專利名稱：具有增加的抗氧化活性的麝香葡萄組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本公開涉及用作抗氧化劑、例如用作抗衰老補(bǔ)充劑的包括麝香葡萄果渣提取物和白藜蘆醇的麝香葡萄組合物。
背景技術(shù)：
活性氧(ROQ是有氧代謝的必然副產(chǎn)物，因此在人類和其他生物體中持續(xù)不斷地產(chǎn)生。人類還暴露于來自外部/環(huán)境來源例如污染、陽光和飲食的R0S。盡管ROS具有不同的化學(xué)形式，但它們都對細(xì)胞成分和大分子的結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生有害作用。ROS產(chǎn)生/暴露的強(qiáng)度被稱為氧化應(yīng)激。氧化應(yīng)激與慢性炎性疾病例如糖尿病、癌癥、動(dòng)脈粥樣硬化和其他心血管疾病以及變性疾病例如阿茨海默氏病和帕金森氏病的發(fā)病機(jī)理相關(guān)。此外，多條證據(jù)支持氧化應(yīng)激是造成正常衰老的核心機(jī)制這一觀點(diǎn)。因此，對于開發(fā)抑制氧化應(yīng)激的治療方法存在著需求。發(fā)明概述據(jù)認(rèn)為，將氧化應(yīng)激降到最低對于健康和長壽來說是關(guān)鍵的。流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示， 富含抗氧化劑營養(yǎng)物的飲食提供極大益處。除了經(jīng)典的抗氧化劑維生素(維生素C和E) 之外，膳食植物含有許多在食用后表現(xiàn)出既快速又長期降低氧化應(yīng)激的多酚。已經(jīng)建立了幾種用于測量不同食物的抗氧化能力的體外測定方法，并且在多酚含量與抗氧化能力之間存在強(qiáng)烈關(guān)聯(lián)。盡管植物、包括葡萄提供了有前景的抗氧化劑來源，但植物化學(xué)物質(zhì)在人類群體中的廣泛使用還存在著顯著的障礙。例如，食物中的活性劑的生物利用度對于用作抗氧化劑來說通常不是最佳的。活性劑也可能集中在植物的某些部分中，而這些部分在用于食用的食品的典型制備中比率偏低或被丟棄。相關(guān)食物的不同種類也可能具有生物化學(xué)差異， 使它們對于治療性應(yīng)用來說不太合適。本發(fā)明人通過氧自由基吸收能力(ORAC)分析法進(jìn)行測量，確定了麝香葡萄果渣提取物和虎杖提取物單獨(dú)或組合(在混合物或膳食補(bǔ)充劑中)的抗氧化能力。樣品的親水性抗氧化能力和親脂性抗氧化能力都被測量。這些研究證實(shí)了混合物或膳食補(bǔ)充劑中的麝香葡萄果渣提取物和虎杖根提取物在產(chǎn)生親脂性抗氧化能力中的強(qiáng)烈協(xié)同效應(yīng)。在親脂性條件下表現(xiàn)出的選擇性協(xié)同是出乎意料的。這些發(fā)現(xiàn)證實(shí)了含有至少作為基本上純的白藜蘆醇源的虎杖提取物、和麝香葡萄果渣提取物兩者的混合物和膳食補(bǔ)充劑，與任一種單獨(dú)的提取物相比具有增加的抗氧化能力。本文公開了具有增加的抗氧化活性的組合物。在某些公開的實(shí)施方案中，組合物包括具有至少2%的多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源(例如虎杖根提取物)的最低純度為至少5%的白藜蘆醇，其中麝香葡萄多酚與反式白藜蘆醇的比率在0. 1/1到10/1 (重量/重量)的范圍內(nèi)，從而提供具有抗氧化活性的組合物。在具體實(shí)例中，組合物包括具有至少2%的多酚含量的麝香葡萄 (圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源(例如虎杖根提取物)的最低純度為至少5%的白藜蘆醇，其中麝香葡萄果渣提取物與白藜蘆醇的比率在0. 2/1到50/1 (重量/重量)、例如5/1到50/1 (重量/重量)或20/1到50/1 (重量/ 重量)的范圍內(nèi)，從而提供具有抗氧化活性的組合物。在某些實(shí)例中，組合物具有每mg多酚至少 24 μ mol Trolox 當(dāng)量(μ molTE/mg 多酚)的總 ORAC0在某些實(shí)例中，麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物具有約 4%的總多酚含量，并且組合物具有約18比1(重量/重量)的麝香葡萄果渣提取物與反式白藜蘆醇比率。在實(shí)例中，組合物具有約0.75比1(重量/重量)的麝香葡萄多酚與白藜蘆醇比率。在某些實(shí)例中，麝香葡萄果渣提取物在液體中可以包含20%到50%固形物。例如，麝香葡萄果渣提取物在液體中包含約40%固形物。在某些實(shí)例中，白藜蘆醇包含至少 98%的從虎杖(Polygonum cuspidatum)根提取的反式白藜蘆醇。在某些實(shí)例中，所公開的組合物還可以包括接骨木提取物、紫色胡蘿卜提取物、賦形劑(例如甘油、山梨糖醇、膠體二氧化硅或天然調(diào)味添加劑)或其組合。在具體實(shí)例中， 組合物包括組合物總量的23%到32%的麝香葡萄果渣提取物、總量的1. 2<%到3.0%的白藜蘆醇、總量的0. 12%到0. 20%的紫色胡蘿卜提取物、總量的0.4%到0.6%的接骨木提取物、總量的50%到61%的山梨糖醇、總量的8%到12%的99. 7%甘油組合物和總量的
到2%的膠體二氧化硅。在更具體的實(shí)例中，組合物包括總量的約觀.9%的麝香葡萄果渣提取物(包含約 4. 多酚)、總量的約1.65%的白藜蘆醇、總量的約0. 16%的紫色胡蘿卜提取物、總量的約0. 48%的接骨木提取物、總量的約54. 8%的山梨糖醇、總量的約10%的99. 7%甘油組合物、總量的約2%的膠體二氧化硅、約1. 27%的康科特(Concord)葡萄提取物、約0. 16%的解百納(Cabernet)葡萄提取物和約0. 48%的紅葡萄粉。在另一個(gè)具體實(shí)例中，組合物包括總量的約23. 77%的麝香葡萄果渣提取物(包含約5%多酚)、總量的約1.65%的白藜蘆醇、總量的約0. 16%的紫色胡蘿卜提取物、總量的約0. 48 %的接骨木提取物、總量的約60 %的山梨糖醇、總量的約10 %的99. 7 %甘油組合物、總量的約2%的膠體二氧化硅、約1. 27%的康科特葡萄提取物、約0. 16%的解百納葡萄提取物和約0. 48%的紅葡萄粉。任何所公開的組合物可以采用液體或固體的形式提供在非飲料食品、飲料或膳食補(bǔ)充劑中。此外，任何所公開的組合物可以用作抗氧化劑，例如抗衰老補(bǔ)充劑包括皮膚改善劑。例如，公開了阻止或抑制細(xì)胞衰老的方法，所述方法包括向需要的對象施用本公開的組合物，其施用的劑量足以在攝入組合物的對象中阻止或抑制與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程，例如阻止或抑制自由基的形成或活性。本文還提供了生產(chǎn)所公開的抗氧化組合物的方法。這些方法可以包括將具有至少 2%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物與來自麝香葡萄之外的來源的且反式白藜蘆醇最低純度為至少5%的白藜蘆醇組合，其中麝香葡萄多酚與反式白藜蘆醇的比率在0. 1/1到10/1 (重量/重量)的范圍內(nèi)，由此產(chǎn)生具有抗氧化活性的麝香葡萄果渣提取物和反式白藜蘆醇的混合物。在某些實(shí)例中，方法可以包括將具有至少2%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物與來自麝香葡萄之外的來源(例如虎杖根提取物)的且反式白藜蘆醇最低純度為至少5%的白藜蘆醇組合，其中麝香葡萄果渣提取物與白藜蘆醇的比率在0. 2/1到50/1 (重量/重量)、例如5/1 到50/1 (重量/重量)或20/1到50/1 (重量/重量)的范圍內(nèi)，包括18比1 (重量/重量)，由此提供具有抗氧化活性的組合物。所公開的方法還可以包括制備麝香葡萄果渣提取物，然后將麝香葡萄果渣提取物與反式白藜蘆醇組合。在一個(gè)具體實(shí)例中，制備麝香葡萄果渣提取物包括將青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物組合。在其他實(shí)例中，制備麝香葡萄果渣提取物包括從青銅色麝香葡萄果渣與紫色麝香葡萄果渣的混合物制備提取物。在具體實(shí)例中，方法包括通過將青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物相組合來制備麝香葡萄果渣提取物，其中青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率在0. 1到10 (重量/重量)、例如0. 3到3 (重量/重量)的范圍內(nèi)。在更具體的實(shí)例中，青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率為約2. 25 比1 (重量/重量)。從下面的詳細(xì)描述中，本公開的上述和其他特點(diǎn)將變得更加明顯。詳細(xì)描述I.縮寫和術(shù)語(a)縮寫FRAP 血漿三價(jià)鐵降低能力mg 毫克ml 毫升ORAC 氧自由基吸收能力ROS 活性氧TE =Trolox 當(dāng)量TEAC =Trolox當(dāng)量抗氧化能力wt 重量(b)術(shù)語提供了下面的術(shù)語和方法的解釋，以更好地描述本公開并指導(dǎo)本技術(shù)領(lǐng)域的普通專業(yè)人員實(shí)踐本公開。當(dāng)在本文和隨附的權(quán)利要求書中使用時(shí)，除非上下文另有明確指明， 否則不帶具體數(shù)量指示的名詞形式包括其復(fù)數(shù)指示物。除非上下文另有明確指明，否則術(shù)語“或”是指所陳述的可選要素的單一要素或兩個(gè)或多個(gè)要素的組合。本文中使用的“包含”意指“包括”。因此，“包含A或B”意指“包括A、B或A和B”，不排除其他要素。除非另有解釋，否則本文中使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本公開所屬技術(shù)領(lǐng)域中的普通專業(yè)人員所通常理解的相同的意義。盡管與本文所述的相似或等價(jià)的方法和材料可用于本公開的實(shí)踐或試驗(yàn)，但是下面描述了適合的方法和材料。此外應(yīng)該理解，不論是否陳述了單詞“約”或“大約”等，任何數(shù)量值都是近似值。除非另有指明，否則所有百分率和比率都以重量計(jì)算。
施用通過任何有效途徑向?qū)ο筇峁┗蚪o予藥劑，例如包含麝香葡萄果渣提取物和反式白藜蘆醇的組合物。示例性的施用途徑包括但不限于口服、注射(例如皮下、肌肉內(nèi)、真皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)和腫瘤內(nèi))、舌下、透皮、鼻內(nèi)、局部和吸入途徑。抗氧化活性包括清除和中和氧化性自由基的活性。抗氧化活性可以使用本文公開的方法以及本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法來測量，包括氧自由基吸收能力(ORAC)分析法、血漿三價(jià)鐵降低能力(FRAP)分析法和Trolox當(dāng)量抗氧化能力(TEAC)分析法。例如，如果組合物具有每mg多酚至少M(fèi) μ mol Trolox當(dāng)量(μ molTE/mg多酚)的總0RAC，則其具有抗氧化活性并可用作抗氧化劑。接骨木(西洋接骨木(Sambucus nigra))一種見于歐洲和北美洲的屬于五?；?Adoxaceae)的植物，具有幾個(gè)地區(qū)性品種或亞種?；槠降膫銧罨ㄐ颉{果為黑色到藍(lán)綠色，并含有花青苷和其他多酚物質(zhì)，其中花青苷和其他多酚物質(zhì)的量和類型隨品種而變?！敖庸悄咎崛∥铩笨梢允前凑毡炯夹g(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員已知的任何提取方法提取接骨木所獲得的物質(zhì)，只要它具有所需活性(例如顏色穩(wěn)定活性、抗氧化活性或其組合)即可。例如，接骨木提取物可以包括通過壓榨接骨木果實(shí)而獲得的果汁，或通過本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員所常規(guī)了解的任選提取方法提取接骨木的整果或果實(shí)的果皮或種子的適合部分而獲得的提取物等。此外，接骨木果實(shí)的壓碎產(chǎn)物或干燥的接骨木果實(shí)濃縮物，可以用作 “接骨木提取物”。賦形劑用作組合物活性成分的載體的無活性物質(zhì)。賦形劑可以包括用于為具有非常強(qiáng)活性成分的制劑增加體積、允許方便和精確配劑量、使活性成分穩(wěn)定和使遞送系統(tǒng)在光學(xué)和/或器官感覺上(organol印tically)可接受的物質(zhì)。藥用賦形劑的實(shí)例包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、稻米、面粉、白堊、硅膠、硬脂酸鈉、甘油單硬脂酸酯、滑石粉、氯化鈉、脫脂奶粉、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。在具體實(shí)例中，所公開的抗衰老補(bǔ)充劑包括下列賦形劑甘油、山梨糖醇、膠體二氧化硅和天然調(diào)味添加劑。抑制(包括阻止)細(xì)胞衰老在攝入組合物的對象中抑制(例如阻止)與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程，例如抑制自由基的形成或活性。阻止細(xì)胞衰老是指改善細(xì)胞衰老的征兆或癥狀的干預(yù)。阻止包括預(yù)防以延遲與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程的發(fā)生。 細(xì)胞衰老的阻止或抑制不需要完全沒有細(xì)胞衰老。在具體實(shí)例中，所公開的組合物使與細(xì)胞衰老相關(guān)的過程降低或延遲至少10%、至少20%、至少50%或甚至至少90%。這樣的降低可以使用本文公開的方法以及本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法測量。麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitus rotundifolia))原產(chǎn)于美國東南部的葡萄，見于從特拉華河(Delamare)到墨西哥灣并向西到密蘇里、堪薩斯、俄克拉荷馬和德克薩斯的野外。麝香葡萄非常適應(yīng)美國東南部的溫暖潮濕條件。結(jié)出的果實(shí)是3-40顆葡萄的松散小簇，與歐洲和美洲葡萄的大的、緊密成束的特征顯著不同。果實(shí)圓形，1到1-1/2英寸，具有厚的、堅(jiān)韌的果皮，并含有最多5粒堅(jiān)硬的橢圓形種子。果實(shí)的顏色范圍從發(fā)綠的青銅色到青銅色、桃紅色、紫色和幾乎黑色。麝香葡萄有許多不同品種可用，包括雌性(僅有雌蕊的)品種例如Black Beauty, Black Fry、Darlene、Fry、Higgins、Jumbo、Scuppernong、Sugargate> Summit、Supreme 禾口 Sweet Jenny,以及自花授粉的的品種例如 Carlos、Cowart, Dixieland、Dixie Red、Fry Seedless、Magnolia、Nesbitt、Noble、Redgate> Regale 禾口 Sterling。
例如，本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員所鑒定的青銅色麝香葡萄品種包括Carl0S、Ch0Wan、 Doreen、Higgins、Magnolia、Nevermiss、Pamlico、Roanoke、Scuppernong、Sterling 禾口 Summit 栽培品種。紫色到黑色品種包括 Albermarle、Bountiful、Cowart、GA-l、Hunt、NC-l、 Noble、Regale、Tarheel 禾口 Jumbo0完整的麝香葡萄的植物化學(xué)組分與歐洲葡萄(Vitis vinifera)不同。麝香葡萄具有較高的總酚類物質(zhì)含量，特征為鞣花、沒食子和類黃酮糖苷的濃度高。鞣花酸在麝香葡萄中的存在是獨(dú)有的，其被發(fā)現(xiàn)是游離鞣花酸、鞣花酸糖苷、甲氧基化衍生物和鞣花單寧的形式。另一個(gè)獨(dú)有特點(diǎn)是在麝香葡萄中觀察到的花青苷化學(xué)。這些化合物以非?；问阶鳛榛ù渌?、花青素、矮牽牛素、甲基花青素和二甲花翠素的3，5- 二葡萄糖苷(與3-葡萄糖苷相反)存在，與葡萄中存在的其他花青苷的天然顏色影響一起，賦予果汁和果渣暗紫色。 紫色果渣提取物含有花青苷，而青銅色果渣提取物不含。紅色和紫色花青苷是具有抗氧化性質(zhì)的多酚類化合物。黃酮醇是完整麝香葡萄中存在的第二豐富的類黃酮。麝香葡萄果皮級份中報(bào)道的主要酚類物質(zhì)(以降序)是鞣花酸、楊梅黃酮、槲皮黃酮和莰非醇，而種子中報(bào)道的是表兒茶素、兒茶素和沒食子酸 (Patrana-Bonilla 等，J. Agric. Food Chem. 51 :5497-5503, 2003)?？伤幱媒橘|(zhì)可用于本公開的可藥用介質(zhì)(載體)是常規(guī)的。E.W.Martin的 〈〈Remington 藥物學(xué)〉〉(Remington，s Pharmaceutical Sciences), Mack Publishing Co., Easton, PA，第19版(1995)描述了適用于一種或多種組合物、例如一種或多種麝香葡萄組合物與其他藥劑的藥物遞送的組合物和制劑?！銇碚f，介質(zhì)的性質(zhì)取決于所使用的具體給藥方式。例如，腸胃外制劑通常包含可注射流體，其包括藥物和生理可接受的流體例如水、生理鹽水、平衡鹽溶液、葡萄糖水、甘油等作為介質(zhì)。對于固體組合物(例如粉劑、丸劑、片劑或膠囊形式)來說，常規(guī)的無毒固體介質(zhì)可以包括例如藥用級甘露糖醇、乳糖、淀粉或硬脂酸鎂。除了生物中性介質(zhì)之外，待施用的藥物組合物可以包含少量無毒輔助物質(zhì)，例如潤濕或乳化劑、防腐劑、PH緩沖劑等， 例如乙酸鈉或失水山梨糖醇單月桂酸酯。純化的術(shù)語純化的不需要絕對純度；相反，它打算用作相對術(shù)語。因此，例如，純化的物質(zhì)是其中物質(zhì)比該物質(zhì)在其天然環(huán)境中例如在果實(shí)(例如葡萄)中更加富集的物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，制備物被純化，使得物質(zhì)占制備物總含量的至少約5% (例如但不限于至少 10%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%、95%、98%或99% )。在實(shí)例中，所公開的具有抗氧化活性的組合物包括反式白藜蘆醇，其最低純度為總白藜蘆醇制備物的至少 50%、70%、80%、90%、95%、98%或 99% (以重量計(jì))。果渣在果汁提取后剩余的果皮、種子和果肉。在一個(gè)實(shí)例中，果渣提取物是青銅色麝香葡萄果渣提取物、紫色麝香葡萄果渣提取物或其組合。許多不同品種的麝香葡萄果渣可用作原料，它們包括雌性(僅有雌蕊的)品種例如Black Beauty,Black Fry.Darlene, Fry>Higgins> Jumbo> Scuppernong> Sugargate> Summits Supreme 禾口 Sweet Jenny,以及自花授粉品禾中例如 Carlos、Cowart、Dixieland、Dixie RecUFry Seedless>Magnolia> Nesbitt> Noble、Redgate> Regale 禾口 Sterling。麝香葡萄果渣含有具有抗氧化性質(zhì)的酚類化合物，包括沒食子酸和鞣花酸。紫色胡蘿卜(Daucus carota)含有花青苷色素的胡蘿卜栽培品種?！白仙}卜提取物”可以是按照本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員已知的任何提取方法提取紫色胡蘿卜所獲得的物質(zhì)，只要它具有所需活性(例如顏色穩(wěn)定活性、抗氧化活性或其組合)即可。在一個(gè)實(shí)例中，紫色胡蘿卜提取物具有穩(wěn)定麝香葡萄顏色色素的性質(zhì)，并因此能夠隨后用作顏色穩(wěn)定添加劑。白藜蘆醇一種植物抗毒素，屬于芪類化合物，是芪的衍生物，并且在植物中在芪合酶的幫助下產(chǎn)生。白藜蘆醇作為兩種結(jié)構(gòu)異構(gòu)體存在順式和反式白藜蘆醇。當(dāng)加熱或暴露于紫外輻射時(shí)，反式白藜蘆醇可以經(jīng)歷異構(gòu)化變成順式形式。白藜蘆醇以各種各樣的量存在于葡萄、覆盆子、桑椹、李、花生、越桔物種包括藍(lán)莓、歐洲越桔和蔓越桔的漿果、某些松樹例如歐洲赤松和東部白松、以及大虎杖和虎杖的根和莖中。在葡萄中，白藜蘆醇主要發(fā)現(xiàn)于果皮和種子中。在葡萄果皮中發(fā)現(xiàn)的白藜蘆醇的量，隨著葡萄的栽培品種、其地理起源和在真菌感染中的暴露而變。在本文中使用的術(shù)語白藜蘆醇可以包括從植物例如葡萄提取的天然反式白藜蘆醇或合成的反式白藜蘆醇。當(dāng)在本文中使用時(shí)，術(shù)語白藜蘆醇可以包括反式白藜蘆醇的改性制劑，例如微囊化或可水分散的形式。對象活的多細(xì)胞有脊椎生物體，其類型包括人類和獸醫(yī)對象兩者。治療有效量可單獨(dú)或與其他藥劑(例如其他抗氧化劑)一起誘導(dǎo)所需的響應(yīng) (例如阻止或抑制細(xì)胞衰老)的組合物的量。本文公開的制備物可以治療有效量施用。在一個(gè)實(shí)例中，所需的響應(yīng)是在組合物所施用的對象中抑制或減少與一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞衰老過程相關(guān)的自由基的生產(chǎn)或活性。對于組合物的有效性來說，自由基的生產(chǎn)或活性不需被完全消除。例如，與不存在組合物情況下的自由基生產(chǎn)或活性相比，組合物可以將生產(chǎn)或活性降低期望的量，例如降低至少10 %、至少20 %、至少50 %、至少60 %、至少70 %、 至少80%、至少90%、至少95%或至少98%。所公開的麝香葡萄果渣提取物組合物的治療有效量，可以例如在治療過程期間每日以單劑或幾劑施用。但是，治療有效量可以取決于受治對象、受治病癥的嚴(yán)重性和類型以及給藥方式。例如，如果口服給藥，這種藥劑的治療有效量可以在每日約1到約500毫克反式白藜蘆醇、麝香葡萄多酚或其組合的范圍內(nèi)變化。單位劑量含有經(jīng)計(jì)算能夠單獨(dú)或共同產(chǎn)生所需效應(yīng)例如治療效應(yīng)的預(yù)定量活性物質(zhì)的物理上獨(dú)立的單位。單個(gè)單位劑量或多個(gè)單位劑量可用于提供所需的效應(yīng)或活性， 例如抗氧化活性。在一個(gè)實(shí)例中，單位劑量包括阻止或抑制與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程的所需量藥劑。II.幾個(gè)實(shí)施方案的描述已經(jīng)對植物藥劑作為可用于減少氧化應(yīng)激的營養(yǎng)劑的潛在來源，進(jìn)行了廣泛研究。紅葡萄是成為深入研究對象的眾多食物之一。紅葡萄的抗氧化效應(yīng)被大體上歸因于多酚類化合物例如白藜蘆醇和原花青素，后者在葡萄中以顯著量存在。本發(fā)明人進(jìn)行了一系列研究以開發(fā)足以提高鞣花酸的最大溶解度的麝香葡萄果渣提取物?，F(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，未濃縮的65 %比35 %的青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物(體積/體積)比率提高了鞣花酸在兩種果渣提取物之間的最大溶解度。確定鞣花酸(其是麝香葡萄獨(dú)有的)在麝香葡萄果渣提取物中的最大溶解度，允許制備鞣花酸溶解度增加的提取物(并因此獲得了果渣的多酚分布圖)，其進(jìn)而允許制備具有改進(jìn)的抗氧化活性的提取物。因此，本文公開了具有改進(jìn)的鞣花酸溶解度的麝香葡萄果渣提取物以及使用這些提取物的方法。例如，所公開的麝香葡萄提取物可以單獨(dú)或與其他化合物組合，在非飲料食品、飲料、膳食補(bǔ)充劑或局部用軟膏中施用。還提供了生產(chǎn)麝香葡萄果渣提取物的方法，所述方法包括將青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物組合以產(chǎn)生麝香葡萄果渣提取物，其中青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率在0. 1到10 (重量/重量)、例如0. 3到3 (重量/重量)的范圍內(nèi)。此外，通過ORAC分析法測量，本發(fā)明人測定了所公開的麝香葡萄果渣提取物和歸一化到98%反式白藜蘆醇的虎杖提取物分別或組合(在混合物或膳食補(bǔ)充劑中)的抗氧化能力。測量了樣品的親水性抗氧化能力和親脂性抗氧化能力兩者。這些研究了證實(shí)了混合物或膳食補(bǔ)充劑中麝香葡萄果渣提取物和歸一化到98%反式白藜蘆醇的虎杖根提取物在產(chǎn)生親脂性抗氧化能力中的強(qiáng)烈協(xié)同效應(yīng)。在親脂性條件下表現(xiàn)出的選擇性協(xié)同是出乎意料的。此外，盡管在組合物中使用的麝香葡萄提取物可以是可能隨物種、提取工藝等而變的天然提取物，但只要維持所公開的麝香葡萄多酚與白藜蘆醇的比率，即可保留協(xié)同親脂性抗氧化活性。這些發(fā)現(xiàn)證實(shí)了含有歸一化到98%反式白藜蘆醇的虎杖提取物、和麝香葡萄果渣提取物兩者的混合物和膳食補(bǔ)充劑，與任一種單獨(dú)的提取物相比具有增加的親脂性抗氧化能力。重要的是，在親脂性環(huán)境中發(fā)生的氧化性過程據(jù)認(rèn)為引起和/或啟動(dòng)了多種疾病狀態(tài)的病理發(fā)生，例如動(dòng)脈粥樣硬化中的低密度脂蛋白(LDL)氧化和II型糖尿病中肥胖誘導(dǎo)的胰島素抗性。此外，膳食脂類在胃腸道內(nèi)的氧化導(dǎo)致細(xì)胞毒性和基因毒性脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物例如丙二醛(MDA)的吸收。因此，所公開的具有高親脂性抗氧化能力的組合物可以提供有益作用，抵消上面提到的脂質(zhì)氧化的有害結(jié)果。該發(fā)現(xiàn)能夠提供具有改進(jìn)的抗氧化活性的麝香葡萄果渣提取物以及生產(chǎn)這些組合物的方法。例如，本文中公開的具有抗氧化活性的麝香葡萄果渣提取物，可以在非飲料食品、飲料、液體或固體膳食補(bǔ)充劑或局部用軟膏中施用。所公開的組合物的生產(chǎn)方法可以包括將具有至少2%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物與來自麝香葡萄之外的來源的最低純度為至少5%的反式白藜蘆醇相組合，其中麝香葡萄多酚與反式白藜蘆醇的比率在0. 1/1到10/1 (重量/重量)的范圍內(nèi)，由此產(chǎn)生具有抗氧化活性的麝香葡萄果渣提取物和反式白藜蘆醇混合物。所公開組合物的生產(chǎn)方法還可以包括將具有至少2%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物與來自麝香葡萄之外的來源的最低純度為至少5%的反式白藜蘆醇相組合，其中麝香葡萄果渣提取物與反式白藜蘆醇的比率在0. 2/1到50/1 (重量/重量)例如5/1到50/1 (重量/重量)、包括20/1到50/1(重量/重量)的范圍內(nèi)，例如18比1(重量/重量)，由此產(chǎn)生具有抗氧化活性的麝香葡萄果渣提取物和反式白藜蘆醇混合物。已發(fā)現(xiàn)親脂性抗氧化劑能夠有效阻止各種類型的皮膚傷害，例如但不限于抑制脂質(zhì)過氧化作用和由脂質(zhì)過氧化產(chǎn)生的產(chǎn)物，例如交聯(lián)劑。已知氧化應(yīng)激是構(gòu)成正常衰老基礎(chǔ)的核心機(jī)制。在本文中顯示，所公開的組合物具有改進(jìn)的親脂性抗氧化活性。基于這些觀察，公開了抑制細(xì)胞衰老、例如阻止或抑制自由基的產(chǎn)生或活性的方法。方法包括使用所公開的具有改進(jìn)的抗氧化能力的組合物(例如膳食補(bǔ)充劑)作為抗衰老補(bǔ)充劑。例如，能夠提供在攝入混合物或膳食補(bǔ)充劑組合物的對象中阻止或降低與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程，例如減少或抑制自由基的生產(chǎn)或活性的方法。A.麝香葡萄果渣提取物本文公開了源自于青銅色麝香葡萄果渣和紫色麝香葡萄果渣的麝香葡萄果渣提取物。在某些實(shí)施方案中，麝香葡萄果渣提取物中青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率在0. 1到10 (重量/重量)、例如0. 3到3 (重量/重量)的范圍內(nèi)。 例如，青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率為約2. 75比約1 (重量/重量)、2.5比約1(重量/重量)、約2. 25比約1(重量/重量)、約2比約1(重量/ 重量)、約1.5比約1(重量/重量)或約1比約1(重量/重量)。本文中使用的術(shù)語“約” 被定義為士0. 5。在具體實(shí)例中，青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率為約2. 25比約1 (重量/重量)。在某些實(shí)施方案中，所公開的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物具有至少2%的多酚含量。例如，多酚含量為至少3%、至少3. 5%、至少4%、至少 4. 5%、至少5%、至少6%、至少8%、至少10%、至少12%或至少14%。在具體實(shí)例中，麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物具有約4%的多酚含量。在某些實(shí)施方案中，所公開的麝香葡萄果渣提取物在液體中包含20%到50%固形物，例如至少25%、至少30%、至少35%、至少37%、至少40%、至少42%、至少44%、至少46%或至少48%。在具體實(shí)例中，提取物在液體中包含約40%固形物。B.麝香葡萄果渣提取物的制備方法還公開了制備麝香葡萄果渣提取物的方法，其中青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率在0. 1到10 (重量/重量)、例如0. 3到3 (重量/重量)的范圍內(nèi)。在一個(gè)公開的實(shí)施方案中，通過將青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物組合來制備麝香葡萄果渣提取物。在一個(gè)具體實(shí)施例中，通過將青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物組合來制備麝香葡萄果渣提取物，其中青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率在0. 1到10 (重量/重量)、例如從0. 3 到3(重量/重量)的范圍內(nèi)，包括約2. 75比約1(重量/重量)、2.5比約1(重量/重量)、 約2. 25比約1 (重量/重量)、約2比約1 (重量/重量)、約1. 5比約1 (重量/重量)或約1比約1 (重量/重量)。在更具體的實(shí)例中，通過將青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物組合來制備麝香葡萄果渣提取物，其中青銅色麝香葡萄提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率為約2. 25比1 (重量/重量)。在某些實(shí)例中，制備麝香葡萄果渣提取物的方法可以包括分別制備青銅色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物。例如，使用水、優(yōu)選為加熱的水分別提取青銅色麝香葡萄果渣和紫色麝香葡萄果渣。制備青銅色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物還可以包括對青銅色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物進(jìn)行發(fā)酵，以除去提取到的糖類。在一個(gè)實(shí)例中，發(fā)酵在提取青銅色麝香葡萄果渣和紫色麝香葡萄果渣之后、但是在青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物組合之前進(jìn)行，以生產(chǎn)所公開的麝香葡萄果渣提取物。在其他實(shí)例中，發(fā)酵在將青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物以所需的提取后比率(例如約2. 25比1的青銅色與紫色比率) 組合后進(jìn)行。發(fā)酵可以通過本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員已知的任何方法、包括本文描述的方法來進(jìn)行。例如，發(fā)酵可以包括向果渣加入酵母和酵母營養(yǎng)物，并使提取物發(fā)酵直到殘留的糖內(nèi)含物被轉(zhuǎn)化成乙醇。典型情況下，人們在每1000加侖1X(未濃縮的)提取物中使用2磅酵母。在這樣的實(shí)例中，發(fā)酵典型在3天后完成。在其他實(shí)例中，酵母的量和/或菌株以及發(fā)酵的持續(xù)時(shí)間和溫度可以根據(jù)本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員所知的具體方法而變。在某些實(shí)例中，可以使用酶在果渣提取物中澄清和/或沉降殘?jiān)?，或改進(jìn)提取收率。例如，這些酶可以包括果膠酶或來自黑曲霉(Aspergillus niger)的酶的混合物，并可以從供應(yīng)源例如kott Laboratories商購。這些酶可以在發(fā)酵前或發(fā)酵期間添加到果渣提取物中。在某些實(shí)施方案中，制備青銅色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物包括對青銅色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物進(jìn)行過濾。例如，可以在發(fā)酵之前和/或之后過濾青銅色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物。過濾可以按照本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員已知的通用方法、包括本文中公開的過濾方法來進(jìn)行。在具體實(shí)例中，提取物通過具有適合篩眼大小的篩網(wǎng)過濾，例如USP篩網(wǎng)(典型為120目)或類似的濾布(例如可以從Millipore Corporation商購的濾器)。在其他實(shí)施方案中，制備麝香葡萄果渣提取物可以包括將青銅色麝香葡萄果渣與紫色麝香葡萄果渣以所需比率組合，并同時(shí)提取青銅色麝香葡萄果渣和紫色麝香葡萄果渣。例如，使用水、優(yōu)選為加熱的水同時(shí)提取青銅色麝香葡萄果渣和紫色麝香葡萄果渣，以產(chǎn)生所公開的麝香葡萄果渣提取物。在某些實(shí)施方案中，該方法還可以包括對麝香葡萄果渣提取物進(jìn)行發(fā)酵以除去提取到的糖類。正如前面所述，可以使用本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員已知的任何發(fā)酵方法，包括本文中描述的方法。例如，發(fā)酵可以包括向果渣加入酵母和酵母營養(yǎng)物，并使提取物發(fā)酵直到殘余的糖內(nèi)含物被轉(zhuǎn)化成乙醇。在一個(gè)實(shí)例中，發(fā)酵包括在每 1000加侖IX提取物中加入2磅酵母，并允許提取物在室溫下保持約3天或直到殘余的糖內(nèi)含物被轉(zhuǎn)化成乙醇。該所公開的方法還可以包括對麝香葡萄果渣提取物進(jìn)行過濾。例如， 可以在發(fā)酵之前和/或之后對麝香葡萄果渣提取物進(jìn)行過濾。過濾可以按照本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員已知的通用方法、包括本文公開的過濾方法來進(jìn)行。在某些實(shí)施方案中，制備麝香葡萄果渣提取物的方法還包括濃縮青銅色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物，以便每種提取物在液體中包含20%到50%固形物，例如至少25 %、至少30 %、至少；35 %、至少37 %、至少40 %、至少42 %、至少44%、至少 46 %或至少48 %固形物。在具體實(shí)例中，將提取物濃縮以便每種提取物在液體中包含約 40%固形物?？梢允褂霉挠糜跐饪s樣品的方法、包括本文公開的用于濃縮樣品的方法來濃縮青銅色和紫色提取物。在具體實(shí)例中，為了制備含有40 %固形物的麝香葡萄果渣提取物，將麝香葡萄果渣提取物干燥成粉末形式，并在水中復(fù)溶成40%固形物水平?？蛇x地并且在商業(yè)上更加可接受的方法，是通過在真空下蒸發(fā)以除去提取溶劑來進(jìn)行濃縮。這可以通過批式或連續(xù)工藝來實(shí)現(xiàn)。批式工藝包括將提取物置于容器中，抽到20-29”汞柱的真空，同時(shí)加熱容器夾套來提供能量以增加溶劑的蒸汽壓。將溶劑蒸汽冷凝到容器外部，冷凝的速率控制冷凝物的溫度。同樣的原理適用于連續(xù)蒸發(fā)工藝，但優(yōu)點(diǎn)是縮短了冷凝物暴露于高溫的時(shí)間長度。 兩種工藝都適用于本文描述的麝香葡萄果渣提取物的濃縮。在具體實(shí)施方案中，制備麝香葡萄果渣提取物的方法包括分別提取青銅色和紫色果渣，然后過濾每種提取物，然后將青銅色和紫色果渣提取物以所需比率組合。在某些實(shí)例
13中，該方法還可以包括對合并的麝香葡萄果渣提取物進(jìn)行發(fā)酵，以除去提取到的糖類。正如前面所述，可以使用本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員已知的任何發(fā)酵方法，包括本文描述的方法。在一個(gè)實(shí)例中，方法包括一個(gè)以上的過濾步驟，例如在發(fā)酵之前和之后對提取物進(jìn)行過濾。在某些實(shí)例中，方法還可以包括如本文所述濃縮提取物。例如，方法可以包括通過在真空下蒸發(fā)以除去提取溶劑來濃縮提取物。C.具有抗氧化活性的組合物本文公開了具有改進(jìn)的抗氧化活性的組合物。在某些所公開的實(shí)施方案中，組合物包括具有至少2%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源(例如虎杖根提取物)的最低純度為至少5%的反式白藜蘆醇， 其中麝香葡萄多酚與反式白藜蘆醇的比率在0. 1/1到10/1(重量/重量)的范圍內(nèi)，從而提供具有抗氧化活性的組合物。在某些實(shí)例中，組合物包括具有至少3%、至少3. 5%、至少4%、至少4. 5%、至少 5%、至少6%、至少8%、至少10%、至少12%或至少14%的總多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源的最低純度為至少5%、至少10%、至少25%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少 85 %、至少90 %、至少95 %、至少97 %或至少98 %的反式白藜蘆醇。在具體實(shí)例中，組合物包含具有約4%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源的最低純度為至少98 %的反式白藜蘆醇。在具體實(shí)施方案中，組合物包括在液體中具有20%到50%固形物、例如至少 23%、至少25%、至少30%、至少35%、至少37%、至少40%、至少42%、至少44%、至少 46%或至少48%固形物的麝香葡萄果渣提取物。在具體實(shí)例中，提取物在液體中包含約 40%固形物。在某些實(shí)施方案中，白藜蘆醇包含至少5%反式白藜蘆醇，例如至少10%反式白藜蘆醇、至少20%反式白藜蘆醇、至少30%反式白藜蘆醇、至少40%反式白藜蘆醇、至少 50 %反式白藜蘆醇、至少55 %、至少60 %、至少70 %、至少75 %、至少80 %、至少85 %、至少 90%、至少95%、至少97%或至少98%反式白藜蘆醇。在具體實(shí)施方案中，白藜蘆醇包含至少50%反式白藜蘆醇，例如至少55%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少 85%、至少90%、至少95%、至少97%或至少98%從虎杖(Polygonum cuspidatum)根提取的反式白藜蘆醇?？紤]到了在本公開的組合物中可以使用其他反式白藜蘆醇來源，包括合成的反式白藜蘆醇。在某些實(shí)施方案中，所公開的抗氧化組合物具有至少0.1比1(重量/重量)的麝香葡萄多酚與反式白藜蘆醇比率，例如0. 25比1,0. 5比1,0. 6比1,0. 65比1,0. 7比1、 0. 75比1、0. 8比1、0. 9比1或1比1 (重量/重量)。在其他實(shí)施方案中，麝香葡萄多酚與反式白藜蘆醇的比率可以高達(dá)10比1 (重量/重量)，例如2比1、3比1、4比1、5比1、7. 5 比1或9比1 (重量/重量)。在具體實(shí)例中，所公開的抗氧化組合物具有0. 75比1 (重量 /重量)的麝香葡萄多酚與反式白藜蘆醇比率。在某些實(shí)施方案中，所公開的抗氧化組合物具有0. 2/1到50/1 (重量/重量)范圍內(nèi)的麝香葡萄果渣提取物與反式白藜蘆醇比率，例如0.5比1、1比1、5比1、10比1、15 比1、20比1、22比1、25比1、30比1、35比1、40比1或45比1 (重量/重量)。
在某些實(shí)施方案中，所公開的具有抗氧化活性的組合物具有每mg多酚至少 21 μ mo 1 Trolox當(dāng)量(μπιοΙΤΕ/mg多酚)的總0RAC，例如至少22 μ molTE/mg多酚、至少 24 μ molTE/mg 多酚、至少 26 μ mol TE/mg 多酚、至少 28 μ molTE/mg 多酚或至少 30 μ molTE/ mg多酚。在一個(gè)實(shí)例中，所公開的組合物具有My molTE/mg多酚的總0RAC。在某些實(shí)例中，所公開的組合物還可以包含接骨木提取物、紫色胡蘿卜提取物、賦形劑(例如甘油、山梨糖醇、膠體二氧化硅或天然調(diào)味添加劑)或其組合。例如，可以包含接骨木提取物和紫色胡蘿卜提取物，為組合物提供顏色或附加的抗氧化活性。在具體實(shí)例中，組合物包含占組合物總量的23%到32% (例如23%、24%、25%、 洸％、27%、28%、29%、30%、31%或32% )的麝香葡萄果渣提取物(含有約4%到5%多酚含量)、總量的 1.2%到 3.0% (例如 1. 3%、1. 5%、1. 7%、1. 9%、2. 1%、2. 3%、2. 5%、 2. 7%或2. 9%)的反式白藜蘆醇、總量的0. 12%到0.20% (例如0. 12%,0. 14%,0. 16%, 0. 18%或0.20% )的紫色胡蘿卜提取物、總量的0.4%到0.6% (例如0. 4 %、0. 45 %、 0.5%、0.55%或0.6%)的接骨木提取物、總量的50%到61% (例如51 %、52 %、53 %、 54%、55%、56%、57%、58%、59% 或 60%)的山梨糖醇、總量的 8% 到 12% (例如 8%、9%、 10%、11%或12%)的99. 7%甘油組合物，以及總量的到2% (例如1. 2%U. 5%U. 7% 或2% )的膠體二氧化硅。在其他具體實(shí)例中，組合物包含總組合物的8%到60%的麝香葡萄果渣提取物(含有以液體重量計(jì)2%到14%的麝香葡萄多酚)和總組合物的1.2%到 3.0%的反式白藜蘆醇。在更具體的實(shí)例中，組合物包含總量的到30%的麝香葡萄果渣提取物、總量的到2%的白藜蘆醇、總量的0. 到0.2%的紫色胡蘿卜提取物、總量的0.4%到 0.5%的接骨木提取物、總量的53%到56%的山梨糖醇、總量的9%到11 %的99. 7%甘油組合物、總量的1. 5%到2%的膠體二氧化硅、約到2%的康科特葡萄提取物、約0. 到 0. 2%的解百納葡萄提取物和0. 4%到0. 5%的紅葡萄粉。在更加具體的實(shí)例中，組合物包含總量的約觀.9%的麝香葡萄果渣提取物(含有4. 的多酚含量)、總量的約1.65%的反式白藜蘆醇、總量的約0. 16%的紫色胡蘿卜提取物、總量的約0. 48%的接骨木提取物、總量的約8%的山梨糖醇、總量的約10% 的99. 7%甘油組合物、總量的約2%的膠體二氧化硅、約1.27%的康科特葡萄提取物、約 0. 16%的解百納葡萄提取物和約0. 48%的紅葡萄粉。在另一個(gè)具體實(shí)例中，組合物包含總量的23%到25%的麝香葡萄果渣提取物、總量的到2%的白藜蘆醇、總量的0. 到0.2%的紫色胡蘿卜提取物、總量的0.4%到 0. 5 %的接骨木提取物、總量的58 %到61 %的山梨糖醇、總量的9 %到11 %的99. 7 %甘油組合物、總量的1. 5%到2%的膠體二氧化硅、約到2%的康科特葡萄提取物、0. 到 0. 2%的解百納葡萄提取物和0. 4%到0. 5%的紅葡萄粉。在另一個(gè)更加具體的實(shí)例中，組合物包含總量的約23. 77%的麝香葡萄果渣液體提取物(含有5%的多酚含量)、總量的約1.65%的反式白藜蘆醇、總量的約0. 16%的紫色胡蘿卜提取物、總量的約0. 48%的接骨木提取物、總量的約60. 05%的山梨糖醇、總量的約 10%的99. 7%甘油組合物、總量的約2%的膠體二氧化硅、約1. 27%的康科特葡萄提取物、 約0. 16%的解百納葡萄提取物和約0. 48%的紅葡萄粉。任何所公開的組合物可以提供在非飲料食品、飲料或液體或固體膳食補(bǔ)充劑中。在某些實(shí)例中，所公開的組合物被提供成飲料。本文的組合物(特別是食品、飲料和膳食補(bǔ)充劑組合物)可以用一種或多種營養(yǎng)物質(zhì)、特別是一種或多種維生素和/或礦物質(zhì)強(qiáng)化。維生素和礦物質(zhì)的美國推薦每日攝入量(U. S. Recommended Daily Intake) (USRDI) 在國家科學(xué)院-國家研究理事會(huì)下食品和營養(yǎng)委員會(huì)(Food and Nutrition Board, National Academy of Sciences-National Research Council)白勺月善Hi午fi》 (Recommended Daily Dietary Allowance)中規(guī)定和說明。除非在本文中另有規(guī)定，否則當(dāng)產(chǎn)品中存在給定礦物質(zhì)時(shí)，產(chǎn)品包含這種礦物質(zhì)的USRDI的至少約1%，例如至少約5%、至少約10%、至少約20%、至少約50%、至少約75%、至少約100%、至少約150%。除非在本文中另有規(guī)定，否則當(dāng)產(chǎn)品中存在給定維生素時(shí)，產(chǎn)品包含這種維生素的USRDI的至少約 1%，例如至少約5%、至少約10%、至少約20%、至少約50%、至少約75%、至少約100%、 至少約150%。所添加的維生素和礦物質(zhì)的量可以取決于加工方法和制劑中其他成分的濃度。這些維生素和礦物質(zhì)的非限制性的實(shí)例包括鐵、鋅、銅、鈣、磷、煙酸、硫胺素、葉酸、泛酸、碘、維生素A、維生素C、維生素B2、維生素B3、維生素B6、維生素B 12、維生素D、維生素E和維生素K。商購來源的維生素和礦物質(zhì)也可以包含在本發(fā)明的組合物中。例如，可以使用這些礦物質(zhì)適合于包含在可食用產(chǎn)品中的任何可溶性鹽，例如檸檬酸鎂、葡萄糖酸鎂、硫酸鎂、氯化鋅、硫酸鋅、碘化鉀、硫酸銅、葡萄糖酸銅和檸檬酸銅。 鈣的來源可以包括例如氨基酸螯合鈣、碳酸鈣、氧化鈣、氫氧化鈣、硫酸鈣、氯化鈣、磷酸鈣、磷酸氫鈣、磷酸二氫鈣、檸檬酸鈣、蘋果酸鈣、calcium titrate、葡萄糖酸鈣、calcium realate,calcium tantrate和乳酸鈣，特別是檸檬酸-蘋果酸鈣。當(dāng)在本文中使用時(shí)，“維生素A”包括但不限于視黃醇、β-胡蘿卜素、視黃醇棕櫚酸酯和視黃醇乙酸酯。維生素A可以采用油、珠丸(beadlet)或囊封的形式。也可以使用囊封的抗壞血酸和抗壞血酸的可食用鹽。碘的來源包括含碘鹽類，例如碘化鈉、碘化鉀、碘酸鉀、碘酸鈉或其混合物。這些鹽類可以被囊封。鐵的可接受形式在本技術(shù)領(lǐng)域中是公知的。摻入到組合物中的鐵化合物的量將隨最終產(chǎn)品中所需的增補(bǔ)水平和所針對的消費(fèi)者而廣泛變化。本公開的鐵強(qiáng)化組合物典型地包含鐵的USRDI的約5 %到約100 %，例如約15 %、約25 %、約40 %、約50 %、約70 %、 約80%或約90%。亞鐵典型地比三價(jià)鐵更好被身體利用。可用于本公開的可攝取組合物的高度生物可利用的亞鐵鹽是硫酸亞鐵、延胡索酸亞鐵、琥珀酸亞鐵、葡萄糖酸亞鐵、乳酸亞鐵、酒石酸亞鐵、檸檬酸亞鐵、亞鐵氨基酸螯合物以及這些亞鐵鹽的混合物。盡管亞鐵典型生物利用， 但某些三價(jià)鐵鹽也能提供高度生物可利用的鐵源?？捎糜诒竟_的食品或飲料組合物中的高度生物可利用的三價(jià)鐵鹽是蔗糖酸鐵、檸檬酸鐵銨、檸檬酸鐵、硫酸鐵以及這些三價(jià)鐵鹽的混合物。高度生物可利用的亞鐵和三價(jià)鐵鹽的組合或混合物可用于這些可食用混合物和即食飲料中。除了這些高度生物可利用的亞鐵和三價(jià)鐵鹽之外，其他來源的生物可利用的鐵可以包含在本公開的食品和飲料組合物中。特別適合于強(qiáng)化產(chǎn)品的鐵的其他來源包括某些鐵-糖-羧酸復(fù)合物?？捎糜诒竟_的組合物的鋅化合物可以采用任何常用形式，例如硫酸鋅、氯化鋅、 乙酸鋅、葡萄糖酸鋅、抗壞血酸鋅、檸檬酸鋅、天冬氨酸鋅、吡啶甲酸鋅、氨基酸螯合鋅和氧化鋅。
在某些實(shí)例中，食品和飲料組合物還可以包含一種或多種膳食纖維?！吧攀忱w維” 是指對哺乳動(dòng)物酶類的消化有抗性的復(fù)雜的碳水化合物，例如見于植物細(xì)胞壁和海藻中的碳水化合物，以及通過微生物發(fā)酵生產(chǎn)的碳水化合物。這些復(fù)雜碳水化合物的實(shí)例是麩皮、 纖維素、半纖維素、果膠、樹膠和粘膠粘、海藻提取物和生物合成的樹膠。纖維素質(zhì)纖維的來源包括蔬菜、水果、種子、谷類和人造纖維(例如由細(xì)菌合成)。也可以使用可商購纖維例如純化的植物纖維素或纖維素粉。天然存在的纖維包括來自完整柑橘果皮、柑橘內(nèi)皮、甜菜、 柑橘果肉和果囊固形物、蘋果、杏和西瓜皮的纖維?？梢酝ㄟ^已知和常用的方法例如使用食品級酸緩沖劑，將飲料酸度調(diào)整到并維持在必需范圍內(nèi)。典型情況下，上面提到的范圍內(nèi)的飲料酸度是抑制微生物的最高酸度與所需飲料口味的最適酸度之間的平衡。在某些實(shí)例中，飲料組合物具有約2到約8，例如約2 到約4. 5或約2. 7到約4. 2的pH。可以使用有機(jī)以及無機(jī)的可食用酸來調(diào)整飲料組合物的pH。酸能夠以其未離解的形式或可選地作為其相應(yīng)的鹽存在，例如磷酸氫鉀或鈉、磷酸二氫鉀或鈉鹽。在某些實(shí)例中，酸包括檸檬酸、蘋果酸、延胡索酸、己二酸、磷酸、葡萄糖酸、酒石酸、抗壞血酸、乙酸、磷酸、丙酮酸或其混合物。酸化劑也可以用作抗氧化劑以穩(wěn)定飲料組分。常用的抗氧化劑的實(shí)例包括但不限于抗壞血酸、EDTA(乙二胺四乙酸)及其鹽。D.具有抗氧化活性的麝香葡萄組合物的制備方法還公開了具有抗氧化活性的麝香葡萄果渣提取物組合物的制備方法。本發(fā)明的組合物可以按照普通專業(yè)人員熟知的方法來制造。一般來說，可以通過將所有組分單獨(dú)或適當(dāng)?shù)亟M合在一起，在水中溶解、分散或以其它方式混合，適合的情況下用機(jī)械攪拌器攪拌直到所有成分已經(jīng)溶解或充分分散，來制備組合物。在適合時(shí)，可以將所有分離的溶液組合。 當(dāng)需要儲(chǔ)存穩(wěn)定的組合物時(shí)，最終的混合物可以任選地在適合的工藝條件下進(jìn)行巴斯德消毒或無菌裝填。這些方法可以包括將含有至少2%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物與來自麝香葡萄之外的來源的最低純度為至少5% (例如至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少 90%、至少95%、至少98%或至少99% )的白藜蘆醇組合，其中麝香葡萄多酚與反式白藜蘆醇的比率在0. 1/1到10/1(重量/重量)的范圍內(nèi)，由此產(chǎn)生具有抗氧化活性的麝香葡萄果渣提取物和反式白藜蘆醇的混合物。所公開的方法還可以包括制備麝香葡萄果渣提取物，然后將麝香葡萄果渣提取物與反式白藜蘆醇組合。在一個(gè)具體實(shí)例中，制備麝香葡萄果渣提取物包括將青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物組合。在其他實(shí)例中，制備麝香葡萄果渣提取物包括同時(shí)提取青銅色麝香葡萄果渣與紫色麝香葡萄果渣的混合物。在某些實(shí)例中，包含在本公開的組合物中的麝香葡萄果渣提取物按照本文公開的方法制備。但是，考慮到了麝香葡萄果渣提取物可以按照本技術(shù)領(lǐng)域的已知方法制備，包括通過壓碎、壓榨、提取、過濾(幾次)并通過真空蒸發(fā)然后冷凍來濃縮提取物。在一個(gè)實(shí)例中，在提取工藝中只使用水，不向提取物自身添加其他成分例如溶劑、載體或防腐劑。工藝在保存多酚類化合物同時(shí)減少存在的其他分子例如大部分糖類的條件下進(jìn)行。在其他實(shí)例中，提取工藝?yán)昧艘掖蓟蛞掖寂c水的混合物。在具體實(shí)例中，提取工藝還可以包括使用酶類來澄清或促進(jìn)提取。例如，來自黑曲
17霉(Aspergillus niger)或果膠酶的酶的混合物可用于這些目的。商業(yè)化的實(shí)例包括來自 Scott Laboratories 的 Scottzyme KS 禾口 Scottzyme PEC5L。在其他實(shí)例中，通過利用總酚濃度為至少2%的麝香葡萄果渣提取物來制備所公開的組合物。例如，可以使用總酚濃度為至少2%的可商購麝香葡萄提取物來制備所公開的具有抗氧化活性的組合物。在具體實(shí)例中，具有抗氧化活性的組合物的制備方法還可以包括將麝香葡萄果渣提取物和白藜蘆醇與接骨木提取物、紫色胡蘿卜提取物、賦形劑(例如甘油、山梨糖醇、膠體二氧化硅或天然調(diào)味添加劑)或其組合進(jìn)行組合。在具體實(shí)例中，方法包括將總組合物的23%到32%的麝香葡萄果渣提取物(含有約4%到約5%多酚含量)與總量的1.2% 到3. 0%的反式白藜蘆醇、總量的0. 12%到0. 20%的紫色胡蘿卜提取物、總量的0. 4%到 0.6%的接骨木提取物、總量的50%到61 %的山梨糖醇、總量的8%到12%的99. 7%甘油組合物和總量的到2%的膠體二氧化硅進(jìn)行組合。在更具體的實(shí)例中，組合物包括將總量的約觀.9%的麝香葡萄果渣提取物(含有 4. 多酚含量)與總量的約1. 65%的白藜蘆醇、總量的約0. 16%的紫色胡蘿卜提取物、總量的約0. 48%的接骨木提取物、總量的約54. 8%的山梨糖醇、總量的約10%的99. 7%甘油組合物、總量的約2%的膠體二氧化硅、約1. 27%的康科特葡萄提取物、約0. 16%的解百納葡萄提取物和約0. 48%的紅葡萄粉相組合。在另一個(gè)更具體的實(shí)例中，組合物包括將總量的約23. 77%的麝香葡萄果渣液體提取物(含有5%多酚含量)與總量的約1.65%的反式白藜蘆醇、總量的約0. 16%的紫色胡蘿卜提取物、總量的約0. 48%的接骨木提取物、總量的約60. 05%的山梨糖醇、總量的約 10%的99. 7%甘油組合物、總量的約2%的膠體二氧化硅、約1. 27%的康科特葡萄提取物、 約0. 16%的解百納葡萄提取物和約0. 48%的紅葡萄粉相組合。在即飲組合物的制備中，可以任選地首先形成飲料濃縮物。制備濃縮形式的飲料組合物的一種方法，是以比用于飲料組合物的制備中所需的水體積更少的水開始。另一種方法是將最終制備的飲料組合物部分脫水，以便僅除去一部分水和存在的任何其他揮發(fā)性液體。脫水可以按照公知的程序例如在真空蒸發(fā)來實(shí)現(xiàn)。濃縮物可以采取相對濃的液體的形式。稠漿液典型地通過向飲料濃縮物中添加適合成分例如電解質(zhì)或乳液來形成。然后將稠漿液與水混合以形成成品飲料或成品飲料濃縮物。所公開的組合物的基本上干燥的混合物可以通過將適當(dāng)量和比率的所有所需干燥成分混合在一起來制備?？蛇x地，可以將最終制備的飲料組合物脫水以給出飲料組合物的基本上干燥的混合物?；旧细稍锏幕旌衔锘蛘咦鳛槔绶勰?、顆?；蚱瑒┛梢砸院笕芙庠谶m量的含碳酸或不含碳酸的水中，以制成最終的可飲用飲料，或與水一起服用。作為食品的形式，所公開的組合物可以配制成任何任選形式，例如顆粒狀態(tài)、晶粒狀態(tài)、糊劑狀態(tài)、凝膠狀態(tài)、固體狀態(tài)或液體狀態(tài)。在這些形式中，可以包含各種其他物質(zhì)， 例如粘合劑、崩解劑、增稠劑、分散劑、重吸收促進(jìn)劑、調(diào)味劑、緩沖劑、表面活性劑、溶解助劑、防腐劑、乳化劑、等滲劑、穩(wěn)定劑或PH控制劑。在具體實(shí)例中，當(dāng)所公開的組合物被用作保護(hù)健康(包括但不限于改善膚質(zhì))的食品、功能食品等時(shí)，它優(yōu)選包含本發(fā)明的組合物和提取物(例如麝香葡萄果渣提取物、白藜蘆醇、紫色胡蘿卜提取物和接骨木提取物)的活性成分，其量使得本公開的預(yù)定效應(yīng)表現(xiàn)出足以提供抗氧化活性。
E.用于抑制(例如阻止)細(xì)胞衰老的方法和試劑盒本文中顯示了具有改進(jìn)的親脂性抗氧化活性的所公開組合物。已知氧化應(yīng)激是構(gòu)成正常衰老的基礎(chǔ)的核心機(jī)制。也已知道，親脂性抗氧化劑能夠抑制各種類型的皮膚傷害。 基于這些觀察，公開了抑制細(xì)胞衰老、例如抑制或降低自由基的產(chǎn)生和活性的方法。在一個(gè)實(shí)例中，方法包括向需要的對象施用具有抗氧化活性的所公開組合物，其劑量足以抑制或降低與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程。例如，抑制與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程包括在攝入組合物的對象中降低或抑制自由基的形成或活性。在某些所公開的實(shí)施方案中，方法包括施用可攝取的例如本文描述的組合物，組合物包含源自于青銅色麝香葡萄果渣和紫色麝香葡萄果渣的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物。在某些實(shí)施方案中，麝香葡萄果渣提取物中青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率在0. 1到10 (重量/重量)、例如0. 3到3 (重量/重量)的范圍內(nèi)。例如，青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率為約2. 75比約1(重量/重量)、2.5比約1(重量/重量)、約2. 25比約1 (重量/重量)、 約2比約1 (重量/重量)、約1. 5比約1 (重量/重量)或約1比約1 (重量/重量)。本文中使用的術(shù)語“約”被定義為士0.5。在具體實(shí)例中，青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率為約2. 25比約1 (重量/重量)。在某些實(shí)施方案中，口服的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物具有至少2%的多酚含量。例如，多酚含量為至少3%、至少3. 5%、至少4%、至少 4. 5%、至少5%、至少6%、至少8%、至少10%、至少12%或至少14%。在具體實(shí)例中，麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物具有約4%的多酚含量。在某些實(shí)施方案中，方法包括施用可攝取的組合物，組合物包含麝香葡萄果渣提取物以及其他附加成分，包括但不限于白藜蘆醇。在某些實(shí)例中，方法包括施用具有約0. 75 比1(重量/重量)的麝香葡萄多酚與白藜蘆醇比率的口服組合物。在其他實(shí)例中，方法包括施用至少包含麝香葡萄果渣提取物總組合物的8%到60%的麝香葡萄果渣提取物(包含以液體重量計(jì)2%到14%，例如4^^6^^8^^10%或12%的麝香葡萄多酚)和總量的 1. 2 %到3. 0 %的反式白藜蘆醇的組合物。在其他實(shí)施方案中，方法包括施用口服組合物，組合物包含具有至少2 %多酚含量的麝香葡萄果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源(例如虎杖根提取物)的最低純度為至少5%的白藜蘆醇，其中麝香葡萄多酚與反式白藜蘆醇的比率在0. 1/1到10/1 (重量/重量)的范圍內(nèi)，由此提供具有足以抑制或降低與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程(包括但不限于改善膚質(zhì))的抗氧化活性的組合物。在具體實(shí)例中，方法包括施用組合物，組合物包含具有至少2%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源(例如虎杖根提取物)的最低純度為至少5%的白藜蘆醇，其中麝香葡萄果渣提取物與白藜蘆醇的比率在0. 2/1到50/1 (重量/重量)，例如5/1到50/1 (重量/重量)或20/1到50/1 (重量/重量)的范圍內(nèi)，由此提供具有抗氧化活性的組合物。 在某些實(shí)例中，組合物具有每mg多酚至少M(fèi) μ mol Trolox當(dāng)量(μ molTE/mg多酚)的總 ORAC。在其他實(shí)施方案中，施用含有單獨(dú)或與其他活性成分包括但不限于白藜蘆醇組合的麝香葡萄果渣提取物的溶液或局部用軟膏，通過抑制或降低皮膚細(xì)胞中的自由基形成或活性，提供了改善膚質(zhì)的方法。在一個(gè)實(shí)例中，溶液或局部用軟膏包含所公開的麝香葡萄果渣提取物但不含白藜蘆醇。在另一個(gè)實(shí)例中，溶液或局部用軟膏包括所公開的麝香葡萄果渣提取物和白藜蘆醇兩者，例如麝香葡萄果渣提取物包含的麝香葡萄多酚濃度使得麝香葡萄多酚與白藜蘆醇的比率約為0. 75比1 (重量/重量)。方法可以由臨床醫(yī)生或其他健康護(hù)理提供者執(zhí)行。方法還被設(shè)計(jì)用于家中使用。方法可以減少與衰老相關(guān)的皮膚外觀的變化、 可見地減少人類皮膚皺紋并改進(jìn)皮膚的肌理質(zhì)量。還提供了用于改善膚質(zhì)的組合物和試劑盒，組合物和試劑盒可以包含所公開的具有抗氧化活性的組合物(包括口服和局部用)或麝香葡萄提取物與一種或多種其他的抗衰老組合物，例如一種或多種其他抗氧化劑。任何皮膚表面(例如皮膚的表皮)都可以使用本文提供的方法處理?？梢蕴幚淼钠つw表面包括但不限于眼眶、嘴唇、面頰、鼻唇溝、前額、頸部、上唇紋(rhytides)、胃部、頸部、背部、胸部、手部、腿部、足部或其任何組合。在實(shí)例中，可以使用本文提供的方法處理任何面部表面的皮膚。方法可以應(yīng)用于任何面部區(qū)域和/或任何身體表面區(qū)域，其他可直接施用的區(qū)域是胸部和頸部。在同一次處理期間可以處理一個(gè)以上皮膚表面。在具體實(shí)例中， 將液體或霜?jiǎng)┬问降谋竟_的組合物或提取物基本上均勻地施加在皮膚表面上，在皮膚上形成一層組合物或提取物。所公開的組合物或提取物可以包含其他慣常用于化妝品的物質(zhì)，例如香料；抗微生物劑；抗細(xì)菌劑；加脂劑；絡(luò)合和螯合劑；珠光劑；植物提取物；維生素例如視黃醇或維生素C ；活性劑；防腐劑；殺菌劑；表面活性劑；染料、色素、顏料或任何具有著色效應(yīng)的物質(zhì)；乳化劑；增稠劑；軟化、加濕和/或保濕物質(zhì)；或化妝或皮膚制劑的其他常見組成成分， 例如醇類、多元醇、聚合物、泡沫穩(wěn)定劑、電解質(zhì)、有機(jī)溶劑或有機(jī)硅衍生物。組合物還可以包含功能性添加劑，例如角質(zhì)軟化劑、氧化劑、防曬劑和皮膚光滑劑。組合物還可以包含據(jù)認(rèn)為在皮膚及其下方的皮下組織的中胚層療法注射治療中有益的組分，包括抗氧化劑例如二甲基氨基乙醇、α -硫辛酸和抗壞血酸。組合物中也可以包含可增強(qiáng)組合物或提取物的功效的藥劑，例如親脂性和疏脂性滲透增強(qiáng)劑(例如檸檬酸三乙酯、丙二醇、脂肪酸酯等)。可以增強(qiáng)皮膚的血管灌注的藥劑例如氨茶堿或己酮可可堿，也可以包含在組合物中。組合物中還可以包含可增加皮膚的充盈和張力以及允許下方的皮下組織結(jié)構(gòu)縮緊或收縮的藥劑， 例如磷脂酰膽堿和硫酸脫氧膽酸?？梢蕴峁┘に匾嫣幍纳砦镔|(zhì)，例如引起皮膚的雌激素或雄激素刺激的物質(zhì)，包括雌三醇和睪酮，也可以包含在組合物中。所公開的麝香葡萄組合物可以包含一種或多種防腐劑。這些防腐劑包括例如 Opthiphen (來自 International Specialty Products 公司)、Geogard Ultra (來自 Lonza公司)、列入《歐盟化妝品指令》(European Union Cosmetic Directive)的防腐劑等，例如甲醛供體(例如DMDM乙內(nèi)酰脲，其可以在商品名GLYDAN 下從Lonza公司購買)、 丁基氨基甲酸碘代丙酯(例如可以在商品名GLYCACIL-STM下從L0NZATM公司購買和/或在DEKABEN LMBTM下從Jan Dekker公司購買的)、對羥苯甲酸酯(例如對羥基苯甲酸的烷基酯，例如對羥苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯和/或丁酯)、苯氧乙醇、乙醇、苯甲酸和水楊酸。防腐系統(tǒng)還可以包含防腐助劑，例如辛氧基甘油或大豆油(glycine soya) 0其他防腐劑或防腐助劑包括二溴氰基丁烷(2-溴-2-溴甲基戊二腈)、3_碘-2-丙炔基丁基氨基甲酸酯、 2-溴-2-硝基丙烷-1，3- 二醇、咪唑烷基脲、5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮、2-氯乙酰胺、苯扎氯銨和苯甲醇。
組合物還可以包含一種或多種調(diào)理劑，例如水溶性調(diào)理劑。其他調(diào)理劑包括例如根據(jù)《化妝品成分國際命名法》(International Nomenclature for Cosmetic Ingredients(INCI))被稱為聚季胺鹽的化合物，特別是聚季胺鹽_1到聚季胺鹽_56。組合物可以從軟管、廣口瓶、瓶、泵、罐、噴霧罐或噴霧瓶，或從一些其他已知容器分配。在本文中還公開了在家中或由臨床醫(yī)生使用的用于改善膚質(zhì)的麝香葡萄果渣提取物組合物和試劑盒。在一個(gè)實(shí)例中，該試劑盒適合于由臨床醫(yī)生或美容師使用。在這樣的實(shí)例中，試劑盒還可以包含涂敷器，用于輔助組合物的施加。一般來說，試劑盒還包含使用說明書。這些說明書可以是書面的，或是用于電子裝置例如計(jì)算機(jī)、⑶播放器、mp3播放器或DVD播放器等的數(shù)字格式(例如錄像帶、DVD或CD)。在另一個(gè)實(shí)例中，試劑盒適合于在家使用。該試劑盒可以包括涂敷器例如海綿或布，用于施加組合物?？蛇x地，可以使用一個(gè)或多個(gè)手指施加組合物。一般來說，試劑盒還包括使用說明書。這些說明書可以是書面的，或是用于電子裝置例如計(jì)算機(jī)、CD播放器、mp3播放器或DVD播放器的數(shù)字格式(例如錄像帶、DVD或CD)。在某些實(shí)例中，試劑盒包含一種本公開的組合物或提取物以及一種或多種其他的抗衰老化合物例如另一種抗氧化劑(例如維生素C、維生素E、硒和/或β -胡蘿卜素)，其在兩個(gè)分開的容器中或作為單一組合物在單一容器中。在一個(gè)實(shí)例中，組合物或提取物被施加到靶皮膚區(qū)域上。在一個(gè)具體的非限制性實(shí)例中，麝香葡萄果渣提取物抗衰老試劑盒可以由個(gè)人在家中如下使用。首先，通過使用涂敷器例如海綿或布、或通過使用一個(gè)或多個(gè)手指將酌量的組合物或提取物施加到皮膚表面，以在皮膚表面上提供組合物或提取物的均勻的層。允許組合物或提取物經(jīng)過一定時(shí)間長度以被動(dòng)吸收到皮膚表面中，或組合物/提取物被皮膚表面的吸收可以通過用指尖將組合物輕柔摩擦到皮膚表面中來促進(jìn)。一般來說，在施加麝香葡萄果渣組合物/提取物后，可以繼續(xù)進(jìn)行正常的皮膚護(hù)理程序，例如上妝和施加其他保濕劑。該過程可以按照描述每天兩次、每天一次、每兩天一次、每周兩次、每周一次、每兩周一次或每月一次，或使用一些其他的時(shí)間間隔例如每3到5天一次來進(jìn)行。改善膚質(zhì)包括逆轉(zhuǎn)、減慢與天然或固有的衰老相關(guān)的皮膚變化的進(jìn)程或阻止所述皮膚變化。在本文中使用，阻止及其變化形式是指皮膚變化的發(fā)生的任何程度的延遲。例如，改善膚質(zhì)包括逆轉(zhuǎn)、 減慢與自由基形成和活性相關(guān)的皮膚變化的進(jìn)程或阻止所述皮膚變化。在一個(gè)實(shí)例中，改善膚質(zhì)包括逆轉(zhuǎn)、減慢與暴露于日光或其他形式的光化學(xué)輻射(例如UV輻射和曬黑機(jī))相關(guān)的日光損傷或光致衰老性皮膚變化的進(jìn)程或阻止所述皮膚變化。作為另一個(gè)實(shí)例，改善膚質(zhì)還可以包括逆轉(zhuǎn)、減緩由外界因素包括但不限于輻射、空氣污染、風(fēng)、寒冷、潮濕、熱、化學(xué)物質(zhì)、煙、吸煙及其組合引起的皮膚變化的進(jìn)程或阻止所述皮膚變化。改善膚質(zhì)還可以包括逆轉(zhuǎn)、阻止或減少可由某些皮膚病癥(例如痤瘡)、感染(例如利什曼病)或損傷(例如擦傷、刺傷、劃傷或手術(shù)傷口)引起的瘢痕形成。皮膚的改善還可以包括至少下列之一使面部紋路顯得不太顯著，使面部紋路和/或皺紋感覺充起，改善眼眶下紋路和/或眼眶周圍紋路的外觀，改善魚尾紋的外觀，減少和/或消除皺紋的出現(xiàn)、特別是面頰、前額(例如眼睛之間的豎皺紋、眼睛上方的橫皺紋)上和/或嘴周圍的面部皺紋、以及特別是深皺紋、褶皺或皺痕的出現(xiàn)，改善皮膚柔軟性，減少和/或消除細(xì)紋和/或深紋、褶皺和皺痕，以及使皮膚光滑。用于測量膚質(zhì)改善的方法在本技術(shù)領(lǐng)域中是已知的。參見例如美國專利No. 6，866，856 和 6，682，763。可以通過實(shí)踐本文公開的方法和使用本文公開的試劑盒治療的皮膚變化包括例如皺紋(包括但不限于人類面部皺紋)、皺痕、深紋、褶皺和細(xì)紋，皮膚紋路加深，皮膚變薄， 阻止或減少瘢痕、皮膚發(fā)黃、色斑形成、色素沉著過度、色素沉著和/或非色素沉著老年斑的出現(xiàn)、革質(zhì)化、失去彈性、失去回彈能力、失去膠原纖維、彈性纖維的異常變化、真皮小血管的退化、皮膚表面上日曬增加的可見血管的形成，及其組合。改善膚質(zhì)包括減少、減輕和/或最小化一種或多種上面討論的皮膚變化。改善膚質(zhì)可以導(dǎo)致皮膚具有更年輕的外觀。改善膚質(zhì)可以導(dǎo)致皮膚具有更光滑、含水(不太干燥) 或較少起屑的外觀。例如，在某些實(shí)施方案中，改善膚質(zhì)可以包括減少粗糙度、干燥度或起屑。改善膚質(zhì)包括消除和改善紋路和皺紋、改善充盈和張力，具有觀察到的所需提升和拉緊效應(yīng)?？梢愿纳破つw的肌理特性，包括柔軟度、柔順性和光滑度，以導(dǎo)致光澤、純凈度和亮度的增加。皮膚的其他并且重要的、可以客觀和主觀測量的特性包括但不限于皮膚松弛度或相反的皮膚緊密性，以及皮膚中肌理性細(xì)紋和較粗紋路的存在和程度。這些特性與判斷表觀的外部情況(例如皮膚衰老)的特性相同。通過本文公開的處理方法和試劑盒改善這些特性，在表觀的目測判斷的基礎(chǔ)上產(chǎn)生了益處。通過本文公開的方法改變膚質(zhì)，減少了皮膚衰老的出現(xiàn)。所需好處可以不僅包括對皮膚的生理好處，而且包括治療和藥理好處，例如可能的惡性腫瘤預(yù)防和治療，不論是通過化學(xué)預(yù)防還是改進(jìn)的光動(dòng)力療法。好處還可以包括通過包含抑制皮脂腺活性的組合物來進(jìn)行痤瘡治療和抑制。F.藥物組合物所公開的麝香葡萄果渣提取物和組合物至少可用于抑制(例如阻止)一個(gè)或多個(gè)氧化過程，例如與細(xì)胞事件例如細(xì)胞衰老相關(guān)的例如自由基形成。因此，本文還描述了包含至少一種所公開的麝香葡萄果渣提取物單獨(dú)或與白藜蘆醇組合的藥物組合物。藥物組合物的配制在本技術(shù)領(lǐng)域中是公知的。例如，E. W. Martin的《Remington藥物學(xué)》(Remington' s Pharmaceutical Sciences), Mack Publishing Co. , Easton, PA,第 19版，1995，描述了適合用于至少一種所公開的麝香葡萄果渣提取物單獨(dú)或與白藜蘆醇組合的藥物遞送的示例性制劑(及其組分)。在某些實(shí)例中，組合物還包括其他藥劑例如紫色胡蘿卜根提取物或接骨木提取物?？梢耘渲瓢辽僖环N這些化合物的藥物組合物，用于人類或獸醫(yī)醫(yī)學(xué)。所公開的藥物組合物的具體制劑可以取決于例如給藥方式(例如口服、 局部或腸胃外)和/或待治療的病癥(例如自由基的生產(chǎn)或活性)。在某些實(shí)施方案中，制劑包括可藥用載體以及至少一種活性成分，例如麝香葡萄果渣提取物?？捎糜诒竟_的方法和組合物的可藥用載體是本技術(shù)領(lǐng)域中常規(guī)的?？伤幱幂d體的性質(zhì)取決于所使用的具體給藥方式。例如，腸胃外制劑通常包含可注射流體作為介質(zhì)，所述流體包括藥物和生理可接受的流體例如水、生理鹽水、平衡鹽溶液、葡萄糖水、甘油等。對于固體組合物例如粉劑、丸劑、片劑或膠囊形式來說，可以包含常規(guī)的無毒固體載體，例如藥用級甘露糖醇、乳糖、淀粉或硬脂酸鎂。除了生物中性載體之外，待施用的藥物組合物可以任選地包含少量無毒性輔助物質(zhì)或賦形劑，例如潤濕或乳化劑、防腐劑和PH緩沖劑等；例如乙酸鈉或失水山梨糖醇單硬脂酸酯。其他非限制性的賦形劑包括非離子性增溶劑例如克列莫佛(cremophor)，或蛋白質(zhì)例如人血清白蛋白。所公開的藥物組合物可以配制成可藥用鹽?？伤幱名}是化合物的游離堿形式的無毒性鹽，其具有游離堿的所需藥理活性。這些鹽可以源自于無機(jī)或有機(jī)酸。適合的無機(jī)酸的非限制性實(shí)例是鹽酸、硝酸、氫溴酸、硫酸、氫碘酸和磷酸。適合的有機(jī)酸的非限制性實(shí)例是乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、蘋果酸、馬來酸、延胡索酸、酒石酸、 檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲基苯磺酸、甲基磺酸、水楊酸、甲酸、 三氯乙酸、三氟乙酸、葡萄糖酸、天冬氨酸(asparagic acid)、天冬氨酸(aspartic acid)、 苯磺酸、甲基苯磺酸、萘磺酸等。其他適合的可藥用鹽的名單可見于在《Remington藥物學(xué)》 (Remington' s Pharmaceutical Sciences),第 19 版,Mack Publishing Company,Easton, PA，1995?？伤幱名}也可用于調(diào)整組合物的滲透壓。所公開的藥物組合物的劑型由所選的給藥方式?jīng)Q定。例如，可以使用口服劑型?？诜苿┛梢允且后w例如糖漿、溶液或懸液，或固體例如粉劑、丸劑、片劑或膠囊。制備這些劑型的方法在本文中公開，或?qū)τ诒炯夹g(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員來說是顯而易見的。包含本公開化合物的藥物組合物的某些實(shí)施方案，可以配制成適合于單次施用精確劑量的單位劑型。施用的活性成分的量取決于受治對象、疾病嚴(yán)重性和施用方式，并且是本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員公知的。在這些界限內(nèi)，待施用制劑所包含的本文公開的提取物或化合物的量，是能夠在受治對象中有效獲得所需效應(yīng)的量。在具體實(shí)例中，對于口服施用來說，組合物被提供成液體形式，其含有約75mg麝香葡萄果渣提取物多酚和IOOmg反式白藜蘆醇。在其他實(shí)例中，對于口服施用來說，組合物被提供成片劑形式，其含有約1.0到約 500mg 活性成分，特別是約 10. Omg、約 50mg、100mg、約 150mg、約 175mg、約 200mg、約 210mg、 約225mg、約250mg、約300mg、約400mg或約500mg活性成分，用于根據(jù)癥狀調(diào)整給予受治對象的劑量。在一個(gè)示例性口服劑量方案中，每天至少一次施用含有約Img到約500mg(例如約150mg到約225mg)活性成分的片劑。在其他實(shí)例中，每周至少一次、例如每周至少兩次、 三次、至少四次、至少五次或至少六次或每天施用含有約Img到約500mg(例如約150mg到約225mg)活性成分的片劑。G.所公開的提取物和組合物的施用任何所公開的組合物和提取物的施用方法都是常規(guī)的。例如，所公開的方法(例如包含具有抗氧化活性、用于阻止或降低與衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程的組合物的方法) 可以通過注射、腫瘤內(nèi)、口服、局部、透皮、腸胃外或通過吸入或噴霧來施用。在具體實(shí)例中， 組合物以非飲料食品、飲料或膳食補(bǔ)充劑的形式口服施用于哺乳動(dòng)物對象、例如人類。在另一個(gè)實(shí)例中，組合物局部施用于哺乳動(dòng)物對象例如人類的皮膚表面。所施用的藥劑的治療有效量可以根據(jù)所需的效應(yīng)和待治療的對象而變。在一個(gè)實(shí)例中，方法包括向?qū)ο?例如人類對象)每日施用至少Img組合物。例如，人類可以每日施用至少Ig或至少IOg組合物，例如每日Ig到5g、每日5g到10g，例如每日7g。在一個(gè)實(shí)例中，對象被施用至少5g包含麝香葡萄果渣提取物和白藜蘆醇的組合物。在其他實(shí)例中，對象被口服施用至少6. 3g這樣的組合物。劑量可以采用分劑量(例如每天2、3或4個(gè)分劑量)或以每日單一劑量施用。在具體實(shí)例中，以多劑每日給藥時(shí)間表向?qū)ο笫┯弥委熜越M合物(例如所公開的含有白藜蘆醇和麝香葡萄提取物的抗衰老補(bǔ)充劑)，例如至少連續(xù)兩天、連續(xù)10天等，例如數(shù)周、數(shù)月或數(shù)年的時(shí)間。在一個(gè)實(shí)例中，向?qū)ο笫┯弥委熜越M合物(例如所公開的含有白藜蘆醇和麝香葡萄提取物的抗衰老補(bǔ)充劑)，其包括在至少30天、例如至少2個(gè)月、至少4 個(gè)月、至少6個(gè)月、至少12個(gè)月、至少M(fèi)個(gè)月或至少36個(gè)月的時(shí)間內(nèi)每日施用。治療性組合物，例如所公開的包含反式白藜蘆醇和麝香葡萄果渣提取物或單獨(dú)的麝香葡萄果渣提取物的抗衰老補(bǔ)充劑，還可以包含一種或多種生物活性或無活性化合物 (或兩者)，例如分別為其他抗氧化劑和常規(guī)的無毒性可藥用載體。在具體實(shí)例中，治療性組合物還包含一種或多種無生物活性化合物。這樣的無生物活性化合物的實(shí)例包括但不限于載體、增稠劑、稀釋劑、緩沖劑、防腐劑和載體?？捎糜谶@些制劑的可藥用載體是常規(guī)的(參見 E. W. Martin 的《Remington 藥物學(xué)》(Remington’ s Pharmaceutical Sciences), Mack Publishing Co.，Easton，PA，第19版(1995))。一般來說，載體的性質(zhì)取決于所使用的具體施用方式。例如，腸胃外制劑可以包括可注射流體作為介質(zhì)，注射流體包括藥物和生理可接受的流體例如水、生理鹽水、平衡鹽溶液、葡萄糖水、甘油等。對于固體組合物(例如粉劑、丸劑、片劑或膠囊形式)來說，常規(guī)的無毒性固體載體可以包括例如藥用級甘露糖醇、乳糖、淀粉或硬脂酸鎂。除了生物中性載體之外，待施用的藥物組合物可以包括少量無毒性輔助物質(zhì)，例如潤濕或乳化劑、防腐劑和PH緩沖劑等，例如乙酸鈉或失水山梨糖醇單硬脂酸酯。盡管本公開對使用任何所公開的組合物和提取物來阻止或抑制與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程提供了詳細(xì)描述，但應(yīng)該考慮到，所公開的組合物和提取物不僅可用作抗氧化劑阻止或抑制與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程，而且可用于治療任何與氧化應(yīng)激相關(guān)的疾病。例如，考慮到了本發(fā)明的提取物和組合物可用于減輕、阻止或治療與慢性炎性疾病例如糖尿病、癌癥、動(dòng)脈粥樣硬化和其他心血管疾病的發(fā)病機(jī)理以及與變性疾病例如阿茨海默氏病和帕金森氏病相關(guān)的氧化應(yīng)激。通過下面非限制性的實(shí)施例，對本公開的主題進(jìn)行了進(jìn)一步說明。 實(shí)施例實(shí)施例1測定麝香葡萄果渣提取物中鞣花酸的溶解度本實(shí)施例說明了青銅色與紫色果渣提取物的各種比率對鞣花酸溶解度的影響。將分別發(fā)酵的青銅色和紫色果渣提取物加熱，然后以表1中提供的比率混合成總體積100ml。表1. IX濃度下青銅色/紫色果渣提取物的各種比率
權(quán)利要求
1.用作抗氧化劑的組合物，所述組合物包含總量的23%到32%的麝香葡萄(圓葉葡萄 (Vitis rotundifolia))果渣提取物、總量的1. 2%到3. 0%的白藜蘆醇、總量的0. 12%到 0. 20 %的紫色胡蘿卜提取物、總量的0. 4 %到0. 6 %的接骨木提取物、總量的50 %到61 %的山梨糖醇、總量的8%到12%的99. 7%甘油組合物和總量的到2%的膠體二氧化硅，由此提供具有抗氧化活性的組合物。
2.生產(chǎn)抗氧化組合物的方法，所述方法包括將具有至少2%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源的且反式白藜蘆醇最低純度為至少5%的白藜蘆醇組合，其中麝香葡萄果渣提取物多酚與反式白藜蘆醇的比率在0. 1/1到10/1 (重量/重量)的范圍內(nèi)， 由此生產(chǎn)具有抗氧化活性的麝香葡萄果渣提取物和反式白藜蘆醇混合物。
3.用作抗氧化劑的組合物，所述組合物包含具有至少2%多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源的且反式白藜蘆醇最低純度為至少5%的白藜蘆醇，其中麝香葡萄果渣提取物多酚與反式白藜蘆醇的比率在 0. 1/1到10/1 (重量/重量)的范圍內(nèi)，由此提供具有抗氧化活性的組合物。
4.權(quán)利要求2的方法或權(quán)利要求3的組合物，其中白藜蘆醇包含從虎杖(Polygonum cuspidatum)根提取的至少98%的反式白藜蘆醇。
5.權(quán)利要求2或4的方法或權(quán)利要求3-4的組合物，其中麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物具有約4%的總多酚含量，并且麝香葡萄果渣提取物與白藜蘆醇的比率為約18比1 (重量/重量)。
6.權(quán)利要求2或4-5任一項(xiàng)的方法，所述方法還包括制備麝香葡萄果渣提取物，然后將麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物與白藜蘆醇組合。
7.權(quán)利要求6的方法，其中制備麝香葡萄果渣提取物包括將青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物組合。
8.權(quán)利要求6的方法，其中制備麝香葡萄果渣提取物包括同時(shí)提取紫色麝香葡萄果渣與青銅色麝香葡萄果渣的混合物。
9.權(quán)利要求3-5任一項(xiàng)的組合物，其中麝香葡萄果渣提取物包括從青銅色麝香葡萄果渣和紫色麝香葡萄果渣獲得的麝香葡萄果渣提取物。
10.權(quán)利要求8的方法或權(quán)利要求9的組合物，其中青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率在0. 3到3 (重量/重量)的范圍內(nèi)。
11.權(quán)利要求10的方法或組合物，其中青銅色麝香葡萄果渣提取物與紫色麝香葡萄果渣提取物的比率為約2. 25比1 (重量/重量)。
12.權(quán)利要求8、10或11任一項(xiàng)的方法或權(quán)利要求9-11任一項(xiàng)的組合物，其中麝香葡萄果渣提取物在液體中包含20%到50%固形物。
13.權(quán)利要求12的方法或組合物，其中麝香葡萄果渣提取物在液體中包含約40%固形物。
14.權(quán)利要求2、4-8或10-13任一項(xiàng)的方法，所述方法還包括向麝香葡萄果渣提取物與白藜蘆醇的混合物添加接骨木提取物、紫色胡蘿卜提取物或其組合。
15.權(quán)利要求3-5或9-12任一項(xiàng)的組合物，所述組合物還包含接骨木提取物、紫色胡蘿卜提取物或其組合。
16.權(quán)利要求2、4-8或10-14任一項(xiàng)的方法，所述方法還包括向麝香葡萄果渣提取物與白藜蘆醇的混合物添加賦形劑。
17.權(quán)利要求3-5、10-13或15任一項(xiàng)的組合物，所述組合物還包含賦形劑。
18.權(quán)利要求16的方法或權(quán)利要求17的組合物，其中賦形劑包括甘油、山梨糖醇、膠體二氧化硅、天然調(diào)味添加劑或其組合。
19.權(quán)利要求18的方法或組合物，其包含總量的23%到32%的麝香葡萄果渣提取物、總量的1. 2%到3. 0%的白藜蘆醇、總量的0. 12%到0. 20%的紫色胡蘿卜提取物、總量的0. 4 %到0.6%的接骨木提取物、總量的50 %到61 %的山梨糖醇、總量的8 %到12 %的 99. 7%甘油組合物和總量的到2%的膠體二氧化硅。
20.權(quán)利要求19的方法或組合物，其包含總量的到30%的麝香葡萄果渣提取物、 總量的到2%的白藜蘆醇、總量的0. 到0.2%的紫色胡蘿卜提取物、總量的0.4%到 0. 5 %的接骨木提取物、總量的53 %到56 %的山梨糖醇、總量的9 %到11 %的99. 7 %甘油組合物、總量的1. 5%到2%的膠體二氧化硅、約到2%的康科特葡萄提取物、0. 到 0. 2%的解百納葡萄提取物和0. 4%到0. 5%的紅葡萄粉。
21.權(quán)利要求20的方法或組合物，其包含總量的約觀.9%的麝香葡萄果渣提取物、總量的約1.65%的白藜蘆醇、總量的約0. 16%的紫色胡蘿卜提取物、總量的約0. 48%的接骨木提取物、總量的約8%的山梨糖醇、總量的約10%的99. 7%甘油組合物、總量的約 2%的膠體二氧化硅、約1.27%的康科特葡萄提取物、約0. 16%的解百納葡萄提取物和約 0. 48%的紅葡萄粉。
22.權(quán)利要求19的方法或組合物，其包含總量的23%到25%的麝香葡萄果渣提取物、 總量的到2%的白藜蘆醇、總量的0. 到0.2%的紫色胡蘿卜提取物、總量的0.4%到 0. 5%的接骨木提取物、總量的58%到61%的山梨糖醇、總量的9%到11%的99. 7%甘油組合物、總量的1. 5%到2%的膠體二氧化硅、約到2%的康科特葡萄提取物、0. 到 0. 2%的解百納葡萄提取物和0. 4%到0. 5%的紅葡萄粉。
23.權(quán)利要求22的方法或組合物，其包含總量的約23.77 %的麝香葡萄果渣提取物、 總量的約1.65%的白藜蘆醇、總量的約0. 16%的紫色胡蘿卜提取物、總量的約0. 48%的接骨木提取物、總量的約60. 05%的山梨糖醇、總量的約10%的99. 7%甘油組合物、總量的約 2%的膠體二氧化硅、約1.27%的康科特葡萄提取物、約0. 16%的解百納葡萄提取物和約 0. 48%的紅葡萄粉。
24.權(quán)利要求3-5、9-13、15或17-23任一項(xiàng)的組合物，其中組合物具有每mg多酚至少 24 μ mo 1 ο οχ當(dāng)量(ymolTE/mg酚)的總氧自由基吸收能力(ORAC)。
25.權(quán)利要求3-5、9-13、15或17- 任一項(xiàng)的組合物，其中組合物提供在非飲料食品、 飲料、液體或固體膳食補(bǔ)充劑或局部用軟膏中。
26.權(quán)利要求3-5、8-13、15或17-25任一項(xiàng)的組合物，其用作抗衰老補(bǔ)充劑。
27.權(quán)利要求3-5、9-13、15或1716任一項(xiàng)的組合物，其中組合物所具有的麝香葡萄多酚與白藜蘆醇的比率為約0. 75比1 (重量/重量)。
28.抑制細(xì)胞衰老的方法，所述方法包括向需要的對象施用一定劑量的權(quán)利要求3-5、 9-13、15或17-27任一項(xiàng)的組合物，所述劑量足以抑制與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程。
29.權(quán)利要求觀的方法，其中抑制與細(xì)胞衰老相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)過程包括在攝入組合物的對象中阻止或抑制自由基的形成或活性。
30.權(quán)利要求3-5、8-13、15或17-25任一項(xiàng)的組合物，所述組合物用于降低或抑制與進(jìn)餐相關(guān)的氧化應(yīng)激。
31.抑制氧化應(yīng)激的方法，所述方法包括向需要的對象施用一定劑量的權(quán)利要求3-5、 9-13、15、17-25或30任一項(xiàng)的組合物，所述劑量足以降低或抑制氧化應(yīng)激。
32.權(quán)利要求32的方法，其中組合物在用餐之前或之后10到30分鐘施用。
33.權(quán)利要求32的方法，其中組合物在用餐之前10分鐘施用。
全文摘要
本文公開了一種用作抗氧化劑、例如用作抗衰老補(bǔ)充劑的組合物。所述組合物可以包括具有至少2％多酚含量的麝香葡萄(圓葉葡萄(Vitis rotundifolia))果渣提取物和來自麝香葡萄之外的來源的最低純度為至少5％的反式白藜蘆醇。在一個(gè)實(shí)例中，麝香葡萄果渣提取物的多酚與反式白藜蘆醇的比率在0.1/1到10/1(重量/重量)的范圍內(nèi)，由此提供具有抗氧化活性的組合物。還公開了生產(chǎn)抗氧化組合物的方法。這些方法可包括將具有至少2％多酚含量的麝香葡萄果渣提取物與來自麝香葡萄之外的來源的最低純度為至少5％的白藜蘆醇以0.1/1到10/1(重量/重量)范圍內(nèi)的比率組合，由此提供具有抗氧化活性的組合物。
文檔編號A61P39/06GK102164508SQ200980137662
公開日2011年8月24日 申請日期2009年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月31日
發(fā)明者勞勒爾·A·費(fèi)舍, 威廉·J·摩根斯, 特奧多羅·T·安尼羅 申請人:沙克利公司