專利名稱：人白細(xì)胞介素24增強(qiáng)抗結(jié)核的作用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于分子微生物學(xué)以及分子和感染免疫領(lǐng)域，特別是涉及一種人白細(xì)胞介素24(Interleukin-24，IL-24)增強(qiáng)抗結(jié)核的作用。
背景技術(shù)：
結(jié)核病(Tuberculosis，TB)是一種嚴(yán)重危害人類健康的傳染病，由結(jié)核桿菌(Mycobacterium tuberculosis，MTB)感染引起。目前全球結(jié)核病疫情仍十分嚴(yán)峻，據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)，2005年有880萬(wàn)新結(jié)核病例，740萬(wàn)例在亞洲和撒哈拉以南非洲。共有160萬(wàn)人死于結(jié)核，包括感染艾滋病毒的195 000名患者。在全球22個(gè)結(jié)核高負(fù)擔(dān)國(guó)家中，我國(guó)位居第二，僅次于印度[1]。接種卡介苗(BCG)是目前預(yù)防結(jié)核病的主要措施，但大規(guī)模的疫苗控制試驗(yàn)表明其保護(hù)效力不夠理想。BCG免疫效果不穩(wěn)定，對(duì)成人沒(méi)有保護(hù)作用，可干擾皮膚結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)果，并且不能用于免疫功能缺損患者[2]。因此，需要發(fā)展更有效的疫苗來(lái)控制結(jié)核病。
近20年國(guó)際組織提出控制結(jié)核病主要方法有①發(fā)現(xiàn)和治療痰菌陽(yáng)性者；②新生兒接種卡介苗(BCG)，約80％獲得保護(hù)力。BCG作為疫苗具有抗結(jié)核病的功效首先在印度提出，毫無(wú)疑問(wèn)BCG能保護(hù)嬰兒，但這種保護(hù)作用的持久性很有限，好象不能持續(xù)到成年；而且，卡介苗是活疫苗，苗內(nèi)活菌數(shù)直接影響免疫效果。盡管早期用BCG接種在兒童中具有非常好的效果，然而靠接種來(lái)提供終生保護(hù)的概念并非出自BCG，這和BCG不能在人體中持續(xù)存在超過(guò)三年的事實(shí)有關(guān)[3]。因此，BCG最終就喪失了其使效應(yīng)T細(xì)胞及非特異性巨噬細(xì)胞活化的能力。它和野生型TB相反，后者能在宿主體內(nèi)持續(xù)存在直至宿主死亡。在許多例子中也顯示，持續(xù)低水平結(jié)核感染能使包括老年在內(nèi)的免疫抑制期的感染加劇。
目前結(jié)核病疫苗的研究一方面集中于改善BCG的免疫原性，另一方面則集中于開(kāi)發(fā)新型疫苗以代替?zhèn)鹘y(tǒng)BCG。但DNA疫苗在單獨(dú)注射時(shí)難以發(fā)揮保護(hù)作用，因此如何提高其免疫保護(hù)能力迫在眉睫[4]。
白細(xì)胞介素24(Interleukin-24，IL-24)，最先于1995年從人的黑色素瘤HO-1細(xì)胞中分離得到克隆，該基因在誘導(dǎo)分化的黑色素瘤細(xì)胞中高表達(dá)，并能促進(jìn)黑色素瘤細(xì)胞分化，因此最初命名為MDA-7(黑色素瘤分化相關(guān)基因-7 melanoma differentiation-associatedgene-7)[5]。IL-24可誘導(dǎo)人外周血單個(gè)核細(xì)胞產(chǎn)生高水平IFN-γ、IL-6、TNF-α，以及少量IL-1β、IL-12和粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)，提示IL-24是一種免疫調(diào)節(jié)分子，主要表現(xiàn)為對(duì)TH1型細(xì)胞因子的誘導(dǎo)，具有抗腫瘤作用和抗感染作用[6]。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種增強(qiáng)抗結(jié)核DNA疫苗Ag85B保護(hù)效果的細(xì)胞因子，利用構(gòu)建用于增強(qiáng)人機(jī)體免疫應(yīng)答的細(xì)胞因子pVAX1-IL-24質(zhì)粒，通過(guò)肌肉注射方式與抗結(jié)核DNA疫苗Ag85B共同免疫，使被免疫者能夠抵抗結(jié)核桿菌的感染。從而為其開(kāi)辟了在抗結(jié)核感染中制備新型有效的抗結(jié)核DNA疫苗的新途徑。
本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題采用以下的技術(shù)方案本發(fā)明提供的人白細(xì)胞介素24具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，該序列含有人白細(xì)胞介素24蛋白分子的601個(gè)堿基。
人白細(xì)胞介素24的重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24，其構(gòu)建包括用PCR法將人IL-24cDNA從pcDNA3.1-IL-24擴(kuò)增與純化，得純化的PCR產(chǎn)物，構(gòu)建到真核表達(dá)載體pVAX-1上，其特征是包括以下步驟(1)重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24的構(gòu)建和獲得將純化的PCR產(chǎn)物和載體pVAX1用BamHI和XhoI雙酶切后，分別回收酶切產(chǎn)物，用T4DNA連接酶定向?qū)L-24基因片段與pVAX-1連接，以連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化入DH5α感受態(tài)細(xì)菌，在LB(kan+)培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)；挑取陽(yáng)性克隆，培養(yǎng)后小量提取質(zhì)粒，用BamHI和XhoI雙酶切，在1％瓊脂糖凝膠檢測(cè)，獲得正確的重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24。
其中，PCR所用的上游引物p1、下游引物p2分別具有SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列，即上游引物p15′-GGGATCATGAATTTTCAACAGAGGCTG-3′，酶切位點(diǎn)為BamHI，下游引物p25′-CCTCGAGTCAGAGCTTGTAGAATTTCTGC-3′，酶切位點(diǎn)為XhoI。
(2)重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24的DNA的制備將鑒定正確的質(zhì)粒pVAX1-IL-24在LB(kan+)培養(yǎng)基中于37℃振蕩培養(yǎng)過(guò)夜，用生理鹽水調(diào)節(jié)細(xì)菌濃度為2×108/ml；根據(jù)大量提取試劑盒操作說(shuō)明提取并純化質(zhì)粒；將抽提的質(zhì)粒溶解于生理鹽水中，測(cè)OD260/OD280的比值為1.70～1.85，適于DNA注射所用；然后將質(zhì)粒的濃度調(diào)節(jié)到1μg/μL。
本發(fā)明提供的人白細(xì)胞介素24，其在增強(qiáng)抗結(jié)核作用中的應(yīng)用。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下的主要優(yōu)點(diǎn)DNA疫苗因?yàn)槟苡行У卣T導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答(cell-mediatd immunity，CMI)，使機(jī)體獲得抗結(jié)核分支桿菌感染的保護(hù)力，因而在結(jié)核病疫苗的開(kāi)發(fā)中占有重要地位，但目前DNA抗結(jié)核疫苗的保護(hù)能力普遍不高[7]。IL-24真核表達(dá)載體質(zhì)粒進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)，可激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生高水平IFN-γ、IL-6、TNF-a，以及少量IL-1β、IL-12和粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)，應(yīng)而可以協(xié)同Ag85B發(fā)揮更強(qiáng)的免疫保護(hù)作用。本發(fā)明提供IL-24基因插入美國(guó)FDA推薦為可用于人類的表達(dá)載體pVAX-1中[8]，與抗結(jié)核DNA疫苗Ag85B聯(lián)合免疫，可在機(jī)體上持續(xù)表達(dá)的蛋白IL-24和Ag85B并刺激機(jī)體獲得抗結(jié)核所需的Th1型免疫應(yīng)答。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示，免疫小鼠抵抗標(biāo)準(zhǔn)結(jié)核菌株H37Rv的攻擊能力顯著加強(qiáng)。
總之，本發(fā)明構(gòu)建的pVAX1-IL-24系真核表達(dá)載體，其聯(lián)合抗結(jié)核DNA疫苗Ag85B，可以在機(jī)體內(nèi)表達(dá)IL-24蛋白，具有增強(qiáng)Th1型細(xì)胞免疫作用并增強(qiáng)Ag85B保護(hù)作用。在增加感染結(jié)核小鼠生存時(shí)間，改善病理水平方面有積極作用。


圖1為重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24的瓊脂糖凝膠圖。其中1.DNAmarker；2.IL-24PCR產(chǎn)物；3.pVAX-1空載酶切(BamHI和XhoI)產(chǎn)物；4.pVAX1-IL-24質(zhì)粒；5.pVAX1-IL-24/BamHI+XhoI，pVAX1-IL-24為酶切產(chǎn)物。pVAX-1的大小為3.0kb，擴(kuò)增產(chǎn)物IL-24的大小約0.6kb。
重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24為3.6kb，經(jīng)雙酶切后分別為3.0kb和0.6kb，經(jīng)與圖中DNAmarker所示的標(biāo)準(zhǔn)分子量對(duì)比可以知道，構(gòu)建的質(zhì)粒片段是正確的。
圖2免疫小鼠的抗結(jié)核桿菌Ag85B抗體水平。分別觀察空載質(zhì)粒、單獨(dú)Ag85B和聯(lián)合IL-24免疫小鼠后血中抗Ag85B抗體水平?？梢悦黠@看到pVAX1-IL-24可增強(qiáng)Ag85B在體內(nèi)抗體的表達(dá)。pVAX-Ag85B+pVAX-IL24組與其它組相比，*p＜0.05。
圖3感染結(jié)核桿菌后小鼠體內(nèi)組織活菌量數(shù)量。
A組(H37Rv+NS對(duì)照)；B組(H37Rv+pVAX-1)；C組(H37Rv+pVAX-Ag85B)；D組(H37Rv+pVAX1-IL-24)；E(H37Rv+pVAX-Ag85B+pVAX-IL-24)；F(H37Rv+鏈霉素)。
箭頭表示抗酸染色陽(yáng)性的紅色結(jié)核桿菌。取菌量對(duì)數(shù)和平均誤差檢測(cè)，由圖3可知兩組織中聯(lián)合免疫的小鼠的體內(nèi)菌量明顯減少。
圖4HE染色片。
圖4AH37Rv+生理鹽水(normal saline，NS)對(duì)照組肺組織感染抗酸染色。箭頭指示的是結(jié)核桿菌，可以看到聯(lián)合免疫組抗酸染色陽(yáng)性的結(jié)核桿菌最少，說(shuō)明抗酸能力最強(qiáng)。
圖4BH37Rv+pVAX-1對(duì)照組肺組織感染HE染色。聯(lián)合免疫組有少量漿液滲出、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。其組織病變最小，說(shuō)明阻遏結(jié)核感染能力最強(qiáng)。
圖4CH37Rv+pVAX-Ag85B對(duì)照組肺組織感染HE染色。
圖4DH37Rv+pVAX1-IL-24對(duì)照組肺組織感染HE染色。
圖4EH37Rv+pVAX-Ag85B+pVAX-IL-24對(duì)照組肺組織感染HE染色。
圖4FH37Rv+鏈霉素對(duì)照組肺組織感染HE染色。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明提供的人白細(xì)胞介素24具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，該序列含有人白細(xì)胞介素24蛋白分子的601個(gè)堿基(請(qǐng)見(jiàn)文章末尾的序列表)。
本發(fā)明提供了人白細(xì)胞介素24的重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24，其構(gòu)建包括用PCR法將人IL-24cDNA從pcDNA3.1-IL-24擴(kuò)增與純化，得純化的PCR產(chǎn)物，構(gòu)建到真核表達(dá)載體pVAX-1上，具體包括以下步驟
一.構(gòu)建模板為T(mén)RAP-hIL-24上游引物為5′-GGGATCATGAATTTTCAACAGAGGCTG-3′酶切位點(diǎn)為BamHI，下游引物為5′-CCTCGAGTCAGAGCTTGTAGAATTTCTGC-3′酶切位點(diǎn)為XhoI。將純化的PCR產(chǎn)物和載體pVAX1用BamHI和XhoI雙酶切后，分別回收酶切產(chǎn)物，用T4DNA連接酶定向?qū)L-24基因片段與pVAX-1連接，以連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化入DH5α感受態(tài)細(xì)菌，在LB(kan+)培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。挑取陽(yáng)性克隆，培養(yǎng)后小量提取質(zhì)粒，用BamHI和XhoI雙酶切，在1％瓊脂糖凝膠檢測(cè)。
二.質(zhì)粒DNA的制備將鑒定正確的質(zhì)粒pVAX1-IL-24在LB(kan+)培養(yǎng)基中于37℃振蕩培養(yǎng)過(guò)夜，用生理鹽水調(diào)節(jié)細(xì)菌濃度為2×108/ml。根據(jù)大量提取試劑盒操作提取并純化質(zhì)粒。將抽提的質(zhì)粒溶解于生理鹽水中，測(cè)OD260/OD280的比值，均在1.8左右，適于DNA注射所用。將質(zhì)粒的濃度均調(diào)節(jié)到1μg/μL。
三.免疫小鼠的抗結(jié)核桿菌Ag85B抗體水平分析將pVAX-1，pVAX-Ag85B，pVAX-Ag85B+pVAX-IL24或生理鹽水分別免疫小鼠(每組6只)，每只小鼠左右分別股4頭肌注射50μg/50μl，總劑量100μg/每只小鼠，經(jīng)免疫一次后的第14天，檢測(cè)血中anti-Ag85B的抗體效價(jià)。
四.小鼠感染結(jié)核桿菌后生存分析在觀察小鼠感染結(jié)核桿菌60天左右，治療組小鼠仍有大量存活。觀察各組50％死亡的平均時(shí)間，生理鹽水組感染后平均存活時(shí)間僅為21天，pVAX-1組感染后半數(shù)平均存活時(shí)間為45天；而聯(lián)合IL-24+Ag85B組和單獨(dú)IL-24或Ag85B質(zhì)粒組和鏈霉素組感染后半數(shù)平均存活時(shí)間均大于45天，與生理鹽水組和pVAX-1組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(*p＜0.05)；但聯(lián)合IL-24+Ag85B組和單獨(dú)IL-24或Ag85B質(zhì)粒組和鏈霉素組間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
五.免疫小鼠肺、脾組織荷菌量；結(jié)核分支桿菌H37Rv感染小鼠后肺、脾組織菌落計(jì)數(shù)(表1)顯示，IL-24+Ag85B聯(lián)合治療組和單獨(dú)IL-24或Ag85B質(zhì)粒組或鏈霉素組感染后的肺、脾組織荷菌量明顯低于空載體或生理鹽水對(duì)照組(*p＜0.05)。
六.抗酸染色片將小鼠肺組織抗酸染色。
1.取組織塊，經(jīng)多聚甲醛固定后，按常規(guī)脫水包埋。
2.切片4～5μm，在汽油松節(jié)油脫蠟2次，每次約5～10分鐘；3.不經(jīng)酒精洗，用紗布將切片周?chē)嘁耗ǜ桑肓魉云矗?.滴入015％高錳酸鉀水溶液，氧化5分鐘，水洗；5.2％草酸水溶液漂白1～2分鐘，水洗；6.滴入苯酚堿性品紅液于室溫5～10分鐘；7.流水洗去多余染液；
8.用20％硫酸水溶液分化至無(wú)色(一般需1分鐘即可)，流水充分漂洗；9.用015％美藍(lán)水溶液淺染20～30s；10.用風(fēng)扇把切片吹干，即用二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。
七.HE染色小鼠組織HE染色1.取材組織塊，經(jīng)固定后，常規(guī)石蠟包埋，4μm切片。
2.切片常規(guī)用二甲苯脫蠟，經(jīng)各級(jí)乙醇至水洗二甲苯(I)5分鐘加入到二甲苯(II)5分鐘，再加入100％乙醇2分鐘→95％的乙醇1分鐘→80％乙醇1分鐘→75％乙醇1分鐘→蒸餾水洗2分鐘。
3.蘇木素染色5分鐘，自來(lái)水沖洗。
4.鹽酸乙醇處理30秒。
5.自來(lái)水浸泡15分鐘或溫水(約50℃)5分鐘。
6.置伊紅液2分鐘。
7.常規(guī)脫水，透明，封片95％乙醇(I)分鐘→95％乙醇(II)1分鐘→100％乙醇(I)1分鐘→100％乙醇(II)1分鐘→二甲苯石碳酸(3∶1)1分鐘→二甲苯(I)1分鐘→二甲苯(II)1分鐘→中性樹(shù)脂封固。
本發(fā)明提供的人白細(xì)胞介素24，具有增強(qiáng)抗結(jié)核作用利用構(gòu)建用于增強(qiáng)人機(jī)體免疫應(yīng)答的細(xì)胞因子pVAX1-IL-24質(zhì)粒，通過(guò)肌肉注射方式與抗結(jié)核DNA疫苗Ag85B共同免疫，使被免疫者能夠抵抗結(jié)核桿菌的感染。IL-24可作為-種新型免疫佐劑，為在抗結(jié)核感染中制備新型有效的抗結(jié)核DNA疫苗的提供了新的途徑。
附表表1 免疫小鼠肺、脾組織荷菌量(CFU)

A、B組與C、D、E和F組相比，*p＜0.05
參考文獻(xiàn)[1]World Health Organisation.The World Health Report.2007.This website describes the work of theStop TB Department. Colditz GA，Brewer TF，Berkey CS，et al.Efficacy of BCG vaccine in the prevention of tuberculosis.Meta-analysis of the published literature.JAMA，1994，271(9)698-702. Zinkernagel RM.On nature and artificial vaccinations.Annv.Rev.Immunol，2003，21515-546. Jiang H，Lin JJ，Su ZZ，et al.Subtraction by bridization identifies a novel melanoma differentiationassociated gene，mda-7 modulated during human melanoma differentiation，growth andprogression[J].Oncogene，1995，11(12)2477-2486. 章曉聯(lián)，汪付兵.新型細(xì)胞因子IL-24及其前景[J].細(xì)胞及分子免疫學(xué)雜志，2003；19(5)S20-S22. Flynn P.E.variation in protection by BCGimplications of and for heterologouis immuntity.Lancet，1995，3461339-1345. Kamath AT，F(xiàn)eng CG，Macdcnald M，et al.Differential protective efficacy of DNA vaccinesexpressing secreted proteins of Mycobacterium tuberculosis.Infect Immun，1999，67(4)1702-1707. FDA，Points to consider on Plasmid DNA Vaccines Preventive Infectious Disease Indications，Published December 22，1996，Docket no.96N-0400.
序列表<110>武漢大學(xué)<120>白細(xì)胞介素24增強(qiáng)抗結(jié)核的作用<140>
<141>
<160>1<170>
<210>1<211>601<212>DNA<213>人白細(xì)胞介素24蛋白<220>
<221>
<222>(1)...(601)<223>
<400>11 atgaattttc aacagaggct gcaaagcctg tggactttag ccagaccctt ctgccctcct61 ttgctggcga cagcctctca aatgcagatg gttgtgctcc cttgcctggg ttttaccctg121 cttctctgga gccaggtatc aggggcccag ggccaagaat tccactttgg gccctgccaa181 gtgaaggggg ttgttcccca gaaactgtgg gaagccttct gggctgtgaa agacactatg241 caagctcagg ataacatcac gagtgcccgg ctgctgcagc aggaggttct gcagaacgtc301 tcggatgctg agagctgtta ccttgtccac accctgctgg agttctactt gaaaactgtt361 ttcaaaaact accacaatag aacagttgaa gtcaggactc tgaagtcatt ctctactctg421 gccaacaact ttgttctcat cgtgtcacaa ctgcaaccca gtcaagaaaa tgagatgttt481 tccatcagag acagtgcaca caggcggttt ctgctattcc ggagagcatt caaacagttg541 gacgtagaag cagctctgac caaagccctt ggggaagtgg acattcttct gacctggatg601 cagaaattct acaagctctg a
<210>2<211>24<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>
<222>(1)...(29)<223>PCR上游引物(p1)<400>25′-GGGATCATGAATTTTCAACAGAGGCTG-3′<210>3<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<221>
<222>(1)...(31)<223>PCR下游引物(p2)<400>35′-CCTCGAGTCAGAGCTTGTAGAATTTCTGC-3′
權(quán)利要求
1.人白細(xì)胞介素24具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，該序列含有人白細(xì)胞介素24蛋白分子的601個(gè)堿基。
2.人白細(xì)胞介素24的重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24，其構(gòu)建包括用PCR法將人IL-24cDNA從pcDNA3.1-IL-24擴(kuò)增與純化，得純化的PCR產(chǎn)物，構(gòu)建到真核表達(dá)載體pVAX-1上，其特征是包括以下步驟(1)重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24的構(gòu)建和獲得將純化的PCR產(chǎn)物和載體pVAX-1用BamHI和XhoI雙酶切后，分別回收酶切產(chǎn)物，用T4DNA連接酶定向?qū)L-24基因片段與pVAX-1連接，以連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化入DH5α感受態(tài)細(xì)菌，在LB(kan+)培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)；挑取陽(yáng)性克隆，培養(yǎng)后小量提取質(zhì)粒，用BamHI和XhoI雙酶切，在1％瓊脂糖凝膠檢測(cè)，獲得正確的重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24，其中，PCR所用的上游引物p1、下游引物p2分別具有SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列，即上游引物p15′-GGGATCATGAATTTTCAACAGAGGCTG-3′，酶切位點(diǎn)為BamHI，下游引物p25′-CCTCGAGTCAGAGCTTGTAGAATTTCTGC-3′，酶切位點(diǎn)為XhoI；(2)重組質(zhì)粒pVAX1-IL-24DNA的制備將鑒定正確的質(zhì)粒pVAX1-IL-24在LB(kan+)培養(yǎng)基中于37℃振蕩培養(yǎng)過(guò)夜，用生理鹽水調(diào)節(jié)細(xì)菌濃度為2×108/ml；根據(jù)大量提取試劑盒操作提取并純化質(zhì)粒；將抽提的質(zhì)粒溶解于生理鹽水中，測(cè)OD260/OD280的比值為1.70～1.85，適于DNA注射所用；然后將質(zhì)粒的濃度調(diào)節(jié)到1μg/μL。
3.人白細(xì)胞介素24在增強(qiáng)抗結(jié)核作用中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)的人白細(xì)胞介素24具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，該序列含有人白細(xì)胞介素24蛋白分子的601個(gè)堿基。人白細(xì)胞介素24的重組質(zhì)粒pVAX1－IL－24，其構(gòu)建包括用PCR法將人IL－24cDNA從pcDNA3.1－IL－24擴(kuò)增與純化，得純化的PCR產(chǎn)物，構(gòu)建到真核表達(dá)載體pVAX－1上，還包括重組質(zhì)粒pVAX1－IL－24的構(gòu)建和制備步驟。本發(fā)明構(gòu)建的pVAX1－IL－24系真核表達(dá)載體，可以在機(jī)體內(nèi)表達(dá)IL－24蛋白，產(chǎn)生Th1型細(xì)胞免疫作用，其聯(lián)合結(jié)核DNA疫苗Ag85B一起免疫，比單獨(dú)用DNA疫苗Ag85B免疫，具有更強(qiáng)的抗結(jié)核感染作用，增強(qiáng)Ag85B抵抗結(jié)核感染的免疫保護(hù)作用，即IL－24具有作為一種免疫佐劑，具有增強(qiáng)抗結(jié)核的免疫保護(hù)的作用。
文檔編號(hào)A61K38/20GK101070542SQ20071005215
公開(kāi)日2007年11月14日 申請(qǐng)日期2007年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月11日
發(fā)明者章曉聯(lián), 孫平 申請(qǐng)人:武漢大學(xué)