微粉化特考韋瑞一水化物的再水化的制作方法
【專利說明】
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用:
[0002]本申請(qǐng)要求2013年11月19日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?1/906,119的權(quán)益，其公 開內(nèi)容由此通過引用被全部并入本文。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003 ]本文描述了用于制備特考韋瑞(Te co v i r i mat)的穩(wěn)定微粉化一水化物形式的方法 和其治療或預(yù)防病毒感染以及與其相關(guān)的疾病一一具體是由正痘病毒引起的那些病毒感 染和相關(guān)的疾病--的用途。專利商品名為ST-246?的特考韋瑞具有N_[(3aR，4R，4aR， 5aS，6S，6aS)-3，3a，4，4a，5，5a，6，6a-八氛-1，3-一氧代 _4，6-亞乙烯基環(huán)丙并[f]異吲噪-2 (1H)-基]-4-(三氟甲基)-苯甲酰胺的化學(xué)名。
【背景技術(shù)】
[0004] 正痘病毒屬(正痘病毒科(Orthopoxviridae))是痘病毒科家族和脊椎動(dòng)物痘病毒 亞科(Choropoxivirinae)亞家族的成員。所述屬由在人和動(dòng)物種群中引起重大疾病的許多 病毒組成。正痘病毒屬中的病毒包括牛痘(cowpox)、猴痘、牛痘(vaccinia)和痘瘡(天花）， 其全部都可以感染人類。
[0005] 天花(痘瘡)病毒是特別重要的。最近對(duì)天花病毒用作生物武器的關(guān)注已經(jīng)強(qiáng)調(diào)了 開發(fā)靶向正痘病毒的小分子療法的必要性。痘瘡病毒是高度可傳染的并且在人體中引起導(dǎo) 致高死亡率的嚴(yán)重疾病(Henderson等（1999)JAMA. 281:2127-2137)。而且，存在痘瘡用作生 物武器的先例。在法國(guó)人和印第安人戰(zhàn)爭(zhēng)（1754-1765)期間，為了引發(fā)流行病，英國(guó)士兵給 美國(guó)印第安人分發(fā)天花患者使用過的毛毯(Stern,E.W.和Stern,A.E. 1945.The effect of smallpox on the destiny of the Amerindian.Boston)。所引起的爆發(fā)在一些印第安人 部落中導(dǎo)致了 50 %的死亡率(Stern，E. W.和Stern，A. E.)。最近，蘇維埃政府啟動(dòng)了一個(gè)項(xiàng) 目以生產(chǎn)在霧化懸浮液中的強(qiáng)毒的武器化形式的痘瘡(Henderson，同上）。更關(guān)注的是觀察 到已經(jīng)開發(fā)的重組形式的痘病毒在接種疫苗的動(dòng)物中具有引發(fā)疾病的可能性(Jackson等 (2001)J.Virol.,75:1205-1210)。
[0006] 天花疫苗項(xiàng)目在1972年終止;因而，許多個(gè)體不再對(duì)天花感染免疫。甚至已接種疫 苗的個(gè)體也可能不再受到完全保護(hù)，特別是針對(duì)病毒的強(qiáng)毒或重組株(Downie和McCarthy. (1958) J Hyg. 56:479-487; Jackson，同上）。因此，如果痘瘡病毒被故意地或意外地再引入 人群，則死亡率將是高的。
[0007] 痘瘡病毒經(jīng)由霧化液滴天然地傳播至呼吸道粘膜，其中在淋巴組織中的復(fù)制產(chǎn)生 持續(xù)1-3天的無癥狀的感染。病毒通過淋巴散布至皮膚，其中在小的真皮血管中的復(fù)制和隨 后的感染與相鄰表皮細(xì)胞的細(xì)胞溶解產(chǎn)生皮膚損傷(M 〇SS，B.(1990)P〇XViridae and Their Replication,2079-2111. In B.N.Fields and D.M.Knipe(eds.),Fields Virology.Raven Press, Ltd., New York)。兩種形式的疾病與痘瘡病毒感染相關(guān)；重型天 花，最常見的疾病形式，其產(chǎn)生30%的死亡率;和輕型天花，其較少流行并且很少導(dǎo)致死亡 (〈1%)。死亡是播散性血管內(nèi)凝血、低血壓和心血管性虛脫的結(jié)果，其可通過罕見的出血性 天花中的凝血缺陷而加劇(Moss，同上）。
[0008] 最近爆發(fā)的猴痘病毒強(qiáng)調(diào)了開發(fā)靶向正痘病毒屬中病毒的小分子療法的需要。猴 痘在美國(guó)的出現(xiàn)代表了新興的感染。猴痘和天花在人類中引起相似的疾病，然而，猴痘的死 亡率較低（1%)。
[0009] 接種疫苗是目前用于預(yù)防正痘病毒疾病，特別是天花疾病的手段。使用牛痘病毒 的減毒株開發(fā)天花疫苗，所述牛痘病毒的減毒株局部復(fù)制并在大于95%的接種疫苗的個(gè)體 中提供對(duì)痘瘡病毒的保護(hù)性免疫(Modlin(2001)MMWR(Morb Mort Wkly Rep)50:l-25)。與 接種疫苗相關(guān)的不良事件(adverse advent)頻繁發(fā)生（1:5000)，并且其包括全身性牛痘和 牛痘從接種疫苗位點(diǎn)的無意轉(zhuǎn)移。更加嚴(yán)重的并發(fā)癥比如腦炎以1:300,000的比率出現(xiàn)，其 通常是致命的（Modlin，同上）。不良事件的風(fēng)險(xiǎn)在免疫功能不全的個(gè)體中甚至更加明顯 (Engler等(2002)J Allergy Clin Immunol.ll0:357_365)。因而，接種疫苗對(duì)于患有艾滋 病或者過敏性皮膚病的人是禁忌的(Engler等）。雖然保護(hù)性免疫持續(xù)許多年，但是對(duì)天花 接種疫苗應(yīng)答的抗體在接種后的10至15年顯著地減少(Downie，同上）。此外，接種疫苗可能 對(duì)重組形式的正痘病毒沒有保護(hù)性。最近的研究顯示，表達(dá)IL-4的重組形式的鼠痘病毒在 接種疫苗的小鼠中引起死亡(Jackson，同上）?？紤]到與接種疫苗相關(guān)、免疫功能不全個(gè)體 的禁忌癥和不能抵御病毒的重組株的副作用，需要用于治療天花病毒感染的更好的預(yù)防法 和/或新的療法。
[0010] 牛痘病毒免疫球蛋白（VIG)已經(jīng)用于治療接種疫苗后的并發(fā)癥。VIG是來源于接受 牛痘病毒疫苗的個(gè)體的血漿的免疫球蛋白級(jí)分的等滲無菌溶液。其用于治療牛痘性濕疹 (eczema vaccinatum)和一些形式的進(jìn)行性牛痘苗。由于該產(chǎn)品是限量可用的并且難以獲 得，所以還沒有指示將它用于泛發(fā)性天花爆發(fā)的事件(Modlin，同上）。
[0011] 西多福韋(Cidofovir) ([ (S)-1-(3-羥基-2-膦?；籽趸?胞嘧啶][HBMPC]) 是被批準(zhǔn)用于治療艾滋病患者中CMV視網(wǎng)膜炎的核苷類似物。西多福韋已經(jīng)顯示具有在體 外對(duì)抗多個(gè)含DNA的病毒--包括腺病毒、皰疹病毒、肝DNA病毒、多瘤病毒、乳頭狀瘤病毒 和正痕病毒--的活性（Bronson等（1990)Adv · Exp .Med · Biol · 278: 277-83 ;De Clercq等 (1987)Antiviral Res.8:26卜272;de Oliveira等（1996)Antiviral Res.31:165-172; Snoeck等（2001 )Clin Infect. Dis. 33: 597-602)。也已經(jīng)發(fā)現(xiàn)西多福韋抑制真實(shí)痘瘡病毒 復(fù)制（Smee等（2002)Antimicrob.Agents Chemother.46:1329-1335) 〇
[0012] 然而，西多福韋施用與許多問題相關(guān)。西多福韋生物可利用度差并且必須被靜脈 內(nèi)施用(Laezari等（1997)Ann. Intern .Med .126:257-263)。而且，在靜脈內(nèi)施用時(shí)，西多福 韋產(chǎn)生劑量限制性腎毒性(Lalezari等）。此外，已經(jīng)注意到多種病毒的西多福韋抗性。通過 在藥物的存在下重復(fù)傳代，已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室分離出西多福韋抗性的牛痘(cowpox)、猴痘、牛痘 (vaccinia)和胳盤痘病毒變體(Smee，同上）。西多福韋抗性表示使用該化合物治療正痘病 毒復(fù)制的顯著限制。因而，生物利用度差、需要靜脈內(nèi)施用、和抗性病毒的流行強(qiáng)調(diào)了開發(fā) 治療正痘病毒感染的另外的和替代的療法的需要。
[0013] 除了病毒聚合酶抑制劑比如西多福韋之外，已經(jīng)報(bào)道了許多其它化合物來抑制正 痘病毒復(fù)制(De Clercq ·( 2001 )C1 in Microbiol. Rev · 14:382-397)。歷史上，美替沙腙-- 原型的硫代縮氨基脲一一已經(jīng)用于天花感染的預(yù)防性治療（Bauer等（ 1969) Am. J Epidemiol. 90:130-145)。然而，該化合物種類還沒有獲得許多關(guān)注，因?yàn)楦旎ㄍǔ?dǎo) 致不能接受的副作用比如嚴(yán)重的惡心和嘔吐。作用機(jī)制研究表明美替沙腙干擾L基因的翻 譯(De