專利名稱：新的血小板凝集抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的化合物、其制備方法、其用途和含有該新化合物的藥物組合物。該新化合物在治療、特別是預(yù)防血小板凝集方面是有用的。
背景和先有技術(shù)許多會聚路徑導(dǎo)致血小板凝集。無論最初的刺激是什么，最終共同結(jié)果是由于纖維蛋白原結(jié)合于膜結(jié)合部位，糖蛋白IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)而造成血小板的交叉連接。GBIIb/IIIa抗體或?qū)顾幍母呖寡“逍ЯΓ赏ㄟ^它們對該最終共同結(jié)果的干擾來解釋。不過，該效力也可解釋已由這類試劑觀察到的出血問題。
凝血酶可以引起血小板聚集，這大部份與其它路徑無關(guān)，但是，大量的凝血酶似乎不可能在未通過其他機(jī)理預(yù)先活化血小板之前存在。凝血酶抑制劑如水蛭素是高效抗血栓形成劑，但是，由于它們既起抗血小板劑和又起抗凝血?jiǎng)┳饔茫赡茉僖逻^多出血(TIMI9a調(diào)研者(1994)，Circulation 90，pp.1624-1630；打開閉合的冠狀動脈的全球采用的策略(GUSTO)IIa調(diào)研者(1994)Circulation 90，pp.1631-1637；Neuhaus K.L等，(1994)Circulation 90，pp.1638-1642)。
已知阿司匹林對血小板凝集作用具有有益作用(參見例如，抗血小板試驗(yàn)者的合作(1994)，Br.Med. J.308，pp.81-106；抗血小板試驗(yàn)者的合作(1994)，Br.Med.J.308，pp.159-168)，但是，對于其它ADP來源引起的凝集作用，例如損傷細(xì)胞或在湍動血流狀態(tài)下釋放的ADP不起作用。ADP的重要作用被下述事實(shí)支持，即其它試劑如腎上腺素和5-羥色胺(5HT，又稱serotonin(5-羥色胺))將僅僅在ADP存在下產(chǎn)生凝集作用。
本發(fā)明的發(fā)明人始于下述觀點(diǎn)，即對ADP對其血小板膜受體，P2T-purinoceptor作用的拮抗劑，可能會給出一種比阿司匹林更有效的抗血栓形成劑，但要比血纖蛋白原受體的拮抗劑對出血的顯著作用要更弱。
US4543255公開了2-氨基-6-取代的嘌呤2′-脫氧核糖呋喃糖苷和2-氨基-6-取代的-8-氮雜嘌呤2′-脫氧核糖呋喃糖苷的碳環(huán)類似物。先于該專利的化合物是作為對皰疹病毒具有抑制作用而被公開。
WO 90/06671公開了治療乙型肝炎病毒的各種核甙的碳環(huán)類似物的用途。
本發(fā)明的目的是要尋找一類新化合物，它們具有改進(jìn)的P2T-受體拮抗藥活性并且對已知的抗血小板劑有顯著的優(yōu)點(diǎn)，如對P2T-受體有改進(jìn)的效力、減低的副作用、無毒和較好的選擇性。
上述問題由于提供了一類如下所述的5，7-二取代的1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基衍生物新化合物而得到解決。
發(fā)明概要本發(fā)明的新化合物由通式(I)定義，
式中B是O或CH2；X選自NR1R2，SR1和C1-C7烷基；Y選自SR1，NR1R2和C1-C7烷基；R1和R2各自獨(dú)立地選自H或在烷基鏈上或烷基鏈中任意取代有一個(gè)或多個(gè)O、S、N或鹵素的C1-C7烷基；R3和R4都是H或者R3和R4一起形成鍵；A是COOH、C(O)NH(CH2)pCOOH、C(O)N[(CH2)qCOOH]2、C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH，或5-四唑基，其中p、q和r各是或獨(dú)立地是1、2或3。
烷基的定義包括直鏈、支鏈和環(huán)烷基，以及飽和和不飽和烷基鏈。
O、S和N取代基可以是在烷基鏈上或烷基鏈內(nèi)。這一定義意味著在C1-C7烷基中的一個(gè)亞甲基可任意地被O、S或NH置換和其中烷基鏈也可任意地被一個(gè)或多個(gè)OH、SH、NH2或鹵素取代。
鹵素包括氯和氟。
在本發(fā)明范圍內(nèi)也包括通式(I)化合物的藥用鹽以及前藥如其酯和其酰胺。
在本發(fā)明范圍內(nèi)也包括通式(I)化合物的互變異構(gòu)體、對映體和非對映體形式。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物是如下的通式(I)化合物，式中X是NR1R2；Y是SR1；A是C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH；和其中R1、R2和r的定義同前。
本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物是如下的通式(I)化合物，式中X是NR1R2，其中R1是氫和R2的定義同上；Y是SR1，其中R1是任意取代有一個(gè)或多個(gè)鹵素的C1-C5烷基；和A是C(O)NHCH(COOH)CH2COOH。
本發(fā)明最優(yōu)選的化合物是(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸；[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]丙酰基]-L-天冬氨酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸；和[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽。
本發(fā)明的新化合物在治療，特別是預(yù)防血小板凝集方面是有用的。因而，本發(fā)明的新化合物作為抗血栓形成劑是有用的，也因此在治療或預(yù)防不穩(wěn)性心絞痛、冠狀血管成形術(shù)(PTCA)和心肌梗塞方面是有用的。
本發(fā)明的化合物在治療或預(yù)防粥樣硬化的初期的動脈血栓形成并發(fā)癥，例如血栓形成發(fā)作、外周血管病、心肌梗塞(即無血栓溶解)也是有用的。
由于干涉了粥樣硬化疾病如心管成形術(shù)、動脈內(nèi)膜切除術(shù)、斯騰特氏印模植入(stent placement)、冠狀的和其它的血管移植外科手術(shù)，本發(fā)明的化合物的進(jìn)一步適應(yīng)癥可用于治療或預(yù)防動脈血栓形成并發(fā)癥。
本發(fā)明的化合物的進(jìn)一步適應(yīng)癥還可用于治療或預(yù)防外科或機(jī)械損傷的血栓形成并發(fā)癥，如緊接外科或意外創(chuàng)傷、修復(fù)手術(shù)包括皮膚活瓣(skin flap)和“復(fù)位”手術(shù)如胸復(fù)位的組織修補(bǔ)。
本發(fā)明的化合物還可用于預(yù)防機(jī)械誘導(dǎo)的體內(nèi)血小板激活如心肺旁路(微血栓栓塞的預(yù)防)；預(yù)防機(jī)械誘導(dǎo)的體外血小板激活，例如應(yīng)用化合物對血液產(chǎn)品，如血小板濃縮物的保護(hù)；預(yù)防分流術(shù)閉塞，如腎滲析和去血漿法，血管損傷/炎癥，如脈管炎、動脈炎、腎小球性腎炎，和組織移植排斥等繼發(fā)的血栓形成。
本發(fā)明的化合物有用的進(jìn)一步適應(yīng)癥是擴(kuò)散血栓形成/血小板消耗組分如播散的血管內(nèi)凝結(jié)、血栓形成的血小板減少性紫癜、溶血的尿毒綜合癥、敗血病的血栓形成并發(fā)癥、成人呼吸窘迫綜合癥、抗磷脂綜合癥、肝素誘導(dǎo)的血小板減少癥和子癇前期/子癇。
本發(fā)明的化合物的進(jìn)一步的適應(yīng)癥還可用于治療和預(yù)防靜脈血栓形成如深度靜脈血栓形成、靜脈閉合病、血液狀態(tài)如血小板增多和紅細(xì)胞增多，和偏頭痛。
在本發(fā)明的特別優(yōu)選實(shí)施方案中，這些化合物用于治療不穩(wěn)性心絞痛、冠狀血管成形術(shù)和心肌梗塞。
在本發(fā)明的另一特別優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可用作為輔助性治療以預(yù)防在控制不穩(wěn)性心絞痛、冠狀血管成形術(shù)和急性心肌梗塞期間的冠狀動脈血栓形成，此即周圍血栓溶解在血栓形成的病癥治療中通?？捎糜谳o助治療的試劑為，例如肝素和/或阿司匹林，還有將提及的一些。
制備方法本發(fā)明的化合物可用如下方法制備。
A)(i)將起始原料4，5-二氨基-2，6-二巰基嘧啶進(jìn)行烷基化反應(yīng)后接著重氮化，得到通式(II)化合物，
式中R1的定義如通式(I)。
(ii)步驟(i)的通式(II)的產(chǎn)物與通式(III)化合物在惰性溶劑中和堿存在下反應(yīng)，
式中P2是保護(hù)基；和L是離去基?？梢允褂玫娜軇┌―MF和可以使用的堿包括氨基鈉。反應(yīng)在 20°-50℃進(jìn)行。反應(yīng)優(yōu)選在環(huán)境溫度下，溶劑為乙腈和堿為氫化鈉。適宜的保護(hù)基包括?；绫郊柞；瓦m宜的離去基包括鹵素如溴。
該步驟中使用的通式(III)試劑由適當(dāng)保護(hù)的核糖的鹵化來制備。
然后基團(tuán)X＝NR1R2(其中R1和R2的定義如通式I)可以通過與通式為HNR1R2(其中R1和R2的定義如通式(I))化合物反應(yīng)而導(dǎo)入。該反應(yīng)在惰性溶劑中于0°-150℃下進(jìn)行；優(yōu)選溶劑是1，4-二噁烷和溫度為100℃。
保護(hù)基P2可以通過用親核試劑如在醇溶劑的醇鹽，優(yōu)選在甲醇中的甲醇鈉在60℃下處理而除去。
在該步驟中獲得的產(chǎn)物是通式(IV)化合物，
式中X是NR1R2；Y是SR1；和其中，R1和R2的定義如通式(I)。
(iii)將步驟(ii)的式(IV)產(chǎn)物，在惰性溶劑中和無機(jī)或有機(jī)酸催化劑存在下于-15°-100℃，與適宜的羰基化合物或與原甲酸酯反應(yīng)，得到通式(V)化合物，
式中X是NR1R2；Y是SR1；B是O；和P1是保護(hù)基，優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)。P1/P1最好是乙氧基亞甲基，在1，4-二噁烷中用原甲酸三乙酯于50℃和三氯乙酸存在下引入。
B)(i)將4，6-二羥基-2-巰基嘧啶烷基化后接著硝化，然后將兩個(gè)羥基轉(zhuǎn)變成離去基，得到通式(VI)化合物，
式中R1的定義如通式(I)；和M是離去基；可以使用的離去基的例子是鹵素。
在堿如丁基鋰存在下在惰性溶劑如四氫呋喃中于10°-100℃下，將通式(VI)化合物與適當(dāng)保護(hù)的5，6-二羥基-2-氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-3-酮，優(yōu)選[3aS-(3aα，4β，7β，7aα]-四氫-2，2-二甲基-4，7-亞甲基-1，3-二噁環(huán)戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)酮反應(yīng)，得到通式(VII)化合物，
式中Y是SR1；R1的定義如通式(I)；M是離去基；和P1是保護(hù)基。
優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)如異亞丙基，和優(yōu)選的離去基為氯。
優(yōu)選的堿是氫化鈉，溶劑是DMF和反應(yīng)在環(huán)境溫度下進(jìn)行。
(ii)步驟(i)的通式(VII)產(chǎn)物中的硝基和內(nèi)酰胺被還原，接著環(huán)化為三唑。
可提及的硝基的還原方法包括，在氫氣氛下于1-5巴壓力和適宜的溶劑如乙醇中，用過渡金屬催化劑如在活性炭上的鈀氧化。優(yōu)選使用鐵在酸性溶劑如乙酸中，在20°-150℃，最好在100℃下進(jìn)行。
可提及的內(nèi)酰胺的還原方法包括，在惰性溶劑如四氫呋喃中于O°-100℃下使用金屬氫化物如氫化鋰鋁的復(fù)合物。優(yōu)選在甲醇中的硼氫化鈉在0°-30℃。
形成的二氨基醇，使用適宜溶劑中的金屬亞硝酸鹽或亞硝酸烷基酯如在稀鹽酸水溶液中的亞硝酸鈉，在-20°-100℃下經(jīng)重氮化反應(yīng)而環(huán)合。優(yōu)選在80℃使用乙腈中的亞硝酸異戊酯。
在惰性溶劑中于0°-150℃下，通過與通式為HNR1R2的化合物反應(yīng)導(dǎo)入X＝NR1R2基團(tuán)，得到通式(V)的化合物，式中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2的定義如通式(I)；B是CH2；和P1是保護(hù)基。
優(yōu)選溶劑是1，4-二噁烷，優(yōu)選反應(yīng)溫度是100℃下進(jìn)行。優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)，其中P1/P1最好為異亞丙基。
C)(i)將步驟A)和B)的產(chǎn)物，即步驟A)和B)分別獲得的通式(V)化合物氧化并經(jīng)行烯化反應(yīng)，得到通式(VIII)化合物，
式中B是O或CH2；X，Y和P1分別如步驟(A)和(B)的通式(V)中所定義的；A是COOR11，其中R11是低級(芳)烷基；和R3和R4一起形成鍵。
可以提及的氧化方法包括Swern反應(yīng)并使用Dess Martin試劑，在適宜的溶劑中和-78°-120℃下。優(yōu)選Pfitzner-Moffatt氧化反應(yīng)，在DMSO中于環(huán)境溫度下進(jìn)行，保護(hù)基P1/P1一起形成環(huán)，最好P1/P1是異亞丙基?？商岬降南┗椒ò≒eterson反應(yīng)和Horner Emmons反應(yīng)。優(yōu)選Wittig反應(yīng)，使用磷內(nèi)鎓鹽如(烷氧羰基亞甲基)三苯膦，特別優(yōu)選(叔丁氧羰基亞甲基)三苯膦。
(ii)使用酸或堿或氫解條件經(jīng)脫酯化作用除去R11和最后進(jìn)行脫保護(hù)，得到通式(I)化合物，式中X是NR1R2；Y是SR1；B是O或CH2；R1和R2的定義同通式(I)；R3和R4一起形成鍵；和A是COOH。
基團(tuán)R11包括甲基、乙基、異丙基、叔丁基和芐基。使用酸性或堿性條件經(jīng)水解可以除去R11。堿性水解可用在溶劑如乙醇水溶液中的金屬氫氧化物或氫氧化季銨鹽如氫氧化鈉于10°-100℃下進(jìn)行。優(yōu)選在四氫呋喃水溶液中的氫氧化鋰在環(huán)境溫度下。酸性水解可用無機(jī)酸如HCl或強(qiáng)有機(jī)酸如三氟乙酸在適宜溶劑如1，4-二噁烷水溶液中進(jìn)行。用過渡金屬催化劑如鈀/炭，在1-5巴的氫氣氛下，在適宜溶劑如乙酸中氫解可除去芐基。優(yōu)選的R11為叔丁基和在二氯甲烷中用三氟乙酸進(jìn)行水解。
?；推S基情形中的保護(hù)基可以如上述R11所述那樣除去，甲硅烷基保護(hù)基可用例如氟離子除去。低級烷基可用例如三溴化硼除去。亞甲基和乙氧基亞甲基可用例如無機(jī)或有機(jī)酸除去。所有這些方法可以在-80°-150℃溫度下進(jìn)行。優(yōu)選R11為叔丁基和P1/P2為異亞丙基時(shí)，可用在二氯甲烷中的三氟乙酸于環(huán)境溫度下同時(shí)除去。
D)(i)通式(I)的化合物，式中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；R1和R2的定義如通式(I)中；B是O或CH2；R3和R4是氫或一起形成鍵；和A是COOH；與具結(jié)構(gòu)式為NH2(CH2)pCOOR11、NH[(CH2)qCOOR11]2或NH2CH(COOR11)(CH2)rCOOR11的化合物反應(yīng)，式中p、q和r是1、2或3和R11是低級(芳)烷基；采用在肽合成中所用的方法，例如使用偶合劑?？捎玫呐己蟿┌?，1′-羰基二咪唑、N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1，2-二氫喹啉。
通式(I)的化合物，式中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，C1-C7烷基；B是O或CH2；R3或R4是氫或一起形成鍵；和A是C(O)NH(CH2)pCOOR11、C(O)N[(CH2)qCOOR11]2或C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中p、q和r是1，2或3，和R11是低級(芳)烷基；在此步驟中也被獲得。
可提及的基團(tuán)R11包括甲基、乙基、異丙基、叔丁基和芐基。偶合反應(yīng)在適宜溶劑中于-15°-120℃進(jìn)行。優(yōu)選在N，N-二甲基甲酰胺中的二環(huán)己基碳二亞胺或溴-三吡咯烷磷鎓六氟磷酸鹽，在0℃至室溫下進(jìn)行。
(ii)步驟(i)的通式(I)產(chǎn)物被脫脂化，得到通式(I)的化合物，其中B是O或CH2；X是NR1R2，SR1，或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，或C1-C7烷基；R1和R2各自和獨(dú)立地為H或在烷基鏈內(nèi)或烷基鏈上被一個(gè)或多個(gè)O、S、N或鹵素任意取代的C1-C7烷基；R3和R4都為H，或R3和R4一起形成鍵；和A是C(O)NH(CH2)pCOOH、C(O)N[(CH2)qCOOH]2或C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH，其中p、q和r各自和獨(dú)立地為1，2或3。
可提及的基團(tuán)R11包括甲基、乙基、異丙基、叔丁基和芐基?；鶊F(tuán)R11可經(jīng)酸性或堿性條件水解除去。堿性水解可以用金屬氫氧化物或氫氧化季銨鹽如氫氧化鈉在溶劑如乙醇水溶液中于10°-100℃溫度下進(jìn)行。優(yōu)選在四氫呋喃水溶液中的氫氧化鋰在環(huán)境溫度下進(jìn)行。酸性水解可以用無機(jī)酸如HCl或強(qiáng)有機(jī)酸如三氟乙酸在適宜的溶劑如1，4-二噁烷水溶液中進(jìn)行。芐基可采用過渡金屬催化劑如鈀/炭在1-5巴氫氣壓下，在適宜溶劑如乙酸中氫解而除去。優(yōu)選為R11為叔丁基，用二氯甲烷中的三氟乙酸水解。
E)(i)步驟C(ii)所得產(chǎn)物經(jīng)還原，得到通式(I)化合物，其中B、X、Y、R1和R2的定義如上面的步驟C(ii)；A是COOH；和R3和R4都是氫。
可采用的還原方法包括利用過渡金屬催化劑如鈀/炭，在1-5巴的氫壓下于適宜的溶劑如乙酸中氫化。優(yōu)選使用在60-100℃和四氫呋喃(THF)溶劑中由適宜的前體如2，4，6-三異丙基苯磺酰肼產(chǎn)生的二酰亞胺。
F)(i)適當(dāng)保護(hù)的5-氨基-1-(β-D-呋喃核糖基)-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，優(yōu)選5-氨基-1-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-1，2，3-三唑-4-甲酰胺用堿處理后，再以通式為R1COOR5的酯處理，式中R1的定義如通式(I)和R5是低級烷基。然后，進(jìn)行保護(hù)，得到通式(IX)化合物，
式中Y是C1-C7烷基；P1是保護(hù)基，和優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)；P2是保護(hù)基；和M是OH。
可提及的保護(hù)基P2包括低級烷基或?；?。優(yōu)選P2為乙?；窃谶m當(dāng)溶劑如二氯甲烷中于環(huán)境溫度下以乙酰氯和三乙胺處理而引入。
最優(yōu)選P1/P1是異亞丙基和P2是乙?；?br> (ii)M為OH的通式(IX)化合物被鹵化，和在惰性溶劑中于0°～150℃下以通式HNR1R2化合物處理導(dǎo)入X＝NR1R2基。然后，除去保護(hù)基P2，得到通式(V)化合物，其中X是NR1R2；R1和R2的定義如通式(I)；Y是C1-C7烷基；B是O；和P1是保護(hù)基，和優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)。最優(yōu)選的是P1/P1為異亞丙基。
可提及的鹵化劑包括P(III)或P(V)，或者S(II)或S(IV)鹵化物如三氯化磷，溫度為0°-150℃。反應(yīng)可以在作為溶劑的鹵化劑或其它惰性溶劑如二氯甲烷中進(jìn)行。優(yōu)選氯化亞硫?；亓髟贒MF/氯仿中。
用于導(dǎo)入X＝NR1R2基的優(yōu)選溶劑是1，4-二噁烷，溫度為100℃。保護(hù)基P2可以在這些條件下除去。或者，也可以用酸性或堿性水解法除去。
優(yōu)選在環(huán)境溫度下使用在甲醇中的氨。
(iii)將步驟(ii)的通式(V)的產(chǎn)物進(jìn)行如步驟C(i)和(ii)所述的相同反應(yīng)，得到通式(I)化合物，其中X是NR1R2；R1和R2的定義如通式(I)；B是O；Y是C1-C7烷基；A是COOH；和R3和R4一起形成鍵。
G)(i)適宜的保護(hù)基P3被引入至保護(hù)了的5-氨基-1-(β-D-呋喃核糖基)-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，優(yōu)選5-氨基-1-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-1，2，3-三唑-4-甲酰胺。所得的中間體用堿處理，優(yōu)選氫化鈉，然后，用通式如下的試劑處理，
其中L是離去基，優(yōu)選咪唑基，得到通式(X)化合物，
式中P1是保護(hù)基，優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)；和P3是保護(hù)基，優(yōu)選甲硅烷基。最優(yōu)選的是其中P1/P1為異亞丙基和P3為叔丁基二甲基硅烷基。
(ii)步驟(i)的通式(X)產(chǎn)物，在惰性溶劑如THF中于-20°-50℃下用堿如丁基鋰處理，接著，用烷基化劑R1G(其中G是離去基如鹵素和R1的定義如通式(I))處理。優(yōu)選用氫化鈉作為堿，在DMF中于環(huán)境溫度下，和G是碘。然后，從上述化合物除去P3并用新的保護(hù)基P2代替。優(yōu)選P2是酰基。
優(yōu)選P3是甲硅烷基，它可用氟離子處理而除去并用?；脫Q。最優(yōu)選P3是叔丁基二甲基硅烷基，它可通過與在THF中用氟化四正丁基銨反應(yīng)而除去，接著，在環(huán)境溫度下與二氯甲烷中的乙酰氯反應(yīng)，引入保護(hù)基P2。
最后，進(jìn)行鹵化反應(yīng)，得到通式(IX)的化合物，其中M是離去基，例如鹵素和優(yōu)選氯；P1是保護(hù)基，優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)；和P2是保護(hù)基，優(yōu)選乙?；缓蚘是SR1。
可提及的鹵化劑包括P(III)或P(V)，或者S(II)或S(IV)鹵化物，如三氯化磷，鹵化溫度為0°-150℃。反應(yīng)可以在作為溶劑的鹵化劑或其它惰性溶劑如二氯甲烷中進(jìn)行。優(yōu)選回流在DMF/氯仿中的氯化亞硫酰。
(iii)步驟(ii)的產(chǎn)物在惰性溶劑如THF中于-20°-150℃與烷基親核試劑如格氏試劑反應(yīng)，優(yōu)選的烷基親核試劑是在Pd(II)催化劑存在下使用的烷基錫。然后，除去保護(hù)基P2，得到通式(V)化合物，其中X是C1-C7烷基；Y是SR1；R1的定義如通式(I)；B是O；和P1是保護(hù)基，優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)，最優(yōu)選的是異亞丙基。
保護(hù)基P2可以通過酸性或堿性水解除去。優(yōu)選P2是乙酰基，它可以在環(huán)境溫度下用在甲醇中的氨處理而除去。
H)(i)通式(I)化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2的定義如通式(I)；B是O；R3和R4都是氫；和A是C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中r是1，2或3，和R11的定義同上；在惰性溶劑如THF中于-20℃至100℃，用氧化劑如單過氧鄰苯二甲酸鎂處理，接著，在惰性溶劑中于0°-150℃用通式HNR1R2化合物處理，得到通式(I)化合物，其中X是NR1R2；Y是NR1R2；B是O；R3和R4都是氫；和A是C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中r是1，2或3和R11的定義如上面步驟D)。
優(yōu)選用m-氯過氧苯甲酸作氧化劑，在乙醇溶劑中于環(huán)境溫度下，和置換反應(yīng)是在1，4-二噁烷中于100℃下進(jìn)行。
I)通式(I)化合物，其中X是SR1；Y是SR1；B是O；R3和R4都是氫；和A是COOH；可以通過通式(II)化合物(其中R1的定義如通式(I))與通式(XI)化合物反應(yīng)來制備，
式中R12是低級烷基和P4是保護(hù)基如乙?；?br> 該反應(yīng)可以通過在酸如三氯乙酸存在下在減壓和50°-175℃下一起加熱這些化合物進(jìn)行。優(yōu)選R12是乙基，P4是乙酰基和反應(yīng)是在對甲苯磺酸存在下在水泵真空和140℃下進(jìn)行。
保護(hù)基和基團(tuán)R12然后可以在酸性或堿性條件下水解除去，得到通式(I)化合物，其中X是SR1；Y是SR1；R1的定義如通式(I)；B是O；R3和R4都是氫；和A是COOH。
可采用的水解劑和條件的例子是在醇中的金屬醇鹽和0°-100℃，或者可采用在二氯甲烷中的三氟乙酸。優(yōu)選R12是乙基和P4是乙?；?，和于環(huán)境溫度下在四氫呋喃水溶液中使用氫氧化鋰。
在該反應(yīng)步驟中起始原料化合物之一的通式(XI)化合物的制備，起初是從(E)-甲基-5，6-二脫氧-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-庚-烯-5-呋喃糖醛酸乙酯經(jīng)酸性水溶液如乙酸水溶液水解和在堿如吡啶和適宜的溶劑如二氯甲烷存在下與?；瘎┤缫阴Ｂ确磻?yīng)，接著進(jìn)行還原，例如用過渡金屬催化劑如鈀/炭在1-3巴氫壓下在適宜溶劑如乙醇中氫化。
J)通式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2的定義如通式(I)；B是O或CH2；R3和R4都是氫；和A是5-四唑基；按以下方法制備。
步驟A(iii)的產(chǎn)物或步驟B(ii)的產(chǎn)物，即通式(V)的化合物，其中B是O或CH2和X和Y的定義如上述通式(V)，和P1是保護(hù)基，優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)，被氧化，接著烯化并隨之還原。
可提及的氧化方法包括Swern反應(yīng)和在適宜溶劑中于-78°-120℃下使用Dess Martin試劑。在DMSO溶劑中環(huán)境溫度下用其中P1/P1為異亞丙基的通式(V)化合物優(yōu)選進(jìn)行Pfitzner-Moffatt氧化反應(yīng)。可提及的烯化方法包括Peterson反應(yīng)和Horner Emmons反應(yīng)。優(yōu)選用磷內(nèi)鎓鹽(三苯基膦亞基)乙腈進(jìn)行Wittig反應(yīng)?？商峒暗倪€原方法包括用過渡金屬催化劑如鈀/炭在氬氣氛下于適宜的溶劑如乙酸中于0°-100℃氫化。優(yōu)選在4巴壓力下在乙醇溶劑中于環(huán)境溫度下以鈀/炭氫化。
這樣獲得的產(chǎn)物是通式(XII)化合物，
式中B是O或CH2；P1是保護(hù)基，優(yōu)選P1/P1一起形成環(huán)和最優(yōu)選P1/P1是異亞丙基；和R1和R2的定義如通式(I)。
通式(XII)化合物與疊氮化物如疊氮化鈉在惰性溶劑如DMF中于0°-175℃反應(yīng)。異亞丙基是優(yōu)選的保護(hù)基。優(yōu)選在110℃使用甲苯中的疊氮化三丁基錫。
保護(hù)基然后用無機(jī)或有機(jī)酸在惰性溶劑中于0°-100℃下處理而除去。優(yōu)選在環(huán)境溫度下用二氯甲烷中的三氟乙酸。這樣就得到通式(I)的產(chǎn)物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2的定義如通式(I)；B是O或CH2；R3和R4都是氫；和A是5-四唑基。
K)將通式(I)化合物還原，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；R1和R2的定義如通式(I)；B是CH2或O；R3和R4一起形成鍵；和A是COOR11，其中R11的定義如上面通式(I)；得到通式(VIII)化合物，其中R3和R4為氫；和X、Y、B、A、R11和P1的定義如上。
可提及的還原方法包括用過渡金屬催化劑如鈀/炭在1-5巴氫壓下在適宜的溶劑如乙酸中氫化。優(yōu)選在60°-100℃下的四氫呋喃中從適宜的前體如2，4，6-三異丙基苯磺肼產(chǎn)生的二酰亞胺。
(ii)將步驟(i)的產(chǎn)物進(jìn)行如步驟D(ii)中所述的同樣反應(yīng)條件，得到通式(I)化合物，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；R1和R2的定義如通式(I)；B是CH2或O；和A是COOH。
通式(I)化合物及其鹽和前藥如其酯或其酰胺，可以用常規(guī)技術(shù)從其反應(yīng)混合物中分離。
通式(I)化合物的鹽，可以通過其游離酸或其鹽或者其游離堿或其鹽或其衍生物，與一個(gè)或多個(gè)當(dāng)量的適宜的堿或酸反應(yīng)形成。該反應(yīng)可以在該鹽不溶的溶劑或介質(zhì)中或者在該鹽可溶的溶劑中進(jìn)行，如水、乙醇、四氫呋喃或乙醚，它們可以真空除去或通過冷凍干燥除去。該反應(yīng)也可以是復(fù)分解過程或可以在離子交換樹脂上進(jìn)行。雖然可以使用各種鹽例如離析的或純化的產(chǎn)物，不過優(yōu)選無毒的生理上可接受的鹽。
通式(I)化合物的藥用酯可以通過常規(guī)技術(shù)，如酯化作用或酯基轉(zhuǎn)移作用制備。
通式(I)化合物的藥用酰胺可以通過常規(guī)技術(shù)，如相應(yīng)酸的酯與氨或適宜的胺反應(yīng)來制備。
本發(fā)明的詳細(xì)說明本發(fā)明將由以下實(shí)施例更詳細(xì)地說明，但是，這些不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。
如果沒有另外的指明，實(shí)施例中的溫度是指攝氏度。
實(shí)施例實(shí)施例1[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸鈉鹽]a)2-(丙硫基)-4，6-(1H，5H)嘧啶二酮將丙基碘(136ml)加到含有氫氧化鈉(55.6g)的4，6-二羥基-2-巰基嘧啶(200g)在水(800m1)的懸浮液中。攪拌反應(yīng)混合物2周，然后濃縮至一半體積，加入2N鹽酸并過濾出產(chǎn)物(167g)。MS(EI)186(M+，100％)。b)6-羥基-5-硝基-2-(丙硫基)-4(1H)-嘧啶酮將步驟a)產(chǎn)物(70g)緩慢加入至冰冷的發(fā)煙硝酸(323ml)中。將混合物攪拌1小時(shí)，然后傾倒在冰上并過濾分離出產(chǎn)物(65g)。MS(EI)231(M+)，41(100％)。c)4，6-二氯-5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶將N，N-二乙基苯胺(150ml)滴加到攪拌著的步驟b)產(chǎn)物(134g)在磷酰氯(500ml)中的懸浮液中，并將所得溶液加熱回流1小時(shí)。將冷的反應(yīng)混合物傾倒在冰上然后用乙醚(3×500m1)萃取。將合并的萃取物干燥并濃縮。色譜提純(SiO2，洗脫劑；異己烷∶乙醚，19∶1)得到標(biāo)題化合物(128g)。MS(EI)271，269，267(M+)，41(100％)。d)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[6-氯-5-硝基-2-(丙硫基)-嘧啶-4-基]-四氫-2，2-二甲基-4，7-亞甲基-1，3-二噁環(huán)戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮將氫化鈉(60％，400g)分批加到在THF(500ml)中的[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-四氫-2，2-二甲基-4，7-亞甲基-1，3-二噁環(huán)戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮(18.3g)中。在攪拌1小時(shí)時(shí)將溶液滴加到在THF(500mk)中步驟c)的產(chǎn)物(54.0g)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌45分鐘，然后濃縮并通過色譜法純化(SiO2，洗脫劑，二氯甲烷∶異己烷，3∶2)得到標(biāo)題化合物(79.2g)。MS(APCI)417，415(M+H+)，415(10(％)。e)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[5-氨基-6-氯-2-(丙硫基)-嘧啶-4基-]-四氫-2，2-二甲基-4，7-亞甲基-1，3-二噁環(huán)戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮將還原鐵粉(50g)加到在冰醋酸(1.8L)中的步驟d)產(chǎn)物(50.0g)溶液中，并將反應(yīng)混合物加熱回流15分鐘。將冷的反應(yīng)混合物濃縮并將殘余物溶于乙醚(2L)，然后用碳酸氫鈉溶液(2×1L)洗滌。干燥有機(jī)相并濃縮得到標(biāo)題化合物(42.6g)。MS(APCI)387，385(M+H+)，385(100％)。f)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[5-氨基-6-氯-2-(丙硫基)-4-嘧啶基氨基]-四氫-2，2-二甲基4H-環(huán)戊基-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇將硼氫化鈉(8.37g)加到冰冷的在甲醇(1.3L)中的步驟e)產(chǎn)物(42.6g)的溶液中。攪拌1小時(shí)后，將溶液傾入至水中(2L)，并用乙醚(2×1L)萃取。將合并萃取物干燥并濃縮。純化(SiO2，洗脫劑，二氯甲烷∶乙酸乙酯，1∶1)得到標(biāo)題化合物(36.1g)。MS(APCI)419，417(M+H+)，417(100％)。g)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-氯-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇將亞硝酸異戊酯(24.9ml)加入到在乙腈(80ml)中的步驟f)產(chǎn)物(36.0g)的溶液中，并將溶液在70℃下加熱1小時(shí)。將冷的反應(yīng)混合物濃縮并純化(SiO2，洗脫劑，二氯甲烷∶乙酸乙酯，4∶1)得到標(biāo)題化合物(33.6g)。MS(EI)401，399(M+H+)，43(100％)。h)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(丁基氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇將在1，4-二噁烷(500ml)中的步驟g)產(chǎn)物(16.75g)和n-丁胺(30ml)加熱回流1小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物并純化殘余物(SiO2，洗脫劑，二氯甲烷∶乙酸乙酯，4∶1)，得到標(biāo)題化合物(17.8g)。MS(APCI)437(M+H+，100％)。i)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(丁基氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-基[-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙基酯用1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(0.72g)處理攪拌著的步驟h)產(chǎn)物(0.5g)，吡啶(0.093ml)和三氟乙酸(0.048ml)在DMSO(25ml)中的混合溶液，并將混合物在室溫下攪拌24小時(shí)。
加入(t-丁氧基羰基亞甲基)三苯基膦(0.69g)并另攪拌反應(yīng)18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，用乙酸乙酯(100ml)稀釋并加入草酸(0.51g)。30分鐘后過濾混合物并用飽和碳酸氫鈉溶液(100ml)洗滌，干燥并濃縮。色譜純化(SiO2，洗脫劑己烷∶乙酸乙酯，5∶1)得到標(biāo)題化合物(0.55g)。MS(FAB)533(M+H+，100％)。j)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸鈉鹽在室溫下，將步驟i)的產(chǎn)物(0.8g)在50％三氟乙酸水溶液(100ml)中的溶液攪拌5小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物并用乙酸乙酯(30ml)重結(jié)晶產(chǎn)物。用甲醇∶水(2∶3，30ml)溶解游離酸并用Dowex 50×100離子交換樹脂(鈉型)處理，用水洗脫。冷凍干燥得到標(biāo)題鹽為無色固體(0.43g)。NMRδH(d6-DMSO)6.59(1H，dd)，5.89(1H，d)，4.94(1H，m)，4.45(1H，t)，4.12(1H，t)，3.45(2H，m)，2.83(3H，m)，2.47(1H，m)，2.00(1H，m)，1.5(4H，m)，1.20(2H，m)，0.82(3H，t)，0.71(3H，t).
實(shí)施例2[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸的雙鈉鹽a)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯將L-天冬氨酸二叔丁酯鹽酸鹽(0.46g)和三乙胺(0.23ml)加到實(shí)施例1的化合物(0.6g)在DMF(25ml)中的溶液中。加入1-羥基苯并三唑(0.22g)并在冰浴中冷卻上述溶液，然后加入1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(0.34g)。反應(yīng)混合物在0℃攪拌30分鐘然后在室溫下攪拌3天。除去溶劑后，用色譜法純化(SiO2，洗脫劑氯仿∶甲醇，40∶1)得到標(biāo)題化合物(0.63g)。MS(FAB)664(M+H+)，57(100％)。b)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸二鈉鹽在室溫下，將步驟a)的產(chǎn)物(0.60g)在含三氟乙酸(30ml)的二氯甲烷(30ml)溶液攪拌2小時(shí)。濃縮溶液并純化殘余物(HPLCNova-PakC18柱洗脫液為0.1％乙酸銨水溶液∶甲醇從50∶50到0∶100經(jīng)15分鐘)得到標(biāo)題鹽為無色固體(0.19g)。NMRδH(d6-DMSO)6.74(1H，dd)，6.12(1H，d)，5.07(1H，m)，4.38(1H，m)，4.05(1H，t)，3.95(2H，m)，3.12(2H，t)，2.85(1H，m)，2.49(1H，m)，2.30-2.45(2H，m)，2.0(1H，m)，1.75(2H，m)，1.52(2H，m)，1.47(2H，m)，1.0(3H，t)，0.98(3H，t).
實(shí)施例3[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基-環(huán)戊烷丙酸鈉鹽a)[1S-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸乙酯用1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(0.87g)處理攪拌著的實(shí)施例1h)的產(chǎn)物(0.6g)，吡啶(0.112ml)和三氟乙酸(0.058ml)的DMSO(25ml)溶液，并在室溫下攪拌混合物24小時(shí)。加入(乙酯基亞甲基)三苯基膦(0.90g)并將反應(yīng)另攪拌18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃用乙酸乙酯(100ml)稀釋并加草酸(0.51g)。30分鐘后過濾混合物并用飽和碳酸氫鈉溶液(100ml)洗滌濾液，干燥并濃縮。殘余物用二氯甲烷(50ml)/三氟乙酸(50ml)溶解并攪拌過夜。除去溶劑并用色譜法純化殘余物(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯，1∶1作為洗脫劑)，得到標(biāo)題化合物(0.36g)。MS(FAB)465(M+H+，100％)。b)[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基-環(huán)戊烷丙酸乙酯將2，4，6-三異丙基苯磺酰肼(0.50g)加到步驟a)的產(chǎn)物(0.35g)的無水THF(175ml)的溶液中，并將所得溶液在70℃加熱3小時(shí)。
將冷的反應(yīng)混合物用色譜法純化(SiO2，洗脫劑二氯甲烷∶乙酸乙酯，1∶1)，得到標(biāo)題化合物(0.16g)。MS(EI)466(M+)，43(100％)。c)[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基-環(huán)戊烷丙酸鈉鹽將一水合氫氧化鋰(14mg)加到步驟b)的產(chǎn)物(0.16g)在THF(10ml)/水(10ml)的溶液中。在室溫下攪拌溶液18小時(shí)，然后真空除去溶劑。純化(HPLC Nova-PakC18柱，洗脫液為0.1％乙酸銨水溶液∶甲醇由50∶50到0∶100經(jīng)15分鐘)得到標(biāo)題酸，用甲醇(2ml)溶解并加1N氫氧化鈉溶液(0.28ml)。濃縮，得到標(biāo)題鹽(0.13g)。MS(ESI)439(M-Na+H+，100％).NMRδH(D2O)5.07(1H，m)，4.65(1H，t)，4.08(1H，t)，3.49(2H，t)，3.05(2H，m)，2.62(1H，m)，2.36(2H，m)，2.17(1H，m)，2.00(1H，m)，1.70(2H，m)，1.65(2H，m)，1.61(2H，m)，1.40(2H，m)，1.00(3H，t)，0.97(3H，t).
實(shí)施例4[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸鈉鹽a)2-(戊硫基)-4，6(1H，5H)-嘧啶二酮將碘戊烷(15.6ml)在乙醇中(25ml)的溶液加入到2N氫氧化鈉溶液(100ml)中的4，6-二羥基-2-巰基嘧啶(14.4g)溶液中，并在室溫下攪拌所得反應(yīng)混合物四天。減壓下除去乙醇并加入N，N-二甲基甲酰胺(80ml)和碘戊烷(1.56ml)，然后將反應(yīng)混合物另攪拌16小時(shí)。加入2N HCl溶液酸化該溶液并筆出水層。將剩余的膠狀物溶解于甲醇中并蒸發(fā)至干，然后用甲苯(×2)共沸。固體用乙醚研制，過濾并干燥得到標(biāo)題化合物，為白色固體(11.9g)。MS(EI)214(M+)，144(100％)。b)6-羥基-5-硝基-2-(戊硫基)-4(1H)-嘧啶酮使用步驟a)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1b)的方法制備。MS(EI)259(M+)，43(100％)。c)4，6-二氯-5-硝基-2-(戊硫基)-嘧啶使用步驟b)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1c)的方法制備。MS(FAB)295，297，299(M+H+)，41(100％)。d)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[6-氯-5-硝基-2-(戊硫基)-嘧啶-4-基]-四氫-2，2-二甲基-4，7-亞甲基-1，3-二噁環(huán)戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮使用步驟c)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1d)的方法制備。MS(FAB)445，443(M+H+)，443(100％)。e)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[5-氨基-6-氯-2-(戊硫基)-嘧啶-4-基]-四氫-2，2-二甲基-4，7-亞甲基-1，3-二噁環(huán)戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮使用步驟d)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1e)的方法制備。MS(EI)414，412(M+)，412(100％)。f)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[5-氨基-6-氯-2-(戊硫基)-4-嘧啶基氨基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊二烯并-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇使用步驟e)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1f)的方法制備。MS(EI)418，416(M+)，327(100％)。g)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-氯-5-(戊硫基)-3H1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇使用步驟f)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1g)的方法制備。MS(APCI) 430，428(M+H+)，338(100％)。h)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)- 6 -[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇使用步驟g)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1h)的方法制備。MS(FAB)465(M+H+，100％)。i)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(丁氨基)-5(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯使用步驟h)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1i)的方法制備。MS(FAB)561(M+H+)，505(100％)。j)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸鈉鹽使用步驟i)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1j)的方法制備。MS(FAB)487(M+Na+H+)，465(100％).NMRδH(d6-DMSO)9.00(1H，t)，6.43(1H，dd)，5.70(1H，d)，4.97(1H，q)，4.32(1H，t)，3.87(1H，t)，3.50-3.47(2H，m)，3.12-3.04(2H，m)，2.68(1H，m)，2.38-2.34(1H，m)，1.93-1.89(1H，m)，1.64(2H，m)，1.62(2H，m)，1.37-1.30(6H，m)，0.91(3H，t)，0.87(3H，t).
實(shí)施例5以下化合物按照實(shí)施例4的方法制備[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸鈉鹽a)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇MS(FAB)437(M+H+，100％)。b)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯MS(FAB)533(M+H)+，477(100％)。c)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸鈉鹽MS(FAB)459(M+Na+H+)，437(100％).NMRδH(d6-DMSO)8.99(1H，t)，6.55(1H.dd)，5.76(1H，d)，4.98(1H，q)，4.32(1H，t)，3.90(1H，t)，3.81-3.50(2H，m)，3.16-3.08(2H，m)，2.74-2.70(1H，m)，2.46-2.37(1H，m)，1.98-1.89(1H，m)，1.71-1.67(2H，m)，1.37-1.24(4H，m)，1.19(3H，t)，0.86(3H，t)實(shí)施例6[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基-環(huán)戊烷丙酸鈉鹽使用實(shí)施例4的產(chǎn)物按照實(shí)施例3 b)的方法制備。MS(APCI)467(M+H+)，295(100％).NMRδH(d6-DMSO)8.97(1H，t)，4.93-4.86(1H，m)，4.32(1H，t)，3.88(1H，t)，3.49-3.45(2H，m)，3.07-3.05(2H，m)，2.28-2.08(1H，m)，2.01-1.92(3H，m)，1.74-1.55(7H，m)，1.37-1.33(6H，m)，0.90(3H，t)，0.86(3H，t).
實(shí)施例7[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基-環(huán)戊烷丙酸鈉鹽使用實(shí)施例5的產(chǎn)物按照實(shí)施例3b)的方法制備。MS(FAB)461(M+Na+H+)，154(100％).NMRδH(d6-DMSO)8.96(1H，t)，4.91(1H，q)，4.33(1H，t)，3.75(1H，t)，3.51(2H，m)，3.08-3.06(2H，m)，2.30-2.24(1H，m)，2.06-1.93(3H，m)，1.75-1.55(5H，m)，1.37-1.09(4H，m)，1.15(3H，t)，0.87(3H，t).
實(shí)施例8[1R-(1α，2α，3β，5β)]-3-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-5-[2-(1H-四唑5-基)乙基]-1，2-環(huán)戊二醇a)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，2-二甲基-四氫-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-基]-2-丙烯腈使用實(shí)施例1h)的產(chǎn)物和(三苯基膦亞基)乙腈按照實(shí)施例1i)的方法制備。MS(EI)457(M+)，414(100％)。b)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-3-[6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，2-二甲基-四氫-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-基]-丙腈在4個(gè)大氣壓的氫氣作用下，將在乙醇(300ml)中的含有10％的鈀/碳(0.37g)的步驟a)產(chǎn)物(0.75g)攪拌48小時(shí)。過濾除去催化劑并濃縮濾液得到標(biāo)題化合物(0.34g)。MS(FAB)460(M+H+，100％)。c)[3aS-(3aα，4α，6α，6aα)]-N-丁基-5-(丙硫基)-3-[6-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-7-胺將在甲苯中的步驟b)產(chǎn)物(0.40g)和疊氮化三丁基錫(0.70g)加熱回流48小時(shí)，然后濃縮。色譜法純化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇，95∶5為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物(0-19g)。MS(FAB)503(M+H+，100％)。d)[1R-(1α，2α，3β，5β)]-3-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并-[4，5-d]嘧啶-3-基]-5-[2-(1H四唑-5-基)乙基]-1，2-環(huán)戊烷二醇使用步驟c)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1j)的方法制備。MS(FAB)463(M+H+，100％).NMRδH(d6-DMSO)8.64(1H，t)，5.11(1H，m)，4.96(1H，m)，4.85(1H，m)，4.38(1H，m)，3.83(1H，m)，3.50(2H，m)，3.07(2H，m)，2.97(2H，m)，2.41(1H，m)，2.00(2H，m)，1.80(2H，m)，1.69(2H，m)，1.61(2H，m)，1.35(2H，m)，0.97(3H，m)，0.91(3H，t).
實(shí)施例9[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]丙?；鵠-L-天冬氨酸a)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]丙酰基]-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯將N，N-二異丙基乙基胺(0.35mL)加到由L-天冬氨酸二叔丁基酯，鹽酸鹽(0.28g)，溴三-吡咯烷-磷鎓六氟磷酸鹽(0.44g)和實(shí)施例3產(chǎn)物(0.44g)在DMF(20ml)中的溶液。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后濃縮。色譜法純化(SiO2，乙酸乙酯為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物(0.49g)。MS(APCI)666(M+H+，100％)。b)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]丙酰基]-L-天冬氨酸使用步驟a)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2b)的方法制備。NMRδH(d6-DMSO)9.03(1H，brs)，7.79(1H，d)，4.92(1H，m)，4.35(1H，m)，4.19(1H，t)，3.75(2H，m)，3.49(2H，t)，3.08(2H，m)，2.43(1H，m)，2.32(1H，m)，2.18(3H，m)，1.91(1H，m)，1.73(3H，m)，1.58(2H，m)，1.34(2H，m)，1.00(3H，t)，0.98(3H，t).
實(shí)施例10[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸a)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇將硼氫化鈉(1.16g)加到冰冷的在甲醇(200ml)中的步驟1e)產(chǎn)物的溶液中。攪拌1小時(shí)后濃縮溶液并用色譜法(SiO2，乙醚作為洗脫劑)純化殘余物。將得到的中間產(chǎn)物溶于乙腈(300ml)并加入亞硝酸異戊酯。在60℃下攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，然后濃縮并將殘余物溶于1，4-二噁烷(300ml)。在室溫下，向反應(yīng)混合物中加入己胺(20ml)并攪拌2小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物并將殘余物純化(SiO2，乙醚為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物(4.69g)。MS(APCI)465(M+H+，100％)。b)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸使用步驟a)產(chǎn)物，先按照實(shí)施例1i)方法，然后按照實(shí)施例1j)方法制備。NMRδH(D2O)9.03(1H，t)，6.96(1H，dd)，5.89(1H，d)，5.31(1H，s)，5.10(1H，s)，5.00(1H，m)，4.29(1H，t)，4.02(1H，t)，3.49(2H，m)，3.01(2H，m)，2.83(2H，m)，2.49(1H，m)，2.01(1H，m)，1.72(2H，m)，1.65(2H，m)，1.29(6H，m)，0.98(3H，t)，0.86(3H，t).c)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯使用步驟b)的產(chǎn)物按照實(shí)施例9a)的方法制備。MS(APCI)692(M+H+，100％)。d)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸使用步驟c)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2b)的方法制備。NMRδH(d6-DMSO)7.94(1H，d)，7.23-7.11(1H，s)，6.75(1H，dd)，6.17(1H，d)，5.19(1H，s)，5.08(1H，s)，5.00(1H，m)，4.31(2H，m)，3.96(1H，m)，3.62(2H，m)，3.07(2H，m)，2.81(1H，m)，2.49-2.31(3H，m)，2.01(1H，m)，1.67(2H，m)，1.61(2H，m)，1.31(6H，m)，0.96(3H，t)，0.85(3H，t).
實(shí)施例11以下化合物按照實(shí)施例1的方法制備。a)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(3，3-二甲基丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸i)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(3，3-二甲基丁氨基)5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇MS(APCI)465(M+H+，100％)。ii)[3aR-(3aα，4 α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(3，3-二甲基丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯MS(APCI)561(M+H+，100％)。iii)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(3，3-二甲基丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸NMRδH(d6-DMSO)8.59(1H，t)，6.84(1H，dd)，5.84(1H，d)，5.03-4.96(1H，m)，3.98(1H，m)，3.52(2H，m)，3.07(2H，m)，2.81(1H，m)，2.43(1H，m)，1.97(1H，m)，1.75(2H，m)，1.55(2H，m)，0.99(3H，t)，0.95(9H，s).b)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸i)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇MS(FAB)439(M+H+，100％)。ii)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯MS(FAB)535(M+H+，100％)。iii)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸MS(FAB)439(M+H+，100％)。
實(shí)施例12[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基丙?；鵠-L-天冬氨酸a)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊烷丙酸使用步驟10b)的產(chǎn)物按照實(shí)施例3b)的方法制備。MS(APCI)467(M+H+，100％)。b)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基丙酰基]-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯使用步驟a)的產(chǎn)物按照實(shí)施例9a)的方法制備。MS(APCI)694(M+H+，100％)。c)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5d-]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基丙?；鵠-L-天冬氨酸使用步驟b)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2b)的方法制備。NMRδH(d6-DMSO)8.90(1H，brs)，7.61(1H，d)，4.97(1H，m)，4.36(1H，t)，4.21(1H，m)，3.47(2H，m)，3.77(1H，m)，3.07(2H，t)，2.51(2H，m)，2.28(1H，m)，2.20(2H，m)，1.93(1H，m)，1.77(1H，m)，1.62(3H，m)，1.59(3H，m)，1.33(6H，m)，1.00(3H，t)，0.88(3H，t).
實(shí)施例13[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫基]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽a)2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-4，6(1H，5H)-嘧啶二酮按照實(shí)施例1a)的方法制備。MS(APCI，陰極電離)239(M-H+)，143(100％)。b)2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-6-羥基-5-硝基-4(1H)-嘧啶二酮使用步驟a)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1b)的方法制備。MS(APCI，陰極電離)284(M-H+，100％)。c)4，6-二氯-2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-5-硝基-嘧啶使用步驟b)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1c)的方法制備。NMRδH(CDCl3)3.30(2H，m)，2 60(2H，m)d)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[6-氯-2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-5-硝基-嘧啶-4-基]-四氫-2，2-二甲基-4，7-亞甲基-1，3-二噁環(huán)戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮使用步驟c)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1d)的方法制備。NMRδH(CDCl3)4.77(1H，s)，4.73(1H，d)，4.56(1H，d)，3.33(2H，m)，3.05(1H，s)，2.58(2H，m)，2.33(1H，d)，2.20(1H，t)，1.53(3H，s)，1.36(3H，s)e)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]5-[5-氨基-6-氯-2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]嘧啶-4-基]-四氫-2，2-二甲基-4，7-亞甲基-1，3-二噁環(huán)戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮使用步驟d)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1e)的方法制備。MS(APCI)439(M+H+，100％)。f)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[[5-氨基-6-氯-2-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-4-嘧啶基]氨基]-四氫-2，2-二甲基-4H環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇使用步驟e)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1f)的方法制備。MS(APCI)443(M+H+，100％)。g)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-甲醇使用步驟f)的產(chǎn)物，先按照實(shí)施例1g)方法制備，然后按照實(shí)施例1h)方法制備。MS(APCI)509(M+H+，100％)。h)[3aR-(3aα，4α(E)，6α，6aα)]-3-[6-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氫-2，2-二甲基-4H-環(huán)戊-1，3-二噁環(huán)戊烯-4-基]-2-丙烯酸的1，1-二甲基乙酯使用步驟g)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1i)的方法制備。MS(APCI)605(M+H+)，549(100％)。i)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸使用步驟h)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1j)的方法制備。MS(APCI)509(M+H+，100％)。j)[1R-(1α(E)，2，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯使用步驟i)的產(chǎn)物按照實(shí)施例9a)的方法制備。MS(APCI)736(M+H+)，624(100％)。k)[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫代]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽使用步驟j)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2b)的方法制備。NMRδH(d6-DMSO)7.90(1H，d)，6.76-6.68(1H，dd)，6.15(1H，d)，，4.99(1H，m)，4.30(2H，m)，3.71(2H，t)，3.30(2H，m)，2.74(5H，m)，2.50(1H，m)，2.42(2H，m)，2.11(3H，s)，1.98(1H，m).
實(shí)施例14(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)2，6-雙(丙硫基)-4，5-嘧啶二胺將正碘丙烷(2.52ml)加到攪拌著的在1N氫氧化鉀溶液(26.4ml)中的4，5-二氨基-2，6-二巰基嘧啶(2.0g)溶液中。攪拌24小時(shí)后過濾收集固體得到標(biāo)題化合物為粉紅色固體(2.2g)。MS(EI)258(M+，100％)。b)5，7-雙(丙硫基)-1H-1，2，3 三唑并[4，5-d]嘧啶在50℃下，將亞硝酸鈉(0.6g)在水中(7ml)的溶液加到攪拌著的在醋酸∶水(1∶1，90ml)中的步驟a)產(chǎn)物(2.0g)的懸浮液中。在50℃下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)并過濾收集固體得到標(biāo)題化合物(1.71g)。MS(EI)269(M+)，43(100％)。c)5，7-雙(丙硫基)-3-(2，3，5-三-O-苯甲?；?β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶將溴化氫氣體通入在二氯甲烷(15ml)中的1-O-乙酰基-2，3，5-三-O-苯甲?；?β-D-呋喃核糖(2.02g)的冰冷溶液中，通氣15分鐘。在0℃攪拌反應(yīng)1小時(shí)，然后在室溫下攪拌15分鐘。濃縮溶液并用二氯甲烷(3×50ml)共沸殘余物。將氫化鈉(60％，0.19g)加到攪拌著的步驟b)產(chǎn)物(1.08g)在乙腈(29ml)中的懸浮液中。在室溫下攪拌15分鐘后，加入在乙腈(10ml)中上述的溴代糖，并繼續(xù)攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水間分配，干燥有機(jī)層并濃縮。色譜法純化(SiO2，二氯甲烷∶乙醚，39∶1，作為洗脫劑)得到5，7-雙(丙硫基)-3-(2，3，5-三-O-苯甲?；?β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶[MS(FAB)714(M+H+)，105(100％)]和5，7-雙(丙硫基)-2-(2，3，5-三-O-苯甲?；?β-D-呋喃核糖基)-2H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶[MS(FAB)714(M+H+)，105(100％)](1.9g)的混合物。進(jìn)一步洗脫得到5，7-雙(丙硫基)-1-(2，3，5-三-O-苯甲?；?β-D-呋喃核糖基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶為無色泡沫狀物(0.46g)。MS(FAB)714(M+H+)，105(100％)。d)N-丁基-5-(丙硫基)-3-(β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺將正丁胺(7.37g)加到在1，4-二噁烷(100ml)和水(30ml)中的步驟c)所得的異構(gòu)體混合物(9.0g)溶液中。在100℃下加熱溶液40小時(shí)然后濃縮。將殘余物溶解在0.1M甲醇鈉的甲醇(250ml)溶液中，并將反應(yīng)混合物加熱回流30分鐘。冷卻至室溫，加入醋酸調(diào)至pH7并濃縮溶液。色譜法純化(SiO2，氯仿∶異丙醇，85∶15作為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物為無色玻璃狀物(2.0g)。MS(電噴霧)399(M+H+，100％)。e)N-丁基-5-(丙硫基)-3-[2，3-O-(乙氧基亞甲基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺用三氯乙酸(0.44g)和原甲酸三乙酯(0.44g)處理步驟d)產(chǎn)物(0.40g)在1，4-二噁烷中的溶液。在50℃下加熱溶液90分鐘。用二氯甲烷(100ml)稀釋冷卻的溶液，用飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)和水(50ml)洗滌，然后干燥并濃縮。色譜法純化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，2∶1作為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物為無色固體(0.32g)。MS(FAB)455(M+H+)，267(100％)。f)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯用1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺(4.42g)處理步驟e)產(chǎn)物(3.25g)，吡啶(0.57g)和三氟乙酸(0.41g)在DMSO(30ml)中的攪拌溶液。在室溫下攪拌混合物24小時(shí)。加入乙氧羰基亞甲基三苯膦(3.98g)，再攪拌反應(yīng)18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，用乙酸乙酯(400ml)稀釋并加入草酸(3.51g)。30分鐘后過濾混合物并用飽和碳酸氫鈉溶液(200ml)洗滌濾液，干燥并濃縮。色譜法純化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，5∶1作為洗脫劑)得到中間體。將其溶解在80％醋酸(水液)(25ml)中并在36℃下加熱2天。濃縮溶液并將殘余物通過色譜法純化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，2∶1，為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物為無色固體(1.84g)。MS(FAB)467(M+H+)，267(100％)。g)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸使用步驟f)的產(chǎn)物按照實(shí)施例3c)的方法制備。NMRδH(d6-DMSO)9.10(1H，t)，6.82(1H，dd)，6.15(1H，d)，5.89(1H，d)，4.76(1H，t)，4.60(1H，t)，4.39(1H，t)，3.50(2H，m)，3.08(2H，m)，1.69(2H，m)，1.61(2H，m)，1.34(2H，m)，0.98(3H，t)，0.91(3H，t).MS(FAB)439(M+H+)，267(100％).
實(shí)施例15(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸a)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯使用實(shí)施例14的產(chǎn)物按照實(shí)施例2a)的方法制備。MS(電噴霧)666(M+H+，100％)。b)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸使用步驟a)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2b)的方法制備。NMRδH(d6-DMSO)12.57(2H，brs)，9.09(1H，t)，8.42(1H，d)，6.70(1H，dd)，6.13(2H，m)，5.78(1H，d)，5.60(1H，d)，4.71(1H，m)，4.56(2H，m)，4.40(1H，q)，3.50(2H，q)，3.07(2H.m)，2.63(2H，m)，1.68(2H，m)，1.60(2H，m)，1.35(2H，m)，0.98(3H，t)，0.91(3H，t)。
實(shí)施例16以下化合物按照實(shí)施例14和15的方法制備(E)-N-[1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽a)5-(丙硫基)-3-(β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺將在甲醇(1L)中的由實(shí)施例14c)得到的異構(gòu)體混合物(12.0g)溶液冷卻至0℃，通氨氣飽和。在室溫下攪拌溶液72小時(shí)，然后濃縮。色譜法純化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇，14∶1，為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物為無色固體(4.94g)。MS(電噴霧)343(M+H+，100％)。b)5-(丙硫基)-3-[2，3-O-(乙氧基亞甲基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺MS(電噴霧)399(M+H+，100％)。c)(E)-1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯MS(電噴霧)411(M+H+，100％)d)(E)-1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸MS(電噴霧)383(M+H+，100％)。e)(E)-N-[1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯MS(電噴霧)610(M+H+，100％)。f)(E)-N-[1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽NMRδH(d6-DMSO)8.53(1H，brs)，8.18(1H，brs)，6.66(1H，dd)，6.62(1H，d)，6.15(1H，d)，4.78(1H，t)，4.54(1H，t)，4.39(1H，t)，4.25(1H，m)，3.05(2H，m)，2.53-2.25(2H，m)，1.68(2H，m)，0.97(3H，t)。
實(shí)施例17(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽a)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酸乙酯使用步驟14f)的產(chǎn)物按照實(shí)施例3b)的方法制備。MS(電噴霧)469(M+H+，100％)。b)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酸使用步驟a)的產(chǎn)物按照實(shí)施例3c)的方法制備。MS(電噴霧，陰極電離)439(M-H+，100％)。c)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛?；鵠-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯使用步驟b)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2a)的方法制備。MS(電噴霧)668(M+H+，100％)。d)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸單銨鹽使用步驟c)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2b)的方法制備。NMRδH(d6-DMSO)9.07(1H，t)，7.69(1H，d)，6.04(1H，d)，5.50(2H，brs)，4.76(1H，t)，4.18(2H，m)，3.91(1H，m)，3.49(2H，q)，3.08(2H，t)，2.46-2.23(2H，m)，2.18(2H，t)，1.93(1H，m)，1.70(3H，m)，1.60(2H，m)，1.34(2H，m)，0.99 (3H，t)，0.91(3H，t)。
實(shí)施例18(E)-N-[1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽a)3-(5-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-N-己基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺使用正己胺按照實(shí)施例14d)的方法制備。MS(FAB)531(M+H+)，295(100％)。b)3-[5-O-苯甲?；?2，3-O-(1-甲基亞乙基-β-D-呋喃核糖基]-N-己基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺用對甲苯磺酸(4.4g)處理在含2，2-二甲氧基丙烷(11.4ml)的丙酮(120ml)中的步驟a)產(chǎn)物(4.93g)。在室溫下攪拌所得溶液2小時(shí)，用三乙胺(3.25ml)堿化，并濃縮。色譜法純化(SiO2，環(huán)己烷∶乙醇，95∶5作為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物(5.03g)。MS(電噴霧)571(M+H+，100％)。c)N-己基-3-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺將在甲醇(88ml)中的0.1M甲醇鈉溶液中的步驟b)產(chǎn)物(5.02g)溶液，加熱回流30分鐘。加入醋酸(1ml)并濃縮。色譜法純化(SiO2，二氯甲烷∶乙腈，95∶5為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物(3.63g)。MS(電噴霧)467(M+H+，100％)。d)(E)-1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙基酯使用步驟c)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1i)的方法制備。MS(FAB)563(M+H+，100％)。e)(E)-1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸用步驟d)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1j)的方法制備。MS(FAB)467(M+H+)，295(100％)。f)(E)-N-[1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯使用步驟e)的產(chǎn)物按照實(shí)施例9a)的方法制備。MS(FAB)694(M+H+)，295(100％)。g)(E)-N-[1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽使用步驟f)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2b)的方法制備。MS(FAB)582(M+H+)，295(100％)。NMRδH(d6-DMSO)8.74(1H，t)，8.00(1H，m)，6.66(1H，dd)，6.23(1H，d)，6.15(1H，m)，4.76(1H，m)，4.55(1H，t)，4.40(1H，t)，4.27(1H，t)，3.50(2H，m)，3.07(2H，m)，2.51(2H，m)，1.68(4H，m)，1.30(6H，m)，0.98(3H，m)，0.87(3H，m)。
實(shí)施例19(E)-1-[7-(N-丁基-N-甲基-氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)N-丁基-N-甲基-5-(丙硫基)-3-(β-D-呋喃核糖基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺使用N-甲基丁胺，按照實(shí)施例14d)的方法制備。MS(FAB)413(M+H+)，281(100％)。b)N-丁基-N-甲基-5-(丙硫基)-3-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺使用步驟a)的產(chǎn)物按照實(shí)施例18b)的方法制備。MS(FAB)453(M+H+)，281(100％)。c)(E)-1-[7-(N-丁基-N-甲基-氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙基酯使用步驟b)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1i)的方法制備。MS(FAB)549(M+H+，100％)。d)(E)-1-[7-(N-丁基-N-甲基-氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸使用步驟c)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1j)的方法制備。MS(FAB)453(M+H+，100％)。NMRδH(d6-DMSO)6.51(1H，dd)，6.12(1H，d)，5.83(1H，d)，4.71(1H，t)，4.51(1H，t)，4.31(1H，m)，3.76(2H，m)，3.71(3h，s)，3.08(2H，m)，1.69(4H，m)，1.61(2H，m)，1.34(2H，m)，0.94(6H，m)。
實(shí)施例20(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸a)2-(2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-5，7-雙(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶和2-(2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-5，7-雙(甲硫基)-2H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶使用5，7-雙(甲硫基)-1H-三唑并[4，5-d]嘧啶(J. A.Montgomery，A. T. Shortnacy，G. Arnett，W. H. Shannon，J. Med. Chem.，1997，20，401中所描述的方法制備)按照實(shí)施例14c)的方法制備。色譜法純化(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯，99∶1為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物(13.3g)。MS(電噴霧)658(M+H+，100％)。b)N-丁基-3-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺將正丁基胺(13.5ml)加到步驟a)所得的異構(gòu)體混合物(22.5g)在二噁烷(175ml)/水(25ml)中的溶液中。在室溫下攪拌溶液24小時(shí)后濃縮。用在0.1M甲醇鈉的甲醇(500ml)溶液溶解殘余物并加熱回流30分鐘。放冷至室溫后將溶液濃縮，并將殘余物溶解在DMF。(80ml)中。加入對甲苯磺酸(5.91g)和2，2-二甲氧基丙烷(50ml)，在室溫下攪拌反應(yīng)混合物24小時(shí)。濃縮溶液并將殘余物在乙酸乙酯(500ml)和飽和碳酸氫鈉溶液(500ml)間分配，干燥有機(jī)相并濃縮。色譜法純化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，7∶3為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物為無色固體(3.67g)。MS(電噴霧)411(M+H+，100％)。c)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯使用步驟b)的產(chǎn)物和(乙氧羰基亞甲基)三苯膦，按照實(shí)施例1i)的方法制備。MS(FAB)479(M+H+，100％)。d)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯將步驟c)的產(chǎn)物(1.4g)溶解在2M HCl的甲醇(75ml)溶液中，在室溫下攪拌反應(yīng)混合物15分鐘后濃縮。用乙酸乙酯(300ml)溶解殘余物，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌(3×100ml)，干燥并濃縮。色譜法純化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇，97∶3為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物為無色固體(1.10g)。MS(FAB)439(M+H+)，239(100％)。e)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸使用步驟d)的產(chǎn)物按照實(shí)施例3c)的方法制備。MS(FAB)411(M+H+)，154(100％)。f)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯使用步驟e)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2a)的方法制備。MS(FAB)638(M+H+)，239(100％)。g)(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸使用步驟f)的產(chǎn)物按照實(shí)施例2b)的方法制備。MS(FAB)526(M+H+)，239(100％)。
實(shí)施例21(E)-1-[5-丁基-7-(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)5-丁基-3，4-二氫-3-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]-嘧啶-7-酮將鈉(4.6g)溶解在乙醇(200ml)中，然后加入5-氨基-1-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖醛?；鵠-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(按照G.Biagi et al，F(xiàn)armaco，1992，47，525描述方法制備)(6.0g)，并加熱回流混合物。加入戊酸甲酯(10.5ml)繼續(xù)回流17小時(shí)。用Dowex 50×8-200(H+型)中和混合物，過濾并濃縮濾液。用乙醇溶解殘余物，加入醋酸并濃縮溶液。色譜法純化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，7∶3為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物為無色油狀物(3.08g)。MS(FAB)366(M+H+)。b)5-丁基-3，4-二氫-3-[5-O-乙?；?2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮將三乙胺(0.42g)和乙酰氯(0.3g)順序加入至步驟a)的產(chǎn)物(1.41g)在二氯甲烷(50ml)中的冰冷溶液中。在5℃攪拌混合物30分鐘，然后用鹽水洗滌，干燥并濃縮。色譜法純化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇，95∶5作為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物(1.2g)。MS(EI)408(M+H+)。c)5-丁基-7-氯-3-[5-O-乙?；?2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶加熱回流在氯仿(30ml)中的步驟b)產(chǎn)物(1.19g)和DMF(299mg)，加入亞硫酰氯(3.47g)并保持回流45分鐘。在冰浴中冷卻后，將混合物慢慢加入攪拌著的飽和碳酸氫鈉溶液中。用二氯甲烷(3×200ml)萃取混合物，干燥合并的有機(jī)相，過濾并濃縮。色譜法純化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯，5∶1為洗脫劑)得到標(biāo)題化合物(1.14g)。MS(EI)427，425(M+H+)。d)N，5-二(丁基)-3-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺使用步驟c)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1h)的方法制備。MS(EI)420(M+)。e)(E)-1-[5-丁基-7-(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙基酯使用步驟d)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1i)的方法制備。MS(FAB)517(M+H+，100％)。f)(E)-1-[5-丁基-7-(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸使用步驟e)的產(chǎn)物按照實(shí)施例1j)的方法制備。NMRδH(d6-DMSO)8.87(1H，t)，6.71(1H，dd)，6.20(1H，m)，5.89(1H，d)，4.75(1H，m)，4.56(1H，t)，4.37(1H，t)，3.54(2H，q)，2.73(2H，t)，1.74(2H，m)，1.62(2H，m)，1.35(4H，m)，0.91(6H，t)。
實(shí)施例22(E)-1-[7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)5-氨基-1-[5-O-[(1，1-二甲基乙基)二甲基硅烷基]-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核糖呋喃糖醛?；鵠-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺5-氨基-1-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核糖呋喃糖醛?；鵠-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺(由G.Biagi等Farmaco，1992，47，525所述方法制備)(10.0g)，咪唑(2.20g)和叔丁基二甲基硅烷基氯(4.98g)的DMF(200ml)溶液，在室溫下攪拌16小時(shí)。濃縮該反應(yīng)液，提純殘留物(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯＝1∶1作洗脫劑)，得到標(biāo)題化合物(1.20g)。MS(EI)398(M-CH3+)，73(100％)。b)3，6-二氫-3-[5-O-[(1，1-二甲基乙基)二甲基硅烷基]-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-5-巰基-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮在DMF(100ml)中的步驟a)的產(chǎn)物(26.0g)于1小時(shí)內(nèi)加到攪拌的氫化鈉(60％，2.52g)在DMF(200ml)的懸浮液中。加1，1-硫代羰基二咪唑(11.2g)并回流加熱反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后濃縮反應(yīng)混合物。殘留物溶于水(1L)中，用冰醋酸酸化并過濾分離出標(biāo)題化合物(14.1g)。MS(FAB)456(M+H+)，69(100％)。c)3-[5-O-[(1，1-二甲基乙基)二甲基硅烷基]-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3，4-二氫-5-(丙硫基)-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮將步驟b)的產(chǎn)物(19.3g)加到攪拌的氫化鈉(60％，1.41g)在DMF中(200ml)的懸浮液中。15分鐘后加入碘丙烷(3.55ml)并攪拌混合物1小時(shí)，然后濃縮。殘余物在水(1L)和二氯甲烷(1L)間分配。干燥有機(jī)層，濃縮，得到(18g)標(biāo)題化合物。MS(FAB)498(M+H+)，73(100％)。d)3-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3，4-二氫-5-(丙硫基)-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮將氟化四丁銨(1M THF溶液40.6ml)加到攪拌的步驟c)產(chǎn)物(20.2g)的THF(300ml)溶液中，并于室溫下攪拌反應(yīng)混合物12小時(shí)。濃縮反應(yīng)液，殘余物在水(1L)和乙酸乙酯(1L)間分配。干燥有機(jī)相并濃縮，得到14.1g標(biāo)題化合物。MS(電噴霧)382(M+H+，100％)。e)3-[5-O-乙?；?2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3，4-二氫-5-(丙硫基)-7H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-酮用步驟d)的產(chǎn)物按實(shí)施例21b)的方法制備。MS(電噴霧)443(M+H+，100％)。f)3-[5-O-乙?；?2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-7-氯-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶用步驟e)的產(chǎn)物按實(shí)施例21c)的方法制備。MS(FAB)444，446(M+H+)。g)3-[5-O-乙?；?2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶將氯化雙(三苯膦)鈀(II)(40mg)和四丁基錫(0.81ml)加到步驟f)的產(chǎn)物(500mg)在1-甲基-2-吡啶烷酮(5ml)的溶液中，并于100℃下攪拌所得混合物2小時(shí)，然后于室溫下攪拌72小時(shí)。反應(yīng)混合物于水(100ml)和乙酸乙酯(200ml)間分配。用鹽水(500ml)洗滌有機(jī)層、干燥并濃縮。色譜純化(SiO2，己烷∶乙酸乙酯85∶15為洗脫劑)，得到標(biāo)題化合物(230mg)。MS(FAB)466(M+H+)。h)7-丁基-3-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶用步驟g)的產(chǎn)物按實(shí)施例16a)的方法制備。MS(FAB)424(M+H+)。i)(E)-1-[7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙酯用步驟h)的產(chǎn)物按實(shí)施例1i)的方法制備。MS(FAB)520(M+H+)。j)(E)-1-[7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸用步驟i)的產(chǎn)物按實(shí)施例2b)的方法制備。NMRδH(CDCl3)7.00(1H，d)，6.52(1H，s)，6.01(1H，d)，5.30(2H，brs)，4.94(1H，s)，4.56(1H，t)，4.76-4.81(2H，d)，3.12(4H，brs)，1.80(2H，q)，1.70(2H，q)，1.37(2H，q)，0.99(3H，t)，0.89(3H，t)。
實(shí)施例23(E)-N-[1-[5，7-二(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酰基]-L-天冬氨酸單銨鹽a)(E)-N-[1-[7-丁氨基-5-(甲磺?；?-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-呋喃庚糖醛?；鵠-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯于1小時(shí)內(nèi)將3-氯過氧苯甲酸(50％，0.12g)的乙醇(1ml)溶液加到攪拌的實(shí)施例17c)的產(chǎn)物(0.1g)的乙醇(2ml)溶液中。室溫下攪拌16小時(shí)后，溶液用二氯甲烷(50ml)稀釋，然后用偏亞硫酸氫鈉水溶液(30ml)和碳酸鈉水溶液(2×20ml)洗滌。干燥有機(jī)層并濃縮得到標(biāo)題化合物(90mg)。MS(FAB)700(M+H+)，299(100％)。b)(E)-N-[1-[5，7-二(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-呋喃庚糖醛?；鵠-L-天冬氨酸的雙(1，1-二甲基乙基)酯用步驟a)的產(chǎn)物按實(shí)施例1h)的方法制備。MS(FAB)665(M+H+，100％)。c)(E)-N-[1-[5，7-二(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-呋喃庚糖醛?；鵠-L-天冬氨酸的單銨鹽用步驟b)的產(chǎn)物按實(shí)施例2b)的方法制備。MS(電噴霧)553(M+H+，100％)。
實(shí)施例24(Z)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸a)N-丁基-5-(丙硫基)-3-[2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-呋喃核糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺用實(shí)施例14e)的產(chǎn)物按實(shí)施例18b)的方法制備。MS(FAB)439(M+H+)，267(100％)。b)(Z)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸的1，1-二甲基乙酯用步驟a)的產(chǎn)物按實(shí)施例1i)的方法制備，標(biāo)題化合物作為少量產(chǎn)物被分離。MS(FAB)535(M+H+，100％)。c)(Z)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸用步驟b)的產(chǎn)物按實(shí)施例1j)的方法制備。MS(FAB)439(M+H+)，267(100％)。NMRδH(d6-DMSO)8.76(1H，t)，6.22(1H，m)，6.14(1H，m)，5.85(1H，d)，5.48(1H，m)，4.84(1H，t)，4.25(1H，m)，3.50(2H，m)，3.09(2H，m)，1.71(2H，m)，1.63(2H，m)，1.35(2H，m)，0.99(3H，t)，0.91(3H，t)。
實(shí)施例25N-丁基-5-(丙硫基)-3-[5，6-二脫氧-6-(1H-四唑-5-基)-β-D-核-呋喃己糖基-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺a)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛腈用步驟24a)的產(chǎn)物和(三苯基膦亞基)乙腈按實(shí)施例1i)的方法制備。MS(FAB)460(M+H+，100％)。b)(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-呋喃庚糖醛腈用步驟a)的產(chǎn)物按實(shí)施例8b)的方法制備。MS(APCI)462(M+H+，100％)。c)N-丁基-5-(丙硫基)-3-[5，6-二脫氧-2，3-(1-甲基亞乙基)-6-(1H-四唑-5-基)-β-D-核糖己基呋喃糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺將疊氮三甲基硅烷(0.30g)和氧化二丁基錫(32mg)加到步驟b)的產(chǎn)物(0.60g)的甲苯(6ml)溶液中，加熱回流所得溶液72小時(shí)。一冷至室溫即除去溶劑，并將殘余物經(jīng)色譜提純(SiO2，乙酸乙酯∶異己烷∶乙酸＝100∶100∶1為洗脫劑)，得到標(biāo)題化合物(0.26g)。MS(FAB)505(M+H+)，267(100％)。d)N-丁基-5-(丙硫基)-3-[5，6-二脫氧-6-(1H-四唑-5-基)-β-D-核-呋喃己糖基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5d]嘧啶-7-胺用步驟c)的產(chǎn)物按實(shí)施例1j)的方法制備。粗產(chǎn)物用乙酸乙酯研制，得到標(biāo)題化合物(0.13g)。MS(FAB)465(M+H+)，267(100％)。NMRδH(d6-DMSO)9.08(1H，t)，6.08(1H，d)，5.65(1H，d)，5.35(1H，m)，4.76(1H，t)，4.30(1H，t)，3.98(1H，m)，3.50(2H，m)，3.06(2H，m)，2.92(2H，m)，2.05(2H，m)，1.63(4H，m)，1.34(2H，m)，0.97(3H，t)，0.91(3H，t)。
實(shí)施例261，5，6-三脫氧-1-[5，7-雙(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-呋喃庚糖醛酸鈉鹽a)(E)-1，2，3-三-O-乙?；?5，6-二脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯(E)-甲基-5，6-二脫氧-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖甙糖醛酸乙酯(按A. J. Cooper，R. G.Salomon，Tetrahedron Lett.，1990，31，3813中所述方法制得)(8.0g)在乙酸(256ml)和水(64ml)的混合物中于80℃下加熱16小時(shí)，然后，在室溫下放置48小時(shí)。蒸發(fā)后的殘余物溶于吡啶(160ml)中并用乙酸酐(19.8ml)處理。24小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(500ml)稀釋并用稀HCl洗滌。干燥并蒸發(fā)，所得油狀物經(jīng)色譜純化(SiO2，異己烷∶乙酸乙酯＝5∶1為洗脫劑)，得到標(biāo)題化合物(5.34g)。MS(FAB+RbI)431，429(M+Rb+)，285(100％)。b)1，2，3-三-O-乙?；?5，6-二脫氧-β-D-核-呋喃庚糖醛酸乙酯用步驟a)的產(chǎn)物按實(shí)施例8b)的方法制備。MS(FAB-RbI)433，431(M+Rb+)，185(100％)。c)2，3-二-O-乙?；?1，5，6-三脫氧-1-[5，7-雙(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-呋喃庚糖醛酸乙酯和2，3-二-O-乙酰基-1，5，6-三脫氧-1-[5，7-雙(丙硫基)-2H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-2-基]-β-D-核呋喃庚糖醛酸乙酯步驟b)的產(chǎn)物(1.00g)和步驟14b)的產(chǎn)物(0.78g)與對甲苯磺酸(12mg)混合并在水泵真空下充分?jǐn)嚢?。將反?yīng)混合物浸入140℃的油浴中并繼續(xù)加熱10分鐘。冷卻反應(yīng)瓶并將反應(yīng)混合物溶于氯仿。用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌、干燥和蒸發(fā)，并將殘余物經(jīng)色譜提純(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯＝15∶1為洗脫劑)，得到標(biāo)題化合物(5.34g)為分離不開的混合物。d)1，5，6-三脫氧-1-[5，7-雙(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-呋喃庚糖醛酸鈉鹽用步驟c)的產(chǎn)物按實(shí)施例3c)的方法制備。MS(FAB+RbI)433，431(M+Rb+)。
藥物組合物本發(fā)明的新化合物可以胃腸外、靜脈、吸入或口服給藥。優(yōu)選的給藥途徑是靜脈輸注。
當(dāng)決定對個(gè)別患者最適宜的具體給藥程序和劑量水平時(shí)，給藥劑量將取決于給藥途徑、疾病的嚴(yán)重程度、患者的年齡和體重，以及醫(yī)生通?？紤]的其它因素。
可使用的藥物組合物例子，和適宜的輔藥、稀釋劑或載體如下所述供靜脈注射或輸注純水或鹽水溶液；吸入組合物粗乳糖；片劑、膠囊劑和糖衣丸微晶纖維素、磷酸鈣、硅藻土、糖如乳糖、葡萄糖或甘露醇、滑石、硬脂酸、淀粉、碳酸氫鈉；和/或明膠。
栓劑天然或硬化油或蠟。
當(dāng)本發(fā)明的化合物用于水溶液例如供輸注用時(shí)，可能需要摻入其它賦形劑。特別要敘述的是螯合劑、抗氧化劑、張度調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑和緩沖劑。如果需要，含有通式(I)化合物的溶液可以通過冷凍干燥或噴霧干燥被蒸發(fā)，得到可以在使用前再組成的固體組合物。該組合物可以含有適宜的防腐、穩(wěn)定和潤濕劑，增溶劑例如水溶性纖維素、聚合物如羥丙基甲基纖維素，或水溶性二醇如丙二醇，甜味劑和著色劑和矯味矯臭劑。適宜的話，化合物可配制成持續(xù)釋放劑型。
本發(fā)明的另一方面是提供通式(I)的化合物或其藥用鹽，用于制備治療血小板凝集疾病的藥物。
本發(fā)明的又一方面是提供治療涉及血小板凝集的任何病癥的方法，為此，將有效量的通式(I)化合物給予遭受該病癥的患者。
通式(I)化合物的藥用鹽包括堿金屬鹽如鈉和鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣和鎂鹽，第III族元素的鹽如鋁鹽；和銨鹽。與適合的有機(jī)堿的鹽例如與羥胺的鹽，低級烷基胺如甲胺或乙胺，取代的低級烷胺如羥基取代的烷胺；或單環(huán)氮雜環(huán)化合物如哌啶或嗎啉；和氨基酸的鹽如精氨酸、賴氨酸等，或其N-烷基衍生物；或氨基糖如N-甲基-D-葡糖胺或氨基葡糖。剛剛所述的鹽僅僅是可以用于本發(fā)明的鹽的例子，這不以任何方式被認(rèn)為是詳盡的。
優(yōu)選的通式(I)化合物的藥用鹽是堿金屬鹽和銨鹽，更優(yōu)選的是鈉鹽和單銨鹽。
生物評價(jià)本發(fā)明化合物作為血小板凝集作用抑制劑的效果可通過其作為P2T受體拮抗劑的能力測定，如下面篩選所闡明在洗過的人血小板中的P2T受體激動劑/拮抗劑活性的定量制備將(100ml)人靜脈血等分于3個(gè)試管中，每個(gè)含有4ml 3.2％的檸檬酸三鈉作為抗凝血?jiǎng)?。這些試管在240G離心15分鐘，得到血小板富集的血漿(PRP)，向其中加入300mg/ml的環(huán)前列腺素(prostacyclin)以在洗滌過程中穩(wěn)定血小板。無PRP的紅細(xì)胞可通過于125G離心10分鐘，接著于640G再離心15分鐘而獲得。棄去上清液，將血小板沉淀再懸浮于改良的，無鈣臺羅德氏溶液(10ml)CFT，組成為NaCl 137mM、NaHCO311.9mM、NaH2PO40.4mM、KCl2.7mM、MgCl21.1mM、葡萄糖5.6mM，以95％O2/5％CO2通氣并保持于37℃。在加入300ng/ml PGI2之后，該混合的懸浮液于640G再離心15分鐘。丟棄上清液，將血小板起初再懸浮于10ml CFT中，再加CFT調(diào)節(jié)最后的血小板計(jì)數(shù)為2×155/ml。最后的懸浮液排除空氣并于3℃下貯存于60ml注射器中。為了從PGI2-抑制作用中恢復(fù)正常功能，血小板至少要在最后再懸浮2小時(shí)后用于聚集作用的研究。
在所有研究中，3ml等分的血小板懸浮液加到含有CaCl2溶液(60μl50mM，最終濃度為1mM)的試管中。加入纖維蛋白原(Sigma，F(xiàn)4883)和8-硫苯基茶堿(8-SPT，阻斷化合物的任何P1激動劑活性)，分別得到0.2mg/ml(60μl10mg/ml可凝蛋白質(zhì)在鹽水中的溶液)和300nM(10μl 15mM在6％葡萄糖的溶液)的最終濃度。血小板或適宜的緩沖液以150μl體積加到96井平皿的各個(gè)井中。所有的測定以一式三份以各個(gè)供體的血小板進(jìn)行。
方案a)激動劑/拮抗劑效力的評定在96井平皿中的凝集應(yīng)答由在660nm的平皿讀數(shù)器所給出的吸收度的變化測定。
平皿中各井的吸收度在660nm讀出以確定基線圖。試驗(yàn)化合物的鹽水或適宜的溶液以10μl體積加到各個(gè)井中，得到0、0.01、0.1、1、10或100mM的最終濃度。然后，在定軌搖床上定位于10搖動平皿5分鐘并于660nm讀吸收度。在這一點(diǎn)的凝集作用是試驗(yàn)化合物的激動劑活性的表征。然后，加鹽水或ADP(30mM；10μl 450mM)于每個(gè)井中并在搖動5分鐘之后于660nm讀出吸收度。
拮抗劑效力以對照ADP應(yīng)答的％抑制作用測定。
當(dāng)如上試驗(yàn)時(shí)，本發(fā)明的化合物呈現(xiàn)抗凝集活性。
權(quán)利要求
1.通式(I)的化合物及其藥用鹽和前藥，
式中B是O或CH2；X選自NR1R2，SR1和C1-C7烷基；Y選自SR1，NR1R2和C1-C7烷基；R1和R2各自獨(dú)立地選自H或在烷基鏈上或烷基鏈中任意取代有一個(gè)或多個(gè)O、S、N或鹵素的C1-C7烷基；R3和R4都是H或者R3和R4一起形成鍵；A是COOH、C(O)NH(CH2)pCOOH、C(O)N[(CH2)qCOOH]2、C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH，或5-四唑基，其中p、q和r各是或獨(dú)立地是1、2或3。
2.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；A是C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH；和其中R1、R2和r的定義如權(quán)利要求1。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中X是NR1R2，其中R1是氫和R2的定義如權(quán)利要求1；Y是SR1，其中R1是任意取代有一個(gè)或多個(gè)鹵素的C1-C5烷基；和A是C(O)NHCH(COOH)(CH2)COOH。
4.權(quán)利要求1的化合物，該化合物是[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸鈉鹽]；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3 [4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3 三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酰基]-L-天冬氨酸的雙鈉鹽；[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基-環(huán)戊烷丙酸鈉鹽；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸鈉鹽；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸鈉鹽；[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊烷丙酸鈉鹽；[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(乙氨基)-5-(戊硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基-環(huán)戊烷丙酸鈉鹽；[1R-(1α，2α，3β，5β)]-3-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-5-[2-(1H-四唑-5-基)乙基]-1，2-環(huán)戊二醇；[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]丙?；鵠-L-天冬氨酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(3，3-二甲基丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-3-[4-[7-(2-甲氧基)乙氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酸；[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基丙酰基]-L-天冬氨酸；[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫基]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽；(E)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3基-]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸；(E)-N-[1-[7-氨基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸單銨鹽；(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-呋喃庚糖醛?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽；(E)-N-[1，5，6-三去氧-1-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酰基]-L-天冬氨酸單銨鹽；(E)-1-[7-(N-丁基-N-甲基-氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(甲硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸；(E)-1-[5-丁基-7-(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；(E)-1-[7-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；(E)-N-[1-[5，7-二(丁氨基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三脫氧-β-D-核-呋喃庚糖醛?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽；(Z)-1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基-1，5，6-三脫氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸；N-丁基-5-(丙硫基)-3-[5，6-二脫氧-6-(1H-四唑-5-基)-β-D-核-呋喃己糖基-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺；1，5，6-三脫氧-1-[5，7-雙(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-β-D-核-呋喃庚糖醛酸鈉鹽。
5.權(quán)利要求4的化合物，該化合物是(E)-N-[1-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-1，5，6-三去氧-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛?；鵠-L-天冬氨酸。
6.權(quán)利要求4的化合物，該化合物是[1R-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]丙?；鵠-L-天冬氨酸。
7.權(quán)利要求4的化合物，該化合物是[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[7-(己氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯酰基-L-天冬氨酸。
8.權(quán)利要求4的化合物，該化合物是[1R-(1α(E)，2β，3β，4α)]-N-[3-[4-[5-[(3，3，3-三氟丙基)硫基]-7-[2-(甲硫基)乙氨基]-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羥基環(huán)戊基]-2-丙烯?；鵠-L-天冬氨酸單銨鹽。
9.權(quán)利要求1的通式(I)化合物的鹽。
10.權(quán)利要求9的化合物，該化合物是權(quán)利要求1的通式(I)化合物的堿金屬鹽或銨鹽。
11.權(quán)利要求10的化合物，該化合物是權(quán)利要求1的通式(I)化合物的鈉鹽。
12.權(quán)利要求10的化合物，該化合物是權(quán)利要求1的通式(I)化合物的單銨鹽。
13.權(quán)利要求1的通式(I)化合物，其中該化合物以其互變異構(gòu)體、對映異構(gòu)體或非對映體的任一形式存在。
14.權(quán)利要求1的通式(I)化合物用于治療。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中治療適應(yīng)癥是預(yù)防血小板凝集。
16.權(quán)利要求14的化合物，其中治療適應(yīng)癥是指不穩(wěn)性絞痛。
17.權(quán)利要求14的化合物，其中治療適應(yīng)癥是指冠狀血管成形術(shù)。
18.權(quán)利要求14的化合物，其中治療適應(yīng)癥是指心肌梗塞。
19.權(quán)利要求16-18的化合物，其中治療是指附加治療。
20.權(quán)利要求1的化合物的用途，用于制造治療血小板凝集病癥用的藥物。
21.權(quán)利要求1的化合物的用途，用于制造治療不穩(wěn)性絞痛用的藥物。
22.權(quán)利要求1的化合物的用途，用于制造治療冠狀血管成形術(shù)用的藥物。
23.權(quán)利要求1的化合物的用途，用于制造治療心肌梗塞用的藥物。
24.權(quán)利要求21-23的用途，其中該用途是為了附加治療。
25.一種藥物組合物，它含有作為活性組分的權(quán)利要求1的通式(I)化合物，和藥用載體。
26.權(quán)利要求1的通式(I)化合物的制備方法，包括以下步驟A)(i)將起始原料4，5-二氨基-2，6-二巰基嘧啶進(jìn)行烷基化反應(yīng)后接著重氮化，得到通式(II)化合物，
式中R1的定義如通式(I)；(ii)步驟(i)的通式(II)化合物與通式(III)化合物在惰性溶劑中和堿存在下，于-20-50℃反應(yīng)，
其中P2為保護(hù)基；和L為離去基團(tuán)；然后，基團(tuán)X＝NR1R2是通過與式NHR1R2的化合物在惰性溶劑中于0°-150℃反應(yīng)而引入，其中R1和R2如上式(I)所定義，而后，保護(hù)基P2通過以親核試劑處理而被除去，給出式(IV)化合物
式中X是NR1R2；Y是SR1；和其中，R1和R2的定義如通式(I)；(iii)將步驟(ii)的式(IV)產(chǎn)物，在惰性溶劑中和無機(jī)或有機(jī)酸催化劑存在下于-15°-100℃，與適宜的羰基化合物或與原甲酸酯反應(yīng)，得到通式(V)化合物
式中X是NR1R2；Y是SR1；B是O；和P1是保護(hù)基；B)(i)將4，6-二羥基-2-巰基嘧啶烷基化后接著硝化，并轉(zhuǎn)化醇為離去基，得到通式(VI)的化合物，
其中R1的定義如通式(I)；和M為離去基；然后，將該化合物與適當(dāng)保護(hù)的5，6-二羥基-2-氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚烷-3-酮，在堿存在下于惰性溶劑中在10℃到100℃溫度下反應(yīng)，給出通式(VII)的化合物，
其中Y為SR1；R1定義如式(I)；M為離去基；和P1是保護(hù)基，(ii)將步驟(i)的產(chǎn)物中的內(nèi)酰胺和硝基功能基還原，隨之環(huán)化成三唑；還原生成的二氨基醇并用下述重氮化反應(yīng)而環(huán)化使用金屬亞硝酸鹽或亞硝酸烷基酯在適宜溶劑中于溫度-20℃至100℃下；然后在惰性溶劑中于0°-150℃下，通過與通式HNR1R2的化合物反應(yīng)而引入基團(tuán)X＝NR1R2，給出通式(V)的化合物，其中X為NR1R2；Y為SR1；B為CH2；和P1是保護(hù)基；C)(i)將步驟A)和B)的產(chǎn)物，即步驟A)和B)分別獲得的通式(V)的化合物氧化并進(jìn)行烯化反應(yīng)，得到通式(VIII)化合物，
其中B為O或CH2；X，Y和P1分別如步驟(A)和(B)的通式(V)中所定義的；A是COOR11，其中R11是低級(芳)烷基；和R3和R4一起形成鍵；(ii)使用酸或堿或氫解條件經(jīng)脫酯化作用而除去R11和最后進(jìn)行脫保護(hù)，得到通式(I)化合物，其中X是NR1R2；Y為SR1；R1和R2如式(I)中所定義；B是O或CH2；R3和R4一起形成鍵；和A是COOH；D)(i)通式(I)的化合物，其中X是SR1，NR1R2，或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，C1-C7烷基；R1和R2如通式(I)中所定義；B是O或CH2；R3和R4是氫或一起形成鍵；和A是COOH；與結(jié)構(gòu)式為NH2(CH2)pCOOR11、NH[(CH2)qCOOR11]2、或NH2CH(COOR11)(CH2)rCOOR11的化合物反應(yīng)，其中p、q和r是1，2或3和R11是低級(芳)烷基；采用在肽合成中所用的方法，給出式(I)的化合物，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，C1-C7烷基；R1和R2如式(I)中所定義；B是O或CH2；R3或R4是氫或一起形成鍵；和A是C(O)NH(CH2)pCOOR11、C(O)N[(CH2)qCOOR11]2或C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中p、q和r是1，2或3，和R11是低級(芳)烷基；(ii)步驟(i)的通式(I)的產(chǎn)物被脫脂化，得到通式(I)的化合物，其中B是O或CH2；X是NR1R2，SR1，或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2，或C1-C7烷基；R1和R2各自獨(dú)立地為H，或在烷基鏈內(nèi)或烷基鏈上被一個(gè)或多個(gè)O、S、N或鹵素任意取代的C1-C7烷基；R3和R4都為H，或R3和R4一起形成鍵；和A是C(O)NH(CH2)pCOOH、C(O)N[(CH2)qCOOH]2、或C(O)NHCH(COOH)(CH2)rCOOH，其中p、q和r各自獨(dú)立地為1，2或3；E)(i)步驟C(ii)所得產(chǎn)物經(jīng)還原，得到通式(I)化合物，其中B、X、Y、R1和R2的定義如上面的步驟C(ii)，A是COOH；和R3和R4都是氫。F)(i)將適當(dāng)保護(hù)的5-氨基-1-β-D-呋喃核糖基-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，用堿處理并隨之用式R1COOR5的酯處理，其中R1的定義如結(jié)構(gòu)(I)和R5是低級烷基，然后進(jìn)行保護(hù)，得到式(IX)的化合物，
式中Y是C1-C7烷基；P1是保護(hù)基；P2是保護(hù)基；和M是OH；(ii)在前一步中得到的式(IX)的化合物被鹵化，并在惰性溶劑中于0～150℃溫度下用通式HNR1R2的化合物處理以引入X＝NR1R2基，然后，除去保護(hù)基P2，得到通式(V)化合物，其中X是NR1R2；Y是C1-C7烷基；B是O；和P1是保護(hù)基，(iii)將步驟(ii)的通式(V)的產(chǎn)物進(jìn)行如步驟C(i)和(ii)所述的相同反應(yīng)，得到通式(I)的化合物，其中X是NR1R2；B是O；Y是C1-C7烷基；A是COOH；和R3和R4一起形成鍵；G)(i)適宜的保護(hù)基P3被引入至保護(hù)了的5-氨基-1-β-D-呋喃核糖基-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，所得的中間體用堿處理，隨之用下式的試劑處理
其中L為離去基，得到式(X)化合物
其中P1和P3各自獨(dú)立地為保護(hù)基；(ii)將步驟(i)的通式(X)的產(chǎn)物在惰性溶劑中于-20℃至50℃溫度下用堿處理，接著用烷基化劑R1G處理，其中G是離去基，而R1如式(I)中所定義，其后除去P3并用新的保護(hù)基P2代替，并最后進(jìn)行鹵化反應(yīng)，得到式(IX)的化合物，其中M是離去基；P1是保護(hù)基，P2是保護(hù)基；Y是SR1；和R1如式(I)中所定義；(iii)將步驟(ii)的式(IX)的產(chǎn)物與烷基親核劑于溫度-20℃和150℃之間反應(yīng)，隨后除去保護(hù)基P2，得到式(V)的化合物，其中X是C1-C7烷基；Y是SR1；R1如式(I)中所定義；B是O；和P1是保護(hù)基；H)(i)式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2如式(I)中所定義；B是O；R3和R4均是氫；和A是C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中r是1，2或3，和R11如上所定義；用一種氧化劑于惰性溶劑中在溫度為-20℃和100℃間處理，隨之用式HNR1R2的化合物在惰性溶劑中于溫度0℃～150℃處理，得到式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是NR1R2；B是O；R3和R4均為氫；和A是C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中r是1，2或3，和R11如上述所定義；I)將式(II)的化合物(其中R1如式(I)中所定義)與式(XI)的化合物反應(yīng)
其中R12是低級(芳)烷基和P4是保護(hù)基，該反應(yīng)是通過在一種酸存在下于減壓下和在溫度50℃和175℃間將化合物一起加熱，隨后在酸性或堿性條件下水解除去保護(hù)基和R12基，得到式(I)的化合物，其中X是SR1Y是SR1；R1如式(I)中所定義；B是O；R3和R4均為氫；和A是COOH；式(XI)的化合物的制備起初是由(E)-甲基-5，6-二脫氧-2，3-O-(1-甲基亞乙基)-β-D-核-庚-5-烯呋喃糖醛酸乙酯經(jīng)酸性水溶液水解，和在堿和一種適宜的溶劑存在下與酰化劑反應(yīng)，隨后還原；J)將步驟A(iii)的產(chǎn)物或步驟B(ii)的產(chǎn)物氧化，接著進(jìn)行烯化反應(yīng)，并隨之還原，得到式(XII)的化合物
其中B是O或CH2；P1是保護(hù)基；和R1和R2如式(I)中所定義；然后將該化合物與疊氮化物在惰性溶劑中，于溫度在0℃和175℃間反應(yīng)，隨后通過與無機(jī)酸或有機(jī)酸在惰性溶劑中于溫度在0℃和100℃間進(jìn)行處理而除去保護(hù)基，得到式(I)的化合物，其中X是NR1R2；Y是SR1；R1和R2如式(I)中所定義；B是O或CH2；R3和R4均為氫；和A是5-四唑基，K)(i)將通式(I)的化合物被還原，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；R1和R2如式(I)所定義；B是CH2；R3和R4一起形成鍵；和A是COOR11，其中R11如上述步驟C(ii)所定義；得到式(VIII)的化合物，其中R3和R4是氫；和X、Y、B、A和P1如上述所定義；(ii)將步驟(i)的產(chǎn)物進(jìn)行如步驟D(ii)所述的相同的反應(yīng)，得到式(I)的化合物，其中X是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；Y是SR1，NR1R2或C1-C7烷基；B是CH2或O；和A是COOH。
27.權(quán)利要求1的化合物，其中B、X、Y、R1、R2、R3和R4的定義同權(quán)利要求1，和A選自COOR11、C(O)NH(CH2)pCOOR11、C(O)N[(CH2)qCOOR11]2和C(O)NHCH(COOR11)(CH2)rCOOR11，其中p、q和r是1，2或3和R11是低級(芳)烷基。
28.權(quán)利要求26的化合物，其中M、Y和P1的定義同權(quán)利要求26。
29.一種治療血小板凝集病癥的方法，該方法包括對遭受所說血小板凝集病癥的對象施用有效量的權(quán)利要求1的通式(I)化合物。
30.權(quán)利要求29的方法，其中血小板凝集病癥是不穩(wěn)性心絞痛。
31.權(quán)利要求29的方法，其中血小板凝集病癥是冠狀血管成形術(shù)。
32.權(quán)利要求29的方法，其中血小板凝集病癥是心肌梗塞。
全文摘要
通式(Ⅰ)化合物,其中B是O或CH
文檔編號A61K31/505GK1195353SQ96196720
公開日1998年10月7日 申請日期1996年7月4日 優(yōu)先權(quán)日1995年7月11日
發(fā)明者D·科克斯, A·加爾, P·維利斯 申請人:英國阿斯特拉藥品有限公司