專利名稱：抗－cd38－免疫毒素細(xì)胞毒性的增強(qiáng)的制作方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明總的涉及免疫學(xué)和腫瘤生物學(xué)。更具體的，本發(fā)明涉及藥物處理靶腫瘤細(xì)胞提高其中CD38蛋白質(zhì)的表達(dá)，來(lái)增強(qiáng)以抗-CD38為基礎(chǔ)的免疫毒素的細(xì)胞毒性。
相關(guān)領(lǐng)域描述用單克隆抗體將藥物或毒素遞送給不良腫瘤細(xì)胞表面的獨(dú)特分子結(jié)構(gòu)提出了一種吸引人并可能有用的策略。理論上癌癥治療的這種靶向方法的主要優(yōu)點(diǎn)在于選擇性清除腫瘤細(xì)胞的同時(shí)減少治療藥物對(duì)正常非靶組織的毒性。但是，實(shí)際上存在許多問(wèn)題需要解決，然后免疫毒素或抗體藥物治療才會(huì)真正在體內(nèi)有效。
對(duì)任何靶向治療方法的成功，一種可能的限制是在一群腫瘤細(xì)胞中靶抗原表達(dá)的異源性。即如果在一腫瘤中，少量細(xì)胞的靶抗原呈陰性，或表達(dá)的抗原非常弱，這些細(xì)胞就可能逃脫被破壞，因?yàn)椴荒芡ㄟ^(guò)抗體介導(dǎo)將細(xì)胞毒性藥物傳遞給這些特別的細(xì)胞?？朔@個(gè)問(wèn)題的一種可能方法是鑒定得到能誘導(dǎo)高水平細(xì)胞表面靶分子的藥物，寄希望于抗原陰性的靶腫瘤細(xì)胞將大量表達(dá)這些靶分子。
全反式-視黃酸(RA)是一種能在幾種骨髓樣和淋巴樣白血病細(xì)胞中誘導(dǎo)高水平CD38表面抗原表達(dá)的藥物。在這些細(xì)胞中視黃酸誘導(dǎo)的CD38表達(dá)是特異性、快速、劑量依賴性和高度敏感性的，即使視黃酸劑量低至10-13M，也誘導(dǎo)4倍的表達(dá)。視黃酸對(duì)CD38表達(dá)的誘導(dǎo)已顯示和RARα類視黃醇受體有關(guān)。RAR受體與RXR受體形成異二聚體；然后，RXR/RAR異二聚體與稱作視黃酸應(yīng)答元件(RARE’s)的DNA序列相互作用，這些序列和類視黃醇誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄有關(guān)。
CD38是一種45-kDa細(xì)胞表面蛋白質(zhì)，主要由造血(hematopoeitic)系統(tǒng)的早期祖細(xì)胞和成熟的活化細(xì)胞表達(dá)。它是一種跨膜糖蛋白，具有短N(yùn)-末端胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域和長(zhǎng)C-末端胞外結(jié)構(gòu)域。已顯示胞外結(jié)構(gòu)域是一種雙功能的酶，具有ADP-核糖核苷環(huán)化酶和ADP-核糖核苷水解酶活性，催化NAD+轉(zhuǎn)化成cADPR(環(huán)化酶)，并能進(jìn)一步將其水解成ADP-核糖(水解酶)。cADPR與鈣的胞內(nèi)儲(chǔ)藏活動(dòng)有關(guān)，這是一種細(xì)胞增殖、分化和凋亡的重要第二信使活性。據(jù)信CD38作為一種尚未得到鑒定的配體的受體，并通過(guò)與CD31相互作用，作為細(xì)胞黏附分子而起作用。用針對(duì)CD38的單克隆抗體激活其功能的實(shí)驗(yàn)已暗示CD38在成熟B淋巴細(xì)胞和骨髓樣白血病細(xì)胞的增殖，生發(fā)中心細(xì)胞凋亡的拯救，以及B-細(xì)胞祖細(xì)胞的基質(zhì)支持的培養(yǎng)物的生長(zhǎng)抑制，和細(xì)胞因子IL-6、IGN-g、GM-CSF和IL-10的誘導(dǎo)中都起到了作用。此外，已顯示髓樣白血病細(xì)胞中TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8轉(zhuǎn)錄增加的信號(hào)。
現(xiàn)有技術(shù)的缺陷是，缺乏一種方法來(lái)誘導(dǎo)靶分子的表達(dá)，用于腫瘤和其它致病細(xì)胞的免疫治療。本發(fā)明填補(bǔ)了本領(lǐng)域這種長(zhǎng)期存在的需要。
發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明證明了類視黃醇-誘導(dǎo)的CD38表達(dá)作為遞呈免疫毒素抗-CD38-白樹(shù)毒素(gelonin)的靶子的可能性。獲得的結(jié)果提示，用視黃酸處理白血病細(xì)胞，即使?jié)舛群艿?亞納摩爾)也能使這些細(xì)胞對(duì)免疫毒素-誘導(dǎo)的殺傷極端敏感。
本發(fā)明包括一種治療具有病理生理狀態(tài)的個(gè)體的方法，包括步驟如下給予所述個(gè)體一種藥理學(xué)有效量的藥物，該藥物能上調(diào)一種細(xì)胞靶的表達(dá)，和施用藥理學(xué)有效量的針對(duì)該上調(diào)的細(xì)胞靶的免疫毒素。
本發(fā)明還包括一種治療具有能對(duì)類視黃醇治療起反應(yīng)的病理生理狀態(tài)的個(gè)體的方法，包括步驟如下施給所述個(gè)體一種藥理學(xué)有效量的視黃酸代謝物和藥理學(xué)有效量的免疫毒素。
本發(fā)明的其它方面、特征和優(yōu)點(diǎn)將在本發(fā)明優(yōu)選例的描述后變得明顯。給出這些實(shí)施例是為了公開(kāi)。
附圖簡(jiǎn)述因此獲得了將變得清楚的本發(fā)明的上述特征、優(yōu)點(diǎn)和目的，以及其它方面的事情，并可詳細(xì)理解，可參照在附圖中闡明的某些實(shí)施例獲得在上文簡(jiǎn)述的本發(fā)明更具體的描述。這些附圖構(gòu)成了說(shuō)明書的一部分。然而需要注意，附圖闡明了本發(fā)明的優(yōu)選例，并不被視為限制了本發(fā)明的范圍。


圖1顯示了來(lái)自不同人組織的mRNA與放射性標(biāo)記的人CD38-特異性核酸探針雜交后的斑點(diǎn)印跡。僅在胸腺組織[成人(E5)和胚胎(G6)的]中觀察到相對(duì)較低的CD38mRNA表達(dá)，而在正常前列腺(C7)中觀察到更低水平的表達(dá)。
圖2顯示了5nM全反式視黃酸(RA)對(duì)于免疫毒素的細(xì)胞毒性的效果和加入遞增濃度的非偶聯(lián)抗-CD38單克隆抗體(IB4)的效果。點(diǎn)C表明單用免疫毒素的效果。+IT(+RA)顯示了5nM全反式視黃酸(RA)對(duì)免疫毒素的細(xì)胞毒性的作用。在其余樣品中，加入遞增濃度的IB4、免疫毒素和5nM全反式視黃酸(RA)。培養(yǎng)3日后，用MTS試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞活性。結(jié)果表示成％存活細(xì)胞。
圖3顯示了抗-CD38免疫毒素對(duì)HL-60的細(xì)胞毒性受視黃酸預(yù)處理的影響。HL-60細(xì)胞在視黃酸存在或不存在的條件下培育過(guò)夜。除去培養(yǎng)液，并洗滌細(xì)胞兩次后，再次在存在或不存在100倍過(guò)量的非偶聯(lián)抗-CD38單克隆抗體IB4的條件下，將細(xì)胞于遞增濃度的免疫毒素(表示成納克/孔)一起培養(yǎng)。3日后，用MTS試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞存活率，表示成％存活細(xì)胞。
圖4顯示了用免疫毒素或白樹(shù)毒素處理對(duì)HL-60細(xì)胞活性的作用。在遞增濃度的免疫毒素或白樹(shù)毒素(表示成納克/孔)中，存在或不存在5nM視黃酸的條件下培育HL-60細(xì)胞3日。用MTS試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞存活率，并在此表示成相對(duì)于對(duì)照樣品(無(wú)毒素)的細(xì)胞存活百分?jǐn)?shù)。
圖5顯示了遞增濃度的全反式視黃酸(RA)(nM級(jí))對(duì)細(xì)胞存活的作用。將HL-60細(xì)胞與免疫毒素或非偶聯(lián)的抗-CD38單克隆抗體一起，在不存在或存在遞增濃度的視黃酸(以nM顯示)條件下培養(yǎng)。3日后，用MTS試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞存活率，并表示成相對(duì)于未處理對(duì)照的細(xì)胞存活百分?jǐn)?shù)。
圖6A和6B顯示了遞增濃度的免疫毒素(表示成納克/孔)在存在或不存在5nM全反式視黃酸(RA)的條件下對(duì)不同細(xì)胞系(包括Daudi、THP-1、K562(對(duì)CD38的Ra-誘導(dǎo)表達(dá)有抗性)和表達(dá)RARα的HL60變株)細(xì)胞存活的作用。3日后，用MTS試驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞存活率，并表示成相對(duì)于未處理對(duì)照的細(xì)胞存活百分?jǐn)?shù)。
圖7顯示了對(duì)Doxo-抗性HL-60細(xì)胞免疫毒素誘導(dǎo)的殺傷，這種細(xì)胞對(duì)阿霉素誘導(dǎo)的殺傷有抗性。將細(xì)胞與遞增濃度的免疫毒素(表示成納克/孔)，在存在或不存在5nM RA的條件下培養(yǎng)，用MTS試驗(yàn)在3日后測(cè)定細(xì)胞存活率。
圖8顯示了對(duì)非Hodgkin淋巴瘤細(xì)胞系MZ(NHL)的免疫毒素介導(dǎo)的殺傷，這種細(xì)胞系具有CD38抗原的高基線表達(dá)。將細(xì)胞于遞增濃度的免疫毒素(表示成納克/孔)，在存在或不存在5nM RA的條件下培養(yǎng)。3日后，用MTS試驗(yàn)測(cè)試細(xì)胞存活率，并表示成％存活細(xì)胞。
圖9顯示了對(duì)HL60細(xì)胞系的視黃酸-抗性變株(HL60R)的細(xì)胞毒素介導(dǎo)的殺傷。這些細(xì)胞對(duì)視黃酸誘導(dǎo)的CD38抗原的表達(dá)具有抗性，因?yàn)樵谝朁S酸受體α(RARα)基因中有一個(gè)點(diǎn)突變。在不同條件下將該細(xì)胞系與遞增濃度的免疫毒素(納克/毫升)一起培養(yǎng)。3日后，用MTS試驗(yàn)測(cè)試細(xì)胞存活率，并表示成O.D.。視黃酸的存在不能增強(qiáng)對(duì)這些細(xì)胞的免疫毒素誘導(dǎo)的殺傷，因?yàn)檫@些細(xì)胞在對(duì)視黃酸處理的反應(yīng)中不能表達(dá)CD38抗原。
發(fā)明詳述免疫毒素定義為任何已和毒素(優(yōu)選細(xì)胞毒素)偶聯(lián)的免疫學(xué)分子，如抗體。
本發(fā)明涉及一種治療具有病理生理狀態(tài)的個(gè)體的方法，包括步驟如下施給所述個(gè)體一種藥理學(xué)有效量的制劑，它能上調(diào)一種細(xì)胞靶的表達(dá)。給藥后，再施用一種藥理學(xué)有效量的針對(duì)該細(xì)胞靶的免疫毒素。優(yōu)選的，所施用的制劑選自促分化劑、細(xì)胞因子、白細(xì)胞介素-2、腫瘤壞死因子、干擾素-α、干擾素-γ和肽激素。
在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明包括施用藥理學(xué)有效劑量的類視黃醇。優(yōu)選的，該類視黃醇能在細(xì)胞中誘導(dǎo)CD38抗原的表達(dá)。如果是這樣，再施用藥理學(xué)有效量的抗-CD38免疫毒素?？捎帽景l(fā)明該實(shí)施例的方法治療的代表性病理生理學(xué)狀態(tài)包括RARα選擇性急性骨髓性白血病、急性早幼粒細(xì)胞性白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
可用于本發(fā)明的方法的代表性視黃酸代謝物包括全反式視黃酸(RA)；9-順式視黃酸(9-順式RA)；(E)-4-[2-(5，6，7，8-四氫-5，5，8，8-四甲基-2-萘基)-1-丙烯基]苯甲酸(TTNPB)；(E)-4-[2-(5，6，7，8-四氫-3，5，5，8，8-五甲基-2-萘基)-1-丙烯基]苯甲酸(3-甲基TTNPB)；和其它可結(jié)合并激活RARα受體的類視黃醇。優(yōu)選施用的類視黃醇劑量是從約0.1mg/kg-2mg/kg。
本發(fā)明方法中所用的免疫毒素能特異性靶向表達(dá)CD38抗原的細(xì)胞。優(yōu)選免疫毒素含有針對(duì)CD38抗原的單克隆抗體，它和一毒素分子偶聯(lián)。雖然本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可用任何毒素替換，用于這些方法的優(yōu)選毒素是白樹(shù)毒素。雖然本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可替換以任何對(duì)CD38抗原特異性的單克隆抗體，但在本文中用IB4或IB6說(shuō)明本方法。優(yōu)選施用的免疫毒素劑量是0.05mg/kg-2mg/kg之間。
給出了下列例子，用于說(shuō)明本發(fā)明的各種實(shí)施例，不意味以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例1正常組織中的CD38表達(dá)主要限于胸腺通過(guò)將放射性標(biāo)記的CD38核酸探針和商品化(CLONTECH)組織特異性mRNA斑點(diǎn)印跡雜交，檢測(cè)了CD38的組織特異性。圖1顯示了雜交結(jié)果。觀察到CD38主要在胸腺中表達(dá)，在前列腺中的表達(dá)水平明顯低得多。
實(shí)施例2視黃酸(RA)通過(guò)提高CD38的表達(dá)增強(qiáng)了免疫毒素的細(xì)胞毒性作用。
將HL-60細(xì)胞單獨(dú)于免疫毒素，或在5nM視黃酸(RA)存在下一起培育。在與免疫毒素和視黃酸一起培育的細(xì)胞中加入遞增濃度的非偶聯(lián)IB4單克隆抗體。3日后，用MTS試驗(yàn)測(cè)定了細(xì)胞存活率。簡(jiǎn)單說(shuō)，以201比例混合6.5毫克/毫升MTS溶液[(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲氧基苯基)-2-(4-硫代苯基)-2H-四唑鎓]和0.5mM PMS(甲磺酸吩嗪)溶液。將20微升混合的MTS/PMS溶液置于96孔板的含有待測(cè)試細(xì)胞的樣品的各孔中。37℃在5％CO2氣氛中培育板1-4小時(shí)，然后通過(guò)讀取490納米處的吸光度測(cè)量活細(xì)胞的MTS細(xì)胞還原產(chǎn)生的甲量。圖2顯示了結(jié)果。
免疫毒素單獨(dú)對(duì)細(xì)胞(C)存活率的作用極小。然而，當(dāng)在5nM視黃酸存在下培育細(xì)胞和免疫毒素時(shí)，觀察到細(xì)胞存活率顯著下降。遞增濃度的非偶聯(lián)IB4單克隆抗體封阻了免疫毒素和視黃酸的作用；非偶聯(lián)IB4阻抑了該免疫毒素殺傷細(xì)胞的能力的事實(shí)證明，該免疫毒素和CD38表面標(biāo)記特異性相互作用，而視黃酸的作用是增加CD38抗原的表達(dá)。
實(shí)施例3全反式視黃酸(RA)的預(yù)處理增強(qiáng)了HL-60細(xì)胞的誘導(dǎo)殺傷。
在存在或不存在5nM全反式視黃酸的條件下預(yù)培育HL-60細(xì)胞過(guò)夜。洗滌細(xì)胞兩次，并在IB4非偶聯(lián)抗-CD38單克隆抗體的存在或不存在的條件下在遞增濃度的免疫毒素中培育。3日后，測(cè)試細(xì)胞存活率。圖3顯示了結(jié)果。
與全反式視黃酸預(yù)培育，然后用免疫毒素處理，比單用免疫毒素處理導(dǎo)致更多細(xì)胞死亡。過(guò)量100倍的非偶聯(lián)抗-CD38單克隆抗體IB4在兩種情況下都通過(guò)與免疫毒素競(jìng)爭(zhēng)和細(xì)胞上CD38標(biāo)記的結(jié)合，而封阻了免疫毒素的毒性。這些結(jié)果說(shuō)明全反式視黃酸(RA)導(dǎo)致細(xì)胞中的某些變化，使它們對(duì)免疫毒素更易感，而不是在靶細(xì)胞死亡中起到直接作用。
實(shí)施例4白樹(shù)毒素必須和抗-CD38抗體偶聯(lián)，才具有對(duì)靶細(xì)胞的毒性作用。
在存在或不存在5nM視黃酸的條件下，將HL-60細(xì)胞與遞增濃度的免疫毒素或白樹(shù)毒素一起培育3日。然后，用MTS試驗(yàn)測(cè)試細(xì)胞存活率。如圖4所見(jiàn)，在存在或不存在5nM視黃酸的情況下，白樹(shù)毒素單獨(dú)不具毒性作用。因此，白樹(shù)毒素的毒性作用依賴于它與抗-CD38單克隆抗體的偶聯(lián)，以將毒素傳遞給細(xì)胞。
實(shí)施例5甚至公稱水平的全反式視黃酸(RA)能導(dǎo)致免疫毒素的毒性提高。
將HL-60與免疫毒素或與抗體濃度遞增的非偶聯(lián)IB4單克隆抗體一起培育。圖5顯示甚至最低水平的全反式視黃酸(RA)(1nM)能導(dǎo)致靶細(xì)胞幾乎完全被免疫毒素殺死。用非偶聯(lián)單克隆抗體未觀察到該作用。該結(jié)果表明，在免疫毒素中與單克隆抗體偶聯(lián)的白樹(shù)毒素導(dǎo)致細(xì)胞死亡增加，而不是抗體本身的某些作用。
實(shí)施例6視黃酸能誘導(dǎo)各種細(xì)胞系中CD38標(biāo)記的表達(dá)。
在存在或不存在5nM全反式視黃酸(RA)的條件下，用遞增濃度的免疫毒素處理Daudi、THP-1、K562和HL60-RARα細(xì)胞系。3日后，用MTS試驗(yàn)檢測(cè)了細(xì)胞存活率，顯示于圖6。在THP-1和HL60-RARα細(xì)胞系中，全反式視黃酸誘導(dǎo)了細(xì)胞死亡，而在不存在全反式視黃酸的條件下培養(yǎng)的細(xì)胞大多不受免疫毒素的影響。在具有高CD38基線表達(dá)的Daudi細(xì)胞中，免疫毒素導(dǎo)致幾乎所有細(xì)胞死亡，不論是否存在視黃酸。另一方面，對(duì)Ra-誘導(dǎo)的CD38表達(dá)具有抗性的K562細(xì)胞不受免疫毒素的影響，不論是否存在視黃酸。
實(shí)施例7阿霉素抗性HL-60細(xì)胞中免疫毒素誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡將對(duì)阿霉素-誘導(dǎo)的殺傷具有抗性的HL-60亞克隆細(xì)胞單獨(dú)與免疫毒素或在5nM全反式視黃酸存在下一起培養(yǎng)。3日后，用MTS試驗(yàn)測(cè)試細(xì)胞存活率。圖7顯示了獲得的結(jié)果。在免疫毒素單獨(dú)存在下觀察到一些細(xì)胞死亡，但加入5nM全反式視黃酸大大增加了細(xì)胞死亡。
實(shí)施例8無(wú)論存存或不存在全反式視黃酸(RA)。免疫毒素殺傷具有高CD38基線表達(dá)的細(xì)胞。
在存在或不存在5nM全反式視黃酸的條件下，用遞增量的免疫毒素處理具有高CD38基線表達(dá)的MZ細(xì)胞，一種非Hodgkin淋巴瘤細(xì)胞系。加入免疫毒素導(dǎo)致高水平的細(xì)胞死亡，不論是否存在視黃酸(圖8)。這是強(qiáng)有力的證據(jù)，證明視黃酸通過(guò)提高不具有高CD38基線水平的其它細(xì)胞系的CD38水平，提高了免疫毒素的毒性。
實(shí)施例9視黃酸提高了許多淋巴樣腫瘤細(xì)胞中的CD38表達(dá)表1列出了抗-CD38結(jié)合毒素處理的可能靶。用5nM全反式視黃酸(RA)處理了許多不同的淋巴樣腫瘤細(xì)胞系。然后，用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)量未處理對(duì)處理細(xì)胞中的CD38表達(dá)。在急性骨髓性白血病(AML)、急性早幼粒細(xì)胞性白血病(APL)、淋巴瘤和骨髓瘤腫瘤細(xì)胞中觀察到CD38表達(dá)的顯著提高。CD38表達(dá)的增加范圍是2.5-20倍。因此，可將視黃酸用于所有這些腫瘤類型，來(lái)增加腫瘤細(xì)胞對(duì)免疫毒素治療的易損性。
表1抗-CD38結(jié)合毒素治療的可能靶細(xì)胞靶 基線CD38 RA處理后的CD38AML 50±10180±20APL 6±4 120±30淋巴瘤 80±20180±25骨髓瘤 60±20180±25 B細(xì)胞產(chǎn)生自身反應(yīng)性抗體類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞器官移植實(shí)施例10免疫毒素不影響細(xì)胞對(duì)全反式-視黃酸(RA)的抗性在存在或不存在5nM視黃酸的條件下，用免疫毒素處理具有賦予細(xì)胞對(duì)視黃酸作用有抗性的突變RARα基因的HL-60細(xì)胞。在這些細(xì)胞中，加入視黃酸對(duì)免疫毒素的毒性沒(méi)有影響。如圖9所示，在用全反式視黃酸(RA)、用非偶聯(lián)IB4和白樹(shù)毒素，或單用白樹(shù)毒素處理的細(xì)胞中未觀察到可估計(jì)的細(xì)胞死亡。這進(jìn)一步證明免疫毒素殺死受視黃酸影響的細(xì)胞，因?yàn)橐朁S酸誘導(dǎo)了免疫毒素的CD38靶表達(dá)的增加。
任何本說(shuō)明書中提到的專利和出版物表明了本發(fā)明涉及本領(lǐng)域技術(shù)人員的水平。這些專利和出版物在此引入以供參考，就像各出版物是具體并個(gè)別的納入以供參考一樣。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將不難理解本發(fā)明方法能很好的適合實(shí)施本發(fā)明的目的，并獲得所述的結(jié)果和優(yōu)點(diǎn)以及本文提到的這些。本發(fā)明的實(shí)施例和方法、程序、處理、分子和本文所述的具體化合物代表是優(yōu)選例，是示范性的，不是為了限制本發(fā)明的范圍。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，將會(huì)作出各種變化和其它用途，這些都包括在本發(fā)明的宗旨之中和權(quán)利要求的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種治療具有病理生理狀態(tài)的個(gè)體的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟a)施給所述個(gè)體一種藥理上有效劑量的藥劑，所述藥劑能上調(diào)某種細(xì)胞靶的表達(dá)；和b)施給同一個(gè)體一種藥理學(xué)上有效劑量的免疫毒素，所述免疫毒素針對(duì)被上調(diào)了的細(xì)胞靶。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述施用的藥劑選自促分化劑、細(xì)胞因子、白細(xì)胞介素-2、腫瘤壞死因子、干擾素-α、干擾素-γ和肽激素。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述制劑是一種類視黃醇，所述細(xì)胞靶是CD38抗原。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述病理生理狀態(tài)選自急性骨髓性白血病、急性早幼粒細(xì)胞性白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述類視黃醇選自全反式視黃酸；9-順式視黃酸；(E)-4-[2-(5，6，7，8-四氫-5，5，8，8-四甲基-2-萘基)-1-丙烯基]苯甲酸；(E)-4-[2-(5，6，7，8-四氫-3，5，5，8，8-五甲基-2-萘基)-1-丙烯基]苯甲酸。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，施用的所述類視黃醇劑量是約0.1毫克/公斤-2毫克/公斤。
7.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述免疫毒素特異性靶向表達(dá)CD38抗原的細(xì)胞。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述免疫毒素包含與一毒素分子偶聯(lián)的針對(duì)CD38抗原的單克隆抗體。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述毒素是白樹(shù)毒素。
10.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述單克隆抗體選自IB4或IB6。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，施用的所述免疫毒素劑量是約0.05毫克/公斤-2毫克/公斤之間。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥劑的用途,該藥劑能誘導(dǎo)高水平的細(xì)胞表面分子,向針對(duì)同一細(xì)胞表面分子的免疫毒素提供目標(biāo)。給出了特定的實(shí)施例,其中用全反式視黃酸(RA)在幾種骨髓樣和淋巴樣白血病細(xì)胞中誘導(dǎo)高水平CD38細(xì)胞表面抗原的表達(dá)。然后將CD38用作將植物毒素白樹(shù)毒素傳遞給白血病細(xì)胞的靶。用RA處理白血病細(xì)胞在原來(lái)CD38表達(dá)水平低的細(xì)胞中誘導(dǎo)了高水平的CD38。接著,RA－誘導(dǎo)的白血病細(xì)胞將變得對(duì)抗－CD38單克隆抗體與植物毒素白樹(shù)毒素偶聯(lián)而構(gòu)建的免疫毒素極端敏感。
文檔編號(hào)A61P35/02GK1343127SQ00802606
公開(kāi)日2002年4月3日 申請(qǐng)日期2000年1月7日 優(yōu)先權(quán)日1999年1月7日
發(fā)明者M·G·羅森布拉姆, K·梅達(dá) 申請(qǐng)人:研究發(fā)展基金會(huì)