專利名稱：一種從野生茜草里提取茜草色素的新型工藝方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種從大興安嶺野生茜草里提取茜草色素的方法，特別是涉及種利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓技術(shù)純化茜草色素的新方法。
背景技術(shù)：
特征茜草生于山地雜木林下、林緣，灌叢及草甸。產(chǎn)于內(nèi)蒙呼倫貝爾盟及黑龍江省大興安嶺地區(qū)可栽培。草質(zhì)攀援藤本；根紫紅色或橙紅色；小枝有明顯的4棱角，棱上有倒生小刺。葉4片輪生，紙質(zhì)，卵形至狀披針形。長(zhǎng)2 9厘米，寬可達(dá)4厘米，頂端漸尖，基部圓形至心形，上面粗糙，下面脈上和葉柄常有倒生小刺，基出脈3或5條葉柄長(zhǎng)短不齊，長(zhǎng)的達(dá)10厘米，短的僅I厘米，聚傘花序通常排成打二疏松的圓錐花序狀，腋生和頂生；花小，黃白色，5數(shù)有短梗；花冠輻狀。漿果近球狀，直徑5 6毫米，黑色或紫黑色，有I顆。花期7月，果期8 9月。茜草色素天然存在于茜草科茜草的根莖部組織的細(xì)胞內(nèi)，茜草色素經(jīng)近代醫(yī)學(xué)研究表明，對(duì)金黃色葡萄球菌有抑制生長(zhǎng)作用，能行血、活血、破瘀、通經(jīng)活絡(luò)、抗炎，國(guó)內(nèi)對(duì)茜草色素研究主要有回流提取法和超聲提取法，其分離純化效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化技術(shù)·的效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服常規(guī)技術(shù)提取率相對(duì)較低、提取純度低等缺點(diǎn)，提供一種利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其步驟如下(I)酶解將新鮮茜草根切片2_3cm左右，采用一定料液比，加入內(nèi)、外切葡聚糖酶和果膠酶，一種酶比例為1:1 : O. 5，酶濃度為O. 5-1%。，在40-50°C左右酶解l_1.5h;(2)微波預(yù)處理用體積濃度75-95%乙醇做為溶劑，采用微波，在200 500W，加熱至一定溫度提取5-10min ；(3)過濾靜置、將初提液初步過濾，進(jìn)行分離，初步濃縮得茜草色素粗提物；(4)高壓提取粗提物放入超高壓處理袋內(nèi)，按1: 3料液比加入乙醇溶液，封口包裝，以不同壓力，加壓20-30min，加壓兩次；(5)得膏狀物將提取液抽濾、離心得色素液，回收乙醇，濃縮得膏狀物；(6)柱層析將所得茜草膏狀色素上硅膠層析柱，并以不同溶劑進(jìn)行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集茜草色素各階段洗脫液；
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(7)真空干燥將所收集的茜草色素洗脫液，低溫真空干燥得茜草色素，UV檢測(cè)色價(jià)在85以上。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)應(yīng)用生物酶解技術(shù)，使細(xì)胞內(nèi)有效成分充分溶出，采用微波預(yù)處理的色素受熱時(shí)間降低，超高壓技術(shù)可使茜草色素進(jìn)一步純化，本發(fā)明提取方便快捷，原料來源豐富，分離效果明顯，提取純度高
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 :一種利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其步驟如下(I)將50g鮮茜草根切片至2cm，采用1: 5料液比，加入內(nèi)、外切葡聚糖酶和果膠酶，一種酶比例為1:1 : O. 5，酶濃度為O. 5%。，調(diào)節(jié)pH值至45，在40°C左右酶解Ih;(2)微波預(yù)處理用75%乙醇做為溶劑，采用微波提取，在功率200W，加熱至50°C提取5min ；(3)過濾靜置、將初提液過濾，分離，初步濃縮得茜草色素粗提物；(4)高壓提取粗提物放入超高壓處理袋內(nèi)，按1: 3料液比加入60%乙醇溶液，封口包裝，以300MPa，加壓20min，加壓兩次；

(5)得膏狀物將提取液抽濾、離心得色素液，回收乙醇，濃縮得膏狀物330g ；(6)柱層析將所得茜草色素液上硅膠層析柱，并以乙酸乙酯、氯仿體積比3:1-5:1進(jìn)行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集茜草色素各階段洗脫液；(7)真空干燥將所收集的茜草色素洗脫液，于50°C低溫真空干燥，得茜草色素1.5g, UV檢測(cè)色價(jià)為88。實(shí)施案例2 :—種利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其步驟如下(I)將50g鮮茜草根切片至3cm，采用1: 7料液比，加入內(nèi)、外切葡聚糖酶和果膠酶，二種酶比例為1:1 : O. 5，酶濃度為O. 8%。，調(diào)節(jié)pH值至5.0，在45°C左右酶解Ih;(2)微波預(yù)處理用85%乙醇做為溶劑，采用微波提取，在400W功率，加熱至55°C提取8min (3)過濾靜置、將初提液過濾，分離，初步濃縮得茜草色素粗提物；(4)高壓提取粗提物放入超高壓處理袋內(nèi)，按1: 3料液比加入65%乙醇溶液，封口包裝，以400MPa壓力，加壓25min，加壓兩次；(5)得膏狀物將提取液抽濾、離心得色素液，回收乙醇，濃縮得膏狀物390g ；(6)柱層析將所得茜草色素液上硅膠層析柱，并以70^^75^^80%乙醇溶液進(jìn)行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集茜草色素各階段洗脫液；；(7)真空干燥將所收集的茜草色素洗脫液，于50°C低溫真空干燥，得茜草色素l-18g、UV檢測(cè)色價(jià)為90。實(shí)施案例3 :—種利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其步驟如下(I)將50g鮮茜草根切片至3cm，采用1: 8料液比，加入內(nèi)、外切葡聚糖酶和果膠酶，二種酶比例為1:1 : O. 5，酶濃度為1%。，調(diào)節(jié)pH值至5.5，在50°C左右酶解1. 5h;(2)微波預(yù)處理用95%乙醇做為溶劑，采用微波提取，在功率500W，加熱至55°C提取IOmin ；(3)過濾靜置、將初提液過濾，分離，初步濃縮得茜草色素粗提物；
(4)高壓提取粗提物放入超高壓處理袋內(nèi)，按1: 3料液比加入70%乙醇溶液，封口包裝，以500MPa，壓力，加壓30min，加壓兩次；(5)得膏狀物將提取液抽濾、離心得色素液，回收乙醇，濃縮得膏狀物430g ；(6)柱層析將所茜草色素液上硅膠層析柱，并以乙酸乙酯、氯仿體積比5:1-7:1進(jìn)行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集茜草色素各階段洗脫液；(7)真空干燥將所 收集的茜草色素洗脫液，于60°C低溫真空干燥，得茜草色素l-56g，UV檢測(cè)色價(jià)為87。
權(quán)利要求
1.一種利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其步驟如下 (1)酶解將新鮮芮草根切片2-3cm左右，采用一定料液比，加入內(nèi)、外切葡聚糖酶和果膠酶，二種酶比例為I I 0. 5，酶濃度為0. 5-1%。，在40-50°C左右酶解l_1.5h; (2)微波預(yù)處理用體積濃度75-95%乙醇做為溶劑，采用微波，在200 500W，加熱至一定溫度提取5-10min ； (3)過濾靜置、將初提液初步過濾，進(jìn)行分離，初步濃縮得茜草色素粗提物； (4)高壓提取粗提物放入超高壓處理袋內(nèi)，按1: 3粗液比加入乙醇溶液，封口包裝，以不同壓力，加壓20-30min，加壓兩次； (5)得膏狀物將提取液抽濾、離心得色素液，回收乙醇，濃縮得膏狀物； (6)柱層析將所得茜草膏狀色素上硅膠層析柱，并以不同溶劑進(jìn)行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測(cè)，收集茜草色素各階段洗脫液 (7)真空干燥將所收集的茜草色素洗脫液，低溫真空干燥得茜草色素，UV檢測(cè)色價(jià)在85以上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其特征是在所述的步驟(I)中，酶解時(shí)調(diào)節(jié)PH值在4. 5-5. 5之間，料液比為I 5-8。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其特征是在所述的步驟(2)中，加熱溫度為50-55°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其特征是在所述的步驟(4)中，超高壓力為300-500MPa，乙醇體積濃度為60-70%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其特征是在所述的步驟￠)中，洗脫時(shí)采取的乙醇體積濃度為70^^75^^80%,乙酸乙酯與氯仿的體積為I 7 :1。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的利用生物酶解、微波輔助提取藕聯(lián)超高壓純化茜草色素的新方法，其特征是在所述的步驟(7)中，低溫干燥溫度為50-60°C。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)提取方便快捷，原料來源豐富，分離效果明顯，提取純度高。具體體現(xiàn)以下幾點(diǎn)1、應(yīng)用生物酶解技術(shù)，使細(xì)胞內(nèi)有效成分充分溶出。2、采用微波預(yù)處理的色素受熱時(shí)間降低，活性損失少，產(chǎn)品生物活性高。3、超高壓提取是在常溫下進(jìn)行的，因此避免了因熱效應(yīng)引起的有效成分結(jié)構(gòu)變化、損失以及生理活性降低，同時(shí)超高壓技術(shù)減少雜質(zhì)成分溶出的同時(shí)，提高了有效成分的收率，可使茜草色素進(jìn)一步純化。本發(fā)明利用微波輔助提取與超高壓藕聯(lián)技術(shù)，先用乙醇做溶劑經(jīng)過微波預(yù)處理，再用流體靜壓力大于100的超高壓提取，泄壓后溶劑可帶著有效成分溢出；再經(jīng)過低溫真空干燥，將茜草色素色價(jià)提高到90。
文檔編號(hào)A61P31/04GK103040984SQ20121059563
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2012年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月13日
發(fā)明者張亞紅, 姚德坤, 姚德利, 萬(wàn)莉, 魯桂鳳 申請(qǐng)人:大興安嶺林格貝有機(jī)食品有限責(zé)任公司