專利名稱：一種解酒防醉藥及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種解酒防醉藥及其生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
長期以來，人們采用各種方法來解除和減輕過量飲酒造成的對人體的損傷，目前，市場上也出現(xiàn)了很多種解酒藥品或保健食品，但是，大多數(shù)是中草藥配方，也有化學(xué)制劑，都不能很好地達(dá)到解酒防醉的目的，原因是這些解酒制劑在人體中起作用時都不符合乙醇在人體中的代謝機理和代謝途徑，也就不能從根本上消除過量飲酒給人體所造成的傷害，而是以護(hù)肝為主。專利號為20081017442.1公開了一種解酒防醉藥物及其制備方法，其通過乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶催化乙醇、乙醛氧化來進(jìn)行解酒，
其催化過程如下:
ch3ch2oh+nad+— ch3cho+nadh+h+ (在乙醇脫氫酶催化下)
CH3CH0+NAD+ — CH3C00H+ NADH+H+ (在乙醛脫氫酶催化下)；
其中，NAD+為氧化型輔酶I，NADH為還原性輔酶I，但是，其仍然存在一下不足:(I)由原始菌種生產(chǎn)的生物量中酶的活性低，導(dǎo)致催化乙醇、乙醛的能力不強；(2)由醋酸菌菌體提取的含乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶的凍干粉制成膠囊或其它制劑經(jīng)口服時會被人體內(nèi)胃腸中的蛋白酶降解為氨基酸而失去酶的催化作用；(3)容易造成氧化型輔酶I的不足，使乙醇、乙醛在氧化時缺乏電子受體而無法進(jìn)行，因而導(dǎo)致NADH/ NAD+比值增高，破壞肝細(xì)胞內(nèi)的氧化-還原平衡狀態(tài)，導(dǎo) 致一系列代謝上的紊亂，是引起酒精性脂肪肝的病因之一 ；(4)胃液的PH值在1-3左右，腸腔的PH值高達(dá)6-7左右，因此在胃液中乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶幾乎不起作用而被酸水解失活；(5)乙醇氧化過程中易產(chǎn)生自由基，特別是乙醇激活微粒體乙醇氧化體系而產(chǎn)生的自由基，過量的自由基是飲酒對身體造成損傷的機理之一。專利號為2003801014.2公開了酒精代謝的增強，該專利的關(guān)鍵在于利用D-甘油酸或其鹽其脂在乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶的催化下將還原性輔酶轉(zhuǎn)化為氧化型輔酶，使NADH/ NAD+比值降低，恢復(fù)肝細(xì)胞內(nèi)氧化-還原平衡，為酒精氧化提供電子受體，達(dá)到酒精代謝增強的目的。該專利的不足為:乙醇、乙醛在氧化過程中既需要氧化型輔酶，更需要乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶的催化，這樣往往導(dǎo)致乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶的嚴(yán)重不足，從而酒精代謝增強的能力有限。從遺傳學(xué)得知，人體內(nèi)乙醇脫氫酶的含量比較恒定，人與人差別性比較少，而乙醛脫氫酶則完全不同，人與人之間差異性非常大，而且種族性、地區(qū)性都有差異，這也就是有的人海量而有的人滴酒能醉的原因。研究表明乙醛脫氫酶是制約著人們酒量的關(guān)鍵性酶。遺傳研究表明，人體內(nèi)產(chǎn)生乙醛脫氫酶是受基因控制，而我們黃種人先天性攜帶著缺陷型乙醛脫氫酶基因，所以黃種人較白種人易產(chǎn)生酒精中毒的原因是遺傳因素決定的。由于黃種人的乙醇脫氫酶活性高，飲酒后乙醇很快被氧化成乙醛，又由于乙醛脫氫酶的活性低，使乙醛遲遲不能被氧化成乙酸而以原態(tài)在體內(nèi)積蓄，當(dāng)乙醛濃度在人體內(nèi)達(dá)到一定程度時就會引起酒后的諸多醉態(tài)和中毒癥狀，醉酒、酒后頭疼、臉紅、身體難受、酒精中毒等都是乙醛惹的禍，并且，人體內(nèi)將乙醇氧化為乙醛還有其他途徑，例如微粒體乙醇氧化體系(MEOS)等，人體內(nèi)血液中酒精含量到一定濃度時會激活MEOS參與酒精代謝，而此代謝系統(tǒng)是吸熱反應(yīng)，這就是有些人喝酒越喝越冷的原因，此作用對人體特別是對肝臟損害極大，能產(chǎn)生大量的自由基，而將乙醛氧化為乙酸只有乙醛脫氫酶的催化。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的:為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明提供了一種解酒防醉藥，其通過乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶催化乙醇、乙醛氧化來進(jìn)行解酒的同時補充氧化型輔酶，從而保證肝細(xì)胞內(nèi)氧化-還原平衡。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案:一種解酒防醉藥，其特征在于:包括有乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶以及氧化型輔酶，其中，乙醇脫氫酶Ι-lOOOOu/g，乙醛脫氫酶l-10000u/g，氧化型輔酶 l-10000u/g。采用上述技術(shù)方案，其通過乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶催化乙醇、乙醛氧化來進(jìn)行解酒的同時，還能補充氧化型輔酶，從而保證肝細(xì)胞內(nèi)氧化-還原平衡。本發(fā)明的進(jìn)一步設(shè)置:按質(zhì)量百分比計，還包括有1-15%的抗氧化劑。采用上述進(jìn)一步設(shè)置，由于乙醇氧化過程中易產(chǎn)生自由基，過量的自由基是飲酒對身體造成損傷的機理之一，設(shè)置的抗氧化劑，可以很好地抵抗自由基，從而減少自由基對身體造成的損失。本發(fā)明的再進(jìn)一步設(shè)置:所述的抗氧化劑為還原型谷胱甘肽，阿爾法硫辛酸，維生素C，芝麻木酚素中的至少其中一種。采用上述再進(jìn) 一步設(shè)置，其中，還原型谷胱甘肽是一種用途廣泛的活性短肽，是人體內(nèi)最重要的活性物質(zhì)，還原型谷胱甘肽具有兩種重要的生理功能，即:(I)抗自由基對細(xì)胞的損傷:機體代謝產(chǎn)生的過多自由基會損傷生物膜、侵襲生命大分子，加快機體衰老、誘發(fā)其它疾病，還原型谷胱甘肽可以通過巰基與體內(nèi)的自由基結(jié)合轉(zhuǎn)化成易代謝的酸性物質(zhì)，加速自由基的排泄，對細(xì)胞起到強有力的保護(hù)作用；
(2)消除外源有毒物:還原性谷胱甘肽能與進(jìn)入機體的有毒化合物(包括乙醇)、重金屬離子等直接結(jié)合，并促其排出體外，起到中和解毒的作用；
阿爾法硫辛酸是一種類似維他命的抗氧化劑和抗發(fā)炎劑，在體內(nèi)經(jīng)腸道吸收后，進(jìn)入人體各種細(xì)胞的深處能左右細(xì)胞運作，是細(xì)胞制造能量不可或缺的成分，在細(xì)胞內(nèi)外抵抗自由基，加強細(xì)胞的修復(fù)能力。在本發(fā)明中，阿爾法硫辛酸作為清除自由基的有效成分，同時它與還原型谷胱甘肽有協(xié)同作用，加強抗氧化能力；
維生素C又名抗壞血酸，是一種重要的自由基清除劑，它通過逐級供給電子而轉(zhuǎn)變成半脫氫抗壞血酸和脫氫抗壞血酸，從而清除自由基，它還能同時有效地保護(hù)還原型谷胱甘肽被氧化。芝麻木酚素主要成分是芝麻素，芝麻素具有減低膽固醇、抗高血壓、抗菌及抗氧化，保護(hù)肝臟諸多功能。本發(fā)明的更進(jìn)一步設(shè)置:按質(zhì)量百分比計，所述的解酒防醉藥還含有
0.01-5.0%的酶抑制劑、0.01-5.0%的吸收促進(jìn)劑，所述的酶抑制劑為抑肽酶，吸收促進(jìn)劑為膽酸鹽、癸酸鈉中的至少一種。采用上述更進(jìn)一步設(shè)置，其中，酶抑制劑與肽類和蛋白質(zhì)類藥物聯(lián)合應(yīng)用后，其口服生物利用度顯著提高；
吸收促進(jìn)劑是指那些組織損害性小，能夠可逆消除或暫時破壞小腸屏障的化合物，此類化合物有利于藥物穿透上皮細(xì)胞，進(jìn)入血液或淋巴循環(huán)，肽類及蛋白質(zhì)類藥物包括酶制劑中，加入吸收促進(jìn)劑，對藥物通過黏膜吸收起著至關(guān)重要的作用，吸收促進(jìn)劑的作用機制多樣，包括改進(jìn)模的流動性，降低黏液層粘度、穿模蛋白的外漏造成模紊亂以及打開緊密連接等，其中，打開緊密連接對上皮細(xì)胞及模層的破壞較小，被認(rèn)為是安全而且具有前景的促進(jìn)方式。由醋酸菌菌體提取的含乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶的藥物制劑經(jīng)口服時會被人體內(nèi)胃腸中的蛋白酶降解為氨基酸而失去酶的催化作用，因此，通過加入的酶抑制劑、吸收促進(jìn)劑可以很好地防止藥 物口服時會被人體內(nèi)胃腸中的蛋白酶降解。本發(fā)明的進(jìn)一步目的:本發(fā)明提供了一種解酒防醉藥的生產(chǎn)方法。為實現(xiàn)上述進(jìn)一步目的，本發(fā)明的技術(shù)方案:以醋酸菌類微生物為出發(fā)株，將其先經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺復(fù)合誘變，然后，經(jīng)篩選制得改良菌種，將改良菌種經(jīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)后，再制得菌體懸浮液，最后，將菌體懸浮液制成納米藥物。采用上述技術(shù)方案，其中，所述的藥物可以為膠囊、噴霧劑、飲品、顆粒劑等，將醋酸菌類微生物經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺復(fù)合誘變使得菌種產(chǎn)酶活性高，催化乙醇、乙醛的能力強；紫外線誘變使用方便、成本低廉，無污染；鹽酸羥胺是一種重要的誘變劑，也是已知的最專一性的點突變誘變劑，只能與DNA中的胞嘧啶起作用，誘發(fā)G-C到A-T的轉(zhuǎn)換，復(fù)合誘變是由兩種或多種誘變劑的同時處理，使用不同作用機制的誘變劑復(fù)合處理具有協(xié)同效應(yīng)，能取得更好的誘變效果；因此，這種方法制得的藥物制劑中酶的活性強，催化乙醇、乙醛的能力強，從而使得解酒效果好；
由于蛋白質(zhì)藥物在口服時，存在吸收差、生物利用率低的缺點，原因是口服吸收存在著三大生理上的屏障:一是吸收屏障，酶的分子量大，極性較強，具有較低的分配系數(shù)和擴散性能，使其不易為親脂性生物膜攝取，故很難通過胃腸道吸收，故生物利用率低；二是酸屏障，該類藥物對胃液的強酸敏感，易被胃酸水解而被破壞；三是酶屏障，胃腸道存在大量的蛋白酶對蛋白分子產(chǎn)生消化降解作用成為氨基酸而失效，本發(fā)明中將菌體懸浮液制成納米藥物，納米藥物可以提高藥物的吸收速率和吸收率。本發(fā)明的再進(jìn)一步設(shè)置:所述的紫外線、鹽酸羥胺復(fù)合誘變?yōu)閷⒊霭l(fā)株先經(jīng)斜面活化12-24h，用l-20ml無菌水洗脫斜面上的菌體制得菌懸液，菌懸液經(jīng)玻璃珠振蕩30-60min后制成均勻的菌懸液，再作KT3-KT9倍比稀釋，取3_20ml置培養(yǎng)皿中，在磁力攪拌器的攪拌下，用10-30W紫外線燈預(yù)熱20-60min，然后，在垂直距離10-50cm下照射30-120S，將經(jīng)過紫外線照射的菌懸液，再加入3-15%的鹽酸羥胺，作10-3-10-9倍比稀釋，每平板培養(yǎng)基上涂布0.2-1.0ml進(jìn)行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度28-38度，培養(yǎng)時間60-120小時。采用上述再進(jìn)一步設(shè)置，由于誘變?nèi)狈Χㄏ蛐?，在誘變時如果不控制好誘變條件，會使得菌體誘變率低，菌體被殺死，而這種紫外線、鹽酸羥胺復(fù)合誘變方式，使得菌體死亡率低，誘變率高。本發(fā)明的更進(jìn)一步設(shè)置:所述的篩選包括有平板初篩、平板復(fù)篩、搖瓶復(fù)篩；平板初篩:以未經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺處理的出發(fā)株作對照株，挑選水解圈與菌落比對照株的大且形狀規(guī)則的誘變株作為平板復(fù)篩用菌株；
平板復(fù)篩:將平板初篩的誘變株與對照株同時在26 38度下培養(yǎng)6(Tl20h，挑選水解圈與菌落大且形狀規(guī)則的誘變株作搖瓶復(fù)篩用菌株；
搖瓶復(fù)篩:將平板復(fù)篩的誘變株制成均勻的菌懸液，將菌懸液搖床培養(yǎng)24、6h，培養(yǎng)溫度26 38度，以PH值最低的培養(yǎng)液離心得改良菌體作為培養(yǎng)用的改良菌種。采用上述更進(jìn)一步設(shè)置，由于乙醛脫氫酶活性越高的醋酸菌，產(chǎn)乙酸的能力越強，形成的水解圈越大，因此，水解圈越大，表明產(chǎn)酶能力越強；由于誘變?nèi)狈Χㄏ蛐?，在誘變時會有許多菌體被殺死，因此，經(jīng)過平板初篩、平板復(fù)篩、搖瓶復(fù)篩多次篩選，可以將被殺死的菌體篩除，從而提高了誘變株的利用率。本發(fā)明的更進(jìn)一步設(shè)置:所述的培養(yǎng)基包括有斜面培養(yǎng)基、搖瓶培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及流加培養(yǎng)基；其中，所述的斜面培養(yǎng)基組成為:每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10-200ml、葡萄 糖 10-200ml、酵母膏 10_200ml、硫酸銨 0.1-10.0g、磷酸氫二鉀 0.1-10.0g、硫酸二氫鈉0.1-10.0g、硫酸鎂0.1-10.0g、瓊脂0.1-10.0g, PH值為6.0-7.2，培養(yǎng)溫度為26-38度，培養(yǎng)時間為20-48h ；
所述的搖瓶培養(yǎng)基組成為:每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10_200ml、葡萄糖10-200ml、酵母膏10-200ml、磷酸氫二鉀0.1-10.0g、磷酸二氫鈉0.1-10.0g、硫酸鎂
0.1-10.0g、氯化錳 0.01-5.0g、煙酸酰胺 1.0-20.0mg，PH 值為 6.0-7.2，培養(yǎng)溫度 26-38 度，培養(yǎng)時間20-48h，振蕩周期80-300r/min，接種一個斜面；
所述的種子培養(yǎng)基組成為 每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10_200ml、葡萄糖l-100ml、酵母膏10-200ml、磷酸氫二鉀0.1-10.0g、磷酸二氫鈉0.1-10.0g、硫酸鎂
0.1-10.0g、氯化鈣 0.01-5.0g、氯化錳 0.01-5.0g、煙酰胺 1.0-20.0mg,培養(yǎng)溫度 26-38 度，培養(yǎng)時間60-120h，接種量1% 15%，通氣量為1:0.3 0.6 (V/V)；
所述的流加培養(yǎng)基組成為 每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10_200ml。采用上述更進(jìn)一步設(shè)置，經(jīng)斜面培養(yǎng)基、搖瓶培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及流加培養(yǎng)基多次培養(yǎng)后，可以使得菌體利用率高。本發(fā)明的再更進(jìn)一步設(shè)置:在菌體懸浮液中加入0.5-5% (質(zhì)量百分比)的海藻酸鈉，在1-20KW電壓下，經(jīng)電噴霧裝置噴霧到0.1-10.0%的氯化鈣溶液中即得納米凝膠粒，再將納米凝膠粒制成顆粒狀納米藥物。采用上述再更進(jìn)一步設(shè)置，其中，顆粒狀納米藥物可以為膠囊或顆粒劑，納米凝膠粒由于其高度分散，表面積大，有利于增加藥物與吸收部位生物膜的接觸時間和接觸面積，其相對于溶液而言，在小腸的微絨毛中的滯留時間會大大延長，納米載體對藥物還具有明顯的保護(hù)作用，可防止胃腸道酸堿環(huán)境和各種酶系統(tǒng)的破壞，納米凝膠粒在胃腸道吸收的途徑主要有三種:⑴細(xì)胞旁路通道轉(zhuǎn)運；⑵腸道上皮細(xì)胞跨胞攝?。虎墙?jīng)回腸內(nèi)集合淋巴結(jié)的微皺褶細(xì)胞(M細(xì)胞)吞噬，其中，通過M細(xì)胞的吸收是口服納米凝膠粒的主要吸收途徑，納米凝膠粒被吞噬后，通過囊性轉(zhuǎn)運方式轉(zhuǎn)運到M細(xì)胞基底面凹腔釋放出來，納米凝膠粒以游離狀態(tài)或以被巨噬細(xì)胞吞噬的狀態(tài)隨淋巴細(xì)胞通過淋巴管，從淋巴循環(huán)進(jìn)入血液循環(huán)，再分布到各組織器官，集合淋巴結(jié)的M細(xì)胞吞噬在腸道黏膜上皮屏障上打開一個通道，構(gòu)成了納米凝膠粒非受體轉(zhuǎn)運的主要生理途徑，使納米凝膠粒以完整結(jié)構(gòu)形式被吸收進(jìn)入體循環(huán)，納米凝膠粒還可通過與膜的相互作用促進(jìn)藥物吸收，而粒子自身并不被轉(zhuǎn)運過膜，納米凝膠粒還可能被十二指腸的微絨毛所捕獲，并滯留較長時間，進(jìn)一步延長藥物與細(xì)胞壁接觸時間，提高藥物的吸收速率和吸收率，因此，納米凝膠?？梢蕴岣咚幬锏奈蘸蜕锢枚取?br> 具體實施例方式醋酸菌類微生物包括醋桿菌屬和葡糖桿菌屬，本發(fā)明對釀酒酵母、巴氏醋桿菌巴氏亞種、惡臭醋酸桿菌混濁變種、氧化葡萄糖桿菌四種菌株的產(chǎn)乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶和氧化型輔酶I的活性進(jìn)行對比分析后，從中篩選出具有高產(chǎn)乙醛脫氫酶活性的菌株巴氏醋桿菌巴氏亞種為出發(fā)株。實施例1:以巴氏醋桿菌巴氏亞種為出發(fā)株，將出發(fā)株先經(jīng)斜面活化12h，用Iml無菌水洗脫斜面上的菌體制得菌懸液，菌懸液經(jīng)玻璃珠振蕩30min后制成均勻的菌懸液，再作10_3倍比稀釋，取3ml置培養(yǎng)皿中，在磁力攪拌器的攪拌下，用IOW紫外線燈預(yù)熱20min，然后，在垂直距離IOcm下照射30s，將經(jīng)過紫外線照射的菌懸液，再加入3%的鹽酸羥胺，作10_3倍比稀釋，每平板培養(yǎng)基上涂布0.2ml進(jìn)行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度28度，培養(yǎng)時間60小時，再經(jīng)篩選制得改良菌種，所述的篩選包括有平板初篩、平板復(fù)篩、搖瓶復(fù)篩，其中，
平板初篩:以未經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺處理的出發(fā)株作對照株，挑選水解圈與菌落比對照株的大且形狀規(guī)則的誘變株作為平板復(fù)篩用菌株；
平板復(fù)篩:將平板初篩的誘變株與對照株同時在26度下培養(yǎng)60h，挑選水解圈與菌落大且形狀規(guī)則的誘變株作搖瓶復(fù)篩用菌株；
搖瓶復(fù)篩:將平板復(fù)篩的誘變株制成均勻的菌懸液，將菌懸液搖床培養(yǎng)24h,培養(yǎng)溫度26度，以PH值最低的培養(yǎng)液離心得改良菌體作為培養(yǎng)用的改良菌種；
將改良菌種經(jīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)制得菌體懸浮液，所述的培養(yǎng)基包括有斜面培養(yǎng)基、搖瓶培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及流加培養(yǎng)基，其中，所述的斜面培養(yǎng)基組成為:每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10ml、葡萄糖10ml、酵母膏10ml、硫酸銨0.lg、磷酸氫二鉀0.lg、硫酸二氫鈉
0.lg、硫酸鎂0.lg、瓊脂0.lg, PH值為6.0，培養(yǎng)溫度為26度，培養(yǎng)時間為20h ；
所述的搖瓶培養(yǎng)基組成為:每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10ml、葡萄糖10ml、酵母膏10ml、磷酸氫二鉀0.lg、磷酸二氫鈉0.lg、硫酸鎂0.lg、氯化錳0.0lg、煙酸酰胺1.0mg,PH值為6.0，培養(yǎng)溫度26度，培養(yǎng)時間20h，振蕩周期80r/min，接種一個斜面；
所述的種子培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10ml、葡萄糖1ml、酵母膏10ml、磷酸氫二鉀0.lg、磷酸二氫鈉0.lg、硫酸鎂0.lg、氯化鈣0.0lg、氯化錳0.0lg、煙酰胺
1.0mg，培養(yǎng)溫度26度，培養(yǎng)時間60h，接種量1%，通氣量為1:0.3 (V/V)；
所述的流加培養(yǎng)基組成為:每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10ml，流加培養(yǎng)后經(jīng)管式分離機離心收集菌體，用磷酸鹽緩沖液懸浮菌體，經(jīng)高壓細(xì)胞破碎機進(jìn)行細(xì)胞破碎，收集破碎液，采用雙水相萃取進(jìn)行粗分離，離心后取上清液制得菌體懸浮液，在菌體懸浮液中加入0.5%的海藻酸鈉，在IKW電壓下，經(jīng)電噴霧裝置噴霧到含0.1%的氯化鈣溶液中得到納米凝膠粒，取納米凝膠粒80g，加入還原型谷胱甘肽，阿爾法硫辛酸，維生素C，芝麻木酚素共Ig,加入抑肽酶lg，膽酸鹽、癸酸鈉共lg，可壓性淀粉12g、玉米淀粉5g制成200粒0.5g的膠囊，其中，乙醇脫氫酶500u/g，乙醛脫氫酶340u/g，氧化型輔酶210u/ g。
挑選20名自愿者身體健康，酒量相近，平均年齡30歲，三天內(nèi)無飲酒，分成兩組，一組10人空腹飲酒前2小時使用該膠囊，另一組10人在30分鐘內(nèi)喝完750ml的長城紅葡萄酒(酒精度11.5%)，喝完后5分鐘各用酒精測試儀(韓國產(chǎn)CA2000)進(jìn)行測試，服藥組顯示數(shù)值平均值為60.2mg/100ml，臉不紅、頭不暈、頭不疼、頭腦清醒，身體舒暢，而且，還可以繼續(xù)喝下去；而服開水組顯示數(shù)值取平均值為79.8 mg/100ml,已達(dá)到醉酒的邊緣，有的已出現(xiàn)滿臉通紅，語無倫次，頭暈?zāi)X脹，頭重腳輕，醉酒癥狀明顯。60 min后再測一次，服藥組平均值為40.6 mg/100ml，而服開水組平均值為80.4mg/100ml，葡萄酒的后勁很大，有6人已呼呼大睡，另外幾人頭疼得更厲害，完全醉酒。ISOmin后又測一次，服藥組平均值為35mg/100ml，呈現(xiàn)出強勁的解酒效果，基本上沒有酒后的作用，而服開水組平均值為60.lmg/100ml，血液中酒精濃度還是比較高，基本
上直至第二天身體還會難受。實施例2:以巴氏醋桿菌巴氏亞種為出發(fā)株，將出發(fā)株先經(jīng)斜面活化18h，用IOml無菌水洗脫斜面上的菌體制得菌懸液，菌懸液經(jīng)玻璃珠振蕩45min后制成均勻的菌懸液，再作10_6倍比稀釋，取16ml置培養(yǎng)皿中，在磁力攪拌器的攪拌下，用30W紫外線燈預(yù)熱40min,然后，在垂直距離30cm下照射75s，將經(jīng)過紫外線照射的菌懸液，再加入9%的鹽酸羥胺，作10_6倍比稀釋，每平板培養(yǎng)基上涂布0.6ml進(jìn)行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度30度，培養(yǎng)時間90小時，再經(jīng)篩選制得改良菌種，所述的篩選包括有平板初篩、平板復(fù)篩、搖瓶復(fù)篩，其中，
平板初篩:以未經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺處理的出發(fā)株作對照株，挑選水解圈與菌落比對照株的大且形狀規(guī)則的誘變株作為平板復(fù)篩用菌株；
平板復(fù)篩:將平板初篩的誘變株與對照株同時在32度下培養(yǎng)90h，挑選水解圈與菌落大且形狀規(guī)則的誘變株作搖瓶復(fù)篩用菌株；
搖瓶復(fù)篩:將平板復(fù)篩的誘變株制成均勻的菌懸液，將菌懸液搖床培養(yǎng)60h,培養(yǎng)溫度32度，以PH值最低的培養(yǎng)液離心得改良菌體作為培養(yǎng)用的改良菌種；
將改良菌種經(jīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)制得菌體懸浮液，所述的培養(yǎng)基包括有斜面培養(yǎng)基、搖瓶培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及流加培養(yǎng)基，其中，所述的斜面培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇100ml、葡萄糖100ml、酵母膏100ml、硫酸銨5g、磷酸氫二鉀5g、硫酸二氫鈉5g、硫酸鎂5g、瓊脂5g，PH值為6.8，培養(yǎng)溫度為32度，培養(yǎng)時間為40h ；
所述的搖瓶培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇100ml、葡萄糖100ml、酵母膏100ml、磷酸氫二鉀5g、磷酸二氫鈉5g、硫酸鎂5g、氯化錳2.5g、煙酸酰胺10mg，PH值為6.5，培養(yǎng)溫度32度，培養(yǎng)時間34h，振蕩周期190r/min，接種一個斜面；
所述的種子培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇100ml、葡萄糖50ml、酵母膏100ml、磷酸氫二鉀5g、磷酸二氫鈉5g、硫酸鎂5g、氯化鈣2.5g、氯化錳2.5g、煙酰胺10mg，培養(yǎng)溫度32度，培養(yǎng)時間90h，接種量8%，通氣量為1:0.45 (V/V)；
所述的流加培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇100ml，流加培養(yǎng)后經(jīng)管式分離機離心收集菌體，用磷酸鹽緩沖液懸浮菌體，經(jīng)高壓細(xì)胞破碎機進(jìn)行細(xì)胞破碎，收集破碎液，采用雙水相萃 取進(jìn)行粗分離，離心后取上清液制得菌體懸浮液，在菌體懸浮液中加入2.5%的海藻酸鈉，在IKW電壓下，經(jīng)電噴霧裝置噴霧到含5%的氯化鈣溶液中得到納米凝膠粒，取納米凝膠粒70g，加入還原型谷胱甘肽，阿爾法硫辛酸，維生素C，芝麻木酚素共10g，加入抑肽酶2.5g，膽酸鹽、癸酸鈉共2.5g，可壓性淀粉10g、玉米淀粉5g制成200粒0.5g的膠囊，其中，乙醇脫氫酶5000u/g，乙醛脫氫酶2580u/g，氧化型輔酶1500u/ g。挑選20名自愿者身體健康，酒量相近，平均年齡30歲，三天內(nèi)無飲酒，分成兩組，一組10人空腹飲酒前2小時使用該膠囊，另一組10人在30分鐘內(nèi)喝完750ml的長城紅葡萄酒(酒精度11.5%)，喝完后5分鐘各用酒精測試儀(韓國產(chǎn)CA2000)進(jìn)行測試，服藥組顯示數(shù)值平均值為40mg/100ml，臉不紅、頭不暈、頭不疼、頭腦清醒，身體舒暢，而且，還可以繼續(xù)喝下去；而服開水組顯示數(shù)值取平均值為79.8 mg/100ml,已達(dá)到醉酒的邊緣，有的已出現(xiàn)滿臉通紅，語無倫次，頭暈?zāi)X脹，頭重腳輕，醉酒癥狀明顯。60 min后再測一次，服藥組平均值為30.2 mg/100ml，而服開水組平均值為80.4mg/100ml，葡萄酒的后勁很大，有6人已呼呼大睡，另外幾人頭疼得更厲害，完全醉酒。ISOmin后又測一次，服藥組平均值為23.lmg/100ml，呈現(xiàn)出強勁的解酒效果，基本上沒有酒后的作用，而服開水組平均值為60.lmg/100ml，血液中酒精濃度還是比較高，基
本上直至第二天身體還會難受。實施例3:以巴氏醋桿菌巴氏亞種為出發(fā)株，將出發(fā)株先經(jīng)斜面活化24h，用20ml無菌水洗脫斜面上的菌體制得 菌懸液，菌懸液經(jīng)玻璃珠振蕩60min后制成均勻的菌懸液，再作10_9倍比稀釋，取20ml置培養(yǎng)皿中，在磁力攪拌器的攪拌下，用30W紫外線燈預(yù)熱60min，然后，在垂直距離50cm下照射120s，將經(jīng)過紫外線照射的菌懸液，再加入15%的鹽酸羥胺，作10_9倍比稀釋，每平板培養(yǎng)基上涂布1.0ml進(jìn)行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度38度，培養(yǎng)時間120小時，再經(jīng)篩選制得改良菌種，所述的篩選包括有平板初篩、平板復(fù)篩、搖瓶復(fù)篩，其中，
平板初篩:以未經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺處理的出發(fā)株作對照株，挑選水解圈與菌落比對照株的大且形狀規(guī)則的誘變株作為平板復(fù)篩用菌株；
平板復(fù)篩:將平板初篩的誘變株與對照株同時在38度下培養(yǎng)120h，挑選水解圈與菌落大且形狀規(guī)則的誘變株作搖瓶復(fù)篩用菌株；
搖瓶復(fù)篩:將平板復(fù)篩的誘變株制成均勻的菌懸液，將菌懸液搖床培養(yǎng)96h,培養(yǎng)溫度38度，以PH值最低的培養(yǎng)液離心得改良菌體作為培養(yǎng)用的改良菌種；
將改良菌種經(jīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)制得菌體懸浮液，所述的培養(yǎng)基包括有斜面培養(yǎng)基、搖瓶培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及流加培養(yǎng)基，其中，所述的斜面培養(yǎng)基組成為:每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇200ml、葡萄糖200ml、酵母膏200ml、硫酸銨10.0g、磷酸氫二鉀10.0g、硫酸二氫鈉10.0g、硫酸鎂10.0g、瓊脂10.0g, PH值為7.2，培養(yǎng)溫度為38度，培養(yǎng)時間為60h ；
所述的搖瓶培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇200ml、葡萄糖200ml、酵母膏200ml、磷酸氫二鉀10.0g、磷酸二氫鈉10.0g、硫酸鎂10.0g、氯化錳5.0g、煙酸酰胺20.0mg, PH值為7.2，培養(yǎng)溫度38度，培養(yǎng)時間48h，振蕩周期300r/min，接種一個斜面；所述的種子培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇200ml、葡萄糖100ml、酵母膏200ml、磷酸氫二鉀10.0g、磷酸二氫鈉10.0g、硫酸鎂10.0g、氯化鈣5.0g、氯化錳5.0g、煙酰胺20.0mg，培養(yǎng)溫度38度，培養(yǎng)時間120h，接種量15%，通氣量為1:0.6 (V/V)；所述的流加培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇200ml，流加培養(yǎng)后經(jīng)管式分離機離心收集菌體，用磷酸鹽緩沖液懸浮菌體，經(jīng)高壓細(xì)胞破碎機進(jìn)行細(xì)胞破碎，收集破碎液，采用雙水相萃取進(jìn)行粗分離，離心后取上清液制得菌體懸浮液，在菌體懸浮液中加入5%的海藻酸鈉，在20KW電壓下，經(jīng)電噴霧裝置噴霧到含10%的氯化鈣溶液中得到納米凝膠粒，取納米凝膠粒65g，加入還原型谷胱甘肽，阿爾法硫辛酸，維生素C，芝麻木酚素共15g，加入抑肽酶5g，膽酸鹽、癸酸鈉共5g，可壓性淀粉5g、玉米淀粉5g制成200粒0.5g的膠囊，其中，乙醇脫氫酶7200u/g，乙醛脫氫酶4800u/g，氧化型輔酶3200u/ g。挑選20名自愿者身體健康，酒量相近，平均年齡30歲，三天內(nèi)無飲酒，分成兩組，一組10人空腹飲酒前2小時使用該膠囊，另一組10人在30分鐘內(nèi)喝完750ml的長城紅葡萄酒(酒精度11.5%)，喝 完后5分鐘各用酒精測試儀(韓國產(chǎn)CA2000)進(jìn)行測試，服藥組顯示數(shù)值平均值為37mg/100ml，臉不紅、頭不暈、頭不疼、頭腦清醒，身體舒暢，而且，還可以繼續(xù)喝下去；而服開水組顯示數(shù)值取平均值為79.8 mg/100ml,已達(dá)到醉酒的邊緣，有的已出現(xiàn)滿臉通紅，語無倫次，頭暈?zāi)X脹，頭重腳輕，醉酒癥狀明顯。60 min后再測一次，服藥組平均值為20mg/100ml,而服開水組平均值為80.4mg/100ml，葡萄酒的后勁很大，有6人已呼呼大睡，另外幾人頭疼得更厲害，完全醉酒。ISOmin后又測一次，服藥組平均值為12mg/100ml，呈現(xiàn)出強勁的解酒效果，基本上沒有酒后的作用，而服開水組平均值為60.lmg/100ml，血液中酒精濃度還是比較高，基本
上直至第二天身體還會難受。實施例4:以巴氏醋桿菌巴氏亞種為出發(fā)株，將出發(fā)株先經(jīng)斜面活化12h，用Iml無菌水洗脫斜面上的菌體制得菌懸液，菌懸液經(jīng)玻璃珠振蕩30min后制成均勻的菌懸液，再作10_3倍比稀釋，取3ml置培養(yǎng)皿中，在磁力攪拌器的攪拌下，用IOW紫外線燈預(yù)熱20min，然后，在垂直距離IOcm下照射30s，將經(jīng)過紫外線照射的菌懸液，再加入3%的鹽酸羥胺，作10_3倍比稀釋，每平板培養(yǎng)基上涂布0.2ml進(jìn)行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度28度，培養(yǎng)時間60小時，再經(jīng)篩選制得改良菌種，所述的篩選包括有平板初篩、平板復(fù)篩、搖瓶復(fù)篩，其中，
平板初篩:以未經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺處理的出發(fā)株作對照株，挑選水解圈與菌落比對照株的大且形狀規(guī)則的誘變株作為平板復(fù)篩用菌株；
平板復(fù)篩:將平板初篩的誘變株與對照株同時在26度下培養(yǎng)60h，挑選水解圈與菌落大且形狀規(guī)則的誘變株作搖瓶復(fù)篩用菌株；
搖瓶復(fù)篩:將平板復(fù)篩的誘變株制成均勻的菌懸液，將菌懸液搖床培養(yǎng)24h,培養(yǎng)溫度26度，以PH值最低的培養(yǎng)液離心得改良菌體作為培養(yǎng)用的改良菌種；
將改良菌種經(jīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)制得菌體懸浮液，所述的培養(yǎng)基包括有斜面培養(yǎng)基、搖瓶培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及流加培養(yǎng)基，其中，所述的斜面培養(yǎng)基組成為:每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10ml、葡萄糖10ml、酵母膏10ml、硫酸銨0.lg、磷酸氫二鉀0.lg、硫酸二氫鈉
0.lg、硫酸鎂0.lg、瓊脂0.lg, PH值為6.0，培養(yǎng)溫度為26度，培養(yǎng)時間為20h ；
所述的搖瓶培養(yǎng)基組成為:每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10ml、葡萄糖10ml、酵母膏10ml、磷酸氫二鉀0.lg、磷酸二氫鈉0.lg、硫酸鎂0.lg、氯化錳0.0lg、煙酸酰胺1.0mg,PH值為6.0，培養(yǎng)溫度26度，培養(yǎng)時間20h，振蕩周期80r/min，接種一個斜面；
所述的種子培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10ml、葡萄糖1ml、酵母膏10ml、磷酸氫二鉀0.lg、磷酸二氫鈉0.lg、硫酸鎂0.lg、氯化鈣0.0lg、氯化錳0.0lg、煙酰胺
1.0mg，培養(yǎng)溫度26度，培養(yǎng)時間60h，接種量1%，通氣量為1:0.3 (V/V)；
所述的流加培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10ml，流加培養(yǎng)后經(jīng)管式分離機離心收集菌體，用磷酸鹽緩沖液懸浮菌體，經(jīng)高壓細(xì)胞破碎機進(jìn)行細(xì)胞破碎，收集破碎液，采用雙水相萃取進(jìn)行粗分離，離心后取上清液制得菌體懸浮液，取菌體懸浮液70g再加入蓖麻油聚氧乙烯醚18g、肉豆蘧酸異丙酯5.0g、維生素E2.0g、安賽蜜1.0g、蛋奶粉香精2.0g、甘草酸1.0g、薄荷油1.0g，加入到噴霧瓶中，制成IOOg解酒噴霧劑，其中，乙醇脫氫酶430u/g,乙醒脫氫酶350u/g,氧化型輔酶265u/ g。挑選20名自愿者身體健康，酒量相近，平均年齡30歲，三天內(nèi)無飲酒，分成兩組，一組10人空腹飲酒前2小時使用該噴霧劑，另一組10人在30分鐘內(nèi)喝完750ml的長城紅葡萄酒(酒精度11.5%)，喝完后5分鐘各用酒精測試儀(韓國產(chǎn)CA2000)進(jìn)行測試，服藥組顯示數(shù)值平均值為53mg/100ml，臉不紅、頭不暈、頭不疼、頭腦清醒，身體舒暢，而且，還可以繼續(xù)喝下去；而服開水組顯示數(shù)值取平均值為79.8 mg/100ml,已達(dá)到醉酒的邊緣，有的已出現(xiàn)滿臉通紅，語無倫次，頭暈?zāi)X脹，頭重腳輕，醉酒癥狀明顯。60 min后再測一次，服藥組平均值為41.2 mg/100ml,而服開水組平均值為80.4mg/100ml，葡萄酒的后勁很大，有6人已呼呼大睡，另外幾人頭疼得更厲害，完全醉酒。180min后又測一次，服藥組平均值為32.0mg/100ml，呈現(xiàn)出強勁的解酒效果，基本上沒有酒后的作用，而服開水組平均值為60.lmg/100ml，血液中酒精濃度還是比較高，基
本上直至第二天身體還會難受。實施例5:以巴氏醋桿菌巴氏亞種為出發(fā)株，將出發(fā)株先經(jīng)斜面活化18h，用IOml無菌水洗脫斜面上的菌體制得菌懸液，菌懸液經(jīng)玻璃珠振蕩45min后制成均勻的菌懸液，再作10_6倍比稀釋，取16ml置培養(yǎng)皿中，在磁力攪拌器的攪拌下，用30W紫外線燈預(yù)熱40min,然后，在垂直距離30cm下照射75s，將經(jīng)過紫外線照射的菌懸液，再加入9%的鹽酸羥胺，作10_6倍比稀釋，每平板培養(yǎng)基上涂布0.6ml進(jìn)行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度30度，培養(yǎng)時間90小時，再經(jīng)篩選制得改良菌種，所述的篩選包括有平板初篩、平板復(fù)篩、搖瓶復(fù)篩，其中，
平板初篩:以未 經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺處理的出發(fā)株作對照株，挑選水解圈與菌落比對照株的大且形狀規(guī)則的誘變株作為平板復(fù)篩用菌株；
平板復(fù)篩:將平板初篩的誘變株與對照株同時在32度下培養(yǎng)90h，挑選水解圈與菌落大且形狀規(guī)則的誘變株作搖瓶復(fù)篩用菌株；
搖瓶復(fù)篩:將平板復(fù)篩的誘變株制成均勻的菌懸液，將菌懸液搖床培養(yǎng)60h,培養(yǎng)溫度32度，以PH值最低的培養(yǎng)液離心得改良菌體作為培養(yǎng)用的改良菌種；
將改良菌種經(jīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)制得菌體懸浮液，所述的培養(yǎng)基包括有斜面培養(yǎng)基、搖瓶培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及流加培養(yǎng)基，其中，所述的斜面培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇100ml、葡萄糖100ml、酵母膏100ml、硫酸銨5g、磷酸氫二鉀5g、硫酸二氫鈉5g、硫酸鎂5g、瓊脂5g，PH值為6.8，培養(yǎng)溫度為32度，培養(yǎng)時間為40h ；
所述的搖瓶培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇100ml、葡萄糖100ml、酵母膏100ml、磷酸氫二鉀5g、磷酸二氫鈉5g、硫酸鎂5g、氯化錳2.5g、煙酸酰胺10mg，PH值為6.5，培養(yǎng)溫度32度，培養(yǎng)時間34h，振蕩周期190r/min，接種一個斜面；
所述的種子培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇100ml、葡萄糖50ml、酵母膏100ml、磷酸氫二鉀5g、磷酸二氫鈉5g、硫酸鎂5g、氯化鈣2.5g、氯化錳2.5g、煙酰胺10mg，培養(yǎng)溫度32度，培養(yǎng)時間90h，接種量8%，通氣量為1:0.45 (V/V)；
所述的流加培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇100ml，流加培養(yǎng)后經(jīng)管式分離機離心收集菌體，用磷酸鹽緩沖液懸浮菌體，經(jīng)高壓細(xì)胞破碎機進(jìn)行細(xì)胞破碎，收集破碎液，采用雙水相萃取進(jìn)行粗分離，離心后取上清液制得菌體懸浮液，取菌體懸浮液80g再加入蓖麻油聚氧乙烯醚10g、肉豆蘧酸異丙酯3.0g、維生素E2.0g、安賽蜜2.0g、蛋奶粉香精1.0g、甘草酸1.0g、薄荷油1.0g，加入到噴霧瓶中，制成IOOg解酒噴霧劑，其中，乙醇脫氫酶4500u/g,乙醒脫氫酶4300u/g,氧化型輔酶3650u/ g。挑選20名自愿者身體健康，酒量相近，平均年齡30歲，三天內(nèi)無飲酒，分成兩組，一組10人空腹飲酒前2小時使用該噴霧劑，另一組10人在30分鐘內(nèi)喝完750ml的長城紅葡萄酒(酒精度11.5%)，喝完后5分鐘各用酒精測試儀(韓國產(chǎn)CA2000)進(jìn)行測試，服藥組顯示數(shù)值平均值為40mg/100ml，臉不紅、頭不暈、頭不疼、頭腦清醒，身體舒暢，而且，還可以繼續(xù)喝下去；而服開水組顯示數(shù)值取平均值為79.8 mg/100ml,已達(dá)到醉酒的邊緣，有的已出現(xiàn)滿臉通紅，語無倫次，頭暈?zāi)X脹，頭重腳輕，醉酒癥狀明顯。60 min后再測一次，服藥組平均值為25.3mg/100ml，而服開水組平均值為80.4mg/100ml，葡萄酒的后勁很大，有6人已呼呼大睡，另外幾人頭疼得更厲害，完全醉酒。180min后又測一次，服藥組平均值為16.3mg/100ml，呈現(xiàn)出強勁的解酒效果，基本上沒有酒后的作用，而服開水組平均值為60.lmg/100ml，血液中酒精濃度還是比較高，基
本上直至第二天身體還會難受。實施例6:以巴氏醋桿菌巴氏亞種為出發(fā)株，將出發(fā)株先經(jīng)斜面活化24h，用20ml無菌水洗脫斜面上的菌體制得菌懸液，菌懸液經(jīng)玻璃珠振蕩60min后制成均勻的菌懸液，再作10_9倍比稀釋，取20ml置培養(yǎng)皿中，在磁力攪拌器的攪拌下，用30W紫外線燈預(yù)熱60min，然后，在垂直距離50cm下照射120s，將經(jīng)過紫外線照射的菌懸液，再加入15%的鹽酸羥胺，作10_9倍比稀釋，每平板培養(yǎng)基上涂布1.0ml進(jìn)行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度38度，培養(yǎng)時間120小時，再經(jīng)篩選制得改良菌種，所述的篩選包括有平板初篩、平板復(fù)篩、搖瓶復(fù)篩，其中，
平板初篩:以未經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺處理的出發(fā)株作對照株，挑選水解圈與菌落比對照株的大且形狀規(guī)則的誘變株作為平板復(fù)篩用菌株；
平板復(fù)篩:將平板初篩的誘變株與對照株同時在38度下培養(yǎng)120h，挑選水解圈與菌落大且形狀規(guī)則的誘變株作搖瓶復(fù)篩用菌株；
搖瓶復(fù)篩:將平板復(fù)篩的誘變株制成均勻的菌懸液，將菌懸液搖床培養(yǎng)96h,培養(yǎng)溫度38度，以PH值最低的培養(yǎng)液離心得改良菌體作為培養(yǎng)用的改良菌種；
將改良菌種經(jīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)制得菌體懸浮液，所述的培養(yǎng)基包括有斜面培養(yǎng)基、搖瓶培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及流加培養(yǎng)基，其中，所述的斜面培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇200ml、葡萄糖200ml、酵母膏200ml、硫酸銨10.0g、磷酸氫二鉀10.0g、硫酸二氫鈉10.0g、硫酸鎂10.0g、瓊脂10.0g, PH值為7.2，培養(yǎng)溫度為38度，培養(yǎng)時間為60h ；
所述的搖瓶培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇200ml、葡萄糖200ml、酵母膏200ml、磷酸氫二鉀10.0g、磷酸二氫鈉10.0g、硫酸鎂10.0g、氯化錳5.0g、煙酸酰胺20.0mg, PH值為7.2，培養(yǎng)溫度38度，培養(yǎng)時間48h，振蕩周期300r/min，接種一個斜面；所述的種子培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇200ml、葡萄糖100ml、酵母膏200ml、磷酸氫二鉀10.0g、磷酸二氫鈉10.0g、硫酸鎂10.0g、氯化鈣5.0g、氯化錳
5.0g、煙酰胺20.0mg，培養(yǎng)溫度38度，培養(yǎng)時間120h，接種量15%，通氣量為1:0.6 (V/V)；所述的流加培養(yǎng)基組成為 每1000m`l培養(yǎng)基中含有95%乙醇200ml，流加培養(yǎng)后經(jīng)管式分離機離心收集菌體，用磷酸鹽緩沖液懸浮菌體，經(jīng)高壓細(xì)胞破碎機進(jìn)行細(xì)胞破碎，收集破碎液，采用雙水相萃取進(jìn)行粗分離，離心后取上清液制得菌體懸浮液，取菌體懸浮液75g再加入蓖麻油聚氧乙烯醚10g、肉豆蘧酸異丙酯5.0g、維生素E5.0g、安賽蜜2.0g、蛋奶粉香精1.0g、甘草酸1.0g、薄荷油1.0g，加入到噴霧瓶中，制成IOOg解酒噴霧劑，其中，乙醇脫氫酶7300u/g，乙醛脫氫酶5600u/g，氧化型輔酶4300u/ g。挑選20名自愿者身體健康，酒量相近，平均年齡30歲，三天內(nèi)無飲酒，分成兩組，一組10人空腹飲酒前2小時使用該噴霧劑，另一組10人在30分鐘內(nèi)喝完750ml的長城紅葡萄酒(酒精度11.5%)，喝完后5分鐘各用酒精測試儀(韓國產(chǎn)CA2000)進(jìn)行測試，服藥組顯示數(shù)值平均值為37mg/100ml，臉不紅、頭不暈、頭不疼、頭腦清醒，身體舒暢，而且，還可以繼續(xù)喝下去；而服開水組顯示數(shù)值取平均值為79.8 mg/100ml,已達(dá)到醉酒的邊緣，有的已出現(xiàn)滿臉通紅，語無倫次，頭暈?zāi)X脹，頭重腳輕，醉酒癥狀明顯。60 min后再測一次，服藥組平均值為20.lmg/100ml,而服開水組平均值為80.4mg/100ml，葡萄酒的后勁很大，有6人已呼呼大睡，另外幾人頭疼得更厲害，完全醉酒。ISOmin后又 測一次，服藥組平均值為11.6mg/100ml，呈現(xiàn)出強勁的解酒效果，基本上沒有酒后的作用，而服開水組平均值為60.lmg/100ml，血液中酒精濃度還是比較高，基
本上直至第二天身體還會難受。
權(quán)利要求
1.一種解酒防醉藥，其特征在于:包括有乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶以及氧化型輔酶，其中，乙醇脫氫酶Ι-lOOOOu/g，乙醛脫氫酶Ι-lOOOOu/g，氧化型輔酶l-10000u/g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的解酒防醉藥，其特征在于(按質(zhì)量百分比計):還包括有1-15%的抗氧化劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的解酒防醉藥，其特征在于:所述的抗氧化劑為還原型谷胱甘肽，阿爾法硫辛酸，維生素C，芝麻木酚素中的至少其中一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的解酒防醉藥，其特征在于(按質(zhì)量百分比計):所述的解酒防醉藥還含有0.01-5.0%的酶抑制劑、0.01-5.0%的吸收促進(jìn)劑，所述的酶抑制劑為抑肽酶，吸收促進(jìn)劑為膽酸鹽、癸酸鈉中的至少一種。
5.一種解酒防醉藥的生產(chǎn)方法，其特征在于:以醋酸菌類微生物為出發(fā)株，將其先經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺復(fù)合誘變，然后，經(jīng)篩選制得改良菌種，將改良菌種經(jīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)后，再制得菌體懸浮液，最后，將菌體懸浮液制成納米藥物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的解酒防醉藥的生產(chǎn)方法，其特征在于:所述的紫外線、鹽酸羥胺復(fù)合誘變?yōu)閷⒊霭l(fā)株先經(jīng)斜面活化12-24h，用l-20ml無菌水洗脫斜面上的菌體制得菌懸液，菌懸液經(jīng)玻璃珠振蕩30-60min后制成均勻的菌懸液，再作10_3_10_9倍比稀釋，取3-20ml置培養(yǎng)皿中，在磁力攪拌器的攪拌下，用10-30W紫外線燈預(yù)熱20_60min，然后，在垂直距離10-50cm下照射30-120S，將經(jīng)過紫外線照射的菌懸液，再加入3-15%的鹽酸羥胺，作10_3-10_9倍比稀釋，每平板培養(yǎng)基上涂布0.2-1.0ml進(jìn)行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度28-38度，培養(yǎng)時間60-120小時。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的解酒防醉藥的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述的篩選包括有平板初篩、平板復(fù)篩、搖瓶復(fù)篩； 平板初篩:以未經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺處理的出發(fā)株作對照株，挑選水解圈與菌落比對照株的大且形狀規(guī)則的誘變株作為平板復(fù)篩用菌株； 平板復(fù)篩:將平板初篩的誘變株與對照株同時在26 38度下培養(yǎng)6(Tl20h，挑選水解圈與菌落大且形狀規(guī)則的誘變株作搖瓶復(fù)篩用菌株； 搖瓶復(fù)篩:將平板復(fù)篩的誘變株制成均勻的菌懸液，將菌懸液搖床培養(yǎng)24、6h，培養(yǎng)溫度26 38度，以PH值最低的培養(yǎng)液離心得改良菌體作為培養(yǎng)用的改良菌種。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的解酒防醉藥的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基包括有斜面培養(yǎng)基、搖瓶培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及流加培養(yǎng)基；其中，所述的斜面培養(yǎng)基組成為:每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10_200ml、葡萄糖10_200ml、酵母膏10_200ml、硫酸銨0.1-10.0g、磷酸氫二鉀0.1-10.0g、硫酸二氫鈉0.1-10.0g、硫酸鎂0.1-10.0g、瓊脂·0.1-10.0g, PH值為6.0-7.2，培養(yǎng)溫度為26-38度，培養(yǎng)時間為20_60h ； 所述的搖瓶培養(yǎng)基組成為 每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10_200ml、葡萄糖·10-200ml、酵母膏10-200ml、磷酸氫二鉀0.1-10.0g、磷酸二氫鈉0.1-10.0g、硫酸鎂·0.1-10.0g、氯化錳 0.01-5.0g、煙酸酰胺 1.0-20.0mg，PH 值為 6.0-7.2，培養(yǎng)溫度 26-38 度，培養(yǎng)時間20-48h，振蕩周期80-300r/min，接種一個斜面； 所述的種子培養(yǎng)基組成為:每1000ml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10_200ml、葡萄糖l-100ml、酵母膏10-200ml、磷酸氫二鉀0.1-10.0g、磷酸二氫鈉0.1-10.0g、硫酸鎂·0.1-10.0g、氯化鈣 0.01-5.0g、氯化錳 0.01-5.0g、煙酰胺 1.0-20.0mg，培養(yǎng)溫度 26-38度，培養(yǎng)時間60-120h，接種量1% 15%，通氣量為1:0.3 0.6 (V/V)； 所述的流加培養(yǎng)基組成為 每IOOOml培養(yǎng)基中含有95%乙醇10-200ml。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的解酒防醉藥的生產(chǎn)方法，其特征在于:在菌體懸浮液中加入.0.5-5% (質(zhì)量百分比)的海藻酸鈉，在1-20KW電壓下，經(jīng)電噴霧裝置噴霧到0.1-10.0%的氯化鈣溶液中即得納米凝膠粒，再將納米凝膠粒制成顆粒狀納米藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種解酒防醉藥及其生產(chǎn)方法，該藥包括有乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶以及氧化型輔酶，該藥的生產(chǎn)方法為以醋酸菌類微生物為出發(fā)株，將其先經(jīng)紫外線、鹽酸羥胺復(fù)合誘變，再經(jīng)篩選制得改良菌種，然后，將改良菌種經(jīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)制得菌體懸浮液，再將制得的菌體懸浮液制成納米藥物。采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明提供了一種解酒防醉藥，其通過乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶催化乙醇、乙醛氧化來進(jìn)行解酒的同時補充氧化型輔酶，從而保證肝細(xì)胞內(nèi)氧化-還原平衡。
文檔編號A61P39/00GK103169956SQ20131012309
公開日2013年6月26日 申請日期2013年4月10日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月10日
發(fā)明者安壽松, 安海引 申請人:安壽松