專利名稱：一種菥蓂總芥子甙的提取方法及其醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域。更具體地涉及菥蓂提取物的制備方法及其應用，特別是菥蓂總芥子甙的制備方法及其在制備防止高尿酸血癥和痛風的藥物中的應用。
背景技術(shù)：
痛風是一種由于嘌呤代謝紊亂產(chǎn)生過多尿酸及(或)尿酸排泄減少，并在體內(nèi)蓄積沉淀所致的一組代謝性疾病。臨床表現(xiàn)為高尿酸血癥、痛風性關節(jié)炎、關節(jié)畸形、腎臟病變和尿酸結(jié)石、痛風結(jié)石等。尿酸是人類嘌呤代謝的產(chǎn)物，高尿酸血癥是痛風的主要生化基礎。痛風性關節(jié)炎是血清尿酸水平增高后，尿酸鹽沉積在關節(jié)組織，刺激關節(jié)并引發(fā)一系列的炎癥反應，痛風癥狀以反復下肢關節(jié)紅腫熱痛為主，在中醫(yī)上多屬于濕熱范疇?，F(xiàn)有西醫(yī)針對痛風患者在不同時期所變現(xiàn)的癥狀選擇性進行治療。如抗炎鎮(zhèn)痛藥秋水仙堿和消炎鎮(zhèn)痛藥用于痛風急性發(fā)作治療，排泄尿酸藥物如丙磺舒、苯溴馬隆用于間歇期及慢性期治療，黃嘌呤氧化酶抑制劑藥物別嘌醇抑制尿酸合成。但上述藥物毒副作用大，患者往往不能堅持長期服用，以致不易控制病情。如秋水仙堿和消炎痛具有胃腸道刺激作用，前者還產(chǎn)生白細胞降低和脫發(fā)等。丙磺舒、苯溴馬隆具有胃腸道反應、腎絞痛及激發(fā)痛風急性發(fā)作等副作用。別嘌醇有致變態(tài)反應骨髓抑制等嚴重的毒副作用。這些藥物副作用大，病人常常不能忍受，在一定程度上限制了其使用。因此，尋找新型的高效低毒的抗痛風和高尿酸血癥藥物依然是目前藥學研究的一個熱點。CN97116712.5公開了茶色素可抑制高尿酸血癥，預防痛風發(fā)作，并具有治療作用；CN98110667. 6公開了由木通、益母草、車前子、米仁、倉術(shù)、黃柏、牛膝組成的物質(zhì)，具有清熱利濕、活血化濁的作用，可以降低尿酸，治療痛風性關節(jié)炎，預防關節(jié)畸形及腎病變; CN200410034933. 9公開了主要未總黃酮、總生物堿、揮發(fā)油構(gòu)成的組合物，具有降低高尿酸的效果。W^AThlaspi ar陽從Zi/w)為雙子葉十字花科菥蓂屬一年生草本植物，又叫遏藍菜、蘇敗醬(江蘇)、南敗醬(湖北)、苦芥子、敗醬草、瓜子草、野榆樹、菥目(陜西)，分布全國各地，但是在川藏地區(qū)資源最為豐富。菥蓂的主要化學成分為揮發(fā)油和芥子甙。目前關于菥蓂子的研究較少，但卻是一種重要的川藏道地藥材。2010版藥典記載，菥蓂辛， 微寒。歸肝、胃、大腸經(jīng)。主治清肝明目，和中利濕，解毒消腫。用于目赤腫痛，腕腹脹痛，脅痛，腸癰，水腫，帶下，瘡癤癰腫，目前尚無治療痛風的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種單味藏藥菥蓂的提取物-總芥子甙的新用途，其可以降低高尿酸血癥血清尿酸水平、制備抑制黃嘌呤氧化酶和次黃嘌呤氧化酶活性、制備保護痛風性關節(jié)炎的炎癥組織和制備抗關節(jié)炎腫脹的治療或預防的藥物。本發(fā)明還提供了一種簡便的菥蓂的總芥子甙的制備方法，確切地說是菥蓂的總芥子甙的濃縮純化的方法，其技術(shù)方案是將菥蓂粉碎至10-100目，采用A:用水煮乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法；乙醇或甲醇(50-90%)提取，乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；B 將浸膏置于4-10°C下冷藏8-M小時，形成沉淀；C 過濾并干燥沉淀，即得菥蓂總芥子甙?？偨孀舆白鳛榛钚猿煞?，加入藥學上可接受的載體或賦形劑可用于制備治療急慢性痛風的藥物。氧嗪酸鉀鹽是一種尿酸酶抑制劑，可誘導導致尿酸分解，增加體內(nèi)血清尿酸水平， 造成高尿酸血癥動物模型，國際上普遍用其評價藥物的抗高尿酸血癥和痛風作用。本發(fā)明亦采用此高尿酸血癥動物模型，驗證菥蓂提取物的抗痛風療效。結(jié)果表明，其療效確切，效果顯著，總有效率為91. 7%，未見明顯的毒副作用。該發(fā)明獲得的治療和預防高尿酸血癥和痛風病的藥物菥蓂為一傳統(tǒng)藏藥，來源廣泛。所涉及的制備工藝簡單，易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明的另一優(yōu)點在于，本發(fā)明以菥蓂的總芥子甙為主要成分，藥效成分明確，并可分別用黑芥子甙和芥子甙等成分作為質(zhì)量控制指標。
具體實施例方式實施例1傳統(tǒng)提取方法
取菥蓂10kg，粉碎至10-100目，加水50L，在60_75°C的條件下提取三次，每次提取5_8 小時，將3次水提液合并，濃縮成浸膏，干燥，得到0. 8 kg浸膏，即為樣品A。實施例2水提醇沉法
取0. 5 kg的樣品A，向其中加入2. 5 L 85%乙醇，經(jīng)醇沉過濾后，將乙醇濾液回收溶劑濃縮至1. 5 L，所得濃縮液置于4°C冷藏10小時，過濾，收集沉淀，干燥，即得樣品B，總芥子試 0. 15 kg。實施例3醇提醇沉法
取菥蓂10 kg，粉碎至10-100目，加50L 75%乙醇，在40-55°C的條件下提取三次，每次 4-6小時，將醇提液濃縮成浸膏，加4L倍量85%乙醇，置于4°C冷藏15小時，過濾，收集沉淀， 干燥，即得樣品C，總芥子甙0. 18 kg。實施例4
通過一系列動物實驗，分別測定樣品A、B和C對高尿酸血癥和正常小鼠血清尿酸水平、 大鼠尿酸鈉引起痛風性關節(jié)炎組織和角叉菜膠引起關節(jié)腫脹的影響。雄性昆明種小鼠，體重對士2 g，隨機分組，每天給藥一次，連續(xù)4天，其中生理鹽水組合高尿酸血癥模型空白組每天均按100 ml/kg劑量生理鹽水，各高尿酸血癥模型空白組在采血前2小時氧嗪酸鉀鹽，給藥模型組在最后一次給藥前一小時氧嗪酸鉀鹽。最后一次給藥2小時后從動物眼眶后靜脈叢采血，測定血清尿酸水平。雄性昆明種小鼠，體重對士2 g，隨機分組，每天給藥一次，連續(xù)7天，處死動物，取肝臟測定次黃嘌呤氧化酶UDH)和黃嘌呤氧化酶(XO)活力。雄性昆明大鼠，體重200士25 g，隨機分組。每天給藥一次，連續(xù)7天，并于第4天給藥前1小時用尿酸鈉致炎造模，72小時后測量大鼠踝關節(jié)腫脹程度，或造模M小時處死， 取受試關節(jié)周圍軟組織，測定鉀離子(K+)、5-羥色胺(5-HT)含量。雄性昆明大鼠，體重200-250 g，隨機分組，分別灌胃給藥，給藥后1小時，將1%角叉菜膠0. Iml注入大鼠右后趾腱膜下致炎，以容量測量法觀察各鼠踝關節(jié)致炎后lh、2h、4h和他的腫脹程度。樣品A、B和C對高尿酸血癥和正常小鼠血清尿酸水平的影響結(jié)果分別見表1和表 2。在實驗條件下，樣品A、B和C均能降低高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平；其中，樣品B和樣品C可將高尿酸血癥小鼠血清水平恢復至正常，作用強度與陽性藥物別嘌呤醇相近。樣品A、B和C對正常小鼠血清尿酸水平無顯著性影響，而別嘌呤醇可顯著地降低正常小鼠血清尿酸水平。樣品A、B和C對大鼠尿酸鈉引起痛風性關節(jié)炎模型的影響結(jié)果見表3。數(shù)據(jù)顯示， 樣品B和C能顯著地抑制尿酸鈉引起的大鼠痛風性關節(jié)炎腫脹，作用于秋水仙堿相當。受試關節(jié)周圍軟組織組織血研究表明，樣品A、B、C和秋水仙堿均能保護炎癥組織。樣品B和 C能顯著地減低炎癥組織中K+含量和5-HT含量，作用強度于秋水仙堿相當。樣品A、B和C對大鼠角叉菜膠致炎引起的足趾腫脹的影響結(jié)果見表4。數(shù)據(jù)顯示， 樣品B和樣品C能顯著抑制角叉菜引起的足腫脹，降低腫脹率，于陽性藥強地松作用相當。
權(quán)利要求
1.一種菥蓂提取物浸膏的制備方法，其步驟為1)用水煮乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；2)將浸膏置于4-10°C下冷藏8-M小時，形成沉淀；3)過濾并干燥沉淀，即得菥蓂總芥子甙。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其步驟為1)用乙醇或甲醇(50-90%)提取乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；2)將浸膏置于4-10°C下冷藏8-M小時，形成沉淀；3)過濾并干燥沉淀，即得菥蓂總芥子甙。
3.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于菥蓂提取物浸膏在制備用于治療或預防痛風藥物中的應用。
4.如權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于菥蓂提取物浸膏在制備用于制備 (a)降低血尿酸和/或(b)治療痛風性關節(jié)炎的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了菥蓂提取物特別是菥蓂總芥子甙的制備方法，用水煮乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；或再用乙醇或甲醇(50-90%)提取乙醇或甲醇(70-90%)沉淀法提取得到菥蓂提取物浸膏；將浸膏置于4-10℃下冷藏8-24小時，形成沉淀；過濾并干燥沉淀，即得菥蓂總芥子甙；本發(fā)明還公開了菥蓂提取物在用于制備治療或預防高尿酸血癥藥物中的應用，通過這種方法可產(chǎn)生治療或預防痛風的功效。
文檔編號A61K36/31GK102552367SQ20101050387
公開日2012年7月11日 申請日期2010年10月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月12日
發(fā)明者余紅偉, 馬燕如 申請人:云南滇虹藥業(yè)股份有限公司, 四川滇虹醫(yī)藥開發(fā)有限公司, 滇虹藥業(yè)集團股份有限公司