專(zhuān)利名稱(chēng)：槐定堿及其作為鎮(zhèn)痛劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明總地涉及槐定堿及其衍生物。更具體的說(shuō)，本發(fā)明涉及天然來(lái)源的或化學(xué)合成的槐定堿和其衍生物，及其作為鎮(zhèn)痛劑或生產(chǎn)鎮(zhèn)痛劑或兼有抗腫瘤和鎮(zhèn)痛效果的藥物組合物中的應(yīng)用。
目前臨床上廣泛使用的鎮(zhèn)痛藥物主要包括兩大類(lèi)一類(lèi)是作為受體激動(dòng)劑與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的阿片受體結(jié)合，模擬內(nèi)源性鎮(zhèn)痛物質(zhì)(如腦啡肽)的功能，激活體內(nèi)抗痛系統(tǒng)而發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥，其中包括苯并嗎啡烷類(lèi)、哌替啶類(lèi)以及與嗎啡烷相關(guān)的鎮(zhèn)痛藥；另一類(lèi)是通過(guò)抑制下視丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞前列腺素合成酶(環(huán)氧合酶)而抑制體神經(jīng)傳導(dǎo)的疼痛的非固醇類(lèi)抗炎止痛藥(NSAIDS)，其中包括水楊酸類(lèi)、乙酰苯胺類(lèi)、吡唑酮類(lèi)、鄰氨基甲酸類(lèi)、芳基乙酸類(lèi)及芳基丙酸類(lèi)化合物。然而，由于前者存在有嚴(yán)重的耐受性和依賴性(即成癮性)，而后一類(lèi)藥物則常常只表現(xiàn)出很有限的止痛效果，所以從總體上看，這些已知鎮(zhèn)痛藥均不夠理想。
槐定堿(Sophoridine)是最早(1933年)由Oreknow等人從豆科植物苦豆子中分離的一種生物堿。迄今為止，已從苦豆子中發(fā)現(xiàn)并分離了十余種具有相似結(jié)構(gòu)的生物堿，其中主要包括苦參堿(Matrine)、苦豆堿(Aloperine)、槐果堿(Sophocarpine)、氧化苦參堿(Matrine oxide)、槐胺堿(Sophoramine)，以及本發(fā)明所涉及的槐定堿。
與許多天然來(lái)源的植物生物堿一樣，從苦豆子中分離提取的生物堿也具有多方面的生物學(xué)活性。例如在中國(guó)，人們很早就已將苦參堿廣泛用作全身性抗炎劑(如參見(jiàn)Cho etal.，IRCS Med.Sci.14441-442，1986；Chineare Tranditional MedicineEncyclopedia，Hsin-Wen-Feng Publishing Co.，Taiwan，Vo1.1，pp.230-232，1985)。另外，美國(guó)專(zhuān)利5,908,628號(hào)描述了由包括苦豆子在內(nèi)的十二種中國(guó)傳統(tǒng)草藥組成的，具有鎮(zhèn)痛和抗炎性質(zhì)的藥物組合物。美國(guó)專(zhuān)利5,041,450號(hào)公開(kāi)了苦參堿及其衍生物在治療眼炎及作為眼病止痛劑的應(yīng)用。李雪梅等人(如參見(jiàn)李雪梅等，槐定的抗癌作用，中國(guó)藥理學(xué)報(bào)8(2)153-158，1987中國(guó)專(zhuān)利93100881.6)公開(kāi)了槐定堿的抗腫瘤生物學(xué)活性，并證明槐定堿對(duì)包括人子宮滋養(yǎng)細(xì)胞瘤在內(nèi)的多種腫瘤的抗腫瘤生物學(xué)活性。然而，以天然提取的或化學(xué)合成的槐定堿化合物或其衍生物作為臨床普遍適用的鎮(zhèn)痛劑，特別是作為用于各種晚期癌癥病人的及其他各種原因?qū)е碌奶弁吹逆?zhèn)痛劑，迄今尚未見(jiàn)任何報(bào)導(dǎo)。
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種新的，對(duì)哺乳動(dòng)物因各種原因?qū)е碌奶弁淳哂兄雇醋饔玫乃幬锝M合物，其特征在于所說(shuō)的藥物組合物含有作為基本活性成份的治療有效量的槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物，以及一種或多種藥理上可接受的載體或賦形劑。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說(shuō)的哺乳動(dòng)物是人或選自豬、牛、馬、羊的家用大牲畜，或選自狗、貓、小鼠、大鼠、豚鼠或兔的寵物動(dòng)物。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說(shuō)的哺乳動(dòng)物是人。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說(shuō)的槐定堿衍生物是槐定堿基本環(huán)結(jié)構(gòu)任何位置上被選自含有1至6個(gè)碳原子的鏈烷基、環(huán)烷基、鹵代烷基、芳基、芳烷基、芳氧基、?；?、羥基、巰基或磺基、羧基或烷氧基，或烷基芳氧基取代的衍生物或其鹽。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中的所說(shuō)的槐定堿類(lèi)似物包括選自槐果堿、苦參堿、氧化苦參堿、苦豆堿、槐胺堿的槐定堿類(lèi)似物或其鹽。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說(shuō)哺乳動(dòng)物的疼痛包括因晚期腫瘤、機(jī)械或化學(xué)創(chuàng)傷、燒傷、肌肉痙攣、病理性神經(jīng)損傷、感染性或非感染性炎性損傷、異物刺激、代謝紊亂或內(nèi)分泌紊亂，以及組織缺氧所導(dǎo)致的疼痛。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說(shuō)的槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物是天然來(lái)源的或化學(xué)合成的。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說(shuō)的藥物組合物還具有抗腫瘤、抗微生物、抗炎和抗中樞神經(jīng)組織退化活性。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說(shuō)的藥物組合物除含有治療有效劑量的槐定堿外，還含有一種或多種具有輔助或協(xié)同作用的天然或合成的其他活性成份，其中包括但不只限于其他天然或合成的鎮(zhèn)痛劑、抗腫瘤劑、抗微生物劑、抗炎劑及免疫調(diào)節(jié)劑。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說(shuō)的藥物組合物是以局部、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、鼻內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、體腔內(nèi)、器官腔內(nèi)、腫瘤或非腫瘤正常組織內(nèi)給藥途徑投用的。
根據(jù)本發(fā)明這一目的的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，其中所說(shuō)的藥物組合物中槐定堿及其衍生物或類(lèi)似物的治療有效劑量約為每公斤體重0.01-100mg。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供如上限定的槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物作為基本活性成份在生產(chǎn)鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗痛風(fēng)、抗炎及抗中樞神經(jīng)退化性疾病的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明涉及以苦豆子生物堿槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物為基本活性成份的具有止痛作用的藥物組合物。該組合物可有效的抑制或緩解包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物因各種原因?qū)е碌奶弁?，而不至于產(chǎn)生不希望的耐受性和依賴性。
槐定堿是從豆科植物苦豆子中分離的一種單體生物堿。已知槐定堿和槐果堿均為苦參堿(Matrine)的立體異構(gòu)體。李雪梅等曾基于槐定堿與已知具有抗腫瘤活性的苦參堿的結(jié)構(gòu)相似性，使用帶瘤動(dòng)物模型，證明槐定堿同樣具有殺傷腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤生長(zhǎng)的生物學(xué)活性。而且發(fā)現(xiàn)槐定堿在有效劑量范圍內(nèi)基本上不抑制被治療個(gè)體的骨髓造血功能和免疫功能(參見(jiàn)李雪梅等，槐定堿的抗癌作用，中國(guó)藥理學(xué)報(bào)8(2)153-158，1987)。研究者在其進(jìn)一步的臨床試用中發(fā)現(xiàn)，槐定堿對(duì)子宮上皮滋養(yǎng)層細(xì)胞瘤(絨毛膜上皮癌、惡性葡萄胎)、惡性淋巴瘤、胃癌、小細(xì)胞肺癌均具有不同程度的治療作用。
本發(fā)明人基于上述現(xiàn)有技術(shù)研究成果，在對(duì)包括乳腺癌、肝癌、小細(xì)胞腫瘤、惡性淋巴瘤、胰腺癌和胃癌在內(nèi)多種腫瘤晚期病人自愿者進(jìn)行臨床試驗(yàn)治療中發(fā)現(xiàn)，槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物不僅可在不同程度上抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，而且可顯著地抑制或緩解晚期腫瘤病人因腫瘤組織惡性增生所導(dǎo)致的劇烈疼痛。特別令人驚奇的是，當(dāng)槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物用于晚期腫瘤病人時(shí)，其可產(chǎn)生與阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥相同或相似的鎮(zhèn)痛效果。而且臨床試用結(jié)果進(jìn)一步顯示，給所說(shuō)的腫瘤病人長(zhǎng)時(shí)間大劑量投用槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物停藥后，未見(jiàn)病人出現(xiàn)任何如服用阿片類(lèi)中樞神經(jīng)阻斷性鎮(zhèn)痛藥所致的成癮作用。
本發(fā)明人的實(shí)驗(yàn)研究和臨床觀察進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物不僅可有效地抑制或緩解晚期腫瘤病人的疼痛，而且可有效地抑制或緩解哺乳動(dòng)物因機(jī)械或化學(xué)創(chuàng)傷、燒傷、肌肉痙攣、病理性神經(jīng)損傷、感染性和非感染性炎性損傷、異物刺激以及組織缺血等原因所致的疼痛。
根據(jù)本發(fā)明，其中所說(shuō)的機(jī)械或化學(xué)創(chuàng)傷包括銳器傷、電擊傷、鈍器傷及強(qiáng)酸或強(qiáng)堿等化學(xué)物質(zhì)引起的創(chuàng)傷；燒傷包括感染性或非感染性一、二或三度燒傷；肌肉痙攣包括胃痙攣、腸痙攣等平滑肌痙攣，以及骨骼肌痙攣；病理性神經(jīng)損傷包括神經(jīng)炎、三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛，以及脊椎裂和脊椎骨質(zhì)增生引起的神經(jīng)壓迫和神經(jīng)損傷；感染性和非感染性炎性損傷包括由細(xì)菌、真菌或病毒等病原微生物引起的局部或全身性感染，以及因免疫功能失調(diào)或代謝失調(diào)或內(nèi)分泌紊亂引起的風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、痛經(jīng)及其他自家免疫??；異物刺激包括腎或膽結(jié)石刺激，以及身體任何部位因異物侵入所遭受的刺激；組織缺血包括人或哺乳動(dòng)物的心、腦、腎動(dòng)脈供血不足或梗塞所致的缺血(如導(dǎo)致心絞痛、頭痛或腎絞痛)。
根據(jù)本發(fā)明，其中所說(shuō)的待進(jìn)行鎮(zhèn)痛治療的哺乳動(dòng)物包括人或靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物，或選自豬、牛、馬、羊的農(nóng)用大牲畜，以及選自狗、貓、小鼠、大鼠、豚鼠或兔的寵物動(dòng)物。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種含有抑制或緩解疼痛有效量的槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物，并含有一種或多種藥理上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物，所說(shuō)的藥物組合物可有效地抑制或緩解哺乳動(dòng)物機(jī)體因各種原因引起的疼痛，特別是可抑制或緩解晚期腫瘤病人因腫瘤組織惡性增生所導(dǎo)致的疼痛，而不會(huì)引起藥物耐受性和依賴性，即停藥后不會(huì)出現(xiàn)難以忍受的戒斷反應(yīng)綜合癥。
可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的常規(guī)方法，經(jīng)稀酸溶液浸泡、離子交換層析、有機(jī)溶劑(如氯仿、石油醚等)萃取及重結(jié)晶等步驟從天然豆科槐屬植物苦豆子的地上部分提取并分離槐定堿(例如參見(jiàn)吳運(yùn)光，西豆根抗癌有效成份提取分離的研究，新醫(yī)藥資料(西豆根研究增刊)(4)，1974；趙博光，苦豆草主要生物堿在不同器官中的含量動(dòng)態(tài)分布及薄層定量，藥學(xué)學(xué)報(bào)15(3)，182，1980)。另外，可按照常規(guī)方法制備有更好溶解度或吸收率或儲(chǔ)存穩(wěn)定性的槐定堿的無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸鹽。這里所說(shuō)的無(wú)機(jī)鹽包括但不只限于鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸、碳酸、次碳酸、硼酸及硅酸鹽；所說(shuō)的有機(jī)酸鹽包括但不只限于甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、蘋(píng)果酸、水楊酸、順烏頭酸、檸檬酸、富馬酸、馬來(lái)酸、酒石酸、脂肪酸及丙酮酸鹽。也可以以反復(fù)重結(jié)晶的高純度槐定堿為起始材料，按照化學(xué)合成領(lǐng)域已知的氫化、氧化、烷基化、酰化、環(huán)化、脫氫、酯化、酰氨化等反應(yīng)步驟，制備適于各種臨床應(yīng)用或研究目的的槐定堿衍生物或類(lèi)似物?；蛘?，可按照化學(xué)合成領(lǐng)域已知的方法，全人工合成用于本發(fā)明目的的槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物，以降低藥物組合物的生產(chǎn)成本，并有利于進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)和篩選具有更好的止痛和抗腫瘤效果，并顯著降低了毒付作用的新的槐定堿衍生物或類(lèi)似物。
本說(shuō)明書(shū)中使用的術(shù)語(yǔ)“槐定堿衍生物”是指槐定堿的基本環(huán)結(jié)構(gòu)的任何位置上被取代的天然存在的、半合成的或全合成的槐定堿的化學(xué)衍生物或類(lèi)似物。其中所說(shuō)的取代基基團(tuán)包括但不只限于含有一個(gè)或多個(gè)(最好是1至6個(gè))碳原子的烷基(如甲基、乙基、丙基和丁基)、取代的烷基、鏈烯基、取代的鏈烯基、芳基、二烯基、芳烷基、芳烯基、取代的芳基、雜環(huán)或取代的雜環(huán)基團(tuán)、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、鹵素(如Cl、Br、I)、鹵代烷基、?；?、羥基、巰基、磺基、羰基、羧基、烷氧基、芳氧基及烷基芳氧基基團(tuán)。
本說(shuō)明書(shū)中使用的術(shù)語(yǔ)“槐定堿類(lèi)似物”包括但不只限于可按已知方法從天然來(lái)源提取并分離得到的苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、槐胺堿、苦豆堿或它們的天然的、半合成的或全合成的化學(xué)衍生物。
應(yīng)明確指出的是，雖然本發(fā)明優(yōu)選的是天然存在的槐定堿或其衍生物，并以其作為代表性化合物舉例描述本發(fā)明，但上述這些槐定堿衍生物或類(lèi)似物，無(wú)論其為天然的或半合成或全合成的，均可用于制備本發(fā)明的具有鎮(zhèn)痛和/或抗腫瘤和/或抗炎作用的藥物組合物，并且這些化合物均包括在本發(fā)明的待批權(quán)利要求范圍內(nèi)。
作為本發(fā)明的藥物組合物的基本活性成份，槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物表現(xiàn)有極好的鎮(zhèn)痛作用，特別適用于某些晚期腫瘤病人，同時(shí)適用于抑制、緩解和治療某些因免疫功能或代謝紊亂導(dǎo)致的炎性反應(yīng)性疾病，如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和痛風(fēng)。盡管不拘泥于理論，但推測(cè)這些化合物可能是通過(guò)增加中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)遞質(zhì)(如乙酰膽堿)的濃度而發(fā)揮作用的。
可按照制藥工業(yè)中已知的方法(如參見(jiàn)Remington’s PharmaceuticalScience.15th ed.，Mack Publishing Company，1980)將槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物與一種或多種醫(yī)藥上可接受的載體或賦形劑或稀釋劑按適當(dāng)?shù)谋壤旌?，并按已知方法除菌后制成本發(fā)明的藥物組合物。
根據(jù)給藥途徑的不同，可將本發(fā)明的藥物組合物配制成適于靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、體腔內(nèi)(如胸腔、腹腔、脊髓腔、顱內(nèi)及關(guān)節(jié)囊內(nèi))、組織內(nèi)、皮內(nèi)或皮下給藥的可注射的溶液劑或分散劑；或適于口服給藥的粉末劑、片劑、顆粒劑、丸劑、乳劑、懸浮劑、膠囊劑、酏劑；或適于局部給藥和通過(guò)皮膚或粘膜吸收給藥的噴霧劑、霜?jiǎng)?、乳劑、軟膏劑、凝膠劑、含片或栓劑。
為了制備適于胃腸道外途徑給藥的可注射溶液劑，例如可以使用無(wú)菌蒸餾水、注射用水、等滲氯化鈉或葡萄糖溶液，或低濃度(如1-100mM)磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)、以及含有乙醇、多元醇(如乙二醇、丙二醇及液態(tài)聚乙二醇等)的溶劑或分散介質(zhì)作為載體或稀釋劑。在任何情況下，所說(shuō)的可注射制劑均應(yīng)是無(wú)菌和可流動(dòng)并適于通過(guò)注射器注射給藥的。另外，在生產(chǎn)、運(yùn)輸和儲(chǔ)存條件下，所說(shuō)的制劑還必須是穩(wěn)定的，并能夠?qū)辜?xì)菌和真菌等微生物的污染。必要時(shí)，可加入抗氧化劑(如抗壞鹽酸)、抗生素(如青霉素和鏈霉或其他抗真菌劑)及防腐劑(如苯甲酸鈉、三氯叔丁醇、度米酚、山梨酸等)，以及增溶劑和用于維持分散劑中所需顆粒大小的表面活性劑。
為了制備適于口服給藥的片劑、粉末劑、膠囊劑、顆粒劑或乳劑，可以使用蔗糖、乳糖、半乳糖等二糖，或甘露醇、山梨醇等六碳多羥基醇，以及玉米淀粉、明膠、脂質(zhì)、微晶纖維素等作為載體或賦形劑。必要時(shí)，也可在這些口服制劑中加入崩解劑、潤(rùn)滑劑、緩沖鹽、著色劑、甜味劑、香料、分散劑及表面活性劑。
另外，也可使用制藥工業(yè)中已知的方法和輔助成份，將本發(fā)明的藥物組合物制成微膠囊劑或脂質(zhì)體包裹劑。
為了制備適于外用或局部給藥的制劑，例如可以將槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物溶解于含水介質(zhì)或其他適當(dāng)?shù)妮d體或基質(zhì)中，并與適當(dāng)?shù)耐钙の談┤缍谆鶃嗧炕蛟鹿鸬客旌希瞥蓢婌F劑或氣霧劑。另外，也可使用適當(dāng)?shù)幕|(zhì)或賦形劑將本發(fā)明的藥物組合物制成適于局部或通過(guò)皮膚或粘膜吸收給藥的乳劑、霜?jiǎng)?、軟膏、凝膠劑或栓劑(如陰道栓劑或直腸栓劑)。為此，可使用甘油、硬脂酸鎂、聚乙二醇、聚丙烯酰胺、膽固醇、卵磷脂、甲基纖維素或羧甲基纖維素、滑石粉、乳糖、葡聚糖、淀粉等作為基質(zhì)或賦形劑。
根據(jù)使用目的的不同，本發(fā)明的藥物組合物除含有作為基本活性成分的槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物外，還可含有一種或多種具有相同、相似或不同生物學(xué)活性，并對(duì)基本活性成分表現(xiàn)有輔助或協(xié)同作用，但彼此又互不拮抗的天然或合成的其他藥物成份或其混合物。
根據(jù)本發(fā)明，所說(shuō)的其他活性成分包括但不只限于天然來(lái)源的或合成的鎮(zhèn)痛劑(如阿斯匹林、保泰松、丁酸衍生物、芬那酯衍生物等非固醇類(lèi)解熱鎮(zhèn)痛劑，或阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛劑等)、抗腫瘤劑(如氮芥、環(huán)磷酰胺、氨甲喋呤、長(zhǎng)春新堿、紫杉醇、柔紅霉素等)、抗微生物劑(如山梨酸、制霉菌素、黃芩等)，以及免疫調(diào)節(jié)劑(如胸腺素、雷公藤總甙等)。
一般說(shuō)來(lái)，本發(fā)明的藥物組合物的口服給藥劑量為0.1-100mg/kg/天，較好為1-80mg/kg/天，最好為5-50mg/kg/天；腹腔內(nèi)或肌肉內(nèi)注射給藥劑量為0.05-100mg/kg/天，較好為0.1-80m/kg/天，最好為0.5-50mg/kg/天；靜脈內(nèi)注射給藥劑量為0.01-100mg/kg/天，較好為0.05-80mg/kg/天，最好為0.1-50mg/kg/天。當(dāng)然，確切的給藥劑量應(yīng)根據(jù)待治療的病癥或病理狀態(tài)的性質(zhì)、嚴(yán)重程度、病人的年齡、體重、一般健康狀態(tài)，以及病人對(duì)所用藥物的敏感性、耐受性和給藥方式等因素，按照個(gè)體化的原則由臨床醫(yī)生確定。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物在生產(chǎn)鎮(zhèn)痛藥、抗腫瘤藥物、抗痛風(fēng)藥物、抗炎藥物及抗神經(jīng)退化性疾病藥物中的應(yīng)用。
基于本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)的槐定堿及其衍生物對(duì)包括晚期腫瘤及其他原因所致疼痛的顯著鎮(zhèn)痛效果(參見(jiàn)實(shí)施例1-3)，以及現(xiàn)有技術(shù)已證實(shí)的槐定堿及其類(lèi)似物(如苦參堿或氧化苦參堿)對(duì)子宮絨毛膜上皮細(xì)胞癌、惡性淋巴瘤等惡性腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制活性(如參見(jiàn)李雪梅等，槐定的抗癌作用，中國(guó)藥理學(xué)報(bào)8(2)153-158，1987；中國(guó)專(zhuān)利93100881.6)，有可能以槐定堿或其衍生物作為基本活性成份，用于制備鎮(zhèn)痛和/或抗腫瘤藥物組合物?；蛘?，也可將槐定堿或其衍生物作方輔助活性成份，與其他已知的鎮(zhèn)痛和/或抗腫瘤藥物聯(lián)合使用，以改善這些治療藥物的使用效果并減少某些鎮(zhèn)痛藥(如易于導(dǎo)致依賴性或成癮性的阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥)，或抗腫瘤化學(xué)藥物(如易于導(dǎo)致骨髓造血功能或免疫功能抑制的大多數(shù)烷化劑、抗代謝劑)的用量(如參見(jiàn)實(shí)驗(yàn)例4)，從而大大減少因長(zhǎng)期使用這些藥物給病人帶來(lái)的痛苦，并顯著改善病人的生存質(zhì)量。例如，對(duì)于某些因長(zhǎng)期使用腫瘤化療藥物導(dǎo)致外周血白細(xì)胞和血小板水平過(guò)低及其他相關(guān)毒性反應(yīng)，而不宜繼續(xù)使用這些高毒性化療藥物的腫瘤病人，可以單獨(dú)或與小劑量其他化療藥物聯(lián)合使用槐定堿，以作為一種有效的但相對(duì)付作用很低的替代藥物，在不至于造成較大付作用的前提下達(dá)到預(yù)期的治療效果。
同樣，基于本發(fā)明證實(shí)的槐定堿的顯著鎮(zhèn)痛作用，也可以將槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物作為輔助活性成分，與其他已知的阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥或非固醇類(lèi)解熱止痛抗炎藥物或抗痛風(fēng)藥物聯(lián)合使用(如參見(jiàn)實(shí)驗(yàn)例4)，以制成新的藥物組合物，用于抑制或緩解感染或非感染性炎性反應(yīng)性疾病癥狀，以期進(jìn)一步改善解熱鎮(zhèn)痛效果并減少病人或其他被治療個(gè)體的痛苦。另外，本發(fā)明人的初步實(shí)驗(yàn)研究還發(fā)現(xiàn)，槐定堿或其衍生物的鎮(zhèn)痛作用可能是由于這些化合物通過(guò)目前尚不清楚的生物化學(xué)途徑顯著地增加中樞神經(jīng)系統(tǒng)的乙酰膽堿水平所導(dǎo)致的(數(shù)據(jù)未示出)。因此，槐定堿也可望被用于生產(chǎn)治療中樞神經(jīng)退化性疾病如早老性癡呆的藥物。
下列實(shí)施例旨在進(jìn)一步舉例說(shuō)明，而不是限制本發(fā)明。應(yīng)明確指出的是，在不違背本發(fā)明的精神和原則的前提下，對(duì)本發(fā)明的個(gè)別非必要技術(shù)特征所作的任何改動(dòng)和改變都將落入本發(fā)明的待批權(quán)利要求范圍內(nèi)。實(shí)施例1槐定堿對(duì)小鼠模型的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)本實(shí)施例旨在以熱板法觀察苦豆子生物堿槐定堿對(duì)小鼠模型的鎮(zhèn)痛作用。
以平均體重為18-22g的昆明種小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，按照文獻(xiàn)中已描述的熱板法(參見(jiàn)李儀奎主編，中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，pp.351-353，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社)進(jìn)行鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)。
將金屬板溫度調(diào)節(jié)到大約55±0.5℃。給藥前，首先觀察并記錄各小鼠自踏上熱板至出現(xiàn)舔足行為的時(shí)間間隔(秒數(shù))，并將這一時(shí)間間隔定為待試小鼠的痛閾值。從所有候選小鼠中挑選出痛閾值在5-30秒之間的合格動(dòng)物，并將它們隨機(jī)分成六組，每組10只動(dòng)物。各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物分別按照25、20、15、10和5mg/kg體重的給藥劑量經(jīng)尾靜脈注射槐定堿(0.1ml/10g體重)。陰性對(duì)照組動(dòng)物則經(jīng)尾靜脈注射等體積的生理鹽水。給藥后10分鐘再次按上述同樣方法檢測(cè)各組小鼠的痛閾值。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，如個(gè)別動(dòng)物在熱板上停留60秒以上仍未出現(xiàn)前述的痛覺(jué)反應(yīng)，即將該小鼠從熱板上取出，終止實(shí)驗(yàn)觀察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下列表1中所示。
表1槐定堿對(duì)小鼠模型的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)組別 給藥劑量 給藥前痛閾值 給藥后10分鐘痛閾值(10只/組)(mg/kg)(X±SD)(X±SD)對(duì)照組- 12.8±3.91 15.3±5.77實(shí)驗(yàn)組 25 16.4±6.48 48.6±19.14***20 12.4±4.25 57.1±6.10***15 14.7±4.62 38.5±17.19**10 11.7±4.59 24.8±15.995 16.3±6.02 25.8±20.74注與鹽水組比較**P＜0.07；***＜0.001。
從上表所示的數(shù)據(jù)可以看出，給被試動(dòng)物投用(靜脈內(nèi)注射)苦豆子生物堿槐定堿后，可顯著地提高動(dòng)物因經(jīng)受熱刺激所導(dǎo)致的疼痛反應(yīng)的痛閾值，特別是較高劑量組(15-25mg/kg)。這些觀察結(jié)果表明，槐定堿有可能作為一種強(qiáng)用力的鎮(zhèn)痛劑，用于抑制或緩解哺乳動(dòng)物因各種原因引起的疼痛。實(shí)施例2槐定堿對(duì)小鼠模型的鎮(zhèn)痛作用(醋酸誘導(dǎo)的扭體法)本實(shí)驗(yàn)旨在以腹腔內(nèi)醋酸誘導(dǎo)的扭體法觀察苦豆子生物堿槐定堿對(duì)小鼠模型的鎮(zhèn)痛作用。
以平均體重18-24g的雄雌性各30只昆明種小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，按照文獻(xiàn)中已描述的醋酸誘導(dǎo)的扭體法(參見(jiàn)李儀奎主編，中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，pp.351-353，上海科學(xué)技術(shù)出版社)進(jìn)行鎮(zhèn)痛試驗(yàn)。被試動(dòng)物經(jīng)腹腔內(nèi)注射0.6％冰醋酸(0.2ml/只)以誘發(fā)疼痛反應(yīng)，并將動(dòng)物隨機(jī)分成六組，每組10只。各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物分別經(jīng)尾靜脈內(nèi)注射25、20、15、10和5mg/kg槐定堿。陰性對(duì)照組動(dòng)物則經(jīng)尾靜脈內(nèi)注射等體積的生理鹽水。給藥后15分鐘內(nèi)觀察動(dòng)物出現(xiàn)的驅(qū)體扭動(dòng)反應(yīng)的次數(shù)。結(jié)果如下列表2所示。
表2槐定堿對(duì)醋酸誘導(dǎo)的扭體反應(yīng)的影響組別 給藥劑量(mg/kg)扭體反應(yīng)次數(shù)(X±SD)鹽水組 - 33.1±7.40槐定堿組 250***201.5±1.35***159.9±6.31***1014.1±9.64***5 23.2±6.43**注與鹽水組比較**p＜0.01，***＜0.001。
從上列表2中可以看出，與生理鹽水對(duì)照組相比，靜脈注射槐定堿組(5-25mg/kg)動(dòng)物均表現(xiàn)顯著減少了因腹腔內(nèi)注射冰醋酸所造成的痛覺(jué)反應(yīng)(即減少了動(dòng)物的驅(qū)體扭動(dòng)反應(yīng)次數(shù))。因此，本實(shí)驗(yàn)觀察進(jìn)一步證明槐定堿對(duì)小鼠的顯著鎮(zhèn)痛作用。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示，槐定堿的鎮(zhèn)痛效果與給藥劑量之間存在有良好的線性效量關(guān)系。
基本上按照實(shí)施例1中所述的方法篩選實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物并分組。其中槐定堿組同樣包括25、20、15、10和5mg/kg五個(gè)不同給藥劑量組；嗎啡組和槐定堿+嗎啡組分別按表3中所示的劑量給藥。給藥后15、30、60和90分鐘分別記錄各組動(dòng)物的痛閾值。結(jié)果如下列表3中所示。
表3槐定堿與鹽酸嗎啡鎮(zhèn)痛作的比較組別給藥劑量 給藥前痛閾值 給藥后痛閾值(秒)(X±SD)(10只/組) (mg/kg (秒)(X±SD) 15min30min 60min 90min鹽水組 - 17.4±4.9 16.2±5.5 17.7±8.1 18.9±6.1 18.2±6.1槐定堿組25 15.4±4.0 44.3±14.9***28.3±11.4**20.3±4.9*18.8±6.320 16.9±2.5 36.8±18.2**24.6±7.7**23.0±9.9 19.3±6.615 16.45±3.9 32.9±19.2*31.3±17.5*15.2±10.215.8±5.710 18.6±4.9 20.2±7.2 28.0-18.3 12.6±5.9 20.5±15.05 17.45±2.6 17.5±3.3 16.6±6.5 16.0±4.5 19.3±5.4嗎啡組 10 19.7±4.4 35.1±15.5**44.8±14.6***32.4±16.2*27.5±16.5槐定堿+嗎啡組 20+10 19.1±4.4 60±0***57.2±8.9***49.6±12.7***39.9±17.0**注與基礎(chǔ)痛閾比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。
從表3中所示的數(shù)據(jù)可進(jìn)一步看出，槐定堿對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛效果與給藥劑量之間呈線性正相關(guān)關(guān)系，其中25mg/kg和20mg/kg組與基礎(chǔ)痛閾相比，表現(xiàn)出的鎮(zhèn)痛效果尤為明顯。特別是本實(shí)施例的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與投用鹽酸嗎啡的陽(yáng)性對(duì)照組相比，投用較高劑量槐定堿的實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物在給藥后15分鐘所表現(xiàn)的痛閾值似乎略高于鹽酸嗎啡組。因此可以認(rèn)為，槐定堿(25mg/kg)對(duì)哺乳動(dòng)物表現(xiàn)有相似或優(yōu)于常規(guī)強(qiáng)鎮(zhèn)痛藥鹽酸嗎啡的鎮(zhèn)痛作用，故其很有可能作為一種廣泛適用的鎮(zhèn)痛藥，總地或部分地替代具有很大依賴性和成癮性的阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥。
(2)阿片受體拮抗劑對(duì)槐定堿的鎮(zhèn)痛作用的影響本實(shí)施例旨在通過(guò)前述熱板法初步觀察槐定堿是否通過(guò)動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的阿片受體發(fā)揮其鎮(zhèn)痛作用。
基本上按照實(shí)施例1中所述的方法篩選實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物。各實(shí)驗(yàn)組包括阿片受體拮抗劑納絡(luò)酮組(2mg/kg)；槐定堿組(20mg/kg)；嗎啡組(10mg/kg)；納絡(luò)酮(2mg/kg)+鹽酸嗎啡(10mg/kg)組；納絡(luò)酮(2mg/kg)+槐定堿(20mg/kg)組。給藥后15、30、60和90分鐘分別記錄動(dòng)物的痛閾值(秒數(shù))。結(jié)果如下列表4中所示。
表4阿片受體拮抗劑納絡(luò)酮對(duì)槐定堿鎮(zhèn)痛作用的影響組別 給藥劑量 給藥前痛閾值 給藥后痛閾值(秒)(X±SD)(10只/組) (mg/kg) (秒)(X±SD) 15min 30min 60min90min鹽水組- 16.5±3.5 18.2±6.519.7±6.0 16.9±6.517.5±6.0納絡(luò)酮組 2 18.5±2.5 17.4±7.715.8±6.0 19.0±8.718.1±4.0槐定堿組 20 17.9±2.6 34.5±16.2**23.8±7.0 21.8±8.918.3±6.6嗎啡組 10 19.8±4.0 36.0±13.5 43.5±12.5***31.6±15.8*26.3±15.5納絡(luò)酮+嗎啡組 2+1 15.7±3.6 17.9±15.6 26.1±16.524.7±15.3 16.0±17.0納絡(luò)酮+槐定堿組2+20 18.3±5.1 33.2±10.0**21.9±13.417.7±6.016.0±5.7注與鹽水組比較*p＜0.05，**p＜0.01。
從表4所示的數(shù)據(jù)可以看出，單獨(dú)投用阿片受體拮抗劑納絡(luò)酮對(duì)小鼠的疼痛反應(yīng)沒(méi)有明顯抑制作用。然而，納絡(luò)酮與鹽酸嗎啡聯(lián)合用藥，其可顯著地抑制鹽酸嗎啡的鎮(zhèn)痛活性。另一方面，當(dāng)納絡(luò)酮與槐定堿聯(lián)合用藥時(shí)，其對(duì)槐定堿的鎮(zhèn)痛作用沒(méi)有表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)上有意義拮抗作用。因此，這些結(jié)果清楚地表明槐定堿并不是通過(guò)激活CNS阿片受體而發(fā)揮其鎮(zhèn)痛作用的。實(shí)施例4苦豆子總生物堿對(duì)小鼠模型的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)本實(shí)施例旨在觀察包括槐定堿、苦豆堿、槐定堿和苦參堿在內(nèi)的苦豆子地上部分總生物堿(其鹽酸鹽)對(duì)小鼠模型的鎮(zhèn)痛作用。
以平均體重為15-20g的昆明種小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，按照文獻(xiàn)中已描述的熱板法(參見(jiàn)李儀奎主編，中藥藥理實(shí)難方法學(xué)，pp.351-353，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社)進(jìn)行鎮(zhèn)痛試驗(yàn)。
將金屬板溫度調(diào)節(jié)到大約55±0.5℃。給藥前，首先觀察并記錄各小鼠自踏上熱板至出現(xiàn)舔足行為的時(shí)間間隔(秒數(shù))，并將這一時(shí)間間隔定為小鼠的痛閾值。從所有候選小鼠中挑選出痛閾值在5-30秒之間的合格動(dòng)物，并將它們隨機(jī)分成六組，每組10只動(dòng)物。各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物經(jīng)尾靜脈注射苦豆子總生物堿，給藥量分別為25、20、15、10和5mg/kg。陰性對(duì)照組動(dòng)物則經(jīng)尾靜脈注射等體積的生理鹽水。給藥后10分鐘再次按上述同樣方法檢測(cè)各組小鼠的痛閾值。結(jié)果如下列表5所示。
表5苦豆子總生物堿粗提物對(duì)小鼠模型的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)組別 給藥劑量 給藥前痛閾值給藥后10分鐘痛閾值(10只/組) (mg/kg) (X±SD) (X±SD)對(duì)照組-10.6±2.56 14.3±3.65實(shí)驗(yàn)組 2515.3±6.20 45.5±16.10****2011.6±5.25 50.8±10.17***1513.8±6.50 35.6±12.15**1012.3±3.85 19.2±10.80515.3±5.80 23.7±15.75注與鹽水組比較**P＜0.07；***P＜0.001。
從上表所示的數(shù)據(jù)可以看出，給被試小鼠投用(靜脈內(nèi)注射)苦豆子總生物堿(15-25mg/kg)后，可顯著地提高動(dòng)物因遭受熱刺激所導(dǎo)致的疼痛反應(yīng)的痛閾值。這些結(jié)果表明，與槐定堿單體化合物相似，包括槐定堿、苦豆堿、槐果堿和苦參堿在內(nèi)的苦豆子總生物堿粗提物對(duì)哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ屯瑯泳哂酗@著的鎮(zhèn)痛作用。
權(quán)利要求
1.一種新的對(duì)哺乳動(dòng)物因各種原因?qū)е碌奶弁淳哂兄雇醋饔玫乃幬锝M合物，其特征在于所說(shuō)的藥物組合物含有作為基本活性成份的治療有效量的槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物，以及一種或多種藥理上可接受的載體或賦形劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說(shuō)的哺乳動(dòng)物是人或選自豬、牛、馬、羊的家用大牲畜，或選自狗、貓、小鼠、大鼠、豚鼠或兔的寵物動(dòng)物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說(shuō)的哺乳動(dòng)物是人。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說(shuō)的槐定堿衍生物是槐定堿基本環(huán)結(jié)構(gòu)任何位置上被選自含有1至6個(gè)碳原子的鏈烷基、環(huán)烷基、鹵代烷基、芳基、芳烷基、芳氧基、?；?、羥基、巰基或磺基、羧基或烷氧基，或烷基芳氧基取代的衍生物或其鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中的所說(shuō)的槐定堿類(lèi)似物包括選自槐果堿、苦參堿、氧化苦參堿、苦豆堿、槐胺堿的槐定堿類(lèi)似物或其鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說(shuō)哺乳動(dòng)物的疼痛包括因晚期腫瘤、機(jī)械或化學(xué)創(chuàng)傷、燒傷、肌肉痙攣、病理性神經(jīng)損傷、感染性或非感染性損傷、異物刺激、代謝紊亂或內(nèi)分泌紊亂，以及組織缺氧所導(dǎo)致的疼痛。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說(shuō)的槐定堿或其衍生物或其類(lèi)似物是天然來(lái)源的或化學(xué)合成的。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說(shuō)的藥物組合物還具有抗腫瘤、抗微生物、抗炎和抗中樞神經(jīng)組織退化活性。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說(shuō)的藥物組合物除含有治療有效劑量的槐定堿外，還含有一種或多種具有輔助或協(xié)同作用的天然或合成的其他活性成份，包括其他天然或合成的鎮(zhèn)痛劑、抗腫瘤劑、抗微生物劑、抗炎劑及免疫調(diào)節(jié)劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說(shuō)的藥物組合物是以局部、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、鼻內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、體腔內(nèi)、器官腔內(nèi)、腫瘤或非腫瘤正常組織內(nèi)給藥途徑投用的。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說(shuō)的藥物組合物中槐定堿及其衍生物或類(lèi)似物的治療有效劑量約為每公斤體重0.01-100mg。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的槐定堿或其衍生物或類(lèi)似物在生產(chǎn)鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗痛風(fēng)、抗炎及抗中樞神經(jīng)退化性疾病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及以苦豆子生物堿槐定堿為基本活性成分的,具有顯著的鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物,其制備方法及應(yīng)用。本發(fā)明還涉及槐定堿在生產(chǎn)鎮(zhèn)痛劑及用于治療神經(jīng)退化性疾病的藥物中的應(yīng)用?；倍▔A作為鎮(zhèn)痛劑使用時(shí),其除了兼有苦參堿類(lèi)化合物的抗腫瘤活性外,還具有長(zhǎng)期使用后不產(chǎn)生戒斷反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61P29/00GK1343490SQ0111406
公開(kāi)日2002年4月10日 申請(qǐng)日期2001年6月14日 優(yōu)先權(quán)日2001年6月14日
發(fā)明者鞠洪福 申請(qǐng)人:通化方大藥業(yè)股份有限公司, 鞠洪福