專利名稱：寶華玉蘭種子提取物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中草藥提取物，特別是一種寶華玉蘭種子提取物；本發(fā)明還涉及前述寶華玉蘭種子提取物的用途。
背景技術(shù)：
寶華玉蘭(Magnolia zenii)是木蘭科木蘭屬的植物,為中國的特有植物。寶華玉蘭的聚合果圓柱形，長6-14厘米，徑2-3厘米，瞢莢果圓形，有疣點狀凸起。種子寬倒卵圓形，長寬約I厘米，外種皮紅色，內(nèi)種皮黑色?，F(xiàn)有技術(shù)中，寶華玉蘭種子的用途未見相關(guān)報道
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的具有醫(yī)藥用途的寶華玉蘭種子提取物。本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供上述寶華玉蘭種子提取物的用途。本發(fā)有所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種寶華玉蘭種子提取物，其特點是該提取物以寶華玉蘭種子為原料，采用乙醇浸泡的方式提取得到。本發(fā)明所述的寶華玉蘭種子提取物技術(shù)方案中所述的乙醇的濃度優(yōu)選為95%。本發(fā)明所述的寶華玉蘭種子提取物技術(shù)方案中優(yōu)選為浸泡2-3次，為常溫浸泡，浸泡時間為為20-90天，合并浸取液，減壓濃縮成浸膏。本發(fā)明所述的寶華玉蘭種子提取物可以作為有效成份制備抗癌藥物。以下為發(fā)明人所做的寶華玉蘭種子提取物相關(guān)試驗。一、實驗藥物EESMZC制備
取寶華玉蘭種子，用95%乙醇浸泡3次，為常溫浸泡，第一次浸泡90天，第二次浸泡60天，第三次浸泡60天，合并浸取液，減壓濃縮成浸膏，即得寶華玉蘭種子乙醇總浸膏。寶華玉蘭種子乙醇總浸膏(Ethanol Extract from Seeds of Magnolia zenii Cheng)以下簡稱為 EESMZC。二、ICR鼠急性毒性實驗證實EESMZC未呈現(xiàn)毒性
I、試驗?zāi)康母鶕?jù)《化學(xué)藥物急性毒性試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求觀察EESMZC —次給予ICR小鼠后的急性毒性反應(yīng)和死亡情況。2、試驗材料
受試樣品EESMZC，由淮海工學(xué)院提供、生理鹽水溶解、現(xiàn)配現(xiàn)用；
受試動物來源、種系、品系ICR小鼠，購自中國人民解放軍醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心，實驗動物生產(chǎn)許叫證SCXK(軍)2007-004，合格證編號0008473 ;實驗動物使用許可證:SYXK (軍)2007-030。日齡35 — 56天，體重:18—22g，性另Ij :雌雄各半，動物數(shù)每組10只，共180只。3、試驗方法(I)給受試樣品途徑與體積本實驗采用灌胃給藥，給藥體積為0. 4ml/10g。(2)組別與劑量根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果，進(jìn)行如下分組
以劑距 0.8 設(shè)置 8 個劑量，分別為 IOOOOmg / kg、8000mg / kg、6400mg / kg、5120mg / kg、4096 mg / kg、3277 mg / kg、2621 mg / kg、2097 mg / kg。(3)實驗分組與觀察
試驗時，隨機將動物分為10組，每組10只，雌雄各半，給藥前動物禁食12h，按體重灌胃給藥，給藥后即觀察小鼠的皮膚、眼、活動、攝食、飲水、排便，呼吸變化及中毒表現(xiàn)和死亡情況共14 d，死亡動物及時尸檢，存活小鼠14d后處死并尸檢；
4.統(tǒng)計處理應(yīng)用 SPSS (Staffstical Package for the Social Science) 17. 0 通過機率單位加權(quán)回歸法(Bliss法)計算LD50。試驗結(jié)果各組別未出現(xiàn)死亡，受試樣品EESMZC無毒性?！と?、MTT結(jié)果表明，EESMZC對小鼠成纖維細(xì)胞NIH 3T3、人肝癌細(xì)胞H印G2、人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的體外生長均可顯著抑制。(一)EESMZC (種子乙醇總浸膏)抗炎抗腫瘤活性試驗
實驗?zāi)康臏y試受試樣品對小鼠成纖維細(xì)胞NIH 3T3、人肝癌細(xì)胞H印G-2、人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231體外增殖有無抑制作用及作用強度。受試樣品受試樣品地下總膏由淮海工學(xué)院提供，DMSO溶解，配制成400mg/ml的母液，_20°C保存?zhèn)溆茫?br> 對照藥物紫杉醇注射液；廠家太極集團四川太極制藥有限公司；批號20090403。細(xì)胞株見表I :
表I :細(xì)胞株及培養(yǎng)條件
Complete grswth mediumAtmosphipr#
Oil line.............—..........."............—...........-T^mpsratiire ........................- - - —.............
__baif medhyii__Mrmi___air
小JT3 ^ DMEMihiRh glucose) CS 3 ^_ 95 _5e
入Jt.S鐘胸 HcpC.-_ KFM-1￠40_ CS ijX)_ 95%_5%
入MDA-MB-231 _ gMEMChighghcosrt CS 3”:_. 9 %_5
組別與劑量
陰性對照組；溶媒對照組(DMS0 0. 1%);陽性對照組(Taxol 10ug/ml)
受試樣品組400ug/ml ；300ug/ml ；200ug/ml ； 100ug/ml ；75ug/ml ；50ug/ml ；25ug/ml ；12.5ug/ml ；6.25ug/ml
實驗設(shè)備與試劑見表2
表2 :實驗設(shè)備與儀器
權(quán)利要求
1.一種寶華玉蘭種子提取物，其特征在于該提取物以寶華玉蘭種子為原料，采用乙醇浸泡的方式提取得到。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的寶華玉蘭種子提取物，其特征在于所述的乙醇的濃度為95%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的寶華玉蘭種子提取物，其特征在于浸泡2-3次，為常溫浸泡，浸泡時間為為20-90天，合并浸取液，減壓濃縮成浸膏。
4.權(quán)利要求1-3任何一項所述的寶華玉蘭種子提取物為有效成份制備抗癌藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明是一種寶華玉蘭種子提取物，該提取物以寶華玉蘭種子為原料，采用乙醇浸泡的方式提取得到。本發(fā)明寶華玉蘭種子提取物無毒性，經(jīng)MTT結(jié)果表明，EESMZC對小鼠成纖維細(xì)胞NIH3T3、人肝癌細(xì)胞HepG2、人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的體外生長均可顯著抑制。本發(fā)明寶華玉蘭種子提取物可以作為有效成份制備抗癌藥物。
文檔編號A61P35/00GK102793748SQ20121014304
公開日2012年11月28日 申請日期2012年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月10日
發(fā)明者宋曉凱 申請人:淮海工學(xué)院