一種用于預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料添加劑復(fù)方精油及其制備方法和應(yīng)用
【專利說明】一種用于預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料添加劑復(fù)方精油及其制備方 法和應(yīng)用
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明涉及獸用藥物領(lǐng)域，具體涉及一種用于預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料添加劑復(fù)方精 油及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0003] 沙門氏菌（Salmonella)屬腸桿菌科，沙門氏菌屬，是一大群寄生于人和動物腸 道中形態(tài)培養(yǎng)特性反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu)相似的革蘭氏陰性桿菌沙門氏菌病是一種常見的人畜 共患腸道疾病，在世界各地的細(xì)菌性食物中毒中，沙門氏菌引起的中毒病例占第1或 第2位沙門氏菌活力和抗性都很強(qiáng)，對鴿子威脅普遍且大，是一種極為頑固的病菌，一旦 污染便不容易將其徹底根除7沙門氏菌病菌可由鴿子的唾液8糞便8產(chǎn)蛋等將沙門氏菌排 出體外，也可由污染的飼料8飲水等傳染其他鴿子7沙門氏菌同樣對人類的健康有極大危 害7人感染后會引起傷寒副傷寒和急性腸胃炎。
[0004] 青蒿的化學(xué)成分可分為揮發(fā)性和非揮發(fā)性兩大類，前一類主要是揮發(fā)油，得率為 0. 2%~0. 25%，含蒿酮、異蒿酮、茨烯、旅烯、丁香烯、左旋樟腦、旅烯、月桂烯、檸檬烯等多種 單菇倍半菇類化合物。青蒿油有較強(qiáng)的抗淺部致病性真菌的作用，其抗真菌作用的有效成 分為揮發(fā)油及揮發(fā)油成分的中性和酸性部分。
[0005] 苦豆子油是由苦豆子植物的種子經(jīng)水蒸汽蒸餾所得的揮發(fā)油。具有抗菌之功效， 治皮膚炎癥等。
[0006] 百里香酚（5-甲基-2-異丙基酚)，又名麝香草酚，存在于多種植物的精油中。百 里香酚多用于制作香料、防腐劑、醫(yī)用殺菌劑和驅(qū)蛔蟲劑，近年來研究表明百里香酚具有殺 螨抑菌等多種生物活性。
[0007] 以上三種精油，被歐盟批準(zhǔn)為植保產(chǎn)品，具有抗菌和抗氧化的功效，可用作香精和 防腐劑等。由于以上精油化學(xué)成分不穩(wěn)定，也不溶于水，因此在制劑過程中容易被破壞或 丟失。采用與腐殖酸結(jié)合技術(shù)，將其制成精油結(jié)合物，可提高精油的穩(wěn)定性和可用性，雖 然提高精油制劑的質(zhì)量，但是生產(chǎn)實(shí)踐中的廣泛使用，穩(wěn)定性不夠，效果也不理想。
[0008] 目前我國正在傾力建設(shè)"畜產(chǎn)品安全"工程，要對畜產(chǎn)品中沙門氏菌污染的危害探 討并對其進(jìn)行準(zhǔn)確、快速檢測和實(shí)施有效控制的辦法，以保障畜產(chǎn)品的安全。隨著現(xiàn)代科學(xué) 技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)的不斷發(fā)展，迫切需要提出一種更 快捷、簡便、特異、敏感、低耗且實(shí)用的可以預(yù)防致病沙門氏菌的獸用藥。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明的目的就是針對上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供了一種療效確切、治療效率 高、安全有效、天然、無刺激的用于預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料添加劑復(fù)方精油。
[0010] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種用于預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料添 加劑復(fù)方精油，是由按照重量份計(jì)的以下原料制備得到的：青蒿油5-50份、苦豆子油2-20 份、百里香酚5-50份、腐殖酸2000份。
[0011] 進(jìn)一步的，上述的一種用于預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料添加劑復(fù)方精油，是由按照重量 份計(jì)的以下原料制備得到的：青蒿油25份、苦豆子油16份、百里香酚25份、腐殖酸2000份。
[0012] 本發(fā)明的第二個目的是提供了上述一種用于預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料添加劑復(fù)方精 油的制備方法，按照重量配比稱取青蒿油、苦豆子油和百里香酚，加入50ml乙醇，在室溫下 加入至配比量的腐殖酸中，振蕩18h，減壓蒸出乙醇后，40°C干燥即可。
[0013] 本發(fā)明的第三個目的是提供了上述一種用于預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料添加劑復(fù)方精 油在制備預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料中的應(yīng)用。
[0014] 進(jìn)一步的，上述的應(yīng)用，每公斤肉鴿飼料中添加100g所述的用于預(yù)防肉鴿腹瀉的 飼料添加劑復(fù)方精油。
[0015] 本發(fā)明所提供的用于預(yù)防肉鴿腹瀉的飼料添加劑復(fù)方精油，是活性腐殖酸與精油 結(jié)合成穩(wěn)定的制劑，穩(wěn)定精油主要成分為青蒿油、苦豆子油、百里香酚，吸附劑為腐殖酸，是 活化處理后的產(chǎn)品，通過吸附精油后形成穩(wěn)定的獸用藥物。
[0016] 本發(fā)明采用將青蒿油、苦豆子油和百里香酚精油通過多年生產(chǎn)實(shí)際總結(jié)，進(jìn)行科 學(xué)組方，通過廣泛的市場應(yīng)用所確定，并通過活性腐殖酸進(jìn)行吸附，獲得穩(wěn)定的鴿子防治藥 物。對3種沙門氏致病菌的MIC較小，并與單方精油的抗菌效果進(jìn)行比較，其抗菌效果優(yōu)于 單方精油，為一種優(yōu)良的天然抗菌劑。本發(fā)明的原理：本發(fā)明配方中的精油為飼料添加的抗 菌植物藥，對細(xì)菌、酵母和霉菌的生長有較強(qiáng)的抑制作用。該配方其對仔豬腹瀉等細(xì)菌性感 染有較好的效果。
[0017]本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明是針對在肉鴿飼養(yǎng)過程中使用抗生素的鴿場的用戶 日益下降的局面，抗生素曾經(jīng)為鴿場解決眾多的疾病問題，同時產(chǎn)生了對抗生素產(chǎn)品的耐 藥性和藥物殘留等問題的情況下，根據(jù)中藥配方規(guī)律，科學(xué)組方，通過腐殖酸吸附精油后， 制備的穩(wěn)定新制劑，其組方合理，安全有效，原料易得，制備工藝簡單，易于操作，且生產(chǎn)成 本低。
【附圖說明】
[0018] 圖1為由蘭州市鴿養(yǎng)殖場提供的致病鴿中分離的致病沙門氏菌（P3)的分離過程 示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 實(shí)施例1: 本發(fā)明的原理：本發(fā)明配方中的精油為飼料添加的抗菌植物藥，對細(xì)菌、酵母和霉菌的 生長有較強(qiáng)的抑制作用。
[0020] 組方分別為： 實(shí)驗(yàn)組1 : 青蒿油0. 25g，苦豆子油0. 5g，百里香酚2. 5g，腐殖酸100g。
[0021] 實(shí)驗(yàn)組2: 青蒿油1. 25g，苦豆子油0. 8g，百里香酚1. 25g，腐殖酸100g。
[0022] 實(shí)驗(yàn)組3 : 青蒿油2. 5g，苦豆子油lg，百里香酚0. 25g，腐殖酸100g。
[0023] 對照組1 : 青蒿油4g，腐殖酸100g。
[0024] 對照組2: 苦豆子油4g，腐殖酸100g。
[0025] 對照組3 : 百里香酚4g，腐殖酸100g。
[0026] 具體制備過程： 按照重量配比稱取青蒿油、苦豆子油和百里香酚，加入50ml乙醇，在室溫下加入至配 比量的腐殖酸中，振蕩18h，減壓蒸出乙醇后，40°C干燥即可。
[0027] 實(shí)施例2: 肉鴿致病沙門氏菌的藥敏試驗(yàn)： 沙門氏菌（Salmonella)屬腸桿菌科，沙門氏菌屬，是一大群寄生于人和動物腸道中 形態(tài)、培養(yǎng)特性、反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu)相似的革蘭氏陰性桿菌。沙門氏菌病是一種常見的人畜共 患腸道疾病，在世界各地的細(xì)菌性食物中毒中，沙門氏菌引起的中毒病例占第1或第 2位。沙門氏菌活力和抗性都很強(qiáng)，對鴿子威脅普遍且大，是一種極為頑固的病菌，一旦污 染便不容易將其徹底根除。沙門氏菌病菌可由鴿子的唾液、糞便、產(chǎn)蛋等將沙門氏菌排出體 外，也可由污染的飼料、飲水等傳染其他鴿子。沙門氏菌同樣對人類的健康有極大危害。人 感染后會引起傷寒。副傷寒和急性腸胃炎。
[0028]目前我國正在傾力建設(shè)"畜產(chǎn)品安全"工程，要對畜產(chǎn)品中沙門氏菌污染的危害探 討并對其進(jìn)行準(zhǔn)確、快速檢測和實(shí)施有效控制的辦法，以保障畜產(chǎn)品的安全。隨著現(xiàn)代科學(xué) 技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)的不斷發(fā)展，人們發(fā)明出更快捷、簡 便、特異、敏感、低耗且實(shí)用的沙門氏菌的檢測方法。本試驗(yàn)選取3種復(fù)方精油中藥與3種 對照，進(jìn)行了對沙門氏菌的抑菌活性研究對鴿子養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)，預(yù)防治療和有效控制致病 菌的相互傳染有積極指導(dǎo)作用，為今后進(jìn)一步研究提供寶貴的資料。
[0029] 1材料與方法： 1. 1材料與儀器： 致病沙門氏菌（P3):由蘭州市鴿養(yǎng)殖場提供的致病鴿中分離，分離過程如圖1所示；BS瓊脂培養(yǎng)基：購于甘肅凱悅生物科技有限公司；藥物試劑：購于各醫(yī)藥公司；青蒿油：蒿酮 40%(g/g)、苦豆子油30%(g/ml生物堿）、百里香酚99%(g/g)均購自廣東云花實(shí)業(yè)有限公司； 腐殖酸：購于山西侯馬市新佳友腐植酸公司；SHZ-D(III)循環(huán)水式真空栗由上海亞榮儀器 有限公司提供；電熱恒溫干燥箱，8打孔器8無菌操作臺8抑菌藥物紙片等。
[0030] 1. 2試驗(yàn)方法： 1. 2. 1藥液的制備： 中藥藥液的制備：將實(shí)驗(yàn)組三種復(fù)方精油及對照組三種單方精油各稱取烘干后的藥粉 50g，加水500mL，浸泡30min后煎煮，煮沸后文火煎30min用四層紗布過濾藥液，藥渣 加水250mL煮沸后煎30min，過濾藥液合并兩次藥液，用旋轉(zhuǎn)揮發(fā)儀將藥液濃縮至2g/ mL，高壓蒸氣滅菌冷卻后保存于40°C冰箱保存待用。
[0031] 1.2. 2菌懸液的制備： 無菌操作用燒紅冷卻的接種環(huán)挑取培養(yǎng)16-24h的沙門氏菌，置于無菌生理鹽水中， 搖勻制得沙門氏菌混懸液，并按照平板菌落計(jì)數(shù)法校正得出該混懸液的CFU。
[0032] 1. 2. 3培養(yǎng)基平板的制備與接種(細(xì)菌涂布法）： 無菌操作制得BS培養(yǎng)基平板，并用記號筆在平板的底部標(biāo)明藥物名稱和藥物濃度。 無菌操作用無菌吸取105-106CFU/ml沙門氏菌0. 2ml于培養(yǎng)基平板表面上，用無菌T型涂 布棒均勻涂布，晾干lmin。
[0033] 1. 2. 4抑菌測試： 瓊脂擴(kuò)散法：用滅菌的不銹鋼打孔器小管(外徑為〇. 7mm)，放置在培養(yǎng)基