專利名稱：一種三萜皂苷類化合物及制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物化學(xué)領(lǐng)域，具體地說涉及一種三萜皂苷類化合物及制備方法及用途。
背景技術(shù)：
白酒草[Co"少za/^o"/cfl(Thunb.) Less.]系菊科白酒草屬植物白酒草的全草，又名白酒 棵、白酒香、酒藥草、銀紐子，分布于浙江、福建、臺(tái)灣、云南、貴州、湖南、廣東、廣 西、西藏等省區(qū)。白酒草屬(Co"ya)植物全世界約有80-100種，主要分布于東、西半球 的熱帶和亞熱帶地區(qū)。我國(guó)有10種1變種，其中白酒草根或全草藥用，治療小兒肺炎、肋 膜炎、喉炎、角膜炎等癥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從植物白酒草中提取的一種三萜皂苷類化合物。 本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種三萜皂苷類化合物在制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。 本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種三萜皂苷類化合物的制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下
一種三萜皂苷類化合物，其結(jié)構(gòu)式如下所示 '
OH OH
(I)或<formula>formula see original document page 5</formula>
(II)
結(jié)構(gòu)式(I)或(II)所示一種三萜皂苷類化合物在制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。
結(jié)構(gòu)式(I)或(II)所示一種三萜皂苷類化合物的制備方法，其特征是包括如下步驟:
(1) 將粉碎干燥的白酒草全草用乙醇水溶液或甲醇水溶液回流提取，提取液過濾，濾液減 壓濃縮得膏狀物；
(2) 將膏狀物分散于相當(dāng)膏狀物質(zhì)量5-15倍的水中制成分散液，加入乙酸乙酯萃取3-5 次，每次乙酸乙酯的加入量為分散液體積的0.8-2倍，再加入正丁醇萃取3-5次，每次正丁 醇的加入量為分散液體積的0.8-2倍，正丁醇萃取液減壓濃縮得濃縮物；
(3) 將濃縮物溶解于相當(dāng)濃縮物質(zhì)量8-12倍的水中，過大孔吸附樹脂柱，用0%-60%的乙 醇水溶液或甲醇水溶液梯度洗脫，收集40%-60%的乙醇或甲醇洗脫液，減壓濃縮得到總皂
苷；
(4) 將總皂苷進(jìn)行硅膠柱層析，以體積比為7-4:3-6: 0.3-0.6的氯仿-甲醇-水進(jìn)行梯度洗脫， 共收集75個(gè)流分，合并流分43-55和流分56-72;
(5) 將流分43-55上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%-100%的甲醇水溶液梯度洗脫， 共收集20個(gè)流分，合并流分16-19，上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%-100%的甲 醇水溶液梯度洗脫，共收集20個(gè)流分，合并流分8-12，用硅膠柱色譜純化，用體積比為 81:19:2的乙酸乙酯-甲醇-水洗脫，得到化合物(I);將流分56-72上反相ODS層析柱， 用體積百分比為50%-70%的甲醇水溶液梯度洗脫，共收集32個(gè)流分，分離得到的流分29， 析出結(jié)晶為化合物(II)。
步驟(1)較好的是以粉碎干燥的白酒草全草為原料，加入原料6-12質(zhì)量倍的體積百 分比濃度為50%-100%的乙醇水溶液或甲醇水溶液回流提取2-5次，每次1-4小時(shí)，合并提 取液，過濾，濾液減壓濃縮得膏狀物。
步驟(1)最佳的是以粉碎干燥的白酒草全草為原料，加入原料IO質(zhì)量倍的體積百分 比濃度為60%-80%的乙醇水溶液或甲醇水溶液回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液， 過濾，濾液減壓濃縮得膏狀物。 _
步驟(3)中大孔樹脂的型號(hào)可以選用AB-8型、HP20型、HPD100型、HPD100A型、HPD300型、X-5型、NKA-II型、D101型或DA201型。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于所提取分離的一種三萜皂苷類化合物具有抗腫瘤活性，制備方法簡(jiǎn)單。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
實(shí)施例1
一種三萜皂苷類化合物
分子式<:621198031，分子量1338。
化合物(I)的結(jié)構(gòu)通過分析各種核磁共振譜。HNMR、 13CNMR、 DEPT、 COSY、 HMQC、 HMBC、 TOCSY、 NOESY)和高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)等及與類似化合物的波譜數(shù)據(jù)比較 得以鑒定。
化合物(I)的波譜數(shù)據(jù)如下 [a]2D0 -31.7 (c 0.66, MeOH). IR (KBr) vmax 3467, 2944, 1713， 1073 cm".
巾NMR (C5D5N):苷元部分1.94 (s， H3-24 ),1.51 (s， Hr25 )， 1.08 (s， H3-26 ), 1.21 (s, H3-27 )， 0.88 (s, H3-29 ), 0.97 (s, H3-30 ), 5.42 (br s, H-12), 3.26 (br d， /= 12.5 Hz， H-18);糖部分，28 位糖鏈阿拉伯糖6.47 (br s， H-l)，鼠李糖5.62 (br s, H陽l), 1.69 (d， /= 6.0 Hz， H3-6)，木糖 5.24(d,J^7.5Hz,H-l)，斧糖6.17 (br s， H陽l)，支鏈斧糖5.90 (d, ■/= 4.5 Hz, H-l); 3位糖鏈 葡萄糖5.08 (d, /= 7.5 Hz, H-l)。
13C NMR (C5D5N):苷元部分44.3 (C-l), 70.3 (C-2), 86.1 (C-3), 52.9 (C-4), 52.5 (C-5), 21.1 (C-6)， 33.2 (C陽7)， 40.3 (C-8), 48.7 (C-9), 36.8 (C-10), 24.0 (C-ll), 123.0 (C-12), 144.3 (C-13), 42.2 (C-14), 28.2 (C-15), 23.1 (C-16), 47.3 (C-17), 41.6 (C-18), 46.2 (C-19), 30.9 (C-20), 34.1 (C-21), 32.7 (C-22), 181.0 (C-23), 14.3 (C-24), 17.5 (C-25), 16.9 (C-26), 26.2 (C-27)， 176.3 (C-28), 33.2 (C-29), 23.7 (C-30)。糖部分，28位糖鏈阿拉伯糖93.2 (C-l), 75.2 (C-2), 69.3 (C-3), 65.4 (C-4), 62.6 (C-5)，鼠李糖101.0 (C-l), 71.6 (C-2), 82.3 (C-3), 77.8 (C-4), 68.6 (C-5)， 18.6 (C-6)，木糖104.9 (C-l), 75.5 (C-2), 84.6 (C-3), 69.6 (C-4)， 66.6 (C陽5)，開糖111.2 (C-l), 77.8 (C-2)， 80.4 (C-3), 75.0 (C-4)， 65.4 (C-5)，支鏈斥糖111.8 (C-l), 77.8 (C-2), 79.8 (C-3), 74.5(C-4), 64.4 (C-5); 3位糖鏈葡萄糖105.1(C-l)， 75.0 (C-2)， 78.2 (C-3)， 71.5 (C-4)， 78.3 (C-5): 62.6 (C-6)。
High resolution ESIMS:附/z [M+Na]+ 1361.5990 (calcd for C62H98031Na, 1361.5984).
實(shí)施例2
一種三萜皂苷類化合物
分子式C68H1Q8036，分子量1500。
化合物(II)的結(jié)構(gòu)通過分析各種核磁共振譜。HNMR、 13CNMR、 DEPT、 COSY、 HMQC、 HMBC、 TOCSY、 NOESY)和高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)等及與類似化合物的波譜數(shù)據(jù)比較 得以鑒定。
化合物(II)的波譜數(shù)據(jù)如下 [a]2D° -38.2 (c 0.50, MeOH). IR (KBr) vmax 3416, 2943, 1717, 1069 cm-1.
!H NMR (C5D5N):苷元部分1.96 (s， H3-24 )， 1.53 (s, H3-25 ), 1.10 (s, H3-26 ), 1.23 (s, H3-27 ), 0.89 (s, H3-29 )， 1.00 (s， H3-30 )， 5.44 (br s, H-12);糖部分，28位糖鏈阿拉伯糖6.53 (br s, H國(guó)l)，鼠李糖5.55 (brs,H-l), 1.71 6.0 Hz，H3-6)，木糖5.25 (d, /= 8.0 Hz, H-l)，斧糖
6.17(d,/二2.0Hz,H-l)， 4.75 (d, J= 2.0 Hz, H國(guó)2)， 4.70 (d, 9.0 Hz, Ha-4)， 4.26 (d, /= 9.0 Hz,Hb-4)，支鏈斧糖5.88 ((!， /= 4.5 Hz, H-l), 4.78 (d， ■/= 4.5 Hz, H-2) ， 4.55 (d, J= 9.0 Hz， Ha-4); 3位糖鏈:葡萄糖5.06(d，^7.5Hz,H-l)，末端葡萄糖5.17 (d， /= 7.5 Hz, H-l)。 13C NMR (C5D5N):苷元部分44.2 (C-l), 70.3 (C-2), 86.1 (C-3), 52.8 (C-4)， 52.5 (C-5), 21.1 (C-6), 33.0 (C-7), 40.3 (C-8)， 48.7 (C-9), 36.8 (C-IO)， 24.0 (C-ll)， 123.0 (C-12), 144.2 (C-13), 42.2 (C-14), 28.1 (C-15)， 23.1 (C-16), 47.3 (C-17), 41.6 (C-18)， 46.2 (C-19), 30.9 (C-20), 34.1 (C-21), 32.7 (C-22), 180.5 (C-23), 14.2 (C-24), 16.9 (C-25), 17.5 (C-26), 26.1 (C-27), 176.3 (C-28), 33.1 (C-29), 23.7 (C-30)。糖部分，28位糖鏈阿拉伯糖93.0 (C-l), 75.6 (C-2)， 68.5 (C-3), 65.1 (C-4), 61.8 (C-5)，鼠李糖100.9 (C-l), 71.5 (C-2), 82.5 (C-3), 77.7 (C國(guó)4)， 68.7 (C陽5),
18.6 (C-6)，木糖105.0 (C-l), 75.0 (C-2), 84.3 (C-3), 69.6 (C-4), 66.7 (C-5)，齊糖111.2 (C國(guó)l)，
77.7 (C-2)， 80.4 (C-3), 75.1 (C-4), 65.6 (C-5)，支鏈開糖111.9 (C隱l), 77.5 (C-2), 79.8(C-3), 74.6 (C-4), 64.3 (C-5); 3位糖鏈葡萄糖105.1 (C國(guó)l), 73.7 (C-2)， 88.4 (C-3)， 69.8 (C-4), 77.9 (C-5),62.3 (C陽6)，末端葡萄糖105.9 (C-l)， 75.6 (C-2)， 78.2 (C-3), 71.6 (C陽4), 78.6 (C-5)， 62.5 (C-6)。 High resolution ESIMS: w/z [M+Na]+ 1523.6566 (calcd for C68H108O36Na, 1523.6512).
實(shí)施例3
化合物(I)和化合物(II)的抗腫瘤活性試驗(yàn)結(jié)果如下
選擇宮頸癌細(xì)胞HeLa，以紫杉醇為陽性藥物，測(cè)試所獲得單體化合物的抗腫瘤活性， 結(jié)果表明化合物(I)和化合物(II)均具有抗腫瘤活性，對(duì)HeLa細(xì)胞的IC5o分別為44.935 x l{r6mol/L、 18.798 x l(T6mol/L。
HeLa
化合物(I)44.935 x 10-6mol/L
化合物(II)18.798 x l(T6mol/L
紫杉醇1.1 x 10'9mol/L
實(shí)施例4
一種三萜皂苷類化合物的制備方法，包括下列步驟
(1) 取白酒草干燥全草2.5kg，粉碎后加入25 kg的體積百分比濃度90。/。乙醇水溶液 和60%乙醇水溶液依次回流提取兩次，每次2小時(shí)，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮得 膏狀物；
(2) 將膏狀物分散于相當(dāng)于膏狀物質(zhì)量10倍的水中制成分散液，加入乙酸乙酯萃取 4次，每次3000ml，再加入正丁醇萃取4次，每次3000ml，正丁醇萃取液減壓回收溶劑， 得到濃縮物127g;
(3) 將濃縮物溶解于相當(dāng)于濃縮物質(zhì)量10倍的水中溶解，上大孔吸附樹脂D101柱， 用水、10%乙醇水溶液、30%乙醇水溶液、40%水溶液、60%乙醇水溶液梯度洗脫，收集 40 %-60 %乙醇水溶液洗脫液回收溶劑，減壓濃縮得到總皂苷50g;
(4) 將總皂苷進(jìn)行硅膠(100-200目)柱層析、以體積比分別以氯仿-甲醇-水為7:3:0.3— 6.5: 3.5:0.35— 6:4:0.4— 5.5:4.5:0.45— 5:5:0.5— 4:6:0.6梯度洗脫，每500mL收集一個(gè) 流分，共收集75個(gè)流分，各流分經(jīng)過硅膠薄層層析、反相ODS薄層層析檢査后合并流分 43-55和流分56-72;
(5) 將流分43-55 (13 g)上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50% 甲醇水溶液、70%甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20 個(gè)流分，用分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢査各流分，根據(jù)高效液相色譜結(jié)果合 并流分16-19，上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50%甲醇水溶液、 70%甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20個(gè)流分，收集 的各流分經(jīng)分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢查后合并流分8-12，流分8-12用硅 膠柱色譜純化，用體積比為81:19:2乙酸乙酯-甲醇-水洗脫，得到化合物化合物(I);將 流分56-72 (3.5 g)經(jīng)反相ODS柱層析，用體積百分比為50%甲醇水溶液、60%甲醇水溶液、70%甲醇水溶液梯度洗脫，共收集32個(gè)流分，分離得到的流分29，結(jié)晶析出化合物(n)。 實(shí)施例5
一種三萜皂苷類化合物的制備方法，包括如下步驟
(1) 以粉碎干燥的白酒草全草為原料，加入原料6質(zhì)量倍的甲醇回流提取3次，每次2小 時(shí)，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮得膏狀物；
(2) 將膏狀物分散于相當(dāng)膏狀物質(zhì)量5倍的水中制成分散液，加入乙酸乙酯萃取3次，每 次乙酸乙酯的加入量為分散液體積的2倍，再加入正丁醇萃取3次，每次正丁醇的加入量 為分散液體積的2倍，正丁醇萃取液減壓濃縮得濃縮物；
(3) 將濃縮物溶解于相當(dāng)濃縮物質(zhì)量10倍的水中，過大孔吸附樹脂AB-8柱，用水，10% 甲醇水溶液、30%甲醇水溶液，40%甲醇水溶液、60%甲醇水溶液梯度洗脫，收集40%-60 %甲醇水溶液洗脫液回收溶劑，減壓濃縮得到總皂苷；
(4) 將總皂苷進(jìn)行硅膠(100-200目)柱層析、以體積比分別以氯仿-甲醇-水為7:3:0.3— 6.5: 3.5:0.35— 6:4:0.4— 5.5:4.5:0.45— 5:5:0.5— 4:6:0.6梯度洗脫，每500mL收集一個(gè) 流分，共收集75個(gè)流分，各流分經(jīng)過硅膠薄層層析、反相ODS薄層層析檢查后合并流分 43-55和流分56-72;
(5) 將流分43-55 (13 g)上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50%甲 醇水溶液、70%甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20個(gè) 流分，用分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢查各流分，根據(jù)高效液相色譜結(jié)果合并 流分16-19，上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50%甲醇水溶液、70% 甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20個(gè)流分，收集的各 流分經(jīng)分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢查后合并流分8-12，流分8-12用硅膠柱 色譜純化，用體積比為81:19:2乙酸乙酯-甲醇-水洗脫，得到化合物化合物(I);將流分 56-72 (3.5 g)經(jīng)反相ODS柱層析，用體積百分比為50%甲醇水溶液、60%甲醇水溶液、 70%甲醇水溶液梯度洗脫，共收集32個(gè)流分，分離得到的流分29，結(jié)晶析出化合物(II)。 實(shí)施例6
一種三萜皂苷類化合物的制備方法，包括如下步驟
(1) 以粉碎干燥的白酒草全草為原料，加入原料12質(zhì)量倍的體積百分比濃度為50%的乙 醇水溶液回流提取5次，每次2小時(shí)，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮得膏狀物；
(2) 將膏狀物分散于相當(dāng)膏狀物質(zhì)量15倍的水中制成分散液，加入乙酸乙酯萃取5次， 每次乙酸乙酯的加入量為分散液體積的0.8倍，再加入正丁醇萃取5次，每次正丁醇的加 入量為分散液體積的0.8倍，正丁醇萃取液減壓濃縮得濃縮物；
(3) 將濃縮物溶解于相當(dāng)濃縮物質(zhì)量8倍的水中，過大孔吸附樹脂HP20柱，用水，10% 乙醇水溶液、30%乙醇水溶液，40%乙醇水溶液、60%乙醇水溶液梯度洗脫，收集40%-60 %乙醇水溶液洗脫液回收溶劑，減壓濃縮得到總皂苷；
(4) .將總皂苷進(jìn)行硅膠(100-200目)柱層析、以體積比分別以氯仿-甲醇-水為7:3:0.3— 6.5: 3.5:0.35— 6:4:0.4— 5.5:4.5:0.45— 5:5:0.5— 4:6:0.6梯度洗脫，每500mL收集一個(gè)流分，共收集75個(gè)流分，各流分經(jīng)過硅膠薄層層析、反相ODS薄層層析檢査后合并流分 43-55和流分56-72;
(5)將流分43-55 (13 g)上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50%甲 醇水溶液、70%甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20個(gè) 流分，用分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢查各流分，根據(jù)高效液相色譜結(jié)果合并 流分16-19，上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50%甲醇水溶液、70% 甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20個(gè)流分，收集的各 流分經(jīng)分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢查后合并流分8-12，流分8」12用硅膠柱 色譜純化，用體積比為81:19:2乙酸乙酯-甲醇-水洗脫，得到化合物化合物(I);將流分 56-72 (3.5 g)經(jīng)反相ODS柱層析，用體積百分比為50%甲醇水溶液、60%甲醇水溶液、 70%甲醇水溶液梯度洗脫，共收集32個(gè)流分，分離得到的流分29，結(jié)晶析出化合物(II)。 實(shí)施例7
一種三萜皂苷類化合物的制備方法，包括如下步驟
(1) 以粉碎干燥的白酒草全草為原料，加入原料11質(zhì)量倍的體積百分比濃度為80%的甲 醇水溶液回流提取2次，每次4小時(shí)，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮得膏狀物；
(2) 將膏狀物分散于相當(dāng)膏狀物質(zhì)量IO倍的水中制成分散液，加入乙酸乙酯萃取5次， 每次乙酸乙酯的加入量為分散液體積的2倍，再加入正丁醇萃取5次，每次正丁醇的加入 量為分散液體積的2倍，正丁醇萃取液減壓濃縮得濃縮物；
(3) 將濃縮物溶解于相當(dāng)濃縮物質(zhì)量12倍的水中，過大孔吸附樹脂HPD100柱，用水， 10%甲醇水溶液、30%甲醇水溶液，40%甲醇水溶液、60%甲醇水溶液梯度洗脫，收集40 %-60 %甲醇水溶液洗脫液回收溶劑，減壓濃縮得到總皂苷；
(4) 將總皂苷進(jìn)行硅膠(100-200目)柱層析、以體積比分別以氯仿-甲醇-水為7:3:0.3— 6.5: 3.5:0.35—6:4:0.4— 5.5:4.5:0.45— 5:5:0.5—4:6:0.6梯度洗脫，每500mL收集一個(gè) 流分，共收集75個(gè)流分，各流分經(jīng)過硅膠薄層層析、反相ODS薄層層析檢查后合并流分 43-55和流分56-72;
(5) 將流分43-55 (13 g)上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50%甲 醇水溶液、70%甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20個(gè) 流分，用分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢查各流分，根據(jù)高效液相色譜結(jié)果合并 流分16-19，上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50%甲醇水溶液、70% 甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20個(gè)流分，收集的各 流分經(jīng)分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢査后合并流分8-12，流分8-12用硅膠柱 色譜純化，用體積比為81:19:2乙酸乙酯-甲醇-水洗脫，得到化合物化合物(I);將流分 56-72 (3.5 g)經(jīng)反相ODS柱層析，用體積百分比為50%甲醇水溶液、60%甲醇水溶液、 70%甲醇水溶液梯度洗脫，共收集32個(gè)流分，分離得到的流分29，結(jié)晶析出化合物(II)。 實(shí)施例8
一種三萜皂苷類化合物的制備方法，包括如下步驟(1) 以粉碎干燥的白酒草全草為原料，加入原料10質(zhì)量倍的體積百分比濃度為60%的乙 醇水溶液回流提取5次，每次1小時(shí)，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮得膏狀物；
(2) 將膏狀物分散于相當(dāng)膏狀物質(zhì)量12倍的水中制成分散液，加入乙酸乙酯萃取3次， 每次乙酸乙酯的加入量為分散液體積的1倍，再加入正丁醇萃取3次，每次正丁醇的加入 量為分散液體積的1倍，正丁醇萃取液減壓濃縮得濃縮物；
(3) 將濃縮物溶解于相當(dāng)濃縮物質(zhì)量10倍的水中，過大孔吸附樹脂HPD100A柱，用水， 10%乙醇水溶液、30%乙醇水溶液，40%乙醇水溶液、60%乙醇水溶液梯度洗脫，收集40 %-60 %乙醇水溶液洗脫液回收溶劑，減壓濃縮得到總皂苷；
(4) 將總皂苷進(jìn)行硅膠(100-200目)柱層析、以體積比分別以氯仿-甲醇-水為7:3:0.3— 6.5: 3.5:0.35— 6:4:0.4— 5,5:4.5:0.45— 5:5:0.5— 4:6:0.6梯度洗脫，每500mL收集一個(gè) 流分，共收集75個(gè)流分，各流分經(jīng)過硅膠薄層層析、反相ODS薄層層析檢查后合并流分 43-55和流分56-72;
(5) 將流分43-55 (13 g)上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50%甲 醇水溶液、70%甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20個(gè) 流分，用分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢査各流分，根據(jù)高效液相色譜結(jié)果合并 流分16-19，上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%甲醇水溶液、50%甲醇水溶液、70% 甲醇水溶液、100%甲醇梯度洗脫，每100mL收集一個(gè)流分，共收集20個(gè)流分，收集的各 流分經(jīng)分析高效液相色譜(甲醇-水、乙腈-水)檢査后合并流分8-12，流分8-12用硅膠柱 色譜純化，用體積比為81:19:2乙酸乙酯-甲醇-水洗脫，得到化合物化合物(I);將流分 56-72 (3.5 g)經(jīng)反相ODS柱層析，用體積百分比為50%甲醇水溶液、60%甲醇水溶液、 70%甲醇水溶液梯度洗脫，共收集32個(gè)流分，分離得到的流分29，結(jié)晶析出化合物(II)。
本實(shí)施例中的大孔吸附樹脂的型號(hào)可以選用HPD300型、X-5型、NKA-II型或DA201 型，組成新的實(shí)施例
權(quán)利要求
1. 一種三萜皂苷類化合物，其結(jié)構(gòu)式如下所示id="icf0001" file="S2008100529749C00011.gif" wi="64" he="62" top= "57" left = "93" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>(I)或id="icf0002" file="S2008100529749C00012.gif" wi="88" he="72" top= "133" left = "68" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>
2. 權(quán)利要求1所述的一種三萜皂苷類化合物在制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。
3. 權(quán)利要求1所述的一種三砲皂苷類化合物的制備方法，其特征是包括如下步驟-(1) 將粉碎干燥的白酒草全草用乙醇水溶液或甲醇水溶液回流提取，提取液過濾，濾液減 壓濃縮得膏狀物；(2) 將膏狀物分散于相當(dāng)膏狀物質(zhì)量5-15倍的水中制成分散液，加入乙酸乙酯萃取3-5 次，每次乙酸乙酯的加入量為分散液體積的0.8-2倍，再加入正丁醇萃取3-5次，每次正丁 醇的加入量為分散液體積的0.8-2倍，正丁醇萃取液減壓濃縮得濃縮物；(3) 將濃縮物溶解于相當(dāng)濃縮物質(zhì)量8-12倍的水中，過大孔吸附樹脂柱，用0%-60%的乙 醇水溶液或甲醇水溶液梯度洗脫，收集40%-60%的乙醇或甲醇洗脫液，減壓濃縮得到總皂 苷；(4) 將總皂苷進(jìn)行硅膠柱層析，以體積比為7-4:3-6: 0.3-0.6的氯仿-甲醇-水進(jìn)行梯度洗脫， 共收集75個(gè)流分，合并流分43-55和流分56-72;(5) 將流分43-55上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%-100%的甲醇水溶液梯度洗脫， 共收集20個(gè)流分，合并流分16-19，上反相ODS層析柱，用體積百分比為30%-100%的甲 醇水溶液梯度洗脫，共收集20個(gè)流分，合并流分8-12，用硅膠柱色譜純化，用體積比為 81:19:2的乙酸乙酯-甲醇-水洗脫，得到化合物(I);將流分56-72上反相ODS層析柱， 用體積百分比為50%-70%的甲醇水溶液梯度洗脫，共收集32個(gè)流分，分離得到的流分29， 析出結(jié)晶為化合物(II)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種三萜皂苷類化合物的制備方法，其特征是所述步驟(1)為 以粉碎干燥的白酒草全草為原料，加入原料6-12質(zhì)量倍的體積百分比濃度為50%-100%的 乙醇水溶液或甲醇水溶液回流提取2-5次，每次l-4小時(shí)，合并提取液，過濾，濾液減壓濃 縮得膏狀物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種三萜皂苷類化合物的制備方法，其特征是所述步驟(1)為 以粉碎干燥的白酒草全草為原料，加入原料10質(zhì)量倍的體積百分比濃度為60%-80%的乙 醇水溶液或甲醇水溶液回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮得 膏狀物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種三萜皂苷類化合物的制備方法，其特征是所述步驟(3)中 所述大孔樹脂的型號(hào)為AB-8型、HP20型、HPD100型、HPD100A型、HPD300型、X-5 型、NKA-II型、D101型或DA201型。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種三萜皂苷類化合物及制備方法及用途，化合物的結(jié)構(gòu)式如右。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于所提取分離的化合物具有抗腫瘤活性，制備方法簡(jiǎn)單。
文檔編號(hào)A61K31/704GK101284861SQ20081005297
公開日2008年10月15日 申請(qǐng)日期2008年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月4日
發(fā)明者楊鳳英, 蘇艷芳, 解笑瑜, 郭成云 申請(qǐng)人:天津大學(xué)