一種用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位凝膠的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位 凝膠。
【背景技術(shù)】
[0002] 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是以關(guān)節(jié)滑膜慢性炎癥為主的自身免疫性疾病，可引起關(guān)節(jié)腫 痛，破壞關(guān)節(jié)軟骨，導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形，最終引發(fā)不同程度的殘疾。該病全球發(fā)病率為0.5~1 %。 女性的發(fā)病率通常為男性的2~3倍，如不及時(shí)治療，會(huì)導(dǎo)致關(guān)節(jié)破壞和畸形，影響到患者生 活質(zhì)量。
[0003] 該病的發(fā)病原因尚不完全清楚。過去幾十年的研究顯示，多種炎癥途徑與類風(fēng)濕 性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病存在關(guān)聯(lián)。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎最初表現(xiàn)為滑膜炎性反應(yīng)，包括血管分布以及 通透性增加，主要表現(xiàn)為抗原驅(qū)動(dòng)⑶4+細(xì)胞增加。這些細(xì)胞產(chǎn)生出不同的細(xì)胞因子，如INF-γ、TNF_a等，進(jìn)而激活單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和滑膜成纖維細(xì)胞產(chǎn)生過量炎性細(xì)胞因子幾-l、IL-6、TNF-a等，導(dǎo)致炎性反應(yīng)的持續(xù)發(fā)生和軟骨漸進(jìn)性破壞。其他細(xì)胞因子如IL-17、 IL-18、IL-15和趨化因子等也存在于炎性滑液膜中，這些分子可觸發(fā)信號(hào)傳導(dǎo)通路，誘導(dǎo) 各種負(fù)責(zé)炎癥和組織退化基因的表達(dá)。
[0004] 甲氨蝶呤(Methotrexate，CAS 59-05-2)是一種具有多種用途的藥物活性成分，可 用于銀肩病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及癌癥的治療。但該藥存在諸多毒性反應(yīng)如潰瘍性口腔炎、末 梢血管擴(kuò)張、骨髓抑制、急性肝萎縮、偏癱、驚厥等。
[0005] 在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的臨床治療中，目前甲氨蝶呤屬首選藥物之一。通常為口服或 靜脈注射等方式全身性給藥，存在不同程度的不良反應(yīng)。如何降低其不良反應(yīng)是目前主要 的研究方向之一。降低甲氨蝶呤的毒性反應(yīng)，將會(huì)為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的治療提供新的突破。
[0006] 為提高甲氨喋呤對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的治療作用，避免全身給藥的廣泛毒性。近年國(guó) 外已在研究甲氨喋呤乳化微球或中心載體制劑進(jìn)行關(guān)節(jié)腔注射，以減慢局部清除、增強(qiáng) 關(guān)節(jié)腔內(nèi)藥物濃度，進(jìn)一步提高藥效，減低其不良反應(yīng)。但關(guān)節(jié)腔注射操作難度大，且注射 本身會(huì)對(duì)關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)造成損傷。
[0007] 王婷等制備了甲氨喋呤的皮下注射用原位凝膠(趙歡喆，王婷，廖旎彥，丁勁松. 甲氨蝶呤皮下注射用原位凝膠的研制.中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志.2014，第4期，第466-469頁(yè))并 進(jìn)行了體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究（陳姍姍，王婷，朱騰偉，王峰，丁勁松.皮下注射甲氨蝶呤原位凝 膠的兔體內(nèi)藥動(dòng)學(xué).中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志.2014，45(5) :466-469)，但該原位凝膠僅能實(shí)現(xiàn)緩 釋效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的提供一種用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射 用原位凝膠。
[0009] 為實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為： 一種用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位凝膠，由醫(yī)藥學(xué)上可接受的輔料和以 下重量比的原料制成：甲氨蝶呤30~60重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段3~9重量份。
[0010] 作為本發(fā)明的皮下注射用原位凝膠的一個(gè)優(yōu)選方案，所述原料的重量比為：甲氨 蝶呤35重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段4重量份。
[0011] 作為本發(fā)明的皮下注射用原位凝膠的另一優(yōu)選方案，所述原料的重量比為：甲氨 蝶呤58重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段8重量份。
[0012] 作為本發(fā)明的皮下注射用原位凝膠的又一優(yōu)選方案，所述原料的重量比為：甲氨 蝶呤40重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段5重量份。
[0013] 作為本發(fā)明的皮下注射用原位凝膠的再一優(yōu)選方案，所述原料的重量比為：甲氨 蝶呤56重量份、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段4重量份。
[0014] 作為本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步優(yōu)化，上述皮下注射用原位凝膠中所述醫(yī)藥學(xué)上可 接受的輔料包括碳酸鈉、泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M和去離子水； 所述原位凝膠的制備方法包括如下步驟： 1) 取處方量甲氨蝶呤、HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段加入去離子水，攪拌均勻，加碳酸 鈉調(diào)pH為7.2~7.6，制成配液A，配液A中甲氨蝶呤濃度為lmg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分?jǐn)?拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重量百 分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0015] 本發(fā)明的技術(shù)方案中所述的HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段，氨基酸序列為 YGRKKRRQRRR，CAS號(hào)為191936-91-1，屬于已上市產(chǎn)品，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的。
[0016] 在治療過程中，可將本發(fā)明的皮下注射用原位凝膠在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患處關(guān)節(jié)進(jìn) 行皮下注射給藥。局部給藥尤其是皮下注射給藥在患處附近或患病部位給藥更有利于藥物 到達(dá)患處，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是公知的常識(shí)。
[0017]本發(fā)明的發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，采用皮下注射給藥時(shí)，HIV-I-TAT蛋白47-57多肽 片段能夠顯著提高甲氨蝶呤在關(guān)節(jié)腔內(nèi)的分布量;HIV-I-TAT蛋白47-57多肽片段與甲氨蝶 呤的組合物制備成原位凝膠后，通過皮下注射給藥則能夠?qū)崿F(xiàn)甲氨蝶呤的緩釋效果，同時(shí) 提高藥物在關(guān)節(jié)腔的分布量，避免藥物全身分布導(dǎo)致的廣泛毒性作用，也可避免關(guān)節(jié)腔注 射對(duì)身體的損傷，提高甲氨蝶呤的療效，同時(shí)降低甲氨蝶呤的毒性。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的解釋。應(yīng)當(dāng)理解的是，以下實(shí)施例僅用于解 釋本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0019] 實(shí)施例1用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取甲氨蝶呤350g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段40g，加入去離子水，攪拌均勻， 加碳酸鈉調(diào)pH為7.4，制成配液A，配液A中甲氨蝶呤濃度為lmg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分?jǐn)?拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重 量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3)將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0020]實(shí)施例2用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取甲氨蝶呤580g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段80g，加入去離子水，攪拌均勻， 加碳酸鈉調(diào)pH為7.3，制成配液A，配液A中甲氨蝶呤濃度為lmg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分?jǐn)?拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重 量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0021 ]實(shí)施例3用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取甲氨蝶呤400g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段50g，加入去離子水，攪拌均勻， 加碳酸鈉調(diào)pH為7.5，制成配液A，配液A中甲氨蝶呤濃度為lmg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分?jǐn)?拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重 量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0022] 實(shí)施例4用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取甲氨蝶呤560g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段40g，加入去離子水，攪拌均勻， 加碳酸鈉調(diào)pH為7.5，制成配液A，配液A中甲氨蝶呤濃度為lmg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分?jǐn)?拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重 量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0023] 實(shí)施例5用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取甲氨蝶呤590g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段60g，加入去離子水，攪拌均勻， 加碳酸氫鈉調(diào)pH為7.5，制成配液A，配液A中甲氨蝶呤濃度為2mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分?jǐn)?拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重 量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0024] 實(shí)施例6用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位凝膠的制備 1) 取甲氨蝶呤340g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段55g，加入去離子水，攪拌均勻， 加碳酸氫鈉調(diào)pH為7.3，制成配液A，配液A中甲氨蝶呤濃度為3mg/ml; 2) 向配液A中依次加入泊洛沙姆P407、泊洛沙姆P188、羥丙基甲基纖維素 K4M，充分?jǐn)?拌，分散均勻，得配液B，配液B中泊洛沙姆P407的重量百分比為20%，泊洛沙姆P188的重 量百分比為1.2%，羥丙基甲基纖維素 K4M的重量百分比為0.3%; 3) 將配液B液4°C下溶脹24 h，過0.22 μπι微孔濾膜，分裝即得。
[0025] 實(shí)施例7用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的皮下注射用原位凝膠的制備 1)取甲氨蝶呤340g、HIV-1-TAT蛋白47-57多肽片段55g，加入去離子水，攪拌均勻