專利名稱：：在有哮喘或支氣管痙攣病史的患者中檢測心肌功能障礙的方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及檢測和/或診斷有哮喘或支氣管痙攣史的病人的心肌功能障礙的方法。特別地，本發(fā)明使用binodenoson或其它選擇性腺苷A^激動劑作為藥理應激物，并與數(shù)種現(xiàn)有的無創(chuàng)和有創(chuàng)診斷操作中的任一種相聯(lián)合。
背景技術：
：腺苷從20世紀20年代早期起即已知為具有強效的血管擴張活性。它是由身體大多數(shù)組織在應激特別是低氧和缺血應激下釋放的局部激素(參見Olsson等，PhysiologicalReviews,70(3),761-845,1990)。這樣，腺苷和腺苷釋放劑目前通常為診斷目的用來模擬應激狀況(參見A.N.Clark禾QG.A.Beller.Thepresentroleofnuclearcardiologyinclinicalpractice.QuarterlyJournalofNuclearMedicineandMolecularImaging2005;49:43-58)。在當前使用應激模擬劑(藥理應激物)作為冠狀血管顯像手段以獲得冠狀動脈疾病的診斷結果中，心肌灌注顯像是最常見的方法。這通過注射藥理應激物例如大約lmg/kg體重劑量的腺苷，隨后注射顯像劑例如放射性核素，以及使心臟成像以檢測任何冠脈循環(huán)病變的程度來完成。心肌灌注顯像的機理如下作用于冠脈腺苷受體的腺苷引起冠狀微動脈的舒張，從而增加通過心臟的血流量。這種作用是短期的，并且在lmg/kg的劑量下，腺苷不會擴張其它外周血管而產(chǎn)生顯著的全身低血壓。病變的或者其他阻斷的冠狀血管不會響應腺苷而進一步擴張，并且隨后顯像劑通過心臟的流量在這些灌注不足區(qū)域相對于心臟其它較正常區(qū)域少。得到的圖像能使診斷醫(yī)生對冠脈灌注缺陷的量和嚴重性進行定量。此分析對于醫(yī)生選擇任何進一步的治療和介入過程極為重要(參見例如美國專利5，070，877和4，824，660)。腺苷和類似作用的類似物的使用涉及特定副作用。腺苷作用于腺苷受體的最少三種亞類A。A2和A3。A2受體亞型存在于血管中，并且進一步分為A2a和A2b受體亞型(參見Martin等，JournalofPharmacologyandExperimentalTherapeutics,265(1),248-253，1993)。不受任何特定理論約束，相信A2a受體負責介導冠脈擴張和在診斷過程中提供所需的腺苷作用。&受體亞型當被腺苷激活時，其作用尤其是減慢啟動心跳的電活動的頻率和傳導速度。有時腺苷，特別是在劑量接近lmg/kg時，甚至在診斷過程中阻斷(停止)心跳，這是非常不希望的作用。另一個與施用腺苷相關的副作用是哮喘患者的支氣管收縮。支氣管收縮與肥大細胞上腺苷A3受體的激活作用有關。(參見J丄inden.Trends.Pharmacol.Sci.15:298-306(1994))。此外，腺苷在美國專利6，248，723中被描述為哮喘激惹劑。因此，腺苷和腺苷釋放劑的副作用基本上源于對各種腺苷受體亞型的非選擇性刺激。由于與施用腺苷有關的副作用、特別是支氣管收縮，罹患哮喘和支氣管痙攣史的患者被排除于使用腺苷、dypyrimidamole和腺苷類似物作為藥理應激物的心肌顯像方法之外。包括在排除類中的患者是有例如喘鳴的癥狀或嚴重支氣管痙攣史的患者。這些癥狀在遭受哮喘或慢性阻塞性肺病(COPD)的患者中通常很明顯。尤其哮喘，是影響了近一千兩百萬美國人的肺部重要疾病。哮喘通常特征是周期性氣流受限和/或?qū)е職獾肋^度狹窄的多種刺激的高響應性。其它特征可包括氣道炎癥、嗜曙紅細胞增多和氣道纖維化。哮喘的患病率(即發(fā)病率和持續(xù)時間兩者)正在增加。當前患病率接近人口的10%并且在過去20年中增加了25%。然而更讓人關心的是死亡率的上升。當結合急診室就診和住院的增加時，近期數(shù)據(jù)提示哮喘嚴重度正在上升。雖然大多數(shù)哮喘病例易于控制，但是對那些患有較嚴重疾病的患者來說，花費、副作用和時常的治療無效都是嚴重問題。COPD的特征是小氣道(〈2mm)慢性炎癥，它不可避免地引起氣道這部分的組織重建和不可修補的變窄(阻塞)?；加蠧OPD的患者一般表現(xiàn)出肺的最大呼氣流量減少和用力排空減慢。COPD經(jīng)常與慢性支氣管炎和肺氣腫相關。除了腺苷，其它常見用于心肌顯像的藥理應激物包括雙嘧達莫和多巴酚丁胺。雙嘧達莫抑制細胞對腺苷的攝取，增強內(nèi)源腺苷的細胞外作用。與腺苷類似，雙嘧達莫被排除于用作哮喘患者和有支氣管痙攣史患者的藥理應激物。多巴酚丁胺可在患有哮喘或支氣管痙攣史的肺病患者中用作心肌顯像的藥理應激物。然而多巴酚丁胺與腺苷相比有某些缺點。例如，多巴酚丁胺副作用在患者中十分常見。這些副作用包括室性心律不齊(或早搏)、胸痛、心悸、頭痛、面紅和呼吸困難。副作用還可包括心房顫動或室上性心動過速。此外，據(jù)報告很多冠狀動脈疾病患者中發(fā)生了伴有ST段壓低的心絞痛。授予McAfee等人的美國專利5，477，857("'857專利")，要求保護2-環(huán)己基甲基肼基腺苷的心肌顯像用途。雖然，857專利公開了其它肼基腺苷化合物可被使用，但是只將單一化合物的使用方法作為權利要求。，857專利還要求保護哺乳動物心肌顯像的方法。沒有例示或公開具體的人類用法。Martin等人一般性公開了2-環(huán)己基亞甲基肼基腺苷(binodenoson)與腺苷比較的藥理學性能。參見DrugDdvelopmentResearch40:313-324,1997。Martin等人在麻醉和清醒的狗中，特別比較了某些劑量的binodenoson與腺苷對冠脈血流的作用。基于報道的增加狗冠脈擴張的劑量，在過敏性羊哮喘模型上給藥類似劑量以測量對肺阻力的作用。觀察到以下結果不同于腺苷，binodenoson不增加羊的肺阻力；但是施用了binodenoson的羊在呼吸速率上有顯著增高。因此，在羊模型中，作者沒有報道能避免不良作用例如呼吸速率增加的binodenoson劑量?？傊?，仍需要在有哮喘或支氣管痙攣不伴支氣管收縮的病史的患者中安全實現(xiàn)冠脈擴張的binodenoson劑量，以使更廣的患者群能進行心肌顯像方法。此外，由于對binodenoson的冠脈充血響應，這在易損患者群即那些可能患有冠脈血流病變的患者中改變了冠脈血流，這種給藥方法和binodenoson劑量引起的充血作用應當易于逆轉(zhuǎn)。發(fā)明概述在一方面，本發(fā)明涉及在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中，診斷心肌功能障礙的方法。此方法包括以下步驟(a)通過靜脈途徑對患者施用大約0.1至大約l(Hig/kg的binodenoson以提供冠狀動脈擴張；和(b)檢測病人的心肌功能障礙。在此方法的一些實施方案中，binodenoson是以靜脈推注劑量對所述病人施用。例如，在具體實施方案中，大約0.5至大約2.5pg/kg的binodenoson施用至所述病人。在此方法的其它實施方案中，對所述病人輸注binodenoson。例如，在具體實施方案中，大約0.3至2.0jig/kg/min的binodenoson施用至所述病人。在此方法的具體實施方案中，心肌功能障礙是冠狀動脈疾病、心室功能障礙、通過無病變冠狀血管和狹窄血管的血流的差異、或其組在此方法的一些實施方案中，步驟(b)包含無創(chuàng)心肌顯像操作。例如，在具體實施方案中，無創(chuàng)性顯像操作包括施用顯像劑。在另一方面，本發(fā)明涉及在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中，檢測和/或診斷冠狀動脈疾病的方法。檢測冠狀動脈疾病的方法包括以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約lOpg/kg的binodenoson,以提供冠狀動脈擴張；(b)對病人施用顯像劑；和(c)對病人進行心肌灌注顯像，檢測冠狀動脈疾病。在另一方面，本發(fā)明涉及在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中，檢測和/或診斷冠狀動脈疾病引起的心室功能障礙的方法。檢測心室功能障礙的方法包括以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約10pg/kg的binodenoson,以提供冠狀動脈擴張；和(b)對病人進行心室功能顯像技術以檢測心室功能障礙。在另一方面，本發(fā)明涉及在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中，檢測和/或診斷灌注異常的方法。檢測灌注異常的方法包括以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約1(Hig/kg的binodenoson,以提供冠狀動脈擴張；和(b)檢測病人的灌注異常。在檢測灌注異常的方法的某些實施方案中，步驟(b)包括測量病人的冠脈血流速度，以評測與無病冠狀血管相比，病變冠狀血管的舒張能力。在此方法的其它實施方案中，步驟(b)包括評測與無病冠狀血管相比，病變冠狀血管的舒張能力(貯備能力)。在另一方面，本發(fā)明涉及在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中，檢測冠狀動脈疾病存在和評測其嚴重性的方法。此方法包括以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約10jig/kg的binodenoson，以提供冠狀動脈擴張；(b)對病人施用放射性藥劑；和(c)對病人進行閃爍照像以檢測冠狀動脈疾病。在另一方面，本發(fā)明涉及在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中，檢測心室功能障礙存在和評測其嚴重性的方法。此方法包括以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約lOpg/kg的binodenoson，以提供冠狀動脈擴張；和(b)對病人進行超聲心動圖以檢測心室功能障礙。在另一方面，本發(fā)明涉及試劑盒，其包括含有單位劑量binodenoson的第一容器，和含有顯像劑、腺苷拮抗劑或e-2激動劑的第二容器。附圖簡述圖1顯示了用安慰劑和binodenoson(1.5pg/kg)治療的輕度間歇性哮喘的病人，隨時間的1秒鐘平均用力呼氣體積(FEV0。圖2是顯示了25-28個病人(非哮喘)，對3分鐘輸注0.9、1.5和1.5和3微克/kg;和對靜脈推注1.5和3微克/kg(經(jīng)30秒)binodenoson的最大冠脈充血反應的圖。該反應表達為冠脈血流速度儲備(CBFVR)百分數(shù)的平均值±標準偏差。圖3是顯示了在病人(非哮喘)中，5個binodenoson劑量的平均CBFV反應的時程圖，表達為CBFVR的百分數(shù)。圖4是顯示了在病人(非哮喘)中，靜脈推注binodenoson1.5pg/kg對冠脈血流速度(CBFV)、冠脈血管阻力(CVR)、收縮血壓(SBP)、舒張血壓(DBP)和心率(HR)的作用隨時間的圖。圖5是顯示了對非哮喘病人經(jīng)10分鐘時間給藥3pg/kg后binodenoson的平均(士SD)濃度的圖。圖6是顯示了非哮喘病人中，binodenosonAUC。.t和總劑量(微克)之間關系的圖。圖7是顯示了非哮喘病人中，binodenoson全身清除率和體重之間關系的圖。圖8是顯示了非哮喘病人中，每個受試者與binodenoson劑量相關的不良反應數(shù)量的直方圖。圖9A顯示了非哮喘病人中，不同binodenoson劑量下心率的平均(SD)最大變化。圖9B顯示了非哮喘病人中，收縮壓和舒張壓的平均(SD)最大變化。圖IO是顯示了經(jīng)IO分鐘、3分鐘和30秒時間給藥1.5pg/kg后，模擬的體循環(huán)中binodenoson濃度的圖。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了在患有具有反應性氣道要素的肺病病人，例如哮喘或COPD病人中，檢測心肌功能障礙的方法。尤其是，本發(fā)明的方法使更廣的患者群從依賴于通過施用藥理應激物增加冠脈血流的已知心肌功能障礙診斷操作中獲益。由于本發(fā)明的方法使用選擇性八23激動劑例如binodenoson來提供冠脈擴張，并因此增加冠脈血流，此方法基本上減少或消除了與使用其它藥理應激物例如腺苷、dipyrimadole或多巴酚丁胺伴隨的不希望副作用。此改進對患有反應性氣道要素的肺病患者尤其重要，因為與無肺病的患者相比，他們能夠安全使用的藥理應激物較少。在一個實施方案中，例如，本發(fā)明的方法適用于檢測有哮喘或支氣管痙攣史的患者的心肌功能障礙。在一些實施方案中，這些患者可以通過介紹其醫(yī)療史以檢測有反應性氣道要素的肺病史例如哮喘或支氣管痙攣來鑒別?；蛘撸p微哮喘患者能在篩查面談或會診時，通過確定施用沙丁胺醇后支氣管收縮的逆轉(zhuǎn)來鑒別。在另一個實施方案中，患哮喘的患者能以乙酰甲膽堿激發(fā)試驗的陽性激發(fā)來鑒別。藥理應激物本發(fā)明中用作藥理應激物的適合化合物是腺苷A2a受體的強效選擇性激動劑。在具體實施方案中，該藥理應激物用作腺苷A2a受體激動劑，其冠狀血管舒張的冠狀血管舒張EC5Q少于2.5nM，與腺苷&受體相比的選擇性指數(shù)之商最少10,000,與腺苷A2b受體相比的選擇性之商最少IO，OOO。在優(yōu)選實施方案中，對該化合物己進一步檢測其對患反應性氣道要素病癥的患者例如患哮喘或支氣管痙攣的患者有害的副作用。人A2a受體選擇性激動劑化合物在Olsscm等人的美國專利5，278,150("，150專利")中公開，引其全部入本文作為參考。描述于'150專利的化合物一般是2-取代肼基腺苷。'150專利中的化合物的選擇性和效力有很大不同。該專利僅公開了這些化合物的A,/Ah選擇性和有效性。通常另外需要對用于本發(fā)明的適用性的測試，測量A2b/A2a選擇性和確定化合物對有哮喘和支氣管痙攣史的病人是否有可接受水平的副作用。對A2a受體有效的其它腺苷化合物公開于Monaghan等人的美國專利6，326,359("'359專利")，引其全部入本文作為參考。雖然相信'359專利中的一些化合物可能是適合的，但是尚無對效力、Ai/A2a和A2b/A2a選擇性的可用數(shù)據(jù)。公開于'359專利中的化合物在本發(fā)明的使用因此需要這樣的檢測，以及對有哮喘或支氣管痙攣史的病人副作用的檢測。在具體實施方案中，藥理應激物選自2-{2-[(環(huán)己基)亞甲基]肼基}腺苷(binodenoson)，2-{2-[(環(huán)己-3-烯基)亞甲基]肼基}腺苷，2-[2-(4-甲基亞戊基)肼基]腺苷，2-[2-(3-乙基亞庚基)肼基]腺苷，2-[2-(亞己基)肼基]腺苷，2-[2-(4-甲氧基亞芐基)肼基]腺苷，2-[2-(4-丙基亞庚基)肼基]腺苷，2-[2-(3-丙基次芐基)肼基]腺苷，2-[2-(亞芐基)肼基]腺苷，2-[2-(4-氟代亞芐基)肼基]腺苷，2-[2-(4-甲基次芐基)肼基]腺苷，2-[2-(3-甲基次芐基)畊基]腺苷，或2-[2-(4-氯代亞芐基)肼基]腺苷?；衔锬芡ㄟ^已知方法來評測其作為藥理應激物的適用性，以確定化合物對腺苷A2a受體的效力和選擇性。在一個實施方案中，將Langendorff豚鼠心臟制備物以260跳/分鐘搏動，左心房用作A！腺苷受體和A2a腺苷受體激動劑活性分析。參見J.Med.Chem.1991,34，1349和美國專利5，278，150。灌注緩沖液由120mMNaCl、27mMNaHC03、3.7mMKCl、1.3mMKH2P04、0.64mMMgS04、1.3mMCaCl2、2mM丙酮酸鹽和5mM葡萄糖組成。緩沖液用95%02/5%(302飽和，在熱交換器中于37。C平衡并且在等于55mmHg的壓力下遞送。依靠插過二尖瓣的導管使左心室持續(xù)排出，確保該心腔沒有外部工作。在右心室中的電極監(jiān)測心電圖。在響應化合物給藥的穩(wěn)態(tài)相期間，定時將心臟流出液收集在量筒中，測量冠脈總血流，這還通過主動脈灌流套管中的在線電磁流量計來監(jiān)測?；衔镙斪⒙?mol/min)除以冠脈血流量(L/min)的商等于灌流液中的激動劑濃度。激動劑輸注的速度以3-4分鐘的間隔逐步增加直到二度心傳導阻滯(Wenckebach點)出現(xiàn)。刺激-QRS間期的延長的EC5。(EC5()-SQRP)，延長間期達最大反應的50%需要的化合物濃度，反映了對腺苷Ai受體的活性。冠脈血流數(shù)據(jù)的對數(shù)轉(zhuǎn)換和logit(冠脈血流)對log[化合物]對logit-O解回歸得到冠狀血管舒張ECso的估計值(EQ。-CF)，A2腺苷受體活性的指數(shù)。刺激QRS時間延長的EC50除以冠狀血管擴張的EC5。的商提供了選擇性的指數(shù)。指數(shù)值〉1表明對A2腺苷受體有選擇性。某些高選擇性效力的腺苷A2a受體激動劑已公開于例如美國專利US5,278，150("150專利")中。，150專利描述了以下化合物在如上所述的Langendorff豚鼠心臟制備物中得到的EC5()-SQPR和EC5()-CF數(shù)據(jù)，描述于下表1。表1中A一Ah選擇性用刺激-QRS時間延長的ECso除以冠狀血管擴張的EC5Q的商來計算?；衔颮1ECso-SQPR(A!)(nM)EC50-CF(A2a)(nM)Binodenoson環(huán)己基3,5500.2613,800B3-環(huán)-己烯基13,8000.3242,700C3-甲基-l-丁基20,9000.4744,700D2-C己基乙基9,7700.6914,100E1-戊基38,9001.0238,000F4-甲氧基苯基22,9001.7413,200G3-C己基丙基66,1001.7837,200<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>如表1所見，許多2-取代肼基腺苷化合物顯示了對腺苷八2受體的高親合力，相比較于Ai受體具有極好的選擇性。最優(yōu)選那些顯示了高A2效力(EC5o-CF《.5)和高選擇性(選擇性〉10，000)的化合物。表2-表1中化合物的鑒別<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>對照B2-氨基腺苷對照C2-肼基腺苷還優(yōu)選使用對A2a受體選擇性超過A2b受體的化合物。其它進行生物檢測的方法是本領域公知的，并且對鑒別A2b受體的選擇性以及證實體內(nèi)選擇性和效力是有用的。這樣的生物分析一般在動物和人體試驗前進行。表3顯示了在人體試驗前進行binodenoson的制備豚鼠分析的結果。表3-Binodenoson的生物檢測試驗分析腺苷受體EC50(nM)G.P.右心房21,000(負性變力)G.P.左心房38,900(負性變力)G.P.右心房A！39,800(負性變時)G.P丄angendorf心臟At3,500(負性變傳導)G.P丄angendorf心臟A2a0.26c冠脈擴張)G.P.主動脈環(huán)A2b44,700(松弛)如表3所見，binodenoson是有效的A2a激動劑，并且證實相比較于腺苷^和A2b受體，其對A2a受體非常有選擇性。合理的是，表1中鑒別的其它化合物具有相應結果并且也適用于本發(fā)明。在本發(fā)明的具體實施方案中，腺苷A2a受體激動劑是binodenoson。特別是，施用選擇性A2a激動劑binodenoson，不需要病人進行運動而達到冠狀血管擴張的有效水平。Binodenoson的這種性質(zhì)允許不能運動的患者通過下述檢測方法來評測。因此，在本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方案中，患者僅需要施用Binodenoson來誘發(fā)冠脈擴張水平，易化了檢測程序。在替換性實施方案中，本發(fā)明的方法可以這樣實施，其中病人進行運動，運動量足以促進已被binodenoson誘導的冠狀動脈擴張。例如，患者可在使用用于檢測心肌功能障礙的存在和評測其嚴重性的技術前或同時在踏車上走或跑。在運動和施用binodenoson相結合的實施方案中，可施用較低劑量的binodenoson。檢測心肌功能障礙的方法在某些實施方案中，本發(fā)明涉及在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中，診斷心肌功能障礙的方法。通過實施方案，本發(fā)明用腺苷A^受體激動劑binodenoson進行描述。然而，本領域技術人員認識到其它選擇性腺苷Ah受體激動劑例如以上描述那些，可以在如前述部分評測其選擇性和如實施例1和3所述評測其安全性后，用于本發(fā)明的方法。此方法包括以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用0.1至10ng/kg的binodenoson,提供冠狀動脈擴張；和(b)檢測病人的心肌功能障礙。檢測心肌功能障礙包括檢測病人心肌功能障礙的存在、心肌功能障礙在患者心臟中的位置、評測病人心肌功能障礙的嚴重性、或它們的組合。心肌功能障礙可以是，但是不限于，冠狀動脈疾病(例如冠狀血管狹窄)、冠脈壁異常、心室功能障礙、瓣膜或先天性心臟病和心肌病、微血管疾病和心肌存活力。使用binodenoson作為藥理應激物的檢測操作可以是無創(chuàng)或有創(chuàng)檢測操作。無創(chuàng)檢測操作包括那些使心肌或心肌梗塞成像(心肌灌注顯像和心肌梗塞顯像)的操作。此外，無創(chuàng)檢測操作包括那些可以評測心室功能和心壁運動的操作。顯像劑經(jīng)常在無創(chuàng)檢測程序中施用。通常，顯像劑在注射藥理應激物后給患者注射，然后醫(yī)生檢測、記錄和分析圖像(使用例如旋轉(zhuǎn)的伽馬閃爍分析器)。顯像劑包括但是不限于，放射性藥物(例如用于單光子發(fā)射計算機斷層成像、正電子發(fā)射斷層成像或計算機斷層成像操作)、核磁共振顯像劑和微氣泡(例如用于心肌聲學造影)。放射性藥物可用于顯像操作并且包括但是不限于鉈-201、銣-82、锝-99m，和锝-99m、氮-13、銣-82、碘-123和氧-15的衍生物。在本發(fā)明的一些實施方案中，心肌功能障礙通過心肌灌注顯像來檢測。成像可通過閃爍顯像、單光子發(fā)射計算機斷層成像(SPECT)、正電子發(fā)射斷層成像(PET)、核磁共振(NMR)成像、灌注超聲造影、數(shù)字減影血管造影(DSA)和超快X射線計算機斷層成像(CINECT)以及這些技術的組合來完成。在心肌灌注顯像的具體實施方案中，本發(fā)明涉及在有哮喘和支氣管痙攣史的病人中，診斷冠狀動脈疾病的存在和評測其嚴重性的方法。此方法包括(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約10ng/kg的binodenoson,提供冠狀動脈擴張；(b)對病人施用放射性藥劑；和(c)對病人進行閃爍顯像以檢測冠狀動脈疾病。例如，在某些實施方案中，完成對病人給藥binodenoson是通過靜脈推注例如1.5pg/kg的劑量，隨后經(jīng)過短時間例如3分鐘使冠脈舒張。然后，對病人施用放射性藥物和進行閃爍成像。在其它實施方案中，通過心室功能成像來檢測心肌功能障礙。成像可用技術例如超聲心動圖、心室造影術和放射性核素血管造影術來完成。在放射性核素血管造影研究的情況下，此硏究可以是右和/或左心室的首次通過或門電路平衡法研究。在心室功能成像的具體實施方案中，本發(fā)明涉及用超聲心動圖診斷有哮喘或支氣管痙攣歷史的病人心室功能障礙的方法。此方法包括(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至10ng/kg的binodenoson,以提供冠狀動脈擴張；和(b)對病人進行超聲心動圖來檢測心室功能障礙。超聲心動圖可用來例如評測局部室壁活動和心肌灌注的異常的存在。使用binodenoson作為藥理應激物的有創(chuàng)操作包括那些心內(nèi)導管評測心肌灌注異常的功能意義的操作。例如，血管內(nèi)超聲導管能插入冠狀血管中來檢測冠狀血管內(nèi)的血流變化。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及診斷有哮喘或支氣管痙攣史的病人中心肌灌注異常的方法。此方法包括(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至10ng/kg的binodenoson，以提供冠狀動脈擴張；(b)檢測灌注異常。在此方法的具體實施方案中，灌注異常的檢測通過測量病人的冠脈血流速度來進行，以評測與無病冠狀血管相比病變冠狀血管的舒張能力。在另一個具體實施方案中，灌注異常的檢測通過測量病人的冠脈血流速度來進行，以評測與患病冠狀血管相比患病冠狀血管的舒張能力。在此方法的特定實施方案中，冠脈血流速度能用血管內(nèi)血流導管(例如多普勒血流導管)來評定，以評測冠狀血管的舒張能力(貯備能力)。在具體實施方案中，本發(fā)明的檢測方法還可包括施用腺苷拮抗劑來逆轉(zhuǎn)患者經(jīng)歷的任何不良副作用、或更快逆轉(zhuǎn)對binodenoson的血管舒張和血液動力學反應的步驟。給藥模型在本發(fā)明的方法中，binodenoson通過靜脈注射大約0.1至大約10pg/kg的劑量施用至有哮喘或支氣管痙攣史的病人。在具體實施方案中，靜脈劑量是0.1至10pg/kg。給藥可通過靜脈推注或輸注binodenoson一段時間來進行。如本文所用并包括權利要求書中，"推注定量/給藥/注射"意為ninodenoson在不超過大約30秒的過程中注射，而"輸注定量/給藥/注射"意為binodenoson在超過大約30秒的過程中給藥。在本發(fā)明方法的優(yōu)選實施方案中，binodenoson通過靜脈推注大約0.1至大約10ng/kgbinodenoson的舒血管劑量來給藥。特別是，推注能避免使用輸注泵的需要。優(yōu)選binodenoson推注給藥劑量少于大約2.5pg/kg，例如0.5至大約2.5pg/kg，例如大約1至大約2pg/kg。在某些具體實施方案中，推注劑量少于2.5pg/kg，優(yōu)選0.5至2.5fig/kg，更優(yōu)選1至2pg/kg。在本發(fā)明的其它實施方案中，binodenoson通過輸注給藥。一般輸注劑量是大約0.1至大約lOpg/kg/min，優(yōu)選大約0.3至大約2.0ng/kg/min，例如大約0.3至大約0.5ng/kg/min。一般來說，病人輸注binodenoson在少于10分鐘的時間內(nèi)完成，在具體實施方案中，在少于5分鐘的時間內(nèi)完成。腺苷A^激動劑的多種替換性給藥方式也可以考慮。這些方式包括以胃腸外劑型、舌下或含服劑型給藥，或用經(jīng)皮裝置以足夠引起血管舒張的速度給藥。給藥試劑盒本發(fā)明包含能簡化醫(yī)生實現(xiàn)病人的冠脈血管舒張和/或進行檢測方法所需步驟的試劑盒。本發(fā)明的典型試劑盒包含單位劑量腺苷A2a激動劑例如binodenoson。在一個實施方案中，單位劑量在含有有效量腺苷A^激動劑、可為無菌的容器中。在這個例子中，此試劑盒還可具有含顯像劑、腺苷拮抗劑(例如氨茶堿)或P-2激動劑(例如沙丁胺醇)的第二容器。顯像劑可包括在使用上文討論的顯像操作的檢測方法中。腺苷拮抗劑可包括在試劑盒中，作為快速逆轉(zhuǎn)腺苷A^激動劑的冠脈充血作用的預防措施。3-2激動劑可包括在試劑盒中，作為逆轉(zhuǎn)可在診斷操作中或隨后在哮喘患者中觀察到的任何支氣管收縮的預防措施。在一些實施方案中，試劑盒還可包括腺苷A^激動劑例如binodenoson通過推注或輸注給藥的裝置。此裝置可包括例如推注A2a激動劑的注射器或適合于A^激動劑輸注給藥的輸注泵。本發(fā)明由以下實施例說明但是不限于以下實施例。實施例實施例1-在輕度間歇性哮喘病人中測量binodenoson的肺反應方法該研究由2部分組成單盲部分和雙盲部分。按著劑量增加，單盲部分入選的輕度間歇性哮喘的受試者，組成3個連續(xù)的入選劑量組，每組8個受試者，這樣劑量組1、2和3接受的binodenoson目標劑量分別為0.5pg/kg、1.0ng/kg和1.5pg/kg。一個劑量組中的所有8個受試者必須按照分配劑量完成用藥，并且每組的醫(yī)療觀察必須在下一組入選開始前可接受。只有單盲部分的所有安全性數(shù)據(jù)的醫(yī)療觀察接受時，才能開始雙盲部分。在雙盲部分，輕度間歇性哮喘的受試者以2:1的比率隨機分配成接受binodenoson1.5pg/kg(計劃n-40)或安慰劑對照(計劃n=20)。兩種研究部分均包含篩檢、治療和隨訪就診。篩檢就診發(fā)生在治療就診前7-14天，并且由體檢、醫(yī)療史、及應用入選和排除標準組成。在治療就診前最少7天的時間中令受試者測定峰值呼氣流量(PEF)和哮喘癥狀。在治療就診中，受試者要繼續(xù)符合所有篩檢合格標準，并且l秒用力呼氣量(FEVi)保持在對合格受試者預計的80%內(nèi)。入選單盲部分的所有受試者和在雙盲法部分中隨機獲得binodenoson的受試者在治療就診期間接受3次靜脈注射(IV):(l)安慰劑；(2)binodenoson的低激發(fā)劑量，檢測潛在過敏性反應；和(3)分配的binidenoson試驗劑量。雙盲部分中隨機接受安慰劑的受試者接受3次安慰劑注射。隨訪就診發(fā)生在治療就診后的2-4天。研究選擇的受試者計劃計劃入選達84個受試者單盲部分24個受試者(3個劑量漸增組，每組8個受試者)和雙盲部分60個受試者(binodenoson組40個受試者和安慰劑組20個受試者)。分析單盲部分24個受試者(3個劑量漸增組，每組8個受試者)和雙盲部分63個受試者(binodenoson組41個受試者和安慰劑組22個受試者)。合格受試者是男性或無妊娠、無泌乳女性，^18歲，體重<350磅，篩檢6個月內(nèi)有輕度間歇性哮喘醫(yī)療史(如國立衛(wèi)生研究院[NIH]制定的"GuidelinesfortheDiagnosisandManagementofAsthma(診斷禾口處理哮喘指導方針)"中所定義)?；蛘?，哮喘可在篩檢中通過從預先定量的吸入器(MDI)吸入2噴(puff)吸入式沙丁胺醇(90mg/puff)或噴霧器遞送2.5mg沙丁胺醇溶液后支氣管收縮(定義為FEVi增加〉12X)的可逆性、或通過陽性醋甲膽堿激發(fā)試驗(MCT)(引起FEVt降低20%的醋甲膽堿的激發(fā)濃度[PC2o]〈8mg/mL)確定。受試者必須能夠單獨使用P2激動劑控制其哮喘；體檢和臨床實驗室檢查確定健康狀態(tài)大體上良好、穩(wěn)定；具有進行如美國胸科學會(AmericanThoracicSociety,ATS)標準所描述的可重復的肺功能測試(PFTs)的能力；吸煙史蕓10包-年，在實驗開始前戒煙最少1年；并且根據(jù)美國心臟病學會(AmericanCollegeofCardiologe，ACC)/美國心臟病協(xié)會(AmericanHeartAssociation,AHA)指導方針的判斷，冠狀動脈疾病(CAD)的可能性低或非常低。受試者如果靜態(tài)坐位(restingsitting)收縮血壓(SBP)〈100或>140mmHg、舒張血壓(DBP)〈60或>90mmHg、脈搏速率〉95次每分鐘(bpm)、或靜態(tài)FEV1下限<80%預期值，則篩檢不合格。此外，受試者如果他們在治療就診前的7天中S3天PEF值的變異性^20%、如果他們在治療就診前4周內(nèi)有感冒、流感或上呼吸道感染、或如果他們對腺苷或雙嘧達莫具有過敏反應史，則治療就診不合格。給藥劑量和方式Binodenoson25pg/mL溶液經(jīng)30秒推注給藥(0.1pg/kg、0.5ng/kg、1.0^ig/kg、1.5ng/kg)。治療持續(xù)時間在研究的單盲和雙盲部分中，每個受試者以^90分鐘間隔接受3次30秒靜脈IV推注。參比治療、給藥劑量和方式、批號與binodenoson溶液匹配的安慰劑經(jīng)30秒靜脈推注給藥。評價標準安全性主要安全性終點是臨床上顯著的支氣管收縮，定義為binodenoson給藥后，F(xiàn)EVi比給藥前基線降低了^20%。其它安全性評測包括需要急救用藥，定期測量肺功能(FEVi[。/^預計]、用力肺活量[FVC]和在FVC中間一半時[FEF2^.7^]的用力呼氣流量)、生命體征、脈氧測量、體檢結果、心電圖(ECG)結果、臨床實驗室結果和不良事件(AEs)。統(tǒng)計方法安全性研究中收集的所有數(shù)據(jù)按照治療(安慰劑；0.1pg/kgbinodenoson激發(fā)；或0.5、1.0或1.5pg/kgbinodenoson)和研究部分(單變量概括的單盲部分或雙盲部分)匯總。連續(xù)變量用描述統(tǒng)計學(n、平均值、中位數(shù)、標準偏差[SD]、以及最小量和最大量)總結。適當時，變異系數(shù)百分數(shù)也被計算機化。分類變量通過提交每類受試者的數(shù)量和百分數(shù)來總結。安全性分析主要集中在肺對binodenoson的反應，如通過FEV!隨時間從基線值的變化進行測量。總結二次的肺測量(例如相對于基線FVC的變化、急救用藥的需要)和非肺的安全性測量(例如血壓、脈搏數(shù)、脈氧測量、ECG變化、臨床實驗室結果)的數(shù)據(jù)。治療緊急AE由根據(jù)下列分類的治療組來總結全體受試者、系統(tǒng)器官類和個體AE。結果研究的單盲部分表4顯示了在研究的單盲部分中，第一和第二次注射后觀察到的FEVK為L和％預計)。表5顯示了在研究的單盲部分中，第一和第二次注射后觀察到的FEF25.7^和FVC。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>表5<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>表6顯示了在研究的單盲部分中，第三次注射后觀察到的PFT參數(shù)[FEV"L和^預計)FEF25.7^和FVC]。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>binodenoson0.1pg/kg90分鐘時測量值作為基線值。在單盲部分中，注射安慰劑或binodenoson0.1pg/kg后，平均值FEV。平均值FEV"X預計)、平均值FEF25^，或平均值FVC上沒有觀察到與基線的臨床顯著變化(表4和5)。此外，在單盲部分期間，注射binodenoson(第三次注射)后，平均值FEV!、平均值FEV!(X預計)、平均值FEF2^.7^或平均值FVC上沒有觀察到與基線的臨床顯著變化(表6)。研究的雙盲部分在研究的雙盲部分中，在binodenoson1.5^g/kg或安慰劑組第一次或第二次注射后，平均值FEV。平均值FEV"X預計)、平均值FEF2s%.75%或平均值FVC上沒有觀察到與基線的臨床顯著變化(表7)。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>;在雙盲部分中，第三次注射(安慰劑或binodenoson1.5pg/kg)后，平均值FEV!、平均值FEV"X預計)、平均值FEF2^，或平均值FVC上沒有觀察到與基線的臨床顯著變化(表8)。此外，沒有觀察到統(tǒng)計學上的顯著治療差異。圖1顯示了在研究的雙盲部分中，安慰劑和binodenoson治療的患者的平均值FEVi(±SD)隨時間的圖。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>第二次注射90分鐘測量值作為基線值研究兩部分結果的總結在研究的單盲或雙盲部分中均沒有觀察到支氣管收縮事件。在研究的單盲或雙盲部分期間均沒有受試者需要急救藥物。在研究的單盲或雙盲部分中，任何的注射后，F(xiàn)EV,平均值、FEV,平均值(％預計)、FEF2^.7^平均值或FVC平均值均沒有觀察到與基線的臨床顯著變化。在單盲部分中，注射安慰劑或binodenoson0.1pg/kg后，沒有受試者出現(xiàn)緊急治療的AEs。在單盲部分中，第三次注射后，一半受試者出現(xiàn)緊急治療AEs(25X的binodenoson0.5pg/kg、50%的binodenoson1.0pg/kg和75%的binodenoson1.5pg/kg)。在雙盲部分中，19%安慰劑受試者和69%binodenoson1.5pg/kg受試者出現(xiàn)AEs，其中大多數(shù)在第三次注射后發(fā)生。Binodenoson1.5pg/kg組中最常見的緊急治療八E是心動過速(31%)、頭暈(18%)、面紅(15%)、竇性心動過速和惡心(各8%)、頭痛和腹部不適(各5%)。在安慰劑組中沒有具體的AE發(fā)生于超過1個受試者。在研究過程中沒有AE引起的死亡、嚴重AEs或過早停藥。沒有觀察到關于實驗室評價、ECG或脈沖血氧測量的有臨床意義的結果。在雙盲部分中，兩個治療組中均觀察到SBP和脈搏數(shù)的一過性升高和DBP的降低，改變的幅度binodenoson組比安慰劑組大。結論此研究在輕度間歇性哮喘的受試者中的結果說明，劑量高達1.5pg/kg的binodenoson不誘導支氣管收縮；和劑量高達1.5pg/kg的binodenoson是安全和良好耐受的；沒有觀察到對肺功能參數(shù)、實驗室評評、生命體征、ECG或脈氧測量的臨床顯著作用。實施例2-在沒有哮喘或COPD史的病人中，與腺苷相當?shù)漠a(chǎn)生冠脈微循環(huán)血管舒張的binodenoson給藥方案此實施例描述了設計來確定用作藥理應激物的binodenoson的適用劑量和給藥方案的研究。具體地，此研究設計之目的在于建立在藥理應激過程中，產(chǎn)生的冠脈血管擴張水平與腺苷所產(chǎn)生的相當、而副作用最少和最輕微的binodenoson給藥方案。冠脈血流速度儲備(CBFVR)通過binodenoson給藥前即刻冠脈內(nèi)(IC)推注腺苷，以能夠直接比較反應的程度來建立。進行心導管檢查的患者在鎮(zhèn)靜前篩檢其合格性并且提供知情同意書。最終合格性由研究者在診斷性導管插入術期間確定。合格患者包括男性或無妊娠的女性，年齡^18歲，體重在40-125kg之間，具有最少1條技術上可進入且可引入多普勒導線(FloWireT",VolcanoCorporation,RanchoCordova,California)的未阻塞冠狀動脈。下列患者被排除在12小時內(nèi)攝入咖啡因、甲基黃嘌呤或雙嘧達莫，或者有氨茶堿或茶堿的過敏史；30天內(nèi)用過任何研究用藥；入選了以前的binodenoson研究；具有活動性哮喘或慢性阻塞性肺疾??；在30天內(nèi)有過急性心肌梗塞；有未控制的高血壓、充血性心力衰竭、左心室肥大、擴張型心肌病、惡性室性心律失常、臨床顯著心瓣膜病、左心室射血分數(shù)^40%、在目的血管中的開放旁路移植或支架、冠狀動脈左主干病(目觀>50%管腔狹窄)、嚴重的3支病變(在3個主要血管中>80%)、血管造影提示血栓、或在導管插入期間接受經(jīng)皮介入。研究開始前7天內(nèi)患者做12導聯(lián)心電圖(ECG)和24小時內(nèi)釆血進行臨床實驗室試驗。診斷性導管插入操作和所有合格標準確認完成后，多普勒導線引入可進入的冠狀動脈中操作直到獲得穩(wěn)定信號。藥物施用:可以使用所有適用的導管插入操作藥物，包括IC硝酸甘油、肝素、抗焦慮劑和鎮(zhèn)痛藥。Binodenoson給藥前15分鐘內(nèi)，2-3次遞增量的IC腺苷快速注射至目標冠狀動脈以確定CBFVR。然后通過留置導管將binodenoson引入外周靜脈。劑量選擇研究中的所有133個患者隨機分配至5個靜脈內(nèi)給藥(IV)方案之一以0.3、0.5或lpg/kg/min的速度連續(xù)輸注3分鐘binodenoson(總劑量0.9、1.5和3pg/kg)，或經(jīng)30秒靜脈推注1.5或3pg/kg劑量的binodenoson。測量法:冠脈血流速度(CBFV)用導引導管導入的多普勒導線測量為連續(xù)搏動(收縮和舒張)速度(cm/sec)。HR來源于ECG信號。SBP和舒張血壓(DBP)直接記錄自導管鞘。對每次IC腺苷注射，CBFVR用注射后CBFV峰值除以各自基線的CBFV值來計算。每個患者的CBFVR最大計算值用作基準，將對binodenoson反應的CBFV與之相比較。對每個binodenoson劑量，在每點上計算基線CBFV(IC腺苷后)、CBFV峰、給藥開始時間后達到CBFV峰的時間、和CBFVR百分數(shù)(計算為binodenoson給藥后CBFV與基線的變化:CBFVR)。心率-血壓乘積(RPP)和冠狀血管阻力(CVR)由每個時間點得到(參見表10中公式)。連續(xù)監(jiān)測研究中的患者直到CBFV回到基線、CBFV回到binodenoson前基線的25%內(nèi)后IO分鐘、或總共45分鐘，以首先發(fā)生者為準。給藥后大約3-4小時或出院前再次測量生命體征?；颊咴趯Ч懿迦牒?-4天回來隨訪就診，包括生命體征、簡化的體檢、12導聯(lián)ECG、血液化學和血液學評測、以及任何遲發(fā)的不良反應的評測。在整個研究中監(jiān)測不良反應。每個方案選擇保守方法，來鑒別劑量選擇研究中SBP和DBP的降低不管基線血壓如何，SBP降低>20mmHg或DBP降低〉15mmHg報告為不良反應。定義為SBP降低至<80mmHg或DBP降低至〈45mmHg的臨床顯著變化發(fā)生率也被記錄。嚴重不良事件定義為那些導致死亡；危及生命或殘廢的；或者需要或延長住院治療的不良事件。TheCodingSymbolsforThesaurusofAdverseReactionTerms(不良反應術語編碼和符號辭典，COSTART)詞典(5.0版，食品和藥物管理局(FoodandDrugAdministration)，Rockville,Maryland)用于通過身體系統(tǒng)和優(yōu)選術語來編碼不良反應。統(tǒng)計分析:用意向治療(ITT)群體分析所有藥效學和安全性數(shù)據(jù)，包括接受任何劑量研究藥物的所有患者。配對t檢驗用于評測CBFV、生命體征、計算CVR和RPP的治療內(nèi)差異(峰:基線)的顯著性；重復的比較用Bonferroni-Holm方法校正。治療組間差異的統(tǒng)計學意義用包括治療和研究者相互作用的方差分析(ANOVA)模型來評價。劑量選擇研究中入選的120個患者(每種劑量24個患者)，提供了90X的效力(power)來推斷群體成功率的95%置信下限是65%。成功定義為保持^2分鐘的CBFVR^85X的冠脈充血。為了允許中途退出，計劃入選138個患者。結果:總計138個患者入選，133人接受研究藥物的單劑量，并包括在ITT分析中。5個隨機患者由于治療前的不良反應、技術困難或撤銷同意書而沒有接受研究藥物。人口統(tǒng)計特征和基線(IC腺苷前)CBFV值5個劑量組間是相似的。IC腺苷引起CBFV值的一過性升高，但是對SBP、DBP或HR沒有一致影響；對IC腺苷反應的患者和引起CBFVR的腺苷平均劑量在劑量組間是相似的。Binodenoson給藥前的基線平均CBFV、HR、SBP、DBP、CVR和RPP值在治療組間是相似的(表9)。對Binodenoson反應的冠脈充血在給藥數(shù)秒內(nèi)是明顯的。CBFV在3分鐘內(nèi)達到接近最大水平，且所有治療組中平均峰反應發(fā)生在第一個6分鐘內(nèi)(pO，001，配對t檢驗，每組)。峰反應在治療組間是相似的(p《.757，ANOVA;圖2)。開始Binodenoson給藥后，各組內(nèi)的充血反應在各時間點是顯著的(p<0.001,重復測量的ANOVA;圖3)。1.5和3pg/kg劑量，無論經(jīng)3分鐘輸注或者推注，產(chǎn)生與CBFVR相當?shù)淖畲蠊诿}充血，而對3分鐘時間輸注的0.3pg/kg/min充血反應效力僅略低(圖2;表9)。平均最大充血的持續(xù)時間(CBFV285XCBFVR的時間)是劑量相關的(p-0.006，ANOVA，表9)。1.5pg/kg推注給藥后最大充血持續(xù)7.4±6.86分鐘。響應于全部5種劑量的平均CBFV表達為CBFVR百分數(shù)，在圖3中顯示。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>每個結果變量的整體治療效果(ANOVA)p>0.05。binodenoson后。在導管插入觀察期間binodenoson后的最高CBFV;峰和基線間的每個治療內(nèi)差異(配對t檢驗)p<0.001。11治療效果(ANOVA)p岣.006ANOVA-方差分析；CBFV-冠脈血流速度；CBFVR-冠脈血流速度儲備(IC腺苷后的峰CBFV/基線CBFV);cm-厘米；ITT-意向治療；mh^分鐘；SD-標準偏差；sec-秒。充血反應伴有劑量相關的HR(p=0.003，ANOVA)和RPP(p=0.010,AN0VA)增加；HR和RPP的增加在用3pg/kg劑量治療的患者中最大(表10)。SBP、DBP和CVR的適度降低在劑量間是相似的(分別p-0.42、0.45和0.42，ANOVA);當通過輸注或推注給藥劑量相當時，表10和生命體征的峰變化是相似的。binodenoson誘導的平均SBP、DBP、CVR、RPP和HP變化在大約15分鐘內(nèi)回到接近基線水平。不可能精確判定CBFV返回基線需要的時間，因為給藥大約15分鐘后，導管就從大多數(shù)患者中撤出。所有患者在這時是穩(wěn)定的。衰減的CBFV反應的外推法提示，CBFV將在30分鐘內(nèi)完全回到基線。對1.5pg/kg推注響應的平均CBFV、CVR、SBP、DBP和HR在圖4中顯示。表10Binodenoson給藥后的生命體征和血液動力學參數(shù)(ITT群體)*Binodenoson輸注(pg/kg/minX3min)Binode加son推注(iag/kg)0.3(n=26)0.5(n=28)(n=26)(n=28)(n=25)HR(bpm)1最大值11SBP(mmHg)1最大值DBP(mmHg)1最大值CVR1基線最大值RPP1最大值邁74.7±17.669,5±14.472.04±12.075.04±13.895.0±17.994.5±17.6102.7±16.697.1±14.7134.5±26.0133.3±29.9128.4±24.1132.7±23.2108.6±24.5108.0±20.4105.0±23.7103.2±20.075.0±11.873.6±12.071.6±10.872.2±8.457.9±12.958.3±10.655.8±10.954.6±10.15.3±2.26.2±3.35.8±2.75.1±2.61.7±0.61.9±0.71.7±0.61.7±0.89913±30519096±20879111±18599975±278412035±268611995±279512839±335512101±297474.9±14.6108.0±11.4126.0±21,1103.2±17.473.8±11.058.8±9.95,2±1.21.6±0.49344±200913152±25731平均值i標準偏差。最大值反映在導管插入觀察期間變量從基線的最大增加。對每個變量，最大值和基線間的每個治療內(nèi)差異(配對t檢驗)pO.OOl。對于整體治療效果(ANOVA)1p>0.05，np=0.003,rap=0.010。公式CVR(cm*mmHg/sec)=([SBP-DBP]/3+DBP)/CBFV}RPP(心跳次數(shù)承mmHg/min)-SBPxHRANOVA-方差分析；bpn^每分鐘心跳次數(shù)；CBFV-冠脈血流速度;CVR-冠狀血管阻力；DBP-舒張壓；HR-心率；min-分鐘；ITT-意向治療；RPP-心率-收縮壓乘積；SBP-收縮壓；sec-秒。Binodenosoii的所有劑量都是良好耐受的。大多數(shù)患者經(jīng)歷最少1個不良事件(ll)。雖然接受最低劑量(0.3pg/kg/minX3min)的患者報告的藥物相關不良事件最少(表ll)，但在組間不良事件的總發(fā)生率沒有顯著區(qū)別0>=0.280，Pearson's卡方檢驗)。大多數(shù)不良事件強度評級為輕度(84%)或中度(15%)。由于方案定義的標準，SBP降低X0mmHg或DBP降低"5mmHg報告為不良事件，低血壓是最常見報告的不良事件；每個劑量組中50%-71%的患者報告此反應且不是劑量相關的。但是，每組僅2-4個患者(7%-15%)出現(xiàn)了SBP降低到〈80mmHg或DBP降低到<45mmHg。在任何劑量均沒有ECGs的不良變化或趨勢，并且在binodenoson給藥間或后沒有ECG相關的不良反應。表11提供了》5%患者報告的不良反應的列表。<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>血管舒張03(11)3(12)01(4)心動過緩1(4)02(8)1(4)0腹痛0001(4)2(8)背痛2(8)5(18)1(4)4(14)1(4)胸痛01(4)4(15)4(14)5(20)頭痛1(4)2(7)2(8)4(14)4(16)注射部位反應1(4)1(4)2(8)00非特異性疼痛1(4)4(14)5(19)3(11)2(8)惡心3(12)3(11)2(8)2(7)5(20)AST或ALT增加0001(4)2(8)頭暈003(12)2(7)1(4)呼吸困難02(7)1(4)1(4)1(4)淤血001(4)02(8)*與基線比SBP降低〉20mmHg或DBP降低>15mmHg。1SBP值<80mmHg或DBP值<45mmHg。ALT-丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶；AST-天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶；DBP-舒張壓；ITT-意向治療；SBP-收縮壓。兩個嚴重不良事件(心室纖維性顫動[n-l]、心肌梗塞[n-l])在治療前發(fā)生。研究期間6名患者發(fā)生了7個嚴重不良事件血栓形成(n-l)和出血(n-2)認為與研究藥物無關。低血壓(n-2)、心動過緩(n-l)和室性心動過速(n-l)認為與研究藥物有關。頻數(shù)不是劑量相關的。3名患者由于呼吸困難(n-l)或低血壓(n-2)提前中斷了lpg/kg/min為時3分鐘的輸注。小結:與腺苷相似，binodenoson誘導的充血是立即開始的。最大冠脈血管舒張反應趨于劑量依賴的，雖然僅0.9pg/kg輸注劑量產(chǎn)生少于最大的充血。由于將輸注和推注劑量從1.5加倍至3.0pg/kg不能產(chǎn)生明顯更大的冠脈充血，1.5pg/kgIV推注劑量表現(xiàn)出代表了充血的量效曲線的上端漸近線。最大充血在3pg/kg推注(12.3士9.59分鐘)后比1.5pg/kg劑量(7.4士6.86分鐘)后持續(xù)更長，但是代價是更高的HR和RPP和更多的不良事件。1.5pg/kg充血反應的持續(xù)時間明顯足夠使用于單光子發(fā)射計算機斷層成像(SPECT)顯像的2Q1T1和99mTeTc標記的放射性藥物充分提取。實施例3-非哮喘病人中binodenoson的藥物代謝動力學和安全性評測此實施例描述了設計評測靜脈注射binodenoson的單劑量藥物代謝動力學、安全性和耐受性的研究。將Binodenoson對人體給藥，以判斷大范圍劑量的安全性和藥代動力學。方法受試者此研究在theNewOrleansCenterforClinicalResearch,NewOrleans,LA，依照USGoodClinicalPracticeguidelines(美國臨床試驗管理規(guī)范指導方針)的指導進行。受試者需要經(jīng)體檢和實驗室測試及生命體征評測，確定為總體健康狀況良好。排除標準包括對藥物篩查的測試陽性(藥物濫用)；進入研究24小時內(nèi)攝取咖啡因、醇類或藥物；或進入研究的30天接受過研究用藥。排除可能分娩的女性和女性配偶沒有使用可接受的避孕方法的男性。其它排除標準包括已知體位性低血壓的受試者、靜臥收縮壓90mmHg或更低、舒張壓60mmHg或更低、和心率90次/min或更快；人類免疫缺陷病毒感染史；乙型肝炎表面抗原或丙型肝炎抗體陽性檢測結果；和可能混淆分析或有安全性風險的任何臨床有關情況。研究方法此研究設計為在4組(每組n-6)健康志愿者中進行的單中心、開放性、非隨機化、靜脈劑量增加的研究。試驗方案由機構審查委員會批準；所有受試者給予書面知情同意書。每組的受試者接受3個上升劑量的binodenoson，以不超過6pgkg"min"的速度經(jīng)10分鐘靜脈輸注給藥。雖然binodenoson的連續(xù)劑量在研究的同一天給藥，但劑量間的洗脫期最少2小時。組1的受試者接受0.1、0.2和0，4pg/kg的連續(xù)binodenoson劑量；組2接受0.6、1和2pg/kg;組3接受2、3和4pg/kg;和組4接受4、5和6ixg/kg。心率、臥位收縮壓、和舒張壓的系列生命體征監(jiān)測在篩檢和每個劑量期輸注前10分鐘內(nèi)、輸注期間的2、4、6、8和10分鐘時、和輸注后2、5、7.5、10、15、20、30、45、60、90和120分鐘時進行。12導聯(lián)心電圖(ECG)在篩檢和研究結束時進行。在處理期間，包括輸注期間，用遙感裝置監(jiān)測ECG。監(jiān)測在給藥前1小時內(nèi)開始并且持續(xù)到最后劑量完成后的24小時。為了定量血漿中的binodenoson，在處理期間收集總共40-42個血樣。給藥前，將聚乙烯導管插入輸注部位對側(cè)前臂的血管中。輸注即將開始前(-l分鐘)、輸注中點(5分鐘)和終點(IO分鐘)、以及在輸注結束后2、5、7.5、10、15、20、30、45、60、90和120分鐘采集血樣(5mL)至預冷的真空采血管中(BD，F(xiàn)ranklinLakes,NJ)。冷凍(4。C)下4000rpm離心10分鐘從細胞材料中分離血槳，然后-80'C保存于凍存管中直至分析。密集取樣期間取血總量大約為200mL。Binodenoson的血漿濃度在PhoenixIntemational，Inc.(Montreal，Quebec,Canada)由驗證的高效液相-質(zhì)譜(LC/MS/MS)測定。LC/MS/MS檢測具有0.201ng/mL的檢測下限。用SAS統(tǒng)計軟件程序(SASInstitute,Cary，NC)，通過無房室法，產(chǎn)生對各受試者每次binodenoson輸注的血漿binodenoson濃度-時間曲線的藥代動力學參數(shù)。峰濃度(C皿x)和相應于(C皿O的時間(tmJ通過觀察獲得。終末半衰期(tm)由(ln2)/、計算，其中消除速率常數(shù)Az由binodenoson濃度-時間曲線的終末段的log-線性回歸確定。曲線下面積(AUCo.t)由線性梯形法從時間0至最終可計量濃度(C^)來計算。直到無限大的面積(AUCo.一由AUQj-t+Ctet/}^的總和計算。Binodenesonde的全身清除率(CL)來自于binodenoson劑量和AUC。.w的比率，而分布容積(Vz)來自于CL和、的比率。列表總結藥物動力學參數(shù)的統(tǒng)計。線性回歸分析用于評價AUC和劑量之間的相互關系。安全性分析集中在生命體征、體檢發(fā)現(xiàn)、臨床實驗室數(shù)值、ECGs和不良事件(AEs)。AEs和嚴重AEs根據(jù)美國食品與藥物管理局規(guī)定來定義。記錄的AEs是志愿者自發(fā)報告的、或響應于非引導性問題的、或研究者識別出的。安全性數(shù)據(jù)按組和/或劑量列表。Binodenoson劑量對生命體征(收縮血壓、舒張血壓、心率)上的最大效應通過比較用藥前平均值和每IO分鐘輸注期間或輸注后120分鐘期間記錄的最大變化值來分析。雙尾配對1檢驗用來確定變化是否與0有顯著區(qū)別^=.05)。結果受試者總共24名健康成人志愿者(17名男性和7名女性)參加了本研究。所有組的年齡和體重的平均值范圍分別是29-39歲和70.8-83.3kg。研究組作為一個整體，平均年齡35±9歲，平均體重75.6±12.0kg。受試者中24人中15人(63%)是白人，8人是黑人和l人是西班牙人。所有入選的受試者符合研究的入選和排除標準，并且在研究中沒有使用共同用藥。藥物代謝動力學Binodenoson的藥物代謝動力學在表12中顯示。峰濃度(C啦x)—般在輸注給藥期末達到(圖9A和9B)。此后binodenoson濃度以雙向方式下降。梯形法計算的曲線下面積(AUCo.t)—般代表了高于總AUCo."勺80%。Binodenoson的AUC隨劑量按比例增力口(圖10)。Binodenoson的C^x也隨劑量增加，但是由于輸注期間的輕微變化而改變。表觀分布容積顯示binodenoson分布于細胞外液間隙。Binodenoson的表觀消除半衰期的平均值范圍是7.4分鐘(lpg/kg)-14.9分鐘(6pg/kg)，隨著劑量增加有輕微傾向高值的趨勢。但是，由于最低劑量水平(0.4pg/kg)的血漿濃度僅比定量的檢測下限稍高，血漿濃度在較高劑量濃度下可測定較長時間。平均起來(調(diào)和平均數(shù))，所有劑量間的binodenoson終末半衰期是10±4分鐘。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>所給數(shù)據(jù)為平均值(SD)關于binodenoson全身清除率在劑量水平間沒有可檢測的差異(方差分析)。所有劑量水平間的binodenoson平均全身清除率是SAAT.SmLmii^kg^但是，與受試者體重相關的全身清除率在圖7中顯示。線性混合效應模型(S-Plus，InsightfiilCorp.,Seattle,Wash),以受試者用作隨機效應變量和體重作為回歸元項，建立了如下binodenoson清除率(CL)和體重(BW)間的相互關系CL=-0.19+0.039BW(p=.004)。安全性AEs。一般來說binodenoson可以良好耐受。沒有嚴重的AEs和臨床顯著ECG變化。AEs的發(fā)生率是劑量相關的，24名志愿者中的21人(83%)報告最少1AE(圖8)。幾乎所有AEs(99X)由研究者判斷為與binodenoson給藥有關且是輕度(82%)或中度(17%)嚴重性。大多數(shù)AEs(75X)在藥物輸注期間開始，且在開始的30分鐘內(nèi)自發(fā)消退。不需要臨床或藥理介入來逆轉(zhuǎn)藥物的作用。最頻繁報告的AEs是頭痛和血管舒張。與binodenoson相關的AEs頻率在2pg/kg或更髙劑量比lpg/kg或更低劑量有顯著增加，尤其是頭痛(60%:7%)、惡心/口區(qū)吐(49%:0%)、血管舒張(54%:14%)、頭暈(24%:0%)和感覺異常(19%:3%)。生命體征。Binodenoson在lpg/kg或更低劑量對血壓的最大效應是可變的。平均收縮壓在lpg/kg或更高劑量一致增加，而平均收縮壓和平均舒張壓在2pg/kg或更高劑量均增加。收縮壓從基線的平均最大增加從lpg/kg劑量的8.8mmHg至6pg/kg劑量的27.9mmHg。收縮和舒張壓的平均最大增加分別在2和4pg/kg劑量水平上是統(tǒng)計學顯著的(p<.05)。0.1ng/kg或更高binodenoson劑量與心率的增加相關(圖9A和9B)。心率的最大增加從lpg/kg劑量的29次/min至6pg/kg劑量的66.3次/min。在0.4pg/kg劑量和lpg/kg或更高劑量下的變化是統(tǒng)計學顯著的(p〈雄)。討論最普遍AE—血管舒張、頭痛、頭暈、惡心、胸痛、腹痛和感覺異常一是與藥物的藥理學性質(zhì)一致的。AE的發(fā)生率與劑量和曝光有很強的相關性，在4ng/kg或更高劑量更多令人不愉快的AE例如胸痛、腹痛、頭暈、惡心和嘔吐的發(fā)生率和頻率有顯著增加。但是沒有嚴重AE，并且大多數(shù)在輸注期間開始的AE是輕度或中度嚴重性，且在開始30分鐘內(nèi)消退。在動物中，binodenoson產(chǎn)生劑量相關的低血壓和反射性心動過速。在此研究中，麻刺感、面紅、頭痛、發(fā)脹和發(fā)熱的發(fā)生提示周圍血管的舒張反應。盡管有顯著的周圍血管擴張，血壓的變化在較低劑量是可變的并導致不變的平均值，收縮壓和舒張壓在高于lpg/kg的劑量均輕微增加。在lpg/kg或更高劑量下，心率的劑量相關的增加說明binodenoson增加心率不依賴于血壓改變，并且不確定正性變時反應是否遮蔽了藥物造成的全身性低血壓。Binodenoscm是第一個用于人的腺苷A2A-受體選擇性激動劑，其獨立增加心率提供了新發(fā)現(xiàn)。Binodenoson不增加離體和去神經(jīng)的心房制備物的心率，并且對能解釋此反應的/3-腎上腺素或毒蕈堿受體沒有親合力。有臨床前證據(jù)顯示腺苷A2A受體的激活增強了交感神經(jīng)傳出神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素，但是此機制還沒有在人類中確定。血管擴張藥理應激劑腺苷和雙嘧達莫引起心率的適度增加，有可能此作用通過增加心肌需氧量增強了它們的直接冠狀動脈舒張反應。希望binodenoson也是這樣。Binodenoson的藥物代謝動力學特征是關于曝光參數(shù)(C咖x和AUC)的劑量線性和輸注停止后從體循環(huán)的快速消失(11/2=10分鐘)。Binodenoson的全身清除率不依賴于劑量、且顯示從體循環(huán)中快速清除。雖然沒有對人進行代謝研究，但肝細胞和微粒體的體外研究提示了低代謝活性和不顯著抑制細胞色素P450酶。Binodenoson清除率和體重間的相互關系提供了根據(jù)體重建立binodenoson劑量，使藥物代謝動力學變異最小化的合理基礎。在該首先在人體內(nèi)進行的研究中，binodenoson經(jīng)10分鐘時間輸注。獲得的藥物代謝動力學數(shù)據(jù)提示，較短的輸注和推注給藥可能產(chǎn)生與藥理應激成像一致的藥效反應。圖10顯示了經(jīng)30秒、3分鐘和10分鐘給藥1.5pg/kg后的模擬binodenoson濃度。結論當以0.4|iig/kg-6ng/kg劑量靜脈給藥時binodenoson良好耐受，藥理作用與A2A受體激活的藥理性質(zhì)總體一致。Binodenoson的藥代動力學/藥效學性質(zhì)的特征是劑量線性、作用時間短和從體循環(huán)中快速清除，這是此類藥物的理想特征。雖然本發(fā)明根據(jù)具體實施方案描述，給藥方法和條件可如本領域技術人員已知的那樣進行各種替換。例如，給藥方法和/或載體可調(diào)整來適應使用的顯像技術。其它變化對本領域技術人員來說是明顯的且意味著包括于本文。本發(fā)明的范圍僅由以下權利要求限制。權利要求1.一種在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中診斷心肌功能障礙的方法，包含以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約10μg/kg的binodenoson以提供冠狀動脈擴張；和(b)檢測病人的心肌功能障礙。2.根據(jù)權利要求1的方法，其中binodenoson以推注劑量對所述病人施用。3.根據(jù)權利要求2的方法，其中將大約0.5至大約2.5pg/kg的binodenoson施用至所述病人。4.根據(jù)權利要求1的方法，其中binodenoson通過輸注施用至所述病人。5.根據(jù)權利要求4的方法，其中將大約0.3至大約2.0ng/kg/min的binodenoson施用至所述病人。6.根據(jù)權利要求l的方法，其中心肌功能障礙是冠狀動脈疾病、心室功能障礙、通過無病冠狀血管和狹窄血管的血流差異、或它們的組合。7.根據(jù)權利要求l的方法，其中步驟(b)包含無創(chuàng)心肌顯像操作。8.根據(jù)權利要求7的方法，其中無創(chuàng)顯像操作包含施用顯像劑。9.一種在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中診斷冠狀動脈疾病的方法，包含以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約10pg/kg的binodenoson以提供冠狀動脈擴張；(b)對病人施用顯像劑；和(c)對病人進行心肌灌注顯像以檢測冠狀動脈疾病。10.—種在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中診斷由冠狀動脈疾病引起的心室功能障礙的方法，包含以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約10pg/kg的binodenoson以提供冠狀動脈擴張；和(b)對病人進行心室功能顯像技術以檢測心室功能障礙。11.一種在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中診斷灌注異常的方法，包含以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約10pg/kg的binodenoson以提供冠狀動脈擴張；和(b)檢測病人的灌注異常。12.根據(jù)權利要求11的方法，其中步驟(b)包含測量病人的冠脈血流速度，以評測與無病冠狀血管相比病變冠狀血管的舒張能力。13.根據(jù)權利要求11的方法，其中步驟(b)包含評測與無病冠狀血管相比病變冠狀血管的舒張能力(貯備能力)。14.一種在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中診斷冠狀動脈疾病存在和評測其嚴重性的方法，包含以下步驟(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約lO^g/kg的binodenoson以提供冠狀動脈擴張；(b)對病人施用放射性藥劑；和(c)對病人進行閃爍顯像以檢測冠狀動脈疾病。15.—種在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中診斷心室功能障礙存在和評測其嚴重性的方法，包含以下步驟-(a)通過靜脈途徑對病人施用大約0.1至大約10pg/kg的binodenoson以提供冠狀動脈擴張；和(b)對病人進行超聲心動圖以檢測心室功能障礙。16.—種在有哮喘或支氣管痙攣史的病人中診斷心肌功能障礙的方法，包含以下步驟(a)通過靜脈推注對病人施用大約1.5pg/kg的binodenoson以提供冠狀動脈擴張；和(b)檢測病人的心肌功能障礙。17.—種試劑盒，其包括含有單位劑量binodenoson的第一容器，和含有顯像劑、腺苷拮抗劑或/3-2激動劑的第二容器。18.根據(jù)權利要求17的試劑盒，其中第二容器含有顯像劑。19.根據(jù)權利要求17的試劑盒，其中第二容器含有腺苷拮抗劑。20.根據(jù)權利要求17的試劑盒，其中第二容器含有i3-2激動劑。全文摘要本發(fā)明涉及有哮喘或支氣管痙攣史病人的心肌顯像。特別是本發(fā)明使用binodenoson作為藥理應激物，結合現(xiàn)有的數(shù)種可用的無創(chuàng)或有創(chuàng)診斷操作的任一種。例如，靜脈施用可與放射性藥劑和心肌灌注顯像一起使用以評測心肌缺血的嚴重性。文檔編號A61K9/20GK101102717SQ200680002161公開日2008年1月9日申請日期2006年1月12日優(yōu)先權日2005年1月12日發(fā)明者理查德·J·巴雷特申請人:王者制藥研究發(fā)展有限公司