專(zhuān)利名稱：益生菌在調(diào)節(jié)體重中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)飽食標(biāo)志物(satiety marker)(例如由GCG基因編碼的因子)在腸中的表達(dá)同時(shí)增加肌肉組織中的脂肪氧化和減少肌肉組織中的脂肪沉積的益生菌的用途。因此益生菌株的消耗可以有助于促進(jìn)哺乳動(dòng)物達(dá)到最適體重。本發(fā)明進(jìn)一步涉及包含這樣的細(xì)菌益生菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物的組合物，所述組合物用于制備施用于哺乳動(dòng)物以調(diào)節(jié)飽食標(biāo)志物在腸中的表達(dá)同時(shí)增加肌肉組織中的脂肪代謝的組合物。
背景技術(shù)：
體重管理哺乳動(dòng)物(包括人類(lèi))的健康、功能良好的機(jī)體的特征是最適體重。具體的最適體重依照哺乳動(dòng)物個(gè)體的種類(lèi)、性別、年齡、身材的類(lèi)型、體力活動(dòng)水平等變化很大。然而很明顯可以為任一哺乳動(dòng)物個(gè)體建立最適體重范圍，并且過(guò)分超重以及體重過(guò)輕對(duì)個(gè)體的健康和康樂(lè)具有極大的負(fù)面影響。通常，在進(jìn)化過(guò)程中，哺乳動(dòng)物已經(jīng)適應(yīng)了食物資源缺乏和饑荒的處境，并且已經(jīng)進(jìn)化了復(fù)雜的機(jī)制來(lái)應(yīng)對(duì)此種處境，一種是饑餓信號(hào)傳導(dǎo)，其完全改變大多數(shù)哺乳動(dòng)物的行為模式，并且還改變哺乳動(dòng)物以體脂的形式儲(chǔ)存大量能量資源的能力。最適體重的維持是復(fù)雜的并且是多因素的(NIH 1998)。其涉及多個(gè)信號(hào)傳導(dǎo)途徑和代謝過(guò)程以及一系列遺傳和環(huán)境因素。目前的臨床證據(jù)表明需要涉及幾種信號(hào)傳導(dǎo)途徑和代謝過(guò)程的多面性干預(yù)來(lái)獲得對(duì)肥胖癥的有效充分治療。在最近十年中，已經(jīng)越來(lái)越明顯的是健康的哺乳動(dòng)物機(jī)體也已經(jīng)形成了許多復(fù)雜的機(jī)制，這些機(jī)制通過(guò)調(diào)節(jié)我們的飽食感來(lái)調(diào)節(jié)過(guò)剩時(shí)的食物攝入。這些機(jī)制中的許多似乎涉及對(duì)食物中某些成分的特異性反應(yīng)，并且已經(jīng)揭示了更多飽食信號(hào)傳導(dǎo)途徑的分子細(xì)節(jié)，這些分子細(xì)節(jié)顯示涉及特異性的信號(hào)分子/激素。取決于它們的特定水平(存在或缺少)，此類(lèi)特異性飽食調(diào)節(jié)信號(hào)分子/激素可發(fā)送飽食或饑餓的信號(hào)。在此將它們總稱為 “飽食標(biāo)志物(satiety marker)，，。飽食標(biāo)志物高血糖素原(高血糖素原)和衍生的肽激素編碼胰高血糖素前體即高血糖素原的基在腦、胰腺以及小腸和大腸中表達(dá)。該基因也稱為 “GCG 基因”或簡(jiǎn)稱為 “GCG” (Ensembl :ENSG00000115263)。在主要位于遠(yuǎn)段小腸上皮和結(jié)腸中的L-細(xì)胞中，多肽高血糖素原被切割成GLP-I (胰高血糖素樣肽l)、GLP-2(胰高血糖素樣肽幻、泌酸調(diào)節(jié)肽、腸高血糖素 (glicentin)和IP_2 (插入肽2)(參見(jiàn)

圖1)。盡管GLP-I和GLP-2通過(guò)已知的受體發(fā)揮明確的作用，但腸高血糖素和IP-2的生物學(xué)功能還沒(méi)有得到充分的表征，并且還沒(méi)有鑒定到受體。已經(jīng)從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人類(lèi)臨床實(shí)驗(yàn)中推測(cè)到了泌酸調(diào)節(jié)肽的功能，但目前也沒(méi)有鑒定到受體。胰高血糖素樣肽-1 (GLP-I)的生理學(xué)
在腸的L細(xì)胞中，GLP-I (以前稱為胰島素調(diào)理素)作為39個(gè)氨基酸的肽產(chǎn)生，其儲(chǔ)存在細(xì)胞內(nèi)。GLP-I響應(yīng)于營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入而釋放至循環(huán)中，并且其具有許多生理效應(yīng)(1)。數(shù)個(gè)研究已經(jīng)證明在動(dòng)物模型和患有2型糖尿病(T2DM)的患者中長(zhǎng)期外周施用 GLP-I或藥理學(xué)GLP-I類(lèi)似物后觀察到的血糖控制改善與體重的顯著減少相關(guān)O)，表明 GLP-I可在調(diào)節(jié)能量平衡中具有一定作用。在最近的元分析(meta-analysis)中已經(jīng)得出結(jié)論GLP-I減少食欲和熱量攝取，后者急劇地減少達(dá)平均11. %。在瘦和肥胖的受試者中減少程度是類(lèi)似的，并且達(dá)到這種減少而沒(méi)有不良反應(yīng)(3)。眾所周知GLP-I抑制胃排空。 減少的胃排空使食物攝入后胃的牽張延長(zhǎng)。位于胃中的機(jī)械感受器對(duì)胃的牽張進(jìn)行定量并向大腦發(fā)送飽食的信號(hào)。GLP-I的飽食效應(yīng)也可以通過(guò)GLP-I直接作用于大腦而引起， 因?yàn)樵趨⑴c食欲調(diào)節(jié)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)區(qū)域中發(fā)現(xiàn)了大量的GLP-I免疫反應(yīng)性神經(jīng)元G-6)。數(shù)個(gè)研究已經(jīng)證實(shí)了 GLP-I受體在對(duì)食欲調(diào)節(jié)很重要的腦區(qū)中的存在，支持了 GLP-I參與中樞食欲控制的觀點(diǎn)(7 ；8)。胰高血糖素樣肽-2(GLP_2)的生理學(xué)與GLP-I —樣，GLP-2在腸的L細(xì)胞中通過(guò)多肽高血糖素原的翻譯后加工產(chǎn)生。 GLP-2是一個(gè)33個(gè)氨基酸的肽，其與GLP-I響應(yīng)于營(yíng)養(yǎng)素尤其是脂質(zhì)和碳水化合物的攝入而共分泌(9)。GLP-2已經(jīng)被提議充當(dāng)食物攝入的調(diào)節(jié)劑。當(dāng)大鼠接受GLP-2腦室內(nèi)給藥時(shí)，食物攝入被抑制(10)。與GLP-I相反，GLP-2的中樞給藥不抑制水?dāng)z入并且也不引起條件性味
覺(jué)厭惡ο在小鼠中，皮下GLP-2注射增強(qiáng)影響細(xì)胞旁和跨細(xì)胞途徑兩者的腸上皮屏障功能 (11)。改善的胃腸屏障功能與脂多糖(LPS)從腸腔至循環(huán)系統(tǒng)的流動(dòng)減少有關(guān)。最近已經(jīng)顯示甚至輕度增加的LPS水平都能夠誘導(dǎo)脂肪重量增加，類(lèi)似于在嚙齒類(lèi)動(dòng)物中由高脂肪飲食所獲得的脂肪重量增加(12)。泌酸調(diào)節(jié)肽的生理學(xué)泌酸調(diào)節(jié)肽(也稱為胰高血糖素-37，腸高血糖素-(33-69)，并且在較早的文獻(xiàn)中稱為生物活性腸高血糖素)在腸的L細(xì)胞中通過(guò)多肽高血糖素原的翻譯后加工產(chǎn)生。泌酸調(diào)節(jié)肽與GLP-I具有許多共同的特性。因此，外源性施用泌酸調(diào)節(jié)肽可以大幅度改善飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠中的葡萄糖耐受不良，并且這可能是由于葡萄糖誘導(dǎo)的胰島素分泌引起的(13)。此外，泌酸調(diào)節(jié)肽可以延緩胃排空并且減少胃酸分泌(14)。重要的是，外源性泌酸調(diào)節(jié)肽的施用在嚙齒類(lèi)動(dòng)物和人受試者中均導(dǎo)致對(duì)進(jìn)食的短期效應(yīng)以及對(duì)體重增加的較長(zhǎng)期效應(yīng)。泌酸調(diào)節(jié)肽已經(jīng)顯示在正常健康受試者中大幅度地減少饑餓感并且抑制熱量攝取。在同一研究中，施用的泌酸調(diào)節(jié)肽將(^hrelin (人生長(zhǎng)激素釋放肽)循環(huán)水平減少達(dá)大約44% (15)。有可能對(duì)進(jìn)食的抑制效應(yīng)是經(jīng)由(ihrelin的減少來(lái)介導(dǎo)的， Ghrelin是由胃壁的內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生的饑餓激素。還已經(jīng)提議泌酸調(diào)節(jié)肽可能增加能量消耗(16)，增加的能量消耗與減少的能量攝取一起可以導(dǎo)致負(fù)的能量平衡，導(dǎo)致體重減輕。事實(shí)上，泌酸調(diào)節(jié)肽的7天給藥(i. p.)減少了大鼠的體重增加和肥胖的速率(17)。同樣，4 周泌酸調(diào)節(jié)肽治療(通過(guò)皮下注射)導(dǎo)致超重和肥胖人類(lèi)受試者的2. 3kg體重減輕(與對(duì)照組的0. 5kg相比)(18)。這些研究清楚地表明泌酸調(diào)節(jié)肽可能參與了食物攝入和體重增加的調(diào)節(jié)。
腸高血糖素的生理學(xué)腸高血糖素(glicentin)(也稱為腸高血糖素(enteroglucagon)、胰高血糖素-69、或腸型胰高血糖素)對(duì)應(yīng)于前高血糖素原(pr印roglucagon)的氨基酸1-69。該序列還包括泌酸調(diào)節(jié)肽(腸高血糖素-(33-69))的序列。腸高血糖素1-30對(duì)應(yīng)于GRPP(腸高血糖素相關(guān)胰肽)(19)。腸高血糖素在腸L細(xì)胞中產(chǎn)生，并且在消化期間被分泌。腸高血糖素延緩胃排空并且可以切斷十二指腸空腸的進(jìn)食運(yùn)動(dòng)模式。Tomita等Q005M20)已經(jīng)報(bào)道腸高血糖素在經(jīng)由非腎上腺能、非膽堿能神經(jīng)調(diào)節(jié)對(duì)正常人空腸中的收縮反應(yīng)的抑制中具有重要作用，并且對(duì)空腸肌肉受體具有直接的作用。相反，Ayachi等Q005M21)已經(jīng)顯示腸高血糖素促進(jìn)從人結(jié)腸分離的平滑肌細(xì)胞的收縮。艾塞那肽(Exendin)-(3-39)，被描述為GLP-I 受體拮抗劑，其抑制由于腸高血糖素引起的收縮，表明腸高血糖素可以通過(guò)GLP-I受體發(fā)揮作用，Ayachi 等 Q005) 01)。肽YY的生物學(xué)和生理學(xué)肽YY (也稱為 PYY、肽酪氨酸酪氨酸，或胰肽 YY3_36)，Ensembl :ENSG00000131096, 由人染色體17帶q21. 1編碼。肽YY存在兩種主要形式=PYY1^36和PYY3-36。肽YY3^6(PYY) 是由34個(gè)氨基酸組成的線性多肽，其與NPY具有結(jié)構(gòu)同源性，并且胰多肽YY的34個(gè)氨基酸中的18個(gè)與胰肽具有相同的位置，因而與胰肽家族相關(guān)0 。循環(huán)PYY的最常見(jiàn)形式是 PYY3_36，其結(jié)合 Υ2 受體(Y2R) (23)。PYY見(jiàn)于胃腸道(尤其是回腸和結(jié)腸)粘膜中的L細(xì)胞中。小量的PYY——約 1-10%——在食管、胃、十二指腸和空腸中產(chǎn)生04)。血漿PYY濃度餐后(攝入食物后)增加且通過(guò)禁食而減小03)。PYY通過(guò)NPY受體發(fā)揮其作用，抑制胃動(dòng)力并增加結(jié)腸中的水和電解質(zhì)吸收05)。 PYY還可以抑制胰腺分泌。其由回腸和結(jié)腸中的腸內(nèi)分泌細(xì)胞響應(yīng)于進(jìn)食而分泌，并且已經(jīng)顯示其降低食欲。PYY通過(guò)延緩胃排空來(lái)發(fā)揮作用；因此，其增加進(jìn)食后的消化和營(yíng)養(yǎng)素吸收的效率。幾個(gè)研究已經(jīng)顯示ΡΥΥ3_36的短期外周給藥抑制嚙齒類(lèi)動(dòng)物和靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的進(jìn)食。 對(duì)Y2R-敲除小鼠的研究已經(jīng)表明對(duì)Y2R-敲除小鼠沒(méi)有厭食(喪失食欲)效應(yīng)。這些發(fā)現(xiàn)提示PYYm6具有厭食效應(yīng)，所述厭食效應(yīng)由Y2R介導(dǎo)。PYY-缺陷雌性小鼠的體重和脂肪量增加。另一方面，PYY-缺陷小鼠對(duì)肥胖有耐受性但當(dāng)飼以高脂肪飲食時(shí)與對(duì)照小鼠相比具有較高的脂肪量和較低的葡萄糖耐量。因此PYY通過(guò)平衡食物攝入也在能量?jī)?nèi)穩(wěn)態(tài)中具有非常重要的作用03)。在接受人為輸注正常進(jìn)食后濃度的PYY的人類(lèi)志愿者中，食物攝入量一天減少了三分之一。此研究的研究者還研究了測(cè)試組在輸注激素期間和之后的饑餓水平。據(jù)報(bào)道接受PYY的組在輸注后12小時(shí)的時(shí)間內(nèi)可觀察到的饑餓水平下降達(dá)40% (26)。這些數(shù)據(jù)提示PYY可能可用于肥胖癥的潛在治療或至少可用于減少采取減肥飲食的個(gè)體的食欲。載脂蛋白A-IV的生物學(xué)和生理學(xué)載脂蛋白A-IV 由 ΑΡ0Α4 (別名 Apo-AIV 或 ΑροΑ-ΙV)編碼，ΑΡ0Α4 的基因 ID ， Ensembl :ENSG00000110M4，其由人染色體11帶q23編碼。AP0A4包含由兩個(gè)內(nèi)含子分隔的3個(gè)外顯子。初級(jí)翻譯產(chǎn)物是396個(gè)殘基的前蛋白，該前蛋白在蛋白酶解加工后與乳糜顆粒結(jié)合在一起被分泌。載脂蛋白A-IV(apoA-IV)充當(dāng)飽食因子。ΑροΑ-IV是由人腸合成的46，000-Da糖蛋白。在嚙齒類(lèi)動(dòng)物中，小腸和肝都分泌apoA-IV，但小腸是負(fù)責(zé)循環(huán)apoA-IV的主要器官 07)?，F(xiàn)在存在有力的證據(jù)，即，下丘腦，尤其是弓狀核，是apoA-IV表達(dá)的另一活性部位 (28)。腸apoA-IV合成顯著地被脂肪吸收所刺激，并且似乎不被脂肪酸的攝取或再酯化形成甘油三酯介導(dǎo)。而是，乳糜顆粒的局部形成充當(dāng)誘導(dǎo)腸apoA-IV合成的信號(hào)。腸apoA-IV 合成也被來(lái)自回腸的因子增強(qiáng)，可能是肽酪氨酸-酪氨酸(PYY)(四)。apoA-IV對(duì)食物攝入的抑制是由中樞介導(dǎo)的(30)。脂質(zhì)吸收對(duì)腸合成和分泌apoA-IV的刺激是快速的；因此 apoA-IV可能在食物攝入的短期調(diào)節(jié)中具有一定作用。其他證據(jù)表明apoA-IV還可能參與食物攝入和體重的長(zhǎng)期調(diào)節(jié)，因?yàn)槠涫苁菟睾鸵葝u素兩者調(diào)控08)。長(zhǎng)期攝入高脂肪飲食使得腸以及下丘腦apoA-IV對(duì)攝取脂質(zhì)的反應(yīng)遲鈍09)。因此，肽信號(hào)分子(激素)諸如GLP-1、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽、腸高血糖素和PYY以及諸如載脂蛋白A-IV的蛋白質(zhì)參與了飽食或饑餓的信號(hào)傳導(dǎo)和對(duì)飽食或饑餓的反應(yīng)，并且因此可以稱為“飽食標(biāo)志物”。脂肪酸代謝硬脂酰-CoA脫氫酶-1 (S⑶1)的生物學(xué)和生理學(xué)硬脂酰-CoA脫氫酶(S⑶；EC 1. 14. 99. 5)是含鐵的酶，其催化不飽和脂肪酸合成中的限速步驟。S⑶-1由人染色體10q24. 31上的基因編碼，該基因的Entrez基因ID為 6319。硬脂酰-CoA脫氫酶-1 (S⑶1)決定將肌肉組織中的脂肪酸分配入脂肪生成或進(jìn)行脂肪酸β-氧化。在肥胖個(gè)體中見(jiàn)到SCDl的上調(diào)，并且其上調(diào)導(dǎo)致肌內(nèi)三?；视?IMTG) 的積聚。人肥胖癥與骨骼肌纖維內(nèi)中性脂質(zhì)的異常積聚有關(guān)。這種現(xiàn)象與減少的胰島素刺激的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和受損的胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)共同出現(xiàn)。去除IMTG的藥理學(xué)和遺傳操作恢復(fù)胰島素敏感性。Hulver等Q005) (31)已經(jīng)鑒定了人類(lèi)中身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)和肌肉中 S⑶1表達(dá)之間的線性關(guān)系。體外研究已經(jīng)顯示來(lái)自瘦受試者的肌管中S⑶1的過(guò)度表達(dá)以下列的方式改變脂肪酸分配，該方式類(lèi)似于肥胖癥中觀察到的高速肌肉三酰基甘油合成和低速脂肪酸氧化。作者提出“骨骼肌中SCDl的表達(dá)增加可能代表了促進(jìn)脂肪酸氧化減少、 IMTG合成增加和使代謝綜合征進(jìn)展的機(jī)制”，并且此外，“藥理學(xué)靶向肌肉S⑶1和/或其上游調(diào)節(jié)物可能提供預(yù)防和/或治療肥胖癥和其相關(guān)并存病(co-morbidities)的新機(jī)會(huì) (31)。益生菌益生微生物已經(jīng)被定義為“當(dāng)以適當(dāng)量施用時(shí)對(duì)宿主賦予健康益處的活微生物，，(FA0/WH0 2001)。已有記載某些益生細(xì)菌菌株可能具有調(diào)節(jié)特異性飽食標(biāo)志物水平的能力。WO 2007/085970A2 (DANISC0 A/S)描述了嗜酸乳桿菌、彎曲乳桿菌、唾液乳桿菌和乳雙歧桿菌(Bifidobacterium lactis)的特殊菌株，它們能夠調(diào)控飽食信號(hào)傳導(dǎo)，特別提及的是調(diào)控由下列各項(xiàng)組成的飽食標(biāo)志物組PYY、CCK、(ihrelin、瘦素、GLP-1、食欲素 (orexins)、促進(jìn)食欲的下丘腦神經(jīng)肽Y、乙酸、糊精和泌酸調(diào)節(jié)肽。
WO 00238165A1 (PROBI)描述了特殊的植物乳桿菌菌株，其調(diào)控胰島素和瘦素的水平。US 2004/0048356A1 (Johansson)描述了植物乳桿菌的兩個(gè)特殊菌株，它們?cè)诮Y(jié)腸中產(chǎn)生了增加量的丙酸或乙酸，其最終改變了瘦素水平和PPAR基因表達(dá)。然而，就我們所知，沒(méi)有這樣一類(lèi)細(xì)菌的報(bào)道，它們能夠1.通過(guò)激活動(dòng)物腸中的 GCG基因調(diào)控GLP-1、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽和腸高血糖素的全部，2.上調(diào)腸和細(xì)胞培養(yǎng)中PYY 的表達(dá)，3.上調(diào)腸中AP0A4的表達(dá)和4.通過(guò)S⑶-1的下調(diào)增加對(duì)肌肉組織的脂肪氧化。發(fā)明概述本發(fā)明涉及一種用于減少與超重和/或肥胖癥有關(guān)的危險(xiǎn)因子的組合物，所述組合物包含類(lèi)干酪乳桿菌(LactcAacillus paracasei)的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物，所述組合物的特征在于上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由GCG基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。在一個(gè)實(shí)施方案中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物也上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由AP0A4基因編碼的飽食標(biāo)志物和/或由肽YY編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物另外下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。由GCG基因編碼的高血糖素原分子產(chǎn)生許多已知的或假定的飽食信號(hào)分子。 因此，本發(fā)明的一個(gè)重要方面是類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種(LactcAacillus paracasei subsp. paracasei)菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物，其除了在mRNA水平上調(diào)節(jié) GCG基因以外，還在蛋白水平上調(diào)節(jié)選自由下列各項(xiàng)組成的組的一種或多種信號(hào)分子的水平GLP-l、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽、IP-2、GRPP和腸高血糖素。此外，本發(fā)明的重要方面是類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物，其除選自GLP-l、GLP-2、 泌酸調(diào)節(jié)肽、IP-2、GRPP和腸高血糖素的一種或多種信號(hào)分子以外，還調(diào)節(jié)PYY和/或載脂蛋白A-IV的水平。本發(fā)明的進(jìn)一步重要的實(shí)施方案是類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種和/或所述菌株的一部分和/或代謝物，其除選自GLP-1、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽、IP-2、GRPP、腸高血糖素、和/或PYY和/或載脂蛋白A-IV的一種或多種信號(hào)分子以外，還下調(diào)哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)，因?yàn)镾CDl的下調(diào)預(yù)期會(huì)增加脂肪代謝并且因此增加類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株(諸如CRL431)減少超重和/或治療肥胖癥的功效。本發(fā)明進(jìn)一步的方面是根據(jù)本發(fā)明的包含所述菌株和/或所述菌株的一部分和/ 或代謝物的組合物在制備用于哺乳動(dòng)物的體重管理的組合物中的用途。一個(gè)特別令人感興趣的方面是根據(jù)本發(fā)明的包含所述菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物的組合物在制備用于治療超重或肥胖癥的藥物中的用途。眾所周知肥胖 (BMI彡30)以及超重(即BMI 25-30)可能具有重要的醫(yī)學(xué)意義(medical implication), 并且肥胖和超重個(gè)體均可受益于體重減輕。然而，甚至正常體重或接近正常體重個(gè)體(即， BMI 18.5-24.9)可能有興趣為美容的原因保持或努力爭(zhēng)取最適體重，而他們并不存在由于超重引起的醫(yī)學(xué)意義。因此，本發(fā)明的一個(gè)額外的方面是根據(jù)本發(fā)明的包含所述菌株和/ 或所述菌株的一部分和/或代謝物的組合物在美容方法中的用途，所述美容方法用于在身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)小于25的非肥胖、非超重受試者中減少體重，所述方法包括提供包含類(lèi)干酪乳桿菌的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物的組合物， 其中所述組合物的特征在于上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由GCG基因和/或AP0A4基因和/或肽YY基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。此方面的進(jìn)一步實(shí)施方案是包含類(lèi)干酪乳桿菌的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物的組合物，其中所述組合物另外下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。根據(jù)本發(fā)明的包含所述菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物的組合物可以以液體和固體劑型兩種形式配制。在后一種情況下，產(chǎn)品可以制成粉末并形成片劑、顆粒劑或膠囊或簡(jiǎn)單地與其他食物成分混合形成功能食品。因此在一個(gè)方面，根據(jù)本發(fā)明的包含所述菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物的組合物用于制備旨在控制或穩(wěn)定哺乳動(dòng)物的體重增加的功能食品或飼料。定義在討論本發(fā)明的詳細(xì)實(shí)施方案之前，提供與本發(fā)明的各個(gè)主要方面相關(guān)的具體術(shù)語(yǔ)的定義。當(dāng)在本文中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“BMI”表示身體質(zhì)量指數(shù)。BMI是依照身高按比例變化的人的體重的量度。其定義為個(gè)體的體重除以其身高的平方(體重以千克測(cè)量，身高以米測(cè)量)。在醫(yī)學(xué)中通用的該公式產(chǎn)生kg/m2的測(cè)量單位。依照美國(guó)衛(wèi)生部(US Department of Health & Human Services)，BMI低于18. 5表示體重過(guò)輕，18. 5-24. 9表示正常體重， 25-29. 9為超重，且BMI為30以上表示肥胖。應(yīng)該注意不僅肥胖而且超重(BMI 25-29. 9) 增加成人死亡的風(fēng)險(xiǎn)(Neovius等Q009)BMJ 338，b496)。因此，超重不僅由于美容指征而且因?yàn)槠溽t(yī)學(xué)意義而具有相關(guān)性。短語(yǔ)“與超重和/或肥胖癥有關(guān)的危險(xiǎn)因子”是指在超重和/或肥胖癥的發(fā)展中起負(fù)面作用的許多生化因子中的一種或多種因子。一組特別感興趣的此類(lèi)危險(xiǎn)因子是所謂的“飽食標(biāo)志物”。術(shù)語(yǔ)“飽食標(biāo)志物”是指參與飽食的信號(hào)傳導(dǎo)和對(duì)飽食的反應(yīng)中的肽或激素(包括編碼所述肽/激素的基因)，在所述因子的水平增加后對(duì)動(dòng)物提供飽食感并且因此導(dǎo)致食物攝入減少。GLP-I、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽和腸高血糖素以及PYY是此類(lèi)肽信號(hào)分子的實(shí)例。稱為“GCG基因”或簡(jiǎn)稱為“GCG”的基因是編碼胰高血糖素前體——高血糖素原——的基因，GCG基因也稱為“高血糖素原基因”。短語(yǔ)“益生菌劑(probiotics)或益生菌(probioticum) ”是指包含益生微生物的組合物。益生細(xì)菌被定義為對(duì)宿主的健康和康樂(lè)具有有益作用的微生物細(xì)胞。益生微生物已經(jīng)被定義為“當(dāng)以適當(dāng)量施用時(shí)對(duì)宿主賦予健康益處的活微生物”(FA0/WH0 2001)。短語(yǔ)“益生物質(zhì)(prebiotic) ”是指增加腸中益生細(xì)菌數(shù)目的組合物或組合物的組分。因此，益生物質(zhì)是指在結(jié)腸中被固有細(xì)菌特異性發(fā)酵的任何無(wú)生命的食物成分，所述固有細(xì)菌被認(rèn)為具有有益的價(jià)值，例如，雙歧桿菌、乳桿菌。益生菌株與一種或多種益生化合物的聯(lián)合施用可以增強(qiáng)施用的益生菌在體內(nèi)的生長(zhǎng)，導(dǎo)致更突出的健康益處，并且被命名為協(xié)同益生(synbiotic)。本發(fā)明的實(shí)施方案在下面僅作為實(shí)施例進(jìn)行描述。發(fā)明的詳細(xì)公開(kāi)本發(fā)明涉及益生細(xì)菌促使哺乳動(dòng)物達(dá)到最適體重的用途。令發(fā)明人驚奇的是，包含某些活益生細(xì)菌，特別是類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株CRL431細(xì)菌的組合物能夠特異性地誘導(dǎo)1.哺乳動(dòng)物的腸的遠(yuǎn)段回腸部中GCG基因的表達(dá)(實(shí)施例1)，2.AP0A4基因的表達(dá)(實(shí)施例4)，3.哺乳動(dòng)物的腸的遠(yuǎn)段回腸部中GLP1、GLP-2和PYY的分泌(實(shí)施例2)， 4. PYY從人腸內(nèi)分泌細(xì)胞系的分泌(實(shí)施例3)，和5.骨骼肌組織中S⑶-1的表達(dá)減少(實(shí)施例幻。不希望受理論約束，可觀察到不僅活的類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種細(xì)胞而且所述細(xì)菌的一部分或甚至所述菌株的代謝物均可以用于制備施用于哺乳動(dòng)物以調(diào)節(jié)腸中GCG和 AP0A4基因表達(dá)、增加腸中PYY分泌和增加骨骼肌組織中的脂肪氧化的組合物。盡管本發(fā)明不應(yīng)當(dāng)解釋為受任何特殊理論的限制，但認(rèn)為由于保持最適體重涉及許多單獨(dú)的信號(hào)途徑和代謝過(guò)程這一事實(shí)，由此得出結(jié)論上調(diào)許多飽食因子的干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株將證明具有提高的功效。因此在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物用來(lái)誘導(dǎo)腸中GCG基因以及AP0A4和/或肽YY基因的表達(dá)增加。在本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物用來(lái)誘導(dǎo)哺乳動(dòng)物的骨骼肌中 S⑶1基因的表達(dá)減少。如實(shí)施例1中所示，益生菌類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株CRL431 (ATCC 55544)特別有效地激活GCG基因的表達(dá)。如實(shí)施例2-5中進(jìn)一步所示，益生菌類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株CRL431 (ATCC 55544)還上調(diào)腸中AP0A4基因和PYY基因的表達(dá)，并且還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中 SCDl基因的表達(dá)。因此，此類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株似乎是獨(dú)特的，因?yàn)槠渖险{(diào)許多飽食因子并且另外增加肌肉中的脂肪酸氧化?？紤]直接來(lái)源于此益生菌株的菌株有可能保留其益生特征，包括增加編碼各種飽食因子的基因的表達(dá)和/或增加脂質(zhì)代謝的特征。因此，本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案是類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物用于減少與超重和/或肥胖有關(guān)的危險(xiǎn)因子的用途， 其中所述菌株選自由類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種(CHCC3136，CRL431，ATCC 55544)和其突變株組成的菌株組，其中所述突變株通過(guò)使用ATCC 55544作為起始材料獲得，并且其中所述突變株已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了上調(diào)腸中GCG基因和/或AP0A4基因和/或PYY基因的表達(dá)的能力，和/或已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)的能力。菌株類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431依照國(guó)際承認(rèn)用于專(zhuān)利程序的微生物保存布達(dá)佩斯條約于 1994 年 1 月 M 日保藏在 American Tissue type Collection Center, 10801 University Blvd, Manassas, VA 20110，USA，登記號(hào)為 ATCC 55544。CRL431 菌株可商購(gòu)自 Chr. Hansen A/S，10-12 Boege Alle，DK-2970 Hoersholm，Denmark，產(chǎn)品名稱 Probio-Tec F-DVS L. casei-431 ,物品編號(hào) 501749，和產(chǎn)品名稱 Probio-Tec C-Powder-30，物品編號(hào) 687018。在腸中，高血糖素原mRNA還導(dǎo)致產(chǎn)生許多肽[實(shí)施例2，生物活性蛋白GLP-1、 GLP-2和PYY的表達(dá)增加]，即，GLP-I、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽、IP_2、GRPP和腸高血糖素，它們中的大多數(shù)已知是或懷疑是涉及飽食或饑餓的信號(hào)傳導(dǎo)或?qū)︼柺郴蝠囸I反應(yīng)的信號(hào)分子。為了進(jìn)一步證實(shí)CRL431增加GCG基因的表達(dá)這一發(fā)現(xiàn)，在用CRL431菌株灌注的分離的豬腸的靜脈流出物中測(cè)量基因產(chǎn)物，即，完整的GLP-1、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽和總 GLP-I以及GLP-2(參見(jiàn)實(shí)施例2)。如圖3中所示，在用CRL431灌注分離的豬腸后完整的生物活性GLP-I的濃度增加了 443% ο總GLP-I和GLP-2的水平分別增加330%和460%, 表明GCG衍生的高血糖素原激素的分泌增加。此外，通過(guò)用CRL431灌注還誘導(dǎo)了飽食誘導(dǎo)激素PYY的分泌。如圖3中所示，在用CRL431灌注后PYY水平增加了 2 %。因此，本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案是本發(fā)明的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物在制備施用于哺乳動(dòng)物以調(diào)節(jié)選自由下列各項(xiàng)組成的組的一種或多種信號(hào)分子的表達(dá)的組合物中的用途GLP-l、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽、IP-2、GRPP和腸高血糖素。如實(shí)施例3進(jìn)一步所示，CRL431誘導(dǎo)人腸內(nèi)分泌細(xì)胞系(NCI-H716)的細(xì)胞培養(yǎng)物中PYY的分泌。在此實(shí)施例中，CRL431以劑量依賴方式誘導(dǎo)PYY分泌達(dá)到本底以上1131% 的水平。證據(jù)清晰地表明GLP-1、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽、腸高血糖素和PYY是直接或間接地 (例如，經(jīng)由增加的腸上皮屏障功能)能夠促使哺乳動(dòng)物達(dá)到最適體重的激素。因此進(jìn)一步的實(shí)施方案是細(xì)菌的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物在制備用于體重管理的組合物中的用途。特別地本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案是細(xì)菌的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物在制備用于治療超重和/或肥胖癥的藥物中的用途。在實(shí)施例4中，我們顯示益生的類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株CRL431(ATCC 55544)增加腸組織中AP0A4基因的表達(dá)。已經(jīng)顯示AP0A4基因產(chǎn)物——載脂蛋白A-IV是一種飽食誘導(dǎo)蛋白。因此，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物在制備施用于哺乳動(dòng)物以調(diào)節(jié)所述哺乳動(dòng)物的腸組織中AP0A4基因的表達(dá)的組合物中的用途。此外，如實(shí)施例5中所示，益生菌類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株CRL431(ATCC 55544)減少骨骼肌組織中S⑶-1基因的表達(dá)?？紤]直接來(lái)源于此益生菌株的菌株有可能保留其益生特征，包括減少骨骼肌組織中S⑶-1的表達(dá)的特征。因此，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是細(xì)菌的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物在制備施用于哺乳動(dòng)物以調(diào)節(jié)所述哺乳動(dòng)物的肌組織中SCD-I基因的表達(dá)的組合物中的用途。進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案是類(lèi)干酪乳桿菌的至少一種菌株的用途，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物上調(diào)哺乳動(dòng)物的腸中由GCG、AP0A4和肽YY基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)并且還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。特別優(yōu)選的實(shí)施方案是類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種的至少一種菌株的用途，其中所述至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物選自由類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431(ATCC 55544)和其突變株組成的菌株組，其中所述突變株通過(guò)使用ATCC 55544作為起始材料獲得，并且其中所述突變株已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了上調(diào)腸中GCG基因、AP0A4基因或PYY基因的表達(dá)的能力，或已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)的能力。肥胖是發(fā)生多種疾病和癥狀的主要危險(xiǎn)因素。依照內(nèi)分泌學(xué)會(huì)(Endocrine Society)或激素基金會(huì)(Hormone Foundation) (http://www. obesityinamerica. org), 超重和肥胖的人發(fā)生下列病癥的風(fēng)險(xiǎn)增加心血管疾病(例如，動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、卒中、充血性心力衰竭、心絞痛)、2型糖尿病、肥胖癥相關(guān)的通氣不足、背部和關(guān)節(jié)問(wèn)題、非酒精性脂肪性肝病、胃食管反流病、生育力下降、甲狀腺功能減退、血脂異常、高胰島素血癥、膽囊炎、膽石癥、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、睡眠呼吸暫停和其他呼吸系統(tǒng)問(wèn)題、多囊卵巢綜合征(PCOS)、妊娠并發(fā)癥、心理障礙、尿酸性腎結(jié)石(腎臟結(jié)石)、壓力性尿失禁以及某些癌癥 (例如，腎臟、子宮內(nèi)膜、乳腺、結(jié)腸和直腸、食管、前列腺和膽囊的癌癥)的發(fā)生率增加。1型糖尿病(TlDM)是胰腺中產(chǎn)生胰島素的β-細(xì)胞的自身免疫破壞的結(jié)果。動(dòng)物研究表明GLP-I治療可以通過(guò)誘導(dǎo)β-細(xì)胞再生和增殖來(lái)延緩TlDM的發(fā)作(32)22)。已經(jīng)提議此作用與GLP-I的抗炎性質(zhì)有關(guān)(33，23)。因此，本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是本發(fā)明的所述菌株(諸如CRL431)和/或所述菌株的一部分和/或代謝物在制備用于預(yù)防和/或治療上面提及的任一種疾病或病癥的組合物或藥物中的用途。許多益生菌用于制造食品或飼料產(chǎn)品；因此本發(fā)明的更重要的方面是提供包含本發(fā)明的類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物的人或動(dòng)物食品或飼料組合物，所述人或動(dòng)物食品或飼料組合物用于控制或穩(wěn)定哺乳動(dòng)物的體重增加。 此類(lèi)食品或飼料經(jīng)常稱作功能食品或飼料。當(dāng)制備此類(lèi)食品或飼料產(chǎn)品時(shí)，生產(chǎn)商通常利用所謂的起子培養(yǎng)物，所述起子培養(yǎng)物是用來(lái)加工食品和飼料產(chǎn)品的培養(yǎng)物。起子培養(yǎng)物廣泛用于乳制品工業(yè)。通常起子培養(yǎng)物對(duì)多種食品或飼料產(chǎn)品施加特殊的特征。一個(gè)已經(jīng)明確的事實(shí)是稠度、質(zhì)地、體感和口感與用來(lái)制備食品或飼料的起子培養(yǎng)物的EPS產(chǎn)生強(qiáng)烈相關(guān)。本發(fā)明還設(shè)計(jì)一種制造食品或飼料產(chǎn)品的方法，所述方法包括向食品或飼料產(chǎn)品起始材料中添加包含類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431(ATCC 55544)或其突變株的起子培養(yǎng)組合物，并將由此接種的起始材料保持在所述乳酸菌有代謝活性的條件下，以獲得控制或穩(wěn)定哺乳動(dòng)物的體重增加的食品或飼料產(chǎn)品。短語(yǔ)“益生物質(zhì)”是指增加腸中益生細(xì)菌的數(shù)目的組合物或組合物的組分。因此，益生物質(zhì)是指在結(jié)腸中被固有細(xì)菌特異性發(fā)酵的任何無(wú)生命的食物成分，所述固有細(xì)菌被認(rèn)為具有有益的價(jià)值，例如，乳桿菌。益生菌株與一種或多種益生化合物的聯(lián)合施用可以增強(qiáng)施用的益生菌在體內(nèi)的生長(zhǎng)，導(dǎo)致更突出的健康益處。因此本發(fā)明一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案是根據(jù)本發(fā)明的包含活益生細(xì)菌的組合物與至少一種益生物質(zhì)組合的用途。特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述益生物質(zhì)選自下列的組菊糖、反式低聚半乳糖 (transgalactooligosaccharide)、/[氐|^中白才立^^|| (palantinoseoligosaccharide)、；[氐聚糖、低聚龍膽糖(gentiooligosaccharide)、低聚木糖(oxylooligomer)、非降解性淀粉、 乳蔗糖(lactosaccharose)；乳果糖、乳糖醇、麥芽糖醇、FOS (低聚果糖)、GOS (低聚乳糖) 和聚葡萄糖。以權(quán)利要求的形式體現(xiàn)的本發(fā)明本發(fā)明的優(yōu)選方面和實(shí)施方案可以以所謂的權(quán)利要求的形式體現(xiàn)。這些權(quán)利要求在下面給出。1. 一種用于減少與超重和/或肥胖癥有關(guān)的危險(xiǎn)因子的組合物，包含類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物，所述組合物的特征在于上調(diào)哺乳動(dòng)物的腸中由GCG基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的組合物，其中所述GCG基因的表達(dá)的上調(diào)發(fā)生在哺乳動(dòng)物的腸的遠(yuǎn)段回腸部。3.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物也上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由AP0A4基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物也增加所述哺乳動(dòng)物的腸中飽食標(biāo)志物肽YY的分泌。5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物增加PYY從腸的分泌，上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由GCG和AP0A4基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)，并且還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述菌株選自由類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種(CHCC3136，CRL431，ATCC 55544)和其突變株組成的菌株組，其中所述突變株通過(guò)使用ATCC 55544作為起始材料獲得，并且其中所述突變株已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了上調(diào)GCG基因或AP0A4基因的表達(dá)的能力，或進(jìn)一步提高了增加PYY從腸分泌的能力，或已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)的能力。8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物還調(diào)節(jié)選自由下列各項(xiàng)組成的組的一種或多種信號(hào)分子的水平GLP-1、 GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽、IP_2、GRPP、腸高血糖素、PYY和載脂蛋白A-IV。9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，所述組合物用于預(yù)防和/或治療選自由下列各項(xiàng)組成的組的疾病或病癥肥胖癥和肥胖癥相關(guān)的疾病，所述肥胖癥相關(guān)的疾病由下列疾病組成心血管疾病(例如，動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、卒中、充血性心力衰竭、心絞痛)、1型糖尿病、2型糖尿病、肥胖癥相關(guān)的通氣不足、背部和關(guān)節(jié)問(wèn)題、非酒精性脂肪性肝病、胃食管反流病、生育力下降、甲狀腺功能減退、血脂異常、高胰島素血癥、膽囊炎、膽石癥、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、睡眠呼吸暫停和其他呼吸系統(tǒng)問(wèn)題、多囊卵巢綜合征(PCOS)、妊娠并發(fā)癥、心理障礙、尿酸性腎結(jié)石(腎臟結(jié)石)、壓力性尿失禁和某些癌癥(例如，腎臟、子宮內(nèi)膜、乳腺、結(jié)腸和直腸、食管、前列腺和膽囊的癌癥)。10. 一種用于在身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)小于25的非肥胖、非超重受試者中減少體重的美容方法，所述方法包括提供包含類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物的組合物，其中所述組合物的特征在于上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由GCG基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。11. 一種用于在非肥胖受試者中減少體重的美容方法，所述方法包括提供包含類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物的組合物，其中所述組合物的特征在于上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由GCG基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。12.根據(jù)權(quán)利要求10或11所述的美容方法，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物還上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由AP0A4基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。13.根據(jù)權(quán)利要求10-12中任一項(xiàng)所述的美容方法，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物還上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中飽食標(biāo)志物肽YY的分泌。14.根據(jù)權(quán)利要求10-13中任一項(xiàng)所述的美容方法，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。15.根據(jù)權(quán)利要求10-14中任一項(xiàng)所述的美容方法，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物增加PYY從腸的分泌，上調(diào)腸中GCG和AP0A4基因的表達(dá)，并且還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。16.根據(jù)權(quán)利要求10-14中任一項(xiàng)所述的美容方法，其中所述菌株選自由類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種(CHCC3136，CRL431, ATCC 55544)和其突變株組成的菌株組，其中所述突變株通過(guò)使用ATCC 55544作為起始材料獲得，并且其中所述突變株已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了上調(diào)GCG基因、AP0A4基因的表達(dá)或PYY在腸中分泌的能力，或已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)的能力。17.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物用于制備旨在控制或穩(wěn)定哺乳動(dòng)物的體重增加的食品或飼料。18.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物與至少一種益生物質(zhì)組合。19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物與至少一種益生物質(zhì)組合，所述至少一種益生物質(zhì)選自由下列各項(xiàng)組成的組菊糖、 反式低聚半乳糖、低聚帕拉金糖、大豆低聚糖、低聚龍膽糖、低聚木糖、非降解性淀粉、乳蔗糖；乳果糖、乳糖醇、麥芽糖醇、FOS (低聚果糖)、GOS (低聚乳糖)和聚葡萄糖。20.類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物在制備施用于哺乳動(dòng)物以減少與超重和/或肥胖癥有關(guān)的危險(xiǎn)因子的藥物中的用途，包括上調(diào)哺乳動(dòng)物的腸中由GCG基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的用途，其中所述GCG基因的表達(dá)的上調(diào)發(fā)生在哺乳動(dòng)物的腸的遠(yuǎn)段回腸部。22.根據(jù)權(quán)利要求20或21所述的用途，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/ 或代謝物也上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由AP0A4基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。23.根據(jù)權(quán)利要求20-22所述的用途，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物還上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中肽YY基因編碼的飽食標(biāo)志物的分泌。24.根據(jù)權(quán)利要求20-23所述的用途，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。25.根據(jù)權(quán)利要求20-24所述的用途，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由GCG、AP0A4編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)，增加PYY分泌，并且還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。26.根據(jù)權(quán)利要求20-25所述的用途，其中所述菌株選自由類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種(CHCC3136，CRL431，ATCC 55544)和其突變株組成的菌株組，其中所述突變株通過(guò)使用ATCC 55544作為起始材料獲得，并且其中所述突變株已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了上調(diào)腸中GCG基因、AP0A4基因的表達(dá)或增加腸中PYY分泌的能力，或已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)的能力。27.根據(jù)權(quán)利要求2046所述的用途，其中根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物還調(diào)節(jié)選自由下列各項(xiàng)組成的組的一種或多種信號(hào)分子的水平GLP-l、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽、IP_2、GRPP、腸高血糖素、PYY和載脂蛋白A-IV。本發(fā)明進(jìn)一步在下面的非限制性實(shí)施例和附圖中進(jìn)行說(shuō)明。附圖簡(jiǎn)述
圖1 在小腸和大腸的L-細(xì)胞中產(chǎn)生的人高血糖素原分子和高血糖素原-衍生肽的示意性圖示。數(shù)字代表高血糖素原內(nèi)相對(duì)氨基酸位置。GRPP 腸高血糖素-相關(guān)胰多肽。 該圖改編自Wallis等2007 (19)。圖2 :GCG在豬回腸中的表達(dá)。GCG表達(dá)通過(guò)Q-PCR對(duì)從粘膜樣品中提取的RNA進(jìn)行定量。每個(gè)點(diǎn)代表一頭豬。平均表達(dá)量表示為黑線。對(duì)照組(crtl)的平均表達(dá)量設(shè)為 1. 0oBbl2 動(dòng)物雙歧桿菌乳酸亞種(Bifidobacterium animal is subsp. lactis)BB_12 .株 (DSM15954) ；La5 嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)La5 株(DSM13241) ；CRL431 類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431株，(ATCC 55544) · ***p < 0. 001 (t_檢驗(yàn))。圖3 分離禁食過(guò)夜的豬的中段回腸。分離的回腸的動(dòng)脈、靜脈和腸腔如所述用緩沖液灌注。灌注從時(shí)間點(diǎn)0進(jìn)行至220分鐘。分離的回腸用動(dòng)脈鈴蟾肽刺激6次(如豎直的虛線所指示)。腸腔用CRL431從時(shí)間點(diǎn)39分鐘灌注至146分鐘(由水平的加帽線(capped line)指示)。以1分鐘的周期收集靜脈流出物。使用以前描述的放射免疫測(cè)定法分析靜脈流出物中的完整和總GLP-l、GLP-2和促生長(zhǎng)素抑制素，并且使用獲自Linco(Millipore) 的ELISA試劑盒分析靜脈流出物中的PYY (34)。圖4 :PYY從用CRL431刺激2小時(shí)的NCI-H716腸內(nèi)分泌細(xì)胞的釋放。NCI-H716腸內(nèi)分泌細(xì)胞如所述的那樣培養(yǎng)，并且CRL-431以指示的濃度與細(xì)胞培養(yǎng)物共溫育。圖5.ΑΡ0Α4在腸組織中的表達(dá)。S⑶_1表達(dá)通過(guò)Q-PCR對(duì)從粘膜樣品中提取的 RNA進(jìn)行定量。每個(gè)柱代表平均表達(dá)值且誤差棒代表標(biāo)準(zhǔn)差。對(duì)照組(crtl)的平均表達(dá)值設(shè)為1. 0(n = 6頭小豬)。Bbl2 動(dòng)物雙歧桿菌乳酸亞種(Bifidobacterium animal is subsp. lactis)BB-12 株(DSM15954) (η = 7 頭小豬)；La5 嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)La5株(DSM13M1) (η = 6頭小豬)；CRL431 類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431 株，(ATCC 55544) (n = 5 頭小豬)。圖6. S⑶-1在骨骼肌中的表達(dá)。S⑶-1表達(dá)通過(guò)Q-PCR對(duì)從粘膜樣品中提取的 RNA進(jìn)行定量。每個(gè)柱代表平均表達(dá)值且誤差棒代表標(biāo)準(zhǔn)差。對(duì)照組(crtl)的平均表達(dá)值設(shè)為1. 0(n = 6頭小豬)。Bbl2 動(dòng)物雙歧桿菌乳酸亞種(Bifidobacterium animal is subsp. lactis)BB-12 ⑧株(DSM15954) (η = 7 頭小豬)；La5 嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)La5株(DSM13M1) (η = 6頭小豬)；CRL431 類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431 株，(ATCC 55544) (n = 5 頭小豬)。圖7.攝入膠囊A(安慰劑)、B(IO9CFU)或C(IOltlCFU)后4小時(shí)的隨意能量攝取。 N = 21，均值 +SE0
實(shí)施例實(shí)施例1 益生菌株上調(diào)豬回腸中的GCG表達(dá)為了研究選擇的益生菌株是否調(diào)節(jié)動(dòng)物中的回腸GCG表達(dá)，仔豬飼以標(biāo)準(zhǔn)飲食， 所述飲食包含益生細(xì)菌(即，動(dòng)物雙歧桿菌乳酸亞種ΒΒ-12 株(DSM15954)、嗜酸乳桿菌 La5株(DSM13M1)和類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431株，(ATCC 55M4)。ΒΒ-12 株商購(gòu)自 Chr. Hansen A/S，10_12Boege Alle, DK-2970 Hoersholm, Denmark。飼以相同的標(biāo)準(zhǔn)飲食但不補(bǔ)充益生細(xì)菌的豬作為對(duì)照。每組由8頭小豬組成。4周斷奶時(shí)將動(dòng)物移至畜圈， 在畜圈處它們被單獨(dú)圈養(yǎng)，并且被分配進(jìn)行相應(yīng)處理14天。同窩出生仔畜被分配至每種處理。在每種處理中小公豬(barrow)和小母豬(gilt)的數(shù)目相同。豬每天喂料兩次，接受的飼料量相當(dāng)于其體重的4%。每天早晨在餐前給予益生菌。該實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行得到了丹麥作物管理局(The Danish Plant Directorate)和丹麥?zhǔn)称?、農(nóng)業(yè)和漁業(yè)部(The Danish Ministry of Food, Agriculture and Fisheries)的批準(zhǔn)。處理14天后，處死豬，取包含小腸全長(zhǎng)的75% (即，小腸的回腸或遠(yuǎn)段部分)的組織樣品，并且樣品在液氮中速凍。使用對(duì)GCG特異的引物通過(guò)定量PCR分析進(jìn)行遠(yuǎn)段回腸上的基因表達(dá)分析?；旧先鏚ubista等所述進(jìn)行定量PCR分析(3524)。引物序列為，GCG-F 5' -TTC AGA ATA CAG AGG AGA AAT CCA-3‘GCG-R 5' -AGT CAT CTG ATC TGG ATC ATC G-3'如圖2中所示，CRL-431顯著上調(diào)回腸GCG表達(dá)而兩種其他菌株對(duì)GCG表達(dá)沒(méi)有
顯著作用。實(shí)施例2 在分離的灌注豬腸中CRL431對(duì)腸激素釋放的作用將一頭禁食過(guò)夜的丹麥LYY品系豬(XX kg)麻醉，分離80cm節(jié)段的包括動(dòng)脈和靜脈血供的中段回腸。該節(jié)段灌注以充氣的(在O2中的5%C02)KrebS-Ringer碳酸氫鹽灌流緩沖液，該緩沖液包含0. 人血清白蛋白；5%葡聚糖T-70 ；7mmol/L葡萄糖；氨基酸混合物(5mmol/L)；和15-20%剛洗過(guò)的牛紅細(xì)胞。加入環(huán)加氧酶抑制劑以防止灌流系統(tǒng)中生成前列腺素。用緩沖液以24mL/min灌注組織。腸腔用不含紅細(xì)胞的灌流緩沖液以3mL/min 灌注。連續(xù)記錄灌注壓并且約每30分鐘分析靜脈流出物中的氧狀態(tài)和葡萄糖水平。收集靜脈流出物持續(xù)1分鐘的時(shí)期。在4°C離心后，將上清液分成合適的等分試樣并儲(chǔ)存在冰箱中直至進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)方案包括用CRL431 (108CFU/mL)單獨(dú)灌注腸腔或與動(dòng)脈鈴蟾肽刺激物 (IO-8M)組合灌注腸腔。使用以前描述的放射免疫測(cè)定法測(cè)量完整的和總GLP-1、GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽和促生長(zhǎng)素抑制素(14 ；34) 25)。使用獲自Linco (Millipore，MA，USA)的ELISA試劑盒測(cè)量PYY。如圖3中所示，總GLP-I分泌的本底水平為75ng/ml。釋放的激素的本底水平被定義為第一次鈴蟾肽刺激后的測(cè)量值的平均值，即，在時(shí)間點(diǎn)19-33分鐘時(shí)獲得的測(cè)量值的平均值。用CRL431灌注腸腔從時(shí)間點(diǎn)34分鐘進(jìn)行至141分鐘。用CRL431灌注將總 GLP-I水平逐漸增加至215ng/ml (定義為細(xì)菌輸注后第一次鈴蟾肽刺激后的測(cè)量值的平均值，即，在時(shí)間點(diǎn)176-205分鐘時(shí)獲得的測(cè)量值的平均值)。測(cè)量值相當(dāng)于總GLP-I水平增加 287% ο還觀察到完整的生物活性GLP-I的水平增加。灌注分離的豬腸將完整的GLP-I水平從M增加至182ng/ml，相當(dāng)于增加339%。同樣，GLP-2水平從105增加至405ng/ml，相當(dāng)于增加383% ο眾所周知，鈴蟾肽抑制GLP-I的分泌(36)。為了驗(yàn)證完整的以及總GLP-I和GLP-2 的水平增加不是腸L-細(xì)胞的鈴蟾肽表達(dá)減少的結(jié)果，我們測(cè)量了靜脈流出物中此激素的水平。如圖3中所顯示，在CRL431灌注期間鈴蟾肽的濃度從40增加至93ng/ml，相當(dāng)于增加237%。因此，高血糖素原-衍生激素GLP-I和GLP-2的表達(dá)增加不是鈴蟾肽的表達(dá)減少所引起的。此外，如圖3中所示，PYY分泌的本底水平為^ng/ml。用CRL431灌注將PYY水平逐漸增加至65ng/ml。該測(cè)量值相當(dāng)于CRL431灌注后血漿PYY水平增加2 %。在用類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431株灌注腸后看到一個(gè)令人驚奇和非常令人感興趣的觀察結(jié)果。在細(xì)菌灌注后，鈴蟾肽誘導(dǎo)的總GLP-l、GLP-2和PYY和完整的GLP-1、 GLP-2和PYY的釋放被增強(qiáng)，峰值分別為6M、298、639和148ng/ml。這應(yīng)當(dāng)與細(xì)菌灌注期間的總GLP-UGLP-2和PYY和完整的GLP_1、GLP_2和PYY的峰值(分別為281、139、316和 79ng/ml)相比?？傊覀円呀?jīng)顯示CRL431增加分泌的GLP-1、GLP-2和PYY的水平，并且增強(qiáng)了鈴蟾肽誘導(dǎo)的GLP-I、GLP-2和PYY的釋放(峰值)。實(shí)施例3 :CRL431對(duì)培養(yǎng)的人腸內(nèi)分泌細(xì)胞中PYY釋放的作用人腸內(nèi)分泌細(xì)胞，NCI-H716，如以前所述進(jìn)行培養(yǎng)(37)。CRL431在MRS(deMan， Rogosa and Sharpe, Difco, BD Diagnostics)中培養(yǎng)，并使其達(dá)到指數(shù)生長(zhǎng)期。細(xì)菌通過(guò)離心收獲并在單次洗滌步驟后重新懸浮在含有0. 2% BSA(Sigma, A3294)的Krebs-Ringer 緩沖液(Sigma, K4002)中從而獲得下列濃度1χ107、5χ107、7. 5xl07 禾口 lxl08cfu/ml。細(xì)菌與細(xì)胞培養(yǎng)物在37°C下溫育2小時(shí)。溫育后將上清液收集在含有二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制劑(Millipore，MA, USA)的試管中。細(xì)胞培養(yǎng)上清液的PYY濃度通過(guò) ELISA(Linco, Millipore, MA, USA)測(cè)定。如圖4中所示，PYY的本底濃度為19pg/ml。NCI-H716細(xì)胞培養(yǎng)物與漸增濃度的CRL431的溫育引發(fā)了 PYY的劑量依賴性釋放。在CRL431的最高濃度下，PYY濃度達(dá)到 215pg/ml的最大值，相當(dāng)于增加1131%。實(shí)施例4 益生菌株上調(diào)豬腸中的AP0A4表達(dá)為了研究選擇的益生菌株是否調(diào)節(jié)動(dòng)物中的回腸AP0A4表達(dá)，仔豬飼以標(biāo)準(zhǔn)飲食，所述飲食包含益生細(xì)菌(即，動(dòng)物雙歧桿菌乳酸亞種BB-12 株(DSM15954)、嗜酸乳桿菌La5株(DSM13M1)和類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431株，(ATCC 55544) ) 飼以相同的標(biāo)準(zhǔn)飲食但不補(bǔ)充益生細(xì)菌的豬作為對(duì)照。每組由8頭小豬組成。4周斷奶時(shí)將動(dòng)物移至畜圈，在畜圈處它們被單獨(dú)圈養(yǎng)，并且被分配進(jìn)行相應(yīng)處理14天。同窩出生仔畜被分配至每種處理。在每種處理中小公豬和小母豬的數(shù)目相同。豬每天喂料兩次，接受的飼料量相當(dāng)于其體重的4%。每天早晨在餐前給予益生菌。該實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行得到了丹麥作物管理局和丹麥?zhǔn)称?、農(nóng)業(yè)和漁業(yè)部的批準(zhǔn)。處理14天后，處死豬，取包含小腸全長(zhǎng)的75% (即，小腸的回腸或遠(yuǎn)段部分)的組織樣品，并且樣品在液氮中速凍。使用對(duì)AP0A4特異的引物通過(guò)定量PCR分析進(jìn)行遠(yuǎn)段回腸上的基因表達(dá)分析?；旧先鏚ubista等所述進(jìn)行定量PCR分析(35)。引物序列為，AP0A4-F 5‘ -AAGGCCAAGATCGATCAGAA-3‘AP0A4-R 5‘ -GAGCTCCTCCGCATAGGG-3‘如圖5中所示，CRL-431上調(diào)回腸AP0A4表達(dá)而其他三種菌株對(duì)AP0A4表達(dá)沒(méi)有
顯著作用。實(shí)施例5 益生菌株下調(diào)豬骨骼肌中的S⑶-1表達(dá)
為了研究選擇的益生菌株是否調(diào)節(jié)動(dòng)物中的骨骼肌S⑶-1表達(dá)，仔豬飼以標(biāo)準(zhǔn)飲食，所述飲食包含益生細(xì)菌(即，動(dòng)物雙歧桿菌乳酸亞種BB-12 株(DSM15954)、嗜酸乳桿菌La5株(DSM13M1)和類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種CRL431株，(ATCC 55544) ) 飼以相同的標(biāo)準(zhǔn)飲食但不補(bǔ)充益生細(xì)菌的豬作為對(duì)照。每組由8頭小豬組成。4周斷奶時(shí)將動(dòng)物移至畜圈，在畜圈處它們被單獨(dú)圈養(yǎng)，并且被分配進(jìn)行相應(yīng)處理14天。同窩出生仔畜被分配至每種處理。在每種處理中小公豬和小母豬的數(shù)目相同。豬每天喂料兩次，接受的飼料量相當(dāng)于其體重的4%。每天早晨在餐前給予益生菌。該實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行得到了丹麥作物管理局和丹麥?zhǔn)称?、農(nóng)業(yè)和漁業(yè)部的批準(zhǔn)。處理14天后，處死豬，取包含骨骼肌的組織樣品，并將樣品在液氮中速凍。使用對(duì) S⑶-1特異的引物通過(guò)定量PCR分析進(jìn)行遠(yuǎn)段回腸上的基因表達(dá)分析?；旧先鏚ubista 等所述進(jìn)行定量PCR分析(35)。引物序列為，SCDl-F 5' -GGGATACAGCTCCCCTCATAG-3‘SCDl-R 5' -AGTTCCGATGTCTCAAAATGC-3‘如圖6中所示，CRL-431將骨骼肌SOT-I表達(dá)下調(diào)達(dá)未處理豬的水平的大致一半。 這與對(duì)La-5所觀察到的下調(diào)相當(dāng)。相反，Bb-12和KdD(滅活的，死亡的恥-12)與未處理豬相比似乎上調(diào)肌肉SCD-I達(dá)100% (對(duì)于Bb-12)。實(shí)施例5 :CRL431對(duì)能量攝取的作用，以及VAS評(píng)分本研究是22名年齡為20-45歲的健康男性和女性的干預(yù)性研究，這些人將進(jìn)行三次持續(xù)時(shí)間為大約5小時(shí)的單餐實(shí)驗(yàn)(single meal test)。該研究為交叉設(shè)計(jì)，其中關(guān)于食欲、隨意能量攝取和康樂(lè)感(wellbeing)測(cè)試兩種不同劑量的益生細(xì)菌或安慰劑。參與者隨機(jī)化食用大約三種不同的膠囊，例如，安慰劑或IO9CFU干乳酪桿菌CRL431或IOltlCFU干乳酪桿菌CRL431。在測(cè)試日，參與者服用高劑量益生菌膠囊、低劑量益生菌膠囊或安慰劑膠囊。在標(biāo)準(zhǔn)化早餐開(kāi)始時(shí)吞下這些膠囊。之后取血樣，并且登記食欲直至分發(fā)隨意食用的午餐。為了消除膠囊的后遺作用并且為了參與者的安全，在測(cè)試日之間最少間隔4周。進(jìn)餐實(shí)驗(yàn)前一晚，參與者在8. 00p.m.之前食用標(biāo)準(zhǔn)化晚餐G.5MJ)，并被要求之后禁食，除了最多飲用1/2L水以外。在單餐實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，研究參與者通過(guò)公共汽車(chē)、火車(chē)、地鐵或輕便/緩慢的自行車(chē)(light/slow cycling)在8. 00a.m.時(shí)抵達(dá)科室并禁食。參與者著內(nèi)衣稱重， 然后休息并測(cè)量血壓。Venflon導(dǎo)管插入至右肘前靜脈中并且在時(shí)間0時(shí)抽取禁食血樣，測(cè)定血紅蛋白濃度(>7.5mmol/l)，并且在視覺(jué)模擬評(píng)分(MS)問(wèn)卷上登記食欲，然后食用早餐Q.5MJ)并分發(fā)三種膠囊之一。參與者最多花費(fèi)14分鐘吃完早餐。早餐后，在下列時(shí)間抽取血樣早餐開(kāi)始后15、30、45、60、90、120、150、180、210和240分鐘，總計(jì)達(dá)到11個(gè)血樣，總共250ml。每半個(gè)小時(shí)登記一次食欲直至早餐后4個(gè)小時(shí)分發(fā)隨意食用的午餐。午餐后，最后一次登記食欲，并且在參與者離開(kāi)科室之前對(duì)膳食的感官品質(zhì)進(jìn)行評(píng)級(jí)。篩選了 31名受試者，剔除9名。將總共22名受試者(11名男性和11名女性)隨機(jī)化，在研究期內(nèi)21名完成了所有三次訪問(wèn)。平均年齡為27. 2歲，且平均BMI為23. 6kg/ m2并且在研究期間沒(méi)有發(fā)生顯著變化(ρ > 0. 1)。在每次訪問(wèn)時(shí)所有參與者的血壓均在正常范圍內(nèi)，且具有正常的血紅蛋白值，女性為7. 5-lOmmol，男性為8-llmmol (表1)。表1.參與者在基線時(shí)的體質(zhì)特征
權(quán)利要求
1.一種用于減少與超重和/或肥胖癥有關(guān)的危險(xiǎn)因子的組合物，包含類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酷亞種(Lactobacillus paracasei subsp. paracasei)的至少一種菌株禾口 /或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物，所述組合物的特征在于上調(diào)哺乳動(dòng)物的腸中由GCG基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。
2.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和 /或代謝物也上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由AP0A4基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。
3.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和 /或代謝物也增加所述哺乳動(dòng)物的腸中飽食標(biāo)志物肽YY的分泌。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和 /或代謝物還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和 /或代謝物增加PYY從腸的分泌，上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由GCG和AP0A4基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)，并且還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述菌株選自由類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種(CHCC3136，CRL431，ATCC 55544)和其突變株組成的菌株組，其中所述突變株通過(guò)使用ATCC 55544作為起始材料獲得，并且其中所述突變株已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了上調(diào)GCG基因或AP0A4基因的表達(dá)的能力，或進(jìn)一步提高了增加PYY從腸分泌的能力，或已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)的能力。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述菌株和/或所述菌株的一部分和/或代謝物還調(diào)節(jié)選自由下列各項(xiàng)組成的組的一種或多種信號(hào)分子的水平GLP-1、 GLP-2、泌酸調(diào)節(jié)肽、IP_2、GRPP、腸高血糖素、PYY和載脂蛋白A-IV。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，所述組合物用于預(yù)防和/或治療選自由下列各項(xiàng)組成的組的疾病或病癥肥胖癥和肥胖癥相關(guān)的疾病，所述肥胖癥相關(guān)的疾病由下列疾病組成心血管疾病(例如，動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、卒中、充血性心力衰竭、心絞痛)、1型糖尿病、2型糖尿病、肥胖癥相關(guān)的通氣不足、背部和關(guān)節(jié)問(wèn)題、非酒精性脂肪性肝病、胃食管反流病、生育力下降、甲狀腺功能減退、血脂異常、高胰島素血癥、膽囊炎、膽石癥、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、睡眠呼吸暫停和其他呼吸系統(tǒng)問(wèn)題、多囊卵巢綜合征(PCOS)、妊娠并發(fā)癥、心理障礙、尿酸性腎結(jié)石(腎臟結(jié)石)、壓力性尿失禁和某些癌癥(例如，腎臟、子宮內(nèi)膜、乳腺、結(jié)腸和直腸、食管、前列腺和膽囊的癌癥)。
9.一種用于在身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)小于25的非肥胖、非超重受試者中減少體重的美容方法，所述方法包括提供包含類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物的組合物，其中所述組合物的特征在于上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由GCG基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。
10.一種用于在非肥胖受試者中減少體重的美容方法，所述方法包括提供包含類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種的至少一種菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物的組合物，其中所述組合物的特征在于上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由GCG基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10所述的美容方法，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/ 或代謝物還上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中由AP0A4基因編碼的飽食標(biāo)志物的表達(dá)。
12.根據(jù)權(quán)利要求9-11中任一項(xiàng)所述的美容方法，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物還上調(diào)所述哺乳動(dòng)物的腸中飽食標(biāo)志物肽YY的分泌。
13.根據(jù)權(quán)利要求9-12中任一項(xiàng)所述的美容方法，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)。
14.根據(jù)權(quán)利要求9-13中任一項(xiàng)所述的美容方法，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物增加PYY從腸的分泌，上調(diào)腸中GCG和AP0A4基因的表達(dá)，并且還下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中S⑶1基因的表達(dá)。
15.根據(jù)權(quán)利要求9-14中任一項(xiàng)所述的美容方法，其中所述菌株選自由類(lèi)干酪乳桿菌類(lèi)干酪亞種(CHCC3136，CRL431, ATCC 55544)和其突變株組成的菌株組，其中所述突變株通過(guò)使用ATCC 55544作為起始材料獲得，并且其中所述突變株已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了上調(diào)GCG基因、AP0A4基因的表達(dá)或PYY在腸中分泌的能力，或已經(jīng)保留了或進(jìn)一步提高了下調(diào)所述哺乳動(dòng)物的骨骼肌中SCDl基因的表達(dá)的能力。
16.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述至少一種菌株和/或一部分和/或代謝物與至少一種益生物質(zhì)組合，所述至少一種益生物質(zhì)選自由下列各項(xiàng)組成的組菊糖、反式低聚半乳糖、低聚帕拉金糖、大豆低聚糖、低聚龍膽糖、低聚木糖、非降解性淀粉、乳蔗糖；乳果糖、乳糖醇、麥芽糖醇、FOS (低聚果糖)、GOS (低聚乳糖)和聚葡萄糖。
全文摘要
描述了調(diào)節(jié)多種飽食標(biāo)志物在腸中的表達(dá)并減少脂肪沉積從而促進(jìn)哺乳動(dòng)物達(dá)到最適體重的益生菌的用途。本發(fā)明還涉及包含這樣的細(xì)菌益生菌株和/或所述菌株的一部分和/或所述菌株的代謝物的組合物，所述組合物用于制備施用于哺乳動(dòng)物以促進(jìn)哺乳動(dòng)物達(dá)到最適體重的組合物。
文檔編號(hào)A61P3/04GK102448477SQ201080022982
公開(kāi)日2012年5月9日 申請(qǐng)日期2010年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月25日
發(fā)明者延斯·基爾德斯加德, 托馬斯·岡納森, 托馬斯·達(dá)爾曼·萊澤, 珍尼·萬(wàn)達(dá)爾·佩德森, 班奈迪特·佛林巴爾德 申請(qǐng)人:科·漢森有限公司