專利名稱：含有一種延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的局部貼劑及其使用方法
相關(guān)申請的交叉參考根據(jù)35 U.S.C.§119(e)，本申請要求2001年3月12日申請的美國臨專利申請序列號60/275,213的申請日的優(yōu)先權(quán)；本文引用該專利的公開內(nèi)容作為參考。
引言發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明的領(lǐng)域?yàn)檠訒r(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑。
背景技術(shù)：
全世界人免疫缺陷病毒(HIV)患者的數(shù)量在近幾年快速增長，據(jù)說為大約3千萬(WHO；1998年末)。針對此背景，急需研制HIV疫苗。但是，由于感染后病毒構(gòu)型的突變，HIV的一個(gè)特征，仍未發(fā)現(xiàn)準(zhǔn)確的疫苗。此外，雖然已研制許多HIV治療藥物，但仍未完全治愈HIV。而且目前的AIDS藥物(蛋白酶抑制劑、非核苷逆轉(zhuǎn)錄抑制劑、非核苷逆轉(zhuǎn)錄抑制劑等)采用復(fù)雜的技術(shù)。長期施用這些試劑導(dǎo)致患者經(jīng)受持久的不良事件，如貧血、外周神經(jīng)炎、胰腺炎、反胃和頭痛。而且，長期給藥的可能性使藥物耐受性不可能被排除。然而目前的治療方案的另一個(gè)缺點(diǎn)是成本高，其原因是目前HIV的治療藥物非常昂貴，一般平均每人每年為$15,000至$20,000，從而有必要限制患者的獲取。
代表目前HIV治療方案的一種有效的選擇的一種類型的試劑是延時(shí)類型過敏(DTH)誘導(dǎo)劑，該類型的試劑已被研究作為一種通過增加體內(nèi)免疫系統(tǒng)細(xì)胞的活性而引起HIV患者的免疫反應(yīng)的免疫調(diào)節(jié)劑。延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑是這樣的物質(zhì)它們在與人皮膚發(fā)生接觸時(shí)引起IV型過敏反應(yīng)，且它們包括三硝基苯磺酸、苦基氯(PC)、2，4-二硝基氟苯(DNFB)和1-氯-2，4-二硝基苯(DNCB)。其中，DNCB已廣泛地用于治療HIV和免疫學(xué)研究，而本發(fā)明關(guān)注DNCB作為一種許多實(shí)施方案中的DTH誘導(dǎo)劑，如以下詳述。
DNCB是在第二次世界大戰(zhàn)之前在德國發(fā)現(xiàn)的。20世紀(jì)50年代在美國進(jìn)行的研究表明DNCB不具有致癌性。后來在20世紀(jì)70年代，在多種類型的動物上進(jìn)行安全性研究。DNCB一般已知是一種強(qiáng)大的人類延時(shí)過敏誘導(dǎo)皮膚刺激物，并除其他用途外，用于皮膚病的免疫學(xué)試驗(yàn)。
關(guān)于HIV患者的DNCB治療的研究緩慢地起步于20世紀(jì)80年代中葉，而關(guān)于HIV患者的DNCB治療的研究在20世紀(jì)的前半葉進(jìn)行，從那時(shí)起主張DNCB有效地治療HIV。但是，這種主張沒有被證明。在20世紀(jì)90年代后半葉，PCR分析技術(shù)的發(fā)展開始證明DNCB對HIV患者的效力。此外，DNCB先前也被研究作為一種可能的癌癥治療劑已進(jìn)行試驗(yàn)，其中局部應(yīng)用DNCB以誘導(dǎo)延時(shí)變態(tài)反應(yīng)，借此利用其免疫誘導(dǎo)能力。但是，這些發(fā)現(xiàn)尚未付諸實(shí)踐。而且，DNCB已被用于疣的治療，除其他用途外。
一種在最近幾年已被應(yīng)用的在HIV患者中使用DNCB的方法是將DNCB溶于丙酮溶劑，用所得的產(chǎn)物浸漬紗布狀織物，并將此織物應(yīng)用于皮膚。然后將此局部制劑干燥，加蓋并保持靜置數(shù)小時(shí)(通常至少8小時(shí))。此長期應(yīng)用時(shí)間意味著HIV患者限于至少8小時(shí)，相當(dāng)長的時(shí)間，它使該人不能渡過如同健康人一樣的生活方式。
因此，研制一種可以在短時(shí)間內(nèi)將有效量的DTH誘導(dǎo)劑有效地遞送至宿主的局部DTH誘導(dǎo)劑組合物是相當(dāng)感興趣的。
相關(guān)文獻(xiàn)有用的參考資料包括Stricker等人，Dendritic cells anddinitrochlorobenzene(DNCB)A new treatment approach to AIDS.Immunol Letters 1991；29191-196；Stricker等人，Pilot studyof topical dinitrochlorobenzene(DNCB)in human immunodeficiency virus infection.Immunnol Letters 1993；361-6；Stricker等人，Topical dinitrochlorobenzene in HIV disease.JAm Acad Dermatol 1993；28796-797；Stricker等人，Clinicaland immunologic evaluation of HIV-infected patients treatedwith dinitrochlorobenzene(DNCB).JAm Acad Dermatol 1994；31462-466；Stricker RB，Goldberg B，Mills LB，Epstein WL.Improved results of delayed-type hypersensitivity skintesting in HIV-infected patients treated with topicaldinitrochlorobenzene(DNCB).J Am Acad Dermatol 1995；33608-611；Stricker & Goldberg.Safety of topicaldinitrochlorobenzene.Lancet 1995；3461293；Stricker等人，Improved results of delayed-type hypersensitivity skintesting in HIV-infected patients treated with topicaldinitrochlorobenzene.J Am Acad Dermatol 1996；35491-493；Stricker等人，Decrease in viral load associated with topicaldinitrochlorobenzene therapy in HIV disease.Res Virol 1997；148343-348；Traub等人，Topical immune modulation withdinitrochlorobenzene(DNCB)in HIV diseaseA controlled trialfrom Brazil.Dermatology 1997；195369-373；Stricker等人，Topical immune modulation(TIM)A novel approach to theimmunotherapy of systemic disease.Immunol Letters 1997；59145-150；Oracion等人，DNCB treatment of HIV-infected patientsleads to beneficial immunologic outcomes，reduced viral load，and improved measures of quality-of-life.J Invest Dermatol1998；110476。
發(fā)明概述本發(fā)明提供含有延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑，如1-二氯-2，4-二硝基苯(DNCB)的局部貼劑及其使用方法。本發(fā)明的局部貼劑由存在于載體上的粘性凝膠組合物組成，其中該粘性凝膠組合物包含延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑、水溶性聚合物凝膠、水和水保持劑。在使用本發(fā)明的局部貼劑的過程中，將局部貼劑應(yīng)用于受試者的皮膚表面，并在應(yīng)用部位保持一段充足的時(shí)間以將有效量的延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑施用于受試者，其中該保持時(shí)間一般不超過大約60分鐘。本發(fā)明用于多種用途，其中延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的給藥是期望的，且本發(fā)明特別適用于治療與HIV有關(guān)的病癥如AIDS。
附圖的簡要說明

圖1提供本發(fā)明局部貼劑的橫截面視圖。
圖2和3提供本發(fā)明局部貼劑的制備方法的示意圖。
具體實(shí)施方案的描述本發(fā)明提供了一種含有延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑如1-二氯-2，4-二硝基苯(DNCB)的局部貼劑及其使用方法。本發(fā)明的局部貼劑由存在于載體上的粘性凝膠組合物組成，其中該粘性凝膠組合物包含延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑、水溶性聚合物凝膠、水和水保持劑。在使用本發(fā)明的局部貼劑的過程中，將局部貼劑應(yīng)用于受試者的皮膚表面，并在應(yīng)用部位保持一段充足的時(shí)間，以給受試者施用有效量的延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑，其中這種保持時(shí)間一般不超過大約60分鐘。本發(fā)明用于多種用途，其中延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的給藥是期望的，且本發(fā)明特別適用于治療與HIV有關(guān)的病癥如AIDS。在本發(fā)明的進(jìn)一步描述中，首先更為詳細(xì)地描述該局部貼劑，然后綜述本發(fā)明的代表性應(yīng)用，其中使用本發(fā)明的局部貼劑。
在進(jìn)一步描述本發(fā)明之前，還應(yīng)理解本發(fā)明不限于下述的本發(fā)明的特定實(shí)施方案，因?yàn)樘囟▽?shí)施方案的改型是可以進(jìn)行的，且它們?nèi)月湓谒降臋?quán)利要求書的范圍之內(nèi)。還可以理解所用的術(shù)語用于描述特定實(shí)施方案的目的，且不意于進(jìn)行限定。實(shí)際上，通過所附的權(quán)利要求書將確定本發(fā)明的范圍。
在此說明書和所附的權(quán)利要求書中，除非上下文清楚地表明其它意思，否則單數(shù)引用包括復(fù)數(shù)。除非另外定義，本文所用的所有的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的相同含義。
局部貼劑如以上總結(jié)，本發(fā)明涉及一種延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的局部貼劑。本發(fā)明的局部貼劑的特征是含有存在于凝膠粘性基質(zhì)中的有效量的延時(shí)類型的過敏誘導(dǎo)劑。圖1提供根據(jù)本發(fā)明所述的局部貼劑的代表。由圖1可以看出，這種代表性局部貼劑10包含存在于載體14上的凝膠粘性基質(zhì)12?，F(xiàn)在更為詳細(xì)地描述這些組分中的每一種。
用作延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑保持層的凝膠粘性基質(zhì)由存在例如溶解或分散在粘性凝膠基質(zhì)中的延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑和粘性凝膠基質(zhì)組成?！把訒r(shí)類型過敏(DTH)誘導(dǎo)劑”意指通過增加體內(nèi)免疫系統(tǒng)細(xì)胞的活性而引起受試者如HIV患者的免疫反應(yīng)的免疫調(diào)節(jié)劑。延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑是在與人皮膚發(fā)生接觸時(shí)誘導(dǎo)IV型過過敏反應(yīng)的物質(zhì)，且它們包括但不限于三硝基苯磺酸、苦基氯(PC)、2，4二硝基氟苯(DNFB)和1-氯-2，4-硝基苯(DNCB)。在許多實(shí)施方案中，延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑為DNCB。
粘性凝膠基質(zhì)中存在的DTH誘導(dǎo)劑的數(shù)量是在應(yīng)用于受試者皮膚表面時(shí)足以給受試者施用有效量的試劑的數(shù)量，如以下更為詳細(xì)地描述。在許多實(shí)施方案中，粘性凝膠基質(zhì)中存在的DTH誘導(dǎo)劑的數(shù)量為大約0.01-10.0％(w/w)，有時(shí)為大約0.05-10.0％(w/w)，通常大約為0.1-5.0％(w/w)，更通常為大約0.2-3.0％(w/w)。
如上述，包含DTH誘導(dǎo)劑的粘性凝膠基質(zhì)由水溶性高分子量物質(zhì)、水和水保持劑組成。在某些實(shí)施方案中，粘性凝膠基質(zhì)還可以包含共溶劑，如有機(jī)共溶劑?，F(xiàn)在更為詳細(xì)地分別描述這些組分中的每一種。
有用的水溶性高分子量物質(zhì)包含水溶性聚合物，其中有用的聚合物包括但不限于明膠、淀粉、瓊脂、甘露聚糖、海藻酸、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、糊精、甲基纖維素、甲基纖維素鈉、羧丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、纖維素樹脂、羧基乙烯基聚合物、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、阿拉伯樹脂、阿拉伯膠、黃芪膠、刺梧桐樹膠和丙烯酸淀粉共聚物或其它淀粉丙烯酸鈉接枝共聚物。這些物質(zhì)的金屬鹽以及它們通過有機(jī)或無機(jī)交聯(lián)劑形成的交聯(lián)產(chǎn)物也是有用的。這些水溶性聚合物可以用于賦予粘性凝膠組合物中所用的其它原料的性能和特征，并在實(shí)際中可以單獨(dú)使用或進(jìn)行2或更多種的組合使用。粘性凝膠基質(zhì)中存在的水溶性高分子量物質(zhì)的數(shù)量范圍一般為大約0.5-20，通常為大約2-20％(w/w)。
雖然任何方便的水可以用作水組分，有用的水為蒸餾水或離子交換水等，它是本發(fā)明許多實(shí)施方案中優(yōu)選的。凝膠粘合劑中存在的水量足以賦予凝膠粘合劑所需的物理性能，并改善皮膚角質(zhì)或角質(zhì)化層的膨脹，從而改善DTH誘導(dǎo)劑的滲透性或穿透性，其中凝膠組合物中存在的水的數(shù)量范圍一般為大約10-80％，通常為大約30-60％(w/w)。
本發(fā)明的粘性凝膠組合物的水保持劑或水保留劑是任何能夠至少減少粘性凝膠基質(zhì)中所含的水揮發(fā)從而使粘性凝膠基質(zhì)中的水含量在制劑的儲存和使用期間保持至少基本恒定(如果不是恒定的話)水平的試劑。在本發(fā)明組合物中，可以使用一種或多種水保持劑，其中粘性凝膠基質(zhì)中存在的水保持劑的數(shù)量范圍一般為大約1-70wt％，更優(yōu)選10-60wt％。適宜的水保持劑或水保留劑的實(shí)例包括但不限于一種或多種類型的多價(jià)或多羥基或糖或醇，如甘油、山梨醇、丙二醇、二甘醇、1，3-丁二醇和乙二醇等。
此外，本發(fā)明凝膠基質(zhì)組合物還可以包括共溶劑，其中該共溶劑一般為有機(jī)共溶劑。有用的DNCB共溶劑的實(shí)例包括但不限于正甲基-2-吡咯烷酮、克羅他米通、乙醇，甲醇，聚乙二醇(如低分子量聚乙二醇，如PEG 600或更低如500、400、300、200、100等和它們的混合物；和丙酮，其中正甲基-2-吡咯烷酮、聚乙二醇和克羅他米通特別有用。共溶劑可以由簡單的組分組成或兩種或更多種組分組合而成。
而且，除了上述成分之外，還可以在需要的時(shí)候適當(dāng)?shù)貜?fù)合多種用于常規(guī)局部水溶性貼劑的添加劑，包括無機(jī)物質(zhì)如高嶺土、皂土和二氧化鈦；防腐劑如尼泊金酯；陰離子、陽離子和非離子表面活性劑；金屬鋁交聯(lián)劑如氯化鋁、無水氫氧化鋁凝膠和氨基乙酸二羥基鋁；油如加州希蒙得木油和蓖麻油；螯合劑如EDTA；pH調(diào)節(jié)劑如蘋果酸、酒石酸和二異丙醇胺；醇如乙醇；保濕劑如透明質(zhì)酸、蘆薈萃取物和尿素；以及其它芳香劑和著色劑。
凝膠基質(zhì)組合物的pH一般是在生理學(xué)可接受的范圍內(nèi)的那些，其中pH的范圍一般為大約4.0-7.0，更一般為大約4.0-6.0。
如上述，含有一種或多種活性成分的粘性凝膠組合物一般存在于載體或襯墊上。該載體一般由能夠配合人體活動的柔軟的材料組成，且包括例如多種無紡布、機(jī)織布、斯潘德克斯彈性纖維、法蘭絨或這些材料與聚乙烯薄膜的層制品、聚乙二醇對苯二酸酯薄膜、聚氯乙烯薄膜、乙烯-乙酸乙烯基酯共聚物薄膜、聚氨酯薄膜等。
除了粘性凝膠組合物和載體層之外，本發(fā)明局部貼劑還可以包括在與襯墊相對的凝膠層的表面上的釋放薄膜16，它保護(hù)凝膠層不受環(huán)境影響。釋放薄膜可以是任何方便的材料，其中代表性的釋放薄膜包括聚酯，如PET或PP等。
在許多實(shí)施方案中，貼劑存在于密封包裝中。一般地，密封包裝由一種包裝材料制成，所述包裝材料包括由能夠防濕氣、氧通過的材料和其它試劑制成的層，即該包裝包括濕/氧屏障材料。可以使用任何適宜的屏障材料，其中有用的屏障材料包括金屬層如鋁，其中在許多實(shí)施方案中，阻擋層是鋁層。這種阻擋層的厚度足以提供阻擋功能，其中厚度范圍一般為大約5-15，通常為大約6-10μm。在許多實(shí)施方案中，包裝為與一種或多種附加層組合的阻擋層的層制品，如聚合物層、紙層等。可以與本發(fā)明貼劑一起使用的代表性的含鋁包裝由Dainippon Printing Co.，Ltd.(Kyoto，日本)銷售。
局部貼劑可以用任何常規(guī)方法制成。一種用于制備本發(fā)明貼劑的常規(guī)方法包括通過以下步驟制備凝膠粘性糊均勻地混合上述的成分，然后將此糊涂布在載體上，隨后將所得的產(chǎn)物切成特定的尺寸以獲得目標(biāo)局部貼劑。如上述，然后將所得的局部貼劑熱密封，一般將數(shù)片進(jìn)行保裝，使用含有鋁層的包裝材料得到密封的局部貼劑。關(guān)于制備方法的更為詳述的描述，參見美國專利5,827,529；本文引用其公開內(nèi)容作為參考。
在代表性的制備方法中，通過以下方法生產(chǎn)用于本發(fā)明的基質(zhì)使用混合器均勻地混合上述成分，通過任何常規(guī)方法將上述成分混合成糊，然后通過擴(kuò)散器將它擴(kuò)散在襯墊或載體材料上。如上述，所述載體材料可以是例如由PET或PP或某些其它聚酯纖維制成的紙或機(jī)紡布或無紡布。為進(jìn)行保護(hù)，隨后用聚酯如PET或PP的釋放層覆蓋它的表面。這些步驟如圖2所示。
然后將所得的產(chǎn)物切成特定的尺寸以得到目標(biāo)局部貼劑組合物。這些貼的形狀可以改變，其中代表性的形狀包括方形、三角形、卵形、圓形等。貼劑的尺寸也可以改變，其中在許多實(shí)施方案中，尺寸范圍為大約1-200cm2，而在許多實(shí)施方案中為大約10-100cm2，通常為大約20-50cm2，如25cm2。最終的局部貼劑中的基質(zhì)的重量應(yīng)該為300-1500g/m2，優(yōu)選為600-1000g/m2。
如圖3所示，然后通過熱密封于包括鋁層的包裝材料來包裝這種水溶性局部貼劑以得到最終的產(chǎn)物。
應(yīng)該注意到上述的制備方法僅是代表性的。如上述，可以使用任何能夠生產(chǎn)本發(fā)明局部貼劑的方便的方法。
使用貼劑的方法本發(fā)明貼劑用于給宿主局部遞送DTH誘導(dǎo)劑如DNCB?！熬植窟f送”意指通過皮膚吸收的遞送。在使用本發(fā)明的局部貼劑以給宿主局部施用DTH誘導(dǎo)劑的過程中，將局部制劑應(yīng)用于皮膚表面，并在應(yīng)用部位保持一段充足的時(shí)間以將目標(biāo)數(shù)量的DTH誘導(dǎo)劑遞送至宿主。在許多實(shí)施方案中，遞送目標(biāo)數(shù)量的試劑所需的時(shí)間是短暫的，一般不超過大60分鐘，通常不超過大約30分鐘，且在許多實(shí)施方案中不超過大約15分鐘。但是在許多實(shí)施方案中，制劑在應(yīng)用部位保持的時(shí)間至少為大約1分鐘，通常至少為大約3分鐘，更常見為至少大約5分鐘。
可以將貼劑施用于任何方便的局部部位。有用的局部部位包括但不限于手臂、腿、軀干等。施用后被局部貼劑覆蓋的表面積必須足以提供目標(biāo)數(shù)量的給藥試劑，且在許多實(shí)施方案中其范圍為大約1-200cm2，而在許多實(shí)施方案中為大約10-100cm2，通常為大約20-50cm2，如25cm2。在實(shí)施本發(fā)明的方法的過程中，可以在既定的時(shí)間期間內(nèi)，如在病癥的治療期間將局部貼劑進(jìn)行一次或多次應(yīng)用，其中當(dāng)在既定時(shí)間內(nèi)施用多次貼劑時(shí)，給藥方案可以是每日、每周、每兩周、每月等進(jìn)行。
實(shí)用性上述的貼劑和方法用于任何應(yīng)用，其中給宿主施用DTH誘導(dǎo)劑是期望的。通常這些宿主為“哺乳動物(mammals或mammalian)”，其中這些術(shù)語廣義上用于描述屬于哺乳動物類的生物體，包括食肉動物目(如狗和貓)、嚙齒類目(如小鼠、幾尼豬和大鼠)和靈長類目(如人、黑猩猩和猴子)。在許多實(shí)施方案中，宿主為人。
在許多實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法用于治療病癥。治療意指至少改善與影響宿主的病癥有關(guān)的癥狀，其中改善是在廣義上使用的，它指至少減少參數(shù)如與治療的病癥有關(guān)的癥狀，如相關(guān)的病毒載量或與其相關(guān)的副作用的數(shù)量。因此，治療還包括以下情況其中病癥或至少與其相關(guān)癥狀完全被抑制，例如防止發(fā)生或停止，例如終止，從而使宿主不再患有病癥或至少表征該病癥的癥狀。因此治療包括治愈和控制病癥。
在許多實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法治療的病癥是慢性病癥。所關(guān)心的慢性病包括但不限于慢性疲勞綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、麻瘋病、利什曼病、與細(xì)胞內(nèi)致病劑(如病毒、細(xì)菌)，如細(xì)胞巨化病毒、念珠菌、隱球菌、卡氏肺孢子蟲等的存在有關(guān)的疾病。
特別有用的是將本發(fā)明的方法用于治療，例如控制免疫妥協(xié)病癥，特別是HIV相關(guān)病癥如AIDS。HIV相關(guān)疾病的范圍內(nèi)的治療意指改善生活質(zhì)量，如通過減少一種或多種癥狀、機(jī)會感染的發(fā)生等。根據(jù)與HIV病癥有關(guān)的可量化的參數(shù)，本發(fā)明用于減少病毒載量和/或增加天然殺傷細(xì)胞的群體，同時(shí)改變至少一種CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞的群體。這些可量化的參數(shù)的變化可以長度不超過15分鐘的應(yīng)用時(shí)間來獲得。
試劑盒如上述，本發(fā)明還提供試劑盒，其中本發(fā)明的試劑盒至少包括一種或多種DTH誘導(dǎo)劑局部貼劑。如上述，試劑盒中的本發(fā)明局部貼劑可以包裝存在。試劑盒中的局部貼片一般存在于單獨(dú)的小袋(pouch)或類似的容器中，以保持貼片的組成直至使用。本發(fā)明的試劑盒一般還包括關(guān)于在給宿主遞送DTH誘導(dǎo)劑的過程中如何使用貼劑的說明，其中這種說明一般包括關(guān)于應(yīng)用貼劑的地方、給藥方案等信息。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的試劑盒包括關(guān)于如何使用DTH誘導(dǎo)劑貼劑治療特定的病癥的說明。這些說明一般記錄在適宜的記錄介質(zhì)上。例如，這些說明可以打印在基質(zhì)，如紙或塑料等上。因此，這些說明可以作為包裝插入物存在于試劑盒中，存在于試劑盒的容器的標(biāo)記或其組分中(即與包裝或分包裝有關(guān))。在其它實(shí)施方案中，這些說明作為存在于適宜的計(jì)算機(jī)可讀儲存介質(zhì)，如CD-ROM、磁盤等上的電子儲存數(shù)據(jù)文件出現(xiàn)。
通過例示而不是限定的方式提供以下的實(shí)際實(shí)施例和比較實(shí)施例。
實(shí)施例以下提供實(shí)際實(shí)施例和比較實(shí)施例，但制備方法不受其限定。
I.局部貼劑的制備實(shí)際實(shí)施例-一種水溶性聚合物局部貼劑，其中DNCB已以2％的數(shù)量復(fù)合。將2％DNCB溶于正甲基-2-吡咯烷酮，然后將成分混合均勻并調(diào)成糊，然后將其涂布在PET無紡布上至重量為850g/m2；然后用PP薄膜將所得的產(chǎn)物層壓，隨后切成5平方厘米。最后，將每個(gè)單獨(dú)的DNCB貼劑熱密封在含有鋁箔的包裝材料中以獲得成品。參見圖2和3。
安慰劑-一種水溶性聚合物局部貼劑，其中用水代替實(shí)際實(shí)施例中的DNCB。將成分混合均勻并調(diào)成糊，然后將其涂敷在PET無紡布上直至重量為850g/m2；然后用PP薄膜層壓所得的產(chǎn)物，隨后切成5平方厘米。最后，將各單獨(dú)的安慰劑貼劑熱密封在含有鋁箔的包裝材料中以得到最終產(chǎn)物。參見圖2和3。表1總結(jié)了實(shí)際組合物和安慰劑組合物的含量。
表1
*，所有的值以％(w/w)表示。
II.穩(wěn)定性數(shù)據(jù)關(guān)于實(shí)際實(shí)施例中DNCB內(nèi)容物的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。在25℃和60％濕度的環(huán)境中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將結(jié)果與看作100％的最初的值作比較，并在表2中給出。
表2
III.脫色試驗(yàn)我們測定了關(guān)于實(shí)際實(shí)施例中的DNCB水溶性局部制劑的穩(wěn)定性的脫色程度。在25℃和60％濕度的環(huán)境中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果由相對于最初值的脫色程度表示，并在表3中給出。
相當(dāng)大的差別3+可見差別2+細(xì)微差別+沒有變化-表3
IV.活性分析我們將實(shí)際實(shí)施例的DNCB水溶性局部貼劑應(yīng)用于HIV患病志愿者以研究其對HIV的效力。我們使用安慰劑水溶性局部貼劑作比較。
我們應(yīng)用貼劑的上限為5名志愿者持續(xù)8小時(shí)(1名患者)、4小時(shí)(1名患者)和15分鐘(3名患者)，并在1周后收集和分析它們的血液。通過超靈敏HIV-1 RNA PCR分析測定病毒載量(VL)。
結(jié)果如下表4所示。
表4
*1CD4 & CD8；T細(xì)胞子集NK，天然殺傷細(xì)胞VL病毒載量(RNA PCR)*2皮膚反應(yīng)等級等級4(G4)紅斑，起泡和大皰形成等級3(G3)紅斑，起泡；無大皰等級2(G2)紅斑覆蓋全部貼劑區(qū)域；沒有起泡等級1(G1)輕微紅斑覆蓋小于整個(gè)貼劑區(qū)域等級0(G0)在貼劑部位最小或沒有反應(yīng)V.討論根據(jù)表2和3，水溶性貼劑中的DNCB是穩(wěn)定的；脫色在可使用的范圍之內(nèi)，且在實(shí)用性是充分的。表4表明，在長期(8小時(shí))使用DNCB水溶性貼劑時(shí)患者1出現(xiàn)顯著的皮膚刺激；CD4和CD8計(jì)數(shù)增加，但NK減少，而VL增加?；颊?的皮膚刺激程度小于患者1。NK計(jì)數(shù)有一定增加，但在VL中沒有看到顯著變化。對于患者3-5，應(yīng)用的時(shí)間是短暫的(15分鐘)，且不存在皮膚刺激。但是，CD4和CD8計(jì)數(shù)呈現(xiàn)改變，NK計(jì)數(shù)明顯增加，而VL顯著減少，這清楚地表明HIV血液濃度的抑制作用。由于DNCB免疫活化有助于增加NK細(xì)胞，因而它還有助于減少VL。根據(jù)此信息，將DNCB水溶性貼劑進(jìn)行長時(shí)間應(yīng)用是沒有意義的；在短時(shí)間內(nèi)(大約15分鐘)簡單地將其應(yīng)用于皮膚對于HIV特別有效，并且顯然是實(shí)際的。此外，我們同時(shí)完成了一個(gè)應(yīng)用安慰劑的研究沒有皮膚刺激，并對HIV絕對沒有效果。這再次證明DNCB的明顯效果。而且，當(dāng)使用貼劑時(shí)，在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行簡單的皮膚應(yīng)用允許對AIDS進(jìn)行治療并不改變患者的生活方式，因而患者能夠過著與健康人完全相同的生活方式。此外，與其它HIV治療藥物相伴使用也是完全可能的。已對DNCB的不良事件進(jìn)行一定時(shí)間的研究，仍未有任何關(guān)于危及生命的不良事件如致癌的報(bào)道。而且，本發(fā)明的DNCB水溶性局部貼劑僅每周應(yīng)用一次，因此這種治療的可能成本大約為$300每人每年，從而使它比其它HIV治療藥物更為廉價(jià)，并也能夠?qū)⑵溆糜诎l(fā)展中國家。
根據(jù)以上的結(jié)果和討論明顯看出，本發(fā)明提供了許多遞送DTH誘導(dǎo)劑的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的局部制劑是用于將DTH誘導(dǎo)劑施用于患者的高效和有效的遞送賦形劑，且僅需要在短時(shí)間內(nèi)應(yīng)用以進(jìn)行試劑給藥。而且，本發(fā)明的局部貼劑在25℃下儲存是穩(wěn)定的。本發(fā)明的制劑代表一種治療許多病癥，包括AIDS的低成本方法。因此，本發(fā)明代表對現(xiàn)有技術(shù)的一個(gè)顯著貢獻(xiàn)。
在本說明書中引述的所有的出版物和專利在此引入本文作為參考，如同各個(gè)單獨(dú)的出版物或?qū)＠唧w和獨(dú)立地被指示引入作為參考那樣。引述的任何出版物是申請日前公開的其內(nèi)容，且不應(yīng)被理解為承認(rèn)由于在先的發(fā)明而使本發(fā)明不能領(lǐng)先于這些出版物。
雖然已較詳細(xì)地通過例示和實(shí)施例描述了前述的發(fā)明以使理解清晰，但本領(lǐng)域技術(shù)人員在本發(fā)明的教導(dǎo)下容易地看到可以在不背離所附的權(quán)利要求書的構(gòu)思或范圍的情況下對本發(fā)明作一定的改變和修改。
權(quán)利要求
1.一種延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的局部貼劑，所述制劑包含一種含有延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的粘性凝膠組合物；和一種載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的局部貼劑，其中該延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑為1-氯-2，4-二硝基苯(DNCB)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的局部貼劑，其中該粘性凝膠組合物中存在的該DNCB的數(shù)量范圍為大約0.01-10.0％(w/w)。
4.權(quán)利要求1的局部貼劑，其中該粘性凝膠組合物包含一種水溶性聚合物凝膠；水；和一種水保持劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的局部貼劑，其中存在的水量范圍為大約10-80％(w/w)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的局部貼劑，其中該粘性凝膠組合物的pH范圍為大約4.0-7.0。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的局部貼劑，其中該粘性凝膠組合物還包含一種有機(jī)溶劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的局部貼劑，其中該有機(jī)溶劑選自正甲基-2-吡咯烷酮、聚乙二醇和克羅他米通以及它們的組合。
9.一種局部貼劑，所述局部貼劑包含(a)一種pH范圍為大約4.0-7.0的粘性凝膠組合物，所述粘性凝膠組合物包含(i)數(shù)量范圍為大約0.01-10.0％(w/w)的DNCB；(ii)一種水溶性聚合物凝膠；(iii)數(shù)量范圍為大約10-80％(w/w)的水；和(iv)一種水保持劑；和(b)一種載體。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的局部貼劑，其中該DNCB存在的數(shù)量范圍為大約0.1-5.0％(w/w)。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的局部貼劑，其中該DNCB存在的數(shù)量范圍為大約0.2-3.0％(w/w)。
12.根據(jù)權(quán)利要求9的局部貼劑，其中該水存在的數(shù)量范圍為大約20-70％(w/w)。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的局部貼劑，其中該水存在的數(shù)量范圍為大約30-60％(w/w)。
14.根據(jù)權(quán)利要求9的局部貼劑，其中該pH范圍為大約4.0-6.0。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的局部貼劑，其中該粘性凝膠組合物還包含一種有機(jī)溶劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的局部貼劑，其中該有機(jī)溶劑選自正甲基-2-吡咯烷酮、聚乙二醇和克羅他米通以及它們的組合。
17.一種局部貼劑，所述局部貼劑包含(a)一種pH范圍為大約4.0-6.0且包含以下成分的粘性凝膠組合物(i)數(shù)量范圍為大約0.2-3.0％(w/w)的DNCB；(ii)一種水溶性聚合物凝膠；(iii)數(shù)量范圍為大約30-60％(w/w)的水；(iv)一種水保持劑；和(v)一種選自以下的有機(jī)共溶劑正甲基-2-吡咯烷酮、聚乙二醇和克羅他米通以及它們的組合；(b)一種載體。
18.一種將延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑遞送給受試者的方法，所述方法包括(a)給該受試者的皮膚表面應(yīng)用一種包含以下的局部貼劑(i)一種包含該延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的粘性凝膠組合物；和(b)一種載體；和(b)使該局部貼劑在該皮膚表面保持充足的時(shí)間，以將該延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑遞送至該受試者。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中該延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑為DNCB。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中該粘性凝膠組合物中存在的該DNCB的數(shù)量范圍為大約0.01-10.0％(w/w)。
21.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中該粘性凝膠組合物包含一種水溶性聚合物凝膠；水；和一種水保持劑。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的方法，其中該粘性凝膠組合物還包含一種有機(jī)溶劑。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中該有機(jī)溶劑選自正甲基-2-吡咯烷酮、聚乙二醇和克羅他米通以及它們的組合。
24.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中該方法為治療免疫妥協(xié)疾病的方法。
25.一種治療患有免疫妥協(xié)疾病的宿主的方法，所述方法包括(a)給該受試者的皮膚表面應(yīng)用一種包含以下的局部貼劑(i)一種包含有效量的延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的粘性凝膠組合物；和b)一種載體；和(b)使該局部貼劑在該皮膚表面保持一段充足的時(shí)間，以將該有效量的延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑遞送至該受試者。
26.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中該延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑為DNCB。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中該粘性凝膠組合物中存在的該DNCB的數(shù)量范圍為大約0.01-10.0％(w/w)。
28.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中該粘性凝膠組合物包含一種水溶性聚合物凝膠；水；和一種水保持劑。
29.根據(jù)權(quán)利要求28的方法，其中該粘性凝膠組合物還包含一種有機(jī)溶劑。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其中該有機(jī)溶劑選自正甲基-2-吡咯烷酮、聚乙二醇和克羅他米通以及它們的組合。
31.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中該免疫妥協(xié)疾病為HIV感染。
32.一種治療患有HIV感染的宿主的方法，該方法包括(a)給該受試者的皮膚表面應(yīng)用一種包含以下的局部貼劑(i)一種包含有效量的DNCB的粘性凝膠組合物；和(b)一種載體；和(b)將該局部貼劑保持在該皮膚表面。
33.根據(jù)權(quán)利要求32的方法，其中該粘性凝膠組合物中存在的該DNCB的數(shù)量范圍為大約0.01-10.0％(w/w)。
34.根據(jù)權(quán)利要求32的方法，其中該粘性凝膠組合物包含一種水溶性聚合物凝膠；水；和一種水保持劑。
35.根據(jù)權(quán)利要求34方法，其中該粘性凝膠組合物還包含一種有機(jī)溶劑。
36.根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中該有機(jī)溶劑選自正甲基-2-吡咯烷酮、聚乙二醇和克羅他米通以及它們的組合。
37.一種用于將延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑經(jīng)皮遞送至有此需要的受試者的試劑盒，該試劑盒包含(a)一種局部貼劑，所述局部貼劑包含(i)一種包含有效量的延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的粘性凝膠組合物；和(ii)一種載體；和(b)關(guān)于使用該制劑的說明。
38.根據(jù)權(quán)利要求37的試劑盒，其中該試劑盒包含大量該局部貼劑。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的試劑盒，其中該大量局部貼劑存在于單獨(dú)的容器中。
40.根據(jù)權(quán)利要求39的試劑盒，其中該單獨(dú)的容器為密封的小袋。
全文摘要
本發(fā)明提供含有延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑，如1－二氯－2，4－二硝基苯(DNCB)的局部貼劑和使用此貼劑的方法。本發(fā)明的局部貼劑由存在于載體上的粘性凝膠組合物組成，其中該粘性凝膠組合物包括延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑、水溶性聚合物凝膠、水和水保持劑。在使用本發(fā)明局部貼劑的過程中，將該局部貼劑應(yīng)用于受試者皮膚表面，并在應(yīng)用部位保持充足的時(shí)間以將有效量的延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑施用于受試者，其中這種保持時(shí)間一般不超過大約60分鐘。本發(fā)明用于多種用途，其中延時(shí)類型過敏誘導(dǎo)劑的給藥是期望的，且本發(fā)明特別適用于治療與HIV有關(guān)的病癥如AIDS。
文檔編號A61K47/16GK1561202SQ02809677
公開日2005年1月5日 申請日期2002年2月22日 優(yōu)先權(quán)日2001年3月12日
發(fā)明者首藤十太郎, 森一郎 申請人:帝國制藥美國公司