一種益生菌蘆薈面膜的制備方法
【專利摘要】一種益生菌蘆薈面膜的制備方法,是利用庫拉索蘆薈原汁、葡萄糖、水按照一定配比制備發(fā)酵備用液，添加益生菌進行共發(fā)酵。通過設(shè)定不同的溫度梯度和PH梯度，經(jīng)活菌計數(shù)后，確定其最佳發(fā)酵條件；并采用蘆薈益生菌發(fā)酵液進行抑菌實驗以便確定其抗菌效果，如痤瘡丙酸桿菌；同時通過對其抗氧化性指標的測定，確定該蘆薈益生菌發(fā)酵液的抗氧化能力，如DPPH自由基清除能力的測定、鐵離子螯合能力的測定和總還原力的測定等。本產(chǎn)品采用蘆薈益生菌發(fā)酵液與化妝品輔助原料按比例混合，加工制作成膏狀面膜，經(jīng)感官指標測試、理化指標測試、皮膚刺激性測試和試用效果測試后，確定本產(chǎn)品的安全性和功能性，實現(xiàn)護膚保健的目的。
【專利說明】
一種益生菌蘆薈面膜的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種益生菌蘆薈面膜的制備方法及效果評價，屬于化妝品制備技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]庫拉索蘆薈屬于天然的護膚品，含豐富的天然維生素E、C、A及B族維生素、礦物元素、氨基酸、蘆薈多糖、酚類化合物等，這些基本營養(yǎng)素在保持機體活力和美容護膚的過程中起著重要的作用。其中，蘆薈多糖能夠調(diào)節(jié)機體的細胞免疫和體液免疫水平，激活皮膚基底層的朗罕細胞，增強其在皮膚局部的免疫功能和修復功能，促進其清除皮膚色素，降低抗氧化性損害(包括紫外線)，抗衰老增加皮膚的彈性等功效，尤其針對粉刺的發(fā)生具有良好的治療效果。
[0003]益生菌是指對人和動物機體有益的菌。經(jīng)過一個多世紀的實驗已證明益生菌具有重要的生理功能，目前多應用于保健食品中。實驗證明，益生菌能利用皮膚汗腺排泄的無機鹽、尿酸和尿素等物質(zhì)作為生長因子和營養(yǎng)氮源，從而達到清潔皮膚的功效；同時益生菌代謝產(chǎn)生乳酸等有機酸可使皮膚的PH呈弱酸性，即皮膚正常的pH范圍，從而達到平衡肌膚表面PH的功效;而且益生菌產(chǎn)生的有機酸、雙乙酰和小分子抗菌物質(zhì)等能有效抑制皮膚表面有害菌如痤瘡桿菌的生長繁殖，從而達到很好的抗痘功效。綜上，將益生菌直接或間接涂抹在面部皮膚上，確實可以起到護膚、潔膚的作用。
[0004]現(xiàn)今，面膜已成為眾多護膚品中的必選，在市場上占有較大比重，但是種類的增多、高昂的價格和單一的功效并不能滿足市場需求，而且部分面膜不同程度上采用了各種化學添加劑，存在安全隱患。所以專利中描述了一種更安全、更具功能性的面膜的制備方法，不僅具有蘆薈本身的美白、保濕和抗炎作用，并兼具益生菌潔膚、護膚、抗菌的益生作用，而且因為用材的安全性決定該產(chǎn)品幾乎不存在使用風險。結(jié)合上述，本產(chǎn)品將更具有應用價值和市場競爭力。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為克服上述產(chǎn)品的缺陷與不足，本發(fā)明提出一種益生菌蘆薈面膜的制備方法。
[0006]—種益生菌蘆薈面膜，該蘆薈益生菌面膜中活性益生菌含量達到I X 108CFU/g，所述的活性益生菌為長雙歧桿菌、短雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、鼠李唐乳桿菌、植物乳酸桿菌、德式乳桿菌I:1:1:1:1: I混合，制備復合益生菌懸液。
[0007]本發(fā)明所述蘆薈益生菌面膜的制備方法，包括如下步驟:
A、蘆薈原汁制備:挑選新鮮、飽滿、肉質(zhì)肥厚的庫拉索蘆薈葉，剔除帶有病斑、軟腐的葉片，葉片均重約300?400 g;用酒精擦拭葉片表面，去除表皮，采用榨汁機將葉肉榨成蘆薈原汁，分裝，6000 rpm/min離心10 min，取上清。采用巴氏消毒法將蘆薈原汁滅菌，55°C水浴30min，待冷卻于4 °C冰箱保存，以備用。
[0008]B、發(fā)酵:選用二次活化后的6種益生菌按照1:1比例混合制備復合益生菌懸液，按5%接種量添加到蘆薈原汁中，并輔以葡萄糖，進行共發(fā)酵。
[0009]C、發(fā)酵條件設(shè)定:分別以25 °C、30 °C、37 °C、42 °C設(shè)置溫度梯度，并設(shè)置PH梯度為3、4、5、6、7、8、9;通過活菌計數(shù)法，確定復合益生菌的最佳發(fā)酵條件。
[0010]D、發(fā)酵后處理:發(fā)酵完畢，分裝發(fā)酵液，4°C保存以備用。
[0011]E、抗氧化指標測定及評價:配制相關(guān)試劑，測定DPPH自由基清除能力、超氧自由基清除能力、鐵離子螯合能力和總還原力，并進行發(fā)酵液的后期評價。
[0012]F、抑菌試驗:取活化的致病菌稀釋至18 CFU/mL左右，分別取100 yL菌液涂布于LB平板，菌液吹干后在平板中小心放入無菌的牛津杯，再向牛津杯中加入六種益生菌的發(fā)酵液上清，將平板于37°C培養(yǎng)，測量其抑菌圈直徑，并照相。
[0013]G、面膜基質(zhì)制作:
所使用材料:A漢生膠1.5% ,B甘油7.5%，C吐溫(20)1.8%，D椰子油2.3%+凡士林1.8% + 二甲基硅油1.6% +羥乙基尿素11% ,E蘆薈益生菌發(fā)酵液32.5%，F(xiàn)去離子水40%，G香精+防腐劑適量；
(I)A+B倒入燒杯內(nèi)調(diào)和(其中甘油加5%)，分散至均勻。
[0014](2)將C和F加入上述燒杯內(nèi)，攪拌均勻，放入水浴鍋加熱至75°C，保溫30min。
[0015](3)取另一燒杯，將D項所有物物料倒入，放入水浴鍋加熱至75°C，保溫30min。
[0016](4)在不停攪拌的同時，將步驟(3)所得的油相混合物料逐漸加入到步驟(2)的燒杯中，全部倒入后加大攪拌轉(zhuǎn)速，將其攪拌分散均勻，靜置乳化8min。
[0017](5)將步驟(4)所得的乳化體攪拌降溫至45°C，然后將E(與剩余2.5%甘油一同加入)攪拌均勻后加入到其中。
[0018](6)攪拌降溫至40°C，加入G，攪拌均勻。
[0019]H、對成品面膜進行感官指標測試(外觀、氣味、使用感受)，理化指標測試(粘度，PH值，耐熱性耐寒性)，皮膚刺激性測試及使用效果評估。
本發(fā)明的有益效果:本產(chǎn)品采用蘆薈益生菌發(fā)酵液與化妝品輔助原料按比例混合，加工制作成膏狀面膜，經(jīng)感官指標測試、理化指標測試、皮膚刺激性測試和試用效果測試后，確定本產(chǎn)品的安全性和功能性，實現(xiàn)護膚保健的目的。
【附圖說明】
[0020]圖1益生菌發(fā)酵液抗氧化參數(shù)測定；
圖2蘆薈益生菌發(fā)酵液抑菌結(jié)果。
【具體實施方式】
[0021]
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式包括但不限于此。
[0022]實施例1:蘆薈益生菌發(fā)酵液發(fā)酵條件確定:
一、蘆薈原汁制備:挑選新鮮、飽滿、肉質(zhì)肥厚的庫拉索蘆薈葉，剔除帶有病斑、軟腐的葉片，葉片均重約300?400 g。用酒精擦拭葉片表面，去除表皮，采用榨汁機將葉肉榨成蘆薈原汁，分裝，6000 rpm/min離心10 min，取上清。采用巴氏消毒法將蘆薈原汁滅菌，55°C水浴30min，待冷卻于4 °C冰箱保存，以備用。
[0023]二、發(fā)酵:選用二次活化后的6種益生菌按照1:1比例混合制備復合益生菌懸液，按5%接種量添加到蘆薈原汁中，并輔以葡萄糖，進行共發(fā)酵。
[0024]三、發(fā)酵條件設(shè)定:分別以25 °C、30 °C、37 °C、42 °C設(shè)置溫度梯度，并設(shè)置PH梯度為3、4、5、6、7、8、9;通過活菌計數(shù)法，確定復合益生菌的最佳發(fā)酵條件。
[0025]實施例2:抗氧化指標的測定及評價
一、相關(guān)試劑:0.2 mmol /T, DPPH 乙醇；150 mmol /T, pH 8.0 Tris-Hcl ； 1.2 mmol/L鄰苯三酚；0.4% FeS04: FeS047H20；l%抗壞血酸；0.2 mol/L氫氧化鈉；10%三氯乙酸；
0.1%鄰二氮菲;P H為6.6磷酸緩沖液;0.1%三氯化鐵。
[0026]二、確定最佳蘆薈發(fā)酵液條件后以最佳條件進行發(fā)酵，發(fā)酵好后于4 V冰箱保存。
[0027]三、抗氧化指標的測定
1.DPPH自由基清除能力的測定
取2ml蘆薈發(fā)酵液，加入0.2mol/LDPPH乙醇溶液2ml，黑暗下室溫反應30min，然后用等體積的三氯甲烷抽提，取上清517nm測OD，對照為去離子水加DPPH溶液。
[0028]2.羥基自由基清除能力的測定
取2 mmol/L的硫酸亞鐵溶液I mL, 6 mmol/L過氧化氫I mL, 6 mmol/L水楊酸I mL,并加入蘆薈飲料I mL，靜置30 min，以蒸餾水為參比，在510 nm處測定吸光度，計算羥自由基的清除率。
[0029]3.3，5_二硝基水楊酸法測定還原糖
A.標準曲線的制作:取8支15 mmX 180 mm試管，分別編號為O至7，向其中依次加入0、
0.2、0.4、0.6、0.8、1.4、1.6、2.0 mL的I mg/mL的葡萄糖標準溶液，然后用蒸饋水定容到2mL再依次加入1.5 mL水楊酸，水浴5 min，取出立即冷卻到室溫，加21.5 mL蒸餾水，搖勻，在540 nm處測定吸光度。
[°03°] B.樣品中還原糖含量的測定:以標準曲線制作中O號為對照，向15 mmX 180 mm試管中加入I mL樣品溶液，I mL蒸餾水和1.5 mL水楊酸，水浴5 min，取出立即冷卻到室溫，加21.5 mL蒸餾水，搖勻，在540 nm處測定吸光度。
[0031]4.對Fe2+的螯合能力的測定
取0.5 mL蘆薈發(fā)酵液中加入0.4%的FeS04溶液0.1 mL混合均勻后，再加入0.1 mL 1%的抗壞血酸溶液和0.2 mol/L氫氧化鈉溶液I mL，37°C下反應20 min，然后用10%的三氯乙酸去除蛋白，取0.4 mL上清并加入4 mL 0.1%鄰二氮菲，室溫反應10 min，測定536 nm處吸光度。
[0032]5.總還原力的測定
取I mL的樣品，加入P H為6.6的磷酸緩沖液I mL和1%鐵氰化鉀溶液I mL，混勻，在50°C下保溫20 min,加入10 %的三氯乙酸溶液I mL，振蕩混勻后取I mL的混合液，加入4 mL去離子水和0.1 %的三氯化鐵溶液0.4 mL，靜置10 min，用去離子水為空白，在700nm下進行比色，吸光度的值越大，說明還原力越強。
[0033]實施例3:抑菌試驗
實驗材料:益生菌、鼠傷寒、腸炎沙門、福氏志賀、大腸0157、單增ATCC、志賀301、金黃色葡萄球菌ccwanl、庫拉索蘆薈、LB培養(yǎng)基、牛津杯。
[0034]實驗步驟:
A活化益生菌、致病菌，過夜培養(yǎng)。
[0035]B將致病菌菌體濃度調(diào)至18 CFU/mL左右，分別取100 yL菌液涂布于LB平板。
[0036]C待菌液吹干后，在平板中小心放入無菌的牛津杯；向牛津杯中加入蘆薈益生菌發(fā)酵液。
[0037]D 37Γ培養(yǎng)6-8 h，每隔2?3 h觀察。
[0038]E測量平板中的抑菌圈直徑，并照相。
[0039]實施例1的結(jié)果表明，在37 °C，PH=7的條件下發(fā)酵48 h，10000 rpm/min 10離心后，發(fā)酵液澄清透亮。
[0040]實施例2的結(jié)果表明，DPPH自由基清除能力實驗中，清除率達到29.92%，說明蘆薈益生菌發(fā)酵液對自由基清除能力較弱;羥基自由基清除能力的測定實驗，清除率為50.60%，說明蘆薈益生菌發(fā)酵液對羥基自由基清除能力較強;對Fe2+的螯合能力的測定中，螯合率為81.48%，說明蘆薈益生菌發(fā)酵液對鐵離子的螯合能力較強;總還原力的測定實驗，數(shù)值為
0.164，說明蘆薈益生菌發(fā)酵液具有一定還原力，但還原力較弱;在還原糖測定實驗中，根據(jù)標準曲線計算得出還原糖含量為28.35 mg/mL ο
[0041 ]實施例3的結(jié)果表明，蘆薈益生菌發(fā)酵液對痤瘡桿菌的抑制效果良好。
【主權(quán)項】
1.一種益生菌蘆薈面膜的制備方法，其特征在于:包括如下步驟: A、蘆薈原汁制備:挑選新鮮、飽滿、肉質(zhì)肥厚的庫拉索蘆薈葉，剔除帶有病斑、軟腐的葉片，葉片均重約300?400 g;用酒精擦拭葉片表面，去除表皮，采用榨汁機將葉肉榨成蘆薈原汁，分裝，6000 rpm/min離心10 min，取上清；采用巴氏消毒法將蘆薈原汁滅菌，55 °C水浴30min，待冷卻于4°C冰箱保存，以備用； B、發(fā)酵:選用二次活化后的6種益生菌混合制備復合益生菌懸液，按5%接種量添加到蘆薈原汁中，并輔以葡萄糖，進行共發(fā)酵； C、發(fā)酵條件設(shè)定:分別以25°C、30 °C、37 °C、42 °C設(shè)置溫度梯度，并設(shè)置PH梯度為3、4、5、6、7、8、9;通過活菌計數(shù)法，確定復合益生菌的最佳發(fā)酵條件； D、發(fā)酵后處理:發(fā)酵完畢，分裝發(fā)酵液，4°C保存以備用； E、抗氧化指標測定及評價:配制相關(guān)試劑，測定DPPH自由基清除能力、超氧自由基清除能力、鐵離子螯合能力和總還原力，并進行發(fā)酵液的后期評價； F、抑菌試驗:取活化的致病菌稀釋至18CFU/mL左右，分別取100 yL菌液涂布于LB平板，菌液吹干后在平板中小心放入無菌的牛津杯，再向牛津杯中加入六種益生菌的發(fā)酵液上清，將平板于37 °C培養(yǎng)，測量其抑菌圈直徑，并照相； G、面膜基質(zhì)制作:所使用材料:A漢生膠1.5%,B甘油7.5%，C吐溫201.8%，D椰子油2.3%+凡士林1.8% + 二甲基硅油1.6% +羥乙基尿素11% ,E蘆薈益生菌發(fā)酵液32.5%，F(xiàn)去離子水40%，G香精+防腐劑適量； (1)A+B倒入燒杯內(nèi)調(diào)和，其中甘油加5%，分散至均勻； (2)將C和F加入上述燒杯內(nèi)，攪拌均勻，放入水浴鍋加熱至75°C，保溫30min; (3)取另一燒杯，將D項所有物物料倒入，放入水浴鍋加熱至75°C，保溫30min; (4)在不停攪拌的同時，將步驟(3)所得的油相混合物料逐漸加入到步驟(2)的燒杯中，全部倒入后加大攪拌轉(zhuǎn)速，將其攪拌分散均勻，靜置乳化8min; (5)將步驟(4)所得的乳化體攪拌降溫至45°C，然后將E與剩余2.5%甘油一同加入攪拌均勻后加入到其中； (6)攪拌降溫至40°C，加入G，攪拌均勻。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種益生菌蘆薈面膜的制備方法，其特征在于:所述6種活性益生菌為長雙歧桿菌、短雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、鼠李唐乳桿菌、植物乳酸桿菌、德式乳桿菌，其比例為1:1:1:1:1:1。
【文檔編號】A61Q19/00GK105853303SQ201610367765
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年5月30日
【發(fā)明人】陳廷濤, 辛洪波, 王鑫, 周海婷
【申請人】南昌大學