專利名稱：干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及的是干酪乳桿菌干酪亞種和銀杏葉提取物在制備預防和治療高脂血癥中藥物的應用。
背景技術：
進入21世紀人們生活水平有了顯著提高，與此同時一些與生活方式相關性疾病開始成為威脅人類健康的首要原因。在我國心腦血管疾病的死亡率已經上升到第二位。高血脂癥即血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的增高，是引起心腦血管疾病的一個主要原因。大量的流行病學調查和研究均表明，高血脂癥是當今社會常見的一種疾病，近年來，它的發(fā)病率在逐漸的上升，已被稱為“人類健康的三大殺手之一”，對人的健康所造成的傷害非常大。高血脂除可以導致動脈粥樣硬化、誘發(fā)冠心病、腦中風、心肌梗塞等疾病外，還會誘發(fā)高血壓、高血糖、脂肪肝、胰腺炎、眼底出血等嚴重的疾病，對人體的危害十分嚴重，極大地影響到患者的生活質量。

因此，研究開發(fā)能夠降低高血脂的保健藥品對預防疾病保護人民身體健康有重要的意義。然而，在高血脂癥新型保健食品開發(fā)及新藥研究中，常見的降脂藥物雖對血脂調節(jié)較強，但副作用也較明顯，在治療疾病的同時也留下不少后遺癥，研制既安全有效又綠色環(huán)保無毒副作用的降脂藥物成為當前醫(yī)學研究中一個重要課題。乳酸菌作為微生態(tài)制劑，具有減少血清中的膽固醇含量，降低心血管疾病發(fā)病率的功效。此外還刺激機體免疫功能，改善宿主機體的各種生理功能，達到防病治病，促進生長的目的，被認為是一種具有多重降血脂作用的微生物。此外，乳酸菌還有抑制NPClLl蛋白、影響自主交感神經活動、促進脂肪組織的生熱作用和改善肝臟NKT細胞衰竭等新的機制。人體臨床試驗分析也表明，口服乳酸菌可以對總膽固醇水平和LDL膽固醇水平產生有益作用。研究顯示，初級膽汁酸作為膽固醇的一個重要產物，可被乳酸菌所產生的膽鹽水解酶分解成游離膽汁酸和氨基酸，難溶的游離膽汁酸鹽隨著糞便排出，減少對膽汁酸的重吸收，增加膽固醇向膽鹽的轉化，從而降低膽固醇水平。研究發(fā)現(xiàn)，銀杏葉是一種具有多種藥理功能的中藥，含有黃酮類、酚類、萜類以及氨基酸類等多種化學成分。從銀杏葉中提取的有效活性成分主要有2類活性物質，分別是銀杏萜內酯類化合物和黃酮類化合物，是一種天然的自由基清除劑，具有抗氧化、抗菌消炎以及改善缺血心肌功能等生理功效，其藥用價值十分突出。EGb (銀杏葉提取物)可明顯提升高密度脂蛋白含量，抑制PAF，降低血液黏度以及血漿膽固醇與血纖蛋白原的合成，改善血漿磷脂和膽固醇的比例。試驗報道，銀杏黃酮能促進脂肪細胞的脂解作用。另有報道，給SD大鼠飼喂高脂飼料IOd后，加喂EGb，18d后與對照組相比，SD大鼠血清中膽固醇含量極顯著降低，甘油三酯也顯著降低，說明EGb具有明顯降低血脂的作用。隨著對藥物危害的認識，中草藥以其無毒害副作用受到青昧。大量研究表明，中藥對益生菌的增殖有促進作用，將有益菌與中藥聯(lián)合應用，不僅具有無毒、無害和無污染的特點，而且還可通過相互的促進作用加強療效。目前，已有大量研究表明，乳酸菌及銀杏葉提取物均有降低小鼠血脂的作用。但是尚未見兩者的比較及聯(lián)合作用的報道。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是針對現(xiàn)有技術的不足提供一種干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應用。本發(fā)明的技術方案如下:干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應用，干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同，具有調血脂降血脂、促進膽固醇代謝、控制體重的作用，用于預防和治療聞脂血癥。將體重為20±lg的小鼠隨機分成5組，分別為:空白對照組、高脂對照組、干酪乳桿菌組、銀杏葉組和混合組，除空白對照組外，其他4組給予高脂飼料，每周稱I次體重，建立肥胖模型，試驗期為30天。測定各組小鼠體重及血清中總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)和過氧化氫酶(CAT)等的活性。結果干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同作用明顯降低了肥胖小鼠體質量、TC、TG和MDA ；TC和TG降解率分別達到24.48%和20.93%，小鼠體重較高脂組降低了 13.22%，MDA的含量降低了 5.98%。小鼠血清中HDL-C有明顯的升高，提升率高達167.85%。小鼠體內GSH-PX活力提高了 13.14%，CAT、S0D等酶活力分別降低了 49.02%、
3.13%。干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同作用，具有降血脂、促進膽固醇代謝、控制體重的作用，可用于預防和治療高脂血癥。
具體實施方式
以下結合具體實施例，對本發(fā)明進行詳細說明。I材料與方法1.1 材料銀杏葉有效成分提取物(購于四川同泰植物化工有限公司)，干酪乳桿菌Kl菌株(干酪乳桿菌干酪亞種購買于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址:中國北京市海淀區(qū)中關村北一條13號，中國科學院微生物研究所)，編號為:CGMCC1.2435)，實驗小白鼠60只(四川農業(yè)大學龍鼠家園雌性小鼠60只，體重19 21g)，MRS培養(yǎng)基(蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏粉4g，葡萄糖20g，吐溫-801ml，磷酸氫二鉀2g，乙酸鈉5g，檸檬酸三銨0.2g，磷酸鎂O, 2g，硫酸錳0.05g)，灌胃針。1.2儀器設備全自動生化分析儀GS200 (深圳市錦瑞電子有限公司)，AL204電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)。1.3 方法1.3.1灌胃乳酸菌菌液的制備將干酪乳桿菌Kl菌株涂布于MRS固體培養(yǎng)基上,37°C靜置培養(yǎng)24h。挑取單一菌落接種MRS液體培養(yǎng)基，37°C培養(yǎng)32 36h后備用。在無菌操作的條件下，取ImL培養(yǎng)后的菌液加入裝有99mL無菌生理鹽水的錐形瓶中，用漩渦振蕩器振蕩lOmin，使試樣混合均勻，即成10_2稀釋液，然后無菌IO倍稀釋，分別從10_5、10_6、IO-7三個稀釋度試管中取0.1mL稀釋液，涂布接種于MRS瓊脂平板中，每個稀釋度3塊平皿。37°C厭氧培養(yǎng)至長出菌落后進行平板計數。在灌胃前，樣品均以PBS溶液制成IO8Cfu / mL懸液,臨用時新鮮配制。1.3.2銀杏葉提取物溶液的配置銀杏葉提取物(EGb，含24%黃酮苷，6%銀杏內酯)加溫配成37 °C水溶液，以100mg/kg體重的黃酮量灌胃小鼠，配成濃度為41.7mg/mL的銀杏溶液(含銀杏葉提取物
0.4178/1^體重)。1.3.3高脂飼料的制備高脂飼料配方:膽固醇2%、膽酸鈉0.5%、丙硫氧嘧啶0.2%、蔗糖5%、豬油10%、基礎飼料82.3%o1.3.4動物飼喂及血清樣品的制備將健康的小鼠60只在干燥、清潔、通風良好的環(huán)境中飼養(yǎng)，溫度控制在24土 1°C，預飼一周基礎飼料后，將小鼠隨機分成5組，試驗分組及處理見表I。表I動物分組及處理
權利要求
1.干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應用，其特征在于，干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同，具有降血脂、促進膽固醇代謝、控制體重的作用，用于預防和治療1 脂血癥。`
全文摘要
本發(fā)明公開了干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應用，干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同作用明顯降低了肥胖小鼠體質量、TC、TG和MDA；TC和TG降解率分別提高24.48％和20.93％，小鼠體重較高脂組降低了13.22％，MDA的含量降低了5.98％。小鼠血清中HDL-C有明顯的升高，提升率高達167.85％。小鼠體內GSH-PX提高了13.14％，CAT、SOD等酶的活力分別下降49.02％、3.13％。干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同作用，具有降血脂、促進膽固醇代謝、控制體重的作用，可用于預防和治療高脂血癥。
文檔編號A61K36/16GK103222990SQ20131014826
公開日2013年7月31日 申請日期2013年4月25日 優(yōu)先權日2013年4月25日
發(fā)明者曾東, 倪學勤, 溫嘯, 辛金鴿, 曾燕, 賀大方, 張丹, 丁艷東, 李利杰 申請人:四川農業(yè)大學