本發(fā)明屬于日化領(lǐng)域，具體涉及一種復(fù)方抑菌型洗手液。

背景技術(shù)：

洗手液是新興的一種手部清潔產(chǎn)品，由于使用方便越來(lái)越受到廣大消費(fèi)者的厚愛。早期，國(guó)內(nèi)在洗手液的研制與開發(fā)方面不太關(guān)注護(hù)膚功效，洗手液產(chǎn)品大都只注重去污殺菌功效，同時(shí)也忽略了洗手液對(duì)人體健康的所帶來(lái)的危害。例如，市場(chǎng)上所售部分洗手液使用氯鹽來(lái)作為增稠劑，將會(huì)直接影響洗手液的滑膩潤(rùn)膚功效及使用者使用時(shí)的手感，如長(zhǎng)期使用，將會(huì)對(duì)人體健康會(huì)帶來(lái)一定的隱患。還有部分洗手液使用甲醛作為殺菌防腐劑以達(dá)到殺菌、抑菌的效果，雖然達(dá)到了清潔去污的目的，但對(duì)人體也造成一定的傷害。近年來(lái)，一些天然提取物以其溫和、無(wú)刺激、無(wú)毒副作用，具有殺菌、抑菌功效且易降解的特點(diǎn)，深受廣大消費(fèi)者的青睞。同時(shí)，由于新興的綠色洗護(hù)產(chǎn)品在市場(chǎng)中備受歡迎，因此，開發(fā)一種清潔效果好，同時(shí)又對(duì)皮膚和環(huán)境都友好的洗手液是非常有意義的。

目前市場(chǎng)上比較青睞的大多為添加植物活性成分，天然無(wú)刺激的新型綠色洗手液，類似蘆薈類洗手液中所含活性酶類物質(zhì)可分解皮膚表層的死亡細(xì)胞，從而去除“污垢”，并對(duì)皮膚的新陳代謝具有一定的保護(hù)作用。還有些洗手液中含有的過(guò)氧化氫酶、sod等酶類能起到防止細(xì)胞老化，去除硬化皮膚(或傷痕)，從而達(dá)到保護(hù)皮膚的作用。另外制備的金桔洗手液，由于金桔含有類黃酮、萜類化合物、苷類、糖類、維生素等物質(zhì)，有一定的保濕、消炎、殺菌和抑菌功效，而且容易在環(huán)境中被生物降解，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，因此制成的抑菌抗炎型洗手液受到廣大消費(fèi)者的厚愛。例如從白蘞、白芷、白茯苓、積雪草、玉竹等植物中提取多糖、多酚、黃酮、植物激酶等物質(zhì)，作為活性添加成分，提高了洗手液美白洗護(hù)性能。由此可見，由中草藥提取物所組成的洗手液，能夠滋潤(rùn)增白皮膚，減輕色素沉著，改善微循環(huán)，促進(jìn)新陳代謝，延緩皮膚衰老，同時(shí)又具有去污，抑菌抗炎等功效，而且對(duì)人體健康也不會(huì)造成危害。

然而，洗手液的除菌效果是所有功能活性中最重要的一個(gè)衡量指標(biāo)，目前市售的各式洗手液所含的除菌物質(zhì)不盡相同，除菌效果亦有區(qū)別。隨著洗手液市場(chǎng)的不斷壯大，洗手液產(chǎn)品也在不斷推陳出新，例如，新型艾葉洗手液抑菌效果研究，采用水蒸氣蒸餾法提取出艾葉揮發(fā)油，制作成乳化液，藥敏片法測(cè)定抑菌效果，并與其它洗手液進(jìn)行對(duì)照。結(jié)果表明新型艾葉洗手液對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均有一定的抑制效果，但是，由于艾葉揮發(fā)油提取產(chǎn)率不高，所以成為影響艾葉洗手液產(chǎn)量提高的主要瓶頸；除此之外，用菊花提取物做原料制成的抑菌型洗手液，雖然具有一定的抑菌功效，但是由于菊花的特殊氣味限制了洗手液品質(zhì)的提升；然而用迎春花制備的洗手液具有一定的抑菌殺菌功效，如對(duì)大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡糖球菌、傷寒桿菌、腸炎桿菌等都有一定的抑菌活性，但是原料來(lái)源大多是以野生為主，所以基體成分含量不穩(wěn)定，難以保證洗手液的品質(zhì)及可持續(xù)研發(fā)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種含天然丹參多糖的復(fù)方抑菌型洗手液，以解決現(xiàn)有洗手液抑菌活性不高的問題。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種含天然丹參多糖復(fù)方抑菌型洗手液的制備方法。

本發(fā)明技術(shù)方案如下：一種含天然丹參多糖復(fù)方抑菌型洗手液，由下列重量份的原料組成：十二烷基二甲基甜菜堿0.1％-8％、脂肪醇聚氧乙醚0.3％-5％、椰子油脂肪醇二乙醇酰胺1％-12％、烷基糖苷1％-10％、丙二醇5％-10％、維生素e0.1％-0.5％、丹參多糖提取物10％-20％，余量為蒸餾水；用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)溶液的ph在6.0-7.0之間。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述丹參多糖提取物由以下方法制得：

a、制備乙醇/硫酸銨雙水相體系

配置40％-60％的無(wú)水乙醇，按照硫酸銨與乙醇溶液1.3—2:5的質(zhì)量體積比加入無(wú)水乙醇，攪拌溶解，待溶液由渾濁變澄清后，自然冷卻至室溫，溶液分層，上相為乙醇和水，下相為硫酸銨飽和溶液；

b、制備制備丹參粗多糖

丹參粉碎過(guò)篩,稱取丹參粉末,加入乙醇/硫酸銨雙水相溶液，浸泡24h-48h；置于水浴鍋中,溫度控制在30℃-60℃之間，控制浸提時(shí)間為60min-150min，減壓抽濾,將溶液真空濃縮，然后在濃縮液中加入乙醇硫酸銨雙水相溶液溶解濃縮液，分離的固體和液體，取液體，加入雙水相溶液，離心30min,取上清液用乙醇/硫酸銨雙水相溶液定容，得到丹參多糖；

c、丹參多糖的純化

取上述丹參多糖粗提取液100-200ml，加入sevag試劑，振搖，離心，收集上清液，重復(fù)操作，去除蛋白1—3次，得到最終純化的多糖。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟b中的分離固體和液體的方式為離心，轉(zhuǎn)速為5000r/min，

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟c中的丹參多糖粗提取液與sevag試劑的體積比為1:5，振搖5-10min，在8000r/min轉(zhuǎn)速下離心10-15min，收集上清液去除蛋白。

上述含天然丹參多糖復(fù)方抑菌型洗手液的制備方法，包括如下步驟：

取蒸餾水加熱至70-80℃，在不斷攪拌的條件下，逐滴加入十二烷基二甲基甜菜堿使其充分溶解后，降溫至30—50℃，加入檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，調(diào)節(jié)溶液的ph在6.0-7.0之間；加入脂肪醇聚氧乙醚、椰子油脂肪醇二乙醇酰胺、烷基糖苷、丹參多糖提取物、丙二醇,勻速攪拌使其充分溶解后，恒溫50-60℃條件下，攪拌,冷卻至30—40℃，再次用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖溶液調(diào)節(jié)ph至中性或弱酸性；加入水調(diào)節(jié)粘度，最后加入維生素e，陳化30-50h后，即得成品。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述攪拌轉(zhuǎn)速為1000r/min，攪拌時(shí)間為30min。

本發(fā)明以提取物中的黃酮類化合物作為添加成分，以提取的丹參粗多糖作為功能因子，在多次純化的基礎(chǔ)上，將其作為抑菌功能成分，提供一種兼具去污能力強(qiáng)、抑菌、無(wú)毒、無(wú)刺激等功效的含天然丹參多糖復(fù)方抑菌型洗手液。

本發(fā)明產(chǎn)品以植物多糖丹參多糖作為天然綠色的抑菌活性成分，用十二烷基二甲基甜菜堿(bs-12)、脂肪醇聚氧乙醚(aeo)、椰子油脂肪醇二乙醇酰胺(尼諾爾6501)、烷基糖苷作為表面活性劑，丙二醇作為助溶劑，維生素e作為補(bǔ)水抗氧化成分，丹參多糖提取物作為抑菌、補(bǔ)水、美白的活性功能因子，用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖液作為ph調(diào)節(jié)劑，復(fù)方抑菌型洗手液，同時(shí)采用濾紙片擴(kuò)散、微孔板二倍稀釋法研究制備的洗手液的抑菌性能進(jìn)行檢測(cè)與評(píng)估，通過(guò)對(duì)泡沫高度及抑菌效能進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果表明丹參多糖復(fù)方抑菌型洗手液能夠滿足家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中理化性能指標(biāo)指出，洗手液泡沫高度≥100mm的要求，同時(shí)抑菌實(shí)驗(yàn)表明，該洗手液具有一定的的抑菌特性。本發(fā)明產(chǎn)品天然、綠色、無(wú)毒無(wú)害、無(wú)刺激性。

本發(fā)明方法以乙醇/硫酸銨雙水相作為提取天然產(chǎn)物功能活性成分的保護(hù)試劑，提取丹參多糖，能夠避免提取溶劑對(duì)多糖原始生物活性的影響，減少溶劑殘留，防止多糖提取物二次污染等問題，為丹參多糖作為功能活性因子添加至洗手液中產(chǎn)生特定功效提供可靠保證。開發(fā)成本低廉、提取效率高，來(lái)源穩(wěn)定可靠。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明實(shí)施例制得的洗手液對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用結(jié)果圖；

圖2是對(duì)照組洗手液對(duì)對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用結(jié)果圖；

圖3是對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。

具體實(shí)施方式

下面的實(shí)施例可以進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。

實(shí)施例中原料丹參來(lái)源為甘肅隴西地區(qū)種植的丹參。sevag試劑為商購(gòu)。

實(shí)施例1.含天然丹參多糖復(fù)方抑菌型洗手液的原料組成：

實(shí)施例2.含天然丹參多糖復(fù)方抑菌型洗手液的原料組成：

實(shí)施例3.含天然丹參多糖復(fù)方抑菌型洗手液的原料組成：

上述實(shí)施例1-3制備洗手液的方法如下：

取20ml的蒸餾水加熱至70℃，在不斷攪拌的條件下，逐滴加入十二烷基二甲基甜菜堿(bs-12)使其充分溶解后，降溫至50℃，測(cè)其溶液的ph，加入已配置好的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(ph＝5)，調(diào)節(jié)溶液的ph值至在6.0-7.0之間；加入脂肪醇聚氧乙醚(aeo)，椰子油脂肪醇二乙醇酰胺(尼諾爾6501)，烷基糖苷，加入丹參多糖(1),丙二醇,勻速攪拌使其充分溶解后，恒溫50℃條件下，以1000r/min的轉(zhuǎn)速攪拌30min,冷卻至40℃，再次用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖溶液調(diào)節(jié)ph至5.0；加入少量的水調(diào)節(jié)粘度，最后加入維生素e，陳化30h后，即得成品。

實(shí)施例4-制備洗手液的方法如下：

配方同實(shí)施例1，取20ml的蒸餾水加熱至80℃，在不斷攪拌的條件下，逐滴加入十二烷基二甲基甜菜堿(bs-12)使其充分溶解后，降溫至30℃，測(cè)其溶液的ph，加入已配置好的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(ph＝5)，調(diào)節(jié)溶液的ph值至在6.0-7.0之間；加入脂肪醇聚氧乙醚(aeo)，椰子油脂肪醇二乙醇酰胺(尼諾爾6501)，烷基糖苷，加入丹參多糖(1),丙二醇,勻速攪拌使其充分溶解后，恒溫60℃條件下，以1000r/min的轉(zhuǎn)速攪拌30min,冷卻至30℃，再次用檸檬酸－檸檬酸鈉緩沖溶液調(diào)節(jié)ph至5.0；加入少量的水調(diào)節(jié)粘度，最后加入維生素e，陳化50h后，即得成品。

上述實(shí)施例1-4中丹參多糖(1)的制備方法如下：

操作步驟1：制備乙醇/硫酸銨雙水相體系

配置40％的無(wú)水乙醇1000ml，按照硫酸銨與乙醇溶液的質(zhì)量體積比2:5加入40％的無(wú)水乙醇，在電磁攪拌器攪拌作用下，快速溶解硫酸銨，等溶液由渾濁變澄清后，自然冷卻至室溫，可觀察到明顯的分層現(xiàn)象，上相為乙醇和水，下相為硫酸銨飽和溶液。

操作步驟:2：制備丹參粗多糖

丹參粉碎過(guò)篩,稱取5g丹參粉末，加入不同料液比(1:40g/ml)的乙醇/硫酸銨雙水相溶液，浸泡24h；置于水浴鍋中,溫度控制在45℃，控制浸提時(shí)間為90min，減壓抽濾，將溶液真空濃縮；然后在濃縮液中加入乙醇硫酸銨雙水相溶液溶解濃縮液，離心(5000r/min)，取上清液，加1倍體積的雙水相溶液；再以5000r/min離心30min,取上清液用乙醇/硫酸銨雙水相溶液定容至一定體積，得到丹參多糖，標(biāo)記為丹參多糖1號(hào)，貯存?zhèn)溆谩?/p>

操作步驟3：丹參粗多糖的純化與含量測(cè)定

取上述丹參多糖粗提取液100ml，按照體積比1:5加入sevag試劑，劇烈振搖5min，在8000r/min轉(zhuǎn)速下離心10min，收集上清液，即為sevag法去除蛋白1次；按照同樣方法重復(fù)以上操作，得sevag法去除蛋白2次、3次，得到最終純化的多糖，采用苯酚硫酸顯色法測(cè)定其多糖含量為67.8％。

實(shí)施例5-制備丹參多糖(按照實(shí)施例1的配方)，制備工藝不同。

操作步驟1：制備乙醇/硫酸銨雙水相體系

配置60％的無(wú)水乙醇1000ml備用，按照硫酸銨與乙醇溶液的質(zhì)量體積比1.3:5)加入40％的無(wú)水乙醇，在電磁攪拌器攪拌作用下，快速溶解硫酸銨，等溶液由渾濁變澄清后，自然冷卻至室溫，可觀察到明顯的分層現(xiàn)象，上相為乙醇和水，下相為硫酸銨飽和溶液。

操作步驟:2：制備丹參粗多糖

丹參粉碎過(guò)篩,稱取10g丹參粉末，加入不同料液比(1:50g/ml)的乙醇/硫酸銨雙水相溶液，浸泡48h；置于水浴鍋中,溫度控制在60℃，控制浸提時(shí)間為60min，減壓抽濾，將溶液真空濃縮；然后在濃縮液中加入乙醇硫酸銨雙水相溶液溶解濃縮液，過(guò)濾，取濾液，加1倍體積的雙水相溶液；再以5000r/min離心30min,取上清液用乙醇/硫酸銨雙水相溶液定容至一定體積，得到丹參多糖，標(biāo)記為丹參多糖1號(hào)，貯存?zhèn)溆谩?/p>

操作步驟3：丹參粗多糖的純化與含量測(cè)定

取上述丹參多糖粗提取液200ml，按照體積比1:5加入sevag試劑，劇烈振搖10min，在8000r/min轉(zhuǎn)速下離心15min，收集上清液，去除蛋白1次；按照同樣方法重復(fù)以上操作，去除蛋白2-3次，得到最終純化的多糖。

《對(duì)比試驗(yàn)》

一、測(cè)試制備洗手液的起泡性能：

(1)取配置好的洗手液，用去離子水稀釋100倍以后保存?zhèn)溆茫?/p>

(2)取(1)中稀釋好的洗手液加入9支具塞試管中，每3支試管作為一組，分別加入洗手液的體積為50ml、60ml、80ml，塞住試管口上下?lián)u動(dòng)三次，記下泡沫高度；

(3)重復(fù)步驟(2)，測(cè)量3次，記錄數(shù)據(jù)每個(gè)樣平行做三次，以加入的蒸餾水作為試劑空白。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表1所示：

表1

國(guó)家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中理化性能指標(biāo)指出，洗手液泡沫高度≥100mm為正常，本發(fā)明實(shí)施例制備的洗手液泡沫平均高度為644.2mm，符合且優(yōu)于洗手液理化性能指標(biāo)。

二、研究洗手液對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制活性

在無(wú)菌操作臺(tái)上遴選被活化的供試菌2—3環(huán)，接入5ml液體培養(yǎng)基中，用100μl的移液槍吹打數(shù)次，取10μl均勻涂布于固體培養(yǎng)基平板上，置于無(wú)菌超凈臺(tái)放置3—4h，培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h。用平板計(jì)數(shù)器測(cè)量菌懸液的濃度，達(dá)到107—108cfu/ml，低溫留存?zhèn)溆谩＝?jīng)高壓滅菌并烘干的濾紙制作成半徑為6mm的圓形濾紙片，放在干燥的平皿中，121℃濕熱滅菌30min，在平皿溫度降到室溫之后分別倒入不同配方的丹參多糖洗手液。

如圖3所示，一個(gè)平皿倒入無(wú)菌生理鹽水作為陰性對(duì)照(不加丹參多糖，洗手液的其余配方同實(shí)施例1)，另一個(gè)平皿倒入青霉素注射液作為陽(yáng)性對(duì)照(不加丹參多糖，洗手液的其余配方同實(shí)施例1)，分別浸泡30min。在無(wú)菌操作臺(tái)上將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基熔化后倒入平皿中，待培養(yǎng)基凝固之后用無(wú)菌移液管量取約0.5ml的菌懸液，用涂布棒在培養(yǎng)基上涂布均勻，用無(wú)菌鑷子將濾紙片貼在培養(yǎng)基上，每個(gè)平皿均勻的分布4個(gè)，每個(gè)配方做4個(gè)平行，然后將平皿置于28℃的溫度下進(jìn)行培養(yǎng)36h，每個(gè)處理設(shè)3次重復(fù)。定期觀察菌落形態(tài)，并用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，計(jì)算抑制生長(zhǎng)率。

對(duì)照例1、以酸提堿沉法得到的丹參多糖作為功能添加因子；

方法如下：丹參粉碎、過(guò)篩，稱取5g丹參粉末，加入ph＝5的乙酸溶液浸泡24h，置于60℃的水浴鍋中，控制提取時(shí)間40min，然后將混合物減壓抽濾，棄去沉淀物，上清液真空濃縮，加入0.1mol/l的氫氧化鈉溶液靜置3h,離心(5000r/min)40min,棄去沉淀，取上清液定容至一定體積，得到丹參多糖，標(biāo)記為丹參多糖2號(hào)，洗手液的其余配方同實(shí)施例1，洗手液的制備方法同上。

對(duì)照例2、以乙醇-微波輔助法提取的丹參多糖作為功能添加因子；

方法如下：丹參粉碎、過(guò)篩，稱取5g丹參粉末，加入40％乙醇溶液浸泡24h，在微波功率360-400w條件下,控制微波反應(yīng)時(shí)間5-10min，得粗提取液，減壓抽濾，將溶液真空濃縮，加入0.1mol/l乙醇溶液溶解濃縮液，離心(5000r/min)30-50min,棄去沉淀，取上清液加0.1mol/l的無(wú)水乙醇溶液定容至一定體積，得到丹參多糖，標(biāo)記為丹參多糖3號(hào)，洗手液的其余配方同實(shí)施例1，洗手液的制備方法同上。

對(duì)照例3、不加丹參多糖，洗手液的其余配方同實(shí)施例1。

結(jié)果：比較不同添加量洗手液的抑菌試驗(yàn)結(jié)果，實(shí)施例1-3制得的洗手液對(duì)金黃色葡萄球菌都一定的抑制作用，三個(gè)配方實(shí)驗(yàn)組的抑菌直徑分別為34.4mm、32.9mm、33.8mm，根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照組的抑菌直徑(48.5mm)和陰性對(duì)照組的抑菌直徑(12.4mm)，分別計(jì)算其抑菌率分別為95.2％，91.1％，93.6％，其抑菌率的計(jì)算公式為：抑制率＝r1/r0-r*100％(式中：r1：實(shí)驗(yàn)組的抑菌直徑，r0：陽(yáng)性對(duì)照組的抑菌直徑；r：陰性對(duì)照組的抑菌直徑)。

從圖1和圖2可以看出，采用本發(fā)明乙醇硫酸銨雙水相提取并純化后的丹參多糖制備的洗手液對(duì)金黃色球菌具有較為明顯的抑制作用，能夠從圖1中看出實(shí)施例1-3制備的洗手液能夠產(chǎn)生明顯的透明圈，說(shuō)明具有抑菌活性。而對(duì)照組采用酸提堿沉法提取的丹參多糖和采用乙醇-超聲輔助法提取的丹參多糖對(duì)金黃色葡萄球菌沒有抑菌作用，從圖2中看不到明顯的透明圈，因此沒有抑菌活性。