專(zhuān)利名稱(chēng)：治療退化性盤(pán)疾病的方法
相關(guān)申請(qǐng)本申請(qǐng)是2003年8月13日申請(qǐng)的美國(guó)申請(qǐng)No.10/640,412和2003年7月31日申請(qǐng)的美國(guó)申請(qǐng)No.10/631,487的部分繼續(xù)申請(qǐng)，美國(guó)申請(qǐng)No.10/631,487是2003年6月31日申請(qǐng)的美國(guó)申請(qǐng)No.10/610,355的部分繼續(xù)申請(qǐng)，美國(guó)申請(qǐng)No.10/610,355是2003年6月6日申請(qǐng)的美國(guó)申請(qǐng)No.10/456,948的部分繼續(xù)申請(qǐng)，美國(guó)申請(qǐng)No.10/456,948要求2003年5月13日申請(qǐng)的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)No.60/470,098的利益。將上面的申請(qǐng)的完整教導(dǎo)完全并入本文作為參考。
背景技術(shù)：
天然的椎間盤(pán)含有凝膠樣髓核(nucleus pulposus)，其由纖維狀纖維環(huán)(annulus fibrosus)包圍。在軸負(fù)荷下，髓核壓縮并將該負(fù)荷徑向地轉(zhuǎn)移到纖維環(huán)。纖維環(huán)的層疊性質(zhì)為其提供了高抗張強(qiáng)度并且因此允許其響應(yīng)該轉(zhuǎn)移的負(fù)荷而快速?gòu)较驍U(kuò)張。
在健康椎間盤(pán)中，髓核中的細(xì)胞產(chǎn)生含有高百分比蛋白聚糖的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)。這些蛋白聚糖含有硫酸化官能團(tuán)，其保持水分，從而為髓核提供緩沖性質(zhì)。這些髓核細(xì)胞還可以分泌少量細(xì)胞因子以及基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)。這些細(xì)胞因子和MMPs幫助調(diào)節(jié)髓核細(xì)胞的代謝。
在退化性盤(pán)疾病(degenerative disc disease，DDD)的一些情況中，脊柱的其他部分中機(jī)械不穩(wěn)定性導(dǎo)致椎間盤(pán)的逐漸退化。在這些情況中，對(duì)髓核增加的負(fù)荷和壓力導(dǎo)致盤(pán)內(nèi)的細(xì)胞(或者侵入的巨噬細(xì)胞)釋放大于正常量的上述細(xì)胞因子。在DDD的其他情況中，遺傳因素或者程序性細(xì)胞死亡也可以導(dǎo)致髓核內(nèi)細(xì)胞釋放毒性量的這些細(xì)胞因子和MMPs。在一些情況中，盤(pán)的抽吸作用可能功能失常(由于例如，髓核內(nèi)蛋白聚糖的濃度降低)，從而阻礙營(yíng)養(yǎng)物向盤(pán)內(nèi)的流動(dòng)以及廢物從盤(pán)的流出。該清除廢物能力的降低可以導(dǎo)致促炎細(xì)胞因子和/或MMPs的高水平積累，它們可以導(dǎo)致神經(jīng)刺激和疼痛。
隨著DDD的發(fā)展，髓核中存在的毒性水平的細(xì)胞因子和MMPs開(kāi)始降解細(xì)胞外基質(zhì)。具體地，MMPs(由細(xì)胞因子介導(dǎo))開(kāi)始切割蛋白聚糖的持水部分，從而降低它們的持水能力。該降解導(dǎo)致彈性降低的髓核，因此改變盤(pán)內(nèi)的負(fù)荷模式，從而可能導(dǎo)致纖維環(huán)的脫層(delamination)。這些改變導(dǎo)致更大的機(jī)械不穩(wěn)定性，從而導(dǎo)致細(xì)胞釋放更多細(xì)胞因子，從而通常上調(diào)MMPs。隨著該破壞性級(jí)聯(lián)繼續(xù)和DDD進(jìn)一步發(fā)展，盤(pán)(disc)開(kāi)始膨脹(“突出的盤(pán)”)，然后最終破裂，導(dǎo)致髓核接觸脊髓和產(chǎn)生疼痛。
發(fā)明概述本發(fā)明人已經(jīng)開(kāi)發(fā)了通過(guò)藥物治療有效治療退化性盤(pán)疾病的多種方法。
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明人已經(jīng)開(kāi)發(fā)了治療椎間盤(pán)的方法，其中透盤(pán)(即，靶組織是正在退化的盤(pán))施用拮抗劑(例如，蛋白質(zhì))。文中所用的拮抗劑指抑制劑，例如，一種或幾種蛋白質(zhì)(如細(xì)胞因子和MMPs)，如從髓核和/或纖維環(huán)細(xì)胞釋放的蛋白質(zhì)的抑制劑。此類(lèi)蛋白質(zhì)可以由于DDD而以毒性量釋放。在一些實(shí)施方案中，拮抗劑選自高特異性細(xì)胞因子拮抗劑(HSCA)、高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶(HAAMMP)、p38激酶的拮抗劑或者環(huán)素(cycline)化合物。
相信直接透盤(pán)對(duì)靶定的盤(pán)施用此類(lèi)拮抗劑具有幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)首先，HSCAs抑制細(xì)胞因子的活性。HAAMMPs和環(huán)素化合物抑制MMP的活性。因?yàn)橐阎?xì)胞因子(如白介素和TNF-α)和MMPs在髓核的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的降解中起主要作用，將拮抗劑以治療有效量直接注射到盤(pán)中可以防止細(xì)胞因子和/或MMP引起進(jìn)一步的ECM降解。實(shí)際上，拮抗劑(例如，HAAMMPs)的透盤(pán)施用幫助阻止正在退化的盤(pán)的老化過(guò)程。因此，本發(fā)明設(shè)法在DDD的較早的階段治療退化性盤(pán)，從而防止ECM的降解。
其次，環(huán)素化合物和某些HSCAs抑制TNF-α的活性。還已知纖維環(huán)內(nèi)存在神經(jīng)末梢傷害性感受器，并且TNF-α參與神經(jīng)的刺激。相信向盤(pán)間隙注射TNF-α拮抗劑(如環(huán)素化合物)還防止TNF-α引起盤(pán)內(nèi)的神經(jīng)刺激。從而，可以有效消除這些神經(jīng)刺激導(dǎo)致的疼痛。
第三，因?yàn)槟承┺卓箘┦翘禺惖?，它們不抑制非靶定的?xì)胞、組織或者蛋白質(zhì)。此外，拮抗劑可以與其他(即額外的)治療劑(如生長(zhǎng)因子)聯(lián)合，所述其他治療劑也可以注射到盤(pán)內(nèi)而不減小那些治療劑的有效性。
第四，因?yàn)楸P(pán)的纖維環(huán)部分含有致密的纖維結(jié)構(gòu)，盤(pán)的該外部組分可以提供拮抗劑的適宜的貯庫(kù)(depot)，從而，增加其在盤(pán)內(nèi)的半壽期。
第五，因?yàn)榍秩胄跃奘杉?xì)胞、髓核細(xì)胞或者纖維環(huán)細(xì)胞的至少一種至少可以分泌MMPs，所以環(huán)素化合物的透盤(pán)注射將有利地在它們的起源處攻擊MMPs。
因此，在本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括透盤(pán)施用含有有效量制劑的制劑，其中拮抗劑選自a)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，b)高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶(HAAMMP)，c)p38激酶的拮抗劑(即，p38激酶抑制劑)，和d)環(huán)素化合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，包括透盤(pán)施用有效量的制劑，該制劑包含a)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，b)高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶(HAAMMP)，c)p38激酶的拮抗劑，和d)環(huán)素化合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，以一定劑量施用拮抗劑，例如p38激酶抑制劑以產(chǎn)生約5μg/kg到約50μg/kg的局部組織濃度。在一個(gè)實(shí)施方案中，以小于約1cc的量施用制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，拮抗劑以至少約100mg/ml的量存在于制劑中。在一個(gè)實(shí)施方案中，拮抗劑以不超過(guò)約0.5mg的量存在于制劑中。
本發(fā)明在此描述的一些實(shí)施方案中，制劑還含有緩釋裝置，例如，含有水凝膠的緩釋裝置。在一個(gè)實(shí)施方案中，緩釋裝置提供受控的釋放。在另一實(shí)施方案中，緩釋裝置提供了連續(xù)釋放。在再一個(gè)實(shí)施方案中，緩釋裝置提供了間歇性釋放。
在一個(gè)實(shí)施方案中，緩釋裝置含有生物傳感器。在一個(gè)實(shí)施方案中，緩釋裝置包含許多微球體。在一個(gè)實(shí)施方案中，緩釋裝置包含炎癥響應(yīng)性遞送系統(tǒng)。
在另一實(shí)施方案中，拮抗劑主要通過(guò)其通過(guò)持續(xù)遞送裝置的擴(kuò)散從持續(xù)遞送裝置釋放。在再一個(gè)實(shí)施方案中，持續(xù)遞送裝置是聚合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，拮抗劑主要通過(guò)持續(xù)遞送裝置的生物降解從持續(xù)遞送裝置釋放。
在一個(gè)實(shí)施方案中，制劑還含有至少一種額外的(例如，第二、第三或第四種)治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一種額外的治療劑與拮抗劑共同施用(例如，順序或同時(shí)施用)。在一個(gè)實(shí)施方案中，制劑以有效減少疼痛的量施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，制劑以有效抑制髓核胞外基質(zhì)的降解的量施用。額外的治療劑可以含有本文公開(kāi)的任意額外的活性劑，包括本文公開(kāi)的任意拮抗劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑是生長(zhǎng)因子。生長(zhǎng)因子可以以有效修復(fù)椎間盤(pán)組織的量存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，生長(zhǎng)因子是TGF-β。在一個(gè)實(shí)施方案中，生長(zhǎng)因子由血小板濃縮物提供。
在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑是質(zhì)粒DNA。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在透盤(pán)施用制劑前除去髓核。
在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)藥物泵施用制劑。在再一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)針頭施用制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，針頭具有24號(hào)的最大號(hào)。在再一個(gè)實(shí)施方案中，所施用的制劑的體積為約0.03ml到約0.3ml。
在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，施用包括提供附著到纖維環(huán)外壁的貼劑中的制劑。在另一實(shí)施方案中，施用包括在與纖維環(huán)外壁緊密相鄰的位置處的貯庫(kù)中提供制劑。在再一個(gè)實(shí)施方案中，施用包括在與相鄰椎體的終板緊密相鄰位置處的貯庫(kù)中提供制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在與纖維環(huán)的外壁緊密相鄰處提供制劑。在再一個(gè)實(shí)施方案中，將制劑注射到髓核中。在一個(gè)實(shí)施方案中，將制劑注射到纖維環(huán)中。
在一個(gè)實(shí)施方案中，正在退化的盤(pán)是完整的盤(pán)。在另一實(shí)施方案中，正在退化的盤(pán)是破裂的盤(pán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，正在退化的盤(pán)是脫層的。在一個(gè)實(shí)施方案中，正在退化的盤(pán)具有裂縫。
還提供了治療正在退化的盤(pán)疾病的含有拮抗劑的制劑，所述拮抗劑選自a)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，b)高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶HAAMMP，c)p38激酶的拮抗劑，d)環(huán)素化合物；和e)額外的治療劑，其選自
i).生長(zhǎng)因子，和ii).質(zhì)粒DNA。
還提供了治療性治療正在退化的盤(pán)的方法，其包括步驟a)確定盤(pán)內(nèi)促炎蛋白質(zhì)的水平，b)將所述水平與促炎蛋白質(zhì)的預(yù)定水平比較，和c)向盤(pán)內(nèi)注射拮抗劑，其中拮抗劑選自i)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，ii)高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶HAAMMP，iii)p38激酶抑制劑的高特異性拮抗劑，和iv)環(huán)素化合物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，促炎蛋白質(zhì)是白介素。在一個(gè)實(shí)施方案中，白介素的預(yù)定水平為至少100pg/ml。
在一個(gè)實(shí)施方案中，促炎蛋白質(zhì)是白介素-6。在一個(gè)實(shí)施方案中，白介素-6的預(yù)定水平為至少100pg/ml。在一個(gè)實(shí)施方案中，白介素-6的預(yù)定水平為至少250pg/ml。
在一個(gè)實(shí)施方案中，促炎蛋白質(zhì)是白介素-8。在一個(gè)實(shí)施方案中，白介素-8的預(yù)定水平為至少500pg/ml。
在一個(gè)實(shí)施方案中，促炎蛋白質(zhì)是PEG2。在一個(gè)實(shí)施方案中，PEG2的預(yù)定水平為至少1000pg/ml。
在一個(gè)實(shí)施方案中，促炎蛋白質(zhì)是TNF-α。在一個(gè)實(shí)施方案中，TNF-α的預(yù)定水平為至少20pg/ml。在一個(gè)實(shí)施方案中，TNF-α的預(yù)定水平為至少30pg/ml。在一個(gè)實(shí)施方案中，TNF-α的預(yù)定水平為至少1000pg/盤(pán)。
還提供了預(yù)防人類(lèi)個(gè)體中椎間盤(pán)退化的方法，其包括a)確定個(gè)體的遺傳圖；b)比較該個(gè)體的遺傳圖與處于危險(xiǎn)中人的預(yù)定的遺傳圖水平；c)確定該個(gè)體是處于危險(xiǎn)的患者；和d)向該個(gè)體的盤(pán)中注射拮抗劑，其中拮抗劑選自i)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，ii)MMPs的高親和性拮抗劑，iii)p38激酶的高特異性拮抗劑，和iv)環(huán)素化合物。
還提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，該方法包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用有效量的制劑，該制劑含有COX-2酶的拮抗劑、NO合酶的高特異性拮抗劑、高特異性抗氧化劑、高特異性抗增殖劑和/或高特異性抗程序性細(xì)胞死亡劑。
在一些實(shí)施方案中，所述制劑含有細(xì)胞因子化合物和至少一種高度特異的拮抗劑(HAS)，其選自i)促炎白介素的抑制劑；ii)TNF-α合成抑制劑；iii)膜結(jié)合TNF-α的抑制劑；iv)TNF-α的天然受體的抑制劑；v)NO合酶的抑制劑。
vi)PLA2酶的抑制劑；vii)抗增殖劑；viii)抗氧化劑；ix)程序性細(xì)胞死亡抑制劑，其選自EPO模擬肽、EPO模擬體(mimetibody)、IGF-I、IGF-II和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)抑制劑；x)MMPs抑制劑；和xi)p38激酶抑制劑。
發(fā)明詳述對(duì)于本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)“抑制劑”和“拮抗劑”可以互換使用。蛋白質(zhì)可以在合成水平上、翻譯水平上受到脫落、抗體或者可溶性受體的抑制。術(shù)語(yǔ)“患者”指具有正在退化的盤(pán)的人。文中所用的拮抗劑包括，例如，來(lái)自DDD患者的盤(pán)或盤(pán)中存在的物質(zhì)的抑制劑。例如，所述物質(zhì)可以是細(xì)胞因子或MMPs。拮抗劑可以包括，例如，高特異性細(xì)胞因子拮抗劑、高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶(HAAMMP)、p38激酶抑制劑(即，p38激酶的拮抗劑)，例如，p38激酶的高特異性拮抗劑，和環(huán)素化合物(cycline compound)。
對(duì)于本發(fā)明，“透盤(pán)施用”包括，但不限于a)將制劑注射到正在退化的盤(pán)(degenerating disc)，如相對(duì)完整的正在退化的盤(pán)的髓核中；
b)將制劑注射到正在退化的盤(pán)，如相對(duì)完整的正在退化的盤(pán)的纖維環(huán)中；c)提供附著到纖維環(huán)外壁的貼劑中的制劑；d)在纖維環(huán)外壁外但是密切接近纖維環(huán)外壁的位置處的貯庫(kù)中提供制劑(“透環(huán)施用”)；和e)在相鄰椎體終板外但是密切接近相鄰椎體終板的位置處的貯庫(kù)中提供制劑(下文中，“透終板施用”)。
因?yàn)镈DD是連續(xù)過(guò)程，治療藥物所施用的正在退化的盤(pán)可能處于多種退化狀態(tài)的任意一種。因此，正在退化的盤(pán)可以是完整盤(pán)。正在退化的盤(pán)可以是突出的盤(pán)(即，其中纖維環(huán)的一部分具有凸起)。正在退化的盤(pán)可以是破裂的盤(pán)(即，其中纖維環(huán)已受到破壞并且大量髓核已經(jīng)滲出)。正在退化的盤(pán)可以是脫層的(即，其中纖維環(huán)的相鄰層已經(jīng)分離)。正在退化的盤(pán)可以具有裂縫(即，其中纖維環(huán)具有細(xì)小裂紋或撕裂，通過(guò)其可以滲漏來(lái)自髓核的所選分子)。在所有這些退化性狀態(tài)中，纖維環(huán)或者髓核的胞外基質(zhì)也在退化。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及直接通過(guò)患病的椎間盤(pán)提供能夠特異抑制盤(pán)中存在的物質(zhì)的至少一種拮抗劑，其中拮抗劑選自a)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，b)高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶(HAAMMP)，c)p38激酶拮抗劑，或者d)環(huán)素化合物。
美國(guó)公布的專(zhuān)利申請(qǐng)No.US 2003/0039651(″Olmarker I″)教導(dǎo)了神經(jīng)疾病的治療性治療，其包括施用治療有效劑量的化合物，所述化合物包括MMPs的抑制劑、選自TNF抑制劑(特異和非特異的)、IL-1抑制劑、IL-6抑制劑、IL-8抑制劑、FAS抑制劑、FAS配體抑制劑，和IFN-γ抑制劑的至少兩種物質(zhì)。
在Olmarker I的實(shí)施例中，教導(dǎo)了通過(guò)全身途徑施用的治療性化合物。具體地，Olmarker I教導(dǎo)“TNF-α的主要貢獻(xiàn)可能來(lái)源于募集的、聚集的和甚至外滲的白細(xì)胞，并且成功的藥理學(xué)阻斷可以?xún)H通過(guò)全身治療實(shí)現(xiàn)”。注意到，Olmarker I似乎勸阻向?qū)⒁獞?yīng)用于脊髓的自體移植的髓核局部加入至少一種治療性化合物(多西環(huán)素)。
PCT公布的專(zhuān)利申請(qǐng)No.WO 02/100387(″OlmarkerII″)教導(dǎo)通過(guò)施用抗血管生成物質(zhì)預(yù)防椎間盤(pán)的新血管生成和/或新神經(jīng)支配。然而，Olmarker II再次教導(dǎo)全身性施用這些治療劑。
美國(guó)專(zhuān)利No.6,419,944(″Tobinick″)公開(kāi)用細(xì)胞因子拮抗劑治療突出的盤(pán)。Tobinick教導(dǎo)局部施用包括在脊髓附近皮下注射。因此，Tobinick沒(méi)有教導(dǎo)包括持續(xù)遞送藥物以治療DDD的方法，也沒(méi)有教導(dǎo)向盤(pán)中直接施用藥物。
美國(guó)公布的專(zhuān)利申請(qǐng)No.2003/0049256(″Tobinick II″)公開(kāi)通過(guò)椎間注射，優(yōu)選通過(guò)脊柱的兩個(gè)相鄰棘突之間的解剖學(xué)區(qū)域內(nèi)的皮膚注射實(shí)現(xiàn)向脊柱相鄰的解剖學(xué)區(qū)域注射此類(lèi)治療分子。
Tobinick II還教導(dǎo)通過(guò)在人的椎間注射可以施用治療化合物并且劑量水平為每劑1mg到300mg，劑量間隔短至2天。Tobinick II還公開(kāi)以治療有效劑量施用其他治療化合物，所述劑量通常為每劑10mg到200mg，并且它們的劑量間隔將短至每天一次。
Tobinick，Swiss Med.Weekly，133170-7(2003)(″Tobinick III″)教導(dǎo)脊周和硬膜外施用TNF抑制劑。
Karppinen，Spine，28(8)750-4(2003)教導(dǎo)給患有坐骨神經(jīng)痛的患者靜脈注射或者口服英夫單抗(infliximab)。
對(duì)于Tobinick I和Tobinick II，Karppinen沒(méi)有教導(dǎo)包括持續(xù)遞送用于治療DDD的藥物的方法，也沒(méi)有教導(dǎo)向椎間盤(pán)間隙直接施用藥物。
美國(guó)專(zhuān)利No.6,352,557(Ferree)教導(dǎo)向顆粒(morselized)胞外基質(zhì)加入治療性物質(zhì)，如消炎藥物，并且將該組合物注射到椎間盤(pán)。然而，許多消炎劑是非特異的，因此可能對(duì)其他細(xì)胞、蛋白質(zhì)和組織產(chǎn)生不需要的副作用。此外，這些活性劑的疼痛減輕效果通常僅是暫時(shí)的。最后，這些活性劑通常僅減輕疼痛，并且不是治療性的，也不是恢復(fù)性的。
Alini，Eur.Spine J.，11(Supp.2)S215-220(2002)教導(dǎo)早期DDD治療，包括注射刺激細(xì)胞代謝活性的蛋白水解酶或者生物因子(即，生長(zhǎng)因子)的抑制劑以便減慢退化過(guò)程。蛋白水解酶的抑制劑組成了一大類(lèi)化合物，包括i)蛋白水解酶合成抑制劑和ii)蛋白水解酶活性抑制劑。Alini I沒(méi)有具體說(shuō)明蛋白水解酶的任何希望類(lèi)型的抑制劑。
美國(guó)公布的專(zhuān)利申請(qǐng)US 2002/0026244(″Trieu″)公開(kāi)了含有水凝膠的椎間盤(pán)核，其可以遞送所需藥理學(xué)劑。Trieu教導(dǎo)這些藥理學(xué)劑可以包括生長(zhǎng)因子，如TGF-β和消炎藥，包括類(lèi)固醇。Trieu還教導(dǎo)這些藥理學(xué)劑可以分散在水凝膠內(nèi)，水凝膠具有適宜水平的孔隙率，從而以所希望的速率釋放藥理學(xué)劑。Trieu教導(dǎo)這些試劑可以在周期負(fù)荷或者再吸收時(shí)釋放。
Goupille，Spine，23(14)1612-1626(1998)鑒定MMPs的組織抑制劑(“TIMPs”)是MMP活性的降解劑。Goupille報(bào)導(dǎo)TIMP-1和TIMP-2以1∶1的摩爾比非共價(jià)結(jié)合活性MMPs并特異抑制它們的酶活性。然而，Goupille還鑒定糖皮質(zhì)激素、視黃酸、TGF-β、PGE1和PGE2為MMP合成的抑制劑；鑒定α2巨球蛋白、氧肟酸、其衍生物、四環(huán)素和喹諾酮為MMP活性抑制劑，鑒定bFGF、EGF、Retenoicacid、TGF-β、IL-6、IL-1 LIF、地塞米松、佛波酯和合成維生素A類(lèi)似物為T(mén)IMPs的刺激劑。此外，關(guān)于施用途徑，Goupille明確認(rèn)定僅口服途徑。
Takegami，Spine，27(12)1318-25(2000)教導(dǎo)向盤(pán)間隙注射TGF-β導(dǎo)致受細(xì)胞因子破壞的細(xì)胞外基質(zhì)的補(bǔ)充增強(qiáng)。Takegami還教導(dǎo)注射到椎間盤(pán)的生長(zhǎng)因子的半壽期可預(yù)期比注射到滑膜關(guān)節(jié)的更長(zhǎng)，因?yàn)樗韬吮焕w維環(huán)的纖維結(jié)構(gòu)包圍，從而，提供了封閉的環(huán)境。Diwan，Tissue Engineering in Orthopedic Surgery，31(3)453-464(2000)報(bào)導(dǎo)了另一篇Takegami的文章，其斷定將必須使用允許延長(zhǎng)遞送(＞3天)的遞送系統(tǒng)來(lái)得到生長(zhǎng)因子的觀(guān)察到的效果。
Alini，Spine 28(5)446-54(2003)公開(kāi)接種細(xì)胞的膠原-透明質(zhì)酸支架，其補(bǔ)加生長(zhǎng)因子如TGF-β、bFGF和IGF-1，所述支架用于產(chǎn)生髓核。
Maeda等人Spine 25(2)166-169(2000)報(bào)導(dǎo)了暴露于IL-1的兔纖維環(huán)對(duì)白介素-1受體拮抗劑蛋白質(zhì)(IRAP)的體外應(yīng)答。Maeda提出IRAP可以用于抑制盤(pán)的降解。
Yabuki，Spine，26(8)870-5(2001)教導(dǎo)用于治療坐骨神經(jīng)痛的抗-TNF藥物。
美國(guó)專(zhuān)利No.6,277,969(″Le″)公開(kāi)了抗-TNF抗體用于治療TNF-介導(dǎo)的病理的用途。Le教導(dǎo)腸胃外施用抗體。
Ariga，Spine，28(14)1528-33(2003)報(bào)導(dǎo)了將p38 MAP激酶抑制劑應(yīng)用于器官-培養(yǎng)的椎間盤(pán)培養(yǎng)物增加了培養(yǎng)物中終板軟骨細(xì)胞中程序性細(xì)胞死亡的發(fā)生率。
Olmarker，Spine，26(8)863-9(2001)(″Olmarker I″)和Aoki，Spine，27(15)1614-17(2002)教導(dǎo)TNF-α(TNF-alpha)似乎在產(chǎn)生與接觸脊髓的神經(jīng)根的髓核相關(guān)的疼痛中起作用。Olmarker勸阻在脊柱相關(guān)的藥物治療中使用非特異TNF-α抑制劑，尤其具有抗生素效果的那些非特異TNF-α抑制劑。
美國(guó)公布的專(zhuān)利申請(qǐng)No.U.S.2003/0039651(″Olmarker II″)教導(dǎo)神經(jīng)疾病的治療性治療，其包括施用治療有效劑量的多種藥物，包括環(huán)素化合物。根據(jù)Olmarker，四環(huán)素是TNF-α的非特異抑制劑。
在Olmarker II的實(shí)施例中，Olmarker II還教導(dǎo)這些藥物通過(guò)全身途徑施用。具體地，Olmarker II教導(dǎo)“TNF-α的主要貢獻(xiàn)來(lái)源于募集的、聚集的和甚至外滲的白細(xì)胞，并且成功的藥理學(xué)阻斷可以?xún)H通過(guò)全身治療實(shí)現(xiàn)”。注意到，Olmarker II似乎勸阻向?qū)⒁獞?yīng)用于脊髓的自體移植的髓核局部加入多西環(huán)素。
PCT公布的專(zhuān)利申請(qǐng)No.WO 02/100387(″Olmarker III″)教導(dǎo)通過(guò)施用抗血管生成物質(zhì)預(yù)防椎間盤(pán)的新血管生成和/或新神經(jīng)支配。然而，Olmarker III再次教導(dǎo)全身性施用這些治療劑。
美國(guó)專(zhuān)利No.6,419,944(″Tobinick″)公開(kāi)用細(xì)胞因子拮抗劑(包括英夫單抗)治療突出的盤(pán)。然而，Tobinick教導(dǎo)局部施用包括在脊髓附近皮下注射。因此，Tobinick沒(méi)有教導(dǎo)包括持續(xù)遞送藥物以治療DDD的方法，也沒(méi)有教導(dǎo)向盤(pán)中直接施用環(huán)素化合物。
美國(guó)公布的專(zhuān)利申請(qǐng)No.2003/0049256(″Tobinick II″)公開(kāi)通過(guò)椎間注射，優(yōu)選通過(guò)脊柱的兩個(gè)相鄰棘突之間的解剖學(xué)區(qū)域內(nèi)的通過(guò)皮膚的注射實(shí)現(xiàn)向脊柱相鄰的解剖學(xué)區(qū)域注射此類(lèi)治療分子。
Tobinick，Swiss Med.Weekly，133170-77(2003)(″Tobinick III″)教導(dǎo)脊周和硬膜外施用特異TNF-α抑制劑。
Karppinen，Spine，28(8)750-4(2003)教導(dǎo)向患有坐骨神經(jīng)痛的患者靜脈內(nèi)注射或者口服英夫單抗。
對(duì)于Tobinick I和Tobinick II，Karppinen沒(méi)有教導(dǎo)包括持續(xù)遞送用于治療DDD的藥物的方法，也沒(méi)有教導(dǎo)向盤(pán)中直接施用環(huán)素化合物。
總之，盡管研究人員已經(jīng)一般性教導(dǎo)了透盤(pán)施用蛋白水解酶抑制劑，但是當(dāng)研究人員具體指定施用環(huán)素化合物用于脊柱相關(guān)的治療時(shí)，研究人員似乎僅教導(dǎo)向盤(pán)外部的組織施用某些拮抗劑(例如，環(huán)素化合物)。此外，Olmarker II似乎勸阻向髓核施用環(huán)素化合物。
高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶(HAAMMP)在一個(gè)實(shí)施方案中，以有效量施用HAAMMP以抑制退化過(guò)程期間盤(pán)細(xì)胞釋放的MMPs的特異作用。在一個(gè)實(shí)施方案中，以有效量施用HAAMMP以抑制髓核中存在的MMPs，從而幫助阻業(yè)細(xì)胞外基質(zhì)的降解。
在一個(gè)實(shí)施方案中，HAAMMP是重組的。在一個(gè)實(shí)施方案中，HAAMMP以自體形式存在。HAAMMP可以例如，以自體濃縮形式存在。在一些實(shí)施方案中，HAAMMP含有螯合基團(tuán)，其緊密結(jié)合MMP中活性位點(diǎn)中存在的鋅組分。此類(lèi)HAAMMPs可以選自Gordon，Clin.Exp.Rheumatol.，11(Supp 8)S91-4(1993)；和Johnson，J.，EnzymeInhib.，21-22(1987)中公開(kāi)的物質(zhì)。
在一些實(shí)施方案中，HAAMMP是MMP的天然抑制劑，例如，MMPs的組織抑制劑(TIMP)。在一些實(shí)施方案中，TIMP選自TIMP-1和TIMP-2。在一些實(shí)施方案中，TIMP是自體的并通過(guò)過(guò)濾、離心或者免疫附著方法濃縮。在其他實(shí)施方案中，TIMP經(jīng)重組生產(chǎn)并且優(yōu)選以正?；颊咧邪l(fā)現(xiàn)的濃度的例如，至少1000倍的濃度存在。在一些實(shí)施方案中，可以從異種來(lái)源得到TIMP。
在一些實(shí)施方案中，HAAMMP是聚集蛋白聚糖酶的特異抑制劑(即，抗-聚集蛋白聚糖酶)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-聚集蛋白聚糖酶以自體濃縮形式存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-聚集蛋白聚糖酶為重組抗-聚集蛋白聚糖酶。
在一些實(shí)施方案中，HAAMMP是膠原酶MMP的特異拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，HAAMMP是溶基質(zhì)素MMP的特異拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，HAAMMP是明膠酶MMP的特異拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，HAAMMP是膜MMP的特異拮抗劑。
在一些實(shí)施方案中，靶定的(targeted)MMP選自MMP-2、MMP-3和MMP-8。打靶(targeting)MMP-2和/或MMP-3是所希望的，因?yàn)檎J(rèn)為這些MMPs降解蛋白聚糖。打靶MMP-8是所希望的，因?yàn)檎J(rèn)為該MMP降解聚集蛋白聚糖。
在一些實(shí)施方案中，當(dāng)拮抗劑是HAAMMP時(shí)，額外的治療物質(zhì)(即，試劑)是高特異性細(xì)胞因子拮抗劑(“HSCA”)。例如，高親和性細(xì)胞因子拮抗劑可以選自TNF-α的HSCA，和白介素的HSCA。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一種治療劑是TNF-α的拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，另一種治療劑是白介素的拮抗劑。
因?yàn)樵S多促炎蛋白質(zhì)在盤(pán)退化中起作用，并且本發(fā)明的許多拮抗劑是高度特異的，所以還認(rèn)為直接向盤(pán)中注射本發(fā)明的至少兩種高度特異拮抗劑將是有益的。
因此，根據(jù)本發(fā)明，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括施用含有HAAMMP，和促炎細(xì)胞因子的至少兩種高特異性拮抗劑，所述促炎細(xì)胞因子選自TNF-α、白介素(優(yōu)選IL-1、IL-6和IL-8)、FAS、和FAS配體，和IFN-γ。
細(xì)胞因子拮抗劑在一個(gè)實(shí)施方案中，HSCA抑制退化過(guò)程中盤(pán)細(xì)胞或者侵入的巨噬細(xì)胞釋放的特定促炎細(xì)胞因子的作用。
在一些實(shí)施方案中，所述拮抗劑能夠特異抑制選自TNF-α、白介素(優(yōu)選IL-1、IL-6和IL-8)、FAS、和FAS配體，和IFN-γ的促炎細(xì)胞因子。此類(lèi)特異抑制劑包括在Olmarker II的5-18頁(yè)鑒定的那些抑制劑。
在一些實(shí)施方案中，HSCA通過(guò)防止細(xì)胞因子的產(chǎn)生來(lái)抑制細(xì)胞因子。在一些實(shí)施方案中，HSCA通過(guò)結(jié)合到膜結(jié)合的細(xì)胞因子抑制細(xì)胞因子。在其他實(shí)施方案中，HSCA通過(guò)結(jié)合溶解的(例如，可溶性)細(xì)胞因子抑制細(xì)胞因子。在一些實(shí)施方案中，HSCA通過(guò)結(jié)合到膜結(jié)合的細(xì)胞因子和溶解的細(xì)胞因子抑制細(xì)胞因子。在一些實(shí)施方案中，HSCA是單克隆抗體(“mAb”)。mAb的使用是非常希望的，因?yàn)樗鼈兲禺惤Y(jié)合某種靶蛋白質(zhì)并且不結(jié)合其他蛋白質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，HSCA通過(guò)結(jié)合靶標(biāo)細(xì)胞因子的天然受體抑制細(xì)胞因子。
在一些實(shí)施方案中，HSCA通過(guò)防止細(xì)胞因子產(chǎn)生來(lái)抑制細(xì)胞因子。其一個(gè)實(shí)例是p38促分裂原活化蛋白(MAP)激酶的抑制劑。
在一些實(shí)施方案中，HSCA是TNF-α的的特異拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，TNF抑制劑通過(guò)結(jié)合膜結(jié)合的TNF以防止其從膜釋放而抑制TNF。在其他實(shí)施方案中，TNF抑制劑通過(guò)結(jié)合溶解的TNF抑制TNF。其一個(gè)實(shí)例是etanercept(ENBREL，Amgen)。在一些實(shí)施方案中，TNF抑制劑通過(guò)結(jié)合膜結(jié)合的TNF和結(jié)合溶解的TNF抑制TNF。其一個(gè)實(shí)例是REMICADE英夫單抗。在一些實(shí)施方案中，HSCA通過(guò)結(jié)合靶標(biāo)細(xì)胞因子的天然受體抑制細(xì)胞因子(例如，TNF-α)。在一些實(shí)施方案中，TNF-α抑制劑是TNF-α合成抑制劑。
優(yōu)選的TNF拮抗劑包括，但不限于下面的etanercept(ENBREL，Amgen)、英夫單抗(REMICADE-Johnson andJohnson)；D2E7-人抗-TNF單克隆抗體(Knoll Pharmaceuticals，Abbott Laboratories)；CDP 571(人源化抗-TNF IgG4抗體)；CDP 870(抗TNFα人源化單克隆抗體片段)，都來(lái)自Celltech；可溶性I型TNF受體(Amgen)；聚乙二醇化可溶性I型TNF受體(PEGs TNF-R1)(Amgen)；和onercept-重組TNF結(jié)合蛋白(r-TBP-1)(Serono)。
適于本發(fā)明的組合物、組合治療、共同施用、裝置和/或方法(任選還包含本發(fā)明的至少一種抗體、其特定部分和/或變體)的TNF拮抗劑包括，但不限于，抗-TNF抗體(例如，至少一種TNF拮抗劑(例如，但不限于，TNF化學(xué)拮抗劑或者蛋白質(zhì)拮抗劑、TNF單克隆或多克隆抗體或者片段、可溶性TNF受體(例如，p55、p70或者p85)或者其片段、融合多肽，或者小分子TNF拮抗劑，例如，TNF結(jié)合蛋白質(zhì)I或II(TBP-1或TBP-II)、nerelimonmab、REMICADE英夫單抗、enteracept(ENBREL)、adalimulab(HUMIRATM)、CDP-571、CDP-870、阿非莫單抗(afelimomab)、來(lái)尼喹新(lenercept)，等等)、其抗原結(jié)合片段、和特異結(jié)合TNF的受體分子；防止和/或抑制TNF合成、TNF釋放和其對(duì)靶細(xì)胞的作用的化合物，如沙立度胺、替尼達(dá)普、磷酸二酯酶抑制劑(例如，己酮可可堿和環(huán)戊苯吡酮)、A2b腺苷受體激動(dòng)劑和A2b腺苷受體增強(qiáng)劑；防止和/或抑制TNF受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的化合物，如促分裂原活化蛋白(MAP)激酶抑制劑；阻斷和/或抑制膜TNF切割的化合物，如金屬蛋白酶抑制劑；阻斷和/或抑制TNF活性的化合物，如血管緊張肽轉(zhuǎn)變酶(ACE)抑制劑(例如，卡托普利)；和阻斷和/或抑制TNF產(chǎn)生和/或合成的化合物，如MAP激酶抑制劑。
文中所用“腫瘤壞死因子抗體”、“TNF抗體”、“TNFα抗體”、或者片段等等在體外、原位和/或優(yōu)選體內(nèi)降低、阻斷、抑制、消除或者干擾TNFα活性。例如，本發(fā)明的適宜的TNF人抗體可以結(jié)合TNFα并且包括抗-TNF抗體、其抗原結(jié)合片段，和其特異結(jié)合TNF-alpha(TNFα)的特定突變體或者結(jié)構(gòu)域。適宜的TNF抗體或片段也可以降低、阻斷、消除、干擾、防止和/或抑制TNF RNA、DNA或者蛋白質(zhì)合成、TNF釋放、TNF受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、膜TNF切割、TNF活性、TNF產(chǎn)生和/或合成。
嵌合抗體cA2由高特異性中和性小鼠抗人TNFα IgG1抗體的抗原結(jié)合可變區(qū)(稱(chēng)作A2)和人IgG1的恒定區(qū)κ免疫球蛋白組成。人IgG1 Fc區(qū)提高了同種異型抗體效應(yīng)子功能，增加循環(huán)血清半壽期并降低了抗體的免疫原性。嵌合抗體cA2的親合力和表位特異性來(lái)源于鼠抗體A2的可變區(qū)。在特定實(shí)施方案中，編碼鼠抗體A2的可變區(qū)的核酸的優(yōu)選來(lái)源是A2雜交瘤細(xì)胞系。
嵌合A2(cA2)以劑量依賴(lài)方式中和天然和重組人TNFα的細(xì)胞毒性效應(yīng)。根據(jù)嵌合抗體cA2和重組人TNFα的結(jié)合測(cè)定法，計(jì)算嵌合抗體cA2的特異性常數(shù)為1.04×1010M-1。測(cè)定單克隆抗體特異性和競(jìng)爭(zhēng)抑制的特異性的優(yōu)選方法可以見(jiàn)Harlow et al.，AntibodiesA Laboratory Manual，ColdSpring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，New York(1988)；Colligan etal.，eds.，Current Protocols in Immunology，Greene Publishing Assoc.and WileyInterscience，New York，(1992-2000)；Kozbor et al.，lmmunol.Today，472-79(1983)；Ausubel et al.，eds.Current Protocols in Molecular Biology，WileyInterscience，New York(1987-2000)；and Muller，Meth.Enzymol.，92589-601(1983)，本文完整引用這些參考文獻(xiàn)作為參考。
在特定實(shí)施方案中，通過(guò)稱(chēng)作c134A的細(xì)胞系產(chǎn)生鼠單克隆抗體A2。通過(guò)稱(chēng)作c168A的細(xì)胞系產(chǎn)生嵌合抗體cA2。
可以用于本發(fā)明的單克隆抗-TNF抗體的額外實(shí)例在本領(lǐng)域中已被描述(見(jiàn)，例如，美國(guó)專(zhuān)利No.5,231,024；Mller，A.等人，Cytokine2(3)162-169(1990)；美國(guó)申請(qǐng)No.07/943,852(1992年9月11日提交)；Rathjen等人，國(guó)際公開(kāi)No.WO 91/02078(1991年2月21日公布)；Rubin等人，EPO專(zhuān)利公開(kāi)No.0 218 868(1987年4月22日公布)；Yone等人，EPO專(zhuān)利公開(kāi)No.0 288 088(1988年10月26日)；Liang，等人，Biochem.Biophys.Res.Comm.137847-854(1986)；Meager，等人，Hybridoma 6305-311(1987)；Fendly等人，Hybridoma6359-369(1987)；Bringman，等人，Hybridoma 6489-507(1987)；和Hirai，等人，J.Immunol.Meth.9657-62(1987)，本文完整引用這些參考文獻(xiàn)作為參考。
可用于本發(fā)明的優(yōu)選的TNF受體分子為以高特異性結(jié)合TNFα(見(jiàn)，例如，F(xiàn)eldmann等人，國(guó)際公開(kāi)No.WO 92/07076(1992年4月30日公布)；Schall等人，Cell，61361-370(1990)；和Loetscher等人，Cell 61351-359(1990)，本文完整引用這些參考文獻(xiàn)作為參考)和任選地，具有低免疫原性的那些分子。具體地，55kDa(p55 TNF-R)和75kDa(p75 TNF-R)TNF細(xì)胞表面受體可以用于本發(fā)明。這些受體的截短形式包括該受體的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域(ECD)或者其功能部分(見(jiàn)，例如，Corcoran等人，Eur.J.Biochem.223831-840(1994))，所述截短形式也可以用于本發(fā)明。TNF受體的含有ECD的截短形式已經(jīng)在尿和血清中檢測(cè)到為30kDa和40kDa TNF抑制性結(jié)合蛋白質(zhì)(Engelmann，H等人，J.Biol.Chem.2651531-1536(1990))。TNF受體多聚體分子和TNF免疫受體融合分子，和其衍生物和片段或部分是可以用于本發(fā)明的方法和組合物的TNF受體分子的額外的實(shí)例。可以用于本發(fā)明的TNF受體分子的特征是它們能夠長(zhǎng)期治療患者，好到極好地減輕癥狀并且具有低毒性。低免疫原性和/或高特異性，以及其他未定的特征可能促進(jìn)了所實(shí)現(xiàn)的治療結(jié)果。
可用于本發(fā)明的TNF受體多聚體分子包括兩個(gè)或多個(gè)TNF受體的ECD的全部或功能部分，所述兩個(gè)或多個(gè)TNF受體通過(guò)一個(gè)或多個(gè)多肽連接體或者其他非肽連接體，如聚乙二醇(PEG)連接。多聚體分子還可以含有分泌蛋白質(zhì)的信號(hào)肽，其指導(dǎo)多聚體分子的表達(dá)。這些多聚體分子和它們的產(chǎn)生方法已經(jīng)在美國(guó)申請(qǐng)No.08/437,533(1995年5月9日提交)中描述，將其內(nèi)容完整并入本文作為參考。
可用于本發(fā)明的方法和組合物的TNF免疫受體融合分子包含一種或多種免疫球蛋白分子的至少一部分和一種或多種TNF受體的全部或功能部分。這些免疫受體融合分子可以裝配成單體、或者異-或同多聚體。免疫受體融合分子還可以是單價(jià)或多價(jià)的。此類(lèi)TNF免疫受體融合分子的一個(gè)實(shí)例是TNF受體/IgG融合蛋白質(zhì)。TNF免疫受體融合分子和它們的產(chǎn)生方法已經(jīng)在本領(lǐng)域描述(Lesslauer等人，Eur.J.Immunol.212883-2886(1991)；Ashkenazi等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 8810535-10539(1991)；Peppel等人，J.Exp.Med.1741483-1489(1991)；Kolls等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91215-219(1994)；Butler等人，Cytokine 6(6)616-623(1994)；Baker等人，Eur.J.Immunol.242040-2048(1994)；Beutler等人，美國(guó)專(zhuān)利No.5,447,851；和美國(guó)申請(qǐng)No.08/442,133(1995年5月16日提交)。產(chǎn)生免疫受體融合分子的方法也可以見(jiàn)Capon等人，美國(guó)專(zhuān)利No.5,116,964；Capon等人，美國(guó)專(zhuān)利No.5,225,538；和Capon等人，Nature 337525-531(1989)，本文完整引用這些參考文獻(xiàn)作為參考。
TNF受體分子的功能等價(jià)物、衍生物、片段或者區(qū)域指TNF受體分子的部分，或者編碼TNF受體分子的TNF受體分子序列的部分，其具有足夠的大小和序列與可以用于本發(fā)明的TNF受體分子在功能上相似(例如，以高特異性結(jié)合TNFα并且具有低免疫原性)。TNF受體分子的功能等價(jià)物還包括經(jīng)修飾的TNF受體分子，其與可以用于本發(fā)明的TNF受體分子在功能上相似(例如，以高特異性結(jié)合TNFα并且具有低免疫原性)。例如，TNF受體分子的功能等價(jià)物可以含有“沉默”密碼子或者一個(gè)或多個(gè)氨基酸替換、缺失或加入(例如，一個(gè)酸性氨基酸替換另一個(gè)酸性氨基酸；或者編碼相同或不同疏水氨基酸的一個(gè)密碼子替換編碼疏水氨基酸的另一密碼子)。見(jiàn)Ausubel等人，Current Protocols in Molecular Biology，Greene PublishingAssoc.and Wiley-Interscience，New York(1987-2003)。
在一些實(shí)施方案中，抑制TNF-α的單克隆抗體選自單克隆嚙齒類(lèi)-人抗體、嚙齒類(lèi)抗體、人抗體或者其任意部分，它們具有免疫球蛋白可變區(qū)的至少一個(gè)抗原結(jié)合區(qū)，所述抗體結(jié)合TNF。優(yōu)選地，該單克隆抗體選自美國(guó)專(zhuān)利No.6,277,969中公開(kāi)的化合物。在一些實(shí)施方案中，REMICADE英夫單抗以制劑遞送，所述制劑具有約30mg/ml到約60mg/ml的英夫單抗?jié)舛取?br> 還認(rèn)為透盤(pán)施用有效量的促炎化合物的其他拮抗劑將也有助于提供對(duì)患有DDD的患者的治療。在許多實(shí)施方案中，拮抗劑是酶，如激酶的拮抗劑。
還認(rèn)為透盤(pán)施用有效量的p38激酶拮抗劑將也有助于提供對(duì)患有DDD的患者的治療。認(rèn)為p38激酶位點(diǎn)調(diào)節(jié)TNF-α、IL-1和COX-2酶的產(chǎn)生。因此，根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施方案，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)透盤(pán)施用有效量制劑，其含有p38激酶的高特異性拮抗劑。
因此，在一些實(shí)施方案中，拮抗劑，如高度特異的(即，高特異性)拮抗劑是p38 MAP激酶抑制劑，優(yōu)選p38 MAP激酶的小分子抑制劑。認(rèn)為p38 MAP激酶的抑制阻斷TNF-α和IL-2的產(chǎn)生，TNF-α和IL-2都是促炎細(xì)胞因子。p38 MAP激酶的小分子抑制劑非常特異和有效(～nM)。不希望被理論所束縛，認(rèn)為p38的抑制不應(yīng)該阻斷TGF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)或者TGF活性。
還認(rèn)為p38抑制劑還可以阻斷某些金屬蛋白酶、COX 2和NO合成酶的誘導(dǎo)。還認(rèn)為p38抑制劑不抑制與免疫細(xì)胞增殖有關(guān)的白介素，如IL-2。優(yōu)選地，它們以10nM到10μM劑量提供。P38激酶的一些拮抗劑在Zhang，J.Biol.Chem.，272(20)，1997年5月16日(13397-402)；Pargellis，Nature Structural Biology，9(4)，April 2002 268-272，和Chae，Bone，28(1)，45-53(2001年1月)，和美國(guó)專(zhuān)利No.6,541,477(″Goehring″)中公開(kāi)，將其說(shuō)明書(shū)完整并入本文作為參考。在一個(gè)實(shí)施方案中，p38激酶的HSA以一定劑量施用以產(chǎn)生約5μg/kg到約50μg/kg的局部組織濃度。
在一些實(shí)施方案中，p38激酶抑制劑選自由以下成員構(gòu)成的組a)二芳基咪唑；b)N，N’-二芳基脲(由Bayer，Boehringer Ingelheim and Vertex開(kāi)發(fā))；c)N，N-二芳基脲(由Vertex開(kāi)發(fā))；d)二苯甲酮(由Leo Pharmaceuticals開(kāi)發(fā))；e)吡唑酮(由Hoffman-LaRoche開(kāi)發(fā))；f)吲哚酰胺(由GlaxoSmithKline和Scios開(kāi)發(fā))；g)二酰胺(由AstraZeneca開(kāi)發(fā))；h)喹唑啉(由GlaxoSmithKline開(kāi)發(fā))；i)嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮(pyrimidinone)(由GlaxoSmithKlineand和Hoffman LaRoche開(kāi)發(fā))；和j)吡啶基氨基-喹唑啉(由Scios開(kāi)發(fā))。
該組成員在例如，Zhang等人，如前，Pargellis等人，如前，Chae等人，如前，和Cirillo等人，Current Topics in Medicinal Chemistry，21021-1035(2002)，Boehm等人，Exp.Opin，Ther.Patents，10(1)25-38(2000)，和Lee等人，Immunopharmacology，47185-2001(2000)中描述。
在一些實(shí)施方案中，p38激酶抑制劑選自a)SK & F 86002；b)SB 203580；c)L-167307；d)HEP 689；e)SB220025；f)VX-745；g)SU4984；h)RWJ 68354；i)ZM336372；j)PD098059；k)SB235699；和i)SB220025。
在一些實(shí)施方案中，p38激酶抑制劑的特征是1-芳基-2-吡啶基雜環(huán)。在一些實(shí)施方案中，1-芳基-2-吡啶基雜環(huán)選自a)4，5取代的咪唑，b)1，4，5取代的咪唑；c)2，4，5取代的咪唑；d)1，2，4，5取代的咪唑；和e)非咪唑5-元環(huán)雜環(huán)。
在一些實(shí)施方案中，p38激酶抑制劑具有至少3個(gè)環(huán)狀基團(tuán)。
在一些實(shí)施方案中，p38激酶抑制劑易溶于水(水溶性的)。在一些實(shí)施方案中，p38激酶抑制劑基本上是水不溶性分子。基本上水不溶性p38抑制劑可以是有利的，因?yàn)槿绻⑸涞剿韬酥校鋵⒆鳛楣腆w保持在髓核中并且僅隨時(shí)間微溶，從而提供了緩釋。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述制劑還含有p38激酶抑制劑和糖胺聚糖。
在一些實(shí)施方案中，HSCA是白介素的特異拮抗劑。優(yōu)選地，靶標(biāo)白介素選自IL-1、IL-2、IL-6和IL-8和IL-12。優(yōu)選的拮抗劑包括但不限于Kineretg(重組IL 1-RA，Amgen)、2型IL1-受體(Amgen)和IL-1Trap(Regeneron)。
還認(rèn)為本發(fā)明還可以用于防止人個(gè)體中椎間盤(pán)的退化，即，按照包括下面步驟的方法實(shí)現(xiàn)a)確定個(gè)體的遺傳圖；b)比較該個(gè)體的遺傳圖與處于危險(xiǎn)中人的預(yù)定的遺傳圖；c)確定該個(gè)體是處于危險(xiǎn)的患者；和d)向該個(gè)體的盤(pán)中注射拮抗劑。
環(huán)素化合物一方面，本發(fā)明涉及對(duì)患病椎間盤(pán)直接提供(例如，通過(guò)患病椎間盤(pán))環(huán)素化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用含有環(huán)素化合物的制劑。在另一實(shí)施方案中，所述制劑還含有緩沖劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)素化合物以有效量施用以抑制促炎細(xì)胞因子(如TNF-α)或者基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)的作用。這些細(xì)胞因子可以存在于髓核中。在一個(gè)實(shí)施方案中，以有效量施用環(huán)素化合物以抑制退化過(guò)程中盤(pán)細(xì)胞釋放的MMP的作用。在一個(gè)實(shí)施方案中，以有效量施用環(huán)素化合物以a)抑制特定促炎細(xì)胞因子(如TNF-α)和b)抑制退化過(guò)程中局部細(xì)胞釋放的ECM-降解的MMP。在一個(gè)實(shí)施方案中，以有效量施用環(huán)素化合物以抑制MMP(例如，髓核中存在的MMP)，從而阻止細(xì)胞外基質(zhì)的降解。在一個(gè)實(shí)施方案中，以有效量施用環(huán)素化合物以抑制TNF-α(例如，髓核中存在的TNF-α)，從而抑制細(xì)胞外基質(zhì)的降解和/或減輕疼痛。
在一些實(shí)施方案中，環(huán)素化合物選自多西環(huán)素、賴(lài)甲環(huán)素、氧環(huán)素(oxicycline)化合物、四環(huán)素、米諾環(huán)素、化學(xué)修飾的四環(huán)素(CMT)和KB-R7785。優(yōu)選地，選擇多西環(huán)素或米諾環(huán)素。
在一些實(shí)施方案中，拮抗劑(例如，環(huán)素化合物)與額外的治療劑一起施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑包括促炎白介素的拮抗劑，白介素為白介素-1β，白介素為IL-2，白介素為IL-6，白介素為IL-8，白介素為IL-12，白介素為IL-19。
在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑為T(mén)NF-α的拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，TNF-α的拮抗劑是可溶性TNF-α、TNF-α合成、TNF-α的天然受體、p38激酶和/或基本上不溶于水的p38激酶的抑制劑。
在一些實(shí)施方案中，HSCA是白介素(例如，促炎白介素)的特異抑制劑(例如，高特異性拮抗劑)。優(yōu)選地，靶標(biāo)白介素選自IL-1、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12和IL-19。優(yōu)選的拮抗劑包括，但不限于，Kineretg(重組IL 1-RA，Amgen)、2型IL-1受體(Amgen)和IL-1 Trap(Regeneron)。
因?yàn)樵S多促炎蛋白質(zhì)在盤(pán)退化中起作用，并且其拮抗劑優(yōu)選高度特異，所以還認(rèn)為向盤(pán)中直接注射本發(fā)明的至少兩種高度特異的拮抗劑將是有益的。
因此，根據(jù)本發(fā)明，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中施用制劑，所述制劑含有i)環(huán)素化合物；和ii)選自TNF-α、白介素(例如，IL-1、IL-6和IL-8)、FAS、FAS配體和IFN-γ的促炎細(xì)胞因子的至少兩種高度特異的拮抗劑。
環(huán)素化合物以非特異方式抑制TNF-α。TNF-α和其他相似生物活性物質(zhì)首先以非活性形式產(chǎn)生并轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜。一旦活化，切割并釋放TNF-α原的活性部分。該過(guò)程稱(chēng)作脫落(shedding)并且可以由一種或多種酶啟動(dòng)。這些酶都共同地具有金屬離子并且稱(chēng)作基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)。已知環(huán)素化合物結(jié)合金屬離子并從而抑制MMP的作用和隨后以非特異方式抑制釋放TNF-α和其他促炎細(xì)胞因子。
其他拮抗劑和試劑還認(rèn)為透盤(pán)施用有效量的COX-2酶的拮抗劑將有助于提供對(duì)DDD患者的治療。認(rèn)為COX-2酶是對(duì)前列腺素的產(chǎn)生的調(diào)節(jié)劑，前列腺素與炎癥和疼痛的產(chǎn)生有關(guān)。因此，根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施方案，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用有效量的制劑，其含有COX-2酶的高親和性拮抗劑。
COX-2酶的通常的拮抗劑包括塞來(lái)昔布(Searle)，羅非克西(Merck)；美洛昔康(Boehringer Manheim)；尼美舒利；雙氯酚酸鈉和乙哚酸。
還認(rèn)為透盤(pán)施用有效量的PLA2酶的拮抗劑也有助于提供對(duì)DDD患者的治療。認(rèn)為PLA2酶是對(duì)前列腺素產(chǎn)生的調(diào)節(jié)劑。因此，根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施方案，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用有效量的制劑，其含有PLA2酶的高親和性拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，可以全身性施用PLA2的拮抗劑。
在Kawakami，Clin.Orthop.，351241-51(1998)中公開(kāi)了PLA2的至少一種拮抗劑。
還認(rèn)為透盤(pán)施用有效量的NO合酶的拮抗劑也有助于提供對(duì)DDD患者的治療。認(rèn)為NO合酶調(diào)節(jié)NO產(chǎn)生，已知NO具有促炎效果。因此，根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施方案，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用有效量的制劑，其含有NO合酶的高親和性拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，可以全身性施用NO合酶的拮抗劑。
NO合酶的一些拮抗劑是N-亞氨基乙基-L-賴(lài)氨酸(L-NIL)和NG-單甲基-L-精氨酸。
還認(rèn)為透盤(pán)施用有效量的高特異性抗氧化劑也有助于提供對(duì)DDD患者的治療。認(rèn)為氧化劑降解髓核細(xì)胞外基質(zhì)。通常的抗氧化劑包括自由基清除劑和超氧化物歧化酶。因此，根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施方案，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用有效量的制劑，其含有高親和性抗氧化劑。在一些實(shí)施方案中，可以全身性施用高特異性抗氧化劑。
還認(rèn)為透盤(pán)施用有效量的高特異性抗增殖劑也有助于提供對(duì)DDD患者的治療。認(rèn)為抗增殖劑通過(guò)影響發(fā)炎組織對(duì)炎癥產(chǎn)生影響，其將限制炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，高特異性抗增殖劑選自a)雷帕霉素；b)依賴(lài)環(huán)素的激酶9(cdk)的抑制劑；和c)達(dá)汀(statin)(如MEVASTATINTM和LOVASTATINTM)。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)選擇雷帕霉素時(shí)，采用產(chǎn)生約0.5μg/kg到約50μg/kg的局部組織濃度的劑量。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施方案，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用有效量的制劑，其含有高特異性抗增殖劑。
雷帕霉素是TOR(雷帕霉素靶標(biāo))蛋白質(zhì)的下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的強(qiáng)烈抑制劑。同樣，其負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)蛋白質(zhì)合成和蛋白質(zhì)分解之間的平衡。認(rèn)為細(xì)胞外基質(zhì)合成和降解之間平衡的喪失導(dǎo)致DDD增殖。因?yàn)門(mén)OR蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)多種代謝途徑，所以雷帕霉素可以穩(wěn)定該循環(huán)的平衡。雷帕霉素還可以直接影響軟骨細(xì)胞增殖和隨后的免疫反應(yīng)。此外，退化性軟骨細(xì)胞表現(xiàn)出低水平的增殖活性，相比之下，正常細(xì)胞不表現(xiàn)出活性。認(rèn)為這導(dǎo)致軟骨中軟骨細(xì)胞聚簇。雷帕霉素還可以消除非典型軟骨細(xì)胞增殖。在一個(gè)實(shí)施方案中，雷帕霉素以約0.1到約10μM的劑量提供。
Cdk抑制劑可以直接影響軟骨細(xì)胞的增殖和隨后的免疫反應(yīng)。Cdk抑制劑還可以直接影響軟骨細(xì)胞聚簇，公知軟骨細(xì)胞聚簇是特征性退化事件。代表性cdk抑制劑包括flavopiridol、roscovitine和PCT專(zhuān)利公開(kāi)No.WO 02/057240(Lin)和美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)60/257,703中公開(kāi)的化合物，將所述專(zhuān)利申請(qǐng)的內(nèi)容完整并入本文作為參考。在一個(gè)實(shí)施方案中，以1到10μM的劑量提供cdk抑制劑。
本發(fā)明還涉及對(duì)患病關(guān)節(jié)提供高特異性抗程序性細(xì)胞死亡分子。這些分子用以保護(hù)軟骨細(xì)胞防止程序性細(xì)胞死亡。優(yōu)選的化合物包括EPO、紅細(xì)胞生成素模擬肽、EPO模擬抗體融合蛋白質(zhì)、IGF-I、IGF-II、和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制劑。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施方案，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用有效量的制劑，其含有高特異性抗程序性細(xì)胞死亡劑。
此外，非類(lèi)固醇消炎藥物(NSAIDs)也可以選擇作為第二種治療劑。在一些實(shí)施方案中，NSAID是合成代謝的并且優(yōu)選選自TOLMETINTM(可從Ortho-MacNeil得到)、SUPROLTM(可從Johnson& Johnson得到)，和噻洛芬酸(可從Roussel Labs得到)。優(yōu)選地，以足夠劑量施用合成代謝性NSAID以產(chǎn)生約5μg/kg到約500μg/kg的最初局部組織濃度。在一些實(shí)施方案中，NSAID為COX和LOX途徑的雙重抑制劑并且優(yōu)選為T(mén)EPOXALINTM(可從Johnson & Johnson得到)。
此外，也可以根據(jù)本發(fā)明使用抗-組織蛋白酶。認(rèn)為這些酶的抑制會(huì)抑制細(xì)胞外基質(zhì)的分解。優(yōu)選地，拮抗劑抑制選自組織蛋白酶B、組織蛋白酶L和組織蛋白酶K的組織蛋白酶。
在一些實(shí)施方案中，額外的治療劑選自i)生長(zhǎng)因子；和ii)質(zhì)粒DNA。
對(duì)退化性盤(pán)疾病患者的施用DDD涉及盤(pán)的進(jìn)行性退化，其中涉及許多因子。在許多情況中，僅僅提供單次劑量或者甚至幾天內(nèi)的給藥方案可能都不足以解決DDD。例如，如果DDD部分地由功能性脊柱單位中的機(jī)械不穩(wěn)定性導(dǎo)致，那么對(duì)透盤(pán)細(xì)胞簡(jiǎn)單地提供一次治療將可能僅僅延遲DDD的發(fā)作。因此，需要提供DDD的長(zhǎng)期藥物療法治療，其不需要多次注射。
因?yàn)镈DD是持續(xù)的過(guò)程并且因?yàn)檎J(rèn)為一些目的細(xì)胞因子當(dāng)存在于髓核中時(shí)產(chǎn)生疼痛和降解ECM，所以希望拮抗劑以藥學(xué)有效量盡可能長(zhǎng)時(shí)間地保持在髓核中。髓核中拮抗劑的半壽期取決于許多因素，包括拮抗劑的大小及其電荷。通常，拮抗劑的分子量越大，其越可能保持包含在盤(pán)的纖維環(huán)部分中。
當(dāng)使用短半壽期拮抗劑時(shí)，希望透盤(pán)(即，到盤(pán)中)施用相對(duì)大劑量的拮抗劑。在該條件中，拮抗劑的快速耗竭將不導(dǎo)致拮抗劑下降到盤(pán)中的治療有效水平以下，直到經(jīng)過(guò)了延長(zhǎng)的時(shí)間。
盡管在此類(lèi)情況中希望大劑量拮抗劑，但是注射臨界體積的水會(huì)增加髓核中壓力。纖維環(huán)的內(nèi)壁上存在的傷害性感受器對(duì)該增加的壓力產(chǎn)生反應(yīng)并產(chǎn)生疼痛。在一些情況中，產(chǎn)生疼痛的加入量按體積計(jì)可以少至1cc。因此，如果向髓核中加入稀釋濃度的拮抗劑以提供大劑量，該加入的體積導(dǎo)致的所得壓力增加可足以產(chǎn)生劇烈疼痛。
例如，如果確定需要約100mg拮抗劑來(lái)治療性影響髓核，并且拮抗劑以約30到約60mg/ml的濃度提供，那么為了提供所希望的療效，將需要向髓核中注射至少約1.5ml拮抗劑。然而，當(dāng)向髓核注射體積時(shí)，希望遞送的藥物體積不超過(guò)約1ml，優(yōu)選不超過(guò)約0.5ml(即，最大0.5ml)，更優(yōu)選約0.1到約0.3ml。當(dāng)以這些更小量注射時(shí)，認(rèn)為所加的體積將不導(dǎo)致髓核中明顯的壓力增加。
因此，在一些實(shí)施方案中，所施用的制劑中拮抗劑的濃度為至少約100mg/ml。當(dāng)需要約100mg拮抗劑以產(chǎn)生所希望的治療結(jié)果時(shí)，需要注射不超過(guò)約1ml藥物。在一些實(shí)施方案中，所施用的藥物中拮抗劑的濃度為至少約200mg/ml。在該條件中，需要注射不超過(guò)約0.5ml藥物。在一些實(shí)施方案中，所施用的藥物中拮抗劑的濃度為至少約500mg/ml。在該條件中，需要注射的制劑為約0.03到約0.3ml。
在另一實(shí)施例中，如果確定治療性影響髓核需要約2mg環(huán)素化合物，并且以約2mg/ml的濃度提供環(huán)素化合物，那么為了提供希望的療效，需要向髓核注射至少約1ml環(huán)素化合物。然而，當(dāng)向髓核注射體積時(shí)，希望遞送的藥物的體積小于約1ml，優(yōu)選不超過(guò)0.5ml，更優(yōu)選約0.03到約0.3ml。當(dāng)以這些更小量注射時(shí)，認(rèn)為所加入的體積將不導(dǎo)致髓核中明顯的壓力增加。
因此，在一些實(shí)施方案中，所施用的藥物，即制劑(即，持續(xù)遞送裝置)中環(huán)素化合物的濃度為至少約20mg/ml。在該條件下，需要注射不超過(guò)0.1ml藥物。優(yōu)選地，施用的藥物中環(huán)素化合物的濃度為至少50mg/ml。在該條件下，需要注射不超過(guò)約0.05ml(即，最大0.05ml)藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，制劑中環(huán)素化合物的濃度小于約100mg/ml。
在一些實(shí)施方案中，以緩釋裝置(即，持續(xù)遞送裝置)提供拮抗劑。緩釋裝置適于在盤(pán)內(nèi)長(zhǎng)期保留并緩慢釋放其中所含拮抗劑到周?chē)h(huán)境中。該遞送方式允許拮抗劑在盤(pán)內(nèi)長(zhǎng)期保持治療有效量。
在一些實(shí)施方案中，拮抗劑主要通過(guò)其通過(guò)持續(xù)遞送裝置(例如，通過(guò)聚合物)的擴(kuò)散從持續(xù)遞送裝置釋放。在其他實(shí)施方案中，拮抗劑主要通過(guò)持續(xù)遞送裝置的生物降解(例如，聚合物的生物降解)從持續(xù)遞送裝置釋放。
在一些實(shí)施方案中，緩釋裝置(即，持續(xù)遞送裝置)包含生物可再吸收的材料，其逐漸腐蝕導(dǎo)致拮抗劑逐漸釋放到盤(pán)環(huán)境中。在一些實(shí)施方案中，緩釋裝置包含生物可再吸收的聚合物。在一些實(shí)施方案中，生物可再吸收的聚合物的半壽期為至少1個(gè)月，更優(yōu)選至少2個(gè)月，更優(yōu)選至少6個(gè)月。
在一些實(shí)施方案中，持續(xù)遞送裝置包含生物可腐蝕的大球體。拮抗劑優(yōu)選包含在膠囊內(nèi)的明膠(或者水或其他溶劑)內(nèi)，并且當(dāng)外殼被腐蝕時(shí)釋放到盤(pán)環(huán)境中。該裝置可以包括具有不同厚度的外殼的多種膠囊，從而外殼的順序分解提供了拮抗劑的定期釋放。
在一些實(shí)施方案中，緩釋裝置提供了控釋。在一些實(shí)施方案中，其提供了連續(xù)釋放。在一些實(shí)施方案中，其提供了間歇性釋放。在一些實(shí)施方案中，緩釋裝置包含生物傳感器。也可以使用其他釋放方式。
在一些實(shí)施方案中，持續(xù)遞送裝置包含炎癥應(yīng)答性遞送系統(tǒng)，如含有可以被侵入的巨噬細(xì)胞腐蝕的生物可腐蝕的微球體的遞送系統(tǒng)。該技術(shù)提供了盤(pán)環(huán)境的生理炎癥和拮抗劑向該環(huán)境的釋放之間的高度對(duì)應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，選擇Brown等人，Arthritis.Rheum.Dec.，41(12)2185-95(1998)中公開(kāi)的技術(shù)。
在一些實(shí)施方案中，持續(xù)遞送裝置包含美國(guó)專(zhuān)利No.5,728,396(″Peery″)中公開(kāi)的裝置，將該專(zhuān)利的說(shuō)明書(shū)完整引用作為本文的參考。
在一些實(shí)施方案中，持續(xù)遞送裝置包含脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)，如WO03/000190中公開(kāi)的系統(tǒng)。脂質(zhì)體是小球體，它們的壁是具有水的脂質(zhì)層。隨著它們的形成，脂質(zhì)體捕獲水和其中存在的任何水溶性溶質(zhì)。因?yàn)樵摬东@能力，它們可用作遞送系統(tǒng)。對(duì)于本發(fā)明，優(yōu)選的實(shí)施方案包括使用多層小泡，和任意天然發(fā)生的磷脂，如二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)。
脂質(zhì)體可以是具有圍繞內(nèi)部液相的至少一個(gè)脂質(zhì)雙層的小泡(脂質(zhì)雙層圍繞液體核心或者分散在該脂質(zhì)雙層和另一脂質(zhì)雙層之間的液相)。脂質(zhì)體可以具有多種結(jié)構(gòu)，如多層(MLVs)、單層(ULVs)和paucilamellar(PLVs)小泡。脂質(zhì)體的所得結(jié)構(gòu)部分取決于形成疏水相的材料和生產(chǎn)參數(shù)，如溫度和孵育時(shí)間的選擇。
一些脂質(zhì)體包含至少一種兩親性形成雙層的物質(zhì)。其中所含治療性物質(zhì)可以包含在脂質(zhì)體的脂質(zhì)雙層或者親水隔室中。兩親性形成雙層的物質(zhì)包含親水和親脂基團(tuán)并且能夠單獨(dú)或者聯(lián)合其他脂質(zhì)形成脂質(zhì)體的雙層。脂質(zhì)可以具有一條或者多條親脂側(cè)鏈，其在本質(zhì)上是飽和或不飽和的和在結(jié)構(gòu)上是分枝或線(xiàn)性的。兩親性形成雙層的物質(zhì)可以是磷脂或者神經(jīng)酰胺。
在一些實(shí)施方案中，持續(xù)遞送裝置含有許多(例如，至少100個(gè))含有水的小室，每個(gè)小室都含有拮抗劑。小室由雙層脂質(zhì)膜限定，所述雙層脂質(zhì)膜含有天然存在的脂質(zhì)的合成復(fù)制品。通過(guò)改變水性賦形劑、脂質(zhì)組分和生產(chǎn)參數(shù)的至少一種可以控制藥物的釋放。優(yōu)選地，制劑含有不超過(guò)10％的脂質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，選擇SkyepharmaPLC(London，United Kingdom)的DEPOFOAMTM技術(shù)。
在一些實(shí)施方案中，持續(xù)遞送裝置含有美國(guó)專(zhuān)利No.5,270,300(″Hunziker″)中公開(kāi)的遞送系統(tǒng)，將所述專(zhuān)利的說(shuō)明書(shū)完整引用作為本文的參考。
在一些實(shí)施方案中，持續(xù)遞送裝置含有共聚物聚-DL-丙交酯-共-乙交酯(PLG)。優(yōu)選地，通過(guò)將拮抗劑或者額外的治療劑、共聚物和溶劑組合形成小滴，然后蒸發(fā)溶劑形成微球體來(lái)生產(chǎn)制劑。然后將許多微球體在生物相容性稀釋劑中組合。優(yōu)選地，拮抗劑或者額外治療劑通過(guò)其經(jīng)共聚物的擴(kuò)散和共聚物的生物降解從該共聚物釋放。在其一些實(shí)施方案中，選擇Alkermes(位于Cambridge，MA)的PROLEASETM技術(shù)。
水凝膠也可以用于以緩釋方式遞送拮抗劑到盤(pán)環(huán)境。“水凝膠”是當(dāng)有機(jī)聚合物(天然或合成的)被固定或固化產(chǎn)生三維開(kāi)放網(wǎng)格結(jié)構(gòu)時(shí)形成的物質(zhì)，所述網(wǎng)格結(jié)構(gòu)捕獲水分子或者其他溶液而形成凝膠。例如，通過(guò)聚集、凝結(jié)、疏水相互作用或者交聯(lián)可以發(fā)生固化。用于本發(fā)明的水凝膠可以快速固化使HAAMMP保持在應(yīng)用部位，從而消除了從盤(pán)的不希望的遷移。水凝膠也是生物相容的，例如，對(duì)于懸浮在水凝膠中的物質(zhì)是無(wú)毒的。
“水凝膠拮抗劑組合物”是含有所希望的拮抗劑的水凝膠的懸浮物。水凝膠-拮抗劑組合物形成拮抗劑的均勻分布，其具有明確并且可以精確控制的密度。而且，水凝膠可以支持密度非常大的拮抗劑。此外，水凝膠允許營(yíng)養(yǎng)物擴(kuò)散到終板，和廢物從終板擴(kuò)散出去，這促進(jìn)了組織生長(zhǎng)。
適宜用于本發(fā)明的水凝膠包括含有水的凝膠，即特征是親水性和在水中不溶的聚合物。見(jiàn)，例如，Concise Encyclopedia of PolymerScience and Engineering，編者M(jìn)ark等人，Wiley and Sons(1990)458-459頁(yè)的“水凝膠”，將該文獻(xiàn)的公開(kāi)完整并入本文作為參考。盡管它們可以任選用于本發(fā)明，但是包括水凝膠是高度有益的，因?yàn)樗鼈兺哂性S多希望的性質(zhì)。通過(guò)它們的親水、含水性質(zhì)，水凝膠可以有助于盤(pán)的承重能力。
在一個(gè)實(shí)施方案中，水凝膠是細(xì)小的粉狀合成水凝膠。適宜的水凝膠顯示出此類(lèi)性質(zhì)的最優(yōu)組合，所述性質(zhì)為諸如與所選基質(zhì)聚合物的相容性，和生物相容性。水凝膠可以包括任意一種或多種下面的物質(zhì)多糖、蛋白質(zhì)、聚磷腈、聚(氧乙烯)-聚(氧丙烯)嵌段共聚物、乙二胺的聚(氧乙烯)-聚(氧丙烯)嵌段共聚物、聚(丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸)、丙烯酸和甲基丙烯酸的共聚物、聚(乙酸乙烯酯)，和磺化聚合物。
通常，這些聚合物至少部分可以溶于水性溶液，例如，水，或者具有帶電側(cè)基的水性醇溶液，或者其單價(jià)離子鹽中。有許多具有可以與陽(yáng)離子反應(yīng)的酸性側(cè)基的聚合物的實(shí)例，例如，聚(磷腈)、聚(丙烯酸)，和聚(甲基丙烯酸)。酸性基團(tuán)的實(shí)例包括羧酸基、磺酸基、和鹵化(優(yōu)選氟化)醇基。具有可以與陰離子反應(yīng)的堿性側(cè)基的聚合物的實(shí)例為聚(乙烯基胺)、聚(乙烯基吡啶)和聚(乙烯基咪唑)。
在一些實(shí)施方案中，持續(xù)遞送裝置包括選自PLA、PGA、PCL和它們的混合物的聚合物。
如果盤(pán)中拮抗劑的半壽期相對(duì)較長(zhǎng)，那么可以設(shè)想可以對(duì)盤(pán)施用相對(duì)小劑量的拮抗劑。在該條件下，在經(jīng)過(guò)延長(zhǎng)的時(shí)間之前拮抗劑的緩慢耗竭將不導(dǎo)致盤(pán)中拮抗劑下降到治療有效水平以下。
在其中拮抗劑在盤(pán)空間中具有長(zhǎng)半壽期的一些實(shí)施方案中，所施用的劑量可以非常小。
例如，如果認(rèn)為當(dāng)拮抗劑以約1到約10mg/kg或者約1到約10ppm的范圍存在時(shí)是有效的(認(rèn)為對(duì)于TNF拮抗劑REMICADE英夫單抗是這樣的情況)，因?yàn)楸P(pán)的通常的髓核具有約3ml(或者3cc，或者3g)的體積，那么需要對(duì)盤(pán)施用僅約3到約30μg拮抗劑以便提供拮抗劑的長(zhǎng)期有效量。可以以1cc以下的量施用制劑。作為參考點(diǎn)，Tobinick公開(kāi)為了治療背部疼痛，應(yīng)該脊柱周施用至少1mg細(xì)胞因子拮抗劑。相似地，Olmarker混合含有1.11mg/ml單克隆抗體的100ml制劑到40mg提取的髓核中，從而產(chǎn)生約3/1000的單克隆抗體濃度。通過(guò)該途徑可獲得的更小量減小了拮抗劑的有害副作用的機(jī)會(huì)。
例如，如果臨床醫(yī)生向2.7cc盤(pán)施用0.3ml 60mg/ml的拮抗劑，如REMICADE英夫單抗，這將在盤(pán)中產(chǎn)生約6mg/ml，或者6/1000的拮抗劑濃度。不希望被理論所束縛，如果拮抗劑(例如，HAAMMP)在髓核內(nèi)具有與全身性施用時(shí)相同的半壽期(即約1周)，那么拮抗劑的濃度將保持高于約10ppm約9周。因此，如果需要另一劑，臨床醫(yī)生將僅需要在約2個(gè)月后提供第二劑。
因此，在一些實(shí)施方案中，以小于約1mg，例如，小于約0.5mg，更優(yōu)選小于約0.1mg，更優(yōu)選小于約0.01mg，更優(yōu)選小于約0.001mg的劑量提供拮抗劑。通過(guò)該途徑可獲得的更小量減小了拮抗劑的有害副作用的機(jī)會(huì)。當(dāng)拮抗劑是HSCA時(shí)，優(yōu)選地，以這些更小量提供的HSCA是TNF拮抗劑，更優(yōu)選其是REMICADE英夫單抗。
在一些實(shí)施方案中，將本發(fā)明的制劑通過(guò)纖維環(huán)的外壁直接施用到盤(pán)中。更優(yōu)選地，直接施用包括將拮抗劑沉積在盤(pán)的髓核部分。在該條件下，圍繞髓核的纖維環(huán)的纖維狀性質(zhì)將有助于將拮抗劑保持在盤(pán)中。
在一些實(shí)施方案中，將本發(fā)明的制劑通過(guò)小孔針頭注射到盤(pán)中。在一些實(shí)施方案中，針頭具有約22號(hào)(gauge)或更小的孔，從而，產(chǎn)生突出(herniation)的可能性減小了。例如，針頭可以具有約24號(hào)或更小的孔，從而，進(jìn)一步減小產(chǎn)生突出的可能性。
如果制劑的直接注射體積足夠高從而導(dǎo)致對(duì)髓核的過(guò)壓力的擔(dān)心，那么優(yōu)選在直接注射前除去髓核的至少一部分。在一些實(shí)施方案中，所除去的髓核的體積基本上相似于待注射的制劑的體積。例如，所除去的髓核的體積可以為待注射的制劑的體積的80-120％。此外，該方法還具有從患者至少部分除去一些已退化的盤(pán)的額外益處。
在其他實(shí)施方案中，將制劑通過(guò)相對(duì)椎體的終板遞送到盤(pán)空間。該方法不需要纖維環(huán)的穿刺，并且因此消除了突出的可能性。
盡管拮抗劑可通過(guò)結(jié)合MMP，從而減輕疼痛和阻止ECM的降解而治療性治療盤(pán)，但是認(rèn)為這些拮抗劑的至少一些無(wú)助于修復(fù)MMP對(duì)ECM造成的傷害。
根據(jù)本發(fā)明，提供了治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括a)向正在退化的盤(pán)透盤(pán)施用拮抗劑；和在另一實(shí)施方案中，可能需要提供也有助于修復(fù)ECM的治療。
b)因此，透盤(pán)施用至少一種額外的治療劑，所述額外的治療劑可以以有效量施用以至少部分修復(fù)盤(pán)(即，盤(pán)組織)。
根據(jù)本發(fā)明的一方面，向盤(pán)空間局部施用拮抗劑和至少一種額外的(例如，第二種)治療劑。當(dāng)拮抗劑是HSCA時(shí)，因?yàn)镠SCA是特異的，所以其不干擾局部施用的額外的治療劑，并且因此每種試劑獨(dú)立地工作以提供對(duì)患病盤(pán)的治療。
可以施用一種以上的額外的治療劑。例如，可以有第三、第四和第五種治療劑。
在一些實(shí)施方案中，拮抗劑和額外的治療劑(即，額外的治療物質(zhì))同時(shí)施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，拮抗劑和額外的治療劑在含有所述拮抗劑和額外的治療劑的制劑中共同施用。在其他實(shí)施方案中，拮抗劑首先施用。在其他實(shí)施方案中，第二種治療劑首先施用。
額外的治療劑可以是本文公開(kāi)的一種或多種拮抗劑。例如，可以加入盤(pán)的其他化合物包括，但不限于維生素和其他營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充物；激素；糖蛋白；纖連蛋白；肽和蛋白質(zhì)；糖(簡(jiǎn)單和/或復(fù)雜的)；蛋白聚糖；寡核苷酸(有義和/或反義DNA和/或RNA)；骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMPs)；抗體(例如，針對(duì)感染物、腫瘤、藥物或激素抗血管生成素的抗體)；脫礦質(zhì)骨基質(zhì)(DBM)；抗體(例如，針對(duì)感染物、腫瘤、藥物的抗體)；基因治療試劑；和抗癌劑。如果希望，還可以將諸如止痛劑和麻醉劑的物質(zhì)與聚合物混合以遞送和釋放到盤(pán)空間(discspace)。
在一些實(shí)施方案中，生長(zhǎng)因子是額外的治療劑。文中所用術(shù)語(yǔ)“生長(zhǎng)因子”包括調(diào)節(jié)其他細(xì)胞，尤其結(jié)締組織祖細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的任意細(xì)胞產(chǎn)物。根據(jù)本發(fā)明可以使用的生長(zhǎng)因子包括，但不限于，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族的成員，包括酸性和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF-1和-2)和FGF-4、血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)家族的成員，包括PDGF-AB、PDGF-BB和PDGF-AA；EGFs，胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)家族的成員，包括IGF-I和-II；TGF-β超家族，包括TGF-β1、2和3(包括MP-52)，類(lèi)骨質(zhì)誘導(dǎo)因子(OIF)、血管生成素、內(nèi)皮縮血管肽、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子和角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子；骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMPs)的成員BMP-1；BMP-3；BMP-2；OP-1；BMP-2A，-2B，-4，-7和-14；HBGF-1和HBGF-2；生長(zhǎng)分化因子(GDFs)、刺猬蛋白質(zhì)家族成員，包括印度、音速(sonic)和沙漠刺猬蛋白質(zhì)；ADMP-1；GDF-5；和集落刺激因子(CSF)家族成員，包括CSF-1、G-CSF和GM-CSF；和它們的同種型。
在一些實(shí)施方案中，生長(zhǎng)因子選自TGF-β、bFGF和IGF-1。認(rèn)為這些生長(zhǎng)因子促進(jìn)髓核的再生，或者刺激軟骨細(xì)胞的增殖和/或分化，以及ECM分泌。在一個(gè)實(shí)施方案中，生子因子是TGF-β。更優(yōu)選地，以約10ng/ml到約5000ng/ml，例如，約50ng/ml到約500ng/ml，例如，約100ng/ml到約300ng/ml的量施用TGF-β。
在一些實(shí)施方案中，提供血小板濃縮物作為額外的治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，血小板釋放的生長(zhǎng)因子以大于血小板從中采集的血液中發(fā)現(xiàn)的量的至少兩倍(例如，四倍)的量存在。在一些實(shí)施方案中，血小板濃縮物是自體的。在一些實(shí)施方案中，血小板濃縮物是富含血小板的血漿(PRP)。PRP是有益的，因?yàn)槠浜锌梢栽俅碳CM生長(zhǎng)的生長(zhǎng)因子，還因?yàn)槠溲w蛋白基質(zhì)為新組織生長(zhǎng)提供適宜的支架。
在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑是NO合酶的拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，拮抗劑是L-NIL和NG-單甲基-L-精氨酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑是PLA2的拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑是高特異性抗增殖劑，如包括雷帕霉素、cdk抑制劑、達(dá)汀和抗氧化劑的高特異性抗增殖劑。在再一個(gè)實(shí)施方案中，抗氧化劑包含超氧化物歧化酶。
在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑是選自EPO模擬肽和EPO模擬抗體融合蛋白質(zhì)的高度特異的程序性細(xì)胞死亡抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑是選自IGF-1和IGF-II的高度特異的程序性細(xì)胞死亡抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑是高度特異的半胱氨酸天冬氨蛋白酶(caspase)抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的治療劑包含糖胺聚糖。
在一個(gè)實(shí)施方案中，制劑還包括脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)。
在一些實(shí)施方案中，制劑含有適宜的生物相容的載體，如鹽水。在一些實(shí)施方案中，載體選自美國(guó)專(zhuān)利No.6,277,969(″Le″)中公開(kāi)的載體，將所述專(zhuān)利完整引用作為本文的參考。
在一些實(shí)施方案中，通過(guò)藥物泵施用制劑。
還根據(jù)本發(fā)明，提供了藥盒，其包含含有以有效量存在以至少部分修復(fù)正在退化的盤(pán)的拮抗劑的裝置。
還根據(jù)本發(fā)明，提供了用于治療退化性盤(pán)疾病的制劑，其含有a)拮抗劑，和b)生長(zhǎng)因子。
在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，拮抗劑與粘性補(bǔ)充物(viscosupplement)組合在制劑中。所述粘性補(bǔ)充物具有與天然健康髓核ECM基本上相似的特征。
優(yōu)選地，粘性補(bǔ)充物包含糖胺聚糖(GAGS)。GAGS是由重復(fù)多糖單位組成的生物聚合物，并且天然存在于細(xì)胞表面上以及動(dòng)物的細(xì)胞外基質(zhì)中。GAGS是含有重復(fù)二糖單位的長(zhǎng)的未分枝的多糖。所述二糖單位含有兩種經(jīng)修飾的糖之一N-乙酰半乳糖胺或N-乙酰葡糖胺和糖醛酸，如葡糖醛酸或者艾杜糖醛酸。GAGS是高度帶負(fù)電荷的分子，具有延伸構(gòu)象，其賦予溶液的高粘性。除了高粘性，GAGS通常具有低壓縮性，其使得這些分子是關(guān)節(jié)中的理想的潤(rùn)滑液。同時(shí)，它們的剛性為細(xì)胞提供了結(jié)構(gòu)完整性并提供了細(xì)胞間的通道，允許細(xì)胞遷移。
最近工作已經(jīng)表明質(zhì)粒DNA將不會(huì)像使用病毒載體那樣引起炎癥反應(yīng)。編碼軟骨(合成代謝)劑(如BMP)的基因如果注射到關(guān)節(jié)中將是有效的。此外，過(guò)表達(dá)本文中提供的任一種生長(zhǎng)因子或其他試劑，如將限制局部MMP活性的MMP的組織抑制劑(TIMP)，將對(duì)軟骨細(xì)胞和ECM保護(hù)具有積極效果。在一些實(shí)施方案中，TIMP選自TIMP-1和TIMP-2。在一些實(shí)施方案中，TIMP是自體的并且通過(guò)過(guò)濾、離心或者通過(guò)免疫附著方法濃縮。在其他實(shí)施方案中，TIMP經(jīng)重組產(chǎn)生并且優(yōu)選以患者中發(fā)現(xiàn)的至少1000倍的濃度存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，質(zhì)粒含有人TGF-β或者EPO的遺傳密碼。
透明質(zhì)酸(HA)是N-乙酰葡糖胺和葡糖醛酸分子的高分子量多糖，其天然存在于所有哺乳動(dòng)物的多種組織和某些細(xì)菌種類(lèi)中。對(duì)于本發(fā)明，HA包括任意衍生物，如透明質(zhì)酸酐(hyaluronan)和透明質(zhì)酸自身，其H+離子附著到COO-基，和透明質(zhì)酸的鹽，從而另一陽(yáng)離子取代H+離子，例如，用Na+取代，從而形成透明質(zhì)酸鈉。HA的定義中還包括任意物理上或者化學(xué)上交聯(lián)的透明質(zhì)酸或者衍生物。HA在GAGS中是獨(dú)特的，因?yàn)槠洳缓腥魏瘟蛩猁}并且沒(méi)有發(fā)現(xiàn)共價(jià)連接到蛋白質(zhì)作為蛋白聚糖。HA聚合物非常大，分子量為約100,000到10,000,000，并且可以置換大體積水。對(duì)于本發(fā)明，優(yōu)選的實(shí)施方案包括分子量為0.5-10M道爾頓的非交聯(lián)的HA。
優(yōu)選地，粘性補(bǔ)充物選自透明質(zhì)酸和透明質(zhì)酸鹽(交聯(lián)或未交聯(lián)的)。在一些實(shí)施方案中，粘性補(bǔ)充物是ARTHREASETM(DePuyLtd.，Leeds，U.K.)。在一些實(shí)施方案中，粘性補(bǔ)充物是選自在美國(guó)序號(hào)09/298,539，標(biāo)題為″Method of Treating Diseased，Injured orAbnormal Cartilage with Hyaluronic Acid and Growth Factors″(Radomsky等人)的申請(qǐng)中公開(kāi)的透明質(zhì)酸的透明質(zhì)酸，將所述申請(qǐng)的說(shuō)明書(shū)完整引用作為本文的參考。
最近工作已經(jīng)表明質(zhì)粒DNA將不會(huì)像使用病毒載體那樣引起炎癥反應(yīng)。編碼軟骨(合成代謝)劑(如BMP)的基因如果注射到關(guān)節(jié)中將是有效的。此外，過(guò)表達(dá)本文中提供的任一種生長(zhǎng)因子和其他活性劑，如將限制局部MMP活性的TIMP，將對(duì)軟骨細(xì)胞和ECM保護(hù)具有積極效果。在一個(gè)實(shí)施方案中，質(zhì)粒含有人TGF-β或者EPO的遺傳密碼。
因?yàn)橄路奖程弁吹脑蚩赡芴啵乙驗(yàn)槟承┺卓箘┑陌嘿F成本，在提供注射前，臨床醫(yī)生首先進(jìn)行診斷試驗(yàn)以便證實(shí)靶標(biāo)盤(pán)實(shí)際上具有高水平靶標(biāo)蛋白質(zhì)(例如，促炎細(xì)胞因子和/或MMP)是有用的。
在一個(gè)實(shí)施方案中，診斷試驗(yàn)包括非侵入性診斷試驗(yàn)，其包括例如，使用MRI。在一些實(shí)施方案中，MRI能夠定量盤(pán)中的聚集蛋白聚糖水平。
在一個(gè)實(shí)施方案中，臨床醫(yī)生將首先進(jìn)行椎間盤(pán)造影(discogram)以便鑒定哪個(gè)或哪些盤(pán)造成患者的下部背痛。然后，臨床醫(yī)生將對(duì)目的盤(pán)進(jìn)行侵入性或非侵入性試驗(yàn)以證實(shí)促炎細(xì)胞因子和/或MMPs的存在或者量化其水平。
在一個(gè)實(shí)施方案中，診斷試驗(yàn)包括侵入性試驗(yàn)，其中取走并分析一部分盤(pán)。在一些實(shí)施方案中，臨床醫(yī)生取走一部分髓核。在一些實(shí)施方案中，臨床醫(yī)生取走一部分纖維環(huán)。優(yōu)選地，除去的材料是一部分髓核。通過(guò)包括，但不限于電泳、或者酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)(按照Burke，Br.JBJS，84-B(2)，2002)的方法可以檢測(cè)所取走的材料中促炎細(xì)胞因子和/或MMPs的存在。
在一些實(shí)施方案中，選擇美國(guó)專(zhuān)利No.6,277,969(″Le″)中公開(kāi)的診斷方法。在這些方法中，高特異性抗-TNF-α化合物用作檢測(cè)已知或者懷疑具有高水平TNF-α的患者中TNF-α的診斷工具。
測(cè)定正在退化的盤(pán)中不同促炎細(xì)胞因子和/或MMPs的水平后，臨床醫(yī)生將優(yōu)選繼續(xù)比較這些診斷水平與一種或幾種蛋白質(zhì)(如細(xì)胞因子或MMPs)的預(yù)先確定的水平。如果促炎細(xì)胞因子和/或MMPs的診斷水平超出預(yù)先確定的水平，那么臨床醫(yī)生可以推斷這些更高水平導(dǎo)致不希望的炎性作用并且向盤(pán)中直接注射能夠抑制靶標(biāo)蛋白質(zhì)的目的拮抗劑(例如，高特異性p38激酶抑制劑)。
在一些實(shí)施方案中，在診斷試驗(yàn)中使用含有“芯片上實(shí)驗(yàn)室”的生物微機(jī)電系統(tǒng)(bioMES)裝置。
在一些實(shí)施方案中，白介素的預(yù)定水平為至少100pg/ml。在一些實(shí)施方案中，IL-6的預(yù)定水平為至少250pg/ml。在一些實(shí)施方案中，IL-8的預(yù)定水平為至少500pg/ml。在一些實(shí)施方案中，PGE2的預(yù)定水平為至少1000pg/ml。在一些實(shí)施方案中，TNF-α的預(yù)定水平為至少500pg/ml。在其他實(shí)施方案中，TNF-α的預(yù)定水平為至少20pg/ml，更優(yōu)選至少30pg/ml，更優(yōu)選至少50pg/ml，更優(yōu)選至少1ng/ml。在其他實(shí)施方案中，TNF-α的預(yù)定水平為至少1ng/盤(pán)，在其他實(shí)施方案中，TNF-α的預(yù)定水平為至少1000pg/盤(pán)。
還有用的是能夠確定是否直接施用本發(fā)明的治療物質(zhì)實(shí)際上是有效的。因此，可以測(cè)量施用后盤(pán)中剩余細(xì)胞因子或MMP的水平。
實(shí)施例I該非限制性預(yù)言性實(shí)施例(prophetic example)描述怎樣將含有HAAMMP和鹽水的制劑透盤(pán)施用到正在退化的盤(pán)的髓核中。
首先，臨床醫(yī)生使用診斷試驗(yàn)證實(shí)患者中特定盤(pán)具有高水平MMPs。
然后，臨床醫(yī)生向所關(guān)心的盤(pán)的背側(cè)區(qū)域提供局部麻醉劑(如5ml利多卡因)以減小皮下疼痛。
接著，臨床醫(yī)生用其中具有管心針(stylet)的相對(duì)較大(例如，18-19號(hào))針頭穿刺所關(guān)心的盤(pán)背側(cè)的患者皮膚，推動(dòng)針頭通過(guò)皮下脂肪和背部骶腰韌帶和肌肉到達(dá)椎間盤(pán)的外邊緣。
然后，從針頭取下管心針。
接著，臨床醫(yī)生接到注射器，其具有適于安裝在較大號(hào)針頭內(nèi)的較小號(hào)針頭。該針頭通常為22或24號(hào)針頭。注射器的柱體含有本發(fā)明的制劑。
制劑含有HAAMMP，并且具有約30mg/ml到約60mg/mlHAAMMP濃度。
然后，臨床醫(yī)生將較小針頭同軸地推動(dòng)通過(guò)較大針頭并經(jīng)過(guò)較大針頭的遠(yuǎn)端，從而，穿刺纖維環(huán)。然后較小針頭進(jìn)一步進(jìn)入髓核的中心。最后，臨床醫(yī)生壓下注射器活塞，從而，向髓核注射約0.1到1ml制劑。
實(shí)施例II該非限制性預(yù)言性實(shí)施例基本上與實(shí)施例I相似，只是制劑包含緩釋裝置，其含有共聚物聚-DL-丙交酯-共聚-乙交酯(PLG)。制劑含有作為拮抗劑的HAAMMP，并且具有約30mg/ml到約60mg/mlHAAMMP濃度。
實(shí)施例III該非限制性預(yù)言性實(shí)施例描述怎樣向正在退化的盤(pán)的髓核中透盤(pán)施用含有HSCA和鹽水的制劑。
首先，臨床醫(yī)生使用診斷試驗(yàn)證實(shí)患者中特定盤(pán)具有高水平特定促炎細(xì)胞因子。
然后，臨床醫(yī)生向所關(guān)心的盤(pán)的背側(cè)區(qū)域提供局部麻醉劑(如5ml利多卡因)以減小皮下疼痛。
接著，臨床醫(yī)生用其中具有管心針的相對(duì)較大(例如，18-19號(hào))針頭穿刺所關(guān)心的盤(pán)背側(cè)的患者皮膚，推動(dòng)針頭通過(guò)皮下脂肪和背部骶腰韌帶和肌肉到達(dá)椎間盤(pán)的外邊緣。
然后，從針頭取下管心針。
接著，臨床醫(yī)生接到注射器，其具有適于安裝在較大號(hào)針頭內(nèi)的較小號(hào)針頭。該針頭通常為22或24號(hào)針頭。注射器的柱體含有本發(fā)明的制劑。
制劑含有REMICADE英夫單抗，并且具有約30mg/ml到約60mg/ml的英夫單抗?jié)舛取?br> 然后，臨床醫(yī)生將較小針頭同軸地通過(guò)通過(guò)較大針頭并經(jīng)過(guò)較大針頭的遠(yuǎn)端，從而，穿刺纖維環(huán)。然后較小針頭進(jìn)一步推入髓核的中心。最后，臨床醫(yī)生壓下注射器活塞，從而，向髓核中注射約0.1到1ml制劑。
實(shí)施例IV該非限制性預(yù)言性實(shí)施例基本上與實(shí)施例III相似，只是制劑包含緩釋裝置，其含有共聚物聚-DL-丙交酯-共聚-乙交酯(PLG)。制劑含有作為拮抗劑的英夫單抗，并且具有約30mg/ml到約60mg/ml英夫單抗?jié)舛取?br> 盡管已經(jīng)參考本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案具體顯示和描述了本發(fā)明，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解可以在形式和細(xì)節(jié)中進(jìn)行多種改變而不背離所述權(quán)利要求書(shū)包括的本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例V該非限制性預(yù)言性實(shí)施例描述怎樣向正在退化的盤(pán)的髓核中透盤(pán)施用含有環(huán)素化合物的制劑。
首先，臨床醫(yī)生使用診斷試驗(yàn)證實(shí)患者中特定盤(pán)具有高水平特定促炎細(xì)胞因子和/或MMPs。
然后，臨床醫(yī)生向所關(guān)心的盤(pán)的背側(cè)區(qū)域提供局部麻醉劑(如5ml利多卡因)以減小皮下疼痛。
接著，臨床醫(yī)生用其中具有管心針的相對(duì)較大(例如，18-19號(hào))針頭穿刺所關(guān)心的盤(pán)背側(cè)的患者皮膚，針頭通過(guò)皮下脂肪和背部骶腰韌帶和肌肉到達(dá)椎間盤(pán)的外邊緣。
然后，從針頭取下管心針。
在一個(gè)實(shí)施方案中，髓核的部分在施用環(huán)素化合物之前取出。
接著，臨床醫(yī)生接到注射器，其具有適于安裝在較大號(hào)針頭內(nèi)的較小號(hào)針頭。該針頭通常為22或24號(hào)針頭。注射器的柱體含有本發(fā)明的制劑。
制劑含有約50mg/ml多西環(huán)素。
然后，臨床醫(yī)生將較小針頭同軸地推動(dòng)通過(guò)較大針頭并經(jīng)過(guò)較大針頭的遠(yuǎn)端，從而，穿刺纖維環(huán)。然后較小針頭進(jìn)一步進(jìn)入髓核的中心。最后，臨床醫(yī)生壓下注射器活塞，從而，向髓核注射約0.1到約1ml制劑。
實(shí)施例VI該非限制性預(yù)言性實(shí)施例基本上與實(shí)施例I相似，只是制劑包含緩釋裝置，其含有共聚物聚-DL-丙交酯-共聚-乙交酯(PLG)。制劑含有多西環(huán)素化合物。
盡管已經(jīng)參考本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案具體顯示和描述了本發(fā)明，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解可以在形式和細(xì)節(jié)中進(jìn)行多種改變而不背離所述權(quán)利要求書(shū)包括的本發(fā)明的范圍。
權(quán)利要求
1.治療具有髓核的椎間盤(pán)中退化性盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用有效量制劑，其中該制劑含有拮抗劑，所述拮抗劑選自a)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，b)高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶(HAAMMP)，c)p38激酶抑制劑，和d)環(huán)素化合物。
2.權(quán)利要求1的方法，其中p38激酶抑制劑選自k)二芳基咪唑；l)N，N’-二芳基脲；m)N，N-二芳基脲；n)二苯甲酮；o)吡唑酮；p)吲哚酰胺；q)二酰胺；r)喹唑啉；s)嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮；和t)吡啶基氨基-喹唑啉。
3.權(quán)利要求1的方法，其中p38激酶抑制劑是1-芳基-2-吡啶基雜環(huán)。
4.權(quán)利要求1的方法，其中p38激酶抑制劑具有至少三個(gè)環(huán)基團(tuán)。
5.權(quán)利要求1的方法，其中拮抗劑是水不溶性的或者基本上水不溶性的。
6.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是TIMP。
7.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是抗-聚集蛋白聚糖酶。
8.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是選自膠原酶MMP、溶基質(zhì)素MMP、和明膠酶MMP的MMP的特異拮抗劑。
9.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是選自MMP-2、MMP-3和MMP-8的MMP的特異拮抗劑。
10.權(quán)利要求1的方法，其中環(huán)素化合物選自多西環(huán)素、賴(lài)甲環(huán)素、氧環(huán)素化合物、四環(huán)素、米諾環(huán)素、化學(xué)修飾的四環(huán)素和KB-R7785。
11.權(quán)利要求1的方法，其中制劑主要通過(guò)其通過(guò)持續(xù)遞送裝置的擴(kuò)散或者持續(xù)遞送裝置的生物降解從持續(xù)遞送裝置釋放。
12.權(quán)利要求1的方法，其中制劑還含有至少一種額外的治療劑。
13.權(quán)利要求1的方法，其中制劑以有效減輕疼痛的量施用。
14.權(quán)利要求1的方法，其中制劑以有效抑制髓核的細(xì)胞外基質(zhì)降解的量施用。
15.權(quán)利要求1的方法，其中拮抗劑以產(chǎn)生約5μg/kg到約50μg/kg的局部組織濃度的劑量施用。
16.權(quán)利要求1的方法，其中制劑以小于約1cc的量施用。
17.權(quán)利要求1的方法，其中拮抗劑以至少約100mg/ml的量存在于制劑中。
18.權(quán)利要求1的方法，其中制劑還含有緩釋裝置或者糖胺聚糖。
19.權(quán)利要求1的方法，其中在緊鄰纖維環(huán)的外壁處提供制劑。
20.權(quán)利要求1的方法，其中制劑中存在的拮抗劑的量不超過(guò)約0.5mg。
21.權(quán)利要求1的方法，其中制劑還含有以有效修復(fù)盤(pán)組織的量存在的生長(zhǎng)因子。
22.權(quán)利要求1的方法，其中通過(guò)藥物泵施用制劑。
23.權(quán)利要求1的方法，其中將制劑注射到髓核中。
24.權(quán)利要求1的方法，其中將制劑注射到纖維環(huán)中。
25.權(quán)利要求1的方法，其中在透盤(pán)施用制劑前取出一部分髓核。
26.權(quán)利要求1的方法，其中通過(guò)針頭施用制劑。
27.權(quán)利要求1的方法，其中以約0.03ml到約0.3ml的體積施用制劑。
28.權(quán)利要求1的方法，其中施用包括a)提供附著到纖維環(huán)中的外壁的貼劑中的制劑；b)提供與纖維環(huán)的外壁緊密相鄰的位置處貯庫(kù)中的制劑；c)提供與相鄰椎體的終板緊密相鄰位置處的貯庫(kù)中的制劑。
29.權(quán)利要求1的方法，其中正在退化的盤(pán)是完整的盤(pán)。
30.權(quán)利要求1的方法，其中正在退化的盤(pán)是破裂的盤(pán)。
31.權(quán)利要求1的方法，其中正在退化的盤(pán)是脫層的。
32.權(quán)利要求1的方法，其中正在退化的盤(pán)具有裂縫。
33.治療正在退化的盤(pán)疾病的制劑，其含有拮抗劑，其中拮抗劑選自a)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，b)高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶HAAMMP，c)p38激酶的抑制劑，d)環(huán)素化合物；和e)額外的治療劑，其選自i).生長(zhǎng)因子，ii).質(zhì)粒DNA，iii).促炎白介素的高特異性拮抗劑，iv).TNF-α的高特異性拮抗劑，v).PLA2的高特異性拮抗劑，vi).高特異性抗增殖劑，和vii).高度特異的程序性細(xì)胞死亡抑制劑。
34.治療性治療正在退化的盤(pán)的方法，其包括步驟a)確定盤(pán)內(nèi)促炎蛋白質(zhì)的水平，b)將所述水平與促炎蛋白質(zhì)的預(yù)定水平比較，和c)向盤(pán)內(nèi)注射拮抗劑，其中拮抗劑選自i)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，ii)高親和性抗基質(zhì)金屬蛋白酶HAAMMP，iii)p38激酶抑制劑，iv)環(huán)素化合物。
35.權(quán)利要求34的方法，其中促炎蛋白質(zhì)是白介素-6或者白介素-8。
36.權(quán)利要求34的方法，其中TNF-α的預(yù)定水平為至少20pg/ml，至少30pg/ml，或至少1000pg/盤(pán)。
37.預(yù)防人類(lèi)個(gè)體中椎間盤(pán)退化的方法，其包括a)確定個(gè)體的遺傳圖；b)比較該個(gè)體的遺傳圖與處于危險(xiǎn)中的人的預(yù)定的遺傳圖水平；c)確定該個(gè)體是處于危險(xiǎn)的患者；和d)向該個(gè)體的盤(pán)注射拮抗劑，其中拮抗劑選自i)高特異性細(xì)胞因子拮抗劑，ii)MMPs的高親和性拮抗劑，iii)P38激酶拮抗劑，iv)環(huán)素化合物。
38.治療具有髓核的椎間盤(pán)中正在退化的盤(pán)疾病的方法，其包括向椎間盤(pán)中透盤(pán)施用有效量的制劑，該制劑含有COX-2酶的拮抗劑、NO合酶的拮抗劑、高特異性抗氧化劑、高特異性抗增殖劑、或高特異性抗程序性細(xì)胞死亡劑。
39.權(quán)利要求1的方法，其中高特異性細(xì)胞因子拮抗劑抑制TNF-α。
40.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP以有效抑制髓核中存在的MMP和幫助阻止細(xì)胞外基質(zhì)降解的量施用。
41.權(quán)利要求6的方法，其中TIMP是重組TIMP。
42.權(quán)利要求6的方法，其中TIMP以自體濃縮形式存在。
43.權(quán)利要求7的方法，其中抗聚集蛋白聚糖酶以自體濃縮形式存在。
44.權(quán)利要求7的方法，其中抗聚集蛋白聚糖酶是重組抗聚集蛋白聚糖酶。
45.權(quán)利要求1的方法，其中制劑中HAAMMP的濃度為至少100mg/m。
46.權(quán)利要求1的方法，其中制劑還包括緩釋裝置。
47.權(quán)利要求46的方法，其中緩釋裝置包含水凝膠。
48.權(quán)利要求46的方法，其中緩釋裝置提供了控釋。
49.權(quán)利要求46的方法，其中緩釋裝置提供了連續(xù)釋放。
50.權(quán)利要求46的方法，其中緩釋裝置提供了間歇性釋放。
51.權(quán)利要求46的方法，其中緩釋裝置包含生物傳感器。
52.權(quán)利要求46的方法，其中緩釋裝置包含微球體。
53.權(quán)利要求46的方法，其中HAAMMP主要通過(guò)其通過(guò)持續(xù)遞送裝置的擴(kuò)散或者持續(xù)遞送裝置的生物降解從持續(xù)遞送裝置釋放。
54.權(quán)利要求46的方法，其中緩釋裝置包含炎癥應(yīng)答性遞送系統(tǒng)。
55.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP以約0.5mg的最大量存在于制劑中。
56.權(quán)利要求1的方法，其中制劑還含有以有效修復(fù)盤(pán)組織的量存在的生長(zhǎng)因子。
57.權(quán)利要求56的方法，其中生長(zhǎng)因子是TGF-β。
58.權(quán)利要求56的方法，其中通過(guò)血小板濃縮物提供生長(zhǎng)因子。
59.權(quán)利要求1的方法，其中制劑中環(huán)素化合物的濃度為小于約100mg/ml。
60.權(quán)利要求1的方法，其中將制劑注射到髓核中。
61.權(quán)利要求1的方法，其中將制劑注射到纖維環(huán)中。
62.權(quán)利要求26的方法，其中針頭具有24號(hào)的最大號(hào)。
63.權(quán)利要求1的方法，其中施用包括提供附著到纖維環(huán)外壁的貼劑中的制劑。
64.權(quán)利要求1的方法，其中施用包括提供緊鄰纖維環(huán)外壁的貯庫(kù)中的制劑。
65.權(quán)利要求1的方法，其中施用包括提供與相鄰椎體的終板緊密相鄰位置處的貯庫(kù)中的制劑。
66.權(quán)利要求1的方法，其中正在退化的盤(pán)是完整的盤(pán)。
67.權(quán)利要求1的方法，其中正在退化的盤(pán)是破裂的盤(pán)。
68.權(quán)利要求1的方法，其中正在退化的盤(pán)是脫層的。
69.權(quán)利要求1的方法，其中正在退化的盤(pán)具有裂縫。
70.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP主要通過(guò)其通過(guò)持續(xù)遞送裝置擴(kuò)散從持續(xù)遞送裝置釋放。
71.權(quán)利要求70的方法，其中持續(xù)遞送裝置是聚合物。
72.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP主要通過(guò)持續(xù)遞送裝置的生物降解從持續(xù)遞送裝置釋放。
73.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是膠原酶MMP的特異拮抗劑。
74.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是溶基質(zhì)素MMP的特異拮抗劑。
75.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是明膠酶MMP的特異拮抗劑。
76.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是膜MMP的特異拮抗劑。
77.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是MMP-2的特異拮抗劑。
78.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是MMP-3的特異拮抗劑。
79.權(quán)利要求1的方法，其中HAAMMP是MMP-8的特異拮抗劑。
80.權(quán)利要求1的方法，其中環(huán)素化合物的濃度為至少約20mg/ml。
81.權(quán)利要求33的制劑，其中額外的治療劑是生長(zhǎng)因子。
82.權(quán)利要求1的方法，其中環(huán)素化合物以有效抑制髓核中存在的TNF-α并因此阻止細(xì)胞外基質(zhì)降解的量施用。
83.權(quán)利要求1的方法，其中施用包括提供附著到纖維環(huán)外壁的貼劑中的制劑。
84.權(quán)利要求33的制劑，其中HAAMMP選自TIMP-1和TIMP-2。
85.權(quán)利要求33的制劑，其中HAAMMP是抗-聚集蛋白聚糖酶。
86.權(quán)利要求1的方法，其中p38激酶抑制劑是基本上不溶于水的。
87.權(quán)利要求1的方法，其中p38激酶以產(chǎn)生約5μg/kg到約50μg/kg的局部組織濃度的劑量施用。
88.權(quán)利要求1的方法，其中p38激酶抑制劑是水溶性的。
89.權(quán)利要求3的方法，其中1-芳基-2-吡啶基雜環(huán)選自f)4，5取代的咪唑，g)1，4，5取代的咪唑；h)2，4，5取代的咪唑；i)1，2，4，5取代的咪唑；和j)非咪唑5-元環(huán)雜環(huán)。
90.權(quán)利要求1的方法，其中p38激酶抑制劑具有至少3個(gè)環(huán)狀基團(tuán)。
91.權(quán)利要求1的方法，其中p38激酶抑制劑以至少約100mg/ml的量存在于制劑中。
92.權(quán)利要求1的方法，其中p38激酶抑制劑以不超過(guò)約0.5mg的量存在于制劑中。
93.權(quán)利要求1的方法，其中制劑還含有糖胺聚糖。
94.權(quán)利要求33的制劑，其中額外的治療劑是質(zhì)粒DNA。
95.權(quán)利要求34的方法，其中促炎蛋白質(zhì)是白介素。
96.權(quán)利要求35的方法，其中白介素的預(yù)定水平為至少100pg/ml。
97.權(quán)利要求35的方法，其中白介素-6的預(yù)定水平為至少100pg/ml。
98.權(quán)利要求35的方法，其中白介素-6的預(yù)定水平為至少250pg/ml。
99.權(quán)利要求35的方法，其中白介素-8的預(yù)定水平為至少500pg/ml。
100.權(quán)利要求34的方法，其中促炎蛋白質(zhì)是PGE2。
101.權(quán)利要求100的方法，其中PGE2的預(yù)定水平為至少1000pg/ml。
102.權(quán)利要求34的方法，其中促炎蛋白質(zhì)是TNF-α。
103.權(quán)利要求102的方法，其中TNF-α的預(yù)定水平為至少20pg/ml。
104.權(quán)利要求102的方法，其中TNF-α的預(yù)定水平為至少30pg/ml。
105.權(quán)利要求35的方法，其中TNF-α的預(yù)定水平為至少1000pg/盤(pán)。
106.權(quán)利要求38的方法，其中NO合酶的高特異性拮抗劑選自N-亞氨基乙基-L-賴(lài)氨酸(L-NIL)和NG-單甲基-L-精氨酸。
107.權(quán)利要求38的方法，其中高特異性抗增殖劑是雷帕霉素。
108.權(quán)利要求107的方法，其中以約0.1到約10μM劑量提供雷帕霉素。
109.權(quán)利要求107的方法，其中高特異性抗增殖劑是cdk抑制劑。
110.權(quán)利要求109的方法，其中以約0.1到約10μM劑量提供cdk抑制劑。
111.權(quán)利要求38的方法，其中抗程序性細(xì)胞死亡劑選自EPO、紅細(xì)胞生成素模擬肽、EPO模擬抗體融合蛋白質(zhì)、IGF-I、IGF-II、和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制劑。
112.權(quán)利要求1的方法，其中制劑還含有緩沖劑。
113.權(quán)利要求1的方法，其中環(huán)素化合物以有效抑制髓核中存在的MMP和從而阻止細(xì)胞外基質(zhì)降解的量施用。
114.權(quán)利要求1的方法，其中環(huán)素化合物以有效抑制髓核中存在的TNF-α從而減輕疼痛的量施用。
115.權(quán)利要求33的方法，其中額外的治療劑含有促炎白介素的高特異性拮抗劑。
116.權(quán)利要求115的方法，其中白介素是IL-1β，白介素是IL-2，白介素是IL-6，白介素是IL-8，白介素是IL-12，白介素是IL-19。
117.權(quán)利要求33的方法，其中額外的治療劑是TNF-α的高特異性拮抗劑。
118.權(quán)利要求117的方法，其中TNF-α的高特異性拮抗劑是可溶TNF-α的抑制劑。
119.權(quán)利要求117的方法，其中TNF-α的高特異性拮抗劑是TNF-α合成的抑制劑。
120.權(quán)利要求117的方法，其中TNF-α的高特異性拮抗劑是TNF-α的天然受體的抑制劑。
121.權(quán)利要求117的方法，其中TNF-α的高特異性拮抗劑是p38激酶抑制劑。
122.權(quán)利要求117的方法，其中TNF-α的高特異性拮抗劑是基本上不溶于水的p38激酶抑制劑。
123.權(quán)利要求33的方法，其中額外的治療劑是NO合酶的高特異性拮抗劑。
124.權(quán)利要求123的方法，其中高特異性拮抗劑是L-NIL。
125.權(quán)利要求123的方法，其中高特異性拮抗劑是NG-單甲基-L-精氨酸。
126.權(quán)利要求33的方法，其中額外的治療劑是PLA2的高特異性拮抗劑。
127.權(quán)利要求33的方法，其中額外的治療劑是高特異性抗增殖劑。
128.權(quán)利要求127的方法，其中高特異性抗增殖劑包含雷帕霉素。
129.權(quán)利要求127的方法，其中高特異性抗增殖劑包含cdk-抑制劑。
130.權(quán)利要求127的方法，其中高特異性抗增殖劑包含達(dá)汀。
131.權(quán)利要求127的方法，其中高特異性抗增殖劑包含抗氧化劑。
132.權(quán)利要求131的方法，其中抗氧化劑包含超氧化物歧化酶。
133.權(quán)利要求33的方法，其中額外的治療劑是選自EPO模擬肽和EPO模擬體的高特異性程序性細(xì)胞死亡抑制劑。
134.權(quán)利要求33的方法，其中額外的治療劑是選自IGF-I和IGF-II的高度特異的程序性細(xì)胞死亡抑制劑。
135.權(quán)利要求1的方法，其中拮抗劑是單克隆抗體。
136.權(quán)利要求1的方法，其中單克隆抗體是英夫單抗。
137.權(quán)利要求1的方法，其中拮抗劑是etanercept。
138.權(quán)利要求1的方法，其中拮抗劑結(jié)合膜結(jié)合的細(xì)胞因子。
139.權(quán)利要求1的方法，其中結(jié)合劑結(jié)合可溶細(xì)胞因子。
140.權(quán)利要求46的方法，其中緩釋裝置包含大球體。
全文摘要
本文描述了通過(guò)向患病椎間盤(pán)注射拮抗劑治療退化性盤(pán)疾病的方法，所述拮抗劑為諸如高特異性細(xì)胞因子拮抗劑、MMP的高親和性拮抗劑、高度特異的p38激酶抑制劑，和環(huán)素化合物。
文檔編號(hào)A61K38/55GK1822824SQ200480020259
公開(kāi)日2006年8月23日 申請(qǐng)日期2004年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月13日
發(fā)明者H·塞爾漢, T·M·迪莫羅, M·阿塔維亞, M·格雷西, S·卡迪亞拉, D·烏爾巴恩斯, S·布魯?shù)聽(tīng)? G·科林斯, L·J·布朗, J·吉辛, P·L·普羅哈, C·史密斯, J·西基爾卡 申請(qǐng)人:德普伊斯派爾公司