專利名稱：喹唑啉衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種新型喹唑啉衍生物及其藥物學上可接受的鹽，它具有優(yōu)良的抗分泌活性，還涉及用它作為活性組份的藥物組合物，其新的中間體，以及制備這些化合物的方法。
對于消化潰瘍疾病的治療，已經(jīng)采用了各種藥物，諸如抗酸劑，抗膽鹼劑和H2受體拮抗劑。近來，又重新研究起用于質(zhì)子泵抑制劑的澳美拉唑(omeprazole)在這一領域中的活性來。
然而，有人指出以澳美拉唑做質(zhì)子泵抑制劑是不可逆的，它可能會引發(fā)某些副作用。因此，人們現(xiàn)在試圖開發(fā)出一種可逆性的質(zhì)子泵抑制劑(protonpumpinhibitor)，例如，歐洲專利322133和404322公開了涉及一種可逆性質(zhì)子泵抑制劑的喹唑啉衍生物。
本發(fā)明人進行了廣泛的研究以開發(fā)出一種具有改進效果的可逆性質(zhì)子泵抑制劑;結果也發(fā)現(xiàn)在喹唑啉核的第4位有一四氫異喹啉基團的喹唑啉衍生物顯示出優(yōu)良的質(zhì)子泵抑制作用，并且該衍生物能得到可逆性的質(zhì)子泵抑制作用。
本發(fā)明的目的在于提供一種新型的喹唑啉衍生物，它的喹唑啉核的第4位上具有一四氫異喹唑啉基團，以及提供一種其藥物學上可接受的鹽。
本發(fā)明的另一目的在于提供制備所述化合物的方法。
本發(fā)明的再一目的在于提供含有這種化合物做為活性成分的藥物組合物。
本發(fā)明的進一步目的在于提供用于制備本發(fā)明喹唑啉衍生物的新型中間體化合物。
附圖簡要說明結合以下附圖可進一步理解本發(fā)明，其中
圖1至圖3表示從本發(fā)明的實施例中得到的化合物、澳美拉唑和SK&F96067中得到的特殊活性的Lineweaver-Burk印跡圖。
根據(jù)本發(fā)明，提供了一種通式(Ⅰ)的新型喹唑啉衍生物及其藥物學上可接受的 其中R1和R2，分別獨立的為氫或C1-C4烷基;
R3是氫或囟素;
R4，R5，R6，R7，R8，和R9，它們可以相同或不相同，為氫或C1-C4烷基，環(huán)丙基，或者R5和R6可一起形成一環(huán)戊基或環(huán)己基;
R10是氫，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羥基C1-C4烷氧基或者甲基硫甲氧基(methylthiomethyloxy group)。
在本發(fā)明的這些化合物中，其中優(yōu)選的是R1和R2為C1-C4烷基;
R3是囟素;
R4，R5，R6，R7，R8，和R9，可以相同或不相同，為氫或者C1-C4烷基;
R10是C1-C4烷氧基。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物特殊列出如下2-(苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(N-苯甲氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-N-甲基-苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(2-甲基苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(N-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1，8-橋亞乙基(ethano)-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-(N-甲基苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(4-氟-N-甲基-苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
(R)-8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
(S)-8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-(2-羥基乙氧基)-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-乙氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-(甲基硫甲氧基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(N-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(4-氟-N-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1-乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(2-甲基-4-氟苯氨基)-4-(1-乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-環(huán)丙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(3-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(3-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，1-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，1-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，8-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，8-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，6-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，6-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，4-二甲苯-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，4-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1，8-橋亞乙基(ethano)-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;
8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;和2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉。
本發(fā)明通式(Ⅰ)的喹唑啉衍生物可以旋光異構體(R)或(S)或其混合物的形式存在。發(fā)現(xiàn)兩種異構體化合物都顯示優(yōu)良的抗分泌活性。
制備通式(Ⅰ)的化合物的方法可包括通式(Ⅱ)的化合物與通式(Ⅲ)的化合物反應，生成通式(Ⅳ)的化合物，然后該化合物再與通式(Ⅴ)的化合物反應， 其中R1和R2分別獨立，為氫或C1-C4烷基;R3是氫或囟素;
R4，R5，R6，R7，R8，和R9，可以相同或不相同，為氫或C1-C4烷基，環(huán)丙基，或者R5和R6可以一起形成一環(huán)戊或環(huán)己環(huán);
R10是氫，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羥基C1-C4烷氧基或者甲基硫甲氧基;
X是囟素。
用公知的方法可以制備通式(Ⅱ)化合物，例如EP0322133中公開的方法。通式(Ⅴ)為市售產(chǎn)品(如AldrichCo.，USA)通式(Ⅱ)化合物與通式(Ⅲ)化合物在合適的溶劑和堿中反應1至24小時，生成通式(Ⅳ)化合物。反應中采用的合適的溶劑可包括二氯甲烷，丙酮，乙腈，二甲基甲酰胺，四氫呋喃以及它們與水的混合物。反應溫度優(yōu)選介于室溫至150℃之間。本反應中使用的適當?shù)膲A可包括三乙胺，N，N-二甲基苯胺和吡啶。
由此得到的通式(Ⅳ)化合物然后與通式(Ⅴ)化合物在合適的溶劑內(nèi)反應2到4小時，生成本發(fā)明的通式(Ⅰ)化合物。反應中使用的合適的溶劑可以包括二甲基甲酰胺，P-二噁烷，二甲亞砜等。反應溫度優(yōu)選為80～120℃。
經(jīng)上述制備出的通式(Ⅳ)化合物是制備通式(Ⅰ)喹唑啉化合物的新的，有用的中間體。因此，本發(fā)明在此領域內(nèi)包含通式(Ⅳ)的新型化合物和其制備方法。
本發(fā)明化合物可以口服或皮下注射，患者使用的有效劑量為每日0.1mg/kg至500mg/kg，優(yōu)選為每日1.0mg/kg至100mg/kg。
本發(fā)明還進一步包括通式(Ⅰ)化合物藥物學上可接受的鹽。本發(fā)明采用的無毒鹽可包括無機酸鹽，如鹽酸鹽，硫酸鹽，磷酸鹽和硝酸鹽，以及有機酸鹽，例如酒石酸鹽，富馬酸鹽，檸檬酸鹽，甲基磺酸鹽(mesylate)和乙酸鹽。
按公知的方法可制備藥物學上可接受的鹽，例如，將通式(Ⅰ)化合物與上述的酸在溶劑中反應，所述的溶劑為，如甲烷，乙烷，二氯甲烷，乙酸乙醋和乙醚。
本發(fā)明還包括該領域中的藥物組合物，該組合物含有一或多種本發(fā)明之化合物做為活性成分，如果需要，并與藥物學上可接受的載體，賦形劑和/或其他添加劑一道組成藥物組合物。該組合物中的活性成分可為其重量的0.1%至99.9%。
下列的實施例只為說明本發(fā)明之目的，并非限制本發(fā)明保護范圍。
制備1取代的通式(Ⅲ)的1，2，3，4-四氫異喹啉的制備制備1-11-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉步驟1N-(2-苯乙基)乙酰胺的制備12.6ml苯乙胺(0.1M)和14ml三乙胺(0.1M)溶于100ml的二氯甲烷中;將6.9ml乙酰氯(0.1M)滴入其中，同時保持反應體系的溫度低于0℃，隨后室溫攪拌10分鐘。用水沖洗反應溶液，無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮，得14.23克白色固體標題化合物。
步驟21-甲基-3，4-二氫異喹啉的制備將上述步驟1制得的8.43克化合物(51.6mM)加入84.36克的多磷酸中，160℃攪拌反應1.5小時。反應溶液傾入冰水，用氨水中和，用乙酸乙酯萃取。萃取物用無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮。因此而得到的剩余物在硅膠柱色譜中，用甲醇∶二氯甲烷(1∶20(v/v))的混合溶液做為洗脫溶劑，得到油狀標題化合物6.48克。
步驟31-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉的制備將1.76克硼氫化鈉(46mM)懸浮在80ml的乙醇中，將由步驟2制得的6.48克化合物(44.6mM)加入其中。在室溫下攪拌得到的混合物1小時，并冷卻至5℃以下，隨后加入稀鹽酸使其酸化。加入氫氧化鈉使反應溶液呈堿性，用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鈉干燥乙酸乙酯層，并減壓濃縮，得到油狀標題化合物6.17克。
制備1-2(R)-1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉步驟1(R)-1-甲基-4-甲基硫-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-酮的制備。
27.85ml(R)-1-苯乙胺(0.21M)和30ml三乙胺(0.21M)溶于200ml的二氯甲烷中，冷卻至0℃。在0℃向其中滴入37.8克的α-氯-α(甲基硫)-乙酰氯(0.21M)。室溫攪拌生成物30分鐘，加入氯化錫(Ⅳ)，再室溫攪拌30分鐘。
反應溶液傾入冰水，用水洗滌。脫水濃縮有機層，得32.5克的固體標題化合物。
步驟2(R)-1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-酮的制備將150g阮內(nèi)鎳懸浮于300ml的乙醇中，向其中加入經(jīng)上述步驟2制得的32.5g化合物(0.16M)。室溫攪拌該混合物3天后，過濾除去所述的阮內(nèi)鎳，濃縮濾液，得20克固體標題化合物。
步驟3(R)-1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉的制備將上述步驟2制得的10.0克化合物(62mM)與20ml四氫呋喃混合，向其中滴入9ml的10.2M甲硼烷-二甲硫復合物?；亓鞣磻摶旌衔?小時，并冷卻至室溫。通過向該反應溶液中加入10ml6NHCl，剩余的甲硼烷-二甲硫復合物被破壞，生成物用10%NaOH中和。用乙酸乙酯萃取生成物，脫水并濃縮得8.8克油狀標題化合物。
制備1-3(S)-1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉按與制備1-2中相同的步驟進行，只是用25.6ml(S)-1-苯乙胺(0.20M)和34.8克的α-氯-α-(甲基硫)-乙酰氯(0.22M)用作起始物，得8.8克油狀標題化合物。
制備1-41，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉步驟13，4-二氫異喹啉的制備
18.8ml1，2，3，4-四氫異喹啉(0.15M)溶在400ml的二氯甲烷中;將29.4克N-溴丁二酰亞胺(0.165M)慢慢地在室溫下加至其中，隨后攪拌30分鐘。再加入100ml氫氧化鈉水溶液(30%)，并進一步攪拌1小時。分離出有機層，用水洗滌，從含水鹽酸溶液中萃取出有機層。加入氨水將pH調(diào)至9;用二氯甲烷萃取，用水洗滌，再用無水硫酸鈉干燥，濃縮得18.5克油狀標題化合物。
步驟21，2，3，4-四氫異喹啉-1-乙酸的制備在120℃下攪拌含經(jīng)上述步驟1制得的18.5克化合物(0.14M)和14.5克丙二酸(0.14M)的混合物1小時，并冷卻至室溫。向其中加入甲醇和水(4∶1)的混合溶液，攪拌、過濾，得11.2克標題化合物。
步驟3N-(甲氧羧基)-1，2，3，8a-四羥氯戊[ij]異喹啉-7(8H)-酮[N-(methoxycarbonyl)-1，2，3，8a-tetrahydroxychloropent[ij]isoquinoline-7(8H)-one]的制備11.16克五氧化磷溶于75.35ml的甲磺酸中，并將其加熱至150℃;向其中加入經(jīng)步驟2制得的11.16g化合物(58.3mM)。150℃下攪拌反應溶液30分鐘，然后將其冷卻至室溫，向其中加入1.5升的1N氫氧化鈉，用二氯甲烷萃取。得到的萃取物用碳酸鉀干燥，加入8.94ml的氯甲酸甲酯，攪拌1小時，濃縮，用硅膠柱色譜純化，得7.2克標題化合物。
步驟4N-(甲氧羧基)-1，8-橋亞乙-1，2，3，4-四氫異喹啉的制備。
將7.2克由步驟3制得的化合物(31.3mM)溶于100ml乙酸中，用1克10%鈀/活性炭做為催化劑使其氫化。濾去鈀/活性炭，減壓濃縮濾液，用硅膠柱色譜純化之，得5.7克標題化合物。
步驟51，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉的制備將含有5.7克經(jīng)步驟4制得的化合物，340ml含水氫氧化鉀(10%)和340ml1，2-亞乙基二醇的混合物100℃加熱14小時，使之冷卻至室溫，用乙酸乙酯萃取。用水洗滌萃取物，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮，得3.7克標題化合物。
制備1-51-三氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉按與制備1-1相同的步驟進行，只是用25ml苯乙胺(0.2M)和30ml無水三氟乙酸(0.21M)做為起始物，制得5.4克標題化合物。
制備1-61-氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉步驟1N-(2-苯乙基)氟乙酰胺的制備向含11.7克氟乙酸(0.15M)27.3ml的二環(huán)已基碳二亞胺(0.17M)和200ml二氯甲烷的混合物中滴加17ml的苯乙胺(0.17M)，攪拌12小時，過濾生成的固體物，用水沖洗濾液，用無水硫酸鈉干燥并濃縮。用硅膠柱色譜純化殘余物，得11.9克白色固體標題化合物。
步驟21-氟甲基-3，4-二氫異喹啉的制備按與制備1-1中步驟2相同的步驟進行，只是上述步驟1制得的11.9克化合物(65mM)用做起始物，得7.7克標題化合物。
步驟31-氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉的制備按與制備1-1中步驟3相同的步驟進行，只是經(jīng)上述步驟2制得的7.6克化合物(46mM)用做起始物，得7.0克標題化合物。
制備1-71-乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉按與制備1-1相同的步驟進行制備，只是用11.3ml苯乙胺(90mM)和7.8ml的丙酰氯(90mM)為起始原料，得8.48克標題化合物。
制備1-81-環(huán)丙基-1，2，3，4-四氫異喹啉按與制備1-1相同的步驟進行制備，只是用12.5ml苯乙胺(0.1M)和10ml環(huán)丙烷碳酰氯(0.11M)為起始原料，得2.5克標題化合物。
制備1-93-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉將3.0克3-甲基異喹啉(21mM)和50ml甲醇混合，再向其中加入0.84克的氧化鉑。在40psi的壓力下使該混合物進行氫化反應并過濾。減壓濃縮濾液，得3.3克標題化合物。
制備1-101，1-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉步驟11-甲基-N-苯基甲基-3，4-二氫異喹啉翁溴化物的制備將含制備1-1的步驟2制得的20克化合物(0.14M，18ml芐基溴(0.15M)和150ml乙腈的混合物加熱回流12小時，并冷卻至室溫。過濾生成的固體物，干燥得22克標題化合物。
步驟21，1-二甲基-N-苯基甲基-1，2，3，4-二氫異喹啉的制備將上述步驟1制得的20克化合物(0.06M)和80ml無水乙醚混合，向其中滴入60ml甲基溴化鎂(3.0M乙醚溶液)。加熱回流該混合物6小時，冷卻至室溫，然后攪拌12小時。向反應溶液中加入氯化銨水溶液，分離有機層，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。硅膠柱色譜純化生成的殘余物，得11.4克標題化合物。
步驟31，1-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉的制備11克上述步驟2制得的化合物(44mM)與80ml乙酸混合，向其中加入10%鈀/活性炭，使其在40psi壓力下進行氫化反應并過濾。減壓濃縮濾液，用NaOH溶液使其堿化。在用二氯甲烷萃取出生成物后，用無水硫酸鈉干燥萃取物，濃縮，得6.78克標題化合物。
制備1-111，8-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉步驟11-(2′-甲基苯基)乙胺的制備26ml2-甲基乙酰苯(0.2M)與32ml甲酰胺和7.5ml甲酸混合，160℃反應5小時同時蒸去水。生成物冷卻至室溫，用乙醚萃取。用水洗滌萃取物，減壓濃縮，再加入20ml濃鹽酸，加熱回流1小時。將反應溶液冷卻至室溫，用乙醚沖洗，用NaOH水溶液中和。用乙醚萃取生成物后，用無水硫酸鈉干燥萃取物，減壓濃縮，得16.9克標題化合物。
步驟2N-(乙氧基羧甲基)-1-(2′-甲基苯基)乙胺的制備將16.8克的上述步驟1制得的化合物(0.124M)、17.3ml三乙胺與100ml四氫呋喃混合，向其中滴入13.8ml的溴乙酸乙酯(0.124M)，隨后加熱回流1小時。室溫攪拌生成物12小時，再加入乙醚，過濾生成的固體物后，用水沖洗濾液，用無水硫酸鈉干燥之，減壓濃縮。用硅膠柱色譜純化殘余物，得23.3克標題化合物。
步驟3N-(2-羥乙基)-1-(2′-甲基-苯基)乙胺的制備將23.3克上述步驟2制得的化合物(1.105M)室溫下滴入到3.8克氫化鋰鋁(0.1M)和150ml的四氫呋喃的混合物中，攪拌30分鐘。將水加入到生成物內(nèi)，過濾生成的固體物。用無水硫酸鈉干燥濾液，減壓濃縮之，得13.8克標題化合物。
步驟4N-(2-溴乙基)-1-(2′-甲基-苯基)乙胺鹽酸鹽的制備77ml的48%HBr冷卻至0℃，在0℃時將其滴入13.8克的經(jīng)上述步驟3制得的化合物(77mM)中。然后，蒸餾50ml的反應溶液，將殘余物冷卻至室溫。在乙醇和乙醚的混合溶劑中重結晶得到的固體物，生成14.75克標題化合物。
步驟51，8-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉的制備向14.7g經(jīng)上述步驟4制得的化合物(45.5mM)和100ml地卡因(decarine)的混合物中加入氯化鋁，在140℃～150℃時反應1.5小時，再冷卻至0℃。將反應混合物傾入到冰水中使其稀釋，并用乙醚沖洗。向反應混合物中加入NaOH水溶液使其堿化。過濾生成的固體物。用乙醚萃取濾液并用無水硫酸鈉干燥萃取物。減壓濃縮，得3.16克標題化合物。
制備1-121，6-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉按與制備1-11相同的步驟進行制備，只是用13.41克4-甲基乙酰苯(0.2M)作為起始原料，制得2.8克標題化合物。
制備1-131，4-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉按與制備1-1相同的步驟進行制備，只是用14.5mlβ-甲基苯乙胺(β-methylphenethylamine)(0.1M)和7.8ml乙酰氯(0.11M)作為起始原料，制得6.6g的標題化合物。
制備2取代的通式(Ⅱ)的2，4-二氯喹唑啉的制備制備2-1;2，4-二氯喹唑啉步驟12，4-二羥喹唑啉的制備向含有41克2-氨基苯甲酸(0.3M)和2升水以及34ml乙酸的混合物中滴加54克氰酸鉀溶于200ml水中形成的溶液。攪拌生成物1小時，慢慢地加入60克0.3M的氫氧化鈉水溶液使反應溫度不超過40℃。在將溶液加熱到90℃的同時，攪拌30分鐘，然后冷卻至0℃。向生成物中加入濃鹽酸酸化之，過濾生成的固體物，得43.7克的標題化合物。
步驟22，4-二氯喹唑啉的制備向81克經(jīng)上述步驟1制得的化合物(0.5M)中加入200ml磷酰氯和28ml二甲基苯胺;加熱回流生成物5小時。減壓濃縮反應混合物，得40.2克淺黃色固體標題化合物。
制備2-28-甲氧基-2，4-二氯喹唑啉按與制備2-1相同的步驟進行制備，只是用57克2-氨基-3-甲氧基-苯甲酸(0.43M)作為反應起始原料，得36克標題化合物。
在下列實施例1至17中制備了通式(Ⅳ)的2-氯-4-(取代的-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉。
實施例12-氯-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備將制備2-1中制備的10克化合物(50.2mM)與70ml二氯甲烷和7.8ml三乙胺(56mM)混合，在保持反應溫度低于10℃的同時，慢慢滴入6.4ml1，2，3，4-四氫異喹啉(50.2mM)，室溫攪拌2小時。用無水硫酸鈉干燥反應混合物，減壓濃縮之。結晶殘余物，得14.6克的標題化合物。
實施例22-氯-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將制備2-1中制得的10克化合物(50.2mM)和制備1-1中制得的7.4ml化合物(50.2mM)作為起始原料，制得13.5克的標題化合物。
實施例32-氯-4-(1，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將制備2-1中制得的2.31克化合物(11.6mM)和制備1-4中制得的1.85克化合物(11.6mM)作為起始原料，制得3.0克的標題化合物。
實施例42-氯-8-甲氧基-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將制備2-2中制得的11.2克化合物和6.2ml1，2，3，4-四氫異喹啉(48.8mM)作為起始原料，制得14.2克的標題化合物。
實施例52-氯-8-甲氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將制備2-2中制得的3.35克化合物(14.6mM)和制備1-1中制得的2.15克化合物(14.6mM)作為起始原料，制得3.5克標題化合物。
實施例6(R)-2-氯-8-甲氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將制備2-2制得的3.0克化合物(15.1mM)和制備1-2中制得的2.22克化合物(15.1mM)作為起始原料，制得3.64克標題化合物。
實施例7(S)-2-氯-8-甲氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1中相同的步驟進行，只是將制備2-2中制得的3.0克化合物(15.1mM)和制備1-3中制得的2.22克化合物(15.1mM)作為起始原料，制得3.5克標題化合物。
實施例82-氯-8-甲氧基-4-(1-三氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備向制備2-2中制得的3.05克化合物(13.3mM)和20ml的二甲基甲酰胺的混合物中加入制備1-5制得的2.68克化合物(13.3mM)，110℃反應1小時。冷卻反應混合物，用二氯甲烷稀釋，并用水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。用硅膠柱色譜純化生成的殘余物，得2.1克標題化合物。
實施例92-氯-8-甲氧基-4-(1-氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將5.0克制備2-2制得的化合物(22mM)和4克制備1-6制得的化合物(24mM)作為起始原料，制得6.8克的標題化合物。
實施例102-氯-8-甲氧基-4-(1-乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將3.5克制備2-2制得的化合物(15.3mM)和2.46克制備1-7制得的化合物(15.3mM)作為起始原料，制得4.07克的標題化合物。
實施例11;2-氯-8-甲氧基-4-(1-環(huán)丙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將1.44克制備2-2制得的化合物(6.30mM)和1.15克制備1-8制得的化合物(6.9mM)作為起始原料，制得2.25克的標題化合物。
實施例122-氯-8-甲氧基-4-(3-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將5.0克制備2-2制得的化合物(21.8mM)和3.3克制備1-9制得的化合物(22.4mM)作為起始原料，制得2.0克的標題化合物。
實施例132-氯-8-甲氧基-4-(1，1-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將7.70克制備2-2制得的化合物(34mM)和6.50克制備1-10制得的化合物(40mM)作為起始原料，制得4.9克的標題化合物。
實施例142-氯-8-甲氧基-4-(1，8-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將3.6克制備2-2制得的化合物(16mM)和3.10克制備1-11制得的化合物(19mM)作為起始原料，制得5.2克的標題化合物。
實施例152-氯-8-甲氧基-4-(1，6-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將3.6克制備2-2制得的化合物(16mM)和2.80克制備1-12制得的化合物(19mM)作為起始原料，制得5.2克的標題化合物。
實施例162-氯-8-甲氧基-4-(1，4-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將4.65克制備2-2制得的化合物(20mM)和3.60克制備1-13制得的化合物(22mM)作為起始原料，制得4.5克標題化合物。
實施例172-氯-8-甲氧基-4-(1，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備按與實施例1相同的步驟進行，只是將2.64克制備2-2制得的化合物(11.6mM)和1.85克制備1-4制得的化合物(11.6mM)作為起始原料，制得3.5克的標題化合物。
通式(Ⅰ)的喹唑啉衍生物和其藥物學上可接受的鹽由下列實施例18至61制得。
實施例182-(苯胺基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備向實施例1制得的2.0克化合物(6.8mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中加入1.25ml苯胺(13.6mM)，110℃-120℃反應2小時。將生成物冷卻至室溫，加入NaOH水溶液中和之，并用50ml的二氯甲烷萃取。
用無水硫酸鈉干燥萃取物，減壓濃縮。用硅膠柱色譜純化生成的殘余物。生成的白色固體溶于100ml的乙醚內(nèi)，加入用鹽酸飽和的乙醚溶液。由此得到的固體過濾，真空干燥，得0.6克標題化合物。產(chǎn)率為23%。
M.P.246-248℃1H-NMR(DMSO-d6)δ3.1(bs，2H)，4.18(bs，2H)，5.16(s，2H)，7.14-7.34(m，5H)，7.47(t，3H)，7.62(t，3H)，7.86(t，1H)，8.22(d，1H)，10.64(s，1H)實施例192-(N-甲基苯胺基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟進行，只是向0.9克實施例1制得的0.9克化合物(3mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中加入0.4mlN-甲基苯胺(3.6mM))，制得0.51克標題化合物。
產(chǎn)率42%M.P.206-208℃
1H-NMR(CDCl3)δ2.90(t，2H)，3.91(t，2H)，4.00(s，3H)，4.82(s，2H)，6.98(d，1H)，7.14-7.54(m，9H)，7.75(t，1H)，7.86(d，1H)，8.96(d，1H)，13.8(s，1H)實施例202-(4-氟-N-甲基苯基氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟進行，只是將1.9克4-氟-N-甲基苯胺(15mM)加入2.2克實施例1制得的化合物(7mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得2.45克標題化合物。
產(chǎn)率81%M.P.242-244℃1H-NMR(DMSO-d6)δ2.96(t，2H)，3.71(s，3H)，4.01(t，2H)，5.03(s，2H)，7.23(m，4H)，7.25-7.62(m，5H)，7.84(t，1H)，8.20(t，2H)，12.70(bd，1H)實施例212-(2-甲基苯基氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟進行，只是將2.2ml2-甲基苯胺(20.6mM)加入3.05克實施例1制得的化合物(10.3mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.9克標題化合物。
產(chǎn)率22%M.P.206-209℃1H-NMR(DMSO-d6)δ2.35(s，3H)，3.30(bs，2H)，4.17(bs，2H)，5.17(s，2H)，7.1-7.8(m，10H)，7.9(t，1H)，8.3(t，1H)，10.1(s，1H)
實施例222-(4-氟-2-甲基苯基氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟進行，只是將1.7ml的4-氟-2-甲基苯胺(15mM)加入2.2克實施例1制得的化合物(7mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.35克的標題化合物。
產(chǎn)率46%M.P.210-212℃1H-NMR(DMSO-d6+TFA-d)δ2.33(s，3H)，3.02(t，2H)，4.10(t，2H)，5.09(s，2H)，7.25(m，6H)，7.47(t，1H)，7.58(m，2H)，7.86(t，1H)，8.20(d，1H)，10.10(s，1H)，13.25(bd，1H)實施例232-(4-氟苯氨基)-4-(-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.9ml的4-氟苯胺(20.2mM)加入3.0克實施例1制得的化合物(10.1mM)和20ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.05克標題化合物。
產(chǎn)率26%M.P.269-271℃1H-NMR(DMSO-d6)δ3.06(t，2H)，4.15(t，2H)，5.14(s，2H)，7.16-7.40(m，6H)，7.46(t，1H)，7.63(m，3H)，7.85(t，1H)，8.21(d，1H)，10.70(s，1H)實施例242-(N-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.1ml的N-甲基苯胺(10.1mM)加入1.4克實施例2制備的化合物(4.52mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.02克標題化合物。
產(chǎn)率54%M.P.213-215℃1H-NMR(DMSO-d6)δ1.23-1.64(m，2H)，2.69-3.30(m，2H)，3.44-3.75(m，1H)，3.98(s，3H)，4.26-4.47(m，1H)，5.23-5.40(m，1H)，7.17-7.56(m，2H)，7.70-7.83(m，9H)，8.94(d，1H)，13.88(s，1H)實施例252-(4-氟苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.81ml的4-氟苯胺(8.54mM)加入1.26克實施例2制得的化合物(4.07mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.59克標題化合物。
產(chǎn)率93%M.P.250-252℃1H-NMR(CDCl3)δ1.68-1.87(m，3H)，2.96-3.42(m，2H)，3.74-3.88(m，1H)，4.64-4.72(m，1H)，5.67-5.73(m，1H)，7.03-7.96(m，12H)，10.65(s，1H)，13.84(s，1H)實施例262-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例14相同的步驟制備，只是將0.89ml的4-氟-2-甲基苯胺(10.9mM)加入1.61克實施例2制得的化合物(5.20mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.76克標題化合物。
產(chǎn)率78%M.P.260-263℃1H-NMR(CDCl3)δ1.54-1.82(m，3H)，2.43(s，3H)，2.85-3.38(m，2H)，3.61-3.37(m，1H)，4.52-4.65(m，1H)，5.60(q，1H)，6.90-7.07(m，3H)，7.17-7.27(m，3H)，7.34-7.50(m，2H)，7.67-7.78(m，2H)，7.89(d，1H)，10.02(s，1H)，14.18(s，1H)實施例272-(4-氟-2-甲基苯氨基-4-(1，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.80ml的4-氟-2-甲基苯胺(9.79mM)加入1.50克實施例3制得的化合物(4.46mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.64克標題化合物。
產(chǎn)率79%M.P.248-250℃1H-NMR(CDCl3)δ1.55-1.78(m，1H)，2.33(s，3H)，2.53-2.99(m，4H)，3.82-4.02(m，1H)，4.37-4.50(m，1H)，5.02-5.30(m，1H)，6.60-7.01(m，5H)，7.43(t，1H)，7.59-7.67(m，2H)，7.86(t，1H)，8.14(d，1H)，10.13(s，1H)，13.40(s，1H)實施例288-甲氧基-2-(苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.65ml苯胺(6.9mM)加入1.5克實施例4制得的化合物(4.6mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.40克標題化合物。
產(chǎn)率73%M.P.181-183℃1H-NMR(DMSO-d6)δ3.14(t，2H)，4.06(s，3H)，4.23(t，2H)，5.14(s，2H)，7.05-7.40(m，9H)，7.50(d，1H)，7.74(d，2H)，11.90(s，1H)，12.89(s，1H)實施例298-甲氧基-2-(N-甲基苯基氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.46ml的N-甲基苯胺(12.28mM)加入2.0克實施例4制得的化合物(6.14mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.5克標題化合物。
產(chǎn)率56%M.P.90-92℃1H-NMR(DMSO-d6)δ3.12(t，2H)，3.83(s，3H)，3.96(s，3H)，4.24(t，2H)，5.15(s，2H)，7.10-7.26(m，5H)，7.28-7.72(m，7H)實施例308-甲氧基-2-(4-氟苯基氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.85ml的4-氟苯胺(9.2mM)加入1.5克實施例4制得的化合物(4.6mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.3克的標題化合物。
產(chǎn)率65%M.P.239-241℃1H-NMR(DMSO-d6)δ3.12(t，2H)，4.07(s，3H)，4.20(t，2H)，5.12(s，2H)，6.98-7.49(m，3H)，7.40-7.68(m，8H)，11.80(bs，1H)實施例318-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.7ml4-氟-2-甲基苯胺(20mM)加入3.26克實施例4制得的化合物和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得2.5克標題化合物。
產(chǎn)率55%M.P.195-197℃1H-NMR(DMSO-d6)δ2.42(s，3H)，3.01(t，2H)，4.09(t，2H)，4.10(s，3H)，5.00(s，2H)，6.80-7.56(m，11H)，11.20(s，1H)實施例328-甲氧基-2-(4-氟-N-甲基苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.5克4-氟-N-甲基苯胺(12.2mM)加入2.0克實施例4制得的化合物和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.05克標題化合物。
產(chǎn)率38%M.P.93-95℃1H-NMR(DMSO-d6)δ3.08(t，2H)，3.88(s，3H)，4.01(s，3H)，4.16(t，2H)，5.06(bs，2H)，7.08-7.60(m，11H)
實施例338-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.88ml的4-氟苯胺(9.27mM)加入1.50克實施例5制得的化合物(4.4mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.97克標題化合物。
產(chǎn)率49%M.P.155-157℃1H-NMR(CDCl3)δ1.58-1.98(m，3H)，2.85-3.46(m，2H)，3.73-3.97(m，1H)，4.07(s，3H)，4.64-4.77(m，1H)，5.73(q，1H)，7.03-7.67(m，11H)，11.85(s，1H)，12.82(s，1H)實施例348-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基苯氨基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.75ml的4-氟-2-甲基苯胺(9.27mM)加入1.50克實施例5制得的化合物(4.41mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.78克標題化合物。
產(chǎn)率38%M.P.231-233℃1H-NMR(CDCl3)δ1.51-1.90(m，3H)，2.42(s，3H)，2.84-3.35(m，2H)，3.57-3.81(m，1H)，4.10(s，3H)，4.51-4.66(m，1H)，5.58(q，1H)，6.89-7.44(m，11H)，11.12(s，1H)，13.16(s，1H)
實施例35(R)-8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.33ml的4-氟-2-甲基苯胺(16.3mM)加入2.64克實施例6制得的化合物(7.77mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.50克標題化合物。
產(chǎn)率42%M.P.230-233℃1H-NMR(CDCl3)δ1.51-1.90(m，3H)，2.42(s，3H)，2.84-3.35(m，2H)，3.57-3.81(m，1H)，4.10(s，3H)，4.51-4.66(m，1H)，5.58(q，1H)，6.89-7.44(m，11H)，11.12(s，1H)，13.16(s，1H)實施例36(S)-8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.33ml的4-氟-2-甲基苯胺(16.3mM)加入2.64克實施例7制得的化合物(7.77mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.60克的標題化合物。
產(chǎn)率44%M.P.230-232℃1H-NMR(CDCl3)δ1.51-1.90(m，3H)，2.42(s，3H)，2.84-3.35(m，2H)，3.57-3.81(m，1H)，4.10(s，3H)，4.51-4.66(m，1H)，5.58(q，1H)，6.89-7.44(m，11H)，11.12(s，1H)，13.16(s，1H)
實施例378-(2-羥基乙氧基)-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備步驟18-羥基-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備在0℃時，將48ml三溴甲硼烷(tribromoboran)加入4.1克實施例34制得的化合物(9.6mM)和50ml二氯甲烷的混合物中。室溫攪拌生成物14小時，然后將其傾入冰水中。過濾生成的固體，并將其溶于二氯甲烷內(nèi)，加入NaOH水溶液中和之。分離二氯甲烷層，無水硫酸鈉干燥之。濃縮得到2.4克標題化合物。
產(chǎn)率60%1H-NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，3H)，2.07(s，3H)，2.59(t，1H)，3.00(m，1H)，3.42(t，1H)，5.58(q，1H)，6.80-7.20(m，9H)，7.40(d，1H)，9.40(s，1H)，11.40(s，1H)步驟28-(乙氧基羰基甲氧基)-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備在0℃時，將上述步驟1制得的化合物(5.8mM)2.4克滴入0.2克65%氫化鈉(5.8mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，隨后攪拌30分鐘。然后再向其中滴入0.65ml溴乙酸乙酯(5.8mM)，攪拌1小時。生成物中加水，并加入碳酸氫鈉中和之。用二氯甲烷萃取出生成物后，將二氯甲烷層脫水，濃縮。使用乙醚∶己烷(1∶2)，在干燥的硅膠柱色譜上純化殘余物，得2.0克標題化合物。
產(chǎn)率70%1H-NMR(DMSO-d6)δ1.30(t，3H)，1.48(m，3H)，2.07(s，3H)，2.59(t，1H)，3.00(m，1H)，3.42(t，1H)，4.30(q，2H)，4.85(s，2H)，5.58(q，1H)，6.80-7.20(m，9H)，7.40(d，1H)，9.40(s，1H)，步驟38-(2-羥基乙氧基)-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉的制備在0℃，將上述步驟2制得的并溶于四氫呋喃中的1.5克的化合物(3.0mM)滴入0.12克氫化鋰鋁(3.0mM)和30ml四氫呋喃的混合物中，攪拌1小時。向反應溶液中加水并用二氯甲烷萃取。脫水，濃縮二氯甲烷層，并用硅膠柱色譜純化，得0.80克標題化合物。
產(chǎn)率58%M.P.120-122℃1H-NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，3H)，2.07(s，3H)，2.59(t，1H)，3.00(m，1H)，3.42(t，1H)，3.90-4.20(m，4H)，5.58(q，1H)，6.80-7.20(m，9H)，7.40(d，1H)，9.40(s，1H)實施例382-(4-氟-2-甲基苯基氨基)-8-乙氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備將2.0克實施例37步驟1制得的化合物(4.8mM)，在0℃時滴入0.2克65%氫化鈉(5.8mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，隨后攪拌30分鐘。然后向其中再加入0.4ml碘乙烷(4.8mM)和5ml二甲基甲酰胺的混合物，室溫攪拌2小時。向生成物中加水，并加入碳酸氫鈉中和之。用乙酸乙酯萃取生成物后，脫水濃縮該乙酸乙酯層。用硅膠柱色譜純化殘余物，并溶于乙醚內(nèi);再向其中加入鹽酸。過濾生成的固體，真空干燥，得0.52克標題化合物。
產(chǎn)率22%M.P.165-170℃1H-NMR(CDCl3)δ1.54-1.76(m，6H)，2.40(s，3H)，2.80-3.32(m，2H)，3.54-3.80(m，1H)，4.28(q，2H)，4.48-4.62(m，1H)，5.52(q，1H)，6.92-7.04(m，3H)，7.15-7.41(m，7H)，11.22(s，1H)，13.00(s，1H)實施例392-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-(甲硫基甲氧基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例38相同的步驟制備，只是將0.2克65%氫化鈉(5.8mM)，2.0克實施例37步驟1制得的化合物(4.8mM)和0.4ml甲硫基氯代甲烷(4.8mM)作為起始原料，制得0.52克標題化合物。
產(chǎn)率7.1%M.P.94-96℃1H-NMR(CDCl3)δ1.65-1.76(d，3H)，2.32(s，6H)，2.76(d，1H)，3.30(m，1H)，3.60(t，1H)，4.38(m，1H)，5.42(m，3H)，6.68(s，1H)，6.90(d，2H)，7.00-7.20(m，5H)，7.50(d，1H)，7.92(m，1H)實施例408-甲氧基-2-(N-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將2.00mlN-甲基苯胺(18.45mM)加入8.00克實施例5制得的化合物(8.82mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，得0.85克標題化合物。
產(chǎn)率22%M.P.93-95℃1H-NMR(CDCl3)δ1.63(bs，3H)，2.80-3.36(m，2H)，3.50-4.00(m，1H)，4.47-4.57(m，1H)，5.59-5.69(m，1H)，7.21-7.68(m，12H)，10.44(s，1H)實施例418-甲氧基-2-(4-氟-N-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.77克4-氟-N-甲基苯胺(6.18mM)加入1.00克實施例5制得的化合物(2.94mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.66克標題化合物。
產(chǎn)率44%M.P.100-103℃1H-NMR(CDCl3)δ1.58-1.82(m，1H)，2.82-3.61(m，2H)，3.67-4.05(m，1H)，4.51-4.64(m，1H)，5.51-5.63(m，1H)，7.00-7.13(m，11H)，9.80(bs，1H)實施例422-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-三氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.82ml4-氟-2-甲基苯胺(10.1mM)加入1.9克實施例8制得的化合物(4.82mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.32克標題化合物。
產(chǎn)率53%M.P.158-160℃1H-NMR(CDCl3)δ2.38(s，3H)，2.97-3.30(m，2H)，3.98-4.18(m，4H)，4.65-4.82(m，1H)，6.301(q，1H)，6.85-7.00(m，2H)，7.15-7.38(m，7H)，7.50(d，1H)，11.40(s，1H)，14.40(s，1H)，14.55(s，1H)實施例432-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.9ml4-氟苯胺(20.0mM)加入3.3克實施例9制得的化合物(9mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，得0.61克標題化合物。
產(chǎn)率14.5%M.P.208-211℃1H-NMR(CDCl3)δ3.02(bd，1H)，3.25(m，1H)，3.94(bd，1H)，4.06(s，3H)，4.74(d，2H)，5.00(m，1H)，6.02(tt，1H)，7.08(t，2H)，7.20(m，6H)，7.58(m，3H)，11.90(s，1H)，12.96(s，1H)實施例442-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將2.2ml4-氟-2-甲基苯胺(20mM)加入3.3克實施例9制得的化合物(9.0mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.65克標題化合物。
產(chǎn)率15%M.P.122-130℃1H-NMR(CDCl3)δ2.40(s，3H)，2.84-2.95(bd，2H)，3.15(bd，1H)，4.86(bd，1H)，4.10(s，3H)，4.62(bd，1H)，4.64-4.88(dd，2H)，5.80(tt，1H)，6.90-7.08(m，3H)，7.19-7.40(m，6H)，7.62(d，1H)實施例458-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1-乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.65ml4-氟苯胺(6.95mM)加入1.50克實施例10制得的化合物(4.63mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.20克標題化合物。
產(chǎn)率56%M.P.187-189℃1H-NMR(DMSO-d6)δ0.82(t，3H)，1.90(bs，1H)，2.08(m，1H)，3.10(m，3H)，4.02(s，3H)，4.15(bs，1H)，4.51(m，1H)，5.70(t，1H)，7.20-7.80(m，11H)，11.20(s，1H)，12.05(s，1H)實施例468-甲氧基-2-(2-甲基-4-氟苯氨基)-4-(1-乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.80ml2-甲基-4-氟苯胺(9.73mM)加入1.5克實施例10制得的化合物(4.63mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.70克標題化合物。
產(chǎn)率32%M.P.145-147℃1H-NMR(DMSO-d6)δ0.66(t，3H)，1.72(bs，1H)，1.94(m，1H)，2.32(s，3H)，3.06(m，3H)，3.96-4.20(bs+s，4H)，4.40(m，1H)，5.45(t，1H)，7.00-7.80(m，10H)，10.58(bs，1H)，12.42(bs，1H)實施例472-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-環(huán)丙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18所述的相同步驟制備，只是將1.05ml4-氟-2-甲基苯胺(12.9mM)加入2.25克實施例11制得的化合物(6.15mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得2.5克標題化合物。
產(chǎn)率71%M.P.134-136℃1H-NMR(CDCl3)δ0.10-0.50(m，3H)，0.52-0.66(m，1H)，1.16-1.36(m，1H)，2.39(s，1H)，3.00-3.40(m，2H)，4.08-4.25(m，4H)，4.50-4.70(m，1H)，5.36(d，1H)，6.87-7.05(m，3H)，7.16-7.36(m，6H)，7.48(d，1H)，11.10(d，1H)，13.04(s，1H)實施例482-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(3-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.7ml4-氟苯胺(6.6mM)加入1.5克實施例12制得的化合物(4.4mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.7克標題化合物。
產(chǎn)率35%M.P.150-153℃1H-NMR(CDCl3)δ1.38(d，3H)，2.80(d，1H)，3.37(d，1H)，4.08(s，3H)，4.92(d，1H)，5.30(m，2H)，6.90-7.40(m，8H)，7.40-7.70(m，3H)，11.90(s，1H)，12.80(s，1H)實施例492-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(3-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.1ml4-氟-2-甲基苯胺(8.9mM)加入2.0克實施例12制得的化合物(5.9mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.8克標題化合物。
產(chǎn)率29%M.P.214-217℃1H-NMR(CDCl3)δ1.30(d，3H)，2.40(s，3H)，2.70(d，1H)，3.22(d，1H)，4.10(s，3H)，4.86(m，1H)，5.10-5.30(m，2H)，6.90-7.50(m，10H)，11.20(s，1H)，13.20(s，1H)實施例502-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，1-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.10ml4-氟苯胺(11mM)加入1.80克實施例13制得的化合物(5.0mM)和10ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.14克標題化合物。
產(chǎn)率49%M.P.134-138℃1H-NMR(CDCl3)δ1.75(s，6H)，3.22(t，2H)，4.00(t，2H)，4.09(s，3H)，7.13(m，6H)，7.25(m，2H)，7.40(m，3H)，11.62(s，1H)，13.08(s，1H)實施例512-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，1-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.20ml4-氟-2-甲基苯胺(11mM)加入1.80克實施例13制得的化合物(5.0mM)和10ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.81克標題化合物。
產(chǎn)率34%M.P.176-180℃1H-NMR(CDCl3)δ1.56(s，6H)，2.36(s，3H)，3.21(t，2H)，3.98(t，2H)，4.11(s，3H)，6.94(m，2H)，7.16-7.38(m，8H)，11.22(s，1H)，13.40(s，1H)實施例522-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，8-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.9ml4-氟苯胺(20mM)加入3.3克實施例14制得的化合物(9mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.14克標題化合物。
產(chǎn)率49%M.P.134-138℃1H-NMR(CDCl3)δ1.74(s，3H)，1.23(d，3H)，2.82-3.37(m，2H)，3.68-3.84(m，1H)，4.05(s，3H)，4.58-4.80(m，1H)，5.66(q，1H)，6.90-7.32(m，7H)，7.45(d，1H)，7.58-7.66(m，2H)，11.20(s，1H)實施例532-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，8-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.21ml4-氟-2-甲基苯胺(14.9mM)加入2.50克實施例14制得的化合物(7.06mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.70克標題化合物。
產(chǎn)率21%M.P.128-131℃1H-NMR(CDCl3)δ1.56(s，3H)，2.22(s，3H)，2.31(s，3H)，2.74-3.20(m，2H)，3.62-3.79(m，1H)，3.98(s，3H)，4.36-4.52(m，1H)，5.50(q，1H)，6.80-7.25(m，5H)，7.38-7.50(m，2H)，7.53-7.77(m，2H)，10.28(s，1H)，12.35(s，1H)實施例542-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，6-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.40ml4-氟苯胺(14.8mM)加入2.50克實施例15制得的化合物(7.06mM)和10ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得2.0克標題化合物。
產(chǎn)率61%M.P.124-128℃1H-NMR(CDCl3)δ1.73(bs，3H)，2.32(s，3H)，2.88-3.38(m，2H)，3.66-3.86(m，1H)，4.07(s，3H)，4.60-4.74(m，1H)，5.70(q，1H)，6.96-7.18(m，6H)，7.31(t，1H)，7.45(d，1H)，7.60-7.77(m，2H)，11.80(s，1H)，12.76(s，1H)實施例552-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，6-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.21ml4-氟-2-甲基苯胺(14.9mM)加入2.50克實施例15制得的化合物(7.06mM)和10ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.10克標題化合物。
產(chǎn)率33%M.P.130-135℃1H-NMR(CDCl3)δ1.63(bs，3H)，2.42(s，3H)，2.70-3.30(m，2H)，3.31(s，3H)，3.62-3.79(m，1H)，3.50-3.85(m，1H)，4.09(s，3H)，4.50-4.62(m，1H)，5.55(q，1H)，6.80-7.22(m，6H)，7.28(t，1H)，7.37-7.46(m，2H)，11.11(m，2H)，13.12(s，1H)實施例562-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，4-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將1.90毫升4-氟-2-甲基苯胺(20mM)加入3.00克實施例16制得的化合物(8.40mM)和10ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.10克標題化合物。
產(chǎn)率30%M.P.145-149℃1H-NMR(CDCl3)δ1.42(d，3H)，1.83(bd，3H)，3.24(bd，2H)，4.08(s，3H)，4.60(bd，1H)，5.72(q，1H)，6.84(t，1H)，7.10(m，2H)，7.30(m，6H)，7.63(m，1H)，11.80(s，1H)，12.78(bd，1H)實施例572-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，4-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將2.20ml4-氟-2-甲基苯胺(20mM)加入3.10克實施例16制得的化合物(8.76mM)和10ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.40克標題化合物。
產(chǎn)率34%M.P.135-139℃1H-NMR(CDCl3)δ1.12-1.37(bd，3H)，2.40(s，3H)，3.20(bd，2H)，4.12(s，3H)，4.43(q，1H)，5.57-5.76(qq，1H)，6.95(m，3H)，7.30(m，5H)，7.42(m，2H)，10.82(bd，1H)實施例588-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.5ml4-氟苯胺(4.6mM)加入1.10克實施例17制得的化合物(3.10mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得0.9克標題化合物。
產(chǎn)率63%M.P.186-196℃1H-NMR(CDCl3)δ1.78(m，1H)，2.70-3.05(m，4H)，3.90(m，1H)，4.06(s，3H)，4.48(d，1H)，5.38(m，1H)，7.09-7.40(m，6H)，7.52(d，1H)，7.70(d，3H)，11.18(s，1H)，12.10(bs，1H)，實施例598-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉鹽酸鹽的制備按與實施例18相同的步驟制備，只是將0.80ml4-氟-2-甲基苯胺(9.79mM)加入1.50克實施例17制得的化合物(4.46mM)和15ml二甲基甲酰胺的混合物中，制得1.64克標題化合物。
產(chǎn)率37%M.P.195-197℃1H-NMR(CDCl3)δ1.60(m，1H)，2.33(s，3H)，2.42-2.93(m，4H)，3.90(m，1H)，4.06(s，3H)，4.48(m，1H)，5.10(m，1H)，7.10-7.80(m，9H)，10.40(bs，1H)，12.40(bs，1H)實施例602-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉甲磺酸鹽的制備將0.2ml甲磺酸鹽(3.08mM)滴入1.20克實施例34制得的化合物(2.80mM)與50ml二氯甲烷的混合物中，室溫攪拌生成物30分鐘，減壓濃縮。加入乙醚重結晶生成的殘余物，得1.32克標題化合物。
產(chǎn)率90%M.P.109-115℃1H-NMR(CDCl3)δ1.40-1.80(m，3H)，2.35(s，3H)，2.93-3.40(m，5H)，3.58-3.90(m，1H)，4.11(s，3H)，4.48-4.63(m，1H)，5.53(q，1H)，6.89-7.04(m，3H)，7.17-7.25(m，4H)，7.31-7.46(m，3H)，10.08(s，1H)，12.43(s，1H)實施例612-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉蘋果酸鹽的制備將1.20克實施例34制得的化合物(2.80mM)滴入0.27克的蘋果酸(2.33mM)與50ml乙醇的混合物中。室溫攪拌生成物12小時，并減壓濃縮。加入乙醚和乙酸乙酯重結晶生成的殘余物，得1.15克標題化合物。
產(chǎn)率75%M.P.190-192℃1H-NMR(CDCl3)δ1.44-1.70(m，3H)，2.32(s，3H)，2.80-3.28(m，2H)，3.55-3.75(m，1H)，4.11(s，3H)，4.43-4.60(m，1H)，5.53(q，1H)，6.35(s，3H)，6.89-7.04(m，3H)，7.17-7.35(m，6H)，7.43(d，1H)，12.00(s，1H)，13.10(s，1H)實驗例質(zhì)子泵(H+/K+、ATP酶)活性的抑制
1-1質(zhì)子泵酶源的制備敲擊頭部殺死新西蘭大白兔，取出其胃。除去胃容物用鹽水沖洗胃壁。用拔片刮擦胃內(nèi)壁，用特伏龍-玻璃均質(zhì)機在0.25M蔗糖緩沖液中均質(zhì)得到的細胞。以10，000g的速度離心均質(zhì)溶液10分鐘，再以20，000g的速度進一步離心上清液20分鐘。在以180，000g的超高速離心得到的上清液1小時。棄上清收集沉淀物，該沉淀物在50mM，pH7.2的Tris-HCl緩沖液中懸浮。用相同的緩沖液(1，000倍容積)滲析所述的懸浮液3小時，并在液氮中保存。
在4℃進行上述的離心和滲析。由此得的微體(microsomes)用作體外酶反應研究質(zhì)子泵的酶源。
1-2質(zhì)子泵活性的測定采用體外酶反應研究來測定本發(fā)明之化合物對質(zhì)子泵活性的抑制效果。用Mg++刺激的質(zhì)子泵活性用作陰性對比組，而用Mg++和K+刺激的活性同作陽性對比組。對比化合物是澳美拉唑。
將試管分成4組組1為陰性對比組(n＝3)，組2為陽性對比組(n＝3)，組3(n＝5)為服用本發(fā)明化合物的組，而組4為服用對比化合物組。采用經(jīng)實施例34制得的化合物和澳美拉唑測定組3和組4的質(zhì)子泵活性的抑制效果，每一組都以5個不同的濃度溶于二甲亞砜中。
向組1，2，3，和4的每組中加入0.1ml溶于50mMTris-HCl緩沖液(pH7.2)的氯化鎂(40mM)和50μg的實驗1-1制得的酶源。然后，將0.1ml的溶于50mMTris-HCl緩沖液(pH7.2)中的氯化鉀(500mM)和0.1ml的氯化銨(100mM)加入除了組1之外的各組中。
將0.1ml二甲亞砜加入組1和組2;組3中加入實施例34制得的化合物，該化合物以5種不同濃度溶于二甲亞砜制成溶液使用。組4中加入0.01ml以5種不同濃度溶于二甲亞砜中的澳美拉唑制成的溶液，這5種濃度分別為37.6，21.4，12.2，7.0和4.0μM。再向它們當中加入50mMTris-HCl緩沖液以使總容積達到0.4ml。
以后，將各組試管置于37℃下預反應15分鐘。加入0.1ml ATP溶液(33.3mM)直至反應容積達0.5ml，該ATP溶液是將Tris-ATP (50mM)加入pH.7.2的Tris-HCl緩沖液中制得。MgCl2，KCl，NH4，ATP，酶和Tris-HCl的最終濃度分別為8mM，100mM，20mM，6.7mM，100μg/ml和50mM。在37℃反應30分鐘后，加入25%冷三氯乙酸終止酶反應。用自動分析儀(SBA 300，Gilford)測定釋放的無機磷酸鹽。
組1和組2不同的顯著性表示只是K+激活的質(zhì)子泵的活性。經(jīng)Litchfield-wilcoxon等式(參見J.Pharmacol.Exptl.Ther.96，99(1949))計算組3和組4的抑制百分率。表1代表IC50時抑制質(zhì)子泵活性之試驗化合物的液度。
實驗例2胃分泌的抑制按Shay等人公開的方法(Shay，H.，etal.，Gastroenterology5，43-61(1945))進行實驗2。
將體重為170±10克的Spragae-Dawley大鼠分成3組(n＝5)，實驗前禁食24小時，自由飲水。乙醚麻醉切開腹部，拔離幽門。做為比較組的組1經(jīng)十二指腸給入0.5ml/200g30%聚乙烯甘油400(polyethyleneglyceol400)水溶液。組2和組3分別經(jīng)十二指腸給入實施例34的組合物和澳美拉唑，兩者都分別懸浮于30%聚乙烯甘油400水溶液中，其濃度為20mg/kg。關閉腹腔后，大鼠靜置5小時，然后經(jīng)斷頸殺死之。抽胃得胃液。
以1000g的速度離心胃液去除沉淀。測定胃液量及酸度。以公式(Ⅰ)，(Ⅱ)和(Ⅲ)計算試驗化合物引起的相對容量，相對酸濃度和相對酸流出量，其結果見表2。
相對容量＝ (組1的平均胃液量-組2的平均胃液量)/(組1的平均胃液量-組3的平均胃液量) (Ⅰ)相對酸濃度＝ (組1的平均酸度-組2的平均酸度)/(組1的平均酸度-組3的平均酸度) (Ⅱ)
相對酸流出量＝ (組1的酸流出總量-組2的酸流出總量)/(組1的酸流出總量-組3的酸流出總量) (Ⅲ)實驗例3抗分泌作用按Ghosh和Shild等人的方法(Ghosh&Shild，etal.，BritishJournalofPharmacology1354-61(1958))，在本實驗中研究試驗物質(zhì)的抗分泌作用。
3-1當用組織胺(histamine)刺激胃分泌時試驗物質(zhì)的抗分泌作用將體重為200±20克的Sprague-Pawley雄性大鼠分成3組，第1組給實施例34的化合物，第2組給SK&F96067(參見Keeling，D.J.etal.，BiochemicalPharmacology42，1，123-130(1991))，而第三組給澳美啦唑。每組的大鼠實驗前禁食24小時，自由飲水。腹膜內(nèi)給1.5g/kg的20%氨基甲酸乙酯水溶液進行麻醉，將大鼠放在試驗板上加熱保持37℃。麻醉的大鼠其右頸靜脈插管以給入試驗化合物，左頸靜脈插管以給入刺激物質(zhì)。腹部切開后，將管插入食管和十二指腸，每個管與恒溫器和成分收集器中生理鹽水接通。用蠕動泵向食管和十二指腸中灌注采自恒溫器的生理鹽水，其灌注率為1ml/分鐘。
向右頸靜脈給入實施例34制得的化合物，以及做為比較化合物的SK&F96067和澳美拉唑，每種化合物分別溶于乙醇，40%聚乙烯甘油或生理鹽水中。向左頸靜脈給入組織胺做為胃分泌刺激物。
向胃中首先灌注生理鹽水和含有胃液的灌流物經(jīng)成分收集器以每10分鐘間隔收集。當胃分泌達到平衡狀態(tài)時，大約需要60多分鐘，以4mg/2ml/200g/小時的劑量灌注組織胺以刺激胃分泌，同時以每10分間隔收集灌注液60分鐘。
連續(xù)灌注組織胺的同時，以表3中示出的不同濃度的實施例34制得化合物，SK&F96067和澳美拉唑靜脈注入第1，2，和3組大鼠的右頸靜脈;然后收集灌注液。測定收集成分的容量和酸度以計算出μM/分鐘的酸流出量。
以下面的公式計算試驗化合物的胃分泌抑制(%)試驗化合物的胃分泌抑制＝ (A-C)/(A-B) ×100(Ⅳ)其中A是給入組織胺后60分鐘收集到的成分之胃酸流出量(μmol/10分鐘);
B是生理鹽水灌注后60分鐘收集到的成分之胃酸流出量(μmol/10分鐘);以及C是給入試驗化合物后120分鐘期間最少胃酸流出量(μmol/10分鐘)。
其結果見表3-1
表3-1胃分泌抑制(%) 3-2用五肽促胃酸激素(Pentagastrin)刺激胃分泌時試驗化合物對胃分泌的抑制按與實驗例3-1中相同的步驟進行，只是將五肽促胃酸激素(Pentagastrin)做為分泌刺激物質(zhì)輸入大鼠的左頸靜脈，劑量為24μg/2ml/200g/小時。其結果見表3-2。
表3-2當用組織胺刺激分泌時胃分泌抑制(%)和ED50 實施例4可逆性試驗4-1胃泡的制備按SaccomaniG.等人的方法從豬胃中制備胃泡(SaccomaniG.，etal.，J.Biol.Chem.250，4802-2809(1975))。凍干該胃泡-70℃保存。采用標準小牛血清白蛋白，按Lowry等人的方法鑒定其蛋白含量(參見Lowry，D.H.，Rosebrough，N.J.andRandall，R.J.，J.Biol.Chem.193，265-275(1951))。
4-2H+/K+ATP酶活性將試管分成4組，每組有3個試管。做為對照組的第1組加入10μl的DMSO。第2組，第3組和第4組使用實施例34的化合物，其最終濃度分別是0.17μM，0.33μM和0.67μM。每一組再進一步分成3個小組，其中分別用ATP;ATP和Mg++;以及ATP，Mg++和K+，激活酶。
向所有的試管內(nèi)加入100μl的凍干胃泡，其濃度是25μg蛋白/ml以及90μl5mMpH7.0的Pipes/Tris緩沖液。將實施例34制得的化合物加入每一組，直至其終濃度分別為0.17，0.33或者0.67μM。預孵育15分鐘。
向4組中的每一組都加入50μl的ATP(3mM)，各組的第2和第3小組加入50μl的MgCl2(2mM)。各組的第3小組再加入50μl各種濃度(從0.1mM至30mM)的KCl溶液，然后加150μl pH7.0的Pipes/Tris緩沖液。向其中各小組中加入pH為7.0的Pipes/Tris緩沖液在至其容量達到第3小組相同的容量為止。
37℃孵育試管30分鐘，加25%冷三氯乙酸溶液終止反應。用微型離心機離心，取上清液用自動分析儀(CIBACORNING，Express550)測定釋放出的無機磷酸鹽含量。
按與上述相同的步驟制備，只是15和30μm的澳美拉唑和0.75，1.5及3.0μm的SK&F96067用做對比物質(zhì)，測定釋放出的無機磷酸鹽的含量。
其三個小組釋放無機磷酸鹽的含量被認為在各個使用濃度時都具有H+/K+ATP酶的活性。以下面的公式計算H+/K+ATP酶的特殊活性特殊活性＝(A-C)-(B-C)(Ⅴ)其中A是ATP，Mg++和K+激活的酶的活性;
B是ATP，Mg++激活的酶的活性;
C是ATP激活的酶的活性。
在附圖1中涉及KCl的濃度給出的采用DMSO和實施例34以三種不同濃度的第1組，第2組和第3組的計算出的特殊活性，方法上采用Lineweaver-Bruk方法，其中，■，□和○分別代表以0.67μM，0.33μM和0.17μM濃度的實施例34化合物;●代表DMSO化合物的濃度。圖2所示從SK&F96067中得到的Lineweaver-Burk特殊活性的圖，其中，■，□和○代表其濃度分別為0.3μM，1.5μM，0.75μM;而●表示DMSO化合物的濃度。圖3表示澳美拉唑的特殊活性的Lineweaver-Burk圖，其中○和□分別代表其濃度為15μM和30μM;而●表示DMSO的濃度。
正如圖1，2和圖3所見，本發(fā)明化合物和SK&F96067在K+質(zhì)子泵結合位點處與K+競爭性抑制，而澳美拉唑不出現(xiàn)競爭性抑制，即對于本發(fā)明和SK&F96067化合物，Vmax在Lineweaver-Burk圖中不發(fā)生變化，而Km值有變化。本發(fā)明化合物和SK&F96067的Ki值分別是0.04μM和0.7μM。相反，對于澳美拉唑，在濃度為15和30μM時，反應速度大大降低;增加KCl的濃度沒能克服酶活性的抑制。從這一點看，可證明澳美拉唑不存在與K+競爭抑制的關系。
4-3抑制的可逆性按所謂稀釋(Dilution)和(Washout)方法試驗本發(fā)明化合物對質(zhì)子泵活性的抑制機制，(參見D.J.Keeling，etal.，BiochemicalPharmacology42(1)，123-130(1991)。
即，將試管分成兩組，第一組和第二組各自分別給DMSO和本發(fā)明實施例34制得的化合物。分別將10μl的DMSO和實施例34制得的化合物(6μM)加入第一組和第二組。
向所有二組中加入100μl的由實施例4-1，在濃度為100μg蛋白/1ml時制得的凍干骨胃泡。然后，向第三組中加入5mMPipes/Tris緩沖液(pH6.4)，直至其試管容積達150μl。預孵育15分鐘后，按實施例4-2中相同的步驟測定H+/K+ATP酶的活性。上述試驗物的濃度是終濃度。
預孵育完成后，用5mMPipes/Tris緩沖液(pH6.4)將各組稀釋50倍，然后用Beckman超速離心機(L8-80型)離心60分鐘。棄上清液，將沉淀物懸浮在5m MPipes/Tris緩沖液中(pH6.4)直至其容積達到與預孵育的容積相同。此后，按實施例4-2中所述的相同的步驟測定(H+/K+)-ATP酶活性的抑制;再按與上述相同的步驟一步測定，只是將澳美拉唑和SK&F96067做為對比物質(zhì)。進行所述的稀釋和沖洗之前或之后;H+/K+ATP酶活性抑制如表4所示。
表4 H+/K+ATP酶活性的抑制 從表4中可見，在進行稀釋和沖洗步驟之前澳美拉唑抑制80%的酶活性，而在進行稀釋和沖洗之后都只有67%中酶活性抑制作用?？梢娫谙♂尯蜎_洗步驟，澳美拉唑不脫離酶的結合部位，表明澳美拉唑的抑制是非可逆的。
相反，SK&F96067和本發(fā)明化合物在稀釋和沖洗步驟后酶活性的抑制是零或16%。這表示SK&F96067和本發(fā)明的化合物的酶活性抑制是可逆的。
本發(fā)明的描述僅僅是上述的特定的實施方案而已，本領域技術人員在不超出本發(fā)明的權利要求來限定的實質(zhì)和范圍內(nèi)可以進行其它的修改或變動。
表1質(zhì)子泵活性的抑制(50%)化合物試驗化合物的澳美拉唑的效果比IC50(μM) IC50(μM)Example 180.637.061.67Example 195.29.51.83Example 208.49.21.10Example 211.27.46.17Example 220.77.911.29Example 232.08.64.30Example 24～12.516.1～1.29Example 252.716.15.88Example 260.416.146.00Example 272.95.71.97Example 281.28.36.92Example 294.97.21.47Example 302.27.23.27Example 312.010.15.13Example 32>16.09.3<0.58Example 332.32.81.22Example 341.79.25.45Example 351.85.12.83Example 364.05.11.28Example 37～12.57.5～0.60Example 381.22.01.67Example 394.02.80.70Example 401.310.68.15Example 413.87.62.00Example 4212.52.2<0.18Example 43>12.512.1<0.97Example 44～12.512.1～0.97Example 458.94.10.46Example 46～6.04.10.68Example 47～2512.10.49Example 48～25.06.3～0.25Example 49>25.06.3<0.25Example 506.057.41.22Example 516.127.41.21Example 527.59.41.26
表2胃液的量和酸度化合物相對體積相對濃度相對酸(%)(%)流出量Example 180.380.020.29Example 191.030.280.68Example 201.280.640.92Example 210.74-0.040.38Example 220.740.430.64Example 230.390.420.44Example 240.470.070.36Example 250.690.140.50Example 260.380.040.25Example 270.290.120.30Example 280.670.370.64Example 290.870.670.84Example 300.760.530.76Example 310.860.740.79Example 320.470.160.43Example 331.090.340.79Example 341.360.550.97Example 350.920.580.79Example 360.820.420.67Example 370.370.150.37Example 380.800.530.83Example 390.660.220.57Example 400.730.760.82Example 410.630.150.48Example 420.400.140.42Example 430.810.440.76Example 440.730.560.75Example 450.20-0.22-0.06Example 460.42-0.210.11Example 470.450.150.33Example 480.750.520.76Example 490.590.120.42Example 500.850.650.82Example 510.860.640.82Example 521.030.550.79
權利要求
1.由通式(Ⅰ)表示的喹唑啉衍生物及其藥物學上可接受的鹽 其中R1和R2分別獨立地表示氫或者C1-C4烷基；R3是氫或囟素；R4，R5，R6，R7，R8和R9，可以相同或不相同，為氫或C1-C4烷基，環(huán)丙基，或者R5和R6一起可以形成環(huán)戊或者環(huán)已環(huán)；R10是氫，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羥基C1-C4烷氧基或者甲硫甲氧基。
2.如權利要求1所述的喹唑啉衍生物，它可由下述化合物中選出2-(苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(N-苯甲氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-N-甲基-苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(2-甲基苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(N-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1，8-橋亞乙基(ethano)-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-(N-甲基苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(4-氟-N-甲基-苯氨基)-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;(R)-8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;(S)-8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-(2-羥基乙氧基)-2-(4-氟-2-甲基-苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-乙氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-(甲基硫甲氧基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(N-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(4-氟-N-甲基苯氨基)-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-氟甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1-乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(2-甲基-4-氟苯氨基)-4-(1-乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-環(huán)丙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(3-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(3-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，1-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，1-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，8-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，8-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，6-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，6-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，4-二甲苯-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1，4-二甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(4-氟苯氨基)-4-(1，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;8-甲氧基-2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-4-(1，8-橋亞乙基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉;和2-(4-氟-2-甲基苯氨基)-8-甲氧基-4-(1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉。
3.如權利要求1所述的喹唑啉的藥物上接受的鹽它們可以包括鹽酸鹽，硫酸鹽，磷酸鹽和硝酸鹽的無機酸鹽，和包括酒石酸鹽，富馬酸鹽，檸檬酸鹽，甲磺酸鹽(mesylate)和乙酸鹽的有機鹽。
4.制備如權利要求1所述的通式(Ⅰ)的喹唑啉衍生物的方法，包括使通式(Ⅱ)的化合物與通式(Ⅲ)的化合物反應生成通式(Ⅳ)的化合物，通式(Ⅳ)的化合物隨后與通式(Ⅴ)的化合物反應 其中R1，R2，R3，R4，R5，和R6具有與權利要求1相同的定義，X是囟素。
5.如權利要求4所述的方法，其中通式(Ⅱ)的化合物與通式(Ⅲ)的化合物的反應是在從二氯甲烷，丙酮，乙腈，四氫呋喃以及其與水的混合物中選出的溶劑和從三乙胺，N，N-二甲基苯胺和吡啶中選出的堿中進行的。
6.通式(Ⅳ)的2-氯-4-(取代的-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)喹唑啉 其中R1、R2和R3具有與權利要求1中相同的定義，X是囟素。
7.制備通式(Ⅳ)化合物的方法，包括將通式(Ⅱ)化合物與通式(Ⅲ)化合物反應 其中R1、R2和R3具有與權利要求1中相同的定義，X是囟素。
8.如權利要求7所述的方法，其中所述的反應是在從二甲基甲酰胺、p-二噁烷和二甲亞砜中選出的溶劑中進行的。
9.一種含有治療有效劑量的如權利要求1所述的喹唑啉化合物和藥物學上可接受的載體的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種由通式(I)表示的喹唑啉化合物和其藥物學上可接受的鹽。式中R
文檔編號A61K31/47GK1113912SQ9410572
公開日1995年12月27日 申請日期1994年5月16日 優(yōu)先權日1994年5月16日
發(fā)明者李鐘郁, 金在圭, 孫文奎, 蔡正錫, 林大圣, 趙大雄, 金昌燮, 李正源 申請人:株式會社柳韓洋行