一種治療腰椎間盤(pán)突出的中藥組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種服用簡(jiǎn)單、治療周期短、治愈率高、療效鞏固、無(wú)毒副作用的治療腰椎間盤(pán)突出癥的中藥組合物，同時(shí)還提供其檢測(cè)方法，具體為對(duì)本發(fā)明藥物制劑中的馬錢(qián)子、麻黃、赤芍、甘草、鹿銜草、川芎進(jìn)行鑒別；測(cè)定本發(fā)明藥物制劑中麻黃堿和士的寧的含量；該檢測(cè)方法重復(fù)性好、方便操作有利于控制組合物的質(zhì)量。
【專利說(shuō)明】一種治療腰椎間盤(pán)突出的中藥組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種中成藥的檢測(cè)方法，特別是涉及一種治療腰椎間盤(pán)突出的中藥組合物的檢測(cè)方法，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]腰椎間盤(pán)突出癥，又稱腰椎間盤(pán)纖維環(huán)破裂癥，或腰椎間盤(pán)核突出癥，它是纖維環(huán)破裂后髓核突出壓迫脊神經(jīng)根而致腰腿痛的一種常見(jiàn)病，多發(fā)于壯年體力勞動(dòng)者，男多于女，其臨床癥狀主要癥狀表現(xiàn)在：腰、臀、大小腿以至足部反復(fù)發(fā)作性酸脹、麻痛等不適，嚴(yán)重時(shí)可出現(xiàn)肌肉萎縮等癥狀。腰椎間盤(pán)突出癥的治療方法主要有保守治療和手術(shù)治療兩種：一般發(fā)病初始除一些特殊情況外，均采取保守治療，包括腰部理療、牽引、口服消炎止痛藥物、注射糖皮質(zhì)激素、推拿等；若保守治療3-6個(gè)月以上，癥狀無(wú)緩解或又復(fù)發(fā)者，則可考慮采用手術(shù)治療，包括髓核摘除術(shù)和髓核成形術(shù)。我國(guó)中醫(yī)常采用的傳統(tǒng)治療方法包括內(nèi)服中藥湯劑、中藥外敷加推拿。但這些治療方法大多存在療程長(zhǎng)、治愈率低（15^-30%),容易復(fù)發(fā)、治療費(fèi)用高等技術(shù)缺陷。 [0003]清代《急救應(yīng)驗(yàn)良方》九分散為制馬錢(qián)子、麻黃、乳香、沒(méi)藥。臨床應(yīng)用表明該方對(duì)腰椎間盤(pán)突出癥有較好的治療作用。但經(jīng)過(guò)我們研究發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有制劑存在檢測(cè)方法落后，產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺點(diǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供一種服用簡(jiǎn)單、治療周期短、治愈率高、療效鞏固、無(wú)毒副作用的治療腰椎間盤(pán)突出癥的藥物。還提供其檢測(cè)方法。
[0005]本發(fā)明所述的組合物是由以下重量份的中藥原料制成的：
惚木85-95份，老鸛草35-45份，制馬錢(qián)子1_3份，
鹿銜草35-45份，赤芍35-45份，杜仲40-52份，
麻黃25-35份，川芎25-35份，甘草15-25份，
乳香1_3份，沒(méi)藥(制）1-3份；
為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們建立了此組合物的檢測(cè)方法法，該方法采用薄層色譜法對(duì)馬錢(qián)子、麻黃、赤芍、甘草、鹿銜草、川芎進(jìn)行鑒別，采用高效液相色譜法對(duì)士的寧、麻黃堿成分進(jìn)行含量測(cè)定。該檢測(cè)方法精密度、靈敏度及穩(wěn)定性均好，確保產(chǎn)品質(zhì)量的“安全、均一、穩(wěn)定、有效、可控?！?br> 本發(fā)明的制劑形式可以包括片劑、膠囊、微丸、滴丸或顆粒劑等口服制劑。
[0006]本發(fā)明所述的組合物優(yōu)選是由以下重量份的中藥原料制成的：
惚木90份，老鸛草40份，制馬錢(qián)子2份，
本發(fā)明所述的組合物最優(yōu)選是由以下重量份的中藥原料組成的：
惚木90份，老鸛草40份，制馬錢(qián)子2份，
鹿銜草40份，赤芍40份，杜仲46份，麻黃30份，川彎30份，甘草20份，
乳香2份，沒(méi)藥(制）2份；
本發(fā)明中藥組合物的制備方法可以采用以下方法：
通過(guò)上述配方的中藥原料經(jīng)過(guò)提取或其他方式加工，制成藥物活性物質(zhì)，隨后，以該物質(zhì)為原料，需要時(shí)加入藥物可接受的載體，按照制劑學(xué)的常規(guī)技術(shù)制成顆粒、片劑、膠囊、微丸或滴丸。所述活性物質(zhì)可以通過(guò)選自以下方式的方法得到，如；通過(guò)粉碎、壓榨、煅燒、研磨、過(guò)篩、滲漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、層析等方法得到，這些活性物質(zhì)可以是浸膏形式的物質(zhì)，可以是干浸膏也可以是流浸膏，還可以是高純度提取物，根據(jù)制劑的不同需要決定制成不同的濃度。
[0007]本發(fā)明一種制備方式是可以按照下述步驟：所有藥材加藥材總重5-10倍量的水，浸泡1-2小時(shí)后，煎煮2-4次，每次1-2小時(shí)，合并濾液，減壓濃縮至50~60°C時(shí)相對(duì)密度
I.15-1. 25，加乙醇攪勻，使藥液含醇量達(dá)50-70%，靜置，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇并繼續(xù)濃縮至50~60°C時(shí)相對(duì)密度I. 20-1. 30，制得本發(fā)明藥物的活性組分。
[0008]本發(fā)明的另一種制備方法是直接粉碎各原料藥物，加入一定量的淀粉后，灌入膠囊。
[0009]本發(fā)明的中藥組合物是由上述11味中藥原料組成。
[0010]本發(fā) 明的中藥組合物，在制成制劑時(shí)根據(jù)需要可以加入藥物可接受的載體，這些載體可以是任何適合制成組合物的載體。
[0011]針對(duì)其特點(diǎn)及本發(fā)明配方，我們提供了如下檢測(cè)方法：
本發(fā)明所述檢測(cè)方法包括以下步驟：
對(duì)性狀進(jìn)行觀察，根據(jù)藥典的方法對(duì)內(nèi)容物進(jìn)行檢查，對(duì)內(nèi)容物馬錢(qián)子、麻黃、赤芍、甘草、鹿銜草、川芎進(jìn)行鑒別，對(duì)含有的士的寧、麻黃堿成分進(jìn)行含量測(cè)定。
[0012]因此，本發(fā)明的檢測(cè)方法包括以下步驟：
A.對(duì)本發(fā)明藥物制劑中的馬錢(qián)子、麻黃、赤芍、甘草、鹿銜草、川芎進(jìn)行鑒別；
B.測(cè)定本發(fā)明藥物制劑中麻黃堿和士的寧的含量；
其中A鑒別的具體步驟如下：
(O取本品內(nèi)容物2g，研細(xì)，加氫氧化鈉試液IOml使溶解，放置10分鐘，加入乙醚20ml，超聲處理10分鐘，放冷，分取乙醚層，濾過(guò)，取續(xù)濾液10ml，置水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液，另取士的寧對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2010年版一部VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各ΙΟμΙ，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一水（10 ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點(diǎn)；
(2)取本品顆粒2g，研細(xì)，加O.5mol/L氫氧化鈉試液50ml，搖散，加氯化鈉5g，超聲處理10分鐘，蒸餾，用盛有O. 5mol/L的鹽酸溶液5ml的100ml量瓶接收至近100ml，搖勻，作為供試溶液，另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一水(15 ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)；
(3)取本品內(nèi)容物2g，研細(xì)，加乙醚50ml，回流60分鐘，濾過(guò)，濾液收集備用，藥渣揮干乙醚，加氯仿50ml，回流3小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?ml使溶解，加于弱陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱上，用50ml水洗脫，洗脫液蒸干，殘?jiān)颖?0ml使溶解，加活性炭適量脫色濾過(guò)，濾液濃縮至約5ml作為供試品溶液，另取芍藥苷對(duì)照品，加丙酮制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一氯仿（10 ： I)為展開(kāi)劑，在氨蒸氣飽和下展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，于105°C加熱使斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)；
(4)取鑒別（3)項(xiàng)下的丙酮提取液，揮干丙酮，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液，另取川芎對(duì)照藥材lg，加丙酮按供試品溶液制法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一氯仿（5 ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；
(5)取本品內(nèi)容物2g，加丙酮50ml，水浴低溫回流3小時(shí)，濾去丙酮，藥渣揮干丙酮，加乙醇40ml，水浴加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次40ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)右掖?0ml使溶解，加活性炭適量，搖勻，放置30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約10ml，作為供試品溶液，另取甘草酸單銨鹽對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含O. 2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以氯仿一甲酸一冰醋酸（15 ： I ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以20%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈（365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 顏色的熒光斑點(diǎn)；
6)取本品內(nèi)容物2g，加乙醇50ml，水浴加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液中加入等量10%鹽酸溶液，水浴加熱回流3小時(shí)，加水約20ml，蒸去乙醇，用乙酸乙酯提取2次，每次50ml，合并三氯甲烷液，蒸至約20ml，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液，另取齊墩果酸對(duì)照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各ΙΟμΙ，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以三氯甲燒一甲醇（10:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以20%硫酸乙醇溶液，100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同顏色的斑點(diǎn)，紫外光燈（365nm)下顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；
其中B測(cè)定含量的具體步驟如下：
(I)士的寧的含量測(cè)定
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以硅膠為填充劑；以環(huán)己燒一三氯甲燒一無(wú)水甲醇一三乙胺（20:75:5:0. 4)為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min ;檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；
對(duì)照品溶液的制備取士的寧對(duì)照品約20mg，精密稱定，置200ml量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每Iml含O. Img的溶液，搖勻，作為對(duì)照品溶液；
供試品溶液的制備取本品顆粒2. Og,精密稱定，加氫氧化鈉試液15ml使溶解，放置30分鐘，精密加入乙醚50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，用氯仿補(bǔ)足減失的重量，分取乙醚層，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置水浴蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴ト芙猓D(zhuǎn)移并定容至10ml，搖勻，用微孔濾膜（0.45μπι)濾過(guò)，濾液作為供試品溶液，測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即
得；
(2)麻黃堿的含量測(cè)定
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙睛一水(70:30)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；
對(duì)照品溶液的制備精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加水制成每Iml含10 μ g的溶液，搖勻，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加2. 5%鹽酸溶液2ml、0. 25mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置60分鐘，用2. 5%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至中性，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(O. 45 μ m)濾過(guò)， 取續(xù)濾液，即得；
供試品溶液的制備取本品5粒內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約O. 5g，加O. 5mol/L氫氧化鈉溶液50ml，加氯化鈉5g，超聲處理10分鐘，蒸餾，用盛有O. 5mol/L鹽酸溶液5ml的100ml量瓶接收至近100ml，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取IOml，置25ml量瓶中，加2. 5%鹽酸溶液2ml、0. 25mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置60分鐘，用2. 5mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至中性，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各6μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
【具體實(shí)施方式】
[0013]實(shí)施例I本發(fā)明的中藥組合物
惚木52. 2g,老鸛草23. 2g,制馬錢(qián)子I. 16g，
鹿銜草23. 2g，赤芍23. 2g，杜仲26. I g，
麻黃17. 4，川芎17. 4g，甘草11. 6g，
乳香I. 16g，沒(méi)藥(制）I. 16g ；
以上11味藥，將以上所有藥材粉碎、細(xì)粉混勻，加入一定量的淀粉，灌入膠囊即得。
[0014]
實(shí)施例2本發(fā)明藥物治療腰椎間盤(pán)突出癥的臨床觀察
I、一般資料：
患者35例，男性20例，女性15例，男女比例4 ： 3 ;年齡20-60歲，平均年齡為48歲；病癥突發(fā)者13例，慢性發(fā)作者22例；病程6個(gè)月以內(nèi)者22例，6個(gè)月以上者13例；腰椎間盤(pán)突出癥手術(shù)后復(fù)發(fā)者2例；癥型屬寒濕型24例，血瘀型11例；腰部CT示突出位置于L3，4間I例，L4、5間16例，L5、SI間8例，L3、4和L4、5同時(shí)突出2例，L4、5和，L5、SI同時(shí)突出8例；CT示間盤(pán)突出位置偏左側(cè)15例，偏右側(cè)11例，中央型9例，突出伴椎管狹窄者2例。
[0015]2、診斷標(biāo)準(zhǔn)
腰椎間盤(pán)突出癥診斷標(biāo)準(zhǔn)（I)有腰部外傷史，慢性勞損或寒濕者，大部分患者在發(fā)病前有慢性腰痛史。（2)腰痛向臀部及下肢放射，腹壓增加時(shí)疼痛加重。（3)脊柱側(cè)彎，腰椎生理孤度消失或平直，病變部位椎旁壓痛，并向下肢放射，腰部活動(dòng)受限。（4)下肢受累，神經(jīng)支配區(qū)皮膚有感覺(jué)過(guò)敏或遲鈍，病程長(zhǎng)者可出現(xiàn)肌肉萎縮，直腿抬高試驗(yàn)和加強(qiáng)試驗(yàn)陽(yáng)性，膝腱、跟腱反射減弱或消失，拇趾背伸、跖屈肌肌力減弱。（5)X線片檢查，脊柱可側(cè)彎.腰椎生理前突消失，病變椎間隙可變窄，相鄰邊緣椎體骨質(zhì)增生；CT撿查可顯示椎間突出的部位及程度.核磁共振可見(jiàn)病變部位有壓擠現(xiàn)象。
[0016]3、治療方法
口服實(shí)施例I的方法制備得到的組合物，I日3次，每次12g，開(kāi)水沖服，觀察4周為一個(gè)療程。作療效評(píng)定。治療期間，患者以臥床休息為主，停止腰部負(fù)重，局部熱敷.癥狀減輕后，積極作腰部鍛煉和兩下肢交替直腿抬高至最大耐受量。
[0017]4、療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)
臨床痊愈：腰腿痛消失，直腿抬高> 80度，能恢復(fù)原工作；
顯效：腰腿痛明顯減輕，但陰雨天及勞累后仍有癥狀，直腿抬高60-70度，能參加輕工
作；
好轉(zhuǎn)：腰腿痛減輕，腰部活動(dòng)功能改善，直腿抬高較治療前改善；
無(wú)效：治療后癥狀、體征無(wú)改善。
[0018]5、治療結(jié)果：
本組35例，經(jīng)過(guò)4周跟蹤治療，結(jié)果：臨床痊愈14例，占40%;顯效10例，占28. 75%；有效9例·占25.71 無(wú)效2例，占5. 72%。總有效率為94. 28%。
[0019]CT對(duì)照：經(jīng)過(guò)4周治療后，進(jìn)行CT對(duì)照.其中，14倒臨床痊愈者椎間盤(pán)突出范圍均有不同程度的縮小，從l_15mm，其余21例CT見(jiàn)椎間盤(pán)無(wú)明顯縮小。
`[0020]隨訪情況：治療后半年隨訪，14例痊愈者無(wú)復(fù)發(fā)；10例顯效者無(wú)癥狀加重；9例有效者中.5例癥狀加重轉(zhuǎn)院治療,2例無(wú)效者已行手術(shù)治療。
[0021]
江某，男，41歲，2006年2月26日，腰痛伴右下肢外側(cè)疼痛、麻木，行走不便。經(jīng)CT檢查，為第3-4腰椎間盤(pán)突出癥，曾經(jīng)服用美洛昔康、草烏甲素片，癥狀無(wú)明顯好轉(zhuǎn)后，服用本發(fā)明中藥湯劑，連服20天為I療程，腰腿痛減輕，腰部活動(dòng)功能改善。服用2個(gè)療程后，體征消失，直腿抬高70度以上，能恢復(fù)正常工作。
[0022]張某，男，37歲，2009年4月13日，自述干活時(shí)，腰部異常疼痛，查體：腰部活動(dòng)受限，脊柱向左側(cè)彎，西醫(yī)診斷為腰椎間盤(pán)突出癥。連服10天，精神轉(zhuǎn)佳，疼痛明顯減輕，直腿可抬高50度。隨訪兩年未見(jiàn)復(fù)發(fā)。
[0023]實(shí)施例3、實(shí)施例I的組合物的檢測(cè)方法 所述檢測(cè)方法包括以下步驟：
A.對(duì)本發(fā)明藥物制劑中的馬錢(qián)子、麻黃、赤芍、甘草、鹿銜草、川芎進(jìn)行鑒別；
B.測(cè)定本發(fā)明藥物制劑中麻黃堿和士的寧的含量；
其中A鑒別的具體步驟如下：
(O取本品內(nèi)容物2g，研細(xì)，加氫氧化鈉試液IOml使溶解，放置10分鐘，加入乙醚20ml，超聲處理10分鐘，放冷，分取乙醚層，濾過(guò)，取續(xù)濾液10ml，置水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液，另取士的寧對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2010年版一部VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各ΙΟμΙ，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一水（10 ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點(diǎn)；
(2)取本品顆粒2g，研細(xì)，加O. 5mol/L氫氧化鈉試液50ml，搖散，加氯化鈉5g，超聲處理10分鐘，蒸餾，用盛有O. 5mol/L的鹽酸溶液5ml的100ml量瓶接收至近100ml，搖勻，作為供試溶液，另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一水(15 ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)；
(3 )取本品內(nèi)容物2g,研細(xì)，加乙醚50ml，回流60分鐘，濾過(guò)，濾液收集備用，藥渣揮干乙醚，加氯仿50ml，回流3小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?ml使溶解，加于弱陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱上，用50ml水洗脫，洗脫液蒸干，殘?jiān)颖?0ml使溶解，加活性炭適量脫色濾過(guò)，濾液濃縮至約5ml作為供試品溶液，另取芍藥苷對(duì)照品，加丙酮制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一氯仿（10 ： I)為展開(kāi)劑，在氨蒸氣飽和下展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，于105°C加熱使斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)；
(4)取鑒別（3)項(xiàng)下的丙酮提取液，揮干丙酮，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液，另取川芎對(duì)照藥材lg，加丙酮按供試品溶液制法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一氯仿（5 ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；
(5)取本品內(nèi)容物2g，加丙酮50ml，水浴低溫回流3小時(shí)，濾去丙酮，藥渣揮干丙酮，加乙醇40ml，水浴加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次40ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)右掖?0ml使溶解，加活性炭適量，搖勻，放置30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約10ml，作為供試品溶液，另取甘草酸單銨鹽對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含O. 2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以氯仿一甲酸一冰醋酸（15 ： I ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以20%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈（365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒`光斑點(diǎn)；
6)取本品內(nèi)容物2g，加乙醇50ml，水浴加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液中加入等量10%鹽酸溶液，水浴加熱回流3小時(shí)，加水約20ml，蒸去乙醇，用乙酸乙酯提取2次，每次50ml，合并三氯甲烷液，蒸至約20ml，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液，另取齊墩果酸對(duì)照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各ΙΟμΙ，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以三氯甲燒一甲醇（10:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以20%硫酸乙醇溶液，100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同顏色的斑點(diǎn)，紫外光燈（365nm)下顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；
其中B測(cè)定含量的具體步驟如下：
(I)士的寧的含量測(cè)定
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以硅膠為填充劑；以環(huán)己烷一三氯甲燒一無(wú)水甲醇一三乙胺（20:75:5:0. 4)為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min ;檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；
對(duì)照品溶液的制備取士的寧對(duì)照品約20mg，精密稱定，置200ml量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每Iml含O. Img的溶液，搖勻，作為對(duì)照品溶液；
供試品溶液的制備取本品顆粒2. Og,精密稱定，加氫氧化鈉試液15ml使溶解，放置30分鐘，精密加入乙醚50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，用氯仿補(bǔ)足減失的重量，分取乙醚層，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置水浴蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴ト芙?，轉(zhuǎn)移并定容至10ml，搖勻，用微孔濾膜（0.45μπι)濾過(guò)，濾液作為供試品溶液，
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即
得;
(2)麻黃堿的含量測(cè)定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙睛一水(70:30)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；
對(duì)照品溶液的制備精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加水制成每Iml含10 μ g的溶液，搖勻，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加2. 5%鹽酸溶液2ml、0. 25mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置60分鐘，用2. 5%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至中性，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(O. 45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；
供試品溶液的制備取本品5粒內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約O. 5g，加O. 5mol/L氫氧化鈉溶液50ml，加氯化鈉5g，超聲處理10分鐘，蒸餾，用盛有O. 5mol/L鹽酸溶液5ml的100ml量瓶接收至近100ml，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加
2.5%鹽酸溶液2ml、0. 25mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置60分鐘，用2. 5mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至中性，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各6μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
【權(quán)利要求】
1.一種治療腰椎間盤(pán)突出癥的中藥組合物，其特征在于所述組合物包含以下重量份的中藥原料：惚木85-95份，老鸛草35-45份，制馬錢(qián)子1_3份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的中藥組合物，其特征在于所述組合物包含以下重量份的中藥原料：惚木85-95份，老鸛草35-45份，制馬錢(qián)子1_3份，鹿銜草35-45份，赤芍35-45份，杜仲40-52份，麻黃25-35份，川芎25-35份，甘草15-25份，乳香1-3份，制沒(méi)藥1-3份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于所述組合物包含以下重量份的中藥原料：惚木90份，老鸛 草40份，制馬錢(qián)子2份，鹿銜草40份，赤芍40份，杜仲46份，麻黃30份，川芎30份，甘草20份，乳香2份，制沒(méi)藥2份。
4.權(quán)利要求1、2和3所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于：按重量份數(shù)，將惚木 85-95份，老鸛草35-45份，制馬錢(qián)子1_3份，鹿銜草35-45份，赤芍35-45份，杜仲40-52份，麻黃25-35份，川芎25-35份，甘草15-25份，乳香1-3份，制沒(méi)藥1-3份粉碎混勻，加入多少份？淀粉，灌入膠囊，即得。
5.檢測(cè)權(quán)利要求1、2和3所述的一種治療腰椎間盤(pán)突出癥的中藥組合物的方法，其特征在于：包括以下步驟： A.對(duì)本發(fā)明藥物制劑中的馬錢(qián)子、麻黃、赤芍、甘草、鹿銜草、川芎進(jìn)行鑒別； B.測(cè)定本發(fā)明藥物制劑中麻黃堿和士的寧的含量； 其中A鑒別的具體步驟如下： . 1)取本品內(nèi)容物2g，研細(xì)，加氫氧化鈉試液IOml使溶解，放置10分鐘，加入乙醚20ml，超聲處理10分鐘，放冷，分取乙醚層，濾過(guò)，取濾液10ml，置水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液，另取士的寧對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，參照《中國(guó)藥典》2010年版一部VIB中的薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各ΙΟμΙ，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一水（10 ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點(diǎn)； . 2)取本品顆粒2g，研細(xì)，加O.5mol/L氫氧化鈉試液50ml，搖散，加氯化鈉5g，超聲處理10分鐘，蒸餾，用盛有O. 5mol/L的鹽酸溶液5ml的100ml量瓶接收至近100ml，搖勻，作為供試溶液，另取鹽酸麻黃堿對(duì)照品加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一水(15 ： I)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)； . 3 )取本品內(nèi)容物2g,研細(xì)，加乙醚50ml，回流60分鐘，濾過(guò)，濾液收集備用，藥渣揮干乙醚，加氯仿50ml，回流3小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?ml使溶解，加于弱陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱上，用50ml水洗脫，洗脫液蒸干，殘?jiān)颖?0ml使溶解，加活性炭適量脫色濾過(guò)，濾液濃縮至約5ml作為供試品溶液，另取芍藥苷對(duì)照品，加丙酮制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以甲醇一氯仿（10 ： I)為展開(kāi)劑，在氨蒸氣飽和下展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，于105°C加熱使斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)； .4)取A鑒別3)中的丙酮提取液，揮干丙酮，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液，另取川芎對(duì)照藥材lg，加丙酮按供試品溶液制法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以體積濃度為83. 3%的甲醇溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈365nm波長(zhǎng)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； 5)取本品內(nèi)容物2g，加丙酮50ml，水浴低溫回流3小時(shí)，濾去丙酮，藥渣揮干丙酮，加乙醇40ml，水浴加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次40ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次40ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)右掖?0ml使溶解，加活性炭適量，搖勻，放置30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約10ml，作為供試品溶液，另取甘草酸單銨鹽對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含O. 2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以體積比為15 ： I ： I的氯仿、甲酸和冰醋酸的混合液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以20%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈365nm波長(zhǎng)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； 6)取本品內(nèi)容物2g，加乙醇50ml，水浴加熱回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液中加入等量10%鹽酸溶液，水浴加熱回流3小時(shí)，加水約20ml，蒸去乙醇，用乙酸乙酯提取2次，每次50ml，合并三氯甲烷液，蒸至約20ml，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液，另取齊墩果酸對(duì)照品，加三氯甲烷制成每Iml含O. Img的溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各ΙΟμΙ，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以體積比為10:1的三氯甲烷和甲醇的混合液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以20%硫酸乙醇溶液，100°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同顏色的斑點(diǎn)，紫外光燈365nm波長(zhǎng)下顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； 其中B測(cè)定含量的具體步驟如下： 1)士的寧的含量測(cè)定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以硅膠為填充劑；以體積比為20:75:5:0. 4的環(huán)己烷、三氯甲烷、無(wú)水甲醇和三乙胺的混合液為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min ;檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ； 對(duì)照品溶液的制備取士的寧對(duì)照品約20mg，精密稱定，置200ml量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每Iml含O. Img的溶液，搖勻，作為對(duì)照品溶液； 供試品溶液的制備取本品顆粒2. Og,精密稱定，加氫氧化鈉試液15ml使溶解，放置30分鐘，精密加入乙醚50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，用氯仿補(bǔ)足減失的重量，分取乙醚層，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10ml，置水浴蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴ト芙?，轉(zhuǎn)移并定容至IOml，搖勻，用O. 45 μ m微孔濾膜濾過(guò)，濾液作為供試品溶液； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，SP得; 2)麻黃堿的含量測(cè)定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以70%的乙睛溶液為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ； 對(duì)照品溶液的制備精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加水制成每Iml含10 μ g的溶液，搖勻，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加2. 5%鹽酸溶液2ml、0. 25mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置60分鐘，用2. 5%鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至中性，加甲醇至刻度，搖勻，用O.45 μ m微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 供試品溶液的制備取本品5粒內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約O. 5g，加O. 5mol/L氫氧化鈉溶液50ml，加氯化鈉5g，超聲處理10分鐘，蒸餾，用盛有O. 5mol/L鹽酸溶液5ml的100ml量瓶接收至近100ml，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加.2. 5%鹽酸溶液2ml、0. 25mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置60分鐘，用2. 5mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至中性，加甲醇至刻度，搖勻，O. 45 μ m用微孔濾膜濾過(guò)，取濾液作為供試品溶液； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各6μ 1， 注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
【文檔編號(hào)】A61P19/00GK103690606SQ201310692216
【公開(kāi)日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月16日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月16日
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