專利名稱：1－[烷基],1－[(雜芳基)烷基]及1－[(芳基)烷基]－7－(嘧啶－4－基)－咪唑并[1,2 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一些化合物，它們可用作預(yù)防和/或治療由GSK3β的異?；钚砸鸬纳窠?jīng)退化性疾病的藥物的活性成分。
背景技術(shù)：
GSK3β(糖原合成酶激酶3β)是一種脯氨酸指導(dǎo)的絲氨酸、蘇氨酸激酶，在控制新陳代謝、分化和生存中起重要作用。它最初被認(rèn)定為一種能夠使糖原合成酶磷酸化，因而能抑制糖原合成酶的酶。后來認(rèn)為GSK3β與tau蛋白激酶1(TPK1)一樣，是一種在阿耳茨海默氏病和數(shù)種taupathies中也被發(fā)現(xiàn)過度磷酸化的表位上使tau蛋白磷酸化的酶。有趣的是，GSK3β的蛋白激酶B(AKT)磷酸化導(dǎo)致其激酶活性喪失，據(jù)此可推測這種抑制可介導(dǎo)某些神經(jīng)營養(yǎng)因子效應(yīng)。此外，由β連環(huán)蛋白(β連環(huán)蛋白是一種參與細(xì)胞存活的蛋白質(zhì))的GSK3β引起的磷酸化通過遍在依賴性蛋白酶體通道可導(dǎo)致其降解。
所以，抑制GSK3β活性似乎可以產(chǎn)生神經(jīng)營養(yǎng)活性。事實(shí)上，有證據(jù)顯示，通過誘導(dǎo)諸如Bcl-2等存活因子和抑制諸如P53和Bax等細(xì)胞凋亡前因子的表達(dá)，鋰(GSK3β的非競爭性抑制劑)能增強(qiáng)一些模型中的軸突生成(neuritogenesis)，并且也提高神經(jīng)元存活能力。
最新研究表明，β淀粉狀蛋白增加GSK3β的活性和tau蛋白磷酸化。另外，用氯化鋰和GSK3β反義mRNA可阻斷這種過度磷酸化以及β淀粉狀蛋白的神經(jīng)毒性效應(yīng)。這些研究結(jié)果強(qiáng)烈提示，GSK3β可能是阿耳茨海默氏病中兩種主要致病過程異常APP(淀粉樣前體蛋白)加工和tau蛋白過度磷酸化之間的連接物。
雖然tau過度磷酸化導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞骨架不穩(wěn)，但GSK3β的異?；钚缘闹虏〗Y(jié)果最可能并不是由tau蛋白致病磷酸化引起，如上所述，因?yàn)檫@種激酶的過度活動(dòng)可能通過凋亡因子與抗凋亡因子表達(dá)的調(diào)節(jié)影響存活能力。此外，還顯示，β淀粉狀蛋白誘導(dǎo)GSK3β活性增加可發(fā)生磷酸化，因而抑制丙酮酸脫氫酶，它是一種在能量產(chǎn)生和乙酰膽堿合成中起關(guān)鍵作用的酶。
綜合而言，這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，GSK3β抑制劑可應(yīng)用于治療神經(jīng)病理性疾病、阿耳茨海默氏病相關(guān)的認(rèn)知力和注意力缺陷以及其他急性和慢性神經(jīng)退化性疾病。以非限制方式來說，它們包括帕金森氏病、tauopathies(例如額顳癡呆癥、皮層基底節(jié)變性、皮克病、進(jìn)行性核上性麻痹)和包括血管性癡呆癥在內(nèi)的其他癡呆癥；急性中風(fēng)及其他創(chuàng)傷性損傷；腦血管意外(例如老年性黃斑變性)；腦和脊髓損傷；外周神經(jīng)病變；視網(wǎng)膜病和青光眼。
另外，GSK3β還可應(yīng)用于治療其他疾病，例如非胰島素依賴型糖尿病(如II型糖尿病)和肥胖癥；燥狂抑郁癥；精神分裂癥；禿頭癥；癌癥如乳癌、非小細(xì)胞肺癌、甲狀腺癌、T或B-細(xì)胞白血病及某些病毒誘導(dǎo)的腫瘤。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一些用作藥物活性成分的化合物，所述藥物用于預(yù)防和/或治療由GSK3β的異?；钚砸鸬募膊?，特別是神經(jīng)退化性疾病。更具體地說，本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一些用作能預(yù)防和/或治療神經(jīng)退化性疾病如阿耳茨海默氏病的藥物的活性成分的新化合物。
所以，本發(fā)明的發(fā)明人鑒定了對GSK3β具有抑制活性的化合物。結(jié)果是他們發(fā)現(xiàn)以下式(I)表示的化合物具有所希望的活性，可用作預(yù)防和/或治療上述疾病的藥物的活性成分。
所以，本發(fā)明提供以通式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物或其鹽、其溶劑化物或其水合物， 式中，X表示鍵、亞乙烯基、亞乙炔基、由1或2個(gè)選自C1-6烷基、羥基和C1-4烷氧基的基團(tuán)任意取代的亞甲基；羰基、氧原子、硫原子、磺酰基、亞砜基或由C1-6烷基任意取代的氮原子；R1表示由C1-4烷基、C1-4烷氧基或鹵素原子任意取代的2、4或5-嘧啶環(huán)；
R2表示C1-6烷基、C1-2全鹵化烷基、C1-3鹵化烷基、芐基、苯環(huán)、萘環(huán)5，6，7，8-四氫化萘環(huán)、吡啶環(huán)、吲哚環(huán)、吡咯環(huán)、噻吩環(huán)、呋喃環(huán)或咪唑環(huán)、芐基以及由1至4個(gè)取代基任意取代的環(huán)，所述取代基選自C1-6烷基、苯環(huán)、鹵素原子、C1-2全鹵化烷基、C1-3鹵化烷基、羥基、、C1-4烷氧基、硝基、氰基、氨基、C1-6單烷基氨基或C2-10二烷基氨基；n表示0至3。
本發(fā)明另一方面內(nèi)容在于提供一種含有作為活性成分的物質(zhì)的藥物，作為活性成分的所述物質(zhì)選自以通式(I)表示的嘧啶酮衍生物及其生理學(xué)上可接受的鹽、其溶劑化物和水合物。本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例藥物提供用來預(yù)防和/或治療由GSK3β的異?；钚砸鸬募膊〉纳鲜鏊幬?，以及用來預(yù)防和/或治療神經(jīng)退化性疾病和其他以下列出的疾病的上述藥物非胰島素依賴型糖尿病(如II型糖尿病)和肥胖癥；燥狂抑郁癥；精神分裂癥；禿頭癥；癌癥如乳癌、非小細(xì)胞肺癌、甲狀腺癌、T或B-細(xì)胞白血病及某些病毒誘導(dǎo)的腫瘤。
本發(fā)明另一些優(yōu)選實(shí)施例提供用來治療神經(jīng)退化性疾病及阿耳茨海默氏病、帕金森氏病、tauopathies(例如額顳癡呆癥、皮層基底節(jié)變性、皮克病、進(jìn)行性核上性麻痹)和包括血管性癡呆癥在內(nèi)的其他癡呆癥；急性腦中風(fēng)及其他創(chuàng)傷性損傷；腦血管意外(例如老年性黃斑變性)；腦和脊髓損傷；外周神經(jīng)病變；視網(wǎng)膜病和青光眼的上述藥物，以及以含有作為活性成分的上述物質(zhì)與一或多種藥物添加劑的藥物組合物形式存在的藥物。
本發(fā)明還提供一種抑制GSK3β活性的抑制劑，所述抑制劑包含作為活性成分的物質(zhì)，其選自以通式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物及其鹽、其溶劑化物和水合物。
本發(fā)明另一方面內(nèi)容提供一種由GSK3β的異常活性引起的神經(jīng)退化性疾病的預(yù)防和/或治療方法，所述方法包括把預(yù)防或治療有效量的物質(zhì)給予患者的步驟，所述物質(zhì)選自以通式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物及其生理學(xué)上可接受的鹽、其溶劑化物和水合物；本發(fā)明還提供選自以通式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物及其生理學(xué)上可接受的鹽、其溶劑化物和水合物的物質(zhì)在制備上述藥物中的應(yīng)用。
本文所用的C1-6烷基表示帶有1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、新戊基、1，1-二甲基丙基、正己基、異已基等；
C1-4烷氧基表示帶有1至4個(gè)碳原子的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等；鹵素原子表示氟、氯、溴或碘原子；C1-2全鹵化烷基表示全部氫原子均由鹵素原子取代的烷基，例如CF3或C2F5；C1-3鹵化烷基表示至少有1個(gè)氫原子未由鹵素原子取代的烷基；C1-6單烷基氨基表示由1個(gè)C1-6烷基取代的氨基，例如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、異丙基氨基、丁基氨基、異丁基氨基、叔丁基氨基、戊基氨基和異戊基氨基；C2-10二烷基氨基表示由2個(gè)C1-5烷基取代的氨基，例如二甲基氨基、乙甲基氨基、二乙基氨基、甲丙基氨基和二異丙基氨基；亞甲基表示以通式-CH2-表示的二價(jià)基團(tuán)；亞乙烯基表示以下式表示的二價(jià)基團(tuán) 或 亞乙炔基表示以下式表示的二價(jià)基團(tuán) 離去基團(tuán)表示可輕易裂解或取代的基團(tuán)，這樣一個(gè)基團(tuán)例如是甲苯磺?；⒓谆酋；?、溴化物等。
以上式(I)表示的化合物可形成鹽。當(dāng)存在酸性基團(tuán)時(shí)，所述鹽的例子包括堿金屬鹽和堿土金屬鹽如鋰、鈉、鉀、鎂和鈣鹽；氨鹽和胺鹽，如甲胺、二甲胺、三甲胺、二環(huán)己胺、三(羥甲基)氨基甲烷、N，N-二(羥乙基)哌嗪、2-氨基-2-甲基-1-丙醇、乙醇胺、N-甲基葡糖胺和L-葡糖胺等鹽；或者諸如賴氨酸、δ-羥基賴氨酸和精氨酸等堿性氨基酸鹽。酸性化合物的堿加成鹽用本技術(shù)領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)方法制備。
當(dāng)存在堿性基團(tuán)時(shí)，所述鹽的例子包括諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機(jī)酸鹽；諸如甲烷磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、乙酸、丙酸、酒石酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸、扁桃酸、苯乙烯酸、乳酸、乙醇酸、葡糖醛酸、抗壞血酸、煙酸和水楊酸等有機(jī)酸鹽；或者諸如天冬氨酸和谷氨酸等酸性氨基酸鹽。
堿性化合物的酸加成鹽用本技術(shù)領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)方法制備，包括但不限于，將游離堿溶于含有合適酸的醇水溶液中，通過蒸發(fā)溶液或使游離堿與酸在有機(jī)溶劑中反應(yīng)分離出鹽，在此情況下，鹽直接地或通過與第二種有機(jī)溶劑沉淀被分離出來，或者可濃縮溶液而得到鹽?？捎脕碇苽渌峒映甥}的酸優(yōu)選包括那些當(dāng)與游離堿結(jié)合時(shí)能產(chǎn)生藥學(xué)上可接受的鹽，即產(chǎn)生在藥物劑量的鹽中所含陰離子對動(dòng)物有機(jī)體相對無害的鹽的酸，這樣，游離堿的固有有益性質(zhì)不會(huì)受陰離子副作用損害。雖然堿性化合物在醫(yī)學(xué)上可接受的鹽是優(yōu)選的，但所有酸加成鹽都在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
除了以上式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物及其鹽之外，它們的溶劑化物和水合物也在本發(fā)明范圍之內(nèi)。以上式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物可帶有一或多個(gè)不對稱碳原子。至于這些不對稱碳原子的立體化學(xué)，它們可各自為(R)或(S)構(gòu)型，咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物可以立體異構(gòu)體存在，如光學(xué)異構(gòu)體，或非對映異構(gòu)體。任何純形式的立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體的任何混合物、外消旋物等都在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物的例子見下表1。然而，本發(fā)明的范圍不限于所列出的這些化合物。
以通式(I)表示的本發(fā)明優(yōu)選化合物還包括以下化合物(1)式中R1表示可由C1-2烷基、C1-2烷氧基或鹵素原子取代的4或5-嘧啶環(huán)，更好是4-嘧啶環(huán)的化合物；和/或(2)X表示鍵、任意取代的亞甲基或羰基。
以通式(I)表示的本發(fā)明更優(yōu)選化合物還包括以下化合物(1)式中R1表示未取代的4-嘧啶環(huán)的化合物；和/或(2)式中R2表示苯環(huán)、萘環(huán)、或5，6，7，8-四氫化萘環(huán)；更好是苯環(huán)或萘環(huán)；任意取代的環(huán)的化合物；和/或(3)式中X表示未取代的亞甲基或羰基的化合物。
以通式(I)表示的本發(fā)明特別優(yōu)選化合物包括以下化合物1 1-(3-苯基-丙基)-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮2 1-[3-(2-氟-苯基)-丙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮3 1-[2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮
4 1-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮5 1-[2-(4-甲基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮6 1-(2-萘-1-基-乙基)-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮7 1-[2-(3-氟-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮8 1-[2-(3-氯-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮9 1-[2-(2-甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮10 4-[2-(5-氧-7-(嘧啶-4-基)-5H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-1-基)-乙基]-苯甲腈11 1-(2-羥基-2-苯基-乙基)-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮12 1-(2-氧-2-苯基-乙基)-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮13 1-[2-(4-氟-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮14 1-[2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮15 1-[2-(2，5-二甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮。
本發(fā)明的再一個(gè)目的還涉及以上式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮化合物的制備方法。
這些化合物例如可用下述方法制備。
制備方法以上式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮化合物可按照方案1進(jìn)行制備。
方案1 (上述方案中，R1、R2、X和n的定義與對通式(I)化合物所限定的定義相同)。
以上式(III)表示的7-(嘧啶基)-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5(1H)-酮衍生物，式中R1如通式(1)的化合物所限定，在0-130℃的適當(dāng)溫度和大氣壓下可以在溶劑中與堿反應(yīng)，例如，溶劑可以是N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷、N，N-二甲基乙酰胺或氯仿，堿可以是氫化鈉、碳酸鈉或碳酸鉀，然后，再加入通式(II)化合物，式(II)中R2、X和n如通式(1)的化合物所限定，L表示離去基團(tuán)，優(yōu)選為溴化物或甲磺酰基，得到上式(1)化合物。
通式(II)化合物可在市場上購買或按本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法合成。式(III)化合物可按方案2的方法制備。
方案2 (上述方案中，R1的定義與上述定義相同)。
按照此方法，式中R表示烷基如甲基或乙基的通式(V)3-酮酯可以與以通式(IV)表示的2-氨基咪唑反應(yīng)。反應(yīng)可于25-140℃的適當(dāng)溫度和大氣壓下，在銨鹽如乙酸銨存在下，在甲醇、乙醇等醇溶劑中進(jìn)行，或者也可不采用溶劑。
通式(IV)的化合物可在市場上購買，通式(V)的化合物可以參照專利申請DE2705582描述的方法合成。
例如，使可由C1-4烷基、C1-4烷氧基或鹵素原子任意取代的嘧啶基-4-羧酸與丙二酸單酯反應(yīng)得到通式(V)化合物，式中R1表示可由C1-4烷基、C1-4烷氧基或鹵素原子任意取代的嘧啶環(huán)。反應(yīng)可用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法進(jìn)行，例如于20-70℃在1，1’-羰基二-1H-咪唑等偶聯(lián)劑存在下，在四氫呋喃等溶劑中進(jìn)行。
在上述反應(yīng)中，有時(shí)需要對官能團(tuán)進(jìn)行保護(hù)或去保護(hù)。合適的保護(hù)基團(tuán)Pg是根據(jù)該官能團(tuán)的類型來選擇，可應(yīng)用文獻(xiàn)中記載的方法。例如，“有機(jī)合成的保護(hù)基”(Greene等人，第二版，John Wiley & Sons，Inc.，New York)給出了保護(hù)基團(tuán)、保護(hù)及去保護(hù)方法的例子。
本發(fā)明的化合物對GSK3β具有抑制活性。因此，本發(fā)明的化合物可用作制備一種藥物的活性成分，所述藥物能夠預(yù)防和/或治療由GSK3β的異?；钚砸鸬募膊?，特別是神經(jīng)退化性疾病，如阿耳茨海默氏病。此外，本發(fā)明的化合物還可用作制備另一種藥物的活性成分，所述藥物能夠預(yù)防和/或治療神經(jīng)退化性疾病，例如帕金森氏病、tauopathies(例如額顳癡呆癥、皮層基底節(jié)變性、皮克病、進(jìn)行性核上性麻痹)和包括血管性癡呆癥在內(nèi)的其他癡呆癥；急性腦中風(fēng)及其他創(chuàng)傷性損傷；腦血管意外(例如老年性黃斑變性)；腦和脊髓損傷；外周神經(jīng)病變；視網(wǎng)膜病和青光眼；以及其他疾病，例如非胰島素依賴型糖尿病(如II型糖尿病)和肥胖癥；燥狂抑郁癥；精神分裂癥；禿頭癥；癌癥如乳癌、非小細(xì)胞肺癌、甲狀腺癌、T或B-細(xì)胞白血病及某些病毒誘導(dǎo)的腫瘤。
本發(fā)明還涉及一種治療由GSK3β的異常活性引起的神經(jīng)退化性疾病及上述疾病的方法，所述方法包括把有效量的式(I)化合物給予有需要的哺乳動(dòng)物有機(jī)體。
可用作本發(fā)明藥物的活性成分的物質(zhì)選自以上式(I)表示的化合物及其藥理學(xué)上可接受的鹽、其溶劑化物和水合物。該物質(zhì)本身可作為本發(fā)明的藥物給予，然而，最好以藥物組合物形式給藥，所述藥物組合物含有作為活性成分的上述物質(zhì)與一或多種藥物添加劑。可把上述兩或多種物質(zhì)結(jié)合在一起用作本發(fā)明的藥物的活性成分。上述藥物組合物可加入另一種藥物的活性成分，以治療上面提到的疾病。藥物組合物的類型沒有具體限制，組合物可以是口服或腸胃外給予的任何制劑。例如，藥物組合物可制成口服型和腸胃外給予型，口服藥物組合物，如顆粒劑、細(xì)粒劑、粉末、硬膠囊、軟膠囊、糖漿、乳液、懸浮液、溶液等，或者腸胃外給予的藥物組合物，如靜脈、肌內(nèi)或皮下注射劑、點(diǎn)滴注射、經(jīng)皮制劑、跨粘膜制劑、滴鼻液、吸入劑、栓劑等。注射劑或點(diǎn)滴注射可按粉末制劑如凍干制劑的方法制備，使用前溶解在適當(dāng)水性介質(zhì)如生理鹽水中即可使用。緩釋制劑如那些帶有聚合物涂層的緩釋制劑可直接在腦內(nèi)給予。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可適當(dāng)選擇制備藥物組合物所用的藥物添加劑類型、藥物添加劑相對于活性成分的含量比以及藥物組合物的制備方法。無機(jī)或有機(jī)物質(zhì)、或者固體或液體物質(zhì)都可用作藥物添加劑。所含藥物添加劑的比例基于活性成分的重量一般為1％至90％(重量)。
制備固體藥物組合物所用的賦形劑包括例如乳糖、蔗糖、淀粉、滑石、纖維素、糊精、高嶺土、碳酸鈣等。制備口服液體組合物可使用常規(guī)惰性稀釋劑，如水或植物油。液體組合物除了含有惰性稀釋劑之外，還可含有輔助劑，如潤濕劑、懸浮助劑、甜味劑、芳香劑、著色劑和防腐劑。液體組合物可裝在由可吸收物質(zhì)如明膠制成的膠囊中。制備腸胃外給予的組合物例如注射劑、栓劑所用的溶劑或懸浮介質(zhì)包括水、丙二醇、聚乙二醇、苯甲醇、油酸乙酯、卵磷脂等。栓劑所用的基質(zhì)材料包括例如可可脂、乳化可可脂、月桂脂質(zhì)、witepsol。
本發(fā)明藥物給予的劑量和頻率沒有具體限制，取決于預(yù)防和/或治療目的、疾病類型、患者的體重和年齡、病情的嚴(yán)重程度等各種條件作出適當(dāng)選擇。一般來說，口服給予的成人日劑量可以是0.01至1,000毫克(活性成分重量)，劑量可每日一次或每日分多次，或者幾日一次給予。當(dāng)藥物用來注射時(shí)，最好以日劑量0.001至100毫克(活性成分重量)連續(xù)或間斷地給予成人。
具體實(shí)施例方式
化學(xué)實(shí)施例給合下列通用實(shí)施例對本發(fā)明作更具體的敘述，但本發(fā)明的范圍不限于這些實(shí)施例1(表1的2號化合物)1-[3-(2-氟-苯基)-丙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮鹽酸鹽(1∶1)1.1. 7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮使由2.9克(15mmol)3-氧-3-(嘧啶-4-基)-丙酸乙酯(參照專利DE 2705582所述的方法制備)、2克(15mmol)2-氨基咪唑半硫酸鹽和1.2克(15mmol)乙酸銨組成的混合物在140℃加熱18小時(shí)。冷卻后的混合物用30毫升乙腈處理，過濾，將沉淀物加入水中，回流溫度下加熱30分鐘。
將得到的溶液冷卻，過濾回收沉淀物。獲得的粗產(chǎn)物在乙醇中重組晶，得到1.75克淺灰色純產(chǎn)物。
熔點(diǎn)為345-346℃。
1.2. 1-[3-(2-氟-苯基)-丙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮鹽酸鹽(1∶1)0.433克(2.03mmol)7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮在4毫升無水N，N-二甲基甲酰胺中的懸浮液用365毫克(2.64mmol)碳酸鉀處理，所得的混合物在70℃加熱30分鐘。加入530毫克(2.44mmol)3-(2-氟-苯基)丙基溴，該反應(yīng)混合物在130℃加熱1小時(shí)。
冷卻后的溶液用水處理，以乙酸乙酯萃取。有機(jī)相干燥，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，其通過硅膠層析法純化，洗脫液為100/0至95/5之比的二氯甲烷/甲醇。得到0.248克以游離堿形式存在的純產(chǎn)物，將該產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽。
熔點(diǎn)為192-194℃。
實(shí)施例2(表1的3號化合物)1-[2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮2.1(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙酸甲酯向14.34克(32.47mmol)乙酸鉛(IV)在100毫升無水甲苯中的懸浮液加入5.2克(30.92mmol)1-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙酮和15.02毫升(123.13mmol)三氟化硼醚合物在9毫升甲醇中的混合物。該反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢瓒?6小時(shí)。向冷卻混合物加入水，所得溶液用甲苯萃取。萃取液以碳酸氫鈉飽和溶液、氯化鈉飽和溶液洗滌，并以硫酸鈉干燥。蒸干溶劑，得到6克油狀產(chǎn)物，其無需作進(jìn)一步純化即可用于下一步驟中。
2.2 2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙醇在0℃下向1.72克(45.41mmol)氫化鋰鋁在120毫升四氫呋喃中的懸浮液逐滴加入6克(30.27mmol)(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙酸甲酯在120毫升四氫呋喃中的的溶液，所得混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。
反應(yīng)混合物在0℃下用100毫升二乙醚稀釋，再以過量硫酸鈉飽和水溶液處理。另外再加入固體硫酸鈉，有機(jī)相經(jīng)過濾除去鹽。蒸干溶劑，得到5.1克(99％)油狀產(chǎn)物。
2.3甲烷磺酸2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙酯在0℃向5.1克(29.97mmol)2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙醇在30毫升無水二氯甲烷中的溶液加入6.26毫升(44.95mmol)三乙胺和3.5毫升(44.95mmol)甲烷磺酰氯。
所得的混合物在0℃攪拌1小時(shí)。該混合物再用水和二氯甲烷稀釋，以二氯甲烷萃取。有機(jī)層干燥，蒸發(fā)，得到7克(100％)甲烷磺酸2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙酯。
2.4 1-[2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮0.4克(1.88mmol)7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮在10毫升無水N，N-二甲基甲酰胺中的懸浮液用337毫克(2.44mmol)碳酸鉀處理，所得的混合物在70℃加熱30分鐘。加入605毫克(2.44mmol)甲烷磺酸2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙酯，反應(yīng)混合物在80℃加熱16小時(shí)。
冷卻后的溶液用水處理，乙酸乙酯萃取。有機(jī)相干燥，蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物通過硅膠層析法純化，洗脫液為100/0至95/5之比的二氯甲烷/甲醇。得到0.12克以游離堿形式存在的純產(chǎn)物。
熔點(diǎn)為196-198℃。
表1給出以上式(I)表示的本發(fā)明化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理數(shù)據(jù)。這些化合物按實(shí)施例的方法制備。
表中的R1是未取代的4-嘧啶環(huán)，Ph表示苯基，(S)表示碳原子的立體化學(xué)構(gòu)型，R2結(jié)構(gòu)中的“”表示與X連接的鍵。
表1
測試實(shí)施例本發(fā)明的藥物對GSK3β具有抑制活性可采用兩種不同方案。
第一種方案在室溫和GSK3β存在下使7.5μM磷酸化前的GS1肽和10μMATP(含300,000cpm33P-ATP)在25mM pH7.5 Tris-HCl、0.6mM DTT、6mM氯化鎂、0.6mM EGTA、0.05毫克/毫升BSA緩沖液中培育1小時(shí)(總反應(yīng)體積100微升)。
第二種方案在室溫和GSK3β存在下使4.1μM磷酸化前的GS1肽和42μMATP(含260,000cpm33P-ATP)在80mM pH6.5 Mes-NaOH、1mM乙酸鎂、0.5mMEGTA、5mM 2-胇基乙醇、0.02％Tween 20、10％甘油緩沖液中培育2小時(shí)。將抑制劑溶解在DMSO中(反應(yīng)培養(yǎng)液中溶劑的終濃度為1％)。
由25克多磷酸(85％ P2O5)、126毫升85％磷酸和水配成500毫升溶液(使用前稀釋至1∶100)，取100微升這種溶液終止反應(yīng)。將等分反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到WhatmanP81陽離子交換過濾器中，用上述溶液洗滌。通過液體閃爍光譜法測定所帶有的33P放射性。
磷酸化前的GS1肽具有以下序列NH2-YRRAAVPPSPSLSRHSSPHQS(P)EDEE-COOH。
本發(fā)明化合物對GSK3β的抑制活性以IC50表示，作為舉例說明，表1所列化合物的IC50在20納摩爾至1微摩爾濃度之間。
例如，表1的6號化合物的IC50是21nM。
配制實(shí)施例(1)片劑以一般方法混合下列成分，并用常規(guī)裝置進(jìn)行壓片。
實(shí)施例1的化合物30毫克結(jié)晶纖維素 60毫克玉米淀粉 100毫克乳糖 200毫克硬脂酸鎂 4毫克(2)軟膠囊以一般方法混合下列成分，并裝入軟膠囊中。
實(shí)施例1的化合物30毫克橄欖油 300毫克卵磷脂 20毫克(3)腸胃外制劑以一般方法混合下列成分，制成1毫升安瓿注射劑。
實(shí)施例1的化合物3毫克氯化鈉 4毫克注射蒸餾水 1毫升工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明的化合物對GSK3β具有抑制活性，可用作預(yù)防和/或治療由GSK3β的異?；钚砸鸬募膊?，特別是神經(jīng)退化性疾病的藥物的活性成分。
權(quán)利要求
1.以通式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物或其鹽、或其溶劑化物或其水合物 式中，X表示鍵、亞乙烯基、亞乙炔基、由1或2個(gè)選自C1-6烷基、羥基和C1-4烷氧基的基團(tuán)任意取代的亞甲基；羰基、氧原子、硫原子、磺?；?、亞砜基或由C1-6烷基任意取代的氮原子；R1表示由C1-4烷基、C1-4烷氧基或鹵素原子任意取代的2、4或5-嘧啶基；R2表示C1-6烷基、C1-2全鹵化烷基、C1-3鹵化烷基、芐基、苯環(huán)、萘環(huán)5，6，7，8-四氫化萘環(huán)、吡啶環(huán)、吲哚環(huán)、吡咯環(huán)、噻吩環(huán)、呋喃環(huán)或咪唑環(huán)、芐基以及由1至4個(gè)取代基任意取代的環(huán)，所述取代基選自C1-6烷基、苯環(huán)、鹵素原子、C1-2全鹵化烷基、C1-3鹵化烷基、羥基、、C1-4烷氧基、硝基、氰基、氨基、C1-6單烷基氨基或C2-10二烷基氨基；以及n表示0至3。
2.如權(quán)利要求1所述的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物或其鹽，或其溶劑化物或其水合物，其特征在于R1表示未取代的4-嘧啶環(huán)。
3.如權(quán)利要求1或2所述的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物或其鹽，或其溶劑化物或其水合物，其特征在于R2表示苯環(huán)、萘環(huán)、或5，6，7，8-四氫化萘環(huán)、任意取代的環(huán)。
4.一種咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物或其鹽，或其溶劑化物或其水合物，其特征在于所述衍生物選自以下組內(nèi)· 1-(3-苯基-丙基)-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-[3-(2-氟-苯基)-丙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-[2-(4-氟-2-甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-[2-(4-甲基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-(2-萘-1-基-乙基)-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-[2-(3-氟-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-[2-(3-氯-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-[2-(2-甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 4-[2-[5-氧-7-(嘧啶-4-基)-5H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-1-基]-乙基]-苯甲腈· 1-(2-羥基-2-苯基-乙基)-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-(2-氧-2-苯基-乙基)-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-[2-(4-氟-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；· 1-[2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮；或者· 1-[2-(2，5-二甲氧基-苯基)-乙基]-7-(嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5-酮。
5.以通式(III)表示的7-(嘧啶基)-咪唑并[1，2-a]嘧啶-5(1H)-酮衍生物， 式中，R1表示由C1-4烷基、C1-4烷氧基或鹵素原子任意取代的2、4或5-嘧啶基。
6.一種藥物，其特征在于所述藥物含有作為活性成分的物質(zhì)，所述物質(zhì)選自如權(quán)利要求1至4所述的以通式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物或其鹽、或其溶劑化物或其水合物。
7.一種GSK3β抑制劑，其特征在于所述抑制劑選自如權(quán)利要求1至4所述的以通式(I)表示的咪唑并[1，2-a]嘧啶酮衍生物或其鹽、其溶劑化物或其水合物。
8.如權(quán)利要求1至4所述的化合物在制備預(yù)防和/或治療由GSK3β的異?；钚砸鸬募膊〉乃幬镏械膽?yīng)用。
9.如權(quán)利要求1至4所述的化合物在制備預(yù)防和/或治療神經(jīng)退化性疾病的藥物中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求9所述的化合物應(yīng)用，其特征在于所述神經(jīng)退化性疾病選自由阿耳茨海默氏病、帕金森氏病、tauopathies、血管性癡呆癥；急性腦中風(fēng)、創(chuàng)傷性損傷；腦血管意外、腦髓損傷、脊髓損傷；外周神經(jīng)病變；視網(wǎng)膜病或青光眼組成的組。
11.如權(quán)利要求1至4所述的化合物在制備預(yù)防和/或治療非胰島素依賴型糖尿病、肥胖癥、燥狂抑郁癥、精神分裂癥、禿頭癥或癌癥的藥物中的應(yīng)用。
12.如權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其特征在于所述癌癥是乳癌、非小細(xì)胞肺癌、甲狀腺癌、T或B-細(xì)胞白血病及病毒誘導(dǎo)的腫瘤。
全文摘要
本發(fā)明涉及以通式(I)表示的咪唑并[1，2－a]嘧啶酮衍生物或其鹽，式中，X表示鍵、亞乙烯基、亞乙炔基、任意取代的亞甲基；羰基、氧原子、硫原子、磺?；?、亞砜基或任意取代的氮原子；R1表示任意取代的2、4或5－嘧啶基；R2表示C
文檔編號A61P3/10GK1646533SQ03807938
公開日2005年7月27日 申請日期2003年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2002年2月28日
發(fā)明者A·洛切德, M·沙迪, P·亞徹 申請人:沙諾費(fèi)－阿方蒂, 三菱制藥株式會(huì)社