一種治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物及其制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物，該藥物的藥物活性成分為牛至。通過(guò)將牛至用水蒸氣蒸餾，得到牛至揮發(fā)油，再加入藥物輔料得到。本發(fā)明所用藥材來(lái)源于植物，其種植及加工對(duì)環(huán)境影響很小，對(duì)環(huán)境友好，制得的藥物在使用中對(duì)動(dòng)物毒副作用小，無(wú)刺激性，避免了動(dòng)物食品中抗生素的殘留，保證了食品安全。采用本發(fā)明的藥物治療奶牛子宮內(nèi)膜炎，能抑殺子宮內(nèi)膜炎致病菌，促進(jìn)奶牛子宮機(jī)能的恢復(fù)，治療效果好，治愈率達(dá)86%以上，對(duì)母豬子宮內(nèi)膜炎的治愈率達(dá)88%以上。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于獸藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物及其制備方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]子宮內(nèi)膜炎是導(dǎo)致奶牛、母豬繁殖障礙的主要疾病之一，在我國(guó)奶牛、母豬中極為常見(jiàn)多發(fā)，發(fā)病率牛為10%~30%、豬為30%~60%，因奶牛子宮內(nèi)膜炎引起的奶牛不孕癥占生殖系統(tǒng)疾病的68.34%，患子宮內(nèi)膜炎的奶牛不能正常發(fā)情、配種、受孕、產(chǎn)犢，從而延長(zhǎng)胎間距，胎間距每延長(zhǎng)一天，導(dǎo)致少產(chǎn)鮮奶和犢牛損失約合人民幣20多元(未計(jì)入飼養(yǎng)管理、飼草料、人工、醫(yī)藥等費(fèi)用)，全國(guó)每年因奶牛子宮內(nèi)膜炎少產(chǎn)鮮奶損失超過(guò)2億元，少產(chǎn)犢牛49.5萬(wàn)頭，直接經(jīng)濟(jì)損失約10億元。母豬因子宮內(nèi)膜炎導(dǎo)致的損失就更加嚴(yán)重。目前用于治療子宮內(nèi)膜炎藥物主要為抗菌藥物，臨床長(zhǎng)期大劑量的子宮灌注或靜脈、肌肉注射導(dǎo)致致病菌耐藥性產(chǎn)生，使用劑量愈來(lái)愈大，臨床療效愈來(lái)愈低，同時(shí)還導(dǎo)致鮮奶中抗生素和藥物殘留嚴(yán)重超標(biāo)，引起食品安全和公共衛(wèi)生問(wèn)題，各國(guó)研究機(jī)構(gòu)都在探索新的防治藥物和治療方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，提供一種療效好的治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的植物源藥物及其制備方法。
[0004]本發(fā)明實(shí)現(xiàn)上述目的所采用的技術(shù)方案如下:
一種治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物，所述藥物的藥物活性成分為牛至。
[0005]進(jìn)一步，所述牛至為牛至的揮發(fā)油部位。
[0006]進(jìn)一步，所述藥物的`劑型為灌注劑、軟膠囊、栓劑或泡騰片。
[0007]進(jìn)一步,所述動(dòng)物為奶?；蚰肛i。
[0008]進(jìn)一步，所述治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物的制備方法:牛至用水蒸氣蒸餾，得到牛至揮發(fā)油，再加入藥用輔料。
[0009]本發(fā)明所用藥材來(lái)源于植物，其種植及加工對(duì)環(huán)境影響很小，對(duì)環(huán)境友好，制得的藥物在使用中對(duì)動(dòng)物毒副作用小，無(wú)刺激性，避免了動(dòng)物食品中抗生素的殘留，保證了食品安全。采用本發(fā)明的藥物治療奶牛子宮內(nèi)膜炎，能抑殺子宮內(nèi)膜炎致病菌，促進(jìn)奶牛子宮機(jī)能的恢復(fù)，治療效果好，治愈率達(dá)86%以上，對(duì)母豬子宮內(nèi)膜炎的治愈率達(dá)88%以上。
【具體實(shí)施方式】
[0010]以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
[0011]實(shí)施例1
將牛至切成5cm左右的段，置于燒瓶中，用水蒸氣蒸餾制得揮發(fā)油，將制得的揮發(fā)油按每100ml揮發(fā)油加入0.5g無(wú)水硫酸鈉，靜置24小時(shí)，過(guò)濾，棄去硫酸鈉，將揮發(fā)油加入藥用麻油中，至體積1000ml (2mg牛至揮發(fā)油/ml)，分裝，滅菌，即得牛至灌注液。[0012]實(shí)施例2
按比例取明膠-甘油-水(I: 0.3: 1)，明膠用35°C水浸泡1.5小時(shí)，升溫至50°〇，真空脫氣30分鐘，再將料液升溫至62°C左右，保溫2小時(shí)，加入甘油，充分?jǐn)嚢韬?，真空脫?0分鐘，膠液過(guò)濾待用。將依實(shí)施例1的方法制得的牛至揮發(fā)油2000mg加入麻油中，使其濃度為2mg/ml。將濾好的膠液壓入制囊機(jī)中，調(diào)節(jié)油軸和鼓輪，使壓制成的膠帶厚度為
0.3_，在供料系統(tǒng)將牛至油麻油混合液通過(guò)噴體完成注料的同時(shí)，滾模旋壓完成膠囊的封囊，制成橢圓形、粒重為Ig的軟膠囊。
[0013]實(shí)施例3
取可可豆脂約130g置蒸發(fā)皿內(nèi)，移置水浴上加熱，至可可豆脂約2/3熔融時(shí)，加入20g牛至揮發(fā)油，攪拌均勻，取下蒸發(fā)皿，攪拌使全部熔融，注入涂過(guò)肥皂水的栓模中，凝固后整理啟模，取出栓劑，每粒重1.5g。
[0014]實(shí)施例4
將羥丙甲纖維素溶于60%乙醇中，丙烯酸樹(shù)酯II號(hào)溶于85%乙醇中，二者按1:1混合，將十六醇加熱熔融后加入到上述混合液中，隨加隨攪拌，最后加吐溫-80，制成混合黏合劑；取牛至揮發(fā)油、碳酸氫鈉、微晶纖維素、乳糖，粉碎、過(guò)篩、混合，加混合黏合劑制粒，干燥，整粒，制成堿顆粒；取富馬酸粉碎，過(guò)篩，加混合黏合劑制粒，干燥，整粒，制成酸顆粒；取酸堿顆粒按比例混勻，加硬酯酸鎂壓片，每片含牛至揮發(fā)油50mg的泡騰片。
[0015]一、藥理、毒性試驗(yàn)
一)試驗(yàn)用藥物為本發(fā)明的牛至灌注液。
[0016]二)半數(shù)致死量測(cè)定
1.預(yù)實(shí)驗(yàn)
小白鼠:體重18±2 g，雌雄各半，10只為一組，分為10組，分別按照不同劑量灌胃本發(fā)明的藥液，觀察出現(xiàn)的癥狀并記錄死亡數(shù)，找出引起0%和100%死亡率劑量的所在范圍。
[0017]2.正式實(shí)驗(yàn)
在預(yù)實(shí)驗(yàn)所獲得的0%和100%致死量的范圍內(nèi)，選用5個(gè)劑量(相鄰劑量間呈1:0.8等比數(shù)列)；
小白鼠:體重18±2 g，雌雄各半，10只為一組，分為5組，灌胃，觀察給藥后動(dòng)物的死亡情況，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。應(yīng)用簡(jiǎn)化幾率單位換算法計(jì)算LD5tlt5
[0018]LD50 = 1.628g / kg
LD50 的 95% 可信限=1.317 ~1.939 (g / kg)
依據(jù)毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，本制劑為低毒。
[0019]三)刺激性實(shí)驗(yàn)
1)兔點(diǎn)眼法
兔10只，每只左眼給藥，右眼對(duì)照。將實(shí)驗(yàn)藥物0.05ml滴入左眼結(jié)膜囊內(nèi)，右眼滴生理鹽水做對(duì)照。觀察24小時(shí)，觀察角膜有無(wú)紅腫、充血、流淚能否恢復(fù)等情況。
[0020]兔點(diǎn)眼法結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組相比無(wú)明顯分泌增加現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)組眼結(jié)膜未見(jiàn)明顯的充血、流淚、紅腫等癥狀。 [0021 ] 2 )小白鼠腹腔注射法
小白鼠20只，雌雄各半，平均分為兩組，實(shí)驗(yàn)組每只腹腔注射0.1~03ml受試藥物，對(duì)照組每只注射同等量生理鹽水，觀察小白鼠有無(wú)扭體反應(yīng)(腹部抵觸臺(tái)面，軀體向一側(cè)歪扭)出現(xiàn)。
[0022]小白鼠腹腔注射法結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均未見(jiàn)扭體反應(yīng)出現(xiàn)。
[0023]二、治療母豬子宮內(nèi)膜炎臨床實(shí)驗(yàn)
收治蘭州豬場(chǎng)患子宮內(nèi)膜炎母豬76例，每次一粒依實(shí)施例3制得的牛至油栓劑，隔日一次，連用兩次。最后一次用藥后的第10天觀察治療效果，治愈67例，用藥后炎癥消失，子宮內(nèi)無(wú)炎性分泌物和膿液排出，子宮恢復(fù)正常；有效6例，用藥后子宮炎癥明顯緩解，子宮分泌物基本接近正常；無(wú)效3例，用藥后炎癥未見(jiàn)緩解，子宮分泌物沒(méi)有減少。
[0024]三、治療奶牛子宮內(nèi)膜炎臨床實(shí)驗(yàn) I試驗(yàn)材料
1.1試驗(yàn)動(dòng)物
患臨床型子宮內(nèi)膜炎的中國(guó)荷斯坦奶牛40頭，分別來(lái)自蘭州市城關(guān)奶牛場(chǎng)和花莊奶牛場(chǎng)。試驗(yàn)前均未給任何藥物。試驗(yàn)前對(duì)奶牛進(jìn)行臨床檢查，包括體溫、脈搏、呼吸以及營(yíng)養(yǎng)狀況等，并對(duì)其胎次、病程和治療次數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。將病牛隨機(jī)分配到各試驗(yàn)組中。
[0025]1.2試驗(yàn)藥品
供試品:本發(fā)明的牛至灌注液。
[0026]對(duì)照藥物:青霉素G鈉，成都維爾京元亨藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。批號(hào):20131018。
[0027]2試驗(yàn)方法
2.1試驗(yàn)分組
將臨床診斷為患臨床型子宮內(nèi)膜炎的奶牛40頭，隨機(jī)分為藥物治療組(試驗(yàn)動(dòng)物30頭)和青霉素對(duì)照藥物組(試驗(yàn)動(dòng)物10頭)。
[0028]2.1.1 “牛至灌注液”組
設(shè)高、中(推薦劑量)、低3個(gè)試驗(yàn)組，每組試驗(yàn)動(dòng)物10頭。
[0029]2.1.2藥物對(duì)照組
青霉素G鈉對(duì)照藥物組，試驗(yàn)動(dòng)物10頭。
[0030]2.2用法用量
將藥液溫浴至接近體溫溫度，通過(guò)直腸把握法，用輸精器將藥液注入子宮。2次為一個(gè)療程，經(jīng)2次未治愈者改用其他藥物治療。
[0031]2.2.1 “牛至灌注液”治療組
高、中(推薦劑量)、低3個(gè)試驗(yàn)組每次分別子宮灌注150ml/次、100 ml/次和50 ml/次，隔日一次，連用2次，兩次為一個(gè)療程。
[0032]2.2.2青霉素藥物對(duì)照組
青霉素G鈉，子宮灌注。I次/日，每次800萬(wàn)單位，注射用水溶解，連用2次。
[0033]2.3奶牛子宮內(nèi)膜炎的診斷
2.3.1奶牛子宮內(nèi)膜炎的臨床診斷
患臨床型子宮內(nèi)膜炎奶牛臨床表現(xiàn)為:患病奶牛從陰門(mén)中排出粘性或粘膿性炎性分泌物，拱背、努責(zé)和屢做排尿姿勢(shì)，尾根及會(huì)陰部污穢不潔，趴臥時(shí)排出量增多。有時(shí)雖未見(jiàn)到排出炎性分泌物，但發(fā)情時(shí)粘液 中混有膿汁、膿塊或膿絮。有時(shí)患病奶牛不發(fā)情或發(fā)情周期不規(guī)律。嚴(yán)重者患病奶牛體溫升高，精神沉郁，食欲不振，反芻減弱，奶產(chǎn)量降低等表現(xiàn)。[0034]直腸檢查:子宮收縮反應(yīng)減弱，子宮角、子宮體不同程度增大，子宮壁厚薄不均且質(zhì)地軟硬程度不一致。
[0035]陰道檢查:用開(kāi)膣器進(jìn)行陰道檢查，陰道、膣部及子宮頸口可見(jiàn)炎性分泌物；取出開(kāi)膣器時(shí)有時(shí)粘附有膿性炎性分泌物；非發(fā)情時(shí)，可見(jiàn)子宮頸口不同程度的開(kāi)張及不同程度的充血。
[0036]2.3.2微生物學(xué)檢查
對(duì)收治的患臨床型子宮內(nèi)I吳炎的奶牛進(jìn)彳丁治療如后的微生物學(xué)檢查，治療如在臨床檢查時(shí)采集病料，治療后最后一次用藥后的第10天采集病料。
[0037](I)病料采集
按以下方法采集病料:采樣前先用濃度為0.2%的新潔爾滅溶液清洗患病奶牛外陰部，然后將滅菌輸精管按人工授精術(shù)式送入子宮頸，采取分泌物廣3 ml注入滅菌的空青霉素瓶?jī)?nèi)，封蓋，貼標(biāo)簽，置4°C冰箱保存待檢。
[0038](2)病料初步鑒定
將被檢材料進(jìn)行涂片，革蘭氏染色，鏡檢。
[0039](3)培養(yǎng)基制備
營(yíng)養(yǎng)肉湯、血清肉湯、普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂、血清瓊脂、鮮血瓊脂、麥康凱瓊脂、伊紅美蘭瓊月旨、三糖鐵瓊脂、蛋白胨水和枸櫞酸鹽培養(yǎng)基等均按李健強(qiáng)等編寫(xiě)的《獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)習(xí)指導(dǎo)》中的方法制備。
[0040](4)細(xì)菌的分離培養(yǎng)
將所采集的病料接種于適宜的培養(yǎng)基平板上，37 V培養(yǎng)24~48 h，從中選出單個(gè)菌落，經(jīng)染色涂片檢查與初次組織染色鏡檢觀察到的菌體形態(tài)和染色特性一致的單一菌，再挑選單個(gè)菌落接種于固體瓊脂斜面或鮮血瓊脂斜面2管和液體培養(yǎng)基2管，37 °C培養(yǎng)24h，取出即為純培養(yǎng)物。
[0041](5)鑒定
根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果，進(jìn)行細(xì)菌生化鑒定。將上述斜面培養(yǎng)物接種于各種不同的生理生化試驗(yàn)培養(yǎng)基上，37 V孵育24~48 h，甚至可延長(zhǎng)至72~96 h，觀察和記錄各項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)分離菌做出鑒定。
[0042]2.3.3血液學(xué)檢查
對(duì)收治的患子宮內(nèi)膜炎奶牛治療前后進(jìn)行紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù)、白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞壓積(PCV)測(cè)定。治療前在臨床檢查時(shí)采集血樣，治療后最后一次用藥后的第10天采集血樣。
[0043]2.4奶牛子宮內(nèi)膜炎的療效判定標(biāo)準(zhǔn)
對(duì)確診為患臨床型子宮內(nèi)膜炎的奶牛按2.2的方法給藥后，最后一次用藥后的第10天觀察治療效果，在“以臨床檢查結(jié)果為準(zhǔn)，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)”的原則下，按以下療效判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行治療效果評(píng)定。
[0044]治愈:從陰門(mén)無(wú)粘性或粘膿性分泌物排出。用開(kāi)膣器打開(kāi)陰道檢查，陰道、膣部及子宮頸口處均無(wú)炎性分泌物，非發(fā)情時(shí)，子宮頸口關(guān)閉，呈粉紅色(無(wú)充血)；直腸檢查，子宮的收縮、大小及質(zhì)地恢復(fù)正常；停止治療后30天內(nèi)恢復(fù)正常發(fā)情，且粘液正常，可進(jìn)行人工受精。各種實(shí)驗(yàn)室檢查均無(wú)異常。[0045]顯效:從陰門(mén)無(wú)粘性或粘膿性分泌物排出。用開(kāi)膣器打開(kāi)陰道檢查，陰道、膣部及子宮頸口處均無(wú)炎性分泌物，非發(fā)情時(shí)，子宮頸口關(guān)閉，呈粉紅色(無(wú)充血)。直腸檢查，子宮的收縮、大小及質(zhì)地基本恢復(fù)正常；停止治療后30天內(nèi)，未恢復(fù)正常發(fā)情，或雖然恢復(fù)發(fā)情但粘液仍不正常(混有膿絮或不夠清亮或韌性差)，不能進(jìn)行人工受精。實(shí)驗(yàn)室檢查，各種指標(biāo)接近正常。
[0046]有效:臨床癥狀明顯改善。陰門(mén)仍有炎性分泌物排出，但排出量明顯減少，且膿性分泌物比例降低。用開(kāi)膣器打開(kāi)陰道檢查，陰道、子宮頸口仍可見(jiàn)少量炎性分泌物存在；非發(fā)情時(shí)，子宮頸口仍開(kāi)張且充血；直腸檢查，子宮的收縮反應(yīng)增加、子宮體和子宮角變小，質(zhì)地改善。實(shí)驗(yàn)室檢查，大多數(shù)指標(biāo)接近正常。
[0047]無(wú)效:各項(xiàng)檢查及臨床癥狀未見(jiàn)好轉(zhuǎn)或有所加重。實(shí)驗(yàn)室檢查，各種指標(biāo)無(wú)明顯變化。
[0048]2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
各項(xiàng)檢測(cè)數(shù)據(jù)均用SPSS軟件(SPSSV12.0版)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0049]3、結(jié)果與分析
3.1患子宮內(nèi)膜炎奶牛臨床檢查情況
收治和確診的40頭患臨床型子宮內(nèi)膜炎奶牛，經(jīng)臨床檢查，心跳、呼吸基本正常，心跳為50~80次/min，呼吸為15~28次/min ;體溫基本正常(37.8~39.5°C )，其中3頭奶牛達(dá)到41°C。外觀營(yíng)養(yǎng)狀況中等。
[0050]在受試的40頭奶牛中，年齡為3~10歲；頭胎經(jīng)產(chǎn)奶牛11頭，2~4胎經(jīng)產(chǎn)奶牛17頭；5胎以上經(jīng)產(chǎn)12奶牛頭；病程最短25天，最長(zhǎng)的可達(dá)55天，平均為40天。
[0051]3.2細(xì)菌的分離鑒定和抑`菌效果觀察
治療前后，對(duì)40頭患臨床型子宮內(nèi)膜炎奶牛采集的病料進(jìn)行細(xì)菌分離和鑒定，并對(duì)感染情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果分別見(jiàn)表1和表2。
[0052]由表1可見(jiàn)，大腸桿菌的感染率為92.5%、鏈球菌為82.5%、葡萄球菌為率72.5%、棒狀桿菌為40%、未鑒定菌為45%。大腸桿菌、鏈球菌和葡萄球菌仍是引起奶牛子宮內(nèi)膜炎的主要病原菌。本試驗(yàn)所分離的未鑒定菌是否具有致病性有待于進(jìn)一步研究。
[0053]由表2可見(jiàn)，患病奶牛經(jīng)本試驗(yàn)藥物和對(duì)照藥物治療后，細(xì)菌感染百分率顯著降低(差異極顯著，/X0.01)。進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析顯示，高劑量組與中劑量組無(wú)顯著差異Gd>0.05)，高劑量組與低劑量組和對(duì)照組之間有極顯著差異(/X0.01);中劑量組與低劑量組有極顯著差異Gd〈0.01)，與對(duì)照組之間差異極顯著Od〈0.01);低劑量組與對(duì)照組之間無(wú)顯著差異0° >0.05)。
[0054]表1治療前患臨床型子宮內(nèi)膜炎奶牛感染情況統(tǒng)計(jì)
【權(quán)利要求】
1.一種治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物，其特征在于，所述藥物的藥物活性成分為牛至。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物，其特征在于，所述牛至為牛至的揮發(fā)油部位。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物，其特征在于，所述藥物的劑型為灌注劑、軟膠囊、栓劑或泡騰片。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物，其特征在于，所述動(dòng)物為奶牛或母豬。
5.權(quán)利要求1所述治療動(dòng)物子宮內(nèi)膜炎的藥物的制備方法，其特征在于，牛至用水蒸氣蒸餾，得到牛 至揮發(fā)油，再加入藥用輔料。
【文檔編號(hào)】A61K36/00GK103768104SQ201410051075
【公開(kāi)日】2014年5月7日 申請(qǐng)日期:2014年2月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月14日
【發(fā)明者】苗小樓, 潘虎, 尚小飛, 王瑜, 陳化琦, 王學(xué)智 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所, 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院中獸醫(yī)研究所藥廠