針對藥物成癮的疫苗組合物的制作方法
【專利說明】針對藥物成聽的疫苗組合物
[0001] 政府資助聲明
[0002] 本發(fā)明是在美國政府支持下由國家藥物濫用研究所(化tional Institutes of Drug Abuse)授予的基金號5R43DA033845資助完成。政府對本發(fā)明擁有某些權(quán)利。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003] 本發(fā)明一般設(shè)及針對藥物成癒的疫苗。具體而言，本公開內(nèi)容提供用于顯著改善 針對藥物成癒的抗原產(chǎn)生的免疫應(yīng)答的佐劑。
[0004] 背景
[000引成癒性藥物濫用素亂伴隨著多種特定且公認(rèn)的后遺癥，其同時具有社會和經(jīng)濟影 響。運些包括死亡、疾病、暴力、犯罪、失業(yè)、生產(chǎn)率下降、關(guān)系與家庭破裂，W及HIV和其它性 傳播疾病的擴散。1992年，美國社會藥物濫用(排除煙草）的經(jīng)濟成本估計為980億美元，運 是能夠獲得可靠數(shù)據(jù)的最后一年（"美國1992年酒精與藥物濫用的經(jīng)濟成本"，國家藥物濫 用研究所）。運些成本包括犯罪(591億美元）、過早死亡（146億美元）、生產(chǎn)力降低/工傷（142 億美元）、福利（104億美元）、衛(wèi)生保健（55億美元）和機動車事故。運些成本主要由政府 (46%)、藥物濫用者及其家庭（44%)承擔(dān)。公認(rèn)的是，藥物濫用仍然是一嚴(yán)重社會問題。 1992年研究后的S年，在1995年，NIDA估計的藥物濫用的社會成本是1100億美元。
[0006] 濫用的藥物本身可對使用者具有有害影響。然而，認(rèn)為運些藥物的成癒性既是與 此類藥物的應(yīng)用相關(guān)聯(lián)的問題的核屯、，又是無力治療成癒個體并減少藥物成癒在社會上的 流行的根基。
[0007] 世界上最廣泛應(yīng)用的成癒性藥物是煙草。估計世界范圍內(nèi)有12億吸煙者，包括美 國的4600萬和歐洲的1.7億。煙草成癒是癌癥和屯、臟病的最大單一誘因，導(dǎo)致約5百萬人死 亡/年(Jha，P.，《通過死亡計數(shù)來挽救生命》世界衛(wèi)生組織公告（Save lives by counting the dead.Bulletin of the World Health Organization),2010.88:第161-240頁）。與吸 煙相關(guān)的對社會和醫(yī)療系統(tǒng)的健康風(fēng)險和經(jīng)濟負(fù)擔(dān)是清楚且不可否認(rèn)的。每年，在美國，有 近乎一半的吸煙者試圖戒煙，但因為尼古下的高成癒性，只有少于5%的人成功（吸煙的后 果：衛(wèi)生部長的報告，美國，2004;可獲自：surgeongeneral.gov/library/ smokingconsequences/;Fiore,M.C.等.煙草應(yīng)用與依賴的治療"（lYeating Tobacco Use and Dependence).《臨床醫(yī)師快速參考指南2000》（Quick Reference Guide for Clinicians 2000);可獲自：surgeongeneral.gov/tobacco/tobaqrg.htm.)。對于戒煙的協(xié) 助方法包括支持性輔導(dǎo)和尼古下替代法，而運些方法不會改變依賴性，并且，尼古下替代法 開始后12個月的評價顯示在戒煙方面的<10%的慘淡成功率(Stead,L.F.等，"用于戒煙的 尼古下替代療法"（Nicotine replacement therapy for smoking cessation).系統(tǒng)性綜 述的實證醫(yī)學(xué)資料庫（Cochrane Database of Systematic Reviews) ,2008(1):第 CD000146頁）。在中和尼古下在體內(nèi)的生物學(xué)效應(yīng)，W協(xié)助吸煙者克服其成癒的方面存在明 顯的未滿足的醫(yī)學(xué)需求。
[0008] 原則上，疫苗可誘導(dǎo)能夠結(jié)合并防止尼古下穿過血腦屏障的高親和性抗體，導(dǎo)致 短路的尼古下精神影響（Kinsey，B.M.等，"用于治療物質(zhì)濫用的抗藥疫苗"（Anti-drug vaccines to treat substance abuse). Immunology and Cell Biology，2009.87(4):第 309-14頁;LeSage，M.G.等，"免疫學(xué)方法治療煙草依賴性的現(xiàn)狀:疫苗和煙堿特異性抗體" (Current status of immunologic approaches to tre過ti打g tob過cco dependence: vaccines and nicotine-specific antibodies).The AAPS Journal,2006.8(1):第E65-75頁;Moreno, A. Y.和K.D. Janda/免疫藥物治療:作為藥物濫用和依賴性治療的疫苗方案" (Immunopharmacotherapy:vaccination strategies as a treatment for drug abuse and dependence).Pharmacology,Biochemistry,and Behavior，2009.92(2):第199-205 頁;Polosa，R?和N. L.Benowitz，"尼古下成瘤治療:現(xiàn)有治療選擇和途徑開發(fā)"（Treatment of nicotine addiction!present therapeutic options and pipeline developments) .Trends in Pharmacological Sciences，2011.32(5):第281-9頁）D其產(chǎn)生的副作用少于 當(dāng)前的抗吸煙藥物，并且可安全地與其它藥物治療聯(lián)合。已在人中測試了抗尼古下疫苗 (Cerny，E.H.和T.Cerny,抗尼古了疫苗（Vaccines against nicotine).Human Vaccines, 2009.5(4):第200-5頁;Escobar-Chavez J. J?等，"靴向尼古下成瘤：治療性疫苗的可能性，' (T過rgeting nicotine 過ddiction:the possibility of 過 therapeutic v過ccine.)Drug Design,Development and Therapy ,2011 ? 5:第211-24頁）D總體上，均呈現(xiàn)安全，但其性能 就在人中誘導(dǎo)的高度多變的抗體應(yīng)答而言較弱，需要在數(shù)月期間重復(fù)注射(5-7X)大量的抗 原（100-500ug)，并且存在抗體效價隨時間降化的現(xiàn)實(Cornuz，J.等，"用于戒煙的尼古下 疫苗：--項隨機控制試驗，'（A vaccine against nicotine for smoking cessation: a randomized controlled trial.)PloS One,2008.3(6):第e2547頁；Hatsukami，D.K?等， "新型尼古下免疫療法的免疫原性和戒煙的結(jié)果"（Immunogenicity and smoking-cessation outcomes for a novel nicotine immunotherapeutic).Clinical Pharmacology and 化erapeutics ,2011.89(3):第392-9頁；Hatsukami，D .K?等，"尼古下偶 聯(lián)物疫苗對現(xiàn)有吸煙者的安全性和免疫原性，'（Safety and immunogenicity of a nicotine conjugate vaccine in current smokers).Clinical Pharmacology and 化erapeutics ,2005.78(5):第456-67頁;Maurer, P?等/用于尼古下依賴性的治療性疫苗： 臨床前功效，1^及1期安全性和免疫原性，'（A therapeutic vaccine for nicotine dependence:preel ini cal efficacy , and Phase I safety and immunogenicity) ? European Journal of Immunology, 2005.35(7):第2031-40 頁）D 不過，觀察到功效的趨 勢。具有最高抗尼古下Ab應(yīng)答(前30%)的NicVAX(偶聯(lián)至細菌外蛋白A的尼古下）的接受者 比安慰劑接受者更有可能（24.6%對比12.0%)達到8周的連續(xù)禁戒化3巾3扯31111，0.1(.等， ('親片型尼古下免疫治療的免疫原性和戒煙結(jié)果，'（Immunogenicity and smoking-cessation outcomes for a novel nicotine immunotherapeutic).Clinical Pharmacology and 化erapeutics ,2011.89(3):第392-9頁）D不幸的是，NicVax在最近的HI期研究中無法實現(xiàn) 其原來的功效r納比生物制藥公司宣布首個N妃VAX?III期臨床試驗的結(jié)果（Nabi Biopharmaceuticals Announces Results of First NicVAX? Phase III Clinical Trial)，'，Globe Newswire,2011年7月 18 日；和www.nabi .com)，從而其開發(fā)目前尚存疑問。 對于與成瘤抗?fàn)幍娜藗儊碚f，針對濫用藥物的疫苗是一個好想法，但持久長期的抗體應(yīng)答 的實現(xiàn)仍需要疫苗技術(shù)的顯著改善。本發(fā)明提供了這一優(yōu)勢W及其它優(yōu)勢。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明的一個方面提供一種疫苗組合物，所述疫苗組合物包含：與載體蛋白偶聯(lián) 的一種或多種成癒藥物半抗原;藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑，和下式的脂質(zhì)佐劑：
[00川其中：Ri、R3、R哺R6是C11-C20烷基;且R哺R4是C12-C20烷基。在某些實施方式中，Ri、 R3、R哺R墻十一烷基，而R哺R4是十立烷基。在某些實施方式中，所述組合物是水性制劑。在 其它實施方式中，所述組合物是如下形式:水包油乳液、油包水乳液或微顆粒。在本文所述 的疫苗組合物的另一個實施方式中，所述成癒藥物半抗原選自下組：安非他命、脫氧麻黃 堿、可卡因、咖啡因、尼古下、己比妥類、苯乙贓晚酬、苯并二氮草、佐匹克隆、甲哇酬、哇挫嘟 酬，和鴉片或類鴉片鎮(zhèn)痛劑。在一個相關(guān)實施方式中，苯并二氮葦選自下組:地西泮、阿普挫 侖、氣硝西泮、=挫侖、替馬西泮，和硝甲西泮。在某些實施方式中，鴉片或類鴉片鎮(zhèn)痛劑選 自下組：二乙酷嗎啡、氣硝西泮、嗎啡、可待因、阿片、海洛因、氧可酬、下丙諾啡、氨化嗎啡 酬、芬太尼、贓替晚和美沙酬。
[0012] 在本發(fā)明的一個實施方式中，本文所述的疫苗組合物可包含約2.化g或更多GLA/ 劑量疫苗。在其他實施方式中，所述疫苗包含約化g至約IOyg GLA/劑量疫苗，或約化g至約8 Jig GLA/劑量疫苗，或約化g至約化g GLA/劑量疫苗，或可包含約化g GLA/劑量疫苗。
[0013] 在本發(fā)明的另一個方面提供一種用于針對成癒性藥物誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的方法，所述 方法包括:給予有此需要的患者本文所述的疫苗組合物，例如，包含如下物質(zhì)的疫苗組合 物:與載體蛋白偶聯(lián)的一種或多種成癒藥物半抗原;藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑，和下式 的脂質(zhì)佐劑：
[001引其中北、護、護和護是打1-〔2偏基;且護和於是(：12-〔2偏基。
[0016]在本發(fā)明的另一個方面提供一種治療藥物成癒的方法，所述方法包括:給予有此 需要的患者治療有效量的疫苗組合物，所述疫苗組合物包含：與載體蛋白偶聯(lián)的一種或多 種成癒藥物半抗原;藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑，和下式的脂質(zhì)佐劑：
[0018] 其中：r1、R3、R哺R墻Cu-C2〇烷基;且R哺R4是。2-C20烷基。
[0019] 本發(fā)明的另一個方面提供一種用于針對藥物成癒提高戒癒率或降低復(fù)發(fā)率或同 時實現(xiàn)兩者的方法，所述方法包括:給予有此需要的患者治療有效量的本文所述的疫苗組 合物，例如，本文所述的疫苗，例如，包含如下物質(zhì)的疫苗組合物:與載體蛋白偶聯(lián)的一種或 多種成癒藥物半抗原;藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑，和下式的脂質(zhì)佐劑：
[0021] 其中：r1、R3、R哺R墻C11-C2偏基;且R哺R4是C12-C2偏基。
[0022] 附圖的簡要說明
[0023] 圖IA顯示用于測試，相對于明抓尼古下疫苗制劑，KLH-尼古下+GLA-沈刺激優(yōu)越的 持久抗體應(yīng)答的能力的初免加強疫苗接種方案。底部的箭頭指示在各時間點進行的試驗。 空屯、箭頭:B細胞試驗-抗體效價、同種型、親和力(第0天、第21天、第35天）。黑色箭頭:T細胞 試驗-CD4數(shù)量和表型（第0天、第10天、第28天）。圖IB和圖IC顯示抗尼古下抗體在疫苗接種 了KLH-偶聯(lián)的尼古下的小鼠中的終點效價。相對于疫苗接種了與明抓配制的KLH-尼古下的 小鼠，疫苗接種了用GLA-沈配制的KLH-尼古下的小鼠顯示終點抗尼古下抗體效價的增加。
[0024] 圖2. (A)包括TCC16的數(shù)種半抗原載體(見文字）中的氨基酸數(shù)量。柱上方報告各載 體中的半抗原偶聯(lián)可用的賴氨酸數(shù)量。(B)各載體蛋白中賴氨酸的百分比。
[0025] 圖3.免疫的小鼠中的抗尼古下抗體應(yīng)答。C57化/6小鼠（5只/組）用PBS或2. Sug的 指示的偶聯(lián)半抗原載體和佐劑注射(第0天、第14天、第131天），并且通過化ISA分析血清的 抗尼古下Ab效價。組間比較通過非成對雙尾t檢驗進行;卸<0.004 ;*卸<0.002。
[0026] 圖4.第160天抗尼古下Ab效價。