一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及醫(yī)用食品領域，公開了一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，每100g中包含：鱈魚皮膠原蛋白肽粉3?5g，魷魚皮膠原蛋白肽粉7?9g，乳清蛋白粉5?6g，大豆蛋白粉4.5?5.5g，MCT脂肪10?12g，魚油5.2?5.6g，碳水化合物54?56g，以及其他維生素和微量元素等多種營養(yǎng)成分。本發(fā)明為醫(yī)療食品，適用于頜面外科病人；創(chuàng)傷、代謝應激病人、燒傷病人；持續(xù)性腹膜透析病人等。能夠輔助治療創(chuàng)面修復。
【專利說明】
一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品
技術領域
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)用食品領域，尤其涉及一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品。
【背景技術】
[0002]每年，都有很多人被燒傷，導致創(chuàng)傷燒傷的原因繁多，在醫(yī)院治療后，需要進行后期的持續(xù)修復。后期修復情況對病人身心造成巨大影響。
[0003]目前，一般對于燒傷后后期修復，一般是通過外敷的藥來進行修復，很少通過醫(yī)用食品來進行輔助治療。目前市場上關于創(chuàng)傷后期修復的食品，也都是保健品，無法作為醫(yī)用食品使用;保健食品營養(yǎng)配比還不夠合理，無需醫(yī)囑，只是盲目地進行營養(yǎng)攝入，不能起到輔助醫(yī)療作用。卻并不能有效用于創(chuàng)傷修復。因此，目前市場上缺少用于創(chuàng)傷修復輔助治療的醫(yī)用食品。醫(yī)用食品不同于藥品、普通食品、保健食品以及膳食補充劑。食品法典委員會(CAC)對醫(yī)用食品進行了定義:即需要特殊膳食管理的病人在醫(yī)生的指導下進行服用的一類具有特殊膳食用途的食品，屬于特殊膳食的一類。美國FDA對醫(yī)用食品提出三個必備要素:滿足特殊的營養(yǎng)需要;在營養(yǎng)醫(yī)師的指導下服用;適用于需要特殊膳食管理的人群。我國尚未對醫(yī)用食品定義。

【發(fā)明內容】

[0004]為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供了一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品。本發(fā)明為醫(yī)療食品，適用于頌面外科病人;創(chuàng)傷、代謝應激病人、燒傷病人;持續(xù)性腹膜透析病人等。能夠輔助治療創(chuàng)面修復。
[0005]本發(fā)明的具體技術方案為:一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，每10g中包含以下物質:
鱈魚皮膠原蛋白肽粉3_5g，魷魚皮膠原蛋白肽粉7_9g，乳清蛋白粉5_6g，大豆蛋白粉
4.5-5.5g，MCT脂肪 10-12g，魚油5.2-5.6g，碳水化合物54_56g，葉酸68_72yg，生物素7.4-
7.6yg，膽堿 98_102mg，泛酸 3.80-3.82mg，甘氨酸 566_568mg，精氨酸 376_380mg，脯氨酸446-45011^，丙氨酸410-41211^，異黃酮7.4-7.611^，紅棗提取物0.19-0.218，山楂提取物0.09-
0.IIg，L-肉堿48-52mg，卵磷脂98_102mg，山梨酸鉀48_52mg，聚山梨酸脂-80 18_22mg，維生素A 1200-1300IU，維生素D3 98-102IU，維生素E 10-12IU，維生素C 45.4-45.8mg，維生素BI 0.56-0.5811^，維生素82 0.65_0.6711^，維生素86 0.7_0.8mg，維生素K 28_32yg，維生素B12 2.26-2.30yg，以及含有微量元素的多種無機鹽。
[0006]其中所有所述無機鹽中微量元素的含量如下:鈣380-382mg，磷298-302mg，鎂156-158mg，鋅3.80-3.82mg，銅224_226mg，錳0.56-0.58mg，鈉254_256g，鉀440_448mg，氟0.9-
1.Img，碘37-38yg，鉻7_8yg，鉬12-13yg，砸 I.35-1.40yg。
[0007]本發(fā)明的創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品適用于頌面外科病人;創(chuàng)傷、代謝應激病人、燒傷病人;持續(xù)性腹膜透析病人等。用于術前營養(yǎng)補充、腸道凈化、接受手術后應激的營養(yǎng)支持，消化道特殊外科疾病時(愈合不全、消化道瘺和短腸綜合癥等)的營養(yǎng)支持或腸外營養(yǎng)過渡。嚴重創(chuàng)傷，消耗性疾病或手術后營養(yǎng)不良的營養(yǎng)補充和支持。各類創(chuàng)傷病人，肝膽疾患、腸瘺病人不能接受整蛋白質腸內營養(yǎng)支持。
[0008]本品中以鱈魚皮膠原蛋白肽粉、魷魚皮膠原蛋白肽粉和乳清蛋白粉為主要原料，具有較高的消化吸收性，維生素和微量元素協(xié)同作用，明顯提高抗氧化應激效果。
[0009]添加有鋅和紅棗、山楂提取物，能夠刺激食欲。精氨酸有助于減輕應激性膽固醇升高和胸腺損害。本品組分容易消化吸收，能夠滿足病人的能量需求和增加蛋白質需要量。較低色氨酸及高支鏈氨基酸組成的氮源，能減少氮丟失。
[0010]作為優(yōu)選，上述創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，每10g中包含以下物質: 鱈魚皮膠原蛋白肽粉4g，魷魚皮膠原蛋白肽粉Sg，乳清蛋白粉5.5g，大豆蛋白粉5g，MCT
脂肪llg，魚油5.4g，碳水化合物55g，葉酸70yg，生物素7.5yg，膽堿lOOmg，泛酸3.81mg，甘氨酸567mg，精氨酸378mg，脯氨酸448mg，丙氨酸41 Img，異黃酮7.5mg，紅率提取物0.2g，山楂提取物0.Ig，L-肉堿50mg，卵磷脂10mg，山梨酸鉀50mg，聚山梨酸脂-80 20mg，維生素A1250IU，維生素D3 100IU，維生素E 11IU，維生素C 45.68mg，維生素BI 0.57mg，維生素B20.66mg，維生素B6 0.75mg，維生素K 30yg，維生素B12 2.28yg，以及含有微量元素的多種無機鹽。
[0011]其中所有所述無機鹽中微量元素的含量如下:鈣381mg，磷300mg，鎂157mg，鋅3.8111^，銅22511^，錳0.5711^，鈉2558，鉀44411^，氟111^，碘37.548，鉻7.548，鉬12.548，砸
I.375ug0
[0012]作為優(yōu)選，所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200_1000Da區(qū)間內占比90%以上;所述魷魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200-800Da以內占比90%以上。
[0013]水產(chǎn)動物的膠原蛋白肽在某個分子量區(qū)間內具有較好的增強創(chuàng)面修復的效果，但是不同水產(chǎn)動物的膠原蛋白肽最佳分子量區(qū)間大為不同，本
【申請人】在經(jīng)過大量實驗以及創(chuàng)造性研究后，發(fā)現(xiàn)將分子量在200-1000Da區(qū)間的鱈魚膠原蛋白與分子量在200-800Da魷魚皮膠原蛋白肽進行特定比例的復配后，能夠產(chǎn)生協(xié)同作用，對輔助創(chuàng)傷修復具有很好的效果O
[0014]作為優(yōu)選，所述碳水化合物選自麥芽糊精、木薯淀粉、玉米淀粉、藕粉中的至少兩種。
[0015]作為優(yōu)選，所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉和所述魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備方法如下:
a、原料解凍清洗:對魚皮進行流水解凍，解凍時間為2_5h;完全解凍后將魚皮洗凈。原料應該保持新鮮、清潔、無異味。
[0016]b、原料預處理:將魚皮添加到5-10倍濃度為3_5wt%的氫氧化鈉溶液中，在20-30°C下脫脂4_6h，然后取魚皮用水洗凈。
[0017]C、蒸煮熬膠:將魚皮在90-100 °C下進行蒸煮熬膠8_12h，取生成的魚皮膠，并對魚皮膠通過離心處理與油脂分離，離心速率為1000r/min。
[0018]d、酶解:將魚皮膠添加到含有中性蛋白酶的酶解液中進行酶解;其中中性蛋白酶的濃度為0.05-0.25wt%，酶解液質量為魚皮膠質量的2-4倍，酶解溫度為30-45°C，酶解液pH至控制在6-8，酶解時間為30-60min。
[0019]e、炭脫、板框過濾:向酶解液中添加質量為酶解液1-2#%的活性炭，并將酶解液加熱到70-80°C，脫色30-50min;將脫色后的酶解液轉移至板框過濾池內進行過濾，取澄清液。
[0020]f、分離純化:將澄清液轉移至泡沫分離柱中進行鼓氣起泡，并收集泡沫液，，在鼓氣的同時向泡沫分離柱中注水;鼓氣速率為3-5L/min，注水速率為0.1-0.3L/min，泡沫分離柱中液體的裝載高度與泡沫分離柱內徑比為8-10:1，澄清液溫度保持在25-35°C ;待收集的泡沫液滅泡后，用離子交換器對泡沫液進行重金屬分離；向重金屬分離后的泡沫液中添加質量為泡沫液1-2%的磁性親和微球并分散均勻，靜置親和吸附50-70min后利用磁場使磁性親和微球聚集;分離出磁性親和微球后，用pH值為7.2的Tris-HCl緩沖液對磁性親和微球進行洗脫，再次利用磁場分離出磁性親和微球后，得到洗脫液，將洗脫液在75-85°C下儲存?zhèn)溆谩?br>[0021]板框過濾后澄清液中的不溶性雜質基本分離完畢，基本只存在溶解性雜質以及重金屬離子等。對澄清液進行泡沫分離純化，由于蛋白物質具有一定的表面活性，能夠在液體氣泡后聚集在泡沫表面，收集泡沫液，能夠將蛋白物質與其他物質進行分離。在泡沫分離過程中，由于泡沫分離柱中水分的不斷變少，使得液體中蛋白物質的濃度升高，導致濃度超過臨界膠束濃度，從而容易將其他可溶性雜質附帶在泡沫表面，影響分離效果，進行注水能夠有效維持液體中蛋白濃度。用離子交換器能夠對泡沫液中的一同附著的重金屬進行分離，再用磁性親和微球對泡沫液中的目標蛋白物質進行親和吸附，使得膠原蛋白肽的純度更尚O
[0022]g、濃縮:將洗脫液先后輸入雙效濃縮鍋和四效濃縮鍋中進行濃縮，制得濃縮液，所述濃縮液的折光度控制在5-6，濃縮后濃縮液在50-60 0C下儲存。
[0023]h、膜過濾:將濃縮液通過二級0.22微米膜過濾器進行除雜除菌;其中膜過濾溫度小于45°C，一級過濾壓力小于0.25MPa，二級過濾壓力小于0.4MPa。
[0024]1、多肽分級:采用超濾膜或納濾膜對膜過濾后的濃縮液按分子量進行分離，得到目標分子量的膠原蛋白肽。
[0025]j、噴霧干燥:對膠原蛋白肽進行噴霧干燥，制得膠原蛋白肽粉;噴霧溫度為80-90°C，噴霧干燥后水產(chǎn)膠原蛋白肽粉的含水率小于等于5wt%。
[0026]本發(fā)明制備的鱈魚皮膠原蛋白肽粉和所述魷魚皮膠原蛋白肽粉，純度高，得率高，分子量分布區(qū)間小，在目標分子量區(qū)間內的膠原蛋白肽含量尚。
[0027]作為優(yōu)選，在魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用納濾膜截留分子量在SOODa以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-800Da之間的膠原蛋白肽;在鱈魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用超濾膜截留分子量在100Da以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-1000Da之間的膠原蛋白肽。
[0028]作為優(yōu)選，所述磁性親和微球由以下方法制得:將海藻酸鈉、聚乙二醇、殼聚糖、正庚烷、乙酸、水按質量比2-3:1: 2:0.5:3-5:100混合溶解，攪拌均勻后制得混合液A;向混合液A中添加混合液A質量4-6%的四氧化三鐵磁粉并分散均勻，得到混合液B;對混合液B進行超聲波分散，同時向混合液B中勻速滴加混合液B質量40-60%的乳化液，得到混合液C;先后向混合液C中添加混合液C質量0.1-0.2%的98wt%的戊二醛和混合液C質量0.5_1倍的2.5-
3.5￥丨％的氯化鈣溶液，充分攪拌，靜置1-2h，生成磁性微球;利用磁場對液體中磁性微球進行聚集，取出磁性微球后進行清洗、干燥;將磁性微球浸泡在水中溶脹15-25min，然后取出磁性微球并添加到活化液中在35-45°C下活化40-80min，磁性微球與活化液的固液比為
0.5-1.0g/mL;活化后取出磁性微球并洗凈，將磁性微球與肝素按質量比1.5-2.5:1進行混合，得到懸浮液，將懸浮液pH值調節(jié)至4-5，然后向懸浮液中添加懸浮液體積1.5-2.5倍的3wt%的1-乙基-3-二甲氨丙基-碳二亞胺，在4 °C下靜置12_18h。生成磁性未和微球，最后從懸浮液中取出磁性親和微球，洗凈、干燥，備用。
[0029]本發(fā)明的磁性微球，以四氧化三鐵磁粉為磁核，以海藻酸鈉、聚乙二醇、殼聚糖為磁核的主要包衣材料，以正庚烷為致孔劑，添加戊二醛和氯化鈣溶液后，交聯(lián)成型，具有多孔性，比表面積大，吸附容量大，分散性佳，粒徑均一性好。
[0030]作為優(yōu)選，所述乳化液為體積占比為30-40%的司盤-80無水乙醇混合液，乳化液在10-20min內滴加完畢。
[0031]作為優(yōu)選，所述活化液由lmol/L的氫氧化鈉溶液、二甲基亞砜和環(huán)氧氯丙烷按體積比4-6:1:0.5-0.7組成。
[0032]作為優(yōu)選，所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉和所述魷魚皮膠原蛋白肽粉在制備過程中，在多肽分級之后、噴霧干燥之前，將目標分子量的膠原蛋白肽稀釋10-30倍，向稀釋液中添加含鈣無機鹽，在35-45 0C下螯合10-20min，接著向稀釋液中添加含砸無機鹽，在35-45 °C下螯合10-20min;其中含鈣無機鹽、含砸無機鹽的質量分別為稀釋液質量的0.1-0.2%。
[0033]對膠原蛋白肽表面進行修飾，能夠使其含有微量元素，與微量元素螯合后，吸收性好。
[0034]與現(xiàn)有技術對比，本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明為醫(yī)療食品，適用于頌面外科病人;創(chuàng)傷、代謝應激病人、燒傷病人;持續(xù)性腹膜透析病人等。能夠輔助治療創(chuàng)面修復。
【具體實施方式】
[0035]下面結合實施例對本發(fā)明作進一步的描述。
[0036]實施例1
一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，每10g中包含以下物質:
鱈魚皮膠原蛋白肽粉4g，魷魚皮膠原蛋白肽粉Sg，乳清蛋白粉5.5g，大豆蛋白粉5g，MCT脂肪llg，魚油5.4g，麥芽糊精25g，木薯淀粉10g，玉米淀粉10g，藕粉10g，葉酸70yg，生物素7.5yg，膽堿100mg，泛酸3.81mg，甘氨酸567mg，精氨酸378mg，脯氨酸448mg，丙氨酸411mg，異黃酮7.5mg，紅率提取物0.2g，山楂提取物0.lg,L-肉堿50mg，卵磷脂10mg，山梨酸鉀50mg，聚山梨酸脂-80 20mg，維生素A 1250IU，維生素D3 100IU，維生素E 11IU，維生素C45.68mg，維生素BI 0.57mg，維生素B2 0.66mg，維生素B6 0.75mg，維生素K 30yg，維生素B12 2.28yg，以及含有微量元素的多種無機鹽。
[0037]其中所有所述無機鹽中微量元素的含量如下:鈣381mg，磷300mg，鎂157mg，鋅3.8111^，銅22511^，錳0.5711^，鈉2558，鉀44411^，氟111^，碘37.548，鉻7.548，鉬12.548，砸1.375yg0
[0038]所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200_1000Da區(qū)間內占比90%以上;所述魷魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200-800Da以內占比90%以上。
[0039]所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉和所述魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備方法如下:
a、原料解凍清洗:對魚皮進行流水解凍，解凍時間為3.5h;完全解凍后將魚皮洗凈。
[0040]b、原料預處理:將魚皮添加到7.5倍濃度為4wt%的氫氧化鈉溶液中，在25°C下脫脂5h，然后取魚皮用水洗凈。
[0041 ] c、蒸煮熬膠:將魚皮在95 °C下進行蒸煮熬膠1h，取生成的魚皮膠，并對魚皮膠通過離心處理與油脂分離，離心速率為1000r/min。
[0042]d、酶解:將魚皮膠添加到含有中性蛋白酶的酶解液中進行酶解;其中中性蛋白酶的濃度為0.15wt%，酶解液質量為魚皮膠質量的3倍，酶解溫度為38°C，酶解液pH至控制在6-8，酶解時間為45min。
[0043]e、炭脫、板框過濾:向酶解液中添加質量為酶解液1.5被％的活性炭，并將酶解液加熱到75 °C，脫色40min;將脫色后的酶解液轉移至板框過濾池內進行過濾，取澄清液。
[0044]f、分離純化:將澄清液轉移至泡沫分離柱中進行鼓氣起泡，并收集泡沫液，，在鼓氣的同時向泡沫分離柱中注水;鼓氣速率為4L/min，注水速率為0.2L/min，泡沫分離柱中液體的裝載高度與泡沫分離柱內徑比為9:1，澄清液溫度保持在30°C ;待收集的泡沫液滅泡后，用離子交換器對泡沫液進行重金屬分離；向重金屬分離后的泡沫液中添加質量為泡沫液1-2%的磁性親和微球并分散均勻，靜置親和吸附50-70min后利用磁場使磁性親和微球聚集;分離出磁性親和微球后，用pH值為7.2的Tris-HCl緩沖液對磁性親和微球進行洗脫，再次利用磁場分離出磁性親和微球后，得到洗脫液，將洗脫液在80 °C下儲存?zhèn)溆谩?br>[0045]g、濃縮:將洗脫液先后輸入雙效濃縮鍋和四效濃縮鍋中進行濃縮，制得濃縮液，所述濃縮液的折光度控制在5.5，濃縮后濃縮液在55 °C下儲存。
[0046]h、膜過濾:將濃縮液通過二級0.22微米膜過濾器進行除雜除菌;其中膜過濾溫度小于45°C，一級過濾壓力小于0.25MPa，二級過濾壓力小于0.4MPa。
[0047]1、多肽分級:采用超濾膜或納濾膜對膜過濾后的濃縮液按分子量進行分離，得到目標分子量的膠原蛋白肽。
[0048]j、噴霧干燥:對膠原蛋白肽進行噴霧干燥，制得水產(chǎn)膠原蛋白肽粉;噴霧溫度為80-90°C，噴霧干燥后水產(chǎn)膠原蛋白肽粉的含水率小于等于5wt%。
[0049]在魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用納濾膜截留分子量在SOODa以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-800Da之間的膠原蛋白肽;在鱈魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用超濾膜截留分子量在100Da以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-1000Da之間的膠原蛋白肽。
[0050]所述磁性親和微球由以下方法制得:將海藻酸鈉、聚乙二醇、殼聚糖、正庚烷、乙酸、水按質量比2.5:1: 2:0.5:4:100混合溶解，攪拌均勻后制得混合液A;向混合液A中添加混合液A質量5%的四氧化三鐵磁粉并分散均勻，得到混合液B;對混合液B進行超聲波分散，同時向混合液B中勻速滴加混合液B質量50%的乳化液，乳化液在15min內滴加完畢，得到混合液C;先后向混合液C中添加混合液C質量0.15%的98被％的戊二醛和混合液C質量0.75倍的3wt%的氯化鈣溶液，充分攪拌，靜置1.5h，生成磁性微球;利用磁場對液體中磁性微球進行聚集，取出磁性微球后進行清洗、干燥;將磁性微球浸泡在水中溶脹20min，然后取出磁性微球并添加到活化液中在400C下活化60min，磁性微球與活化液的固液比為0.75g/mL;活化后取出磁性微球并洗凈，將磁性微球與肝素按質量比2:1進行混合，得到懸浮液，將懸浮液pH值調節(jié)至4-5，然后向懸浮液中添加懸浮液體積2倍的3被％的1_乙基-3-二甲氨丙基-碳二亞胺，在4 °C下靜置15h。生成磁性親和微球，最后從懸浮液中取出磁性親和微球，洗凈、干燥，備用。
[0051]其中，所述乳化液為體積占比為35%的司盤-80無水乙醇混合液。所述活化液由lmol/L的氫氧化鈉溶液、二甲基亞砜和環(huán)氧氯丙烷按體積比5:1:0.6組成。
[0052]實施例2
一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，每10g中包含以下物質:
鱈魚皮膠原蛋白肽粉3g，魷魚皮膠原蛋白肽粉9g，乳清蛋白粉6g，大豆蛋白粉5.5g，MCT脂肪10g，魚油5.6g，麥芽糊精34g，木薯淀粉10g，藕粉10g，葉酸68yg，生物素7.4yg，膽堿98mg，泛酸3.80mg，甘氨酸566mg，精氨酸376mg，脯氨酸446mg，丙氨酸410mg，異黃酮7.4mg，紅率提取物0.19g，山楂提取物0.09g，L-肉堿48mg，卵磷脂98mg，山梨酸鉀48mg，聚山梨酸脂-80 18mg;，維生素A 1200IU，維生素D3 98IU，維生素E 10IU，維生素C 45.4mg，維生素BI
0.56mg，維生素B2 0.65mg，維生素B6 0.7mg，維生素K 28yg，維生素B12 2.26yg，以及含有微量元素的多種無機鹽。
[0053]其中所有所述無機鹽中微量元素的含量如下:鈣380mg，磷298mg，鎂156mg，鋅3.80mg，銅224mg，錳0.56mg，鈉254g，鉀440mg，氟0.9mg，碘37yg，鉻7yg，鉬12yg，砸 I.35yg。
[0054]所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200_1000Da區(qū)間內占比90%以上;所述魷魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200-800Da以內占比90%以上。
[0055]所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉和所述魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備方法如下:
a、原料解凍清洗:對魚皮進行流水解凍，解凍時間為2h;完全解凍后將魚皮洗凈。
[0056]b、原料預處理:將魚皮添加到5倍濃度為5wt%的氫氧化鈉溶液中，在20°C下脫脂6h，然后取魚皮用水洗凈。
[0057]c、蒸煮熬膠:將魚皮在90 °C下進行蒸煮熬膠12h，取生成的魚皮膠，并對魚皮膠通過離心處理與油脂分離，離心速率為1000r/min。
[0058]d、酶解:將魚皮膠添加到含有中性蛋白酶的酶解液中進行酶解;其中中性蛋白酶的濃度為0.05wt%，酶解液質量為魚皮膠質量的4倍，酶解溫度為300C，酶解液pH至控制在6-8，酶解時間為60min。
[0059]e、炭脫、板框過濾:向酶解液中添加質量為酶解液1的%的活性炭，并將酶解液加熱到70 V，脫色50min;將脫色后的酶解液轉移至板框過濾池內進行過濾，取澄清液。
[0060]f、分離純化:將澄清液轉移至泡沫分離柱中進行鼓氣起泡，并收集泡沫液，，在鼓氣的同時向泡沫分離柱中注水;鼓氣速率為3L/min，注水速率為0.1L/min，泡沫分離柱中液體的裝載高度與泡沫分離柱內徑比為8:1，澄清液溫度保持在25°C ;待收集的泡沫液滅泡后，用離子交換器對泡沫液進行重金屬分離；向重金屬分離后的泡沫液中添加質量為泡沫液1%的磁性親和微球并分散均勻，靜置親和吸附50min后利用磁場使磁性親和微球聚集;分離出磁性親和微球后，用pH值為7.2的Tris-HCl緩沖液對磁性親和微球進行洗脫，再次利用磁場分離出磁性親和微球后，得到洗脫液，將洗脫液在75 °C下儲存?zhèn)溆谩?br>[0061 ] g、濃縮:將洗脫液先后輸入雙效濃縮鍋和四效濃縮鍋中進行濃縮，制得濃縮液，所述濃縮液的折光度控制在5，濃縮后濃縮液在50 0C下儲存。
[0062]h、膜過濾:將濃縮液通過二級0.22微米膜過濾器進行除雜除菌;其中膜過濾溫度小于45°C，一級過濾壓力小于0.25MPa，二級過濾壓力小于0.4MPa。
[0063]1、多肽分級:采用超濾膜或納濾膜對膜過濾后的濃縮液按分子量進行分離，得到目標分子量的膠原蛋白肽。將目標分子量的膠原蛋白肽稀釋20倍，向稀釋液中添加含鈣無機鹽，在40 °C下螯合15min，接著向稀釋液中添加含砸無機鹽，在40 °C下螯合15min;其中含鈣無機鹽、含砸無機鹽的質量分別為稀釋液質量的0.15%。
[0064]j、噴霧干燥:對膠原蛋白肽進行噴霧干燥，制得水產(chǎn)膠原蛋白肽粉;噴霧溫度為80-90°C，噴霧干燥后水產(chǎn)膠原蛋白肽粉的含水率小于等于5wt%。
[0065]在魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用納濾膜截留分子量在SOODa以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-800Da之間的膠原蛋白肽;在鱈魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用超濾膜截留分子量在100Da以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-1000Da之間的膠原蛋白肽。
[0066]所述磁性親和微球由以下方法制得:將海藻酸鈉、聚乙二醇、殼聚糖、正庚烷、乙酸、水按質量比2:1:2:0.5:3:100混合溶解，攪拌均勻后制得混合液A;向混合液A中添加混合液A質量4%的四氧化三鐵磁粉并分散均勻，得到混合液B;對混合液B進行超聲波分散，同時向混合液B中勻速滴加混合液B質量40%的乳化液，乳化液在I Omin內滴加完畢，得到混合液C;先后向混合液C中添加混合液C質量0.1%的98wt%的戊二醛和混合液C質量0.5倍的
3.5wt%的氯化鈣溶液，充分攪拌，靜置Ih，生成磁性微球;利用磁場對液體中磁性微球進行聚集，取出磁性微球后進行清洗、干燥;將磁性微球浸泡在水中溶脹15min，然后取出磁性微球并添加到活化液中在35 °C下活化SOmin，磁性微球與活化液的固液比為0.5g/mL;活化后取出磁性微球并洗凈，將磁性微球與肝素按質量比1.5:1進行混合，得到懸浮液，將懸浮液pH值調節(jié)至4-5，然后向懸浮液中添加懸浮液體積1.5倍的3wt%的1-乙基-3-二甲氨丙基-碳二亞胺，在4 0C下靜置12h ο生成磁性親和微球，最后從懸浮液中取出磁性親和微球，洗凈、干燥，備用。
[0067]其中，所述乳化液為體積占比為30%的司盤-80無水乙醇混合液。所述活化液由lmol/L的氫氧化鈉溶液、二甲基亞砜和環(huán)氧氯丙烷按體積比4:1:0.5組成。
[0068]實施例3
一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，每10g中包含以下物質:
鱈魚皮膠原蛋白肽粉5g，魷魚皮膠原蛋白肽粉7g，乳清蛋白粉5g，大豆蛋白粉4.5g，MCT脂肪12g，魚油5.2g，麥芽糊精36g，木薯淀粉10g，玉米淀粉10g，葉酸72yg，生物素7.6yg，膽堿102mg，泛酸3.82mg，甘氨酸568mg，精氨酸380mg，脯氨酸450mg，丙氨酸412mg，異黃酮7.61^，紅棗提取物0.218，山楂提取物0.118兒-肉堿5211^，卵磷脂10211^，山梨酸鉀5211^，聚山梨酸脂-80 22mg;，維生素A 1300IU，維生素D3 102IU，維生素E 12IU，維生素C 45.8mg，維生素BI 0.58mg，維生素B2 0.67mg，維生素B6 0.8mg，維生素K 32yg，維生素B12 2.30yg,以及含有微量元素的多種無機鹽。
[0069]其中所有所述無機鹽中微量元素的含量如下:鈣382mg，磷302mg，鎂158mg，鋅
3.82mg，銅226mg，錳0.58mg，鈉256g，鉀448mg，氟I.Img，碘38yg，鉻8yg，鉬13yg，砸 I.40yg。
[0070]所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200_1000Da區(qū)間內占比90%以上;所述魷魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200-800Da以內占比90%以上。
[0071]所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉和所述魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備方法如下:a、原料解凍清洗:對魚皮進行流水解凍，解凍時間為5h;完全解凍后將魚皮洗凈。
[0072]b、原料預處理:將魚皮添加到10倍濃度為3的％的氫氧化鈉溶液中，在300C下脫脂4h，然后取魚皮用水洗凈。
[0073]c、蒸煮熬膠:將魚皮在100 °C下進行蒸煮熬膠Sh，取生成的魚皮膠，并對魚皮膠通過離心處理與油脂分離，離心速率為1000r/min。
[0074]d、酶解:將魚皮膠添加到含有中性蛋白酶的酶解液中進行酶解;其中中性蛋白酶的濃度為0.25wt%，酶解液質量為魚皮膠質量的倍，酶解溫度為45°C，酶解液pH至控制在6-8，酶解時間為30min。
[0075]e、炭脫、板框過濾:向酶解液中添加質量為酶解液2的%的活性炭，并將酶解液加熱到80 V，脫色30min;將脫色后的酶解液轉移至板框過濾池內進行過濾，取澄清液。
[0076]f、分離純化:將澄清液轉移至泡沫分離柱中進行鼓氣起泡，并收集泡沫液，，在鼓氣的同時向泡沫分離柱中注水;鼓氣速率為5L/min，注水速率為0.3L/min，泡沫分離柱中液體的裝載高度與泡沫分離柱內徑比為10:1，澄清液溫度保持在35°C ;待收集的泡沫液滅泡后，用離子交換器對泡沫液進行重金屬分離；向重金屬分離后的泡沫液中添加質量為泡沫液2%的磁性親和微球并分散均勻，靜置親和吸附70min后利用磁場使磁性親和微球聚集;分離出磁性親和微球后，用pH值為7.2的Tris-HCl緩沖液對磁性親和微球進行洗脫，再次利用磁場分離出磁性親和微球后，得到洗脫液，將洗脫液在85 °C下儲存?zhèn)溆谩?br>[0077]g、濃縮:將洗脫液先后輸入雙效濃縮鍋和四效濃縮鍋中進行濃縮，制得濃縮液，所述濃縮液的折光度控制在6，濃縮后濃縮液在60°C下儲存。
[0078]h、膜過濾:將濃縮液通過二級0.22微米膜過濾器進行除雜除菌;其中膜過濾溫度小于45°C，一級過濾壓力小于0.25MPa，二級過濾壓力小于0.4MPa。
[0079]1、多肽分級:采用超濾膜或納濾膜對膜過濾后的濃縮液按分子量進行分離，得到目標分子量的膠原蛋白肽。將目標分子量的膠原蛋白肽稀釋30倍，向稀釋液中添加含鈣無機鹽，在45 °C下螯合I Omin，接著向稀釋液中添加含砸無機鹽，在45 °C下螯合1min;其中含鈣無機鹽、含砸無機鹽的質量分別為稀釋液質量的0.2%。
[0080]j、噴霧干燥:對膠原蛋白肽進行噴霧干燥，制得水產(chǎn)膠原蛋白肽粉;噴霧溫度為80-90°C，噴霧干燥后水產(chǎn)膠原蛋白肽粉的含水率小于等于5wt%。
[0081]在魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用納濾膜截留分子量在SOODa以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-800Da之間的膠原蛋白肽;在鱈魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用超濾膜截留分子量在100Da以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-1000Da之間的膠原蛋白肽。
[0082]所述磁性親和微球由以下方法制得:將海藻酸鈉、聚乙二醇、殼聚糖、正庚烷、乙酸、水按質量比3:1:2:0.5: 5:100混合溶解，攪拌均勻后制得混合液A;向混合液A中添加混合液A質量6%的四氧化三鐵磁粉并分散均勻，得到混合液B;對混合液B進行超聲波分散，同時向混合液B中勻速滴加混合液B質量60%的乳化液，乳化液在20min內滴加完畢，得到混合液C;先后向混合液C中添加混合液C質量0.2%的98wt%的戊二醛和混合液C質量I倍的2.5wt%的氯化鈣溶液，充分攪拌，靜置2h，生成磁性微球;利用磁場對液體中磁性微球進行聚集，取出磁性微球后進行清洗、干燥;將磁性微球浸泡在水中溶脹25min，然后取出磁性微球并添加到活化液中在450C下活化40min，磁性微球與活化液的固液比為1.0g/mL;活化后取出磁性微球并洗凈，將磁性微球與肝素按質量比2.5:1進行混合，得到懸浮液，將懸浮液pH值調節(jié)至4-5，然后向懸浮液中添加懸浮液體積2.5倍的3wt%的1-乙基-3-二甲氨丙基-碳二亞胺，在4 0C下靜置18h。生成磁性親和微球，最后從懸浮液中取出磁性親和微球，洗凈、干燥，備用。
[0083]其中，所述乳化液為體積占比為40%的司盤-80無水乙醇混合液。所述活化液由lmol/L的氫氧化鈉溶液、二甲基亞砜和環(huán)氧氯丙烷按體積比6:1:0.7組成。
[0084]本發(fā)明中所用原料、設備，若無特別說明，均為本領域的常用原料、設備;本發(fā)明中所用方法，若無特別說明，均為本領域的常規(guī)方法。
[0085]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例，并非對本發(fā)明作任何限制，凡是根據(jù)本發(fā)明技術實質對以上實施例所作的任何簡單修改、變更以及等效變換，均仍屬于本發(fā)明技術方案的保護范圍。
【主權項】
1.一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于每10g中包含以下物質: 鱈魚皮膠原蛋白肽粉3-5g，魷魚皮膠原蛋白肽粉7-9g，乳清蛋白粉5-6g，大豆蛋白粉4.5-5.5g，MCT脂肪 10-12g，魚油5.2-5.6g，碳水化合物54_56g，葉酸68_72yg，生物素7.4-7.6yg，膽堿 98_102mg，泛酸 3.80-3.82mg，甘氨酸 566_568mg，精氨酸 376_380mg，脯氨酸446-45011^，丙氨酸410-41211^，異黃酮7.4-7.611^，紅棗提取物0.19-0.218，山楂提取物0.09-0.IIg，L-肉堿48-52mg，卵磷脂98_102mg，山梨酸鉀48_52mg，聚山梨酸脂-80 18_22mg;，維生素A 1200-1300IU，維生素D3 98-102IU，維生素E 10-12IU，維生素C 45.4_45.8mg，維生素BI 0.56-0.5811^，維生素82 0.65_0.6711^，維生素86 0.7_0.8mg，維生素 K 28_32yg，維生素B12 2.26-2.30yg，以及含有微量元素的多種無機鹽； 其中所有所述無機鹽中微量元素的含量如下:鈣380-382mg，磷298-302mg，鎂156-158mg，鋅3.80-3.82mg，銅224_226mg，錳0.56-0.58mg，鈉254_256g，鉀440_448mg，氟0.9-1.Img，碘37-38yg，鉻7_8yg，鉬12-13yg，砸 I.35-1.40yg。2.如權利要求1所述的一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于，每10g中包含以下物質: 鱈魚皮膠原蛋白肽粉4g，魷魚皮膠原蛋白肽粉Sg，乳清蛋白粉5.5g，大豆蛋白粉5g，MCT脂肪llg，魚油5.4g，碳水化合物55g，葉酸70yg，生物素7.5yg，膽堿lOOmg，泛酸3.81mg，甘氨酸567mg，精氨酸378mg，脯氨酸448mg，丙氨酸41 Img，異黃酮7.5mg，紅率提取物0.2g，山楂提取物0.Ig，L-肉堿50mg，卵磷脂10mg，山梨酸鉀50mg，聚山梨酸脂-80 20mg，維生素A1250IU，維生素D3 100IU，維生素E 11IU，維生素C 45.68mg，維生素BI 0.57mg，維生素B20.66mg，維生素B6 0.75mg，維生素K 30yg，維生素B12 2.28yg，以及含有微量元素的多種無機鹽； 其中所有所述無機鹽中微量元素的含量如下:鈣38111^，磷30011^，鎂15711^，鋅3.8111^，銅225mg，錳0.57mg，鈉255g，鉀444mg，氟Img，碘37.5yg，鉻7.5yg，鉬12.5yg，砸 I.375yg。3.如權利要求1或2所述的一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于，所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200-1000Da區(qū)間內占比90%以上;所述魷魚皮膠原蛋白肽粉中，分子量在200-800Da以內占比90%以上。4.如權利要求1所述的一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于，所述碳水化合物選自麥芽糊精、木薯淀粉、玉米淀粉、藕粉中的至少兩種。5.如權利要求1所述的一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于，所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉和所述魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備方法如下: a、原料解凍清洗:對魚皮進行流水解凍，解凍時間為2-5h;完全解凍后將魚皮洗凈； b、原料預處理:將魚皮添加到5-10倍濃度為3-5wt%的氫氧化鈉溶液中，在20-30°C下脫脂4-6h，然后取魚皮用水洗凈； c、蒸煮熬膠:將魚皮在90-100°C下進行蒸煮熬膠8-12h，取生成的魚皮膠，并對魚皮膠通過離心處理與油脂分離，離心速率為1000r/min; d、酶解:將魚皮膠添加到含有中性蛋白酶的酶解液中進行酶解;其中中性蛋白酶的濃度為0.05-0.25wt%，酶解液質量為魚皮膠質量的2-4倍，酶解溫度為30_45°C，酶解液pH至控制在6-8，酶解時間為30-60min ； e、炭脫、板框過濾:向酶解液中添加質量為酶解液1_2的%的活性炭，并將酶解液加熱到70-80°C，脫色30-50min;將脫色后的酶解液轉移至板框過濾池內進行過濾，取澄清液； f、分離純化:將澄清液轉移至泡沫分離柱中進行鼓氣起泡，并收集泡沫液，，在鼓氣的同時向泡沫分離柱中注水;鼓氣速率為3-5L/min，注水速率為0.1-0.3L/min，泡沫分離柱中液體的裝載高度與泡沫分離柱內徑比為8-10:1，澄清液溫度保持在25-35°C ;待收集的泡沫液滅泡后，用離子交換器對泡沫液進行重金屬分離；向重金屬分離后的泡沫液中添加質量為泡沫液1-2%的磁性親和微球并分散均勻，靜置親和吸附50-70min后利用磁場使磁性親和微球聚集;分離出磁性親和微球后，用pH值為7.2的Tris-HCl緩沖液對磁性親和微球進行洗脫，再次利用磁場分離出磁性親和微球后，得到洗脫液，將洗脫液在75-85°C下儲存?zhèn)溆茫?g、濃縮:將洗脫液先后輸入雙效濃縮鍋和四效濃縮鍋中進行濃縮，制得濃縮液，所述濃縮液的折光度控制在5-6，濃縮后濃縮液在50-60 0C下儲存； h、膜過濾:將濃縮液通過二級0.22微米膜過濾器進行除雜除菌；其中膜過濾溫度小于450C，一級過濾壓力小于0.25MPa，二級過濾壓力小于0.4MPa ； 1、多肽分級:采用超濾膜或納濾膜對膜過濾后的濃縮液按分子量進行分離，得到目標分子量的膠原蛋白肽； j、噴霧干燥:對膠原蛋白肽進行噴霧干燥，制得膠原蛋白肽粉;噴霧溫度為80-90°C，噴霧干燥后水產(chǎn)膠原蛋白肽粉的含水率小于等于5wt%。6.如權利要求5所述的一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于，在魷魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用納濾膜截留分子量在SOODa以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-800Da之間的膠原蛋白肽;在鱈魚皮膠原蛋白肽粉的制備過程中，在進行多肽分級時，先用超濾膜截留分子量在100Da以上的膠原蛋白肽，再用納濾膜截留分子量在200Da以上的膠原蛋白肽，得到分子量在200-1000Da之間的膠原蛋白肽。7.如權利要求5所述的一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于，所述磁性親和微球由以下方法制得:將海藻酸鈉、聚乙二醇、殼聚糖、正庚烷、乙酸、水按質量比2-3:1:2:0.5:3-5:100混合溶解，攪拌均勻后制得混合液A;向混合液A中添加混合液A質量4-6%的四氧化三鐵磁粉并分散均勻，得到混合液B;對混合液B進行超聲波分散，同時向混合液B中勻速滴加混合液B質量40-60%的乳化液，得到混合液C;先后向混合液C中添加混合液C質量0.1-0.2%的98wt%的戊二醛和混合液C質量0.5-1倍的2.5-3.5wt%的氯化鈣溶液，充分攪拌，靜置l_2h，生成磁性微球;利用磁場對液體中磁性微球進行聚集，取出磁性微球后進行清洗、干燥;將磁性微球浸泡在水中溶脹15-25mi η，然后取出磁性微球并添加到活化液中在35-45 °C下活化40-80min，磁性微球與活化液的固液比為0.5-1.0g/mL;活化后取出磁性微球并洗凈，將磁性微球與肝素按質量比1.5-2.5:1進行混合，得到懸浮液，將懸浮液pH值調節(jié)至4-5，然后向懸浮液中添加懸浮液體積1.5-2.5倍的3wt%的1-乙基-3-二甲氨丙基-碳二亞胺，在4 0C下靜置12-18h;生成磁性親和微球，最后從懸浮液中取出磁性親和微球，洗凈、干燥，備用。8.如權利要求7所述的一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于，所述乳化液為體積占比為30-40%的司盤-80無水乙醇混合液，乳化液在10-20min內滴加完畢。9.如權利要求7所述的一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于，所述活化液由lmol/L的氫氧化鈉溶液、二甲基亞砜和環(huán)氧氯丙烷按體積比4-6:1:0.5-0.7組成。10.如權利要求5所述的一種創(chuàng)傷修復通用型水產(chǎn)膠原蛋白肽食品，其特征在于，所述鱈魚皮膠原蛋白肽粉和所述魷魚皮膠原蛋白肽粉在制備過程中，在多肽分級之后、噴霧干燥之前，將目標分子量的膠原蛋白肽稀釋10-30倍，向稀釋液中添加含鈣無機鹽，在35-45°C下螯合10-20min，接著向稀釋液中添加含砸無機鹽，在35-45 °C下螯合10_20min ；其中含鈣無機鹽、含砸無機鹽的質量分別為稀釋液質量的0.1-0.2%。
【文檔編號】C07K1/22GK105982331SQ201610314068
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2016年5月13日
【發(fā)明人】楊會成, 廖妙飛, 李瑞雪, 相興偉, 鄭斌, 付萬冬, 鄭平安, 洪瑤, 周宇芳
【申請人】浙江省海洋開發(fā)研究院