專利名稱：一種抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的中藥有效部位的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體是ー種抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的中藥-貓須草總多酚制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
貓須草Clerodend ranthus spicatus (Thunbl) Cl Yl Wu (Orthosi phonstamineus Thunbl)為唇形科腎茶屬植物。該屬植物全世界僅有5種,產(chǎn)于東南亞的印度尼西亞、馬來西亞、緬甸、菲律賓等國家，澳大利亞也有分布。我國僅有貓須草ー種，主要分布于廣東、海南、廣西南部、云南南部、臺灣及福建。近年發(fā)現(xiàn)貓須草在我國廣西、云南等地海拔950 1050m的熱帶、亞熱帶地區(qū)有野生分布。從20世紀60年代起，我國云南、廣東、廣西、福建、臺灣、四川米易等地大量引種栽培，猶以云南思茅和西雙版納地區(qū)種植最多。貓須 草全草入藥，味苦、性涼。傣名“雅糯妙”，傣族醫(yī)書“檔哈雅”、“貝葉經(jīng)”中記載貓須草用以治療小便熱、澀、疼痛等泌尿系統(tǒng)疾病，傣醫(yī)沿用至今已有兩千多年歷史，療效確切。民間認為其全草具有利尿、抗菌、消炎、溶石、排石和抗腫瘤作用，對于急慢性腎炎、膀胱炎、尿路結(jié)石、風濕性下肢關(guān)節(jié)炎和咽炎有特殊療效。貓須草是一種珍貴的藥用保健植物，具有廣闊的研究開發(fā)前景。國內(nèi)外學者對貓須草化學成分的研究報道很多，其主要化學成分有黃酮類、酚性化合物、ニ萜類、三萜類、木脂素類、色原烯類、烷基糖苷類、留體皂苷類、蒽醌類、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)及維生素、礦物質(zhì)、有機酸等。現(xiàn)代藥理學研究表明，貓須草的總提取物具有抗炎作用、利尿作用、排尿石作用、對慢性腎功能衰竭的改善作用、免疫調(diào)節(jié)作用、擴張微血管作用；此外還具有健腎、止血、抗過敏、抑制roGF、TNF2a誘導(dǎo)的系膜細胞増殖等作用(許娜，許旭東，楊峻山.貓須草的研究進展，中草藥，2010，41(5):附12-16.)。迄今為止，尚未見有關(guān)貓須草有效部位抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的研究報道和專利。本發(fā)明之目的在于充分利用我國豐富的貓須草藥用植物資源，深入進行研究開發(fā)，尋找具有安全可靠，療效確切，可長期服用的中藥有效部位，以期為臨床提供一種抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的現(xiàn)代中藥制劑。本發(fā)明的有益效果和意義在于貓須草總多酚是用唇形科腎茶屬植物貓須草(Clerodend ranthus)的干燥地上部分或全草提取、分離、精制得到。其中“貓須草”始載于傣族醫(yī)書“檔哈雅”、“貝葉經(jīng)”的記載，主要分布于廣東、海南、廣西南部、云南南部、臺灣及福建等地，民間用全草入藥，具有利尿、抗菌、消炎、溶石、排石和抗腫瘤作用，對于急慢性腎炎、膀胱炎、尿路結(jié)石、風濕性下肢關(guān)節(jié)炎和咽炎有特殊療效。貓須草總多酚是貓須草的主要成分之一，我們研究發(fā)現(xiàn)可用作制備抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的有效藥物，同時對于進ー步綜合利用藥材，帶動山區(qū)經(jīng)濟的發(fā)展具有很重要的現(xiàn)實意義
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種抗臨床泌尿系耐藥菌的中藥及其中藥中貓須草總多酚的制備方法，所述的中藥能從根本上控制疾病，副作用小、不良反應(yīng)發(fā)生率低，且療效確切，可長期服用。
具體實施例方式下面所實施例有助于本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實施例一抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的中藥中的貓須草總多酚的制備方法一種抗臨床泌尿系耐藥菌的中藥的有效成份為或者包括有從貓須草中提取的貓須草總多酚。中藥為膠囊、顆粒劑、片劑、溶液劑、丸劑等劑型，或者為注射劑型。 (I)、提取取貓須草的干燥地上部分或全草，凈選、切段，加入到pH值為6-7. 5的水中浸泡過夜、提取、過濾；過濾后的藥渣再加水提取1-3次，過濾、合并濾液，然后將濾液減壓濃縮至60°C，熱測相對密度為I. 10-1. 30的濃縮液，將濃縮液冷至室溫，加入こ醇攪拌，靜置6-48小吋，過濾，濾液回收こ醇，濾餅與沉淀用こ醇洗滌、過濾，洗滌液回收こ醇，然后將洗滌液與濾液合并，濃縮至60°C熱測時，相對密度為I. 15-1. 20 ；(2)、富集將濃縮后的藥液，按生藥重量水體積比為O. 5-3 I的比例加入中性水，加熱至30-50°C，攪拌使溶解，靜置2-24小時，過濾得濾液；加入等體積的こ酸こ酯萃取3次，棄去こ酸こ酯層，水層減壓濃縮至60°C熱測時，相對密度為I. 15-1. 20 ；上柱液的處理將濃縮后的藥液,按生藥重量水體積比為O. 5-3 I的比例加入中性水，加熱至30-50°C，攪拌使溶解，靜置2-24小吋，過濾得濾液A ；樹脂吸附將濾液A加熱至30-50°C，用DlOl型、AB-8型或D-201型大孔吸附樹脂吸附，然后用水或質(zhì)量濃度為1-15%的こ醇洗脫至洗脫液近無色，棄去洗脫液，然后用質(zhì)量濃度為50-95%的こ醇洗至洗脫液不含總多酚成分；(3)精制在減壓回收后的こ醇濃縮液中加入相當于投料藥材重量的1-5%的40-100目硅膠，攪拌、烘干、取出、研勻，然后加體積比為6-8倍的こ醇提取5-8次，毎次I小時，過濾、合并こ醇提取液，然后經(jīng)減壓回收こ醇，剰余提取液濃縮至干或噴霧干燥，研細，粉碎，過篩，包裝，即得貓須草總多酚?；?qū)⒑喜⒑蟮膜炒继崛∫?，減壓濃縮至60°C熱測時，相對密度為I. 15-1. 20 ;將濃縮后的藥液，按生藥重量水體積比為O. 5-3 I的比例加入中性水，加熱至30-50°C，攪拌使溶解，靜置2-24小時，過濾得濾液；用堿性陰離子樹脂柱(D201-D296)進行分離，先用2-10BV水洗脫，再用2-10BVこ醇洗脫，最后用2_10BV5%冰こ酸(或鹽酸)的こ醇溶液洗脫，收集并合并酸性こ醇洗脫液，減壓回收酸性こ醇，濃縮至近干，減壓或噴霧干燥、研細、粉碎、過篩、包裝，即得貓須草總多酚。實施例ニ 貓須草總多酚體外抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌試驗(I)、實驗藥物貓須草總多酚(CRF)，以迷迭香酸計含量達50. 5% ;
(2)、陽性對照藥物三金片規(guī)格254片薄膜，桂林三金藥業(yè)股份有限公司(3)、培養(yǎng)基:MH瓊脂培養(yǎng)基由中國藥品生物制品檢定所購進，MH肉湯培養(yǎng)基、腦心浸液，沙保羅培養(yǎng)基為美國DIFCO公司產(chǎn)品。(4)、臨床耐藥菌試驗菌株為37株實驗室保存標準菌株和近兩年北京地區(qū)醫(yī)院臨床分離菌(包括耐藥菌)，質(zhì)控菌選用金黃色葡萄球菌ATCC25923、表葡菌ATCC12228、糞腸球菌ATCC29212.大腸埃希菌ATCC25922、ATCC35218、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯桿菌 ATCC700603。(5)、最低抑菌濃度(MIC)測定采用平皿二倍稀釋法。(6)、實驗結(jié)果CRF和三金片對37株菌的MIC測定結(jié)果見表。試驗結(jié)果表明，CRF 對37株標準及臨床分離菌株的抗菌活性強、抗菌譜廣，尤其對各種耐藥細菌，包括耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)、表葡菌(MRSE)、耐5種氨基糖苷類抗生素并且產(chǎn)鈍化酶的糞腸球菌、產(chǎn)不同基因型β -內(nèi)酰胺酶標準菌株、產(chǎn)超廣譜β -內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的大腸埃希菌、肺炎克雷伯桿菌和醋酸鈣不動桿菌，以及耐哌拉西林的銅綠假單胞菌，均有較強抗菌活性。抗菌活性優(yōu)于三金片。
細菌CRF三金片
金葡菌 ATCC259230.252
耐甲氧西林金葡菌(MRSA) 05-30.252
表葡菌 ATCC122280.252
耐甲氧西林表葡菌(MRSE) 04-5232
糞腸球菌ATCC29212464
產(chǎn)鈍化酶糞腸球菌臨床菌株03-4*464
產(chǎn)鈍化酶糞腸球菌標準菌株ΗΗ22*264
大腸埃希菌ATCC25922232
大腸埃希菌ATCC35218216
大腸埃希菌26264
產(chǎn)TEM-I標準菌株264
產(chǎn)ΤΕΜ-2標準菌株264
產(chǎn)ΤΕΜ-3標準菌株O. 54
產(chǎn)0ΧΑ-1標準菌株26權(quán)利要求
1.ー種抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的中藥，其特征在于所述的中藥有效成份為或者包括有從貓須草中提取的貓須草總多酚。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的中藥，其特征在于所述的中藥為膠囊(軟膠囊)、顆粒劑(干混懸劑)、片劑(分散片、泡騰片、咀嚼片、ロ崩片)、溶液劑(糖漿)、丸劑(濃縮丸、滴丸、微丸)，或者為注射劑型。
3.權(quán)利要求I所述的貓須草總多酚在制備臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌感染的治療藥物中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求I所述的貓須草總多酚在制備輔助治療臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌感染的保健品中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的中藥中的貓須草總多酚的制備方法，其特征在于包括以下步驟 (I)、提取 取貓須草的干燥地上部分或全草，凈選、切段，加入到PH值為6-7. 5的水中浸泡過夜、提取、過濾；過濾后的藥渣再加水提取1-3次，過濾，合并濾液，然后將濾液減壓濃縮至60°C，熱測相對密度為I. 10-1. 30的濃縮液，將濃縮液冷至室溫，加入こ醇攪拌，靜置6-48小吋，過濾，濾液回收こ醇，濾餅與沉淀用こ醇洗滌、過濾，洗滌液回收こ醇，然后將洗滌液與濾液合并，濃縮至60°C熱測時，相對密度為I. 15-1. 20 ； ⑵、富集 將濃縮后的藥液，按生藥重量水體積比為O. 5-3 I的比例加入中性水，加熱至30-50°C，攪拌使溶解，靜置2-24小時，過濾得濾液；加入等體積的こ酸こ酯萃取3次，棄去こ酸こ酯層，水層減壓濃縮至60°C熱測時，相對密度為I. 15-1. 20 ； 上柱液的處理將濃縮后的藥液，按生藥重量水體積比為O. 5-3 I的比例加入中性水，加熱至30°C -50°C，攪拌使溶解，靜置2-24小吋，過濾得濾液A ； 樹脂吸附將濾液A加熱至30°C -50°C，用DlOl型、AB-8型或D-201型大孔吸附樹脂吸附，然后用水或質(zhì)量濃度為1-15%的こ醇洗脫至洗脫液近無色，棄去洗脫液，然后用質(zhì)量濃度為50-95%的こ醇洗至洗脫液不含總多酚成分； (3)精制 在減壓回收后的こ醇濃縮液中加入相當于投料藥材重量的1-5%的40-100目硅膠，攪拌、烘干、取出、研勻，然后加體積比為6-8倍的こ醇提取5-8次，毎次I小時，過濾、合并こ醇提取液，然后經(jīng)減壓回收こ醇，剰余提取液濃縮至干或噴霧干燥、研細、粉碎、過篩、包裝，即得貓須草總多酚。
或?qū)⒑喜⒑蟮膜炒继崛∫海瑴p壓濃縮60°C熱測時，相對密度為I. 15-1. 20 ;將濃縮后的藥液，按生藥重量水體積比為O. 5-3 I的比例加入中性水，加熱至30-50°C，攪拌使溶解，靜置2-24小時，過濾得濾液；用堿性陰離子樹脂柱(D201-D296)進行分離，先用2-10BV水洗脫，再用2-10BVこ醇洗脫，最后用2-10BV 5%冰こ酸(或鹽酸)的こ醇溶液洗脫，收集并合并酸性こ醇洗脫液，減壓回收酸性こ醇，濃縮至近干，減壓或噴霧干燥，研細，粉碎，過篩，包裝，即得貓須草總多酚。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抗臨床泌尿系統(tǒng)耐藥菌的中藥及其中藥中貓須草總多酚的制備方法，中藥有效成份為從貓須草中提取的貓須草總多酚，貓須草總多酚的制備方法主要包括提取、富集和精制。本發(fā)明所述的中藥能從根本上控制疾病，副作用小、不良反應(yīng)發(fā)生率低，且療效確切，可長期服用。
文檔編號A61P31/04GK102688285SQ201110073618
公開日2012年9月26日 申請日期2011年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月25日
發(fā)明者許娜, 許旭東, 邵旭, 鄭慶霞 申請人:中國醫(yī)學科學院藥用植物研究所