專利名稱：使用茼蒿屬的至少一種提取物促進皮膚和/或毛發(fā)著色的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及將至少一種茼蒿屬(Chrysanthemum)的植物的至少一種提取物用于組合物中，促進皮膚和/或毛發(fā)著色。
人類毛發(fā)和皮膚的顏色受不同因素的影響，特別是受一年中的四季、種族、性別和年齡的影響。它主要是由角質(zhì)細胞中的由黑素細胞產(chǎn)生的黑素濃度決定的。黑素細胞是特化細胞，它能通過特殊細胞器黑素體合成黑素。
黑素的合成或黑素生成特別復(fù)雜，并且示意性地包括以下主要步驟酪氨酸→多巴→多巴醌→多巴色素→黑素酪氨酸酶(一元酚二羥基苯丙氨酸氧氧化還原酶/EC1，14，18，1)是干預(yù)所述反應(yīng)順序的主要酶。它特別催化從酪氨酸到多巴二羥基苯丙氨酸)的轉(zhuǎn)化反應(yīng)和從多巴到多巴醌的轉(zhuǎn)化反應(yīng)。
在表皮中，黑素細胞與表皮黑素單位有關(guān)，該單位含有一個由大約36個相鄰的角質(zhì)形成細胞環(huán)繞的黑素細胞。所有個體，無論照相制版法(phototype)如何，對于特定的皮膚面積來說都具有大致相同數(shù)量的黑素細胞。人種顏色的差別不是由于黑色細胞的數(shù)量，而是由于其黑素體的性質(zhì)造成的。黑色體聚集成復(fù)合體，并具有很小的體積。它們是高度特化的細胞器，其特有的功能是產(chǎn)生黑素。它們以球形液泡形式產(chǎn)生于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中，被稱為前黑素體。前黑素體含有一種無定形蛋白物質(zhì)，但無黑素生成酶。在前黑素體成熟的過程中，所述無定形物質(zhì)被組織成沿黑素體縱軸取向的纖維結(jié)構(gòu)。黑素體形成的4個階段根據(jù)黑素化強度加以區(qū)分。黑素均勻沉積在黑素體的內(nèi)部纖維網(wǎng)絡(luò)上，并且所述細胞器的不透明性提高到飽和。由于黑素是在黑素體中合成的，它們從核周隙移動到黑素細胞的樹突末端。通過吞噬作用，所述樹突末端被角質(zhì)形成細胞捕獲，其膜被降解，而黑素體被重新分配到角質(zhì)形成細胞中。
盡管不同群體的黑素含量有所不同，但酪氨酸酶的量沒有明顯變化，而酪氨酸酶的信使RNA的含量在白色或黑色皮膚中是相同的。因此，黑素生成的變化是由于酪氨酸酶的活性或角質(zhì)形成細胞吞噬黑素體的能力不同而造成的。
眾所周知的是，在大部分群體中，棕色皮膚和保持固有的毛發(fā)顏色是主要潮流。
另外，諸如白斑病的現(xiàn)有著色疾病是一種自身免疫疾病，其特征是在皮膚上出現(xiàn)與著色缺陷相關(guān)的白斑。
因此，確實需要一種能促進和/或改善皮膚和/或毛發(fā)著色的產(chǎn)品。
在人工染色領(lǐng)域，業(yè)已提出了多種方法，通過使用合理的外源著色劑，使皮膚和/或毛發(fā)著色，這種顏色最大可能地接近其天然顏色，或者在天然著色領(lǐng)域中，通過促進著色的天然途徑而實現(xiàn)。
例如，在專利文件WO-A-9517161，WO-A-9511003，WO-A-9501773，WO-A-9404674，WO-A-9404122，EP-A-585018，WO-A-9310804，WO-A-9220322或WO-A-9107945中業(yè)已提出了各種方案，這些方案提出含有磷酸二酯酶抑制劑的組合物，及前列腺素，DNA片段或者酪氨酸衍生物的應(yīng)用。
通過在現(xiàn)有技術(shù)中提出的方案的確獲得了良好結(jié)果，但所使用的化合物通常具有不可忽視的副作用的或者是不具有任何專一性的復(fù)雜混合物。
發(fā)現(xiàn)對皮膚和/或毛發(fā)著色有作用而又沒有不好的副作用的物質(zhì)仍然是主要的研究課題。
本申請人業(yè)已發(fā)現(xiàn)茼蒿屬的至少一種植物的至少一種提取物對黑素生成具有激活作用。
在現(xiàn)有技術(shù)中，茼蒿屬的植物被用于具有脫色性質(zhì)的組合物(JP07025745，JP07025746)，有利于毛發(fā)生長和/或防止脫發(fā)的組合物(FR2659014，EP569667，DE4330597，DE4312109，JP8081336，JP84154598，JP02048514)，抗頭皮屑組合物(KR9006824，JP62153211)或保持皮膚柔軟、水分和光澤的組合物(JP62048611)。專利申請CN1094278和CN1094279涉及用于天然毛發(fā)處理的組合物。這些組合物具有多種特性(光亮毛發(fā)，定型，促進血液循環(huán)和毛發(fā)生長，殺菌，抗瘙癢，抗頭皮屑)，其中提到了抗白發(fā)作用。事實上，所述組合物是兩種成分的混合物，各自由至少9種植物的提取物組成，它不能形成所引用的多種特性中的一種。
就申請人所知，從來沒有人聲稱用茼蒿屬的植物提取物作為活性成分來促進皮膚和/或毛發(fā)著色。
因此，本發(fā)明涉及將足夠量的至少一種茼蒿屬植物的至少一種提取物作為活性成分用于化妝組合物中或用于制備藥用組合物，該提取物或組合物可用于增強皮膚和/或毛發(fā)的著色。
本發(fā)明同樣涉及將足夠量的至少一種茼蒿屬植物的至少一種提取物作為活性成分用于化妝組合物中或用于制備藥用組合物，以便促進黑素生成。
所述至少一種茼蒿屬植物的提取物可以是由源于一種茼蒿屬植物的任何植物材料制備的任何提取物。
所述組合物可以含有從源于活體培養(yǎng)植物或源于體外培養(yǎng)的材料獲得的至少一種茼蒿屬植物的至少一種提取物。
活體培養(yǎng)被理解為任何常規(guī)類型的培養(yǎng)，就是說在土壤中，在開放的空氣中或在溫室中或在土壤外培養(yǎng)。
因此，根據(jù)本發(fā)明，有可能使用植物不同部分的提取物，如葉、花、莖、根、未分化的細胞、單獨或以混合形式使用，無論所述植物是活體培養(yǎng)或體外培養(yǎng)的。
通過在植物細胞的體外生長期間的物理化學(xué)條件施加選擇壓力，以便獲得植物材料，該過程是標準化的，并且可以在一年中的任何時間進行，而不像植物的活體培養(yǎng)那樣。
體外培養(yǎng)被理解為本領(lǐng)域技術(shù)人員所了解的人工獲得植物或植物的一部分的所有技術(shù)。
優(yōu)選使用從活體培養(yǎng)植物材料中獲得的提取物，更優(yōu)選從活體培養(yǎng)的茼蒿屬植物的葉片中獲得的提取物。
茼蒿屬屬于菊科，而菊科又屬于菊目。
茼蒿屬在歐洲和亞洲有大約200個種，其中包括Chrysanthemumhortorum，Chrysanthemum morifolium，茼蒿(Chrysanthemumcoronarium)，Chrysanthemum myconis，Chrysanthemum sagitum，Chrysanthemum indicum，或者南茼蒿(Chrysanthemum segetum)。
根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選使用源于Chrysanthemum morifolium的植物。
Chrysanthemum morifolium種包括多個變種，其中，可能涉及的有優(yōu)選用于本發(fā)明的品種sinense。
至少一種茼蒿屬植物的提取物被理解為被大致分割成碎片的植物部分和提取溶劑的粗制混合物，以及由在提取過程中溶解的活性成分提取的制劑。本發(fā)明一種特別有用的提取物是通過精細磨碎植物部分，然后在提取溶劑中浸漬，最后過濾而產(chǎn)生的。很明顯，本發(fā)明的提取物可以是分別提取的或者以與一種或幾種其它提取物混合的形式獲得的。
本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的任何提取方法均可用于本發(fā)明。
特別要提到的是水和醇，特別是乙醇提取物，以及水-醇提取物。
無論所述提取物是以何種形式使用，用于獲得該提取物的技術(shù)通常披露于現(xiàn)有技術(shù)中，并為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知。
同樣可以使用通過在法國專利申請?zhí)?5-02379中所披露的方法制備的提取物。
因此，在第一步，在冷水溶液中研磨植物材料，在第二步中，從來自所述第一步驟的水溶液中除去懸浮液中的顆粒，在第三步中，對來自第二步驟的水溶液進行消毒。這種水溶液相當于所述提取物。
另一方面，可以通過對植物組織的冷凍操作(例如，在-20℃下)代替所述第一步驟，接著按照上述第二和第三步驟進行水提取。
無論本發(fā)明所使用的制備方法如何，可以增加其目的在于促進防腐和/或穩(wěn)定的后續(xù)步驟，而不會改變該提取物的實際性質(zhì)。因此，例如，所獲得的提取物可以用任何常規(guī)冷凍干燥方法冷凍干燥，從而獲得一種干粉，這種干粉可直接使用或者在使用之前與合適的溶劑混合。
本發(fā)明優(yōu)選使用含水提取物。
可用于本發(fā)明的提取物制備的詳細方法在實施例中進一步提供。
當然，在本發(fā)明組合物中所含至少一種茼蒿屬植物提取物的量是該組合物的預(yù)期功效和用于所述組合物中的提取物的形式的函數(shù)。因此，它可以在很大范圍內(nèi)變化。
為了給出大小范圍，無論其性質(zhì)如何，所述組合物可以含有的至少一種茼蒿屬植物提取物的量占該組合物總重量的0.01-15％，優(yōu)選占該組合物總重量的1-5％。
本發(fā)明的組合物主要用于加強皮膚和/或毛發(fā)著色和/或促進黑素生成。無論其性質(zhì)任何，本發(fā)明的組合物主要被用于皮膚(用于身體的任何皮膚部位)和/或毛發(fā)。
根據(jù)使用方法，本發(fā)明的組合物可以通常使用的任何藥用形式出現(xiàn)。
為了進行皮膚的局部使用，該組合物可以特別具有水或油溶液的形式或洗液或乳漿類型的分散劑形式，乳型液體或半液體稠度的乳液，通過將脂相分散在水相(O/W)或相反(W/O)的方式而獲得，或柔軟稠度的有水或無水乳液或凝膠類型的懸浮液或乳液，或微膠囊或微顆粒，或離子和/或非離子型的氣泡分散液。所述組合物是按照常用方法制備的。
同樣可以水、醇或水-醇溶液形式，或以霜、凝膠、乳液、泡末形式，或同樣含有推進劑并加壓的氣溶膠組合物形式將其用于毛發(fā)。
本發(fā)明組合物的不同成分的用量是有關(guān)領(lǐng)域的常見用量。
這些組合物特別用于面部、手、腳、主要的解剖學(xué)的析疊或身體的清潔、防護、處理或護理霜(例如，日霜、晚霜、卸妝霜、粉底霜、防曬霜)，液體粉底、卸妝乳、身體防護或護理乳、防曬乳、洗液、凝膠或護理皮膚的泡末，如清洗液、防曬洗液、人工曬黑洗液、洗浴用組合物，含有殺細菌劑的除臭組合物，凝膠或美容水，脫毛霜、防昆蟲叮咬的組合物，止痛組合物，用于治療諸如濕疹、酒渣鼻、牛皮癬、苔癬和嚴重瘙癢的某些疾病。
本發(fā)明的組合物同樣可制成用于生產(chǎn)清洗皂或餅的固體制劑。
所述組合物還可以包裝成同樣含有加壓的推進劑的氣溶膠組合物形式。
本發(fā)明的組合物還可以是用于毛發(fā)護理的組合物，特別是洗發(fā)水，毛發(fā)定型液，處理液，毛發(fā)定型乳或凝膠，染色組合物(特別是氧化染料)，有可能是染色洗發(fā)水形式，用于毛發(fā)的重構(gòu)，永久性波浪形成組合物(特別是用于第一次形成永久性波浪的組合物)，脫發(fā)液或凝膠，抗寄生物洗發(fā)水等。
當所述組合物是一種乳液時，脂相的重量占組合物總重量的5-80％，優(yōu)選5-50％。用于所述乳液形式的組合物中的有、蠟、乳化劑和共乳化劑、選自化妝品領(lǐng)域常用的成分。所述組合物中乳化劑和共乳化劑的使用量占該組合物總重量的0.3-30％，優(yōu)選0.5-20％。另外，所述乳液可以含有脂泡。
當所述組合物是溶液或油性凝膠時，所述脂相可以占該組合物總重量的90％以上。
所述化妝組合物同樣可以已知方式含有化妝品領(lǐng)域常用的佐劑，如親水性或親脂性膠凝劑，親水性或親脂性添加劑，防腐劑，抗氧化劑，溶劑，香精，填充劑，過濾劑，除臭劑和著色材料。所述不同佐劑的用量是化妝品領(lǐng)域常用的量，例如，占該組合物總重量的0.01-10％。所述佐劑根據(jù)其性質(zhì)可以導(dǎo)入脂相，導(dǎo)入水相和/或?qū)胫蝮w。可用于本發(fā)明的油或蠟包括礦物油(液態(tài)石蠟)，植物油(燭果油、向日葵油的液體成分)，動物油(全氫角鯊烯)，合成油類(Purcellin油)，硅油或蠟(cyclomethicone)和氟化油(全氟聚醚)，蜂蠟、巴西棕櫚蠟或石蠟?？梢詫⒅敬己椭舅?硬脂酸)加入所述油類中。
例如，可用于本發(fā)明的乳化劑包括甘油硬脂酸酯，polysorbate60和由Gattefosse以Tefose63為商標出售的PEG-6/PEG32/乙二醇硬脂酸酯的混合物。
可用于本發(fā)明的溶劑包括低級醇，特別是乙醇和異丙醇和丙二醇。
可用于本發(fā)明的親水性膠凝劑包括羧基乙烯基聚合物(carbomer)，丙烯酸共聚物，如丙烯酸/烷基丙烯酸共聚物，聚丙烯酰胺，多糖，如羥丙基纖維素，天然橡膠和粘土，而親脂性膠凝劑包括改性粘土，如膨潤土，脂肪酸的金屬鹽，如硬脂酸鋁和疏水性二氧化硅，以及纖維素和聚乙烯。
所述組合物可以含有其它親水性活性劑，如蛋白或蛋白水解物，氨基酸，多元醇，尿素，尿囊素，糖和糖衍生物，水溶性維生素，植物提取物和羥酸。
可以使用的親脂性活性劑有視黃醇(維生素A)及其衍生物，生育酚(維生素E)及其衍生物，必需脂肪酸，神經(jīng)酰胺，必需油類，水楊酸及其衍生物。
根據(jù)本發(fā)明，所述組合物可以含有其它活性劑，特別適用于預(yù)防和/或治療皮膚疾病。例如，所述活性劑特別包括-減弱皮膚分化和/或增殖的制劑，如視黃酸及其異構(gòu)體，視黃醇及其酯，維生素D及其衍生物，諸如雌二醇的雌激素；-抗細菌劑，如磷酸氯林可霉素，紅霉素或四環(huán)素類抗生素；
-抗寄生物劑，特別是甲硝唑，克羅米通或合成除蟲菊酯；-抗真菌劑，特別是屬于咪唑類的化合物，如益康唑，酮康唑或咪康唑或其鹽，多烯化合物，如兩性霉素B，烯丙胺類化合物，如特比萘芬，或octopirox；-抗病毒劑，如阿昔落韋；膽甾醇抗炎劑，如氫化可的松，戊酸倍他米松或丙酸氯倍他素，或非膽甾醇抗炎劑，如布落芬及其鹽，雙氯芬酸及其鹽，乙酰水楊酸，乙酰氨基苯酚或甘草次酸；-麻醉劑，利多卡因鹽酸鹽及其衍生物；-抗瘙癢劑，如噻苯哌胺，異丁嗪或賽庚啶；-角質(zhì)層分離劑，如α-和β-羥基羧酸或β-酮羧酸，其鹽，酰胺或酯，更具體為羥酸，如乙醇酸，乳酸，水楊酸，檸檬酸，一般來講，果酸和n-辛酰-5-水楊酸；-抗自由基劑，如α-生育酚或其酯，超氧物歧化酶，某些金屬螯合劑或抗壞血酸及其酯；-抗皮脂溢劑，如孕酮；-抗頭皮屑劑，如octopirox或巰氧吡啶鋅；-抗痤瘡劑，如視黃酸或過氧化苯甲酰；-有助于皮膚和/或毛發(fā)著色的制劑，例如，具有酪氨酸酶活性的至少一種酶的底物，如酪氨酸或其衍生物或3，4-二羥基苯基-α-苯氨酸(DOPA)，嘧啶3-氧化物衍生物，在6位上取代的，如在本申請人于法國提交的專利申請?zhí)?6-11316中所披露的化合物，該化合物相當于通式(I)
其中
R1和R2相同或不同，它們是氫原子或C1-C12烷基基團；R3和R4相同或不同，它們是C1-C12烷基基團，或者與和它們鍵合的N原子一起形成一個雜環(huán)；可以理解的是，當R3和R4一起形成一個哌啶子基環(huán)狀系統(tǒng)時，R1或R2基團的至少一個必須不同于氫原子，其中，特別包括2-氨基-4-丙氨基-6-二甲基氨基嘧啶3-氧化物，2-氨基-4-甲氨基-6-哌啶子基嘧啶3-氧化物，2，4-二-苯基氨基-6-二甲基氨基嘧啶3-氧化物，2，4-二-苯基氨基-6-哌啶子基嘧啶3-氧化物，2，4-二-甲基氨基-6-二甲基氨基嘧啶3-氧化物，2，4-二-乙基氨基-6-二甲基氨基嘧啶3-氧化物；源于細菌的提取物，例如，非光合絲狀細菌的提取物，例如，線形透明顫菌(Vitreoscilla filiformis)的提取物。
因此，本發(fā)明的組合物同樣可以含有至少一種選自抗細菌劑、抗寄生物劑、抗真菌劑、抗病毒劑、抗炎劑、抗瘙癢劑、麻醉劑、角質(zhì)層分離劑、抗自由基劑、抗皮脂溢劑、抗頭皮屑劑和抗痤瘡劑，調(diào)節(jié)細胞分化和/或增殖的制劑和/或促進皮膚和/或毛發(fā)著色的制劑的制劑。
同樣可以設(shè)想所述組合物是脂質(zhì)體形式，如特別披露于由抗癌公司于1994年10月13日申請的專利申請WO94/22468中所披露的。因此，膠囊化于脂質(zhì)體中的所述化合物，可以毛發(fā)濾泡的水平選擇性輸送。
本發(fā)明同樣涉及用于加強皮膚和/或毛發(fā)著色的美容治療方法，這樣，將含有至少一種茼蒿屬植物的至少一種提取物的化妝組合物放在化妝可以接受的介質(zhì)中涂在皮膚和/或毛發(fā)上。
化妝可以接受的介質(zhì)被理解為與皮膚、粘膜、指甲和毛發(fā)相容的介質(zhì)。
下面將通過說明形式給出實施例，這些實施例不是要以任何方式限定本發(fā)明的范圍。
例1制備Chrysanthemum morifolium品種sinense的提取物采集在溫室中培養(yǎng)的Chrysanthemum morifolium品種sinense植物的葉片，并在45℃下的溫度下在通風烘箱中干燥48小時。
然后在Culatti型的刀式粉碎機中將干燥的葉片磨成粉末。
讓所獲得的粉末通過孔徑為1mm的篩進行篩選。將這種篩過的粉末用于制備提取物。
方案1以每100ml溶劑5g干粉的濃度比將所述干粉與含水提取溶劑混合，該溶劑是由生命技術(shù)公司出售的12.3∶1的DMEM/F細胞培養(yǎng)基制成的。在環(huán)境溫度下攪拌該混合物4小時。然后以每分鐘1000轉(zhuǎn)的速度離8分鐘，并取上清液，進行兩個相同輪次的離心/取樣。在無菌條件下通過Millipore型的0.22微米的過濾器過濾最后獲得的上清液，然后消毒，并在4℃下保存待用。
方案2以每100ml水2.5g干粉的濃度比將所述干粉與pH為6.5的無菌軟化水混合。在環(huán)境溫度下攪拌該混合物30分鐘。通過GFD膜對該混合物進行過濾，該膜是由Whatmann公司出售，并具有0.7μ的孔度。然后在無菌條件下通過Nalgene型的0.22微米的過濾器過濾所得到的濾液，然后消毒，并在4℃下保存待用。
方案3進行以上方案，用含水提取溶劑代替所述水，該溶劑是用由生命技術(shù)公司出售的12.3∶1的DMEM/F細胞培養(yǎng)基制成的。
方案4在30℃對在方案2中獲得的提取物進行冷凍干燥，然后在-20℃下冷凍。直接使用所獲得的干粉。
例2測定通過例1中方案2獲得的提取物對黑素生成的調(diào)節(jié)作用通過例1的方案2獲得的提取物對黑素生成的調(diào)節(jié)作用是按照法國專利FR9506491中披露的方法在正常人類角質(zhì)形成細胞/黑素細胞的共培養(yǎng)物上進行試驗。根據(jù)用C14標記過的硫尿嘧啶結(jié)合量評價黑素的合成速度。將根據(jù)氚化亮氨酸的結(jié)合量測定的蛋白合成，被作為細胞毒性和增殖的指標。
材料和方法-細胞培養(yǎng)
培養(yǎng)來自包皮的正常人類角質(zhì)形成細胞(NHK)和正常人類黑素細胞(NHM)。讓這兩種類型的細胞增殖并冷凍保存。在試驗之前8天，再對每一種類型的細胞進行培養(yǎng)，角質(zhì)形成細胞(NHK)在購自Gibco的KGM培養(yǎng)基中培養(yǎng)，而黑素細胞(NHM)在購自Dr Olsson的M2培養(yǎng)基中培養(yǎng)(0lsson，M.J.等，Lancet(1992)340，981)。每兩天更換一次培養(yǎng)基。
在鋪滿之前48小時，用分化培養(yǎng)基(DMEM/F12 3∶1，10％小牛血清，10ng/ml EGF，0.4μg/ml氫化可的松，5μg/ml胰島素)取代NHK的KGM培養(yǎng)基。
-植物提取物試驗例1(方案2)的植物提取物，試驗濃度為1.25 10-4，2.510-4，5 10-4，1.5 10-3，2.5 10-3，5 10-3％。
-調(diào)節(jié)黑素生成混合250,000個正常人類角質(zhì)形成細胞和80,000個正常人類黑素細胞，并接種到24孔板(Costar型)的孔中，在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)3天。在隨后的3天中，每天用含有1μCi/ml用C14標記的硫尿嘧啶的確定成分的試驗培養(yǎng)基(DMEM/F12 3∶1，10ng/ml表皮生長因子(EGF)，10ng/mlβ型成纖維細胞生長因子(βFGF))代替所述培養(yǎng)基，進行以下對照培養(yǎng)對照沒有試驗的產(chǎn)品；-刺激黑素生成的正對照1mM酪氨酸；-抑制黑素生成的正對照0.5mM曲酸。
通過氚化亮氨酸的摻入量估計摻入該蛋白中的總的放射性活性。在取樣前1天，將1μCi/ml的氚化亮氨酸加入所述試驗培養(yǎng)基。經(jīng)過1夜之后，將所述細胞用磷酸緩沖液沖洗。用5％的三氯乙酸(TCA)使該蛋白沉淀，并洗滌，以便除去游離的放射活性。在40℃下在Tris-HCl-Triton-EDTA緩沖液中用100μg/ml蛋白酶K溶液培養(yǎng)所述蛋白過夜。取50μl的總提取物，并轉(zhuǎn)移到24孔板中(Wallac)，加入500μl閃爍流體(Optiphase“supermix”)。其余的950μl提取物通過DEAE Filtermat濾膜過濾。在經(jīng)過清洗之后，將用固體閃爍劑覆蓋的“Meltilex”轉(zhuǎn)移到一個平板上。用Wallac計數(shù)器計數(shù)其放射活性。其結(jié)果按照以下公式以對照的百分比形式表達(14CP/3HP)-(14CT/3HT)(14CT/3HT)×100]]>其中14CP是14C硫尿嘧啶在用產(chǎn)品(P)處理過的三個類似的孔中每分鐘衰減(dpm)的平均值；3HP是相應(yīng)的3H亮氨酸的dpm的平均值；14CT是在三個相似的對照孔(T)中14C硫尿嘧啶dmp的平均值；3HT是相應(yīng)的3H亮氨酸的dpm的平均值。
結(jié)果產(chǎn)品3H亮氨酸(％/對照)4CT硫尿嘧啶(％/對照)1mM酪氨酸-2+1185 10-4％提取物 -1+922.5 10-3％提取物+5+5025 10-3％提取物 -13 +9320.5mM曲酸+4-47結(jié)論該產(chǎn)品在試驗的濃度下是無細胞毒性的(3H亮氨酸的摻入量無明顯變化)并由1.25 10-3％誘導(dǎo)黑素合成(提高14CT硫尿嘧啶的摻入量)。
例3含有至少一種茼蒿屬植物的至少一種提取物的組合物實施例。
這些組合物是通過化妝品或制藥領(lǐng)域中常用的常規(guī)技術(shù)獲得的。皮膚用霜劑例2方案1的提取物 5.000gCeteareth 30 7.000g甘油硬脂酸 2.000g十六烷醇 1.500g聚二甲基硫烷 1.500g石蠟油 15.000g醫(yī)用純甘油 20.000g防腐劑適量軟化水 100.000g噴灑皮膚用洗液例1方案2的提取物 10.000g3，4-二羥基苯基-α-丙氨酸(DOPA)0.200g乙醇 30.000g軟化水適量 100.000g毛發(fā)洗液例1方案4的提取物 0.500g酪氨酸 1.000g丙二醇 30.000g乙醇 40.500g水 適量 100.000g將該洗液涂在頭皮上，每天1-2次，每次的用量為1ml。增稠洗液例1方案3的提取物 15.000g醉椒素 2.000g羥丙基纖維素(購自Hercules的Klucel G) 3.500g乙醇 適量 100.000g將該增稠洗液涂在頭皮上，每天1-2次，每次的用量為1ml。Niosomal洗液例1方案1的提取物 1.000gChimexane NL 0.475g膽甾醇 0.475g硬脂酰谷氨酸一鈉 0.050g防腐劑 適量著色劑 適量香料 適量軟化水 適量 100.000g
將該洗液涂在頭皮上，每天1-2次，每次的用量為1ml。洗液例1方案2的提取物 2.000g酪氨酸 1.000g丙二醇-甲基醚來自Dow Chemical的Dowanol PM 20.000g氫化乙醇 40.000gMinoxidil 2.000g水 適量 100.000g將該增稠洗液涂在頭皮上，每天1-2次，每次的用量為1ml。
權(quán)利要求
1.將足夠量的至少一種茼蒿屬植物的至少一種提取物作為活性成分用于化妝組合物中或用于制備藥用組合物，該提取物或組合物被用于增強皮膚和/或毛發(fā)著色。
2.將足夠量的至少一種茼蒿屬植物的至少一種提取物作為活性成分用于化妝組合物中或用于制備藥用組合物，以便促進黑素生成。
3.如上述權(quán)利要求中任一項的用途，其特征在于所述植物選自下列種Chrysanthemum hortorum，Chrysanthemum morifolium，茼蒿(Chrysanthemum coronarium)，Chrysanthemum myconis，Chrysanthemum sagitum，Chrysanthemum indicum，或者南茼蒿(Chrysanthemum segetum)。
4.如上述權(quán)利要求中的用途，其特征在于所述植物來自Chrysanthemum morifolium種。
5.如上述權(quán)利要求4的用途，其特征在于所述植物來自品種sinense。
6.如上述權(quán)利要求中任一項的用途，其特征在于所述至少一種茼蒿屬植物的提取物獲自源于活體培養(yǎng)的完整植株或源于體外培養(yǎng)的植物材料。
7.如上述權(quán)利要求中任一項的用途，其特征在于所述至少一種茼蒿屬植物的提取物獲自葉片、花、莖、根、或未分化的細胞。
8.如上述權(quán)利要求中任一項的用途，其特征在于所述至少一種茼蒿屬植物的提取物的用量占所述組合物總重量的0.01-15％，優(yōu)選占所述組合物總重量的1-5％。
9.化妝或藥用組合物，含有如權(quán)利要求1-8之一所述至少一種茼蒿屬植物的至少一種提取物，和選自下列一組的至少一種制劑抗細菌劑、抗寄生物劑、抗真菌劑、抗病毒劑、抗炎劑、抗瘙癢劑、麻醉劑、角質(zhì)層分離劑、抗自由基劑、抗皮脂溢劑、抗頭皮屑劑、和抗痤瘡劑、調(diào)節(jié)細胞分化和/或增殖的制劑和/或促進皮膚和/或毛發(fā)著色的制劑。
10.用于加強皮膚和/或毛發(fā)著色的美容治療方法，其特征在于將含有至少一種茼蒿屬植物的至少一種提取物的化妝組合物以化妝可接受的介質(zhì)形式涂在皮膚和/或毛發(fā)上。
全文摘要
本發(fā)明涉及將茼蒿屬的至少一種植物提取物用于化妝組合物或用于制備藥用組合物,以便刺激皮膚和/或毛發(fā)著色。本發(fā)明還涉及含有一種活性成分和至少一種茼蒿屬植物的提取物的組合物。
文檔編號A61Q5/06GK1270513SQ98809300
公開日2000年10月18日 申請日期1998年9月14日 優(yōu)先權(quán)日1997年9月18日
發(fā)明者R·馬丁, B·貝爾庫爾-卡斯特羅 申請人:萊雅公司