一種升麻酚酸類有效成分的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種中藥有效成分的提取方法，具體設(shè)及一種綜合加權(quán)平均響應(yīng)面法 優(yōu)化升麻提取工藝的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 升麻是我國的傳統(tǒng)中藥，具有發(fā)表透疹，清熱解毒，升舉陽氣的功效。用于風(fēng)熱頭 痛，齒痛，口瘡，咽喉腫痛，麻疹不透，陽毒發(fā)斑，脫肛，子宮脫垂。臨床應(yīng)用廣泛，資源豐富。 其中酪酸類成分經(jīng)現(xiàn)代藥理研究具有抗氧化，抗炎，抗血小板凝集，抗腫瘤，降低血糖等作 用，臨床藥效顯著。
[0003] 然而目前升麻提取物的加工生產(chǎn)，沒有統(tǒng)一的標準，仍舊采用陳舊的工藝，造成資 源的浪費，加工質(zhì)量不穩(wěn)定，品質(zhì)較差。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0004] 發(fā)明目的：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，采用綜合加權(quán)平 均響應(yīng)面法優(yōu)化，優(yōu)選得到一種提取得率高，并且酪酸類有效成分含量高，工藝穩(wěn)定可靠， 可操作性強的升麻酪酸類有效成分的提取方法。
[000引技術(shù)方案:為了實現(xiàn)W上目的，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案為：
[0006] -種升麻酪酸類有效成分的提取方法，其特征在于，包括W下步驟：
[0007] 取升麻藥材，粉碎，加升麻藥材重量6~14倍量體積的55~85 %乙醇溶劑，提取1~ 3次，每次50~300min，合并提取液，濃縮得到含有酪酸類成分的升麻提取物。
[0008] 作為優(yōu)選方案，W上所述的升麻酪酸類有效成分的提取方法，包括W下步驟：
[0009] 取升麻藥材，粉碎，加升麻藥材重量8倍量體積的70 %乙醇溶劑，提取2次，每次 220min，合并提取液，濃縮得到含有酪酸類成分的升麻提取物。
[0010] 作為優(yōu)選方案，W上所述的升麻酪酸類有效成分的提取方法，升麻提取物中含有 咖啡酸、阿魏酸和異阿魏酸。
[0011] 作為優(yōu)選方案，W上所述的升麻酪酸類有效成分的提取方法，升麻提取物中含有 重量百分比0.015~0.018%的咖啡酸、0.033~0.041 %的阿魏酸和0.229~0.263%的異阿 魏酸。
[0012] 作為優(yōu)選方案，W上所述的升麻酪酸類有效成分的提取方法，升麻提取物得率為 0.18 ~0.21%。
[001引工藝篩選實驗；
[0014] 1、指標性成分的測定方法：
[0015] 標準曲線的制定:精密稱定咖啡酸，阿魏酸，異阿魏酸對照品適量，加甲醇配制成 濃度分別為47.20，144.80，247.40mg ? L-I的混合對照品?；旌蠈φ掌啡芤?，5，8，10，15，1祉 L，按色譜條件下進行測定，W峰面積(Y)對進樣量(X)進行統(tǒng)計回歸，得咖啡酸，阿魏酸，異 阿魏酸的回歸方程分別為
[0016] Y = 273287X-1149084650(r = 0.9999)；
[0017] Y = 745351X+38143(r = 0.9999)
[0018] Y= 1000000X+283628(r = 0.9995) 〇
[0019] 根據(jù)W上回歸方程，采用HPLC測定升麻中酪酸類成分的含量。色譜條件為：色譜 柱：YMC-化ck-0DS-C4(250 X4.6mm，5皿）；流動乙臘-0.1 % 甲酸溶液（0~12min，5%~13% A;12~23min，13%~18%A;23~30min，18%~5%A);流速：1.0血?min-l;柱溫:30°C;檢測 波長：320nm;進樣量：10化。
[0020] 2、指標性成分的提取：
[0021 ]升麻酪酸類成分的提?。喝∩榻?jīng)粉碎后過2號篩，精確稱取10 . Og升麻粉末于 250mL平底燒瓶中，加乙醇，在水浴鍋中回流提取，過濾即得。
[0022] 3、單因素及響應(yīng)面實驗結(jié)果如下：
[0023] 3.1不同乙醇濃度對升麻酪酸類成分提取率的影響
[0024] 本發(fā)明采用20%~80%不同體積濃度的乙醇提取升麻，由圖1可知，溶媒比10:1， 提取時間120min的條件下，隨著乙醇體積濃度增加，總酪酸的峰面積緩緩上升，當(dāng)乙醇體積 濃度達到70%時，峰面積達到最大值，W后明顯下降，表明采用體積濃度70%乙醇提取升麻 中酪酸類成分教佳。
[0025] 3.2不同溶媒比(mL/g)對升麻酪酸類成分提取率的影響
[0026] 本發(fā)明采用乙醇體積和升麻藥材重量比分別為5~16倍進行提取升麻，由圖2可 知，在乙醇體積濃度為70%，提取時間120min的條件下，隨著溶媒比增加，總酪酸的峰面積 升高，當(dāng)乙醇體積(mL)和升麻藥材重量(g)比為別寸，總酪酸的峰面積達到最大，之后峰面積 明顯下降。W上結(jié)果表明：當(dāng)酪酸成分未飽和時，隨著溶劑量的增加而增加，防止溶液處于 過飽和時，則阻止了有效成分的溶出。
[0027] 3.3不同提取時間對升麻酪酸類成分提取率的影響
[0028] 本發(fā)明通過50~300分鐘不同提取時間提取升麻，圖3可知，在乙醇體積70%，溶媒 比8:1的條件下，隨著提取時間的增加，總酪酸的提取率逐漸升高，當(dāng)時間為240min時，提 取率達到最大，但時間過長時，提取對細胞膜破碎作用也加大，隨之雜質(zhì)也溶出過多，影響 有效成分的提取。
[0029] 4、響應(yīng)面法優(yōu)化實驗：
[0030] 在單因素試驗基礎(chǔ)上，本發(fā)明選取對酪酸類成分影響較大的因素，根據(jù)Box-Benhnken試驗設(shè)計原理，設(shè)計S因素S水平的響應(yīng)面分析試驗，研究乙醇體積分數(shù)、液料比 和提取時間及其交互作用對升麻指標性成分提取率的影響；
[0031 ]單因素及響應(yīng)面實驗包括如下：
[0032] A、乙醇體積分數(shù)(55-85%)對升麻指標性成分的影響
[0033] B、液料比（6:1-10:1)對升麻指標性成分的影響
[0034] C、回流提取時間（180-270min)對升麻指標性成分的影響。
[0035] 查閱文獻和預(yù)試驗，設(shè)定綜合評分滿分為100分，根據(jù)升麻中有效成分含量及藥效 影響，咖啡酸，阿魏酸，異阿魏酸，浸出物權(quán)重系數(shù)分別為20,30,40，10，在此基礎(chǔ)上進行總 加權(quán)評分，利用綜合評分值(P)對試驗結(jié)果進行分析：WY表示試驗中指標成分的測定值，W 各指標的最大值(Ymax)作為參照對同一指標各數(shù)據(jù)進行標準化處理，C表示試驗中該指標成 分的測定值的標準化數(shù)據(jù)(C = Y/Ymax)，綜合評分P = Cb細酸X 20+〇55|嫩X 30+蝴夠嫩X 40+C漬胸 X 10。根據(jù)Box-Behnken中屯、組合試驗設(shè)計原理，綜合單因素影響試驗結(jié)果，選取溶媒比 (Xi)、乙醇濃度(X2)和提取時間（X3)作為考察對象，采用Design Expert 8.0統(tǒng)計分析軟件 的響應(yīng)面分析法安排試驗，W獲取最適工藝參數(shù)。
[0036] 本發(fā)明采用表1綜合加權(quán)平均響應(yīng)面法優(yōu)化升麻提取工藝的試驗設(shè)計及結(jié)果
[0037] 表1:響應(yīng)面法優(yōu)化升麻提取工藝的