專利名稱：一種新型釕(ii)多吡啶配合物的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法。
背景技術(shù)：
1969年Rosenberg等發(fā)現(xiàn)順鉬(順-二氯 二氨合鉬(II))具有抗腫瘤活性。二十世紀(jì)八十年代至九十年代，又開發(fā)了卡鉬、環(huán)流鉬、奧沙利鉬，但由于鉬類藥物水溶性差，緩解期短，排泄緩慢，并伴有嚴(yán)重毒副作用，長期使用會(huì)產(chǎn)生耐藥性。國際上普遍認(rèn)為釕金屬配合物是最具有抗癌前景的藥物之一。釕金屬藥物與順鉬相比，由于具有相對(duì)低的毒性，在生物體內(nèi)易于吸收，而且易于聚集在腫瘤組織中，且在體內(nèi)停留時(shí)間短，排泄快，能夠與DNA以共價(jià)或者非共價(jià)結(jié)合。 釕系抗腫瘤作用的配合物KP1019，這類配合物的通式為[HL] [trans-Ru(III)L2Cl4]，它們對(duì)結(jié)腸癌有明顯的治療效果，能抑制一些順鉬不起作用的腫瘤的生長；NAMI型配合物，這類配合物對(duì)鼠類的轉(zhuǎn)移瘤有很明顯的抑制作用，現(xiàn)已進(jìn)入II期臨床。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是
一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，包括以下步驟
1)將1，10-鄰菲羅啉-5，6-二酮和1，2，4，5-四氨基鹽酸鹽在K2CO3、溶劑、水存在下進(jìn)行縮合脫水反應(yīng)，得到產(chǎn)物后進(jìn)行純化；
2)將[Ru(Phen)2Cl2]2H20與步驟I)得到的產(chǎn)物混合在溶劑中，無氧條件下回流反應(yīng)8-12小時(shí)，冷卻至室溫，減壓除溶劑，加飽和NaClO4溶液，得到沉淀、過濾，將沉淀洗滌干燥并用乙腈溶解，用中性氧化鋁裝柱，上樣，再用淋洗劑進(jìn)行洗脫，收集紅色組分，除去溶劑得到產(chǎn)物；
3)將上步得到的產(chǎn)物與苊醌混合于溶劑中，在無氧條件下回流反應(yīng)6-10h，冷卻至室溫，減壓除溶劑，加入飽和NaClO4溶液，得沉淀、過濾，將沉淀洗滌干燥并溶于乙腈，用中性氧化鋁裝柱，上樣，再用淋洗劑進(jìn)行洗脫，收集紅色組分，除去溶劑得到產(chǎn)物。步驟I)中，1，10-鄰菲羅啉-5，6-二酮、1，2，4，5-四氨基鹽酸鹽、溶劑、水的用量比為 Immol : Immol : (50—80)ml:5 ml。步驟I)中，K2CO3的質(zhì)量為I, 10-鄰菲羅啉-5，6_ 二酮的135%。步驟I)和步驟2)中，所述的溶劑為乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇中的一種。步驟2)中，[Ru(phen)2C12] 2H20、步驟I)得到的產(chǎn)物、溶劑用量比為Immol:Immol:(60-100)ml。步驟2)中，減壓除溶劑為除去溶劑的60_80vol%。步驟2)和步驟3)中，所述的淋洗劑為乙腈和甲苯體積比為3:1的混合液。步驟3)中，所述的溶劑為DMF、DMAC、NMP中的一種。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明所合成的化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞BEL-7402和SKBR-3生長具有很強(qiáng)的抑制作用。其IC50值分別為3. 9和5. I μ Μ,可作為BEL-7402和SKBR-3腫瘤治療藥物。


圖I為本發(fā)明的配合物對(duì)BEL-7402細(xì)胞和SKBR-3細(xì)胞增殖的抑制作用圖。圖2為空白對(duì)照組熒光染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡圖(空白試驗(yàn)，培養(yǎng)過程中未加入本發(fā)明的配合物)。 圖3為加了配合物熒光染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡圖(培養(yǎng)過程中加入配合物濃度為12. 5 μ mol/L 的 RPMI 1640 培養(yǎng)基)。圖4為加了配合物熒光染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡圖(培養(yǎng)過程中加入配合物濃度為25 μ mol/L 的 RPMI 1640 培養(yǎng)基)。圖5為腫瘤細(xì)胞BEL-7402對(duì)配合物的內(nèi)吞效果圖(培養(yǎng)過程加入了配合物濃度為12. 5 μ mol/L 的 RPMI 1640 培養(yǎng)基)。圖6為腫瘤細(xì)胞BEL-7402對(duì)配合物的內(nèi)吞效果圖(培養(yǎng)過程中加入了配合物濃度為 25 μ mol/L 的 RPMI 1640 培養(yǎng)基)。圖7為配合物對(duì)BEL-7402細(xì)胞周期阻滯。圖8為配合物對(duì)SKBR-3細(xì)胞周期阻滯。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明
實(shí)施例I :
配體dadppz的制法:將計(jì)量摩爾比為I: I的I, 10-鄰菲羅啉-5，6-二酮和I, 2，4，5-四氨基鹽酸鹽在K2CO3和乙醇及水存在下，其中，1，10-鄰菲羅啉-5，6- 二酮、乙醇及水的用量比為Immol: (50-80) ml: 5 ml ;碳酸鉀的用量為1，10-鄰菲羅啉-5，6-二酮質(zhì)量的135%，力口熱回流40分鐘(反應(yīng)溫度為80-100°C )，冷卻至室溫后，過濾，得紅色濾液，減壓除去溶劑乙醇，粗產(chǎn)品用_5°C乙醇洗滌，得到紅色固體物質(zhì)(dadppz)。產(chǎn)率35%。實(shí)施例2
配合物[Ru (phen) 2 (dadppz) ] (ClO4)2 的合成將[Ru (phen) 2C12] 2H20 和配體dadppz按摩爾比為1:1混合，在乙醇存在下([Ru (Phen)2Cl2] 2H20和乙醇的用量比為O. 5mmol: (30-50)ml)，氬氣保護(hù)加熱回流反應(yīng)8小時(shí)(反應(yīng)溫度85-90°C)，冷卻至室溫，減壓除去60-80vol%的乙醇，加飽和NaClO4溶液，得到紅色沉淀(NaClO4溶液的用量以使得沉淀不再生成為止)，過濾，用水和_5°C的乙醇洗滌，得到紅色固體。粗產(chǎn)品用少量乙腈溶解(粗產(chǎn)品和乙腈的質(zhì)量比為lg:3-5ml)，用中性氧化鋁裝柱，上樣，乙腈和甲苯(3:1，v/V)作為淋洗劑對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行洗脫，收集紅色組分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到紅色物質(zhì)，產(chǎn)率72%。ES-MS(CH3CN) : m/z 873.0 ([M-ClOj+), 387.4 ([M_2C104]2+) · 1HNMR (DMS0_d6，ppm) : δ9.45 (d, 2H, J = 7.0 Hz), 8. 77 (dd, 4H, J= 7.0, J= 6. 5 Hz), 8. 39 (s, 4H)，8. 23 (d, 2H, /= 5.5 Hz), 8. 08 (d, 2H, / = 5. 0 Hz)，8. 03 (d, 2H, / = 5. 5 Hz)，7. 75-7. 79 (m, 6H)，7. 20 (s, 2H)，6. 61 (s, 4H).
實(shí)施例3 配合物[Ru (phen) 2 (adadppz) ] (ClO4)2 的合成[Ru (phen) 2 (dadppz) ] (ClO4)2 (O. 5mmol)和危醌(O. 5 mmol)混合,加入20 mLDMF,在気氣保護(hù)下回流6小時(shí)(反應(yīng)溫度為140-160°C)，冷卻至室溫，減壓除去DMF至溶液為5 mL，加入飽和NaClO4溶液(NaClO4溶液的用量以使得沉淀不再生成為止)，得到紅色沉淀，過濾，沉淀用蒸餾水洗滌，干燥。將粗產(chǎn)品溶于少量乙腈(粗產(chǎn)品和乙腈的質(zhì)量比為lg:3-5ml)，用中性氧化鋁裝柱，上樣，乙腈和甲苯(3:1，v/v)作為淋洗劑，收集紅色組分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到紅色物質(zhì)，產(chǎn)率70%。ES-MS(CH3CN, m/z) : 1049.5 [(M-ClO4)J+, 948.8 [ (M-2C104_H) ]+，474.5 [ (M_2C104) ]2+· Anal.Calc for C56H36N10Cl2O8Ru: C, 58. 54; H, 3. 16; N, 12. 19%. Found: C, 58.36; H, 3. 25;N, 12.44%. 1H NMR δΗ (DMS0_d6) : 9. 34 (s, 2H)，8.90 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 8.43(d, 4H, /= 8.5 Hz), 8.45 (s, 4H)，8. 30 (d, 2H, /= 8.5 Hz), 8. 21 (d, 2H, J =5.0 Hz), 8. 13 (d, 2H, / = 5.0 Hz)，7.94-7.87 (m, 6H), 7.83 (t, 4H, /= 5.0 Hz),7. 70 (d, 2H, /=6.0 Hz). 13C NMR δ c (DMS0_d6) : 155.25，154.42，153.22，152.84，150.88，147.33，140.69，140.21，139.29，137.29，137.15，133.26，130.65，130.19，129.73，128.95，128.42，127.77，126.53，126.36，122.31。本發(fā)明的合成過程示意如下
權(quán)利要求
1.一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，其特征在于包括以下步驟 1)將1，10-鄰菲羅啉-5，6-二酮和1，2，4，5-四氨基鹽酸鹽在K2CO3、溶劑、水存在下進(jìn)行縮合脫水反應(yīng)，得到產(chǎn)物后進(jìn)行純化； 2)將[Ru(phen)2Cl2]2H20與步驟I)得到的產(chǎn)物混合在溶劑中,無氧條件下回流反應(yīng)8-12小時(shí)，冷卻至室溫，減壓除溶劑，加飽和NaClO4溶液，得到沉淀、過濾，將沉淀洗滌干燥并用乙腈溶解，用中性氧化鋁裝柱，上樣，再用淋洗劑進(jìn)行洗脫，收集紅色組分，除去溶劑得到產(chǎn)物； 3)將上步得到的產(chǎn)物與苊醌混合于溶劑中，在無氧條件下回流反應(yīng)6-10h，冷卻至室溫，減壓除溶劑，加入飽和NaClO4溶液，得沉淀、過濾，將沉淀洗滌干燥并溶于乙腈，用中性氧化鋁裝柱，上樣，再用淋洗劑進(jìn)行洗脫，收集紅色組分，除去溶劑得到產(chǎn)物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，其特征在于步驟I)中，1，10-鄰菲羅啉-5，6-二酮、1，2，4，5-四氨基鹽酸鹽、溶劑、水的用量比為Immol:Immol: (50-80)ml:5 ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，其特征在于步驟I)中，K2CO3的質(zhì)量為1，10-鄰菲羅啉-5，6- 二酮的135%。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，其特征在于步驟I)和步驟2)中，所述的溶劑為乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，其特征在于步驟2)中，[Ru(Phen)2Cl2] 2H20、步驟I)得到的產(chǎn)物、溶劑用量比為Immol:Immol:(60-100)ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，其特征在于步驟2)中，減壓除溶劑為除去溶劑的60-80vol%。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，其特征在于步驟2)和步驟3)中，所述的淋洗劑為乙腈和甲苯體積比為3:1的混合液。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，其特征在于步驟3)中，所述的溶劑為DMF、DMAC、NMP中的一種。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種新型釕(II)多吡啶配合物的合成方法，包括以下步驟1)將1,10-鄰菲羅啉-5,6-二酮和1,2,4,5-四氨基鹽酸鹽在K2CO3和乙醇存在下進(jìn)行縮合脫水反應(yīng)，得到產(chǎn)物后進(jìn)行純化；2)將[Ru(phen)2Cl2]2H2O、步驟1)得到的產(chǎn)物混在溶劑中，無氧條件下回流反應(yīng)8-12小時(shí)，冷卻至室溫，減壓除溶劑，加飽和NaClO4溶液，得到沉淀、過濾，將沉淀洗滌干燥并用乙腈溶解，過柱洗脫，收集紅色組分，旋蒸除溶劑；3)將上步得到的產(chǎn)物、苊醌混合于溶劑中，無氧條件下回流反應(yīng)6-10h，冷卻至室溫，減壓除溶劑，加入飽和NaClO4溶液，得沉淀、過濾，將沉淀洗滌干燥并用乙腈溶解，過柱洗脫，收集紅色組分，旋蒸除溶劑得到產(chǎn)物。本發(fā)明所合成的化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞BEL-7402和SKBR-3生長具有很強(qiáng)的抑制作用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102924525SQ20121020128
公開日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2012年6月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月18日
發(fā)明者劉云軍, 謝陽銀, 黃宏靚, 林敢建 申請(qǐng)人:廣東藥學(xué)院