專利名稱：巴西木素在制備抑制β-淀粉樣蛋白聚集的藥物或保健品的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及巴西木素在制備抑制0 -淀粉樣蛋白聚集的藥物和保健品的用途。
背景技術(shù)：
阿爾茲海默癥(Alzheimer，s Disease，AD)是最為常見的老年癡呆癥之一。其病癥表現(xiàn)為認(rèn)知和記憶功能障礙、情緒不穩(wěn)等癥狀。大量研究表明，AD患者腦內(nèi)的神經(jīng)突觸損傷，神經(jīng)細(xì)胞凋亡，大腦萎縮，腦組織呈現(xiàn)神經(jīng)元纖維纏結(jié)，腦血管和神經(jīng)細(xì)胞外有淀粉樣斑塊沉積。構(gòu)成淀粉樣斑塊的主要成份為異常的神經(jīng)末梢、膠質(zhì)細(xì)胞和3-淀粉樣蛋白(amyloidP-protein, AP )。因此，AD與AP的聚集之間存在極為密切的聯(lián)系。
是由跨膜淀粉樣前體蛋白經(jīng)過a、P和Y水解酶水解得到。AP —般含有39-43個(gè)氨基酸。其中AP 40大約占90%，AP 42占10%左右。與AMO相比，由于A M2在羧基端多出2個(gè)疏水性氨基酸殘基(I和A)，因此其疏水性增強(qiáng)，更易聚集，且聚集形成的聚集體的毒性更大。越來越多的研究表明AP單體沒有毒性，但其聚集體通過多種作用方式產(chǎn)生細(xì)胞毒性，引起神經(jīng)元變性甚至凋亡，腦內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞活性增高，從而激發(fā)體內(nèi)炎癥反應(yīng)。有研究表明，這些癥狀的出現(xiàn)均先于淀粉樣斑塊的形成，與病人體內(nèi)AP的可溶性寡聚體的濃度密切相關(guān)。因此目前將AP聚集以及可溶性寡聚體的形成視為研究重點(diǎn)。單體在水溶液條件下主要以無規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)存在，包含少量a -螺旋結(jié)構(gòu)。而在 纖維形成過程中，單體首先通過構(gòu)象轉(zhuǎn)換形成富含￠-折疊的二級(jí)結(jié)構(gòu)，AP分子之間
通過￠-折疊結(jié)構(gòu)上的氫鍵、鹽橋、疏水性相互作用等作用方式聚集在一起，形成一種具有反向平行的￠-折疊片層結(jié)構(gòu)的寡聚體。多個(gè)寡聚體之間相互聚集，形成聚集核，其它寡聚體或單體繼續(xù)向聚集核上聚集形成絲狀的原纖維，并進(jìn)一步聚集形成成熟的纖維，最終在體內(nèi)形成淀粉樣斑塊。由于AD與AP的聚集沉淀密切相關(guān)，因此如何阻止AP的聚集沉淀就成為當(dāng)前研究者關(guān)注的熱點(diǎn)問題。WAP的生成和構(gòu)象轉(zhuǎn)換角度可以采用以下四種方法和手段來治療AD :抑制淀粉樣前體蛋白質(zhì)的生物合成；穩(wěn)定淀粉樣前體蛋白的三維結(jié)構(gòu)；抑制變性淀粉樣前體蛋白質(zhì)的酶解；穩(wěn)定AP初始結(jié)構(gòu)及抑制其聚集。由于AP自身具有生物體所必需的生理功能，因此前三種方法均存在較大的風(fēng)險(xiǎn)。目前最安全和可靠的治療AD的方法就是穩(wěn)定A 0初始結(jié)構(gòu)及抑制其聚集。現(xiàn)有的AP聚集抑制劑主要分為有機(jī)小分子類、多肽類、蛋白及酶類、抗體類、納米顆粒類和金屬螯合劑類等?，F(xiàn)有的多肽類抑制劑大多是AP的同源片段，因此自身會(huì)發(fā)生聚集。而蛋白、酶、抗體和納米顆粒類由于分子量過大，不容易穿過血腦屏障。金屬螯合劑通過改變病灶區(qū)域金屬離子濃度，在A3聚集過程中抑制A3毒性，但其抑制聚集的機(jī)理不明，不易調(diào)控。而有機(jī)小分子具有分子量小和易于穿過血腦屏障的特性，可以通過結(jié)合或體積排阻作用穩(wěn)SAP的初始構(gòu)象，從而達(dá)到抑制AP聚集并降低其細(xì)胞毒性的目的，是A3聚集抑制劑的首選。
近年來隨著對(duì)AD研究的深入，中藥及其提取物在預(yù)防和治療AD方面的作用時(shí)有報(bào)道。中草藥小分子是天熱產(chǎn)物，毒副作用小、藥源豐富、成本低廉、適用于長期服用。因此從中藥中篩選有效的AP聚集抑制劑，是開發(fā)AD新藥的可行途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種巴西木素在制備抑制P -淀粉樣蛋白聚集的藥物或保健品的用途。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下巴西木素在制備抑制P -淀粉樣蛋白聚集的藥物 或保健品的用途。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)多種實(shí)驗(yàn)手段證明，巴西木素能夠有效抑制A P 42的聚集；并改變了 A P 42聚集體形貌，阻止并減緩了其向纖維狀形貌的轉(zhuǎn)化；減緩AP 42的二級(jí)結(jié)構(gòu)向P -sheet結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化的過程，并降低AP 42在溶液中形成的P -sheet的含量；有效抑制了 AP 42聚集體對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生的毒性。巴西木素作為一種潛在的新藥或保健品分子，可以有效抑制AP42的聚集及其構(gòu)象變化過程，并降低A P 42聚集過程中所產(chǎn)生的細(xì)胞毒性作用，是A P 42聚集的理想抑制劑。


圖1 :實(shí)施例1中不同濃度巴西木素與AP 42共培養(yǎng)不同時(shí)間后培養(yǎng)物的ThT突光圖。圖2 :實(shí)施例2中不同濃度巴西木素與AP 42共培養(yǎng)不同時(shí)間后培養(yǎng)物的透射電鏡圖。圖3 :實(shí)施例3中不同濃度巴西木素與AP 42共培養(yǎng)不同時(shí)間后培養(yǎng)物的圓二色譜圖。圖4 :實(shí)施例4中不同濃度巴西木素與AP 42共培養(yǎng)24h后培養(yǎng)物對(duì)PC12的細(xì)胞
存活率。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。首先根據(jù)文獻(xiàn)中現(xiàn)有的中藥有效成分，構(gòu)建含有610余個(gè)分子的中藥有效成分3D數(shù)據(jù)庫。然后利用分子對(duì)接的方法，結(jié)合打分函數(shù)篩選和類藥性參數(shù)篩選的方式獲得A3聚集潛在抑制劑巴西木素。最后通過多種檢測手段證實(shí)篩選得到的巴西木素可以有效抑制A 3 42聚集，并能降低A P 42聚集過程中所產(chǎn)生的細(xì)胞毒性。巴西木素結(jié)構(gòu)式
權(quán)利要求
1.巴西木素在制備抑制￠-淀粉樣蛋白聚集的藥物或保健品的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了巴西木素在制備抑制β-淀粉樣蛋白聚集的藥物或保健品的用途。多種實(shí)驗(yàn)手段證明，巴西木素能夠有效抑制Aβ42的聚集；并能改變Aβ42聚集體的形貌，阻止并減緩其向纖維狀形貌的轉(zhuǎn)化；減慢Aβ42的二級(jí)結(jié)構(gòu)向β-sheet結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化的過程，并降低Aβ42在溶液中形成β-sheet的含量；有效抑制Aβ42聚集體對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生的毒性。巴西木素作為一種潛在的新藥或保健品分子，可以有效抑制Aβ42的聚集及其構(gòu)象變化過程，并降低Aβ42聚集過程中所產(chǎn)生的細(xì)胞毒性作用，是Aβ42聚集的理想抑制劑。
文檔編號(hào)A61K31/352GK103006635SQ201210525318
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月6日
發(fā)明者董曉燕, 都文婕, 劉夫鋒, 孫彥, 史清洪 申請(qǐng)人:天津大學(xué)