] a.大量元素(氮、磷、鉀)的添加比例:氮3.0%、磷1.1%、鉀6.0%;
[0074] b.中量元素(鈣、鎂)的添加比例:媽1.8%、鎂1.2% ;
[0075] c ·微量元素（硼）的添加比例:0 · 08% ;
[0076] d.腐植酸銨的添加比例:5.0%。
[0077] (四）茄果類蔬菜專用促生長復合菌劑制備及添加
[0078] 米用膠質(zhì)芽抱桿菌（Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1 · 153，褐色球形固氮菌 (Azotobacter chroococcum)CGMCC 1.142,巨大芽抱桿菌（Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183等具有特殊功效的菌種發(fā)酵液混合 后作為混合菌劑，經(jīng)再次發(fā)酵而制備的微生物復合菌劑。
[0079] 所述的茄果類蔬菜微生物復合菌劑制備步驟如下：
[0080] 1.接種:將所述各菌種(膠質(zhì)芽孢桿菌、褐色球形固氮菌、巨大芽孢桿菌、枯草芽孢 桿菌)分別接于斜面培養(yǎng)基上;膠質(zhì)芽孢桿菌(鉀細菌)培養(yǎng)溫度25~35 °C，pH為7.5~8.0， 培養(yǎng)時間為5天;褐色球形固氮菌培養(yǎng)溫度25~30°C，pH為7.0~8.0，培養(yǎng)時間為5天；巨大 芽孢桿菌為27~37°C，pH為6.5~7.5，培養(yǎng)時間為4天;枯草芽孢桿菌培養(yǎng)溫度27~37°(：，？!1 為6.5~7.5,培養(yǎng)時間為4天；
[0081] 2.-級菌種培養(yǎng):將所述步驟1制備的菌種分別按接種環(huán)一環(huán)的量接種于盛有相 應液體培養(yǎng)基的50mL錐形瓶中，培養(yǎng)基pH為6.5~7.5，錐形瓶放入搖床振蕩，溫度為30°C， 振蕩24~48h;采用血球計數(shù)板計數(shù)，菌液中菌種數(shù)量分別達到IO8個/mL;
[0082] 3.二級發(fā)酵:將所述步驟2制備的菌種分別按5%接種于盛有液體培養(yǎng)基的1000 mL 錐形瓶中，培養(yǎng)基pH 6.5~7.5，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;使菌種數(shù)量分別 達到IO8個/mL以上，從而制得膠質(zhì)芽孢桿菌(鉀細菌)發(fā)酵液、褐色球形固氮菌發(fā)酵液、巨大 芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液。
[0083] 將各菌種按質(zhì)量百分比混合后進行再次發(fā)酵:膠質(zhì)芽孢桿菌(鉀細菌)發(fā)酵液30~ 40%、巨大芽孢桿菌發(fā)酵液30~40%、褐色球形固氮菌發(fā)酵液10~20%、枯草芽孢桿菌發(fā)酵 液5~10%，如表1常用配方表。
[0084] 表1.常用配方表
[0086] 4.三級發(fā)酵:將所述步驟3制備的混合后的菌液接種于盛有復合菌劑培養(yǎng)基的發(fā) 酵罐中，復合菌劑培養(yǎng)基pH 6.5~7.5,接種量為復合菌劑培養(yǎng)基總質(zhì)量的5%，30°C下培養(yǎng) 4~7天，使發(fā)酵液中菌數(shù)達到6~10 X IO8個/mL，即得到茄果類蔬菜專用微生物復合菌劑， pH為6.8，菌數(shù)含量均達到9 X IO8個/mL。
[0087] 所述斜面培養(yǎng)基配方為：
[0088] 1.膠質(zhì)芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:KH2P04 0.06g、MgS04 · 7H20 0.05g、
[0089] CaS04 · 5H20 0.004g、蛋白胨5g、玉米楽_(50%干重）2.5g、乳糖 15g、NaCl 4g、蒸餾 水1000 mU瓊脂25g、pH 7.1;
[0090] 2.褐色球形固氮菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為：KH2P04 0.2g、K2HP04 0.8g、 MgS04 · 7H20 0.2g、CaS04 · 2H20 0.1g、Na2Mo04 · 2H20微量、酵母膏0.5g、甘露醇20g、 FeC13微量、瓊脂 15g、蒸餾水1000 mUpH 7.2;
[0091] 3.巨大芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為：牛肉膏3g、蛋白胨5g、瓊脂15g、NaCl 5g、蒸饋水 1000mL、pH 7.0;
[0092] 4.枯草芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:牛肉膏10g、蛋白胨10g、NaCl 5g、葡萄 糖1(^，瓊脂158，蒸餾水100〇1111^4!17.0;
[0093] 所述液體培養(yǎng)基配方為斜面培養(yǎng)基不加瓊脂制得。
[0094]所述復合菌劑培養(yǎng)基配方為:玉米粉2~20g/100mL、豆栢粉1~10g/100mL、酵母膏 0.05~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP04 0.5~2g/100mL、MgS04.7H20 0.001 ~0·02g/100mL、NaCl 0·5~0·8g/100mL、（NH4)2S04 0·001 ~0·01g/100mL，其余為蒸餾水。 [0095]按發(fā)酵物料總質(zhì)量的4%。比例添加茄果類蔬菜專用的促生長復合菌劑，再次混合 均勻。
[0096](五)造?；虺煞?，檢測、包裝、入庫
[0097]將物料混合均勻后，經(jīng)造粒機造?；虺煞?，檢測合格后，包裝入庫。
[0098] 實施例二:茄果類蔬菜專用生物有機肥在番茄上的應用效果
[0099] 采用本發(fā)明制備的茄果類蔬菜專用生物有機肥在番茄種植中應用的效果試驗： [0100] 1.試驗材料與方法
[0101] 供試品種:金番一號
[0102] 試驗方法:試驗設置為兩組，采用隨機排列，分別三次重復，每個試驗小區(qū)面積100 平方米。
[0103] 所述的兩組處理：
[0104] ①對照組，常規(guī)施肥;②試驗組，嚴格按照生物有機物肥產(chǎn)品使用說明施用。
[0105] 經(jīng)實際調(diào)查，2015年番茄生育期自然條件較好，有利于番茄的生長。
[0106] 2.本發(fā)明制備的茄果類蔬菜專用生物有機肥在番茄上的應用試驗結果見表1: [0107]表1.茄果類蔬菜專用生物有機肥對番茄作物性狀及產(chǎn)量影響
[0109] 從表1數(shù)據(jù)可以看出，試驗組比對照組的番茄每畝增加888kg，增產(chǎn)率為18.8%，因 此說明施用茄果類蔬菜專用生物有機肥能夠明顯提高番茄的產(chǎn)量。通過對試驗番茄生育的 主要植物性狀調(diào)查數(shù)據(jù)來看，與對照組相比，試驗區(qū)秧苗更墩實，葉色深綠，葉片相對較多、 大而厚，底部葉片的老化程度低，莖粗壯，根系發(fā)達，果實大，著色好，無畸形果，口味甘甜； 該試驗區(qū)作物耐旱，抗早衰，抗植株萎蔫、青枯病、早疫病及晚疫病等發(fā)病率較低。
[0110] 3.本發(fā)明制備的茄果類蔬菜專用的生物有機肥對番茄地土壤影響的應用試驗效 果數(shù)據(jù)見表2:
[0111] 表2.茄果類蔬菜專用生物有機肥對番茄地土壤的腐殖質(zhì)含量及有益菌含量的影 響
[0113] 從表2數(shù)據(jù)可以看出，試驗組比對照組番茄地土壤中的腐殖質(zhì)含量增加3.8%，每 克土壤樣品所含的有益菌數(shù)量比對照組多12.2億。這說明施用茄果類蔬菜專用生物有機肥 后，不但對番茄本身性狀和產(chǎn)量有很大的促進作用，其對番茄地土壤的作用也十分顯著，能 夠明顯改善土壤的理化特性，改良土壤生態(tài)環(huán)境增加腐殖質(zhì)含量及有益微生物數(shù)量。
[0114] 4.結論:番茄施用茄果類蔬菜專用生物有機肥后，植株生長健壯，根系發(fā)達，葉片 深綠，葉面積增加，光合能力增強，番茄果個大，著色鮮艷，口感甘甜，能改善果實外觀質(zhì)量 和提高果實品質(zhì)，且增產(chǎn)效果明顯，能顯著提高經(jīng)濟效益和社會效益。
[0115] 茄果類蔬菜專用生物有機肥在番茄上的試驗效果證明，該產(chǎn)品可在茄果類蔬菜生 產(chǎn)中擴大示范面積，并進行大面積推廣使用。
【主權項】
1. 一種茄果類蔬菜專用的生物有機肥，其特征在于， (一) 有機物料腐熟劑的制備 將菌種數(shù)量分別達到1〇8個/mL以上的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)CICC10088， 米曲霉（Aspergi 1 lus niger )CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium) ACCC30414的菌種發(fā)酵液按1.5~2.0:0.8~1.3:0.8~1.3的比例混合均勻后，接種于盛有 復合菌劑培養(yǎng)基A的發(fā)酵罐中，接種量為復合菌劑培養(yǎng)基A總體積的5%，復合菌劑培養(yǎng)基A 的pH 6.0~8.0，30°C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中總菌數(shù)達到108個/mL，即得到有機物料腐 熟劑； 所述復合菌劑培養(yǎng)基A配方為：玉米面0.5~1.5g/L、玉米猜桿粉15~17g/L、麩皮0.2~ 0 · 4g/L、_a餅粉0 · 2~0 · 4g/L、4mL/100mL Vogel ' s母液，pH值6 · 0~8 · 0; (二) 混拌、發(fā)酵 將步驟(一）制備好的有機物料腐熟劑按發(fā)酵物料總質(zhì)量的5%。比例混合，再兌入適量 的水，使總水分控制在60 %左右，在發(fā)酵池經(jīng)過5-10天發(fā)酵，即制得初肥； (三) 深加工 將初肥進行粉碎、烘干，按初肥質(zhì)量百分比，具體添加如下營養(yǎng)元素： 氮2.5~3.5%、磷0.8~1.5%、鉀5.0~7.0% ;鈣1.5~2.0%、鎂1.0~1.5% ;硼0.05~ 0.1% ;腐植酸類肥料5.0~10.0% ; (四） 茄果類蔬菜專用促生長復合菌劑的制備 將菌種數(shù)量分別達到1〇8個/mL以上的膠質(zhì)芽孢桿菌（Baci 1 lus mucilaginosus) CGMCC1 · 153，褐色球形固氣菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1 · 142，巨大芽抱桿菌 (Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183的菌 種發(fā)酵液，按(30~40% ): (10~20% ): (30~40% ): (5~10% )的比例混合均勻后作為混合 菌劑，接種于盛有復合菌劑培養(yǎng)基B的發(fā)酵罐中，接種量為復合菌劑培養(yǎng)基B總體積的5%， 復合菌劑培養(yǎng)基B的pH 6.5~7.5，30°C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中總菌數(shù)達到6~10 X108 個/mL，即得到茄果類蔬菜專用微生物復合菌劑，pH為6.8，總有效活菌數(shù)為9 X 108個/mL; 所述復合菌劑培養(yǎng)基B的配方為：玉米粉15~18g/100mL、豆栢粉5~8g/100mL、酵母膏 0.1 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP〇4 0.5~2g/100mL、MgS〇4.7H20 0.001 ~ 0·02g/100mL、NaCl 0·5~0·8g/100mL、（NH4)2S〇4 0·001 ~0·01g/100mL，其余為蒸餾水； (五） 按步驟(三)深加工所獲得的發(fā)酵物料總質(zhì)量的3~5%。比例添加步驟（四）獲得的 茄果類蔬菜專用的促生長復合菌劑獲得終產(chǎn)品。2. 根據(jù)權利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機肥的制備方法，其特征在于，步驟 (一)所述復合菌劑培養(yǎng)基A配方為:玉米面0.5g/L、玉米秸桿粉15g/L、麩皮0.25g/L、豆餅粉 0.25g/L、4mL/100mL Vogel's母液，pH 8.5。3. 根據(jù)權利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機肥的制備方法，其特征在于，步驟 (一） 所述枯草芽抱桿菌（Bacillus subtil is )CICC10088,米曲霉(Aspergillus niger) CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌種發(fā)酵液按2:1:1的比 例混合均勻。4. 根據(jù)權利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機肥的制備方法，其特征在于，步驟 (二) 所述發(fā)酵有機物料為粉碎的玉米秸桿與動物糞便按1~2:0.5~2質(zhì)量比混合。5. 根據(jù)權利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機肥的制備方法，其特征在于，步驟 (三)所述營養(yǎng)元素為氮3.0%、磷1.1 %、鉀6.0% ;鈣1.8%、鎂1.2% ;硼0.08% ;腐植酸類肥 料5.0%，腐植酸類肥料為腐植酸銨或者腐植酸鉀。6. 根據(jù)權利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機肥的制備方法，其特征在于，步驟 (三）所述復合菌劑培養(yǎng)基B的配方為：玉米粉16g/100mL、豆栢粉7g/100mL、酵母膏0. lg/ 100mL、KH2P04 lg/100mL、K2HP〇4 lg/100mL、MgS〇4.7H20 0.01g/100mL、NaC10.6g/100mL、 (NH4)2S〇4 0.01g/100mL，其余為蒸餾水。
【文檔編號】C05F17/00GK105859480SQ201610227683
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年4月13日
【發(fā)明人】崔國臣, 崔昌娜
【申請人】大連三科生物工程有限公司