一種治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物及其用途
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物及其用途，本發(fā)明的組合物由以下各原料組成：三棱、莪術(shù)、水蛭、生曬參、黃芪、鹿茸、淫羊藿、浙貝。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，本發(fā)明組合物能夠通過(guò)降低卵巢腫瘤細(xì)胞VEGF的表達(dá)從而抑制卵巢癌腫瘤血管生成。因此，本發(fā)明還提出了所述中藥復(fù)方組合物在制備治療卵巢癌藥物中的用途。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物及其用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方組合物，尤其涉及一種用于治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合 物，本發(fā)明屬于婦科疾病的中藥治療【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 卵巢癌是世界范圍內(nèi)女性面臨的七大常見(jiàn)癌癥之一，其組織成分非常復(fù)雜，是全 身各臟器原發(fā)腫瘤類(lèi)型最多的部位。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年接近大約百萬(wàn)分之十五的婦女被診 斷為卵巢癌，數(shù)據(jù)顯示在過(guò)去的30年里卵巢癌的五年生存率仍為30%，死亡率居?jì)D科癌癥 之首。每年全世界有數(shù)百的研究所對(duì)卵巢癌的病因、治療機(jī)制、臨床RCT進(jìn)行研究，數(shù)億的 治療和研究費(fèi)用也在逐年遞增，希望能夠找到改善卵巢癌治療的方法。
[0003] 西醫(yī)在治療卵巢癌的方法中，以手術(shù)治療為主。能夠早期發(fā)現(xiàn)、卵巢癌的手術(shù)適當(dāng) 擴(kuò)大范圍（盆清、腹主動(dòng)脈旁淋巴結(jié)清掃到腎動(dòng)脈水平、甚至切除卵巢懸韌帶全長(zhǎng)等），術(shù) 后的化療現(xiàn)已將PC、TP、PAC初步定為卵巢上皮性癌的一線(xiàn)方案，中國(guó)專(zhuān)家已經(jīng)根據(jù)NCCN指 南確定了《卵巢癌臨床實(shí)踐指南（中國(guó)版）》，規(guī)范了卵巢癌的治療。理想的腫瘤細(xì)胞減滅 術(shù)并輔以鉬類(lèi)或紫杉醇的聯(lián)合化療是卵巢癌的規(guī)范性治療，然而化療耐藥導(dǎo)致大部分患者 最終復(fù)發(fā)或疾病持續(xù)存在。放射治療方法作為術(shù)前治療和輔助治療等，對(duì)卵巢無(wú)性細(xì)胞瘤 放療可起到其獨(dú)有的療效，但對(duì)于其他腫瘤，放療方法的效果不明顯。
[0004] 目前有些地區(qū)采取中西結(jié)合治療方法，相關(guān)中藥作用途徑和藥理作用環(huán)節(jié)等方面 的相關(guān)研究也廣泛開(kāi)展，卻沒(méi)有完全深入，其作用的關(guān)鍵位點(diǎn)尚需進(jìn)一步的探索?，F(xiàn)有的治 療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物雖然對(duì)卵巢癌都具有一定的療效，但都不同程度的存在著療效 不夠顯著，安全性不高等缺陷，有待改進(jìn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服現(xiàn)有治療卵巢癌方法的不足，提供一種能夠有 效治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 本發(fā)明的一種治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物，由以下重量份的各原料藥組成：三 棱10-15重量份、莪術(shù)10-15重量份、水蛭10-15重量份、生曬參25-35重量份、黃芪40-50 重量份、鹿茸10-15重量份、淫羊藿40-50重量份以及浙貝20-30重量份。
[0008] 為了達(dá)到更好的治療效果，各原料藥優(yōu)選的重量份是：三棱10重量份、莪術(shù)10重 量份、水蛭10重量份、生曬參30重量份、黃芪50重量份、鹿茸10重量份、淫羊藿50重量份 以及浙貝20重量份。
[0009] 本發(fā)明中藥復(fù)方組合物是基于發(fā)明人對(duì)卵巢癌深層發(fā)病機(jī)理的研究及其治療原 貝1J，同時(shí)依據(jù)發(fā)明人多年臨床經(jīng)驗(yàn)和藥理學(xué)研究成果，以破血消癥、軟堅(jiān)散結(jié)、補(bǔ)氣養(yǎng)血、填 精益髓為治則，進(jìn)而篩選出三棱、莪術(shù)、水蛭、生曬參、黃芪、鹿茸、淫羊藿、浙貝作為原料藥， 并按照一定的重量配比組方而成。
[0010] 本發(fā)明中藥復(fù)方組合物的配伍依據(jù)：方中三棱、莪術(shù)破血散癖消癥，行氣消積止 痛，為攻堅(jiān)破積之要藥。配水蛭破瘀血消癥瘕而不耗氣；浙貝開(kāi)郁散結(jié)；生曬參、黃芪扶正 固本增強(qiáng)機(jī)體免疫功能而抗腫瘤；鹿茸為血肉有情之品補(bǔ)腎助陽(yáng)而填精髓，調(diào)理沖任；淫 羊藿溫腎助陽(yáng)，提高機(jī)體免疫力；諸藥相合，取其"少火則生氣"，元陽(yáng)壯則益振奮脾陽(yáng)，共奏 破血消癥、軟堅(jiān)散結(jié)、補(bǔ)氣養(yǎng)血、填精益髓之功效，不僅切中卵巢腫瘤的病因病機(jī)，而且結(jié)合 臨床實(shí)際，體現(xiàn)了祛邪與扶正并用，攻補(bǔ)兼施之意。
[0011] 本發(fā)明所用到的原料藥均可從普通中藥材商店購(gòu)買(mǎi)得到，其規(guī)格符合國(guó)家中藥材 標(biāo)準(zhǔn)。
[0012] 本發(fā)明的中藥復(fù)方組合物可以加入制備不同劑型時(shí)所需的各種輔料，例如崩解 齊IJ、潤(rùn)滑劑、粘合劑等，以常規(guī)的中藥制劑的制備方法制備成任何一種常用的口服制劑，例 如可以是丸劑、膠囊劑、片劑、散劑、顆粒劑、湯劑或口服液等。
[0013] 實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，本發(fā)明中藥復(fù)方組合物能降低卵巢腫瘤細(xì)胞VEGF的表達(dá)，抑制腫 瘤血管生成，從而抑制和阻斷卵巢腫瘤的形成，因此對(duì)于治療卵巢癌具有顯著地療效。
[0014] 因此，本發(fā)明還提出了所述的中藥復(fù)方組合物在制備治療卵巢癌的藥物中的用 途。
[0015] 所述的中藥復(fù)方組合物在制備抑制腫瘤血管生成的藥物中的用途，其中，優(yōu)選的， 所述抑制腫瘤血管生成是指抑制卵巢癌腫瘤血管生成，其是通過(guò)降低卵巢腫瘤細(xì)胞VEGF 的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。
[0016] 本發(fā)明中藥復(fù)方組合物的用法與用量：本發(fā)明藥物的用藥量取決于具體劑型，以 及病人的年齡、體重、健康狀況等因素。作為指導(dǎo)：中湯藥劑，口服，一次150ml，一日兩次， 28日為一個(gè)療程。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0017] 圖1為二甲基苯蒽誘發(fā)Wistar大鼠卵巢癌的實(shí)驗(yàn)研究；
[0018] 圖1A顯不造 t旲后8周廣生深紅色腹水；圖1B顯不因惡病質(zhì)死亡的大鼠；圖1C顯 示造模后12周卵巢腫物增大與周?chē)M織粘連固定成團(tuán)，同時(shí)可見(jiàn)血性腹水；圖1D顯示產(chǎn)生 的腹水、卵巢腫物。
[0019] 具體實(shí)驗(yàn)實(shí)施方式
[0020] 下面結(jié)合具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會(huì)隨著描述而 更為清楚。但這些實(shí)施例僅是范例性的，并不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù) 人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式 進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
[0021] 本發(fā)明所用到的原料藥均可從普通中藥材商店購(gòu)買(mǎi)得到，其規(guī)格符合國(guó)家中藥材 標(biāo)準(zhǔn)。
[0022] 實(shí)施例1治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物的制備
[0023] -種治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物，由以下重量的各原料藥組成：三棱10g、莪術(shù) 10g、水蛭10g、生曬參30g、黃苗50g、鹿鸞10g、淫羊藿50g以及浙貝20g。
[0024] 實(shí)施例2治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物的制備
[0025] -種治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物，由以下重量的各原料藥組成：三棱15g、莪術(shù) 15g、水蛭15g、生曬參30g、黃苗40g、鹿鸞15g、淫羊藿40g以及浙貝20g。
[0026] 實(shí)施例3治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物的制備
[0027] -種治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物，由以下重量的各原料藥組成：三棱15g、莪術(shù) 10g、水蛭10g、生曬參35g、黃苗45g、鹿鸞10g、淫羊藿45g以及浙貝30g。
[0028] 實(shí)施例4治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物的制備
[0029] -種治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物，由以下重量的各原料藥組成：三棱12g、莪術(shù) 12g、水蛭10g、生曬參30g、黃苗45g、鹿鸞12g、淫羊藿40g以及浙貝25g。
[0030] 實(shí)驗(yàn)例1藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)
[0031] 一、材料和方法
[0032] 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：
[0033] Fischer344大鼠75只，雌性，鼠齡8周，體重（120± 15) g，在通風(fēng)、濕度、溫度適宜 的動(dòng)物室內(nèi)常規(guī)飼養(yǎng)。
[0034] 2、實(shí)驗(yàn)藥物和試劑：
[0035] 本發(fā)明實(shí)施例1制備的中藥復(fù)方組合物按照中藥水煎劑的常規(guī)制法制成水煎劑， 水浴80°C濃縮后藥液濃度為1. 338g/ml ;
[0036] 桂枝茯苓膠囊混懸液（CTPP):生理鹽水溶解，制備成懸液，濃度為0. 29g/kg ;
[0037] 二甲基苯蒽；兔抗人VEGF IgG ;DAB酶底物顯色試劑盒；Proteinase K溶液； PV-9005 ;PV-9001購(gòu)自北京中山生物技術(shù)有限公司。
[0038] 3、模型制備：
[0039] 3. 1致癌劑棉線(xiàn)的制備：用苯溶劑溶解二甲基苯蒽后，將棉線(xiàn)浸入藥液內(nèi)，置于通 風(fēng)櫥內(nèi)待苯揮發(fā)后，計(jì)算棉線(xiàn)的含藥量為0. 5mg/cm。
[0040] 3. 2麻醉：1 %的戊巴比妥鈉腹腔注射（0· 2mL/50g)。
[0041] 3. 3造模方法：將麻醉后的Fischer344大鼠仰臥固定于鼠板上，局部消毒，無(wú)菌條 件下于下腹正中、恥骨聯(lián)合上lcm縱行切開(kāi)腹壁約1.5cm充分暴露卵巢后將含藥棉線(xiàn)縫入 卵巢皮質(zhì)內(nèi)，關(guān)腹，待動(dòng)物清醒后放回籠內(nèi)。每只大鼠腹腔注射慶大霉素 O.lmL X7d清潔級(jí) 環(huán)境飼養(yǎng)。
[0042] 4、分組及給藥：
[0043] 實(shí)驗(yàn)采用隨機(jī)方法共分5組，模型組、桂枝茯苓丸組（CTPP組）和中藥復(fù)方組合物 低、中、高劑量組，每組15只。大鼠造模后2周開(kāi)始分別給藥，方法和用量：模型組灌飼生理 鹽水；中藥復(fù)方組每日灌服中藥（劑量以"人與動(dòng)物間按表面積折算的等效劑量比值表"計(jì) 算），低劑量組給藥劑量為含生藥10. 70g/kg/d，中劑量組給藥劑量為含生藥21. 40g/kg/d， 高劑量組給藥劑量為含生藥32. 10g/kg/d ;桂枝茯苓丸組以0. 29g/kg/d劑量灌胃。每日一 次，每只3mL。
[0044] 5、實(shí)驗(yàn)取材：
[0045] 大鼠造模后每天仔細(xì)觀察大鼠的食量、飲水量、腹部變化等日常情況。術(shù)后第6周 開(kāi)始每2周分別取各組實(shí)驗(yàn)大鼠1只，脫頸處死，肉眼觀察腫瘤生長(zhǎng)情況，并做常規(guī)病理學(xué) 檢查是否有局部腫塊形成。測(cè)量所取下的腫瘤組織重量，根據(jù)公式測(cè)得抑瘤率。
[0046] 抑瘤率=(模型對(duì)照組平均瘤重一實(shí)驗(yàn)組平均瘤重）/模型對(duì)照組平均瘤 重 X100%
[0047] 6、VEGF 檢測(cè)：
[0048] 采用免疫組化SABC法。卵巢腫瘤組織石蠟切片，厚度為5 μ m免疫組化操作按試 劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
[0049] VEGF分析統(tǒng)計(jì)方法：VEGF染色以胞漿或胞核出現(xiàn)棕褐色染色為標(biāo)記，VEGF蛋白以 大于5%以上細(xì)胞質(zhì)或和細(xì)胞核出現(xiàn)淡黃至棕黃色為陽(yáng)性表達(dá)。依照陽(yáng)性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞 數(shù)的多少分為：陰性（-)細(xì)胞核內(nèi)未見(jiàn)染色顆粒；陽(yáng)性（+)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)小于30% ;陽(yáng)性 (++)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為30%-60%，陽(yáng)性（+++)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)大于60%
[0050] 使用Mias-2000圖像分析系統(tǒng)，在200倍視下觀察染色切片具有代表性的視野。對(duì) VEGF蛋的染色結(jié)果進(jìn)行定量觀察。經(jīng)測(cè)量可測(cè)定面積、陽(yáng)性反應(yīng)面積及相應(yīng)的灰度值。按 公式計(jì)算陽(yáng)性指數(shù)（Positiveindex PI)取均值，數(shù)據(jù)以平均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示，PI越大，表 達(dá)強(qiáng)度越高。
[0051] PI =陽(yáng)性灰度值X陽(yáng)性反應(yīng)面積/測(cè)定面積
[0052] 二、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
[0053] 運(yùn)用SPSS10. 0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。兩組陽(yáng)性率差別的假設(shè)檢驗(yàn)用X2檢驗(yàn)。
[0054] 三、結(jié)果
[0055] 1、模型制備：
[0056] 圖1顯示為二甲基苯蒽誘發(fā)的Wistar大鼠卵巢癌模型照片。
[0057] 圖1A顯不造 t旲后8周廣生深紅色腹水；圖1B顯不因惡病質(zhì)死亡的大鼠；圖1C顯 示造模后12周卵巢腫物增大與周?chē)M織粘連固定成團(tuán)，同時(shí)可見(jiàn)血性腹水；圖1D顯示產(chǎn)生 的腹水、卵巢腫物，說(shuō)明造模成功。
[0058] 2、Fische r344大鼠一般狀況的觀察：
[0059] 術(shù)后40天模型組即出現(xiàn)一只腹部極度膨隆大鼠，伴有進(jìn)食量、飲水量減少，排便 少，體重?zé)o明顯變化，毛色略黃，無(wú)光澤，行動(dòng)遲緩；其余四組未見(jiàn)到明顯的腹部膨隆大鼠。 術(shù)后52天桂枝茯苓丸組出現(xiàn)一只腹部膨隆大鼠，同時(shí)伴有進(jìn)食量、飲水量減少，排便少，行 動(dòng)遲緩癥狀，術(shù)后60天中藥復(fù)方低劑量組出現(xiàn)一只腹部輕度膨隆大鼠，伴有進(jìn)食量、飲水 量減少，排便少，行動(dòng)遲緩。分別取少量腹水鏡下觀察可見(jiàn)：腹水中癌細(xì)胞脫落較多，細(xì)胞形 狀不規(guī)則，呈成堆聚集，細(xì)胞核異常增大，染色質(zhì)濃染凝結(jié)成塊，核漿比例嚴(yán)重失調(diào)；部分胞 漿融合，細(xì)胞邊界不清楚，緊密成群，周?chē)梢?jiàn)散在的腺癌細(xì)胞。
[0060] 各組一般情況比較：模型組：大鼠極為消瘦、腹部脹大呈蛙狀、腹水量多，呈血性、 行動(dòng)遲緩，貧血貌（眼球、耳廓蒼白），直至衰竭等表現(xiàn)。中藥復(fù)方組合物高、中、低劑量組大 鼠輕度消瘦，體重輕度減少，行動(dòng)無(wú)明顯改變，飲食、飲水無(wú)明顯改變，排便無(wú)明顯改變，毛 色略黃，晦暗。腹部輕度膨隆。CTPP組大鼠輕度消瘦，行動(dòng)遲緩，飲食、飲水有所減少，排便 略少，毛色略黃，腹部膨隆，眼球蒼白。
[0061] 3、光鏡觀察結(jié)果：
[0062] 模型組腫瘤細(xì)胞增生極活躍，細(xì)胞排列不規(guī)則，失去極性，胞漿少，細(xì)胞核大小形 態(tài)不規(guī)則，排列紊亂，核質(zhì)深染，有明顯的分裂相。腫瘤部分區(qū)域細(xì)胞過(guò)度增生，堆積呈條索 狀，中間形成小圓孔，形成腺泡狀圖像。間質(zhì)受浸潤(rùn)，組織分化程度多呈中、高度分化，間質(zhì) 被新生的腫瘤細(xì)胞所代替。CTPP組腫瘤組織呈中度惡性，乳頭狀結(jié)構(gòu)，細(xì)胞異型性大，核分 裂相明顯。中藥復(fù)方組合物高、中、低劑量組惡性改變的組織分化較好，纖維間質(zhì)包裹癌巢， 間質(zhì)未受浸，上皮增生明顯，腫瘤細(xì)胞局部可見(jiàn)壞死，并被纖維組織所代替，細(xì)胞核大小形 態(tài)不一致，染色質(zhì)略增多，少量核分裂相，邊緣可見(jiàn)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。實(shí)驗(yàn)中有效大鼠75只， 發(fā)生卵巢腫瘤53例，卵巢腫瘤總的發(fā)病率為71%。
[0063] 4、各實(shí)驗(yàn)組大鼠抑瘤率：
[0064] 結(jié)果見(jiàn)表1
[0065] 表1中藥復(fù)方組合物對(duì)Fischer344大鼠抑瘤作用結(jié)果
[0066]

【權(quán)利要求】
1. 一種治療卵巢癌的中藥復(fù)方組合物，其特征在于由以下重量份的各原料藥組成：三 棱10-15重量份、莪術(shù)10-15重量份、水蛭10-15重量份、生曬參25-35重量份、黃芪40-50 重量份、鹿茸10-15重量份、淫羊藿40-50重量份以及浙貝20-30重量份。
2. 按照權(quán)利要求2所述的中藥復(fù)方組合物，其特征在于，各原料藥的重量份是：三棱10 重量份、莪術(shù)10重量份、水蛭10重量份、生曬參30重量份、黃芪50重量份、鹿茸10重量份、 淫羊藿50重量份以及浙貝20重量份。
3. 按照權(quán)利要求1或2所述的中藥復(fù)方組合物，其特征在于：按照中藥制劑的常規(guī)制 備方法制成任何一種口服制劑，優(yōu)選的，所述的口服制劑為丸劑、膠囊劑、片劑、散劑、顆粒 齊U、口服液或湯劑。
4. 權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)所述的中藥復(fù)方組合物在制備治療卵巢癌的藥物中的用途。
5. 權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)所述的中藥復(fù)方組合物在制備抑制腫瘤血管生成的藥物中 的用途。
6. 按照權(quán)利要求5的用途，其中所述抑制腫瘤血管生成是指抑制卵巢癌腫瘤的血管生 成。
【文檔編號(hào)】A61K35/32GK104083717SQ201410304868
【公開(kāi)日】2014年10月8日 申請(qǐng)日期:2014年6月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月30日
【發(fā)明者】韓鳳娟, 張艷, 張雪薇 申請(qǐng)人:韓鳳娟